CN109748960B - 调控抗铝毒转录因子stop1蛋白的基因及其应用 - Google Patents

调控抗铝毒转录因子stop1蛋白的基因及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及调控抗铝毒转录因子STOP1蛋白的基因及其应用。具体地，所述RAE1基因或其编码蛋白、或其突变蛋白、或其促进剂或抑制剂可用于(1)调控STOP1蛋白的表达或降解；(2)调控植物抗铝毒能力或耐铝性能；和/或(3)调控选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。下调植物中的RAE1蛋白的表达量和/或活性，可显著抑制STOP1的降解，上调AtALMT1的表达量，增多有机酸(如苹果酸)的分泌和增强植物的抗铝毒能力(或对铝的耐受)。相反，过量表达植物中的RAE1蛋白的表达量和/或活性，可显著促进STOP1的降解，下调AtALMT1的表达量，减少有机酸(如苹果酸)的分泌和增强植物对铝毒的敏感性。

Description

调控抗铝毒转录因子STOP1蛋白的基因及其应用
技术领域
本发明涉及农学领域，具体地，本发明涉及调控抗铝毒转录因子STOP1蛋白稳定性的基因及其应用。
背景技术
全球30％的耕地是酸性土壤，并且随着过度耕作和过度使用氮肥，土壤正在进一步酸化。铝是酸性土壤限制植物生长和农作物产量的主要因素，铝毒主要作用于根尖过渡区，与细胞壁、细胞膜、细胞内靶点结合产生毒害。由于植物不能像动物那样移动，为了生存，许多植物进化出多种应对铝胁迫的解毒机制，充分研究挖掘植物的潜力，并加以利用和改良是解决酸性土壤铝毒害的途径和策略。
有机酸分泌是关键的抗铝毒机制，植物分泌少量的有机酸就能明显地减少铝对植物的毒害。拟南芥苹果酸分泌蛋白AtALMT1在抗铝毒过程中扮演重要角色，AtALMT1的表达受Al诱导且还受低pH、ABA、H2O2和IAA等多种因素影响，转录因子STOP1直接调控AtALMT1的表达，但是STOP1本身mRNA表达是组成型，并不能解释对AtALMT1表达的调控，STOP1蛋白水平调控机制的研究显得尤为重要。
因此，本领域迫切需要开展调控抗铝毒相关基因的功能研究，以便解决酸性土壤铝毒害。
发明内容
本发明的目的是提供一种调控抗铝毒转录因子STOP1蛋白稳定性的基因及其应用。
本发明的第一方面，提供了一种RAE1基因或RAL1基因，或其编码蛋白、突变蛋白、其促进剂或抑制剂的用途，用于选自下组的一种或多种用途：
(1)调控STOP1蛋白的表达量；
(2)调控选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；
(3)调控植物抗铝毒能力或耐铝性能；和/或
(4)制备制剂或农用组合物，且所述的制剂或农用组合物用于调控STOP1蛋白的表达量、调控植物抗铝毒能力或耐铝性能、或调控选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
在另一优选例中，所述调控植物抗铝毒能力包括：调控植物生长期和/或生殖期的抗铝毒能力。
在另一优选例中，所述调控植物抗铝毒能力包括：调控植物(如根)有机酸的分泌水平。
在另一优选例中，所述调控STOP1蛋白的表达量包括介导STOP1蛋白的泛素化从而调控STOP1蛋白的表达量。
在另一优选例中，所述的RAE1基因或RAL1基因，或其编码蛋白、突变蛋白、或其促进剂或抑制剂还用于调控植物有机酸的分泌水平。
在另一优选例中，所述促进剂或抑制剂为RAE1或RAL1的促进剂或抑制剂，RAE1包括RAE1基因，或其编码蛋白、突变蛋白；RAL1包括RAL1基因，或其编码蛋白、突变蛋白。
在另一优选例中，所述促进剂或抑制剂包括RAE1基因或RAL1基因、或其编码蛋白的促进剂或抑制剂。
在另一优选例中，所述植物包括农作物、林业植物、蔬菜、瓜果、花卉、牧草(包括草坪草)。
在另一优选例中，所述的植物选自下组：禾本科植物、十字花科植物、或其组合。
在另一优选例中，所述的植物选自下组：拟南芥、烟草、水稻、小麦、玉米、高粱、大麦、芸薹属、大豆、或其组合。
在另一优选例中，所述的植物为拟南芥。
在另一优选例中，所述的RAE1基因或RAL1基因选自下组：cDNA序列、基因组序列、或其组合。
在另一优选例中，所述RAE1基因或RAL1基因、或其编码蛋白来源于十字花科植物。
在另一优选例中，所述RAE1基因或RAL1基因、或其编码蛋白来源于拟南芥(如Col-0生态型拟南芥)或其变体。
在另一优选例中，所述RAE1基因、或其编码蛋白来源于单子叶(如水稻、玉米、大麦等)和双子叶植物(如芸薹属白菜、大豆等)。
在另一优选例中，所述RAE1基因、或其编码蛋白来源于拟南芥、水稻(OsRAE1.1、OsRAE1.2)、玉米(XM_008677340.2)、大麦(AK372025.1)、芸薹属(XM_009132381.2)、大豆(XM_003521974.4)、或其组合。
在另一优选例中，所述RAE1蛋白的氨基酸序列选自下组：
(i)具有SEQ ID NO.:35、37-42中任一所示氨基酸序列的多肽；
(ii)将如SEQ ID NO.:35、37-42中任一所示的氨基酸序列经过一个或几个(如1-10个)氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，具有与SEQ ID NO.:35所示多肽相同功能的由(i)衍生的多肽；或
(iii)氨基酸序列与SEQ ID NO.:35、37-42中任一所示氨基酸序列的同源性≥80％(较佳地≥90％，更佳地≥95％或≥98％)，具有与SEQ ID NO.:35、37-42中任一所示多肽相同功能的由(i)衍生的多肽。
在另一优选例中，所述RAE1基因的核苷酸序列选自下组：
(a)编码如SEQ ID NO.:35、37-42中任一所示多肽的多核苷酸；
(b)序列如SEQ ID NO.:36、43-49中任一所示的多核苷酸；
(c)核苷酸序列与SEQ ID NO.:36、43-49中任一所示序列的同源性≥75％(较佳地≥85％，更佳地≥90％或≥95％)的多核苷酸；
(d)在SEQ ID NO.:36、43-49中任一所示多核苷酸的5’端和/或3’端截短或添加1-60个(较佳地1-30，更佳地1-10个)核苷酸的多核苷酸；或
(e)与(a)-(d)任一所述的多核苷酸互补的多核苷酸。
在另一优选例中，所述的编码基因编码上述选自(i)、(ii)或(iii)的RAE1蛋白。
在另一优选例中，所述RAL1基因、或其编码蛋白来源于单子叶(如水稻、玉米、大麦等)和双子叶植物(如芸薹属白菜、大豆等)。
在另一优选例中，所述RAL1基因、或其编码蛋白来源于拟南芥(AT5G27920)、水稻(LOC_Os12g36670)、玉米(XM_008664387.2)、大麦(AK358574.1)、芸薹属(XM_009113489.2)、大豆(XM_003521631.4)、或其组合。
在另一优选例中，所述RAL1蛋白的氨基酸序列选自下组：
(i)具有SEQ ID NO.:50-55中任一所示氨基酸序列的多肽；
(ii)将如SEQ ID NO.:50-55中任一所示的氨基酸序列经过一个或几个(如1-10个)氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，具有与SEQ ID NO.:50-55中任一所示多肽相同功能的由(i)衍生的多肽；或
(iii)氨基酸序列与SEQ ID NO.:50-55中任一所示氨基酸序列的同源性≥80％(较佳地≥90％，更佳地≥95％或≥98％)，具有与SEQ ID NO.:50-55中任一所示多肽相同功能的由(i)衍生的多肽。
在另一优选例中，所述RAL1基因的核苷酸序列选自下组：
(a)编码如SEQ ID NO.:50-55中任一所示多肽的多核苷酸；
(b)序列如SEQ ID NO.:56-61中任一所示的多核苷酸；
(c)核苷酸序列与SEQ ID NO.:56-61中任一所示序列的同源性≥75％(较佳地≥85％，更佳地≥90％或≥95％)的多核苷酸；
(d)在SEQ ID NO.:56-61中任一所示多核苷酸的5’端和/或3’端截短或添加1-60个(较佳地1-30，更佳地1-10个)核苷酸的多核苷酸；或
(e)与(a)-(d)任一所述的多核苷酸互补的多核苷酸。
在另一优选例中，所述的编码基因编码上述选自(i)、(ii)或(iii)的RAL1蛋白。
本发明的第二方面，提供了一种RAE1基因或RAL1基因，或其编码蛋白、活性增强的突变蛋白、或其促进剂的用途，用于选自下组的一种或多种用途：
(1)降低STOP1蛋白的表达量；
(2)降低或下调选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；
(3)降低植物抗铝毒能力；和/或
(4)制备制剂或农用组合物，且所述的制剂或农用组合物用于降低STOP1蛋白的表达量、降低植物抗铝毒能力、或下调选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
在另一优选例中，RAE1基因或RAL1基因，或其编码蛋白、活性增强的突变蛋白、或其促进剂通过介导STOP1蛋白的泛素化修饰使其降解，从而降低STOP1蛋白的表达量。
在另一优选例中，所述的活性为介导STOP1蛋白降解的活性，较佳地为通过泛素化介导STOP1蛋白降解的活性。
在另一优选例中，所述的活性增强指所述突变蛋白的介导STOP1蛋白降解的活性A1与野生型RAE1蛋白或野生型RAL1蛋白的介导STOP1蛋白降解的活性A0之比≥1.2，较佳地≥1.5。
在另一优选例中，所述的降低植物抗铝毒能力包括下调选自下组的基因表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
在另一优选例中，所述促进剂为RAE1或RAL1的促进剂，其中RAE1包括RAE1基因、或其编码蛋白、或其活性增强的突变蛋白；RAL1包括RAL1基因、或其编码蛋白、或其活性增强的突变蛋白。
在另一优选例中，所述促进剂包括RAE1基因或RAL1基因、或其编码蛋白、或其活性增强的突变蛋白的促进剂。
在另一优选例中，所述促进剂包括促进RAE1基因或其编码蛋白表达、或提高RAE1蛋白表达量、或增强RAE1蛋白活性的化合物或制剂；和/或
所述促进剂包括促进RAL1基因或其编码蛋白表达、或提高RAL1蛋白表达量、或增强RAL1蛋白活性的化合物或制剂。
在另一优选例中，所述的促进剂选自下组：小分子化合物、核酸分子、多肽、小分子配体、或其组合。
在另一优选例中，所述的核酸分子选自下组：miRNA、shRNA、siRNA、或其组合。
本发明的第三方面，提供了一种RAE1突变蛋白或RAL1突变蛋白、或RAE1基因或RAL1基因或其编码蛋白的抑制剂的用途，所述的RAE1突变蛋白为与野生型RAE1蛋白相比活性下降的RAE1突变蛋白，所述的RAL1突变蛋白为与野生型RAL1蛋白相比活性下降的RAL1突变蛋白，用于选自下组的一种或多种用途：
(1)提高STOP1蛋白的表达量；
(2)提高或上调选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；
(3)增强植物抗铝毒能力；和/或
(4)制备制剂或农用组合物，且所述的制剂或农用组合物用于提高STOP1蛋白的表达量、增强植物抗铝毒能力、或上调选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
在另一优选例中，所述的增强植物抗铝毒能力(或对铝的耐受性)包括：提高植物在铝条件下的存活率、或降低铝毒对植物(如根)的毒害。
在另一优选例中，所述的增强植物抗铝毒能力包括上调选自下组的基因表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
在另一优选例中，所述RAE1突变蛋白、或RAE1基因或其编码蛋白的抑制剂还用于提高植物有机酸(如苹果酸)的分泌水平。
在另一优选例中，所述RAL1突变蛋白、或RAL1基因或其编码蛋白的抑制剂还用于提高植物有机酸(如苹果酸)的分泌水平。
在另一优选例中，所述抑制剂包括抑制RAE1基因或其编码蛋白表达、或降低RAE1蛋白表达量、或降低RAE1蛋白活性的化合物或制剂；和/或
所述抑制剂包括抑制RAL1基因或其编码蛋白表达、或降低RAL1蛋白表达量、或降低RAL1蛋白活性的化合物或制剂。
在另一优选例中，所述的抑制剂选自下组：小分子化合物、核酸分子、多肽、小分子配体、或其组合。
在另一优选例中，所述的核酸分子选自下组：miRNA、shRNA、siRNA、或其组合。
在另一优选例中，所述的抑制剂选自下组：小分子化合物、反义核酸、microRNA、siRNA、RNAi、Crispr试剂、或其组合。
在另一优选例中，所述RAE1突变蛋白为RAE1活性下降或丧失的突变蛋白。
在另一优选例中，所述RAL1突变蛋白为RAL1活性下降或丧失的突变蛋白。
在另一优选例中，所述的活性为介导STOP1蛋白降解的活性。
在另一优选例中，所述的活性下降指所述突变蛋白的介导STOP1蛋白降解的活性A1与野生型RAE1蛋白或野生型RAL1蛋白的介导STOP1蛋白降解的活性A0之比≤0.8，较佳地≤0.6。
在另一优选例中，所述的RAE1突变蛋白是活性下降或活性丧失的突变蛋白。
在另一优选例中，所述的RAE1突变蛋白是缺失F-box结构域的RAE1蛋白。
在另一优选例中，所述的RAL1突变蛋白是活性下降或活性丧失的突变蛋白。
在另一优选例中，所述的RAL1突变蛋白是缺失F-box结构域的RAL1蛋白。
在另一优选例中，所述的RAE1突变蛋白在对应于野生型的RAE1蛋白的选自下组的氨基酸发生突变：第167位(G)、第439位(G)、第466位(R)、第524位(Q)、第568位(S)、第116位(G)、第193位(G)、第400位(W)、或其组合。
在另一优选例中，所述的RAE1突变蛋白在对应于野生型的RAE1蛋白具有选自下组的突变：G167R、G439R、R466K、Q524STOP、S568L、G116R、G193R、W400STOP、或其组合。
在另一优选例中，所述野生型RAE1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.:35、37-42中任一所示。
在另一优选例中，所述野生型RAL1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.:50-55中任一所示。
本发明的第四方面，提供了一种调控植物抗铝毒能力的方法，所述方法包括步骤：调节所述植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而调控植物抗铝毒能力。
在另一优选例中，适用于所述方法的所述植物包括农作物、林业植物、蔬菜、瓜果、花卉、牧草(包括草坪草)。
在另一优选例中，所述调控植物抗铝毒能力为增强植物抗铝毒能力时，下调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，或使RAE1蛋白或RAL1蛋白丧失活性。
在另一优选例中，所述调控植物抗铝毒能力为降低植物抗铝毒能力时，上调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性。
在另一优选例中，所述方法还用于调控植物(如根)分泌的有机酸水平。
在另一优选例中，所述调控植物抗铝毒能力包括调控植物(如根)分泌的有机酸水平。
本发明的第五方面，提供了一种调控基因的表达的方法，所述方法包括步骤：
(i)调节所述植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而调控基因的表达；
其中，所述基因选自下组：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
在另一优选例中，步骤(i)包括：上调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而下调选自下组的基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
在另一优选例中，步骤(i)包括：下调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而上调选自下组的基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
在另一优选例中，所述方法还包括步骤：
(ii)调控所述植物中STOP1蛋白的表达量和/或活性，从而调控RAE1基因的表达。
本发明的第六方面，提供了一种调控STOP1蛋白水平的方法，所述方法包括步骤：
(a)调节所述植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而调控STOP1蛋白水平。
在另一优选例中，步骤(a)包括：上调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而下调STOP1蛋白水平。
在另一优选例中，步骤(a)包括：下调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而上调STOP1蛋白水平。
在另一优选例中，所述下调STOP1蛋白水平包括促进STOP1蛋白的降解。
在另一优选例中，所述上调STOP1蛋白水平包括减少或抑制STOP1蛋白的降解。
本发明的第七方面，提供了一种分离的突变型RAE1蛋白或突变型RAL1蛋白，所述突变型RAE1蛋白或突变型RAL1蛋白为非天然蛋白，且所述突变型RAE1蛋白或突变型RAL1蛋白用于选自下组的一种或多种用途：
(1)调控STOP1蛋白的表达或降解；
(2)调控植物抗铝毒能力或耐铝性能；和/或
(3)调控选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
在另一优选例中，所述的突变型RAE1蛋白或突变型RAL1蛋白包括活性增加的突变蛋白、或活性下降的突变蛋白。
在另一优选例中，所述突变型RAE1蛋白或突变型RAL1蛋白是活性下降或丧失的突变蛋白。
在另一优选例中，所述的RAE1突变蛋白在对应于野生型的RAE1蛋白的选自下组的氨基酸发生突变：第167位(G)、第439位(G)、第466位(R)、第524位(Q)、第568位(S)、第116位(G)、第193位(G)、第400位(W)、或其组合。
在另一优选例中，所述的RAE1突变蛋白在对应于野生型的RAE1蛋白具有选自下组的突变：G167R、G439R、R466K、Q524STOP、S568L、G116R、G193R、W400STOP、或其组合。
在另一优选例中，所述野生型RAE1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.:35、37-42中任一所示。
在另一优选例中，所述野生型RAL1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.:50-55中任一所示。
在另一优选例中，所述突变型RAE1蛋白除所述突变外，其余的氨基酸序列与SEQID NO.:35、37-42中任一所示的序列相同或基本相同。
在另一优选例中，所述的基本相同是至多有50个(较佳地为1-20个，更佳地为1-10个、更佳地1-5个)氨基酸不相同，其中，所述的不相同包括氨基酸的取代、缺失或添加，且所述突变型RAE1蛋白不具有介导STOP1蛋白降解的活性。
在另一优选例中，所述突变型RAE1蛋白或突变型RAL1蛋白具有选自下组的一种或多种用途：
(1)提高STOP1蛋白的表达量；
(2)增强植物抗铝毒能力；和/或
(3)提高或上调选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
本发明的第八方面，提供了一种多核苷酸，所述多核苷酸编码本发明第七方面所述的突变型RAE1蛋白或突变型RAL1蛋白。
本发明的第九方面，提供了一种RAE1蛋白或RAL1蛋白，或其编码基因的用途，用于筛选具有调控植物抗铝毒能力的药物。
在另一优选例中，所述的药物选自下组：小分子化合物、多肽、核酸、小分子配体、或其组合。
本发明的第十方面，提供了一种鉴定植物抗铝毒能力调控剂的方法，所述方法包括步骤：
(a)提供待鉴定的调控剂，和RAE1基因或RAL1基因或其编码蛋白；
(b)将所述待鉴定的化合物和所述RAE1基因或RAL1基因或其编码蛋白接触；
(c)测定所述RAE1蛋白或RAL1蛋白的活性或表达量；
(d)基于步骤(c)的结果，鉴定所述化合物为植物抗铝毒能力促进剂或抑制剂。
在另一优选例中，步骤(c)的结果为RAE1蛋白的活性和/或表达量降低或下调，则所述待鉴定的化合物为植物抗铝毒能力促进剂。
在另一优选例中，步骤(c)的结果为RAE1蛋白的活性和/或表达量增加或上调，则所述待鉴定的化合物为植物抗铝毒能力抑制剂。
在另一优选例中，步骤(c)的结果为RAL1蛋白的活性和/或表达量降低或下调，则所述待鉴定的化合物为植物抗铝毒能力促进剂。
在另一优选例中，步骤(c)的结果为RAL1蛋白的活性和/或表达量增加或上调，则所述待鉴定的化合物为植物抗铝毒能力抑制剂。
本发明的第十一方面，提供了调控RAE1的表达的方法，所述方法包括步骤：
(a)调控所述植物中STOP1蛋白的表达量和/或活性，从而调控RAE1基因的表达。
在另一优选例中，所述方法为上调RAE1的表达的方法，所述方法包括步骤：
(a)下调所述植物中STOP1蛋白的表达量和/或活性。
在另一优选例中，所述方法为非治疗和非诊断目的的。
本发明还提供了一种RAE1基因或RAE1蛋白的抑制剂，所述抑制剂中含有STOP1蛋白或其编码基因作为活性成分。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1显示了突变体rae1中pAtALMT1:LUC表达增强。其中，(A)筛选获得8个pAtALMT1:LUC表达增强突变体；(B)突变体rae1在蛋白序列上的突变位点；(C)pRAE1:RAE1转基因株系回补突变体rae1-1的pAtALMT1:LUC表达。
图2显示了qPCR分析WT、rae1-1、rae1-2、stop1-3中各基因的表达水平。其中，(A)报告基因LUC；(B)AtALMT1；(C)AtMATE；(D)ALS3；(E)AtSTAR1；(F)ALS1。
图3显示了qPCR分析WT、过量表达RAE1株系RAE1-OX1和RAE1-OX2中各基因的表达水平。其中，(A)RAE1；(B)AtALMT1；(C)AtMATE；(D)ALS3；(E)AtSTAR1；(F)ALS1。
图4显示了RAE1的表达调控机制。(A)qPCR分析各组织中RAE1的表达(B)RAE1表达受到Al处理的诱导，并受到STOP1的调控，在rae1中表达水平上调(C)GUS活性分析pRAE1：GUS的表达(D、E、F、G、H、I)GUS染色分析pRAE1：GUS的表达(J)原生质体表达系统显示STOP1调控pRAE1:LUC的表达，将结合区域突变则调控减弱(K)EMSA验证STOP1直接结合RAE1的启动子上的结合区域。
