CN109781998B - Hmgb1基因或蛋白表达在评估芪归银治疗肺炎效果中的用途 - Google Patents
Hmgb1基因或蛋白表达在评估芪归银治疗肺炎效果中的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109781998B CN109781998B CN201910127623.8A CN201910127623A CN109781998B CN 109781998 B CN109781998 B CN 109781998B CN 201910127623 A CN201910127623 A CN 201910127623A CN 109781998 B CN109781998 B CN 109781998B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- gene
- hmgb1
- seq
- primer
- expression level
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title claims abstract description 41
- 101150021904 HMGB1 gene Proteins 0.000 title claims abstract description 29
- 108700010013 HMGB1 Proteins 0.000 title claims abstract description 28
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 title claims abstract description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 12
- 239000004332 silver Substances 0.000 title claims abstract description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 7
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 claims abstract description 18
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 102000055207 HMGB1 Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 21
- 101100339431 Arabidopsis thaliana HMGB2 gene Proteins 0.000 claims description 16
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 16
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 16
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 16
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 101150082427 Tlr4 gene Proteins 0.000 claims description 7
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 claims description 5
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 claims description 4
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 claims description 4
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 claims description 4
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 claims description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 18
- 102100037907 High mobility group protein B1 Human genes 0.000 description 15
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 13
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 13
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 12
- 241001061264 Astragalus Species 0.000 description 10
- 235000006533 astragalus Nutrition 0.000 description 10
- 210000004233 talus Anatomy 0.000 description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 7
- 241000382455 Angelica sinensis Species 0.000 description 6
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 6
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 6
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 4
- 241000125175 Angelica Species 0.000 description 3
- 235000001287 Guettarda speciosa Nutrition 0.000 description 3
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 3