图5显示了RAE1与STOP1在体内和体外均互作。(A)Pull-down试验体外验证RAE1与STOP1互作，GST-STOP1和RAE1-His组合可以拉下RAE1蛋白，GST-RAE1和His-Trx-STOP1组合可以拉下STOP1蛋白，其他组合为负对照；(B)Split-LUC试验体内验证RAE1与STOP1互作，STOP1-nLUC和cLUC-rae1-1/cLUC-RAE1△F产生LUC荧光信号，STOP1-nLUC和cLUC-RAE1的组合未产生LUC荧光信号，其他组合为负对照；(C)Co-IP试验体内验证RAE1与STOP1互作，FLAG-RAE1/FLAG-rae1-1/FLAG-RAE1△F和STOP1-HA在原生质体共表达，蛋白粗提液用FLAG磁珠进行免疫沉淀，STOP1-HA蛋白用HA抗体检测。
图6显示了STOP1蛋白在突变体rae1中积累，,而过量表达RAE1促进STOP1蛋白降解。Western blot分析pSTOP1:STOP1-HA转基因株系在突变体rae1和过量表达RAE1株系中STOP1蛋白水平。
图7显示了蛋白酶体抑制剂MG132稳定STOP1蛋白。(A)MG132处理1和3小时STOP1蛋白被稳定；(B)在无铝条件和有铝条件STOP1蛋白均被MG132稳定；(C)GUS染色分析pSTOP1:STOP1-GUS转基因株系中STOP1蛋白水平；(D)分析pSTOP1:STOP1-GUS转基因株系中的GUS活性。
图8显示了RAE1通过介导STOP1蛋白的泛素化修饰使其降解。(A)原生质表达系统中STOP1蛋白随RAE1表达增多而降解，突变体蛋白rae1-1和RAE1△F不能降解STOP1；(B)原生质表达系统中验证STOP1蛋白被泛素化修饰；(C)原生质表达系统中突变体蛋白rae1-1和RAE1△F不能介导STOP1的泛素化修饰。
图9显示了突变体rae1耐铝能力提高，而过表达RAE1株系耐铝能力下降。其中，(A)铝毒处理条件下rae1的苹果酸分泌比野生型增多；(B)铝在rae1根中的积累比野生型减少；(C)铝毒处理条件下rae1和野生型的根长照片；(D)铝毒处理条件下rae1的根相对生长量比野生型更长；(E)铝毒处理条件下过表达RAE1株系和野生型的根长照片(F)铝毒处理条件下过表达RAE1株系的根相对生长量比野生型更短。
图10显示了ral1中AtALMT1表达上调且RAL1与STOP1互作。(A)ral1中AtALMT1表达上调；(B)ral1中pAtALMT1:LUC表达上调，rae1与ral1的双突变体中pAtALMT1:LUC的表达大幅上调；(C)RAL1表达受到Al处理的诱导，并受到STOP1的调控，在rae1中表达水平上调；(D)GUS染色分析pRAL1：GUS的表达(E)Split-LUC试验体内验证RAL1与STOP1互作，STOP1-nLUC和cLUC-RAL1△F产生LUC荧光信号,STOP1-nLUC和cLUC-RAL1的组合未产生LUC荧光信号，因为RAL1介导了STOP1蛋白的降解。
图11显示OsRAE1的表达模式且OsRAE1与ART1互作。(A)OsRAE1.1和OsRAE1.2在根尖和根基部均表达，而且表达均被Al诱导；(B)art1中OsRAE1.1的表达下降；(C)Split-LUC试验体内验证OsRAE1.1与ARTT1互作，ART1-nLUC和cLUC-OsRAE1.1△F产生LUC荧光信号。
具体实施方式
本发明人经过广泛而深入的研究，通过大量诱变、筛选和分析，首次意外地发现了一种调控抗铝毒转录因子STOP1蛋白稳定性的基因RAE1和RAL1基因。所述RAE1基因或RAL1基因或其编码蛋白、或其突变蛋白、或其促进剂或抑制剂可用于(1)调控STOP1蛋白的表达或降解；(2)调控植物抗铝毒能力或耐铝性能；和/或(3)调控选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。实验表明，RAE1或RAL1介导STOP1蛋白的降解。此外，rae1-1突变蛋白和去掉F-box结构域蛋白丧失了介导STOP1降解的功能。此外，本发明人还首次意外地发现，下调植物中的RAE1蛋白的表达量和/或活性，可显著抑制STOP1的降解，上调AtALMT1的表达量，增多有机酸(如苹果酸)的分泌和增强植物的抗铝毒能力(或对铝的耐受)。相反，过量表达植物中的RAE1蛋白的表达量和/或活性，可显著促进STOP1的降解，下调AtALMT1的表达量，减少有机酸(如苹果酸)的分泌和增强植物的对铝毒的敏感性。在此基础上，本发明人完成了本发明。
构建了AtALMT1启动子与荧光素酶基因融合的LUC报告基因系(pAtALMT1:LUC)，利用该材料进行EMS诱变来筛选影响LUC报告基因表达的突变体。利用其中一个LUC表达增强突变体克隆了一个新的负调控AtALMT1表达的基因，命名为RAE1(Regulation ofAtALMT1Expression 1)，一共筛选获得8个RAE1上不同位点突变的突变体(rae1-1到rae1-8)。构建载体pRAE1:RAE1通过侵染rae1-1获得回补转基因株系，2个株系均回补rae1-1荧光表型。
除了LUC报告基因和AtALMT1以外，其他STOP1下游调控基因AtMATE和ALS3的表达在突变体rae1中无论在无铝条件还是有铝条件下均比野生型(WT)提高。相反，过量表达RAE1,可降低AtALTM1、AtMATE和ALS3的表达。RAE1表达受到铝处理的诱导，并受到STOP1的调控，在rae1中RAE1的表达水平也上调。原生质体表达系统显示STOP1调控pRAE1:LUC的表达，将结合区域突变则调控减弱，EMSA验证STOP1直接结合RAE1的启动子上的结合区域。RAE1表达在植物各组织中均有表达，且主要在维管组织表达。
通过体外Pull-down试验、烟草Split-LUC试验以及体内Co-IP试验证明RAE1能够与STOP1蛋白互作。rae1-1突变蛋白和去掉F-box结构域蛋白并没有丧失与STOP1结合的能力，而RAE1在体内与STOP1互作信号较弱可能是因为RAE1介导了STOP1蛋白的降解。
构建pSTOP1:STOP1-HA转基因株系检测STOP1蛋白，铝处理可以使STOP1蛋白积累，在rae1-1突变体中STOP1蛋白无论在无铝条件还是有铝条件下均比野生型增多。蛋白酶体抑制剂MG132处理可以抑制STOP1在无铝条件或有铝条件下的降解，使蛋白增多。进一步通过原生质表达系统证明，RAE1介导STOP1蛋白泛素化修饰并降解。此外，rae1-1突变蛋白和去掉F-box结构域蛋白丧失了使STOP1通过泛素化修饰并降解的功能。相反，过量表达RAE1可促进STOP1蛋白的降解。
分析突变体rae1的耐铝表型，rae1的苹果酸分泌比野生型增多，铝在根上的积累减少，铝毒处理条件下rae1的根长比野生型更长。相反，过量表达RAE1在铝毒处理条件下的根长比野生型更短。
RAE1在拟南芥中有一个同源基因RAL1(RAE1Like 1),RAL1的T-DNA敲除突变体ral1中AtALMT1、pAtALMT1:LUC的表达上调，但是上调幅度比在rae1-1中更低。pAtALMT1:LUC的表达在rae1-1ral1双突变体中比在各单突变体中表达更高，表明RAE1与RAL1存在功能冗余。RAL1的表达也受铝毒的诱导，但是RAL1在根中表达的组织部位与RAE1不同。烟草Split-LUC试验证明RAL1能够与STOP1蛋白互作。以上表明，RAL1具有与RAE1相同的降解STOP1蛋白的功能，但由于它不在根尖分生组织和伸长区表达，RAE1在植物抗铝毒方面起重要作用。
RAE1和RAL1在大多数单子叶(水稻、玉米、大麦等)和双子叶植物(芸薹属白菜、大豆等)中均有相应的同源基因。水稻中RAE1的同源基因是OsRAE1.1和OsRAE1.2，两个同源基因氨基酸序列有97.5％相似性，OsRAE1.1和OsRAE1.2在根尖和根基部均表达，而且表达均被Al诱导，被ART1(水稻中与STOP1同源的基因)调控。烟草Split-LUC试验证明OsRAE1.1能够与ART1蛋白互作。因此，我们认为，RAE1在调控植物抗铝毒转录因子STOP1稳定性机制上是保守的，对作物中的RAE1同源基因进行功能缺失突变有可能可以提高作物抗铝毒能力。
术语
除非另外定义，否则本文中所用的全部技术与科学术语均具有如本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
如本文所用，在提到具体列举的数值中使用时，术语“约”意指该值可以从列举的值变动不多于1％。例如，如本文所用，表述“约100”包括99和101和之间的全部值(例如，99.1、99.2、99.3、99.4等)。
如本文所用，术语“含有”或“包括(包含)”可以是开放式、半封闭式和封闭式的。换言之，所述术语也包括“基本上由…构成”、或“由…构成”。
如本文所用，术语“AxxB”表示第xx位的氨基酸A变为氨基酸B，例如“G167R”表示第167位的氨基酸G突变为R，以此类推。
如本文所用，术语“AxxSTOP”表示第xx位的氨基酸A变为终止密码，例如“Q524STOP”表示第524位的氨基酸Q突变为终止密码，以此类推。
如本文所用，术语“抗铝毒能力”、“耐铝能力”、“耐铝表型”、“对铝的耐受性”可互换使用，均指对铝的抵抗能力。
如本文所用，术语“植物”没有特别的限制，包括(但不限于)：花卉植物、水果植物、林业植物、蔬菜、农作物等，例如水稻、小麦、玉米、大豆、高粱、芸薹属、大麦等。
水果植物包括(但不限于)：柑橘科、蔷薇科、葫芦科、芭蕉科的植物等。
蔬菜植物包括(但不限于)：菊科、茄科、唇形科、伞形科、十字花科的植物。
农作物例如但不限于：禾本科、石蒜科的植物等。
在本发明的一个优选例中，所述植物选自十字花科，更佳地为拟南芥属植物。
如本文所用，本发明RAE1蛋白包括野生型RAE1蛋白和突变型RAE1蛋白。
如本文所用，本发明RAL1蛋白包括野生型RAL1蛋白和突变型RAL1蛋白。
本发明突变蛋白及其编码核酸
如本文所用，术语“突变蛋白”、“本发明突变蛋白”包括突变型RAE1蛋白和突变型RAL1蛋白。
如本文所用，术语“突变型RAE1蛋白”、“本发明突变型RAE1蛋白”可互换使用，均指非天然存在的RAE1突变蛋白，且所述突变蛋白为基于SEQ ID NO.:35、37-42中任一所示蛋白进行人工改造的蛋白。所述的突变蛋白含有与介导STOP1降解活性相关的核心氨基酸。
在另一优选例中，所述的突变型RAE1蛋白包括活性增加的突变蛋白、或活性下降的突变蛋白。
如本文所用，术语“突变型RAL1蛋白”、“本发明突变型RAL1蛋白”可互换使用，均指非天然存在的RAL1突变蛋白，且所述突变蛋白为基于SEQ ID NO.:50-55中任一所示蛋白进行人工改造的蛋白。所述的突变蛋白含有与介导STOP1降解活性相关的核心氨基酸。
在另一优选例中，所述的突变型RAL1蛋白包括活性增加的突变蛋白、或活性下降的突变蛋白。
在另一优选例中，所述的活性为介导STOP1蛋白降解的活性。
在另一优选例中，所述突变型RAE1蛋白或突变型RAL1蛋白是活性下降或丧失的突变蛋白。
在另一优选例中，所述突变蛋白的所述核心氨基酸中至少有一个是经过人工改造的，并且具有降低或丧失介导STOP1降解的活性。
优选地，在本发明中，所述的RAE1突变蛋白在对应于野生型的RAE1蛋白的选自下组的氨基酸发生突变：第167位(G)、第439位(G)、第466位(R)、第524位(Q)、第568位(S)、第116位(G)、第193位(G)、第400位(W)、或其组合。上述突变可导致RAE1蛋白的活性大幅下降甚至丧失。
应理解，本发明突变蛋白中的氨基酸编号基于SEQ ID NO.:35作出，当某一具体突变蛋白与SEQ ID NO.:35所示序列的同源性达到80％或以上时，突变蛋白的氨基酸编号可能会有相对于SEQ ID NO.:35的氨基酸编号的错位，如向氨基酸的N末端或C末端错位1-5位，而采用本领域常规的序列比对技术，本领域技术人员通常可以理解这样的错位是在合理范围内的，且不应当由于氨基酸编号的错位而使同源性达80％(如90％、95％、98％)的、具有相同或相似的活性的突变蛋白不在本发明突变蛋白的范围内。
本发明突变蛋白是合成蛋白或重组蛋白，即可以是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、植物)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的突变蛋白可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的突变蛋白还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。
本发明还包括所述突变蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持所述突变蛋白相同的生物学功能或活性的蛋白。
本发明的突变蛋白片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的突变蛋白，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的突变蛋白，或(iii)成熟突变蛋白与另一个化合物(比如延长突变蛋白半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的突变蛋白，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此突变蛋白序列而形成的突变蛋白(如前导序列或分泌序列或用来纯化此突变蛋白的序列或蛋白原序列，或与抗原IgG片段的形成的融合蛋白)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。本发明中，保守性替换的氨基酸最好根据表I进行氨基酸替换而产生。
表I
最初的残基 代表性的取代 优选的取代
Ala(A) Val；Leu；Ile Val
Arg(R) Lys；Gln；Asn Lys
Asn(N) Gln；His；Lys；Arg Gln
Asp(D) Glu Glu
Cys(C) Ser Ser
Gln(Q) Asn Asn
Glu(E) Asp Asp
Gly(G) Pro；Ala Ala
His(H) Asn；Gln；Lys；Arg Arg
Ile(I) Leu；Val；Met；Ala；Phe Leu
Leu(L) Ile；Val；Met；Ala；Phe Ile
Lys(K) Arg；Gln；Asn Arg
Met(M) Leu；Phe；Ile Leu
Phe(F) Leu；Val；Ile；Ala；Tyr Leu
Pro(P) Ala Ala
Ser(S) Thr Thr
Thr(T) Ser Ser
Trp(W) Tyr；Phe Tyr
Tyr(Y) Trp；Phe；Thr；Ser Phe
Val(V) Ile；Leu；Met；Phe；Ala Leu
本发明的活性下降的突变蛋白不具有介导STOP1蛋白降解的活性。
此外，还可以对本发明突变蛋白进行修饰。修饰(通常不改变一级结构)形式包括：体内或体外的突变蛋白的化学衍生形式如乙酰化或羧基化。修饰还包括糖基化，如那些在突变蛋白的合成和加工中或进一步加工步骤中进行糖基化修饰而产生的突变蛋白。这种修饰可以通过将突变蛋白暴露于进行糖基化的酶(如哺乳动物的糖基化酶或去糖基化酶)而完成。修饰形式还包括具有磷酸化氨基酸残基(如磷酸酪氨酸，磷酸丝氨酸，磷酸苏氨酸)的序列。还包括被修饰从而提高了其抗蛋白水解性能或优化了溶解性能的突变蛋白。
本发明还提供了编码RAE1多肽、蛋白或其变体的多核苷酸序列。本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括：DNA、基因组DNA或人工合成的DNA，DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。
术语“编码突变蛋白的多核苷酸”可以是包括编码本发明突变蛋白的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。
本发明还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或突变蛋白的片段、类似物和衍生物。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码的突变蛋白的功能。
本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50％，较佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件(或严紧条件)下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中，“严格条件”是指：(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在90％以上，更好是95％以上时才发生杂交。
本发明的突变蛋白和多核苷酸优选以分离的形式提供，更佳地，被纯化至均质。
应理解，虽然本发明的RAE1基因优选来自拟南芥，但是来自其它植物的与RAE1基因高度同源(如具有80％以上，如85％,90％,95％甚至98％序列相同性)的其它基因也在本发明考虑的范围之内。比对序列相同性的方法和工具也是本领域周知的，例如BLAST。
本发明多核苷酸全长序列通常可以通过PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。
一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。
此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。
目前，已经可以完全通过化学合成来得到编码本发明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中已知的各种现有的DNA分子(或如载体)和细胞中。此外，还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。
应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法被优选用于获得本发明的多核苷酸。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时，可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法)，用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择，并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。
野生型RAE1蛋白和RAE1基因
如本文所用，野生型RAE1蛋白，是指天然存在的、来源于植物(较佳地来自拟南芥、水稻、玉米、大麦、芸薹属、大豆、或类似植物)、未经过人工改造的RAE1蛋白，负调控AtALMT1表达。其核苷酸可以通过基因工程技术来获得，如基因组测序、聚合酶链式反应(PCR)等，其氨基酸序列可由核苷酸序列推导而得到。
在另一优选例中，所述RAE1蛋白来源于拟南芥，氨基酸序列如SEQ ID NO.:35所示。
MKKVKQIRVLKPFDLLSEELVFIILDLISPNPSDLKSFSLTCKSFYQLESKHRGSLKPLRSDYLPRILTRYRNTTDLDLTFCPRVTDYALSVVGCLSGPTLRSLDLSRSGSFSAAGLLRLALKCVNLVEIDLSNATEMRDADAAVVAEARSLERLKLGRCKMLTDMGIGCIAVGCKKLNTVSLKWCVGVGDLGVGLLAVKCKDIRTLDLSYLPITGKCLHDILKLQHLEELLLEGCFGVDDDSLKSLRHDCKSLKKLDASSCQNLTHRGLTSLLSGAGYLQRLDLSHCSSVISLDFASSLKKVSALQSIRLDGCSVTPDGLKAIGTLCNSLKEVSLSKCVSVTDEGLSSLVMKLKDLRKLDITCCRKLSRVSITQIANSCPLLVSLKMESCSLVSREAFWLIGQKCRLLEELDLTDNEIDDEGLKSISSCLSLSSLKLGICLNITDKGLSYIGMGCSNLRELDLYRSVGITDVGISTIAQGCIHLETINISYCQDITDKSLVSLSKCSLLQTFESRGCPNITSQGLAAIAVRCKRLAKVDLKKCPSINDAGLLALAHFSQNLKQINVSDTAVTEVGLLSLANIGCLQNIAVVNSSGLRPSGVAAALLGCGGLRKAKLHASLRSLLPLSLIHHLEARGCAFLWKDNTLQAELDPKYWKQQLEEMAP(SEQ ID NO.:35)
在另一优选例中，所述RAE1蛋白来源于水稻(OsRAE1.1)，氨基酸序列如SEQ IDNO.:37所示。
MASPMPTPTHRVKRRRLDLSPPPHLNDLADELLFLILDRAAAHDPRALKSFSLVSRACHAAESRHRRVLRPFRPDLLPAALARYPALSRLDLSLCPRLPDAALAALPAAPSVSAVDLSRSRGFGAAGLAALVAACPNLTDLDLSNGLDLGDAAAAEVAKARRLQRLSLSRCKRITDMGLGCIAVGCPDLRELSLKWCIGVTHLGLDLLALKCNKLNILDLSYTMIVKKCFPAIMKLQSLQVLLLVGCNGIDDDALTSLDQECSKSLQVLDMSNYYNVTHVGVLSIVKAMPNLLELNLSYCSPVTPSMSSSFEMIHKLQTLKLDGCQFMDDGLKSIGKSCVSLRELSLSKCSGVTDTDLSFVVPRLKNLLKLDVTCCRKITDVSLAAITTSCPSLISLRMESCSLVSSKGLQLIGRRCTHLEELDLTDTDLDDEGLKALSGCSKLSSLKIGICLRITDEGLRHVSKSCPDLRDIDLYRSGAISDEGVTHIAQGCPMLESINLSYCTKLTDCSLRSLSKCIKLNTLEIRGCPMVSSAGLSEIATGCRLLSKLDIKKCFEINDMGMIFLSQFSHNLRQINLSYCSVTDIGLISLSSICGLQNMTIVHLAGVTPNGLIAALMVCGLRKVKLHEAFKSMVPSHMLKVVEARGCLFQWINKPYQVAVEPCDVWKQQSQDLLVQ(SEQ ID NO.:37)
在另一优选例中，所述RAE1蛋白来源于水稻(OsRAE1.2)，氨基酸序列如SEQ IDNO.:38所示。