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- 102000000849 HMGB Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010001860 HMGB Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 229910001043 Chinese silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 101710168537 High mobility group protein B1 Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N Stilbene Natural products C=1C=CC=CC=1/C=C/C1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 239000003777 experimental drug Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000013115 immunohistochemical detection Methods 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N stilbene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C=CC1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021286 stilbenes Nutrition 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了HMGB1基因表达水平或HMGB1蛋白水平或HMGB1蛋白受体基因表达水平,以及TNF‑α和IL‑1β水平在评估芪归银治疗对象肺炎效果中的用途,属于生物医学领域。利用本发明提供的用途可以随时监测治疗效果,以便及时调整治疗方案,为肺炎治疗提供更多可能。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域,具体地,涉及HMGB1基因表达水平或HMGB1蛋白水平或HMGB1蛋白受体基因表达水平,以及TNF-α和IL-1β水平在评估芪归银治疗对象肺炎效果中的用途。
背景技术
耐药菌的防治是目前国际医学界的难题。据中医理论《素问遗篇·刺法论》之“正气存内,邪不可干”分析,耐药菌所致肺炎核心病机是正气不足、邪毒内伏。耐药菌作为风热之邪,侵袭人体,首先犯肺,导致肺失宣发、肃降而成为风温肺热病。
芪归银以扶正透邪为治法,完全契合病机,临床疗效肯定;且据其治法分析,可能通过调节机体免疫网络,从而实现疗效。
然而,由于芪归银治疗肺炎的机制尚不明确,使得其治疗效果难以实时评估。
发明内容
为了解决上述技术问题,发明人通过检测经芪归银治疗的对象肺组织中HMGB1的蛋白表达,血清中IL-1β和TNF-α的水平,并进一步检测肺组织中HMGB1及其受体RAGE、TLR4的基因表达,出乎意料地发现,芪归银能够一定程度降低HMGB1及其受体蛋白和基因表达,并可降低血清中IL-1β和TNF-α的水平,从而完成本发明。
发明的目的是为评估芪归银治疗肺炎效果提供一种可能。为此,本发明的提供HMGB1基因表达水平或HMGB1蛋白水平或HMGB1蛋白受体基因表达水平,以及TNF-α和IL-1β水平在评估芪归银治疗对象肺炎效果中的用途。
高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种高度保守的核蛋白,广泛分布于哺乳动物细胞,是典型的炎性反应晚期调节因子。
TNF-α和IL-1β是信号转导通路效应分子。IL-1β是主要的早期促炎细胞因子,为体内调节免疫炎性反应的中心递质,在炎症反应前期发挥核心调节作用;TNF-α可调节机体各类免疫应答,参与多种疾病的发生发展过程。
在本发明的一些具体实施方案中,所述受体选自RAGE、TLR4中的至少一种。
在本发明的一些具体实施方案中,所述HMGB1基因表达水平、RAGE基因表达水平和TLR4基因表达水平利用PCR方法获得的。具体地,利用特异性引物分别扩增HMGB1基因、RAGE基因或TLR4基因,从而获得其表达水平。
在本发明的一个具体实施方案中,扩增HMGB1基因的引物包括具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的下游引物;扩增RAGE基因的引物包括具有SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO.4所示核苷酸序列的下游引物;TLR4基因的引物包括具有SEQ ID NO.5所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO.6所示核苷酸序列的下游引物。
在本发明的一些具体实施方案中,所述HMGB1蛋白水平是利用抗体检测方法获得的。
在本发明的另一些具体实施方案中,所述TNF-α和IL-1β水平是利用抗体检测方法获得的。
在本发明的一些实施方案中,所述基因的表达水平是相对于内参基因的表达水平的相对表达水平。
在本发明的一些具体实施方案中,所述内参基因为GAPDH。
在本发明的一些具体实施方案中,所述内参基因的表达水平利用PCR方法获得的。
在本发明的一个具体实施方案中,用于扩增内参基因的引物包括具有SEQ IDNO.7所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO.8所示核苷酸序列的下游引物。
在本发明的实施方案中,所述肺炎是由铜绿假单胞菌引起的。
在本发明的实施方案中,所述对象包括人。
本发明的有益效果
本发明的技术方案为芪归银治疗肺炎的效果提供一个全面的评估方案。利用本发明提供的用途可以随时监测治疗效果,以便及时调整治疗方案,为肺炎治疗提供更多可能。
附图说明
图1示出了各组大鼠干预5天时肺组织HMGB1表达结果,C:空白组;M:模型组;E:芪归银实验组;A:阿莫西林西药组。
图2示出了各组大鼠干预5天时血清IL-1β浓度结果,C:空白组;M:模型组;E:芪归银实验组;A:阿莫西林西药组。
图3示出了各组大鼠干预5天时血清TNF-α浓度结果,C:空白组;M:模型组;E:芪归银实验组;A:阿莫西林西药组。
图4示出了各组大鼠干预5天时HMGB1及其受体RAGE和TLR4的表达,C:空白组;M:模型组;E:芪归银实验组;A:阿莫西林西药组。
具体实施方式
为了使本发明所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。
实施例