MASPAPTHHAKRRRLALPPPPPPHLNDLADELLFLILDRAAAHDPRALKSFSLVSRACHAAESRHRRVLRPFRPDLLPAALARYPAISHLDLSLCPRLPDAALAALPAAPFVSAVDLSRSRGFGAAGLAALVAAFPNLTDLDLSNGLDLGDAAAAEVAKARRLQRLSLSRCKRITDMGLGCIAVGCPDLRELSLKWCIGVTHLGLDLLALKCNKLNILDLSYTMIVKKCFPAIMKLQNLQVLLLVGCNGIDDDALTSLDQECSKSLQVLDMSNSYNVTHVGVLSIVKAMPNLLELNLSYCSPVTPSMSSSFEMIHKLQKLKLDGCQFMDDGLKSIGKSCVSLRELSLSKCSGVTDTDLSFVVPRLKNLLKLDVTCCRKITDVSLAAITTSCPSLISLRMESCSLVSSKGLQLIGRRCTHLEELDLTDTDLDDEGLKALSGCSKLSSLKIGICLRITDEGLRHVSKSCPDLRDIDLYRSGAISDEGVTHIAQGCPMLESINMSYCTKLTDCSLRSLSKCIKLNTLEIRGCPMVSSAGLSEIATGCRLLSKLDIKKCFEINDMGMIFLSQFSHNLRQINLSYCSVTDIGLISLSSICGLQNMTIVHLAGVTPNGLIAALMVCGLRKVKLHEAFKSMVPSHMLKVVEARGCLFQWINKPYQVAVEPCDVWKQQSQDLLVQ(SEQ ID NO.:38)
在另一优选例中，所述RAE1蛋白来源于玉米，氨基酸序列如SEQ ID NO.:39所示。
MAMAAQQHRHHKRRRIALSPSPSPSLAPIPGAPTPPLDSLADELLFLVLDRVAQADPRALKSFALASRACHAAESRHRRTLRPLRADLLPAALARYPSATRLDLTLCARVPDAALASAAVSGSSALRAVDLSRSRGFGAAGVAALAAACPDLADLDLSNGVHLGDAAAAEVARARALRRLSLVRWKPLTDMGLGCVAVGCTELKDLSLKWCLGLTDLGIQLLALKCRKLTSLDLSYTMITKDSLPSIMKLPNLQELTLVGCIGIDDGALVSLERECSKSLQVLDMSQCQNITDVGVSSILKSVPNLLELDLSYCCPVTPSMVRNFQKLPKLQALKLEGCKFMANGLKAIGTSCVSLRELSLSKSSGVTDTELSFVVSRLKNLLKLDITCCRSITDVSLAAITSSCTSLISLRMESCSHVSSGALQLIGKHCSHLEELDLTDSDLDDEGLKALARCSELSSLKIGICLKISDEGLSHIGRSCPKLREIDLYRCGVISDDGIIQIAQGCPMLESINLSYCTEITDRSLISLSKCAKLNTLEIRGCPSVSSIGLSEIAMGCRLLSKLDIKKCFGINDVGMLYLSQFAHSLRQINLSYCSVTDVGLLSLSSISGLQNMTIVHLAGITPNGLTATLMVCGGLTKVKLHEAFRSMMPPHTIKNVEARGCVFQWIDKPFKVEVEPCDVWKQQSQDVLVR(SEQ ID NO.:39)
在另一优选例中，所述RAE1蛋白来源于大麦，氨基酸序列如SEQ ID NO.:40所示。
ISKDCLPAIMELPNLEVLALVGCVGIDDDALSGLENESSKSLRVLDMSTCRNVTHTGVSSVVKALPNLLELNLSYCCNVTASMGKCFQMLPKLQTLKLEGCKFMADGLKHIGISCVSLRELSLSKCSGVTDTDLSFVVSRLKNLLKLDITCNRNITDVSLAAITSSCHSLISLRIESCSHFSSEGLRLIGKRCCHLEELDITDSDLDDEGLKALSGCSKLSSLKIGICMRISDQGLIHIGKSCPELRDIDLYRSGGISDEGVTQIAQGCPMLESINLSYCTEITDVSLMSLSKCAKLNTLEIRGCPSISSAGLSEIAIGCRLLAKLDVKKCFAINDVGMFFLSQFSHSLRQINLSYCSVTDIGLLSLSSICGLQNMTIVHLAGITPNGLLAALMVSGGLTRVKLHAAFRSMMPPHMLKVVEARGCAFQWIDKPFKVEQERCDIWQQQSRDVLVR(SEQ ID NO.:40)
在另一优选例中，所述RAE1蛋白来源于芸薹属，氨基酸序列如SEQ ID NO.:41所示。
MKKAKQIQHMISKPFDLLSEELVFIILDLVAQNPSDLKSFSLTCKWFYQVEARHRRSLKPLRAEYLPRILTRYRNTADLDLSFCPRVTDYALSVVGCLSGPTLRSVDLSRSFSFSAAGLLRLAVKCVSLVEIDLSNATEMRDAAAAVVAEAKSLERLKLGRCKKLTDMGIGCIAVGCRKLKRVSLKWCVGVGDLGVGLLAVKCKDIRSLDLSYLPITGKCLHDVLKLQHLEELLLQGCFGVDDDSLKSLTHHCNSLKNLDASSCQNLTQRGLTSLLSGAGCLERLDLAHSSSVISLDFASSLNKVSSALQSIRLDGCAVTCDGLKAIGTLCISLREVSLSKCVTVTDEGLSCLVMKLKDLRKLDITCCRKLTGVSITQVASSCPLLVSLKMESCSLVSRDAFWLIGHKCRLLEELDFTDNEIDDEGLKSISSCRSLSSLKLGICLNITDRGLSYIGMGCSNLRELDLYRSVGITDVGISSIAQGCCHLETINISYCKDITDKSLVSLSKCSMLQTFESRGCPHITCQGLAAIAVRCKRLSKLDLKKCPFINDSGLLTLAHFSQGLKQISVSETGVTDVGLVSLANIGCLQNIAAVNTRGLSPSGVAAALVGCGGLRKVKLHASLRSLLPSSLINHMEARGCSFLWKDYNNHNNSNTLQAELDPKYWKV(SEQ IDNO.:41)
在另一优选例中，所述RAE1蛋白来源于大豆，氨基酸序列如SEQ ID NO.:42所示。
MSRIYSSNIETKQTNPSLLSPQLFIINLQNDQPNAKRRTMKKQKLSEPQNDTTNPFEVLSEELMFVILDFLQTTSLDKKSFSLTCKLFYSVEAKHRRLLRPLRAEHLPALAARYPNVTELDLSLCPRVGDGALGLVAGAYAATLRRMDLSRSRRFTATGLLSLGARCEHLVELDLSNATELRDAGVAAVARARNLRKLWLARCKMVTDMGIGCIAVGCRKLRLLCLKWCVGIGDLGVDLVAIKCKELTTLDLSYLPITEKCLPSIFKLQHLEDLVLEGCFGIDDDSLDVDLLKQGCKTLKRLDISGCQNISHVGLSKLTSISGGLEKLILADGSPVTLSLADGLNKLSMLQSIVLDGCPVTSEGLRAIGNLCISLRELSLSKCLGVTDEALSFLVSKHKDLRKLDITCCRKITDVSIASIANSCTGLTSLKMESCTLVPSEAFVLIGQKCHYLEELDLTDNEIDDEGLMSISSCSWLTSLKIGICLNITDRGLAYVGMRCSKLKELDLYRSTGVDDLGISAIAGGCPGLEMINTSYCTSITDRALIALSKCSNLETLEIRGCLLVTSIGLAAIAMNCRQLSRLDIKKCYNIDDSGMIALAHFSQNLRQINLSYSSVTDVGLLSLANISCLQSFTLLHLQGLVPGGLAAALLACGGLTKVKLHLSLRSLLPELLIRHVEARGCVFEWRDKEFQAELDPKCWKLQLEDVI(SEQ ID NO.:42)
如本文所用，术语“本发明RAE1基因”、“RAE1基因”可以互换使用。
在本发明中，RAE1的基因包括基因组基因、cDNA序列、mRNA序列。
在本发明中，所述RAE1基因来源于拟南芥，核酸序列如SEQ ID NO.:36(DNA序列)或SEQ ID NO.:43(mRNA序列)所示。
GGGTTTTTTCCAAAATCCTCAAAGAGAGACTATACTTCTCTCGGATCCTTCCTGATTTCAAAATTTCTTCAACCCACCAGCAGCAGCAGCAGATGAAGAAGGTTAAACAGATTCGTGTCTTAAAGCCTTTCGATCTTCTCTCGGAAGAGCTCGTCTTTATCATCCTTGACCTCATCTCTCCCAACCCTTCCGATCTCAAATCCTTCTCTCTTACTTGCAAATCTTTCTACCAGCTCGAGTCCAAGCACCGCGGATCCTTAAAACCTCTCCGCTCCGACTATCTCCCTCGCATCTTGACTCGTTACCGGAACACCACCGATCTCGATCTTACCTTCTGCCCGCGTGTCACTGACTACGCGCTTAGCGTCGTTGGCTGTCTCTCCGGACCTACGCTTCGCTCCCTCGACCTCTCGCGCTCTGGCTCCTTCTCCGCCGCGGGACTACTGCGATTGGCCCTCAAATGTGTCAATTTAGTCGAGATTGACCTGTCCAATGCGACGGAGATGAGAGACGCCGATGCTGCGGTGGTGGCGGAGGCGAGGAGTCTGGAGAGGCTGAAGCTGGGCAGATGCAAGATGCTGACGGACATGGGAATCGGATGTATAGCAGTTGGATGTAAGAAGCTCAATACGGTTAGCTTGAAATGGTGTGTTGGCGTCGGAGATTTAGGGGTTGGCTTGCTTGCCGTCAAATGCAAGGACATTCGCACCTTAGACCTCTCCTACTTGCCGGTAATTAACTTCTCTCTTCACATTTTCTTAATCCGCAGAGCCAAATTTCGATTAATATGGTAAGTTTGTCGAATTGGAATTATTTCTAAATTTGTTCTTCCTGAGACCTGTTGGTTGATTTTTCAAGTTAACAACAAGTTTTGGTTGAACTTTTGGTCTTTCAACATCTGTGGATCATTATCTATCTGAATTCGACACTTTAAGTGCCATATGTTTGGATTATATCTTCAGAGGAGCTGGAAATTCAAACCTATTCTTTTGTTCCGTATTCTACAGATCACAGGAAAGTGTTTACATGACATTCTGAAACTTCAACACCTTGAAGAACTTCTTCTAGAAGGGTGCTTTGGAGTAGATGATGACAGTCTTAAATCACTCAGACATGATTGCAAGTCATTGAAGGTAACCTCTATTCCAAGAAATTTGTTTGATTCTTATACATGAGATCACATAATAGTTTTGGAATCGACTTGACAGACAAACTTTTTAGTTGATATTTTAGAACAGAAAACTTGGTATTCTCAGAATATGGCTTGGAGAAGATGTTACGCTTCTTCTTGCTCGCTGCATTTATTCTGGAAACATTTAACTTTTATGAGAGAAGATGTATAAACAGGTTTCATGTTTTCTTAGACTCAGAAAGCTATTTATCATTGAAAGTCTAATGCTGGAAGACTATATAGTTGATTGTTTTCATCATCATCTTATCCATAGACATTTGAGATTTTACTTACCAAAACCTGTGTTCTGCAGAAGCTTGATGCATCCAGCTGCCAGAATTTAACTCATAGAGGTTTAACCTCACTTTTAAGCGGGGCAGGATATCTTCAGCGACTTGATCTATCACACTGTTCTTCTGTAAGTTCTCCGTTTTCTCATTATCATCAGAACACATGCTTTCCTTGCTTTGTTCTCTGGTTATGGCCTGTATGTAAGTATTTGCTAAATGGCTGAGTCAACTTAGTTTGGCACTAAAACTCTTTAGTAGTAGCAAAACCAGTAATTGCACATACCACCGAATAGACCATTTGTGTCATGGATCGATAGCAGTACACAGACCCACCAAGTTCTATGATGCCTTCTTATATGAGGTTTATTTACTGATTTAGGTGATATCATTGGATTTTGCGAGTAGCTTAAAGAAGGTTTCAGCATTACAGTCGATCAGGTTGGATGGTTGTTCTGTTACGCCTGATGGTTTGAAGGCGATAGGCACATTGTGCAATTCCCTGAAAGAGGTTAGCCTAAGCAAATGCGTGAGCGTAACTGATGAAGGTCTTTCTTCTCTAGTAATGAAACTGAAAGACCTCAGAAAACTTGACATCACATGTTGCCGGAAACTAAGTAGAGTTTCAATCACCCAAATCGCCAATTCGTGTCCTTTACTAGTCTCTTTGAAGATGGAGTCTTGTTCTCTTGTTTCCAGAGAAGCCTTTTGGTTGATCGGACAAAAGTGTCGGCTACTTGAAGAGCTTGACTTAACTGACAACGAGATTGATGATGAAGGTTCTTTATTTTCTTCAGATCAATTCTTAGAACCGTGGTTTTTGGATTATACCTTATCTTGTTAGTCTTTCCTCGTATGATGCAGGACTGAAATCCATATCTAGTTGTCTGAGTCTTTCCTCGTTAAAGCTGGGAATTTGTCTTAACATAACAGACAAAGGGCTCTCGTACATCGGGATGGGCTGTTCAAATCTCCGTGAACTTGATCTCTATAGGTATCTCGCGTAGAAATTTATTTTTCAGTCGGGTCAATAATAAAATTCTCCGTTCTCAATCTAGTCTTTATCTACTCCAGGTCAGTGGGAATAACAGACGTAGGCATCTCCACAATTGCCCAAGGCTGCATTCATCTGGAAACAATAAACATTTCATACTGCCAAGACATAACAGACAAGTCCCTGGTTTCATTGTCCAAATGCTCGTTGTTACAAACATTCGAGAGCAGGGGATGTCCTAACATCACGTCCCAAGGACTTGCAGCCATTGCTGTTCGGTGCAAGCGACTCGCCAAGGTTGACTTGAAGAAGTGCCCATCCATCAATGATGCGGGGTTGCTCGCTCTGGCTCACTTCTCTCAGAATCTCAAACAGGTAATAAACCGTTGAATCCTTCACTGACAGCTGAAAAAACTACAATATACTGGTTGAATCTGTTATCTGATTGCGATCCCCATGTTGCAGATAAACGTGTCAGACACAGCTGTGACTGAAGTGGGACTTCTCTCCCTAGCCAACATAGGGTGTTTACAGAACATAGCGGTTGTGAACTCGAGTGGTTTAAGACCGAGCGGAGTAGCAGCAGCATTGCTGGGGTGTGGAGGATTAAGGAAAGCGAAACTACATGCGTCCCTAAGATCACTGCTTCCTCTTTCTCTAATCCACCACTTGGAAGCTCGTGGTTGTGCGTTCCTCTGGAAAGACAATACCCTTCAGGTGAATATATATACAAGTATATGTAGATTACTACTTACTACACTAAATAGCCGCAAAAGGTTGGTGTAGCTTTTTATGATTACAAATGAAAATCTTAGAGCGAAGGAGTCTGACATATGGAAATGTAAATGATGTGGGAACAGGCGGAGTTAGATCCCAAGTACTGGAAGCAACAGCTGGAAGAGATGGCGCCTTAAATTAAAAGTGAGAAGAAACATTCTGAAATGGGAAAGAGGAGTTCCTATGGGAGCCAGCAGACAGGCCCTGTTTTGGGCCCAGTGTGGATTAGCTGGAACAATTTTGGTCTCTTTTGTGTTGTTGTTGACGGCGCGTGTTCTAACAACCCCACACAACCTTACATTATAAGTCTAGTCACATGGTGGGTGACATGGTACCGTTGTATATGTAGTTTTTGTTTCTTTTTTTTTTTTTTTTGGTTGGGGAGCCGAAATTAACGGACGTAACAGAGTCACAAGGGGATGCCTTCTCTGTGCCTTTTTGACTTTTTCCTCCTTTCTTTTTTTTCTGTAATCATATGAGTTTTATGTAATTTAATGCCTCATCAACTTGCCTGGATAGGGCCGGCCTTTCC(SEQ ID NO.:36)
GGGTTTTTTCCAAAATCCTCAAAGAGAGACTATACTTCTCTCGGATCCTTCCTGATTTCAAAATTTCTTCAACCCACCAGCAGCAGCAGCAGATGAAGAAGGTTAAACAGATTCGTGTCTTAAAGCCTTTCGATCTTCTCTCGGAAGAGCTCGTCTTTATCATCCTTGACCTCATCTCTCCCAACCCTTCCGATCTCAAATCCTTCTCTCTTACTTGCAAATCTTTCTACCAGCTCGAGTCCAAGCACCGCGGATCCTTAAAACCTCTCCGCTCCGACTATCTCCCTCGCATCTTGACTCGTTACCGGAACACCACCGATCTCGATCTTACCTTCTGCCCGCGTGTCACTGACTACGCGCTTAGCGTCGTTGGCTGTCTCTCCGGACCTACGCTTCGCTCCCTCGACCTCTCGCGCTCTGGCTCCTTCTCCGCCGCGGGACTACTGCGATTGGCCCTCAAATGTGTCAATTTAGTCGAGATTGACCTGTCCAATGCGACGGAGATGAGAGACGCCGATGCTGCGGTGGTGGCGGAGGCGAGGAGTCTGGAGAGGCTGAAGCTGGGCAGATGCAAGATGCTGACGGACATGGGAATCGGATGTATAGCAGTTGGATGTAAGAAGCTCAATACGGTTAGCTTGAAATGGTGTGTTGGCGTCGGAGATTTAGGGGTTGGCTTGCTTGCCGTCAAATGCAAGGACATTCGCACCTTAGACCTCTCCTACTTGCCGATCACAGGAAAGTGTTTACATGACATTCTGAAACTTCAACACCTTGAAGAACTTCTTCTAGAAGGGTGCTTTGGAGTAGATGATGACAGTCTTAAATCACTCAGACATGATTGCAAGTCATTGAAGAAGCTTGATGCATCCAGCTGCCAGAATTTAACTCATAGAGGTTTAACCTCACTTTTAAGCGGGGCAGGATATCTTCAGCGACTTGATCTATCACACTGTTCTTCTGTGATATCATTGGATTTTGCGAGTAGCTTAAAGAAGGTTTCAGCATTACAGTCGATCAGGTTGGATGGTTGTTCTGTTACGCCTGATGGTTTGAAGGCGATAGGCACATTGTGCAATTCCCTGAAAGAGGTTAGCCTAAGCAAATGCGTGAGCGTAACTGATGAAGGTCTTTCTTCTCTAGTAATGAAACTGAAAGACCTCAGAAAACTTGACATCACATGTTGCCGGAAACTAAGTAGAGTTTCAATCACCCAAATCGCCAATTCGTGTCCTTTACTAGTCTCTTTGAAGATGGAGTCTTGTTCTCTTGTTTCCAGAGAAGCCTTTTGGTTGATCGGACAAAAGTGTCGGCTACTTGAAGAGCTTGACTTAACTGACAACGAGATTGATGATGAAGGACTGAAATCCATATCTAGTTGTCTGAGTCTTTCCTCGTTAAAGCTGGGAATTTGTCTTAACATAACAGACAAAGGGCTCTCGTACATCGGGATGGGCTGTTCAAATCTCCGTGAACTTGATCTCTATAGGTCAGTGGGAATAACAGACGTAGGCATCTCCACAATTGCCCAAGGCTGCATTCATCTGGAAACAATAAACATTTCATACTGCCAAGACATAACAGACAAGTCCCTGGTTTCATTGTCCAAATGCTCGTTGTTACAAACATTCGAGAGCAGGGGATGTCCTAACATCACGTCCCAAGGACTTGCAGCCATTGCTGTTCGGTGCAAGCGACTCGCCAAGGTTGACTTGAAGAAGTGCCCATCCATCAATGATGCGGGGTTGCTCGCTCTGGCTCACTTCTCTCAGAATCTCAAACAGATAAACGTGTCAGACACAGCTGTGACTGAAGTGGGACTTCTCTCCCTAGCCAACATAGGGTGTTTACAGAACATAGCGGTTGTGAACTCGAGTGGTTTAAGACCGAGCGGAGTAGCAGCAGCATTGCTGGGGTGTGGAGGATTAAGGAAAGCGAAACTACATGCGTCCCTAAGATCACTGCTTCCTCTTTCTCTAATCCACCACTTGGAAGCTCGTGGTTGTGCGTTCCTCTGGAAAGACAATACCCTTCAGGCGGAGTTAGATCCCAAGTACTGGAAGCAACAGCTGGAAGAGATGGCGCCTTAAATTAAAAGTGAGAAGAAACATTCTGAAATGGGAAAGAGGAGTTCCTATGGGAGCCAGCAGACAGGCCCTGTTTTGGGCCCAGTGTGGATTAGCTGGAACAATTTTGGTCTCTTTTGTGTTGTTGTTGACGGCGCGTGTTCTAACAACCCCACACAACCTTACATTATAAGTCTAGTCACATGGTGGGTGACATGGTACCGTTGTATATGTAGTTTTTGTTTCTTTTTTTTTTTTTTTTGGTTGGGGAGCCGAAATTAACGGACGTAACAGAGTCACAAGGGGATGCCTTCTCTGTGCCTTTTTGACTTTTTCCTCCTTTCTTTTTTTTCTGTAATCATATGAGTTTTATGTAATTTAATGCCTCATCAACTTGCCTGGATAGGGCCGGCCTTTCC(SEQ ID NO.:43)
在本发明中，所述RAE1基因来源于水稻(OsRAE1.1，LOC_Os11g01780)，核酸序列如SEQ ID NO.:44所示。
ATTATTACTACCTTCCCTTCCCTTCTTCTTGTTGCAGTCAACCTCGCCATGGCCTCGCCTATGCCAACGCCTACCCACCGCGTCAAGCGCCGCCGCCTCGACCTCTCCCCGCCCCCGCACCTCAACGACCTCGCCGACGAGCTCCTCTTCCTCATCCTCGACCGTGCCGCCGCCCATGACCCCCGCGCCCTCAAGTCCTTCTCCCTCGTCTCCCGCGCCTGCCACGCCGCCGAGTCGCGCCACCGCCGCGTACTCCGCCCCTTCCGCCCCGACCTCCTCCCCGCCGCGCTCGCCCGCTACCCCGCCCTCTCCCGCCTCGATCTCTCCCTCTGCCCGCGCCTCCCCGACGCCGCCCTCGCCGCGCTCCCCGCCGCGCCGTCCGTCTCCGCCGTCGACCTCTCCCGCTCCCGGGGGTTCGGCGCCGCCGGCCTCGCCGCGCTCGTCGCCGCGTGCCCCAATCTCACGGACCTCGACCTCTCCAATGGCCTCGACCTCGGGGATGCCGCGGCGGCGGAGGTGGCCAAGGCGCGCCGCCTGCAGAGGCTCTCGCTGTCGCGATGCAAGCGCATCACTGACATGGGGCTCGGATGCATCGCCGTCGGATGCCCCGACCTGCGCGAGCTCTCGCTCAAGTGGTGCATCGGGGTCACTCATCTCGGACTAGACCTCCTCGCCCTCAAGTGCAACAAGCTCAACATCCTGGATCTCTCCTACACCATGATTGTAAAAAAATGCTTTCCAGCCATCATGAAGCTACAAAGTCTACAAGTGTTACTACTGGTGGGATGTAATGGAATTGATGATGATGCCCTTACTAGTCTTGATCAAGAATGCAGCAAATCACTACAGGTTCTTGATATGTCAAATTATTACAATGTCACTCATGTCGGTGTTCTGTCCATTGTGAAGGCAATGCCGAATCTGTTGGAACTCAATCTATCATACTGCTCTCCTGTTACTCCTTCTATGTCAAGCAGCTTCGAAATGATTCATAAATTGCAGACACTGAAGCTGGATGGTTGCCAATTCATGGATGATGGATTAAAATCCATTGGGAAATCCTGTGTTTCTTTGAGGGAGTTAAGTCTGAGCAAATGTTCTGGAGTGACAGACACAGATCTTTCTTTTGTCGTGCCAAGACTGAAAAATTTGCTGAAGCTGGATGTTACTTGTTGTCGCAAAATCACTGATGTTTCATTAGCTGCCATCACAACCTCATGCCCCTCCCTCATCTCTCTGAGAATGGAGTCCTGTAGCCTTGTTTCCAGCAAAGGACTACAGCTGATTGGAAGGCGCTGCACTCACTTGGAGGAATTGGATCTTACTGACACTGATTTGGATGATGAAGGTTTGAAAGCTCTCTCTGGATGCAGCAAACTTTCAAGCCTAAAAATTGGCATATGCTTGAGGATAACTGATGAGGGCCTTAGACACGTTAGCAAGTCCTGTCCAGATCTCCGAGATATCGATTTGTACAGGTCTGGGGCGATCAGTGATGAAGGGGTTACTCATATAGCTCAAGGATGCCCAATGTTAGAGTCTATCAATTTGTCCTACTGCACAAAATTAACAGACTGTTCACTGAGATCACTTTCAAAATGCATAAAGCTGAACACATTGGAGATTCGTGGCTGCCCCATGGTTTCATCTGCTGGTCTCTCGGAAATTGCCACAGGATGCAGGCTACTTTCTAAGCTTGATATCAAGAAATGCTTTGAGATCAATGACATGGGAATGATTTTCCTTTCCCAATTCTCTCACAACCTCCGGCAGATAAACTTGTCATATTGTTCGGTCACCGACATTGGGCTTATATCCCTTTCAAGCATATGTGGCTTGCAGAACATGACCATTGTGCATTTAGCGGGTGTTACGCCTAATGGACTGATAGCTGCTCTTATGGTCTGTGGTTTGAGAAAAGTGAAGCTTCATGAAGCATTCAAATCCATGGTGCCATCACATATGCTCAAAGTTGTTGAAGCCCGTGGTTGTCTTTTCCAGTGGATTAATAAACCCTACCAGGTTGCGGTAGAACCGTGTGATGTATGGAAGCAGCAGTCGCAGGATTTGCTTGTACAGTGAAATGTTTCAAAGATAAACGTTGTGGAAACTGGGGCGTGTTTTGTGGTGTTGAATTTATCTAGAGCAATATCTCCAGTCCTAGAGAATGAGCTCCAAAAGTTTTGTGCCATAACTGGCTGAATAGTGTATTGAATTGCTGACGGTAGTATTGTCAGAACAACATACTAGTACTGGTATTTTGCTTGTATGCCAGTGGAGGCGAGGGAGGTTATATTCTTGCTGTGTTGTATATAGCGCAGGTAGGAATCAACAATCAAAGAGAGATCATTGGGGTAAAGCATGTTGTAAGTAGTGCGGAGTATGTGATATGCCTTGCTGTGCCTTTTTGATGCACAATTTGATTAATGGAATGGAACATTGCATTCTCACT(SEQID NO.:44)
在本发明中，所述RAE1基因来源于水稻(OsRAE1.2，LOC_Os12g01760)，核酸序列如SEQ ID NO.:45所示。
GCCAAACGCCCACCATTATTACTACCTTCCCTTCCCTTCTCTCGTTTCAGTCAACTTCGCCATGGCCTCGCCTGCGCCCACCCACCACGCCAAGCGCCGCCGCCTCGCCCTGCCCCCGCCCCCGCCCCCGCACCTCAACGACCTCGCCGACGAGCTCCTCTTCCTCATCCTCGACCGTGCCGCCGCCCATGACCCACGCGCCCTCAAGTCCTTCTCCCTCGTCTCCCGCGCCTGCCACGCCGCCGAGTCGCGCCACCGCCGCGTCCTCCGCCCCTTCCGCCCCGACCTCCTCCCCGCCGCGCTCGCCCGCTACCCCGCCATCTCCCACCTCGATCTCTCCCTCTGCCCCCGCCTCCCCGACGCCGCCCTCGCCGCGCTCCCCGCCGCGCCGTTCGTCTCCGCCGTCGACCTCTCCCGCTCCCGCGGGTTCGGCGCCGCCGGCCTCGCCGCGCTCGTCGCCGCGTTCCCCAATCTCACGGACCTCGACCTCTCCAATGGCCTCGACCTCGGGGATGCCGCGGCGGCGGAGGTGGCCAAGGCGCGCCGCCTCCAGAGGCTCTCGCTGTCGCGATGCAAGCGCATCACTGACATGGGGCTCGGATGCATCGCCGTCGGATGCCCCGACCTGCGCGAGCTCTCGCTCAAGTGGTGCATCGGGGTCACTCATCTGGGACTAGACCTCCTTGCCCTCAAGTGCAACAAGCTCAACATCCTGGATCTCTCCTACACCATGATAGTAAAAAAATGCTTTCCAGCCATCATGAAGCTACAAAATCTACAAGTGTTACTACTGGTGGGATGTAATGGAATTGATGATGATGCCCTTACTAGTCTTGATCAAGAATGCAGCAAATCACTACAGGTTCTTGATATGTCAAACTCTTACAATGTCACTCATGTCGGTGTTCTGTCCATTGTGAAGGCAATGCCGAATCTGTTGGAACTCAATCTATCATACTGCTCTCCTGTTACTCCTTCTATGTCAAGCAGCTTCGAAATGATTCATAAATTGCAGAAACTGAAGCTGGATGGTTGCCAATTCATGGATGATGGATTAAAATCCATTGGGAAATCCTGTGTTTCTTTGAGGGAGTTAAGTCTGAGCAAATGTTCTGGAGTGACAGACACAGACCTTTCTTTTGTCGTGCCAAGACTGAAAAATTTGCTGAAGCTGGATGTTACTTGTTGTCGCAAAATCACTGATGTTTCATTAGCTGCCATCACAACCTCATGCCCATCCCTCATCTCTCTGAGAATGGAGTCCTGTAGCCTTGTTTCCAGCAAAGGACTACAGCTGATTGGAAGGCGCTGCACTCACTTGGAGGAATTGGATCTTACTGACACTGATTTGGATGATGAAGGTTTGAAAGCTCTCTCTGGATGCAGCAAACTTTCAAGCCTAAAAATTGGCATATGCTTGAGGATAACTGATGAGGGCCTTAGACACGTTAGCAAGTCCTGTCCAGATCTCCGAGATATCGATTTGTACAGGTCTGGGGCGATCAGTGATGAAGGGGTTACTCATATAGCTCAAGGATGCCCAATGTTAGAGTCTATCAATATGTCCTACTGCACAAAATTAACAGACTGTTCACTGAGATCACTTTCAAAATGCATAAAGCTGAACACATTGGAGATTCGTGGCTGCCCCATGGTTTCATCTGCTGGTCTCTCGGAAATTGCAACAGGATGCAGGCTACTTTCTAAGCTTGATATCAAGAAATGCTTTGAGATCAATGACATGGGAATGATTTTCCTTTCCCAATTCTCTCACAACCTCCGGCAGATAAACTTGTCATATTGTTCGGTCACCGACATTGGGCTTATATCCCTTTCAAGCATATGTGGCTTGCAGAACATGACCATTGTGCATTTAGCGGGTGTTACGCCTAATGGACTGATAGCTGCTCTTATGGTCTGTGGTTTGAGAAAAGTGAAGCTTCATGAAGCATTCAAATCCATGGTGCCATCACATATGCTCAAAGTTGTTGAAGCCCGTGGTTGTCTTTTCCAGTGGATTAATAAACCCTACCAGGTTGCGGTAGAACCGTGTGACGTATGGAAGCAGCAGTCGCAGGATTTGCTTGTACAGTGAAATGTTTCAAAGATAAACGTTGTGGAAACTGGGGCGTGTTTTGTGGTGTTGAATTTATCTTAGAGCAATATCTCCAGTCCTAGAGAATGAGCTCCAAAAGTTTTGTGCCATAACTGGCTGAATAGTGTATTGAATTACTGACGGTAGTATTGTCAGAACAACATACTAGTACTGGTATTTTGCTTGTATGCCAGTGGAGGCGAGGGAGGTTATATTCTTGATGTGTTGTATATAGCGCAGGTAGGAATCAACAATCAAAGAGAGATTATTGGGGTAAAGCATGTAGTAAGTGTGGAGTATGTGATATGCCTTGTTGTGCCTTTTTGATGCACAATTTGATTAATGGAATGGAACATTGCATTCGCACT(SEQ ID NO.:45)
在本发明中，所述RAE1基因来源于玉米(XM_008677340.2预测:Zea mays F-box/LRR-repeat protein 3(LOC103651656))，核酸序列如SEQ ID NO.:46所示。
CTCCATCTCCATCGCCGGCCTCCATTTCTTGCCTCCCGTGCCAGCCAGTCACTCTCGTCCGCCGCAGATCGAGAAGCCACCACCACCACCACCACCACCGCATGGCCATGGCAGCCCAGCAGCACCGGCACCACAAGCGCCGCCGCATCGCCCTCTCCCCCTCCCCGTCCCCGTCCCTCGCGCCCATCCCCGGCGCCCCCACGCCGCCGCTCGACTCGCTGGCCGACGAGCTCCTCTTCCTGGTCCTGGACCGCGTGGCCCAGGCCGACCCGCGGGCGCTCAAGTCCTTCGCGCTGGCCTCCCGCGCCTGCCACGCCGCGGAGTCACGGCACCGCCGGACGCTCCGCCCGCTCCGCGCGGACCTCCTGCCCGCCGCGCTGGCGCGGTACCCGTCCGCGACCCGCCTCGACCTCACCCTCTGCGCGCGCGTCCCCGACGCCGCCCTCGCCTCCGCCGCCGTCTCCGGCTCCTCCGCCCTCCGCGCCGTCGACCTCTCCCGCTCCCGCGGGTTCGGCGCCGCGGGCGTCGCCGCGCTCGCCGCCGCGTGCCCGGACCTCGCCGACCTCGACCTCTCCAATGGGGTCCACCTCGGGGACGCCGCGGCGGCCGAGGTAGCGCGGGCCAGGGCGCTGCGGAGGCTCTCGCTGGTCCGCTGGAAGCCGCTCACCGACATGGGCCTCGGATGCGTCGCCGTCGGGTGCACGGAGCTGAAGGACCTCTCGCTCAAGTGGTGCCTTGGACTCACGGATCTGGGGATCCAGCTCCTCGCCCTCAAGTGCAGGAAGCTCACCAGCCTGGATCTCTCCTACACCATGATCACAAAGGATAGCTTGCCTTCTATCATGAAGCTACCCAATCTTCAAGAGCTGACACTGGTGGGGTGTATTGGAATCGATGATGGTGCTCTTGTTAGTCTTGAGAGAGAATGCAGTAAATCACTACAGGTGCTTGATATGTCTCAGTGTCAGAATATCACCGATGTAGGAGTTTCATCCATCCTGAAGTCGGTACCCAATCTATTGGAACTGGATCTTTCATACTGCTGTCCTGTTACTCCTTCTATGGTGAGAAACTTCCAGAAGCTTCCTAAACTGCAGGCCCTGAAGCTGGAAGGCTGCAAATTCATGGCCAATGGACTAAAAGCCATTGGGACCTCTTGTGTTTCTTTAAGGGAGCTAAGTCTTAGCAAGTCATCTGGAGTGACAGATACAGAACTCTCTTTTGTTGTGTCAAGGCTAAAGAACCTGCTGAAGCTGGACATTACCTGTTGTCGCAGTATTACTGATGTTTCACTAGCGGCCATAACTAGTTCGTGCACTTCCCTCATCTCTCTGAGGATGGAGTCTTGTAGCCATGTTTCCAGTGGAGCACTCCAACTGATTGGGAAGCACTGTTCTCACTTGGAAGAGTTGGACCTTACTGACAGTGATTTGGATGATGAAGGATTGAAAGCTCTTGCCAGATGTAGCGAACTTTCGAGCCTAAAAATTGGCATTTGCTTGAAGATAAGTGATGAAGGTCTTAGCCACATTGGAAGGTCTTGCCCAAAACTCCGCGAGATTGATTTGTACAGGTGTGGAGTTATTAGCGATGATGGAATTATTCAAATTGCGCAGGGTTGTCCGATGCTAGAGTCTATCAACCTATCATACTGCACAGAAATAACAGACCGTTCACTGATTTCACTCTCAAAATGCGCAAAGCTGAATACTTTGGAGATCCGTGGCTGCCCCAGTGTTTCATCGATTGGGCTCTCAGAAATAGCGATGGGGTGCAGGCTGCTTTCCAAGCTTGATATTAAGAAATGCTTCGGGATTAATGATGTTGGAATGCTTTACCTTTCCCAGTTCGCTCATAGCCTCCGTCAGATAAACTTGTCATACTGTTCAGTCACCGATGTTGGGCTCCTTTCCCTTTCTAGCATATCCGGCCTGCAGAACATGACCATCGTCCATTTGGCGGGTATAACACCCAATGGCTTGACAGCAACTCTTATGGTTTGCGGTGGGTTGACGAAAGTGAAGCTTCATGAAGCATTCAGATCCATGATGCCTCCTCATACGATAAAAAATGTTGAGGCACGTGGCTGTGTTTTCCAGTGGATCGATAAACCGTTCAAGGTTGAGGTGGAGCCTTGTGATGTATGGAAGCAACAGTCACAAGATGTGCTTGTGCGATGAGAATACAGGAGACCTCGAGCGTAGCCGCTATCGTGGAAATCGTGGCATGCATCGTATGGATGGATGAGTTGTTGTTGGCTGGCAATGGCATCCAGAAGTGAAGTCTGATGGGGGGAGCTCCAAACTCAGCGTTGTAATCAGTGCGATTCGGCACAAAGATACCAGCATTTGAGCAGAGGTGTATGTATGTCTTGATGTTGTTTTATACTGCTATAGATGTGTAGATCCCATTGTTTGGTGAGGTGATCATTTGCGAGGAAGTTGACTATTAGCATGTATTAAGATAAAAAGGAAAGAGATGAGAAAATGTTTTTGAAATTTAGTACGATATGCCTTGCAGTGCCTGTATCTGTTGCATTCATATTTGTGATCAGCTGGAATGAAGTGGCTTGCATTCATGTTTTA(SEQ ID NO.:46)
在本发明中，所述RAE1基因来源于大麦(AK372025.1Hordeum vulgare subsp.预测蛋白的vulgare mRNA,部分CDS,clone:NIASHv2145B10)，核酸序列如SEQ ID NO.:47所示。
GAGGTTGGCCGTGGCCAGCCATTGCTACTCCTCCCTCCCTTCTTGGTGTCGCCGCAGCGGACAACCAACTGCCAACTTGCCTTGCCCGTCATGGCCATGGCGACCCACAGCCACCTCCCCAAGCGCCGACGCGTATGCCCTGCCGCGGGCGCGCCGATCGACGAGCTGCCCGACGAGCTCCTCTTCTTGGTCCTGGACCGGGTGGCGGCCGCCGATCCGCGCGCGCTCAAGTCCTTCGCGCTGGCCTCCCGCGCCTGCCACGCCGCCGAGTCGCGCCACCGCCGCGTGCTCCGCCCGTACCGCGCCGACCTACTCCGCGCCGCGCTTGCCCGCTACCCCACCGCCGCCCGCCTCGACCTCACCCTCTGCGCGCGCGTGCCCGGCGCGGCCCTCTCCTCCGCGCCCGTGCCTTCCCTCCGCGCCGTCGACCTCTCCCGCTCCCGCGGCTTCGGGGCGCCCGGCCTCGCCGCGCTCGTCGCCGCCTGCCCCGCCCTGGCCGACCTCGACCTCTCCAATGGGGTCGACCTCGGGGACGCGGCGGCCGCGGAGCTGGCGCGGGCGCGGGGCCTGCAGAGGCTCTGCCTCTCGCGCTGCAAGCCCATCACGGACATGGGCCTCGGCTGCATCGCCGTCGGCTGCCCAGACCTGCGGGACCTCACGCTCAACTGGTGCCTCGGGATCACGGATTTGGGGATCCAGCTCCTCGCCCTCAAGTGCAACAAACTCAGGAACCTGCATCTTTCCTACACCATGGTTAGATCTCCAAAGACTGCCTTCCAGCCATCATGGAGCTACCCAATCTTGAGGTGTTGGCACTGGTGGGATGTGTTGGAATAGATGATGATGCCCTTAGTGGTCTTGAGAATGAAAGCAGCAAATCACTACGGGTTCTCGATATGTCTACCTGTCGAAATGTCACTCATACGGGAGTTTCATCAGTTGTGAAGGCACTGCCAAATCTCTTGGAGTTGAATCTGTCCTACTGCTGTAATGTTACTGCATCTATGGGAAAATGCTTCCAAATGCTTCCTAAATTGCAGACCTTGAAATTGGAAGGCTGCAAGTTCATGGCTGATGGACTAAAACACATTGGAATTTCTTGTGTCTCTTTAAGAGAGTTGAGCCTGAGCAAGTGCTCAGGAGTGACAGATACTGATCTGTCTTTCGTTGTGTCAAGACTAAAGAATTTGCTGAAGCTGGACATTACTTGCAATCGCAATATCACTGATGTTTCGTTAGCTGCCATCACTAGCTCATGCCATTCCCTCATCTCTCTAAGAATAGAGTCCTGTAGCCATTTTTCTAGTGAAGGGCTCCGACTTATTGGGAAGCGATGTTGCCATTTGGAAGAGTTGGATATCACCGACAGTGATTTGGACGATGAAGGTTTGAAAGCTTTGTCTGGATGCAGCAAACTGTCAAGCTTAAAAATTGGAATATGCATGAGGATAAGTGACCAAGGCCTTATCCACATTGGGAAGTCTTGTCCAGAACTCCGAGATATTGATTTGTATAGGTCTGGGGGTATTAGTGATGAGGGGGTTACTCAAATTGCCCAAGGTTGTCCAATGCTAGAGTCTATCAACCTGTCGTACTGTACAGAAATAACAGATGTCTCGTTGATGTCGCTCTCAAAATGTGCAAAGCTAAACACACTGGAGATCCGTGGTTGCCCCAGTATTTCATCTGCTGGGCTCTCAGAAATAGCAATCGGATGCAGGCTACTTGCCAAGCTTGATGTCAAGAAGTGCTTTGCGATCAATGATGTGGGGATGTTTTTTCTTTCCCAGTTCTCTCATAGCCTCCGTCAGATAAACTTGTCATACTGTTCGGTCACCGATATTGGGCTTCTGTCCCTCTCTAGCATATGCGGGCTTCAGAACATGACGATTGTACACTTGGCGGGTATTACGCCTAATGGCTTGCTGGCTGCTCTGATGGTCTCTGGTGGTTTGACAAGGGTGAAGCTTCATGCAGCGTTCAGATCTATGATGCCCCCGCATATGCTCAAAGTCGTTGAGGCTCGCGGCTGTGCTTTCCAGTGGATTGATAAACCATTCAAGGTCGAGCAAGAACGATGCGACATATGGCAACAACAGTCTCGAGACGTGCTTGTACGATGAGAAATGTTTGACGTCGTCGTCTTGGCTGTCAGCCTACAGGATATGGTGTAGAACGAGGCTTTGCACCAAGGTGGACTTGTGTACAGAACAGACATTATCGGAACAATGTTGTATACTCATGTTTCCTTCAGTGCACTAGGAGGTTCTTTTGTTGTGCCGTATCCTGTATATAGAGCAGCAGGAGATGGATGAAATCATAGAGGAATTGCTGGAGGTCGACGTGTACTTAATAGAAACTCACCGATCAATGTGAGAGTGTGCACAGTTCTATTACCTGTCCAATGCGCTCTTGTTTCGAATGAGTAGTAGTTTAGCCTGTGTTTCTCCTGGTGTCC(SEQ ID NO.:47)