以下例子在此用于示范本发明的优选实施方案。本领域内的技术人员会明白,下述例子中披露的技术代表发明人发现的可以用于实施本发明的技术,因此可以视为实施本发明的优选方案。但是本领域内的技术人员根据本说明书应该明白,这里所公开的特定实施例可以做很多修改,仍然能得到相同的或者类似的结果,而非背离本发明的精神或范围。
除非另有定义,所有在此使用的技术和科学的术语,和本发明所属领域内的技术人员所通常理解的意思相同,在此公开引用及他们引用的材料都将以引用的方式被并入。
那些本领域内的技术人员将意识到或者通过常规试验就能了解许多这里所描述的发明的特定实施方案的许多等同技术。这些等同将被包含在权利要求书中。
实施例
1材料与方法
1.1实验药物、菌种、动物及试剂
1.1.1芪归银和阿莫西林
芪归银由北京中医药大学中药学院标准中试生产并提供;阿莫西林颗粒购自深圳致君制药有限公司。
1.1.2铜绿假单胞菌耐药株
编号PA-R003,储存于首都医科大学附属北京中医医院的中医感染性疾病基础研究北京市重点实验室。此菌由北京中医药大学东直门医院、首都医科大学附属北京朝阳医院和首都医科大学附属北京中医医院三家医院互证鉴定。进行实验时,常规复苏培养获取新鲜菌液,备用。
1.1.3实验动物及分组
SD雄性大鼠,6-8周龄,160±10g,16只(北京维通利华实验动物技术有限公司);饲养条件是恒温20±4℃,光照及黑暗12小时交替,自由进食并饮水。随机分为对照组(Control,C)、模型组(Model,M)、实验芪归银组(Experiment,E)和阿莫西林西药组(Acxoicillin,A),每组4只;实施干预前各组均适应饲喂3天,造模干预当天设为0天,各组分笼饲养,每笼4只。
1.1.4试剂
TNF-α和IL-1β的ELISA试剂盒购自上海吉泰依科赛生物科技有限公司;引物合成由Invitrogen完成;定量PCR系列试剂均为宝生物工程(大连)有限公司产品。
1.2药物干预及样本检测
1.2.1药物干预
各组大鼠分别于干预第1天开始给药。E组给药量为2mL;A组根据临床成人标准(70KG)使用剂量转换至相同体积;C组和M组则以同等体积的双蒸水灌胃。各组均每天灌胃一次。
1.2.2样本获取
各组分别于干预10天时获取如下样本。
(1)腹主动脉取血
常规腹主动脉取血,5000rpm,离心10min,收获血清,备测。
(2)肺组织
无菌分离各组大鼠全肺组织,均取右前叶备测免疫组化,右后叶用于基因检测。
1.2.3免疫检测
(1)免疫组化检测:将各组右前叶肺组织,以HMGB1一抗和羊抗鼠的种属二抗进行常规免疫组化染色,每例样本随机统计6个视野,进行比较分析。
(2)ELISA检测:严格按照ELISA试剂盒说明书操作,检测血清中TNF-α和IL-1β的OD450吸光度值,根据各自标准品的浓度-吸光度值曲线折算出实际浓度。
(3)RT-PCR检测:设计并合成HMGB1及其受体RAGE、TLR4和内参基因GAPDH的引物,目的片段依次长262bp,188bp,181bp和138bp。序列如下:
HMGB1上游:AAGAAGTGCTCAGAGAGGTGGAAG(SEQ ID NO.1)
HMGB1下游:CTAGTTTCTTCGCAACATCACCA(SEQ ID NO.2)
RAGE上游:CGGGACTCTTCACGCTTCG(SEQ ID NO.3)
RAGE下游:ACCTTCAGGCTCAACCAACAG(SEQ ID NO.4)
TLR4上游:AAGACTATCATCAGTGTATCGGTGG(SEQ ID NO.5)
TLR4下游:CGTTTCTCACCCAGTCCTCATT(SEQ ID NO.6)
GAPDH上游:TGGAGTCTACTGGCGTCTT(SEQ ID NO.7)
GAPDH下游:TGTCATATTTCTCGTGGTTCA(SEQ ID NO.8)
抽提各组右后叶肺组织总RNA,分别进行常规qPCR检测,按如下公式,用2-ΔΔCT法进行目的分子表达的相对定量分析。
1.3统计分析
以SPSS19.0进行统计处理,各组数据于分析前进行方差齐性检验,正态分布以均数±标准差(mean±SD)表示,非正态分布则以中位数表示。各组比较以单因素方差分析进行,P<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
2.1肺组织中HMGB1表达结果
在药物或模拟干预5天(模型组死亡1只)时,观察结果为HMGB1表达增多;经芪归银或阿莫西林治疗,均有一定程度地恢复,有待以定量检测方法进一步证实。
2.2血清TNF-α和IL-1β表达结果
如图2、3所示,模型组IL-1β和TNF-α表达较对照组均明显升高,经芪归银或阿莫西林干预均明显下降。其中,对TNF-α的表达影响,芪归银较阿莫西林更显著。
2.3肺组织HMGB1和RAGE及TLR4基因表达结果
如图4示,模型组HMGB1及其受体RAGE和TLR4基因表达较对照组均明显升高,经芪归银或阿莫西林干预均明显下降,阿莫西林更为显著。
上述结果说明,经芪归银治疗后,小鼠肺组织内HMGB1及其受体RAGE和TLR4基因表达均明显下降,且血清中TNF-α和IL-1β表达水平也明显下降。这也表明,通过测定经芪归银治疗的肺炎对象肺组织中的HMGB1及其受体RAGE和TLR4基因表达,和/或测定血清中TNF-α和IL-1β的水平,可以有效评估芪归银或其他药物如阿莫西林治疗肺炎的效果。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考,就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解,在阅读了本发明的上述讲授内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
序列表
<110> 首都医科大学附属北京中医医院
<120> HMGB1基因或蛋白表达在评估芪归银治疗肺炎效果中的用途
<130> XY-2019-1-W-005
<160> 8
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
aagaagtgct cagagaggtg gaag 24
<210> 2
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
ctagtttctt cgcaacatca cca 23
<210> 3
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
cgggactctt cacgcttcg 19
<210> 4
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
accttcaggc tcaaccaaca g 21
<210> 5
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
aagactatca tcagtgtatc ggtgg 25
<210> 6
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
cgtttctcac ccagtcctca tt 22
<210> 7
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
tggagtctac tggcgtctt 19
<210> 8
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
tgtcatattt ctcgtggttc a 21
Claims (9)
1.HMGB1基因表达水平或HMGB1蛋白水平或HMGB1蛋白受体基因表达水平的检测试剂在制备用于评估芪归银治疗铜绿假单胞菌引起的小鼠肺炎的效果的试剂盒中的用途,其特征在于,所述试剂盒还包括TNF-α和IL-1β水平的检测试剂。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述受体选自RAGE、TLR4中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的用途,其特征在于,所述HMGB1基因表达水平、RAGE基因表达水平和TLR4基因表达水平的检测试剂分别为利用PCR方法扩增HMGB1基因的引物、扩增RAGE基因的引物和扩增TLR4基因的引物。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于,扩增HMGB1基因的引物包括具有SEQ IDNO.1所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的下游引物;扩增RAGE基因的引物包括具有SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO.4所示核苷酸序列的下游引物;扩增TLR4基因的引物包括具有SEQ ID NO.5所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO.6所示核苷酸序列的下游引物。
5.根据权利要求1-4任一所述的用途,其特征在于,所述HMGB1蛋白水平的检测试剂为HMGB1蛋白抗体。
6.根据权利要求1-4任一所述的用途,其特征在于,所述TNF-α和IL-1β水平的检测试剂分别为TNF-α抗体和IL-1β抗体。
7.根据权利要求1-4任一所述的用途,其特征在于,所述检测试剂还包括内参基因的表达水平的检测试剂。
8.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述内参基因为GAPDH。
9.根据权利要求8所述的用途,其特征在于,所述内参基因的表达水平的检测试剂为利用PCR方法扩增内参基因的引物,其中,所述扩增内参基因的引物包括具有SEQ ID NO.7所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO.8所示核苷酸序列的下游引物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910127623.8A CN109781998B (zh) | 2019-02-20 | 2019-02-20 | Hmgb1基因或蛋白表达在评估芪归银治疗肺炎效果中的用途 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910127623.8A CN109781998B (zh) | 2019-02-20 | 2019-02-20 | Hmgb1基因或蛋白表达在评估芪归银治疗肺炎效果中的用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN109781998A CN109781998A (zh) | 2019-05-21 |
CN109781998B true CN109781998B (zh) | 2022-03-25 |
Family
ID=66503443
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201910127623.8A Active CN109781998B (zh) | 2019-02-20 | 2019-02-20 | Hmgb1基因或蛋白表达在评估芪归银治疗肺炎效果中的用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN109781998B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN117275572A (zh) * | 2023-09-20 | 2023-12-22 | 首都医科大学附属北京中医医院 | 黄芪甲苷治疗肺炎的分子靶点预测方法及对炎性巨噬细胞免疫调节的用途 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015123031A (ja) * | 2013-12-27 | 2015-07-06 | 国立大学法人 千葉大学 | 関節リウマチ患者に対する抗il−6受容体抗体治療の有効性予測方法 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5871916A (en) * | 1994-09-21 | 1999-02-16 | Cancer Institute | ECDN protein and DNA encoding the same |
WO2002024903A1 (fr) * | 2000-09-25 | 2002-03-28 | Genox Research, Inc. | Methode d'examen applicable en cas de maladie allergique |
EP1589101A4 (en) * | 2002-12-27 | 2006-01-18 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | NEW PROTEIN AND ITS GENE |
US20040248097A1 (en) * | 2003-05-23 | 2004-12-09 | Ming-Shi Chang | Interleukin-20 variants and promoters |