在本发明中，所述RAE1基因来源于芸薹属(XM_009132381.2预测:Brassica rapaF-box/LRR-repeat protein 3(LOC103855400))，核酸序列如SEQ ID NO.:48所示。
CTGTCCTTTTTTATTCTCTGTTTCCCATAGAAACTGTGAATCTGTGGGTTTTTAGCAAATCCTCATCGAAACTGTTTCTCCATTTGATAAAAAAAAAAATCAGTAAGTAGTTGGGTTCGAATGAAGAAGGCGAAGCAGATTCAACACATGATCTCAAAGCCTTTCGATCTTCTGTCGGAGGAGCTGGTCTTCATAATCCTAGACCTCGTCGCTCAGAACCCTTCCGATCTCAAATCCTTCTCTCTTACCTGCAAATGGTTCTACCAAGTGGAGGCCAGGCACCGGAGATCCCTGAAACCTCTCAGAGCGGAGTATCTTCCTCGAATCCTGACAAGGTACCGGAATACCGCCGATCTCGATCTTAGCTTCTGCCCGCGCGTCACGGACTACGCGCTTAGCGTGGTCGGGTGCCTCTCCGGACCGACGCTGAGGTCAGTAGACTTATCGAGGTCATTCTCCTTCTCGGCGGCGGGGCTGCTGAGACTGGCCGTGAAATGTGTGAGTCTGGTGGAGATAGACCTGTCGAACGCGACGGAGATGAGGGACGCGGCAGCGGCGGTGGTGGCGGAGGCGAAGAGCCTGGAGAGGCTGAAGCTGGGGAGATGCAAGAAGCTGACGGACATGGGAATAGGATGCATAGCGGTGGGATGTAGGAAGCTGAAGAGGGTGAGCTTGAAGTGGTGTGTAGGCGTCGGAGATTTAGGAGTCGGTCTGCTTGCCGTCAAATGCAAGGACATTCGCTCCTTAGACCTCTCCTACTTGCCGATCACAGGCAAGTGTTTGCATGATGTTCTCAAACTTCAACACCTTGAAGAACTTCTTCTACAAGGTTGCTTCGGAGTCGATGATGACTCTCTTAAATCACTCACTCATCATTGCAACTCCTTAAAGAACCTGGATGCATCGAGCTGCCAGAATTTAACTCAGAGAGGTTTAACCTCACTTTTAAGCGGGGCCGGATGTCTTGAGCGCCTTGATCTAGCACACTCTTCTTCTGTGATCTCATTGGATTTTGCAAGTAGCCTGAACAAGGTTTCTTCAGCATTACAGTCGATCAGGTTGGATGGTTGTGCGGTAACTTGTGATGGGTTGAAGGCGATAGGGACACTGTGCATTTCCCTCAGAGAGGTTAGCCTAAGCAAATGTGTCACCGTAACTGATGAAGGTCTCTCTTGTCTTGTTATGAAACTCAAAGACCTTAGAAAACTTGACATCACCTGTTGCCGGAAACTAACTGGAGTTTCAATCACCCAAGTCGCCAGTTCTTGTCCCTTACTAGTCTCCTTGAAGATGGAGTCTTGTTCTCTTGTTTCCAGAGATGCCTTTTGGTTGATCGGACACAAGTGTCGCCTACTTGAAGAGCTTGACTTTACTGACAATGAGATTGATGATGAAGGACTAAAATCCATATCCAGTTGTCGTAGTCTTTCCTCGTTGAAGTTGGGAATATGTCTGAATATAACAGACAGAGGACTCTCGTACATTGGTATGGGCTGCTCAAATCTCCGTGAACTTGATCTCTACAGGTCGGTGGGAATAACAGACGTAGGAATCTCATCGATCGCTCAAGGCTGCTGTCATCTCGAAACAATAAACATATCATACTGCAAAGACATCACAGACAAGTCGTTGGTGTCATTGTCAAAATGCTCAATGTTACAAACATTCGAGAGCCGGGGATGTCCACACATTACTTGCCAAGGACTTGCCGCCATTGCTGTTCGATGTAAGCGGCTCAGCAAGCTCGACTTGAAAAAGTGTCCTTTCATCAATGACTCCGGTTTGCTCACTCTAGCTCACTTTTCACAGGGCCTCAAACAGATAAGCGTGTCCGAAACGGGGGTGACAGACGTGGGACTTGTGTCGCTAGCAAACATAGGGTGTTTGCAGAACATAGCGGCAGTGAACACAAGGGGTTTAAGCCCGAGTGGAGTAGCAGCAGCGTTGGTTGGGTGTGGAGGTTTAAGGAAAGTGAAACTCCACGCTTCCCTCAGATCACTACTTCCTTCGTCTCTTATAAACCACATGGAAGCTCGTGGCTGCTCCTTCCTGTGGAAAGACTATAACAACCATAATAATAGTAATACACTTCAGGCGGAGTTAGATCCCAAGTACTGGAAGGTATAGCCGGAAGAAGATATTGAGCTTTAGAAGAAAGAAACATCCACAAGGGGAAAGAGACGGAGCCACCATACAGGCCAAGGCCCCATCCATTGTTTGGATTTAGAAAGAGGAACTAAAGCTTGGTATCTATCTATGTCGATGGCGCGTGTTGCCTCACACACATACACGTATATCCATCCTTACGTATGTAGTATATGGTTGTGACATGGATTGGTGGTTAGTTTGTATGTACCCTTTTGTAATTTCATTTCCTTTTTTTGGATGCCAAAGTTAACGGACGTCACAAGAGATTGCATTTGTGTCCTTTTTTTGAGTTTTTCTTTTCTGGATGGTTCTATCAA(SEQ ID NO.:48)
在本发明中，所述RAE1基因来源于大豆(XM_003521974.4预测:Glycine max F-box/LRR-repeat protein 3(LOC100803617))，核酸序列如SEQ ID NO.:49所示。
ACTCATTCAATATTAATAAATGTCTCGCATTTATTCCTCAAACATAGAAACCAAACAAACAAACCCTTCCCTTCTCTCCCCACAGTTATTCATCATTAACCTCCAAAACGACCAACCAAACGCAAAACGCAGAACCATGAAGAAGCAGAAGCTCTCCGAGCCTCAAAACGACACCACCAACCCCTTCGAGGTTCTCTCCGAGGAGCTAATGTTCGTCATCCTCGACTTCCTCCAAACGACGTCGTTGGACAAAAAATCTTTCTCGCTCACGTGTAAGTTGTTTTACTCCGTCGAGGCCAAGCACCGTCGTTTGCTTCGCCCGCTACGTGCGGAACACCTGCCCGCGCTCGCTGCCCGCTACCCGAACGTAACGGAATTGGATCTTTCCTTGTGTCCGCGCGTGGGCGACGGCGCGCTGGGGCTCGTCGCTGGCGCGTACGCGGCGACGCTGCGGCGAATGGACCTGTCGCGGTCGCGGCGGTTCACGGCGACCGGGCTGCTAAGCCTCGGCGCACGGTGCGAGCACCTGGTGGAGCTGGACTTGTCGAACGCGACGGAGCTGAGGGACGCCGGCGTCGCCGCGGTGGCGCGTGCGCGGAACTTGCGGAAGCTGTGGCTGGCGAGGTGCAAGATGGTGACGGATATGGGGATTGGGTGTATTGCGGTGGGGTGCAGGAAGCTGAGGCTGCTTTGCTTGAAGTGGTGTGTGGGAATTGGGGATTTGGGTGTGGATTTGGTTGCGATTAAGTGTAAGGAGCTCACAACATTGGATCTCTCTTATTTGCCTATCACGGAGAAATGTCTACCGTCAATCTTCAAATTGCAACATCTTGAAGATTTGGTCCTTGAAGGATGCTTTGGCATTGATGACGACAGCCTTGATGTTGATCTCTTAAAACAAGGGTGCAAGACATTGAAGAGACTTGATATCTCAGGTTGTCAAAACATAAGTCATGTTGGGTTATCAAAGCTTACAAGCATTTCTGGAGGTTTAGAGAAACTCATTTTAGCAGATGGCTCTCCTGTCACCCTTTCTCTTGCTGATGGTTTGAATAAACTTTCCATGTTGCAATCAATTGTATTAGATGGCTGCCCTGTTACATCTGAAGGATTACGGGCCATTGGAAATTTGTGCATTTCACTTAGGGAGCTTAGTCTAAGCAAATGTTTGGGAGTGACAGATGAGGCACTCTCATTTCTTGTGTCAAAACACAAAGATTTAAGGAAACTTGACATCACATGCTGTCGCAAGATAACTGATGTTTCCATTGCCAGCATTGCAAATTCATGCACAGGTCTAACTTCTCTCAAAATGGAGTCATGTACACTAGTTCCAAGTGAAGCATTTGTCTTGATTGGACAGAAATGCCATTATCTTGAGGAGCTTGACCTAACAGATAATGAAATTGATGATGAAGGTCTTATGTCCATTTCTTCTTGTTCTTGGCTTACCAGCTTGAAAATAGGAATATGCCTGAACATAACTGACAGAGGACTTGCCTATGTTGGCATGCGTTGCTCAAAATTAAAGGAGCTGGATCTATACAGGTCTACTGGAGTAGATGATTTGGGCATTTCAGCAATTGCTGGTGGTTGCCCTGGCCTTGAGATGATAAACACATCCTATTGTACTAGCATTACTGACAGGGCACTAATTGCCTTGTCAAAATGTTCAAATTTGGAGACACTTGAAATTCGAGGATGTCTTCTCGTTACATCCATAGGTCTGGCAGCTATTGCAATGAATTGCAGACAACTAAGTCGTCTAGACATAAAAAAGTGTTACAACATTGATGACAGTGGGATGATTGCTCTGGCTCATTTCTCCCAAAATCTAAGACAGATAAATTTGTCATATAGCTCAGTTACAGATGTGGGGCTTCTGTCACTTGCTAATATCAGTTGCCTTCAAAGCTTTACCTTGCTTCACCTGCAAGGCTTGGTTCCAGGAGGACTGGCGGCAGCCTTATTAGCTTGTGGAGGGCTAACAAAAGTGAAGCTCCATCTTTCACTAAGATCTCTGTTACCTGAGCTACTTATCAGACATGTGGAAGCACGTGGCTGTGTATTTGAATGGAGAGATAAAGAGTTTCAGGCTGAATTGGACCCCAAGTGTTGGAAATTACAGTTGGAAGATGTGATATAATAGGATTTTTCTCAGGTTCTTTGAAGTTTTGATAAAGACAACTCTGCTGCATGGCTCATGAAATTCAATTCGGAAGTCATCATCTTCTCTCTCTTCTCTGTTCACCTAACCTACACTACAAGAAATGAAGAAAGCAGCATGAAAAATGCCAGAAGTATTCTGTTTAGTCCATTGGAGGCTACACAGGCATTTGGAATGGAGATTGTTGATCATCCTTCCTTAAGTCTCGCTCGCCTAACTAGGATGAGTTTTGTTTATTCTTTTTTCTTTTTTTTGCTGCAAATAGCAGGATTAGTGAAGTACTTAAAGTGTTACAAACCCCATCTAACGTCTTTCATTTATTTATTTTGGGAGTACAATTGGAAATGTTCAGAGAATGGAGAAGCAGTGGCTATCGAATGTATAAAAACACTAACTTCTGTTCAATCTTTTCTTTTGACAGTGAAAAGCAAGATTAAGTGTGTAAAACTTAGAAACCTGTTTTGTTTATATATGATTAGAGCTGTTCATGGACATCCAGAATAGAAGTTTCAAAA(SEQ ID NO.:49)
野生型RAL1蛋白和RAL1基因
如本文所用，野生型RAL1蛋白是指天然存在的、来源于植物(较佳地来自拟南芥、水稻、玉米、大麦、芸薹属、大豆、或类似植物)、未经过人工改造的RAL1蛋白，负调控AtALMT1表达。其核苷酸可以通过基因工程技术来获得，如基因组测序、聚合酶链式反应(PCR)等，其氨基酸序列可由核苷酸序列推导而得到。
在另一优选例中，所述RAL1蛋白来源于拟南芥，氨基酸序列如SEQ ID NO.:50所示。
MSTSPSILSVLSEDLLVRVYECLDPPCRKTWRLISKDFLRVDSLTRTTIRILRVEFLPTLLFKYPNLSSLDLSVCPKLDDDVVLRLALDGAISTLGIKSLNLSRSTAVRARGLETLARMCHALERVDVSHCWGFGDREAAALSSATGLRELKMDKCLSLSDVGLARIVVGCSNLNKISLKWCMEISDLGIDLLCKICKGLKSLDVSYLKITNDSIRSIALLVKLEVLDMVSCPLIDDGGLQFLENGSPSLQEVDVTRCDRVSLSGLISIVRGHPDIQLLKASHCVSEVSGSFLKYIKGLKHLKTIWIDGAHVSDSSLVSLSSSCRSLMEIGLSRCVDVTDIGMISLARNCLNLKTLNLACCGFVTDVAISAVAQSCRNLGTLKLESCHLITEKGLQSLGCYSMLVQELDLTDCYGVNDRGLEYISKCSNLQRLKLGLCTNISDKGIFHIGSKCSKLLELDLYRCAGFGDDGLAALSRGCKSLNRLILSYCCELTDTGVEQIRQLELLSHLELRGLKNITGVGLAAIASGCKKLGYLDVKLCENIDDSGFWALAYFSKNLRQINLCNCSVSDTALCMLMSNLSRVQDVDLVHLSRVTVEGFEFALRACCNRLKKLKLLAPLRFLLSSELLETLHARGCRIRWD(SEQ ID NO.:50)
在另一优选例中，所述RAL1蛋白来源于水稻，氨基酸序列如SEQ ID NO.:51所示。
MSEEVQRYGGGGGGGGGGVAALSLDLLGQVLDRVREPRDRKACRLVSRAFARAEAAHRRALRVLRREPLARLLRAFRALERLDLSACASLDDASLAAALSGADLAGVRRVCLARASGVGWRGLDALVAACPRLEAVDLSHCVGAGDREAAALAAATGLRELSLEKCLGVTDMGLAKVVVGCPRLEKLSLKWCREISDIGIDLLSKKCHELRSLDISYLKVGNESLRSISSLEKLEELAMVCCSCIDDDGLELLGKGSNSLQSVDVSRCDHVTSQGLASLIDGHNFLQKLNAADSLHEMRQSFLSNLAKLKDTLTVLRLDGLEVSSSVLLAIGGCNNLVEIGLSKCNGVTDEGISSLVTQCSHLRVIDLTCCNLLTNNALDSIAENCKMVEHLRLESCSSISEKGLEQIATSCPNLKEIDLTDCGVNDAALQHLAKCSELLVLKLGLCSSISDKGLAFISSSCGKLIELDLYRCNSITDDGLAALANGCKKIKMLNLCYCNKITDSGLGHLGSLEELTNLELRCLVRITGIGISSVAIGCKNLIEIDLKRCYSVDDAGLWALARYALNLRQLTISYCQVTGLGLCHLLSSLRCLQDVKMVHLSWVSIEGFEMALRAACGRLKKLKMLSGLKSVLSPELLQMLQACGCRIRWVNKPLVYKD(SEQ ID NO.:51)
在另一优选例中，所述RAL1蛋白来源于玉米，氨基酸序列如SEQ ID NO.:52所示。
MSREAQKLDCAAGAGGIGVLSLDLLGQVLEHLREPRDRKTCRLVSRAFERAEAAHRRALRVLRREPLPRLLRAFPALERLDLSACASLDDASLAAAVADAGGGLAGLRSVCLARANGVGWRGLEALVAACPKLAAVDLSHCVTAGDREAAALAAASELRDLRLDKCLAVTDMGLAKVAVGCPKLEKLSLKWCREISDIGIDLLAKKCPELRSLNISYLKVGNGSLGSISSLERLEELAMVCCSGIDDEGLELLSKGSDSLQSVDVSRCDHVTSEGLASLIDGRNFLQKLYAADCLHEIGQRFLSKLARLKETLTLLKLDGLEVSDSLLQAIGESCNKLVEIGLSKCSGVTDGGISSLVARCSDLRTIDLTCCNLITNNALDSIADNCKMLECLRLESCSLINEKGLERITTCCPNLKEIDLTDCGVDDAALQHLAKCSELRILKLGLCSSISDRGIAFISSNCGKLVELDLYRCNSITDDGLAALANGCKRIKLLNLCYCNKITDTGLGHLGSLEELTNLELRCLVRVTGIGISSVAIGCKNLIELDLKRCYSVDDAGLWALARYALNLRQLTISYCQVTGLGLCHLLSSLRCLQDIKMVHLSWVSIEGFEMALRAACGRLKKLKMLCGLKTVLSPELLQMLQACGCRIRWVNKPLVYKD(SEQ ID NO.:52)
在另一优选例中，所述RAL1蛋白来源于大麦，氨基酸序列如SEQ ID NO.:53所示。
MSEEEAQRYGGGTGGGGVGALSVDLLGQVLDRVLERRDRKACRLVSRAFARAEAAHRRALRVLRREPLPRLLRAFPALERLDLSACASLDDASLAAALAGADLGTVRQVCLARASGVGWRGLEALVAACPRLEAVDLSHCVGAGDREAAALAAASGLRELNLEKCLGVTDMGLAKVAVGCPRLETLSFKWCREISDIGVDLLVKKCRDLRSLDISYLKVSNESLRSISTLEKLEELAMVACSCIDDEGLELLSRGSNSLQSVDVSRCNHVTSQGLASLIDGHSFLQKLNAADSLHEIGQNFLSKLVTLKATLTVLRLDGFEVSSSLLSAIGEGCTNLVEIGLSKCNGVTDEGISSLVARCSYLRKIDLTCCNLVTNDSLDSIADNCKMLECLRLESCSSINEKGLERIASCCPNLKEIDLTDCGVNDEALHHLAKCSELLILKLGLSSSISDKGLGFISSKCGKLIELDLYRCSSITDDGLAALANGCKKIKLLNLCYCNKITDSGLSHLGALEELTNLELRCLVRITGIGISSVVIGCKSLVELDLKRCYSVNDSGLWALARYALNLRQLTISYCQVTGLGLCHLLSSLRCLQDVKMVHLSWVSIEGFEMALRAACGRLKKLKILGGLKSVLSPDLLQLLQACGCRIRWVNKPLVYKDAI(SEQ ID NO.:53)
在另一优选例中，所述RAL1蛋白来源于芸薹属，氨基酸序列如SEQ ID NO.:54所示。
MPLSPSILSVLSEDLLVRVYGFLDPPCRKKWRLVSKEFHRVDSLSRTSIRILRVEFLPALLSNYPHLSSLDLSVCPKLDDDVVLRLASYGAVSIKSLNLSRATALRARGLETLARLCRGLERVDVSHCWGFGDREAAALSVAAGLREVRLDKCLSLSDVGLARIVLGCSNLSKISLKWCMEISDLGIDLLCKKCKDLKSLDVSYLKITNDSIRSIALLPKLEVLEMVNCPLVDDDGLQYLENGCPSLQEIDVTRCERVSLSGVVSIVRGHPDLQHLKASHCVSEVSLSFLHNIKALKHLKTLWIDGARVSDSSLLTLSSSCRPLTDIGVSKCVGVTDIGITGLARNCINLKTLNLACCGFVTDAAISAVAQSCRNLETLKLESCHMITEKGLQSLGCYSKHLQELDLTDCYGVNDRGLEYISKCSNLLRLKLGLCTNISDKGMFHIGSKCSKLLELDLYRCGGFGDDGLAAISRGCKSLNRLIISYCGELTDTGVEQIRQLEHLSHLELRGLKNITGAGLAAVACGCKKLDYLDLKKCENIDDSGFWALAYFARNLRQINLCYCSVSDTALCMLMSNLSRVQDVDLVNLNRVTVEGSEFALRACCNRLKKLKLFAPLRFLLSSELLEMLHARGCRIRWD(SEQ ID NO.:54)
在另一优选例中，所述RAL1蛋白来源于大豆，氨基酸序列如SEQ ID NO.:55所示。
MLSESVFCLLTEDLLIRVLEKLGPDRKPWRLVCKEFLRVESSTRKKIRILRIEFLLGLLEKFCNIETLDLSMCPRIEDGAVSVVLSQGSASWTRGLRRLVLSRATGLGHVGLEMLIRACPMLEAVDVSHCWGYGDREAAALSCAARLRELNMDKCLGVTDIGLAKIAVGCGKLERLSLKWCLEISDLGIDLLCKKCLDLKFLDVSYLKVTSESLRSIASLLKLEVFVMVGCSLVDDVGLRFLEKGCPLLKAIDVSRCDCVSSSGLISVISGHGGLEQLDAGYCLSELSAPLVKCLENLKQLRIIRIDGVRVSDFILQTIGTNCKSLVELGLSKCVGVTNKGIVQLVSGCGYLKILDLTCCRFISDAAISTIADSCPDLVCLKLESCDMVTENCLYQLGLNCSLLKELDLTDCSGVDDIALRYLSRCSELVRLKLGLCTNISDIGLAHIACNCPKMTELDLYRCVRIGDDGLAALTSGCKGLTNLNLSYCNRITDRGLEYISHLGELSDLELRGLSNITSIGIKAVAISCKRLADLDLKHCEKIDDSGFWALAFYSQNLRQINMSYCIVSDMVLCMLMGNLKRLQDAKLVCLSKVSVKGLEVALRACCGRIKKVKLQRSLRFSLSSEMLETMHARGCKIRWD(SEQ ID NO.:55)
如本文所用，术语“本发明RAL1基因”、“RAL1基因”可以互换使用。
在本发明中，RAL1的基因包括基因组基因、cDNA序列、mRNA序列。
在本发明中，所述RAL1基因来源于拟南芥(AT5G27920)，核酸序列如SEQ ID NO.:56所示。
CTTTCTTTATTTTATTTACCTTTTACCAAAGTTACACTTCTACCCCTATTTTTCTTCAATAAGAGATGGAAGAGCAAGGGCAATTAAGTAATTTGACAATATCCTTCTCCTTCAAGACTCTCTCTCTCCCACAGAAAACAAACTGTTTGTTGTTAATAACTGTGGGTTTTTTCCAAAATCCTCAAAGAGAGACTATACTTCTCTCGGATCCTTCCTGATTTCAAAATTTCTTCAACCCACCAGCAGCAGCAGCAGATGAAGAAGGTTAAACAGATTCGTGTCTTAAAGCCTTTCGATCTTCTCTCGGAAGAGCTCGTCTTTATCATCCTTGACCTCATCTCTCCCAACCCTTCCGATCTCAAATCCTTCTCTCTTACTTGCAAATCTTTCTACCAGCTCGAGTCCAAGCACCGCGGATCCTTAAAACCTCTCCGCTCCGACTATCTCCCTCGCATCTTGACTCGTTACCGGAACACCACCGATCTCGATCTTACCTTCTGCCCGCGTGTCACTGACTACGCGCTTAGCGTCGTTGGCTGTCTCTCCGGACCTACGCTTCGCTCCCTCGACCTCTCGCGCTCTGGCTCCTTCTCCGCCGCGGGACTACTGCGATTGGCCCTCAAATGTGTCAATTTAGTCGAGATTGACCTGTCCAATGCGACGGAGATGAGAGACGCCGATGCTGCGGTGGTGGCGGAGGCGAGGAGTCTGGAGAGGCTGAAGCTGGGCAGATGCAAGATGCTGACGGACATGGGAATCGGATGTATAGCAGTTGGATGTAAGAAGCTCAATACGGTTAGCTTGAAATGGTGTGTTGGCGTCGGAGATTTAGGGGTTGGCTTGCTTGCCGTCAAATGCAAGGACATTCGCACCTTAGACCTCTCCTACTTGCCGATCACAGGAAAGTGTTTACATGACATTCTGAAACTTCAACACCTTGAAGAACTTCTTCTAGAAGGGTGCTTTGGAGTAGATGATGACAGTCTTAAATCACTCAGACATGATTGCAAGTCATTGAAGAAGCTTGATGCATCCAGCTGCCAGAATTTAACTCATAGAGGTTTAACCTCACTTTTAAGCGGGGCAGGATATCTTCAGCGACTTGATCTATCACACTGTTCTTCTGTGATATCATTGGATTTTGCGAGTAGCTTAAAGAAGGTTTCAGCATTACAGTCGATCAGGTTGGATGGTTGTTCTGTTACGCCTGATGGTTTGAAGGCGATAGGCACATTGTGCAATTCCCTGAAAGAGGTTAGCCTAAGCAAATGCGTGAGCGTAACTGATGAAGGTCTTTCTTCTCTAGTAATGAAACTGAAAGACCTCAGAAAACTTGACATCACATGTTGCCGGAAACTAAGTAGAGTTTCAATCACCCAAATCGCCAATTCGTGTCCTTTACTAGTCTCTTTGAAGATGGAGTCTTGTTCTCTTGTTTCCAGAGAAGCCTTTTGGTTGATCGGACAAAAGTGTCGGCTACTTGAAGAGCTTGACTTAACTGACAACGAGATTGATGATGAAGGACTGAAATCCATATCTAGTTGTCTGAGTCTTTCCTCGTTAAAGCTGGGAATTTGTCTTAACATAACAGACAAAGGGCTCTCGTACATCGGGATGGGCTGTTCAAATCTCCGTGAACTTGATCTCTATAGGTCAGTGGGAATAACAGACGTAGGCATCTCCACAATTGCCCAAGGCTGCATTCATCTGGAAACAATAAACATTTCATACTGCCAAGACATAACAGACAAGTCCCTGGTTTCATTGTCCAAATGCTCGTTGTTACAAACATTCGAGAGCAGGGGATGTCCTAACATCACGTCCCAAGGACTTGCAGCCATTGCTGTTCGGTGCAAGCGACTCGCCAAGGTTGACTTGAAGAAGTGCCCATCCATCAATGATGCGGGGTTGCTCGCTCTGGCTCACTTCTCTCAGAATCTCAAACAGATAAACGTGTCAGACACAGCTGTGACTGAAGTGGGACTTCTCTCCCTAGCCAACATAGGGTGTTTACAGAACATAGCGGTTGTGAACTCGAGTGGTTTAAGACCGAGCGGAGTAGCAGCAGCATTGCTGGGGTGTGGAGGATTAAGGAAAGCGAAACTACATGCGTCCCTAAGATCACTGCTTCCTCTTTCTCTAATCCACCACTTGGAAGCTCGTGGTTGTGCGTTCCTCTGGAAAGACAATACCCTTCAGGCGGAGTTAGATCCCAAGTACTGGAAGCAACAGCTGGAAGAGATGGCGCCTTAAATTAAAAGTGAGAAGAAACATTCTGAAATGGGAAAGAGGAGTTCCTATGGGAGCCAGCAGACAGGCCCTGTTTTGGGCCCAGTGTGGATTAGCTGGAACAATTTTGGTCTCTTTTGTGTTGTTGTTGACGGCGCGTGTTCTAACAACCCCACACAACCTTACATTATAAGTCTAGTCACATGGTGGGTGACATGGTACCGTTGTATATGTAGTTTTTGTTTCTTTTTTTTTTTTTTTTGGTTGGGGAGCCGAAATTAACGGACGTAACAGAGTCACAAGGGGATGCCTTCTCTGTGCCTTTTTGACTTTTTCCTCCTTTCTTTTTTTTCTGTAATCATATGAGTTTTATGTAATTTAATGCCTCATCAACTTGCCTGGATAGGGCCGGCCTTTCCACGTCACCTTAGTCGCGTTTTGCGGTAAAAAAAGTAAAAAGAAAGGCCGTGACTCAGTAGGGCCCATTACTGGTCCAGTCCAGGCTCTCACCGTCTGTACAAAAATAGCGAGTCAGCGACTCGGTGTGACAGCAACAACCCTCTCTCGTTGAAAAACGGCTAATGCGCCCGACACTTCCATCCTCATATTCCATTACAAAAGAAATCCAGCTATGTAGTATCAAACTACCGAAAACATACACATGTCAATCAAGTCCAAAAAGTATCACCGTCAAATGAGTGATTCAGATTTTGTTTGCTCATGAAAGATAAACCAAATGATTACTTCCTTAATCACCTGCCCCTTGTTTTCCATTTTTTAATTACATAATGGAACCCCCCATTATTAAAACATGATCATTTTCTTTCGTAATAATTAAACTTCCCAACTAAATGCCTCTTAATA(SEQ ID NO.:56)
在本发明中，所述RAL1基因来源于水稻(LOC_Os12g36670)，核酸序列如SEQ IDNO.:57所示。
ATGAGCGAGGAGGTGCAGAGGTATGGAGGTGGTGGGGGTGGGGGAGGAGGTGGGGTGGCGGCGCTGTCGCTGGATTTGCTCGGCCAGGTGCTCGACCGGGTGCGGGAGCCGCGGGACCGCAAGGCGTGCAGGCTCGTGAGCCGCGCCTTCGCCCGCGCCGAGGCCGCGCACCGCCGCGCGCTGCGGGTGCTCCGCCGCGAGCCCCTGGCGCGCCTCCTCCGCGCGTTCCGGGCGCTGGAGCGGCTCGACCTCTCCGCCTGCGCCTCCCTCGACGACGCCTCCCTCGCCGCCGCGCTCTCCGGCGCGGATCTCGCCGGGGTGCGCCGGGTCTGCCTCGCCCGCGCCAGCGGCGTCGGGTGGCGCGGCCTCGACGCGCTCGTGGCGGCGTGCCCGAGGCTGGAGGCCGTCGACCTGTCGCACTGCGTCGGCGCCGGCGACCGCGAGGCCGCCGCGCTGGCCGCGGCGACGGGGCTGAGGGAATTGAGCCTCGAGAAGTGCCTCGGCGTCACGGACATGGGGCTCGCCAAGGTGGTGGTCGGGTGCCCGAGGCTGGAGAAGCTGAGCCTCAAGTGGTGCCGCGAGATCTCCGACATCGGCATCGATTTGCTCTCCAAGAAGTGCCACGAGCTCCGGAGCCTCGACATCTCCTACCTCAAGGTTGGAAATGAATCCCTTAGATCAATATCCTCACTTGAGAAACTTGAGGAGTTGGCAATGGTTTGTTGCTCATGCATAGATGATGATGGCCTGGAATTACTAGGCAAGGGGAGCAACTCACTGCAGAGCGTTGATGTTTCAAGATGTGATCATGTAACCTCCCAGGGATTAGCTTCACTCATAGATGGTCACAATTTTCTCCAGAAGTTAAATGCTGCTGATAGTTTGCATGAGATGAGACAGTCGTTTCTGTCCAACTTGGCAAAACTGAAGGATACCTTGACAGTGCTTAGACTTGATGGTCTTGAAGTCTCATCCTCTGTTCTTCTGGCCATTGGTGGTTGTAATAACTTGGTCGAGATTGGCCTTAGCAAATGCAATGGCGTTACAGATGAAGGAATCTCTTCACTTGTAACTCAATGCAGCCACTTAAGGGTTATTGATCTCACATGCTGTAACCTCCTTACCAACAATGCCCTTGATTCAATAGCTGAGAACTGTAAGATGGTTGAACATCTCCGTTTGGAATCCTGTTCTTCCATAAGCGAAAAGGGACTGGAGCAGATTGCAACCTCCTGCCCCAATCTAAAGGAGATAGACCTCACTGACTGTGGAGTGAATGATGCAGCATTGCAGCACTTGGCCAAGTGCTCTGAACTGCTTGTACTGAAATTAGGCCTGTGCTCAAGTATTTCTGACAAAGGTCTTGCTTTTATCAGTTCAAGCTGTGGAAAGCTGATTGAGCTTGATCTCTATCGCTGCAATTCTATTACCGATGATGGGCTGGCAGCTTTAGCTAATGGCTGCAAGAAGATTAAGATGCTAAACCTATGCTACTGCAACAAGATTACCGACAGTGGTTTGGGCCACCTAGGCTCTCTAGAGGAGCTCACAAACCTTGAACTGAGGTGCTTGGTCCGTATAACAGGTATTGGAATCTCATCAGTTGCCATCGGCTGCAAGAACCTGATAGAGATAGACTTGAAGCGTTGCTATTCTGTCGATGATGCTGGCTTGTGGGCTCTTGCCCGATATGCACTAAACCTTAGACAGCTTACTATATCATACTGCCAAGTCACTGGCCTGGGCCTGTGTCACCTGTTAAGCTCCCTGAGGTGCCTCCAGGATGTTAAGATGGTACACCTCTCATGGGTCTCTATAGAAGGGTTCGAGATGGCACTGAGAGCGGCTTGCGGGAGGCTGAAGAAACTGAAGATGCTGAGTGGGCTGAAGTCTGTGCTGTCTCCTGAGCTGCTCCAGATGCTGCAGGCCTGCGGCTGCCGCATCCGTTGGGTCAACAAGCCTCTTGTCTACAAGGACTAAACCTGCTCTCATATCATCATCTGTGCAGTGTTAATATCCTCGGATCATACACCATGGAGCCCTTACCAAGTCTAGCATGCTTACAAGCCATGTTAGATACCCGCAATAATCGTCAATTTTCATACCCAAGATGTACTGACGATGGTGTCTCTGCATTGCTGCAGTGCCATCCTTATGTTTGGCAACTCCTAGACCAATGTTGTCATCTTCAGATTAAAATCCAACATTTGCAAACATGAGGCATCGAAACAGTTATGTTCTGAGCAAGTGATCCTTGTACCAGACTGCAATGAAATGCTCTACACTTTCAATTGGTATATGCAAAGAACAATGGCATGTTTGCCTTTGTCATTGCTCCAACTCCAGGCTTGCTGACCGATGCATCTTTTAGAGTTTAAGAACAGCTTTAGATCGCAGAAAAACTCTTCCTTGATGCTCCAGGATCTGGGCTGGGACACTGGTTTCATGGTTGTCTGTATTGTATGACTGGTGGACCCGTCCTTTTTTTTTTACCTTGATTACAATAATCTCGATGTACTCATTCAGGCAGAGATTTGAAGTAATGTATTGAATCAGTTTTTAT(SEQ ID NO.:57)
在本发明中，所述RAL1基因来源于玉米(XM_008664387.2预测:Zea mays F-box/LRR-repeat protein 3(LOC103640946))，核酸序列如SEQ ID NO.:58所示。
CGGCATCACCTATCCACATCTTTCTCCCTCTCTCTCTCTCTCCTCTTCCGTCCCTCCTCTCTCCCTCTCTACGCCACGCCTCCACCTCCACACCTGCACGCCTCTCGCTCTCTCTCCTCACCTGTCGAGCTGCCCACAGCCCGTACGTACCTGCCCCCAGTCCCAGTCCCCGCCGCCCCGCCTGCCCGACCCGCGGCTTATCCACCACGTCCGCCGCTGGGCTGGATCGATCGGGACCGGTATCGCGCCGCCGCCGCTGCCCTCGGCACTCGCGGGATCCTGTTCCTACCATGCAGCAGCGCTGCGCCCTTGCCCGACCGCGCCGGCCCGCCGAACCGCGCGTTCCGCTCCCCGACGATCACTCCCTCGTCGCCGTCTTCTCCTTCCTCTTCATCCCCACCTAAATCAACCTCCTCGCCGCGAAATTCTGCTACAATTTCTTCATCTTCCCTTCCCGCCGGGAGCGGACGGATCGCCGCTTCCTCGGCCGGCGGGATGAGCCGGGAGGCGCAGAAACTCGACTGCGCCGCCGGCGCCGGGGGGATCGGGGTCCTGTCGCTGGACCTACTGGGCCAGGTGCTGGAACACCTGCGGGAGCCCCGGGACCGCAAGACGTGCCGCCTCGTCAGCCGCGCCTTCGAGCGCGCCGAGGCCGCGCACCGCCGCGCGCTTCGGGTGCTCCGACGCGAGCCGCTCCCGCGCCTGCTCCGCGCGTTCCCGGCGCTCGAGCGGCTCGACCTCTCCGCCTGCGCCTCGCTCGACGACGCCTCCCTCGCCGCGGCCGTCGCCGACGCCGGCGGAGGGCTCGCCGGCCTCCGCAGCGTGTGCCTCGCGCGGGCCAATGGTGTCGGCTGGCGCGGCCTCGAGGCGCTCGTCGCGGCCTGCCCCAAGCTCGCGGCCGTCGACCTGTCGCACTGCGTCACCGCCGGGGACCGCGAGGCCGCCGCGTTGGCGGCGGCGTCCGAGCTCAGGGACCTGAGGCTGGACAAATGCCTTGCCGTCACCGACATGGGGCTCGCCAAGGTGGCTGTTGGGTGCCCCAAGCTGGAGAAGCTCAGCCTCAAGTGGTGCCGTGAGATCTCTGACATTGGAATTGATCTGCTGGCCAAGAAGTGCCCTGAGCTCCGCAGCCTCAACATATCCTACCTCAAGGTGGGCAATGGATCCCTTGGATCAATTTCGTCACTTGAGAGGCTTGAGGAATTGGCAATGGTTTGTTGTTCAGGTATAGATGACGAAGGCTTGGAATTGCTGAGCAAGGGGAGCGATTCGCTGCAGAGTGTTGATGTGTCAAGATGTGATCATGTGACTTCCGAGGGGTTAGCTTCACTCATAGATGGTCGCAATTTTCTTCAGAAGTTATATGCTGCAGATTGTTTGCATGAGATAGGACAGCGTTTTCTATCCAAGTTGGCAAGACTGAAGGAAACCTTGACATTGCTGAAACTCGACGGTCTTGAGGTCTCGGACTCTCTTCTTCAAGCCATTGGTGAAAGCTGTAACAAATTGGTTGAGATTGGGCTTAGCAAATGCAGTGGTGTTACTGATGGAGGAATCTCATCTCTTGTAGCTCGGTGTAGTGACCTAAGAACAATTGATCTCACATGCTGCAATCTCATTACCAACAATGCGCTTGATTCAATAGCTGACAACTGTAAGATGCTTGAATGTTTGCGGTTGGAATCATGCTCTTTGATAAATGAGAAGGGACTAGAGCGAATTACAACTTGTTGCCCCAACCTTAAGGAGATAGACCTCACTGACTGCGGAGTAGATGATGCAGCATTGCAGCACTTGGCTAAATGCTCTGAATTGCGAATATTGAAATTAGGCCTATGCTCAAGTATTTCTGACAGAGGCATTGCATTTATCAGTTCGAATTGTGGAAAGCTCGTGGAGCTTGATCTCTACCGGTGCAACTCTATTACTGATGATGGGTTGGCAGCTTTAGCAAATGGGTGCAAGAGGATTAAGTTACTGAACTTGTGTTACTGCAACAAGATCACTGATACTGGTTTGGGTCACCTAGGCTCCCTGGAGGAGCTCACAAACCTTGAACTGAGGTGCTTGGTCCGCGTAACAGGCATTGGGATCTCCTCAGTTGCAATCGGATGCAAGAACCTGATAGAGCTGGACTTGAAACGATGCTATTCGGTTGATGACGCTGGCCTGTGGGCCCTTGCTCGTTATGCTTTGAACCTTAGACAGCTTACGATATCGTACTGCCAAGTCACGGGGTTGGGCCTGTGCCACCTGCTGAGCTCCCTGCGATGCCTCCAGGACATTAAGATGGTGCACCTCTCATGGGTCTCAATAGAAGGGTTTGAGATGGCTCTGCGAGCAGCCTGCGGGAGGCTGAAGAAGCTGAAGATGCTCTGCGGGCTGAAGACCGTGCTCTCCCCTGAGCTCCTCCAGATGCTGCAGGCTTGTGGCTGCCGAATAAGATGGGTCAACAAGCCTCTTGTCTACAAGGACTAGACAGACTCGTGTTCCTCATTGTGTGTGCAGTGTCAGCATCAGCATGTATTGTCAAGATCTTGCAGGTTTGCCCTGGCTCACGTTGTGAGTCCGCAATAATCGTTGGGGGCGTAAGCTCCCGTCCCCCAGATGTGGTTATGGTGCCTTTGGGGCACTTCTTGCGCCATTTGTCACTCTCTGCTCCGGTGTATCTGTGTATGCAAACGGAGGCACCGGTAATGTTCATGTGTATATAGCGTGCAGTAGAATGATCCCATTTTATGGGATTAGTTAGTGTGTAATTGTTACCTCATTTCGCATGATTCGAATCTTGAGATGAAAGAATCATAAGGGGTATGATCGATGCATTGCATTCACCGGTTCTTA(SEQ ID NO.:58)
在本发明中，所述RAL1基因来源于大麦(AK358574.1Hordeum vulgare subsp.预测蛋白的vulgare mRNA,全部CDS,clone:NIASHv1079C11)，核酸序列如SEQ ID NO.:59所示。
GGGGTGCTACCTATCCACATCTTTCTCCTCCCATCCTCCCTCCCTCTCCCCACTCCCCACCCATCGACCCACCTTCCTCCCTCCGTACCTTCGCCACCACCGGCCGTCGCCTTGCCGCTCCTCCGCCGCCCGGATCAGGAACGATCGCACCGTGCGGCCGCCTCCCGCCCTGCGCGCGGATCCTACCATGCTGAGGCGCTGCGCCCCATACCGACCCCGCAGGGCCGCCGCCGTACCGCGCCTCCCGATCCCCGGCGGCCACCCCTACCTCGTCGCCCTCTCCTTCCTCTTCATCCCGACCTAAGCTCCACGCCTCGCCGACAGGCCGGCCCTCGCCGCCGGAGCTGCCCGGTGGAATCGTCAGCCGCGATGAGCGAGGAGGAGGCGCAGAGGTACGGCGGCGGGACCGGCGGCGGCGGCGTCGGTGCGCTGTCCGTGGATCTGCTCGGCCAGGTGCTCGATCGCGTGCTGGAGCGGCGGGACCGCAAGGCCTGCCGCCTCGTCAGCCGCGCCTTCGCGCGCGCTGAGGCCGCGCACCGCCGGGCCCTCCGGGTGCTCCGCCGGGAGCCGCTCCCTCGCCTGCTCCGCGCCTTCCCGGCGCTCGAGCGCCTCGATCTCTCAGCCTGTGCCTCGCTCGACGACGCGTCTCTTGCAGCCGCTTTAGCCGGCGCGGACCTCGGCACCGTCCGACAGGTCTGCCTGGCGCGGGCCAGCGGAGTGGGCTGGCGCGGGCTGGAAGCCCTCGTGGCCGCCTGCCCCAGGCTCGAGGCTGTCGACCTGTCGCACTGCGTCGGTGCTGGGGATAGGGAGGCTGCCGCCCTGGCCGCCGCCTCTGGGCTGAGGGAGCTAAATCTGGAAAAGTGCCTTGGGGTCACTGATATGGGGCTCGCCAAGGTAGCCGTGGGCTGCCCCAGACTGGAGACTCTGAGCTTCAAGTGGTGCCGTGAAATCTCTGACATCGGCGTCGATCTGCTTGTCAAAAAGTGCCGCGACCTCCGCAGCCTTGACATCTCCTACCTAAAGGTGAGCAATGAGTCCCTTAGATCAATATCGACTCTTGAGAAGCTAGAGGAGTTGGCCATGGTTGCTTGCTCATGTATAGATGATGAAGGCCTGGAATTGCTTAGCAGAGGAAGCAATTCATTGCAGAGTGTTGATGTCTCAAGATGCAATCACGTGACTTCCCAGGGGTTAGCTTCACTGATAGATGGTCACAGTTTTCTCCAGAAGTTAAATGCCGCAGATAGTTTGCATGAGATTGGACAGAATTTTCTATCCAAGTTGGTAACACTGAAGGCAACCTTGACCGTGTTGAGACTTGACGGCTTTGAAGTGTCATCCTCTCTTCTTTCAGCGATTGGTGAAGGTTGTACCAACTTGGTTGAGATTGGACTAAGCAAATGCAACGGTGTTACAGATGAAGGCATCTCTTCGCTTGTAGCTCGCTGTAGCTACCTAAGGAAAATTGATCTCACATGCTGCAATCTAGTCACAAACGATTCCCTTGATTCAATAGCTGACAACTGTAAGATGCTTGAATGCCTCCGGTTGGAGTCCTGCTCTTCTATAAACGAGAAAGGACTAGAGAGAATTGCAAGCTGTTGCCCCAATCTAAAGGAGATAGATCTCACTGATTGTGGAGTGAACGACGAAGCGTTGCATCATTTGGCGAAGTGCTCTGAACTGCTGATATTGAAATTAGGCCTGAGCTCAAGTATTTCGGACAAAGGCCTTGGTTTTATTAGTTCAAAGTGTGGGAAGCTCATTGAACTTGACCTCTATCGCTGCAGTTCTATCACTGATGATGGGCTGGCAGCCTTAGCCAACGGCTGCAAGAAAATTAAGCTGCTGAACCTTTGTTACTGCAACAAGATAACTGATAGTGGTTTGAGCCACCTGGGCGCTCTTGAGGAGCTCACAAACCTTGAGCTGAGGTGCCTCGTTCGCATTACAGGCATCGGAATTTCTTCCGTTGTCATTGGCTGTAAGAGCCTGGTAGAACTTGACTTGAAGCGCTGCTATTCTGTCAATGATTCTGGGCTATGGGCTCTTGCCCGATATGCTCTAAACCTTAGACAGCTCACCATATCATACTGCCAAGTTACTGGCCTAGGCTTGTGCCACCTGCTTAGCTCCTTGAGGTGCCTCCAGGACGTGAAGATGGTGCACCTGTCATGGGTTTCCATAGAAGGGTTCGAGATGGCTCTGCGAGCCGCTTGCGGGAGGCTGAAGAAGCTGAAGATACTCGGCGGTTTGAAGTCCGTGCTATCCCCTGACCTGCTCCAGCTTCTGCAAGCCTGCGGCTGCCGCATCAGATGGGTCAACAAGCCTCTTGTCTACAAGGATGCCATCTGATCTGAGAAGTACCATATTGTTCATCCTTTCGGCAAGTTTGTCATCGCTGCGTAGCCCTGTTAGAAAATTCACAATAACTACACGCCTCGTCAATGCCATGCCTAAGGTGTGGTCAAGATCATGTCTGTTTGAGATGTCGAGTAAACATGGCAGCTGCTGTCGAATATATGTCATGTACAGTGAAGCCTTTTTTTTTGGACGGGATGTACAGTGAAGCCCTTTTGCATAGCAGAGTTGTGCAACTGGAGTTCTCTACTTGATGTGAAGGAACCTGAAAAATATGCTGT(SEQ IDNO.:59)
在本发明中，所述RAL1基因来源于芸薹属(XM_009113489.2预测:Brassica rapaF-box/LRR-repeat protein 3-like(LOC103837159))，核酸序列如SEQ ID NO.:60所示。
GGGAAACAATTGAAGTAAAGAGAGAGAGGTTCGGTTTTGTGTTTCCAACCGGAAAAAAAACCCCGAAGGTTTGACGATGAACCCGAATCTAATAACCCGTAACCCAATTCGGATCCTGGATCAACCGGTTCACCACTCTCTCCTCTATCTCCGAGCTGTCTTTCTCTTCATCCCGACTTAAAAGATCCGTACTTTTTTTTTTTTGAAACTTTCCGACCAAACTAAAAGTAAACACATACTTGTCTTTTTTTTTCTTGTTCTGTCGCGAAATGCCGCTGTCTCCATCCATTCTATCCGTTCTGTCGGAAGATCTTCTAGTTCGTGTCTACGGGTTCCTAGACCCGCCCTGTCGGAAAAAATGGCGACTCGTCAGCAAAGAGTTTCACCGAGTCGACTCACTGAGCCGCACATCGATCCGAATCCTCCGAGTCGAGTTCCTCCCCGCGCTTCTCTCCAACTACCCTCACCTCTCCTCCCTCGACCTCTCCGTCTGCCCCAAACTCGACGACGACGTCGTTCTGCGCCTAGCGTCCTACGGCGCCGTTTCGATAAAGTCGCTGAACCTGAGCCGCGCCACCGCGCTCCGAGCGAGGGGACTGGAGACGCTGGCTCGCTTGTGCCGAGGCCTCGAGCGAGTCGACGTGTCTCACTGCTGGGGGTTCGGAGACAGGGAAGCGGCGGCGCTCTCCGTCGCGGCGGGGCTGAGGGAGGTGAGGTTGGACAAGTGCTTGAGCCTAAGCGACGTCGGATTGGCGAGGATCGTCCTCGGGTGTAGTAATCTGAGCAAGATTAGTTTGAAGTGGTGTATGGAGATCTCTGATCTAGGGATCGATCTTCTCTGTAAGAAATGCAAAGACTTGAAGTCTCTCGACGTCTCTTATCTTAAGATCACGAATGATTCGATCCGGTCCATAGCTTTGTTGCCAAAGCTCGAGGTTTTAGAGATGGTGAACTGTCCGTTGGTAGATGATGATGGGTTACAGTATCTTGAGAATGGTTGTCCTTCGTTACAGGAGATTGATGTCACAAGGTGTGAGCGTGTGAGTTTGTCTGGCGTTGTCTCCATTGTCAGAGGCCATCCTGATCTTCAACACCTGAAAGCCAGTCACTGTGTATCAGAAGTATCTCTGAGCTTCTTACATAACATCAAAGCTTTGAAGCATCTCAAGACTCTATGGATCGATGGAGCTCGTGTCTCTGACTCCTCTCTCTTAACCCTAAGCTCCAGCTGTAGACCCTTAACAGATATCGGAGTGAGCAAATGTGTGGGTGTGACGGATATTGGCATCACAGGACTAGCACGCAACTGCATAAACCTGAAAACCCTAAACCTAGCGTGCTGCGGGTTTGTGACTGATGCAGCCATCTCTGCGGTAGCTCAGTCTTGCCGCAATCTGGAGACTCTTAAGTTAGAGTCTTGTCATATGATAACCGAGAAAGGTCTTCAATCACTCGGATGTTACTCCAAGCATCTTCAAGAACTCGATCTTACCGACTGTTATGGCGTCAATGACAGAGGGCTAGAATATATCTCAAAGTGTTCGAATCTTCTAAGGTTGAAACTTGGCCTCTGCACAAATATCTCAGACAAAGGGATGTTTCATATCGGTTCCAAATGTTCCAAGCTTCTAGAACTTGATCTATACCGCTGTGGTGGTTTTGGAGATGACGGTTTAGCAGCTATATCCCGAGGTTGCAAGAGCTTGAACCGGCTCATTATATCGTACTGTGGTGAGCTAACAGACACAGGGGTTGAACAAATCCGCCAGCTTGAACATCTAAGCCATCTTGAACTTCGAGGGCTAAAGAATATAACCGGTGCTGGTCTAGCTGCAGTTGCGTGCGGCTGCAAGAAATTGGATTACTTGGACCTCAAGAAGTGCGAGAATATAGATGACTCAGGCTTCTGGGCGCTTGCTTACTTTGCAAGAAACCTAAGACAGATAAACTTGTGCTATTGCTCGGTTTCTGATACGGCTCTATGCATGTTAATGAGCAATCTAAGTCGGGTTCAAGACGTTGACTTAGTCAACCTGAACCGTGTGACAGTGGAAGGGTCTGAGTTTGCTCTAAGAGCCTGTTGCAATAGGCTCAAGAAGCTTAAACTTTTCGCTCCTCTCAGATTCTTGCTCTCATCTGAATTGCTTGAGATGCTTCATGCTCGTGGTTGCCGCATTAGATGGGACTGAAAGACGAAACTTTCTTCAATGGAACTTTACTAGTAACACTTTAACGTGTTCATATGTCTACTTGTTGTATCTATAAAAAATTCGACTATGTTTTTAAATTCGGTTTACCAATTATATGTCTACCGCTTTGGTATTATCTTCCAACATAAACAATAGTAGTTTTAGAAAACAAAAATATTATTTTGGTATTCTATGCAAAA(SEQ ID NO.:60)
在本发明中，所述RAL1基因来源于大豆(XM_003521631.4预测:Glycine max F-box/LRR-repeat protein 3(LOC100802904),transcript variant X1)，核酸序列如SEQID NO.:61所示。
TTTCAACAATTTTTCTCTCATGTCCAAGTTTTGTCCTGAGCAGGACAACTTAATTGGCGGTTCCCTTCTCGCCCTTGGATCTTTAATTGGTTGTTCCCTCCGCTCCAAGAAAAAAAAGGGCATTTATGGCAAAAAAGAGCAGCAGCATTCAACAAGTTGCGAGAGGAACACAGGACTCAATTCACATGGCCGTACCCGAAGAAAGCGAAAAGTGTGAAACACGCACCCTCTGAAATCTAAAATTCAATTTTCCCTTCCCTGACCCTGTTTCTTCTATTCACATTGTATTCTCCTTGTTTTTTCGCTTTTCAATTTTCCATTGAACTCAGACAAAAACAGAAAGAAAGGGGAAAAAAATGAACCCAGAGAAATCTCGTTGCAGGTTGCCACTTCGCACGCTCTCTAAACACACGCACCACCCTCTTCTCCACCTCCGCCTCCTTTTCCTCTTCGTTCCCACCTAAACTGTTTCCCTTCAGTTCCACGTCACATTAACAAACCTTTTTTTTTCTTAAAAAAAAAACTTTAGTAATTACGAAATTTCTGATACCTTAATGTTGTCTGAATCCGTTTTCTGCCTCTTGACCGAGGACCTGCTCATCCGGGTCCTCGAAAAGCTCGGGCCGGATCGGAAACCGTGGCGGCTGGTGTGCAAGGAGTTTCTCCGGGTCGAATCGTCGACCCGGAAGAAGATTCGGATCCTCCGAATCGAGTTTCTGCTTGGGTTGTTGGAGAAGTTCTGCAACATTGAGACGCTGGACCTGTCGATGTGTCCGCGGATCGAGGACGGAGCTGTGTCGGTTGTGCTGAGTCAGGGATCGGCGAGTTGGACTCGGGGACTGAGGAGACTCGTGCTGAGTCGCGCCACCGGGTTGGGGCATGTGGGCTTGGAGATGCTGATTCGGGCGTGTCCCATGTTGGAGGCCGTGGATGTGTCCCATTGTTGGGGGTATGGCGACAGAGAGGCTGCGGCGCTATCGTGCGCCGCGAGGTTGAGGGAACTCAACATGGATAAGTGTTTGGGAGTTACTGATATTGGGTTGGCCAAGATTGCTGTCGGGTGTGGGAAATTGGAGAGGCTGAGTTTGAAGTGGTGCTTGGAGATTTCTGATCTGGGGATTGATCTTCTTTGCAAAAAGTGCTTGGATTTGAAATTTCTCGACGTGTCATATCTCAAGGTAACAAGTGAATCTTTGAGATCAATAGCTTCTCTGTTAAAGCTTGAGGTTTTTGTTATGGTTGGCTGCTCTTTAGTGGATGACGTTGGATTGCGGTTTCTTGAAAAAGGGTGTCCACTGCTTAAGGCAATTGATGTATCAAGGTGTGATTGTGTTAGCTCTTCCGGTTTAATATCTGTAATTAGTGGACATGGAGGTCTTGAGCAGTTGGATGCAGGATATTGCCTCTCTGAGCTTTCAGCACCTCTTGTTAAATGCTTGGAGAATTTAAAGCAGCTGAGAATAATTAGAATTGATGGTGTTCGAGTTTCTGACTTTATCCTCCAGACAATTGGCACCAATTGCAAGTCTTTAGTGGAACTTGGTTTAAGCAAATGCGTTGGAGTGACCAACAAGGGAATTGTGCAGCTAGTATCTGGCTGTGGCTATTTGAAGATACTTGATTTGACTTGTTGTCGGTTCATATCTGATGCAGCAATCTCTACTATAGCAGACTCTTGTCCAGACCTTGTCTGTCTGAAGCTAGAATCTTGTGATATGGTGACTGAGAATTGTCTTTATCAACTTGGATTAAATTGCTCGCTTCTCAAAGAGCTTGATCTTACTGATTGCTCTGGTGTTGATGACATAGCTCTAAGATATCTATCAAGATGTTCAGAACTTGTAAGATTGAAATTAGGATTATGCACAAATATATCAGACATAGGATTGGCACACATTGCTTGTAACTGCCCAAAAATGACTGAACTTGATCTCTATCGATGTGTACGTATTGGAGATGATGGGCTAGCGGCACTAACGAGTGGATGCAAGGGGTTGACAAACCTCAACTTGTCATATTGCAATAGAATTACAGACAGAGGGTTGGAGTATATCAGCCATCTTGGTGAACTATCTGATCTGGAGTTGCGTGGGCTTTCTAATATCACAAGCATTGGTATAAAAGCAGTTGCAATAAGTTGCAAGAGATTGGCAGATTTAGATTTGAAACATTGCGAAAAAATTGATGATTCAGGTTTCTGGGCCCTTGCTTTTTATTCGCAAAACCTGCGGCAGATAAATATGAGCTACTGTATCGTGTCAGATATGGTGTTGTGCATGCTTATGGGTAACCTGAAACGCCTGCAAGATGCCAAACTGGTTTGTCTTTCTAAAGTGAGTGTAAAAGGATTGGAAGTTGCCCTTAGAGCTTGCTGTGGTCGGATTAAAAAGGTTAAACTGCAGAGGTCCCTCAGGTTCTCGCTTTCCTCTGAAATGCTCGAGACAATGCATGCACGAGGGTGCAAGATCAGATGGGATTAGCCAATTGTCACGCTATTAATCTGTTATACTTTCTTTTCTTGGAAGGGTGCTGCTTCATTAAGATCTTTTTTATTCAAAATTTTATATTTCTCTAGCATTTTCTTTTCTTTAAACTCTGTTACCAGATTTCTACGGAAGGTATTTTTTTCACCTTCTTAAGTTACATCATCTCCAATAAAGCATGAGGTTACTTATCTTCGAATTAAA(SEQ ID NO.:61)
本发明还提供了一种包括本发明的基因的重组载体。作为一种优选的方式，重组载体的启动子下游包含多克隆位点或至少一个酶切位点。当需要表达本发明目的基因时，将目的基因连接入适合的多克隆位点或酶切位点内，从而将目的基因与启动子可操作地连接。作为另一种优选方式，所述的重组载体包括(从5’到3’方向)：启动子，目的基因，和终止子。如果需要，所述的重组载体还可以包括选自下组的元件：3’多聚核苷酸化信号；非翻译核酸序列；转运和靶向核酸序列；抗性选择标记(二氢叶酸还原酶、新霉素抗性、潮霉素抗性以及绿色荧光蛋白等)；增强子；或操作子。
用于制备重组载体的方法是本领域普通技术人员所熟知的。表达载体可以是细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒或其他载体。总之，只要其能够在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都是可以被采用的。
本领域普通技术人员可以使用熟知的方法构建含有本发明所述的基因的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等。使用本发明的基因构建重组表达载体时，可在其转录起始核苷酸前加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，如花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子、泛素(Ubiquitin)基因启动子(pUbi)等，它们可单独使用或与其它的启动子结合使用。
包括本发明基因、表达盒或的载体可以用于转化适当的宿主细胞，以使宿主表达蛋白质。宿主细胞可以是原核细胞，如大肠杆菌，链霉菌属、农杆菌：或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高等真核细胞，如植物细胞。本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体和宿主细胞。用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物(如大肠杆菌)时，可以用CaCl2法处理，也可用电穿孔法进行。当宿主是真核生物，可选用如下的DNA转染方法：磷酸钙共沉淀法，常规机械方法(如显微注射、电穿孔、脂质体包装等)。转化植物也可使用农杆菌转化或基因枪转化等方法，例如叶盘法、幼胚转化法、花芽浸泡法等。对于转化的植物细胞、组织或器官可以用常规方法再生成植株，从而获得转基因的植物。
作为本发明的一种优选方式，制备转基因植物的方法是：将携带启动子和目的基因(两者可操作地连接)的载体转入农杆菌，农杆菌再将含启动子和目的基因的载体片段整合到植物的染色体上。涉及的转基因受体植物例如是拟南芥、烟草、果树等。
为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入在植物中表达可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、GFP基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除草剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。
RAE1蛋白或RAL1蛋白及其编码基因有多方面的用途。例如用于筛选具有调控抗铝毒能力的化合物、多肽或其它配体。用表达的重组RAE1蛋白或RAL1蛋白的筛选多肽库可用于寻找有价值的能抑制、或促进植物抗铝毒能力的多肽分子。
改良植物抗铝毒能力的方法
本发明还提供一种调控植物抗铝毒能力的方法，包括步骤：
(i)调节所述植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而调控植物抗铝毒能力。
在另一优选例中，适用于所述方法的所述植物包括农作物、林业植物、蔬菜、瓜果、花卉、牧草(包括草坪草)。
在另一优选例中，所述调控植物抗铝毒能力为增强植物抗铝毒能力时，下调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，或使RAE1蛋白或RAL1蛋白丧失活性。
在另一优选例中，所述调控植物抗铝毒能力为降低植物抗铝毒能力时，上调植物中RAE1蛋白的表达量和/或活性。
在另一优选例中，所述方法还用于调控植物(如根)分泌的有机酸水平。
在另一优选例中，下调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性的方法包括(但不限于)：通过RNAi技术下调RAE1或RAL1表达或CRISPR技术改造RAE1或RAL1。
本发明的主要优点包括：
(1)本发明的RAE1基因或RAL1基因或其编码蛋白、或其突变蛋白、或其促进剂、或其抑制剂可调控STOP1蛋白的表达或降解、植物抗铝毒能力或耐铝性能，还可以调控选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
(2)本发明首次发现，RAE1通过泛素化修饰介导STOP1蛋白的降解，rae1突变蛋白和去掉F-box结构域蛋白丧失了介导STOP1降解的功能，相反，过量表达RAE1可促进STOP1蛋白的降解。
(3)本发明方法可有效、显著提高植物的抗铝毒能力，从而解决酸性土壤铝毒害。
(4)本发明RAE1基因或RAL1基因或其编码蛋白可以用于筛选具有调控抗铝毒能力的化合物、多肽或其它配体，寻找有价值的能抑制、或促进植物抗铝毒能力的多肽分子。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor LaboratoryPress,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非有特别说明，否则实施例中所用的材料和试剂均为市售产品。
通用方法
1.实验材料
植物材料：拟南芥野生型Col-0；从EMS诱变库筛选获得的RAE1突变体材料rae1-1到rae1-8、STOP1突变体材料stop1-3(突变位点是H352Y，stop1蛋白失活)；从ARBC订购RAL1的T-DNA敲除突变体SALK_114341C；转基因材料pAtALMT1:LUC、pSTOP1:STOP1-HA、pSTOP1:STOP1-GUS、pRAE1:GUS、pUBQ10:RAE1和pRAL1:GUS。
菌种：大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)；农杆菌GV3101。
2.实验方法
1)EMS诱变pAtALMT1:LUC转基因种子库和突变体筛选
构建pAtALMT1:LUC载体，将1.76kb AtALMT1启动子通过gateway重组试剂盒(Thermofisher)连入载体pGWB35。农杆菌转化和拟南芥侵染：通过热激法转化农杆菌GV3101，挑取阳性克隆用LB液体培养，然后用5％蔗糖溶液重悬菌体，再加入Silwet-L77使终浓度达到0.05％，完成配置农杆菌的侵染悬浮液。用蘸花法侵染拟南芥，剪去拟南芥的果荚，然后将花浸泡在侵染悬浮液中1min，用保鲜膜保湿并避光24h后去掉保鲜膜重新接受光照，等果荚成熟之后收获T0代种子。将T0代种子种在含潮霉素的1/2MS平板培养基上筛选T1代转基因阳性株系，根据T2代是否显示为3:1分离比，挑选单拷贝插入的转基因株系，继续种植直至得到纯合的T3代用于后续试验。
对pAtALMT1:LUC转基因种子库进行EMS诱变，将种子用100mM磷酸盐缓冲液在4℃冰箱浸泡过夜，然后用8％的NaClO对种子消毒10min，用灭菌水清洗4遍，之后将种子放入40mL新灭菌过的100mM磷酸盐缓冲液中，EMS使其终浓度达到0.4％(v/v)，在翻转仪室温上下翻转8h，再用灭菌水对M1种子彻底漂洗至少20遍，然后点种在1/2MS平板培养基上生长，再移苗到土里种植。
对M2代种子进行突变体筛选，在1/2MS竖板培养基点种并在16h光照/8h黑暗、22℃光照培养箱中培养7-8d，均匀喷洒1mM的荧光素工作液，放于暗处避光反应10min，然后放入LUC荧光成像系统的暗箱中间,用预冷到-110℃的CDD相机进行拍照，曝光时间3min，筛选比野生型对照荧光变亮的幼苗。
构建pAtALMT1:LUC引物：
F:5’-GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTCCTGGCTCCTTTTGGTTGTCTA-3’(SEQ IDNO.:1)
R:5’-GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTAACACCTTTTGATGGTCACTCAGCT-3’(SEQ IDNO.:2)
2)抗铝毒基因的mRNA表达分析
研究铝处理对野生型和突变体中基因表达的变化，将水培培养4周的拟南芥，用0.5mM CaCl2溶液(pH 4.8)预处理6h，之后用0或30μM AlCl3的CaCl2溶液(pH 4.8)处理12h。剪取整条根系，用RNA提取试剂盒(9769；TaKaRa,大连,中国)提取RNA并进行DNA消化,用1μgRNA反转录，然后用5μl 1/25cDNA进行qRT-PCR(5μl体系)(Bio-RadCFX ConnectTM Real-Time System；Bio-Rad,Singapore)。AtUBQ10作为内参基因，结果为平均数±SD,3个生物学重复。
3)回补rae1、检测STOP1蛋白和检测RAE1/RAL1组织表达模式的转基因材料构建
为了回补突变体rae1，将一个包含2.43kb RAE1启动子、基因组片段和1.44kb基因下游连入载体pCAMBIA3301。为了检测植物体内STOP1蛋白，将一个包含2.79kbSTOP1启动子和基因组片段与3×HA或GUS融合连入载体pCAMBIA1305或pORE-R2，分别得到载体pSTOP1:STOP1-HA和pSTOP1:STOP1-GUS。以上载体通过重组试剂盒构建(C112；Vazyme BiotechCo.,Ltd,南京,中国)。为了检测RAE1的组织表达模式，将包含2.43kb RAE1启动子连接GUS连入pORE-R2载体。为了过量表达RAE1，将2.55kb AtUBQ10的启动子连接RAE1CDS连入pCAMBIA3301载体。
构建pRAE1:RAE1引物：
F:5’-GACCTGCAGGCATGCAAGCTTTGTTTCAGCATATTTGCATGTTTGAT-3’(SEQ ID NO.:3)
R:5’-CACCTGTAATTCACACGTGGTGTGCTACAGAGGAAAGAAGGTTTG-3’(SEQ ID NO.:4)
构建pSTOP1:STOP1-3×HA引物：
F:5’-GGTACCCGGGGATCCTCTAGATTTAGGGCTTCAAACTCTTTACCC-3’(SEQ ID NO.:5)
R:5’-GGAACATCGTATGGGTAAAGCTTGAGACTAGTATCTGAAACAGACTCAC-3’(SEQ ID NO.:6)
构建pSTOP1:STOP1-GUS引物：
F:5’-TTGGGGCCCAACGTTCTCGAGTTTAGGGCTTCAAACTCTTTACCC-3’(SEQ ID NO.:7)
R:5’-CGGCCGCAAAGTCGACGAATTCGAGACTAGTATCTGAAACAGACTCAC-3’(SEQ ID NO.:8)
构建pRAE1:GUS引物：
F:5’-TTGGGGCCCAACGTTCTCGAGTGTTTCAGCATATTTGCATGTTTGA-3’(SEQ ID NO.:62)
R:5’-CGGCCGCAAAGTCGACGAATTCTGCTGCTGCTGCTGGTGGGT-3’(SEQ ID NO.:63)
构建pAtUBQ10:RAE1引物：
F:5’-CGACCTGCAGGCATGCAAGCTTAAAGTCTGTATATATGACACAGAAGAAACC-3’(SEQ IDNO.:64)
F:5’-CACCTGTAATTCACACGTGGTGTTAAGGCGCCATCTCTTCCAG(SEQ ID NO.:65)
构建pRAL1:GUS引物
F 5’-TTGGGGCCCAACGTTCTCGAGTGACCTGAGGCTGAAAATCG-3’(SEQ ID NO.:66)
R 5’-CGGCCGCAAAGTCGACGAATTCTTTGCAACAGAACCAGAAATAAACA-3’(SEQ ID NO.:67)
4)GUS染色方法
水培培养1周的pSTOP1:STOP1-GUS转基因株系，用0.5mM CaCl2溶液(pH 4.8)预处理12h，之后用0或15μM AlCl3与50μM MG132组合的CaCl2溶液(pH 4.8)处理12h。用GUS染液(161031；o’Biolab Co.,Ltd,北京,中国)在37℃染色2h，然后用体视镜拍照(SZX7；Olympus,Japan)。
5)LUC活性分析检测RAE1启动子调控和EMSA试验检测STOP1与RAE1启动子结合
LUC活性分析：将pRAE1:LUC或mpRAE1:LUC、35S:STOP1-2×FLAG或35S:2×FLAG、pZmUBQ:GUS(内参)共同转入拟南芥原生质体中室温孵育表达20h，然后分别检测LUC活性(RG006-2；Beyotime Biotechnology,中国)和GUS活性(A602251；Sangon Biotech Co.,Ltd.,中国)。
EMSA试验：
STOP1的CDS序列连入pET29a(+)载体构建，转入大肠杆菌BL21(DE3)表达并纯化蛋白。合成生物素标记的DNA探针，使用EMSA试剂盒进行化学发光检测(GS009；BeyotimeBiotechnology,中国)。
构建pRAE1:LUC引物：
F:5’-GCCTGCAGGCTCTAGAGGATCCTGTTTCAGCATATTTGCATGTTTGA-3’(SEQ ID NO.:68)
R:5’-ATGTTTTTGGCGTCTTCCATGGTGCTGCTGCTGCTGGTGGGT-3’(SEQ ID NO.:69)
构建mpRAE1:LUC引物:
1F:5’-GCCTGCAGGCTCTAGAGGATCCTGTTTCAGCATATTTGCATGTTTGA-3’(SEQ ID NO.:70)
1R:5’-AGACTATCTCGGTTAAAGACTGCCTCGATTAACAGATTCGAGTGCGGACAGTACGAT-3’(SEQ ID NO.:71)
2F:5’-TAATCGAGGCAGTCTTTAACCGAGATAGTCTTCTACTACCAATGGCCTAAC(SEQ ID NO.:72)
TTGTT-3’
2R:5’-ATGTTTTTGGCGTCTTCCATGGTGCTGCTGCTGCTGGTGGGT-3’(SEQ ID NO.:73)
合成pRAE1-EMSA序列:
F:5’-TCAATCTATCGTACTGTCCGCACTCGAATCTGTCCTTCCTCGCATGCTTACTCCACCATATACTTCTACTACCAATGGCCTAACTTGTTGATTGCG-3’(SEQ ID NO.:74)
R:5’-CGCAATCAACAAGTTAGGCCATTGGTAGTAGAAGTATATGGTGGAGTAAGCATGCGAGGAAGGACAGATTCGAGTGCGGACAGTACGATAGATTGA-3’(SEQ ID NO.:75)
合成mpRAE1-EMSA序列:
F:5’-TCAATCTATCGTACTGTCCGCACTCGAATCTGTTAATCGAGGCAGTCTTTAACCGAGATAGTCTTCTACTACCAATGGCCTAACTTGTTGATTGCG-3’(SEQ ID NO.:76)
R:5’-CGCAATCAACAAGTTAGGCCATTGGTAGTAGAAGACTATCTCGGTTAAAGACTGCCTCGATTAACAGATTCGAGTGCGGACAGTACGATAGATTGA-3’(SEQ ID NO.:77)
6)Pull down试验
RAE1和STOP1的CDS序列连入pET29a(+),pGEX4T-1或pET-H6Trx载体构建RAE1-His,GST-RAE1,GST-STOP1或His-Trx-STOP1，载体转入大肠杆菌BL21(DE3)表达蛋白。BL21(DE3)在37℃生长到OD600达到0.6，然后加入0.1mM IPTG在25℃诱导蛋白表达6h。含有GST-STOP1或GST-RAE1的细菌裂解液和对照GST蛋白与GST琼脂糖珠(C60031；Sangon BiotechCo.,Ltd,上海,中国)在4℃摇床上孵育1h。然后用缓冲液清洗4次再用含有RAE1-His或His-Trx-STOP1蛋白的裂解液在在4℃摇床上孵育2h。用缓冲液清洗5次用10％SDS-PAGE进行免疫印迹试验。
构建RAE1-His
F:5’-TCCATGGCTGATATCGGATCCATGAAGAAGGTTAAACAGATTCGT-3’(SEQ ID NO.:9)
R:5’-GTGGTGGTGGTGGTGCTCGAGAGGCGCCATCTCTTCCAG-3’(SEQ ID NO.:10)
构建GST-RAE1
F:5’-TCCGCGTGGATCCCCGGAATTCATGAAGAAGGTTAAACAGATTCGT-3’(SEQ ID NO.:11)
R:5’-GTCACGATGCGGCCGCTCGAGTTAAGGCGCCATCTCTTCCAG-3’(SEQ ID NO.:12)
构建GST-STOP1
F:5’-TCCGCGTGGATCCCCGGAATTCATGGAAACTGAAGACGATTTGTG-3’(SEQ ID NO.:13)
R:5’-GTCACGATGCGGCCGCTCGAGTTAGAGACTAGTATCTGAAACAGAC-3’(SEQ ID NO.:14)
构建His-Trx-STOP1
F:5’-GGTCTGGTGCCACGCGGATCCATGGAAACTGAAGACGATTTGTG-3’(SEQ ID NO.:15)
R:5’-ACTTAAGCATTATGCGGCCGCTTAGAGACTAGTATCTGAAACAGAC-3’(SEQ ID NO.:16)
7)Split-LUC试验
将RAE1,rae1-1，RAE1ΔF和STOP1的CDS序列连入pCAMBIA1-cLUC或pCAMBIA1-nLUC载体构建cLUC-RAE1,cLUC-rae1-1,cLUC-RAE1ΔF和STOP1-nLUC。
将构建转入农杆菌GV3101，根据不同组合注射入烟草N.benthamiana叶片，在暗处培养24h然后放入光照培养箱培养48d,然后叶片用用LUC成像系统拍照。
构建cLUC-RAE1/cLUC-rae1-1
F:5’-GTACGCGTCCCGGGGCGGTACCATGAAGAAGGTTAAACAGATTCG-3’(SEQ ID NO.:17)
R:5’-GAACGAAAGCTCTGCAGGTCGACTTAAGGCGCCATCTCTTCCAG-3’(SEQ ID NO.:18)
构建cLUC-RAE1ΔF
F:5’-GTACGCGTCCCGGGGCGGTACCCTCGATCTTACCTTCTGCCC-3’(SEQ ID NO.:19)
R:5’-GAACGAAAGCTCTGCAGGTCGACTTAAGGCGCCATCTCTTCCAG-3’(SEQ ID NO.:20)
构建STOP1-nLUC
F:5’-ACGAGCTCGGTACCCGGGATCCATGGAAACTGAAGACGATTTGTG-3’(SEQ ID NO.:21)
R:5’-GACGCGTACGAGATCTGGTCGACGAGACTAGTATCTGAAACAGACT-3’(SEQ ID NO.:22)
8)蛋白提取，CoIP试验和蛋白降解试验和泛素化修饰检测试验
将水培培养4周的拟南芥，用0.5mM CaCl2溶液(pH 4.8)预处理6h，之后用0或30μMAlCl3与50μM MG132组合的CaCl2溶液(pH 4.8)处理12h。剪取整条根系，用蛋白提取液提取蛋白(20mM Tris-HCl pH 7.5,300mM NaCl,5mM MgCl2,5mM DTT,50μM MG132,0.5％NP-40，和1×complete protease inhibitor mixture)。
CoIP试验：2mL拟南芥原生质体用100μg 35S:STOP1-3×HA和100μg35S:RAE1-2×FLAG或50μg 35S:rae1-1-2×FLAG或35S:RAE1ΔF-2×FLAG共转，35S:STOP1-3×HA和35S:2×FLAG作为对照。然后用100μL蛋白提取液(20mM Tris-HCl pH 7.4,150mM NaCl,1mMMgCl2,1mM DTT,50μM MG132,0.25％NP-40,和1×完全蛋白酶抑制剂混合物(completeprotease inhibitor mixture))提取蛋白，20μL蛋白提取液作为input。总的蛋白提取液稀释到1ml然后与20μL anti-FLAG M2磁珠在4℃摇床上孵育3h，用缓冲液洗涤3次后用100mM甘氨酸(pH 2.5)洗脱并用1M Tris-HCl(pH 9.0)中和，之后进行免疫印迹试验。
蛋白降解试验：用50μg 35S:STOP1-2×FLAG和25μg 35S:RAE1-3×HA或50μg 35S:RAE1-3×HA(35S:rae1-1-3×HA或35S:RAE1ΔF-3×HA保持一样).然后用50μL蛋白提取液提取蛋白，20μL蛋白提取液作为input。
泛素化修饰检测试验：
用35S:Myc-UBQ10，35S:STOP1-2×FLAG，35S:RAE1-3×HA(35S:rae1-1-3×HA或35S:RAE1ΔF-3×HA)转入拟南芥原生质体中，室温孵育表达16h，然后50μM MG132处理8h，用蛋白提取液(20mM Tris-HCl pH 7.4,150mM NaCl,1mM MgCl2,1mMDTT,50μM MG132,0.25％NP-40,和1×complete protease inhibitor mixture)提取蛋白，20μL蛋白提取液作为input。总的蛋白提取液稀释到1ml然后与20μL anti-FLAG M2磁珠在4℃摇床上孵育2h，用缓冲液洗涤5次后，用anti-Myc抗体检测泛素化修饰情况。
构建35S:STOP1-3×HA
F:5’-CTTGCTCCGTGGATCCTCTAGAATGGAAACTGAAGACGATTTGTG-3’(SEQ ID NO.:23)
R:5’-GAACATCGTATGGGTATCTAGAGAGACTAGTATCTGAAACAGACT-3’(SEQ ID NO.:24)
构建35S:RAE1/rae1-1-3×HA
F:5’-CTTGCTCCGTGGATCCTCTAGAATGAAGAAGGTTAAACAGAT-3’(SEQ ID NO.:25)
R:5’-GAACATCGTATGGGTATCTAGAAGGCGCCATCTCTTCC-3’(SEQ ID NO.:26)
构建35S:RAE1ΔF-3×HA
F:5’-CTTGCTCCGTGGATCCTCTAGAATGCTCGATCTTACCTTCTGCCC-3’(SEQ ID NO.:27)
R:5’-GAACATCGTATGGGTATCTAGAAGGCGCCATCTCTTCC-3’(SEQ ID NO.:28)
构建35S:STOP1-2×FLAG
F:5’-CTTGCTCCGTGGATCCTCTAGAATGGAAACTGAAGACGATTTGTG-3’(SEQ ID NO.:29)
R:5’-TGTAGTCAGAAGGCCTGGTACCGAGACTAGTATCTGAAACAGACT-3’(SEQ ID NO.:30)
构建35S:RAE1/rae1-1-2×FLAG
F:5’-CTTGCTCCGTGGATCCTCTAGAATGAAGAAGGTTAAACAGAT-3’(SEQ ID NO.:31)
R:5’-TGTAGTCAGAAGGCCTGGTACCAGGCGCCATCTCTTCC-3’(SEQ ID NO.:32)
构建35S:RAE1ΔF-2×FLAG
F:5’-CTTGCTCCGTGGATCCTCTAGAATGCTCGATCTTACCTTCTGCCC-3’(SEQ ID NO.:33)
R:5’-TGTAGTCAGAAGGCCTGGTACCAGGCGCCATCTCTTCC-3’(SEQ ID NO.:34)
9)铝毒耐性能力评测
为了测量根际分泌的苹果酸，将水培培养4周的拟南芥，用0.5mM CaCl2溶液(pH4.8)预处理6h，之后用0或30μM AlCl3的CaCl2溶液(pH 4.8)处理12h，收集根际分泌物，通过NAD/NADH酶循环法测定苹果酸(Hampp et al.,1984)。
根据Ligaba-Osena等(2017)的方法来测定拟南芥根中铝含量。用0.5mM柠檬酸溶液(pH 4.2)在4℃处理30min来去除根表面的铝，然后用18Ω的超纯水清洗三次并吸干，再将样品放于60℃烘箱烘干。用1ml HNO3和HClO4的混酸进行消解，并用2％HNO3稀释，然后用ICP-MS测定铝含量。
根据Larsen等(2005)的铝浸泡培养基方法来测定拟南芥铝耐性。培养基基质配方如下：1mM KNO3,0.2mM KH2PO4,2mM MgSO4,0.25mM(NH4)2SO4,1mM Ca(NO3)2,1mM CaSO4,1mMK2SO4,1μM MnSO4,5μM H3BO3,0.05μM CuSO4,0.2μM ZnSO4,0.02μM NaMoO4,0.1μM CaCl2,0.001μM CoCl2,1％sucrose和0.3％Gellan gum(G1910；Sigma-Aldrich)。然后将50ml基质用40ml含有0、0.75、1、1.25mM AlCl3相同配方(不含Gellan gum)的培养液浸泡一天，去除培养液并点上种子在光照培养箱竖直培养七天。植株拍照并用Image J测量根长。
实施例1突变体诱变筛选和基因回补验证
为了研究AtALMT1的表达调控和STOP1蛋白水平调控机制，将1.76kb AtALMT1启动子与荧光素酶基因融合，通过农杆菌侵染拟南芥野生型Col-0构建了pAtALMT1:LUC转基因报告基因系，利用该材料进行EMS诱变，通过LUC荧光检测来筛选影响LUC报告基因表达的突变体。
通过筛选约10000株M2株系，一共获得17株影响LUC报告基因表达的突变体，利用其中一个LUC表达增强突变体克隆了目的基因，命名为RAE1(Regulation of AtALMT1Expression 1)，通过对其余突变体测序发现，一共筛选到8个RAE1上不同位点突变的突变体(rae1-1到rae1-8)，突变体rae1-1到rae1-8中根和地上部的LUC荧光均比野生型提高(图1A、1B)。
为了了解RAE1的功能，首先分析RAE1的二级结构发现，RAE1编码一个含F-box结构域和18个LRR重复结构的蛋白(图1B)。
构建载体pRAE1:RAE1通过农杆菌侵染突变体rae1-1获得回补转基因株系，挑选2个独立株系进行LUC荧光检测，它们均能回补rae1-1荧光表型(图1C)。通过以上方法克隆了一个新的负调控AtALMT1表达的基因，并对该基因进行了回补验证。
实施例2 AtALMT1等抗铝毒基因在突变体rae1和过量表达RAE1中的表达
进一步分析LUC报告基因和AtALMT1在突变体rae1中的表达，选取WT,rae1-1,rae1-2,stop1-3进行试验，不加Al或加Al处理12h之后剪取根提取RNA进行qPCR分析表达。不加Al条件下，rae1中LUC报告基因和AtALMT1的表达比野生型高5倍多，加Al处理LUC报告基因和AtALMT1的表达比野生型高3-5倍(图2A、2B)。LUC报告基因和AtALMT1在stop1-3中完全不表达，说明STOP1是AtALMT1表达必须的转录因子(图2A、2B)。
另一方面分析突变体rae1中其他抗铝毒基因的表达发现，另外2个STOP1下游调控基因AtMATE和ALS3的表达在突变体rae1中无论在无铝条件还是有铝条件下均比野生型(WT)提高(图2C、2D)，而不受STOP1调控的基因AtSTAR1和ALS1的表达在突变体rae1中不受影响(图2E、2F)。
相反，过量表达RAE1,可降低AtALTM1、AtMATE和ALS3的表达(图3)。RAE1表达受到铝处理的诱导，并受到STOP1的调控，在rae1中RAE1的表达水平也上调。
以上结果表明RAE1影响STOP1调控的基因的表达，进一步推测RAE1可能影响STOP1的蛋白稳定性。
实施例3 RAE1的表达受到铝处理诱导并被STOP1直接调控
RAE1表达受到铝处理的诱导，并受到STOP1的调控，在rae1中RAE1的表达水平也上调。原生质体表达系统显示STOP1调控pRAE1:LUC的表达，将结合区域突变则调控减弱，EMSA验证STOP1直接结合RAE1的启动子上的结合区域。RAE1表达在植物各