WO2006016692A1 (ja) * | 2004-08-10 | 2006-02-16 | Sumitomo Chemical Company, Limited | ノックアウト非ヒト動物 |
CN101273061A (zh) * | 2005-06-23 | 2008-09-24 | 米迪缪尼股份有限公司 | 具有优化的聚集和片段化特性的抗体制剂 |
CN102858985A (zh) * | 2009-07-24 | 2013-01-02 | 西格马-奥尔德里奇有限责任公司 | 基因组编辑方法 |
CN205608008U (zh) * | 2016-05-12 | 2016-09-28 | 无锡市人民医院 | 人高迁移率族蛋白b1光激发化学发光检测试剂盒 |
CN106480190A (zh) * | 2016-10-18 | 2017-03-08 | 黑龙江省绿色食品科学研究院 | 一种用于评价嗜酸乳杆菌免疫调节作用的方法及应用 |
-
2019
- 2019-02-20 CN CN201910127623.8A patent/CN109781998B/zh active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015123031A (ja) * | 2013-12-27 | 2015-07-06 | 国立大学法人 千葉大学 | 関節リウマチ患者に対する抗il−6受容体抗体治療の有効性予測方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN109781998A (zh) | 2019-05-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN110964656B (zh) | 一种可预防骨质疏松的乳双歧杆菌bl-99及其应用 | |
Tang et al. | Potassium oxonate induces acute hyperuricemia in the tree shrew (tupaia belangeri chinensis) | |
ES2754052T3 (es) | Composiciones del caldo y su uso como prebióticos | |
Kim et al. | Evaluation of bee venom as a novel feed additive in fast-growing broilers | |
CN106617080A (zh) | 香菇多糖在制备具有调节肠道内菌群功效的保健食品中的用途 | |
Yan et al. | Bovine lactoferricin-induced anti-inflammation is, in part, via up-regulation of interleukin-11 by secondary activation of STAT3 in human articular cartilage | |
CN111603462A (zh) | 用于解热抗炎止咳化痰的药物及药物活性组分筛选方法 | |
Szymańska et al. | The endocrine disruptor bisphenol A (BPA) affects the enteric neurons immunoreactive to neuregulin 1 (NRG1) in the enteric nervous system of the porcine large intestine | |
CN109781998B (zh) | Hmgb1基因或蛋白表达在评估芪归银治疗肺炎效果中的用途 | |
Meng et al. | Stimulator of interferon genes from Asian swamp eel (MaSTING) is involved in host defense against bacterial infection | |
Zhuang et al. | Sodium houttuyfonate effectively treats acute pulmonary infection of Pseudomonas aeruginosa by affecting immunity and intestinal flora in mice | |
CN111529691A (zh) | 甲状旁腺激素(1-34)在制备治疗男性性腺功能减退症的药物中的应用 | |
TW201519901A (zh) | 治療或預防過敏性疾病的有效成分 | |
CN110464756A (zh) | 一种用于调节肥胖机体的葛根芩连汤水提取物 | |
CN100417412C (zh) | 促肝细胞生长素注射液及制备方法和应用 | |
CN109432075A (zh) | 间羟基苯丙酸在制备抗骨质疏松症药物中的应用 | |
CN103990109B (zh) | 重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)在制备治疗骨质疏松药物中的应用 | |
Thayer et al. | The assay of vitamins K1 and K2 | |
Qin et al. | Dietary zinc and growth, carcass characteristics, immune responses, and serum biochemistry of broilers | |
Rebecca et al. | The Combination Effect Analysis of Catharanthus roseus, Abelmoschus manihot and Dysphania ambrosioides on Rattus norvegicus Blood Triglyceride Content | |
CN112672737B (zh) | 氯硝柳胺乙醇胺盐在制备治疗化疗相关性肌肉损伤的药物中的应用 | |
CN110172524A (zh) | 制定鸡产气荚膜梭菌对阿维拉霉素的耐药判定标准的方法 | |
Zhou et al. | Effects of inhaled fine particulate matter on the lung injury as well as gut microbiota in broilers | |
CN114028414B (zh) | 艾叶多糖在制备预防和治疗炎症性肠病药物中的应用 | |
CN114246884B (zh) | 红鱼酶解物在改善慢性应激诱发的抑郁样行为方面的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |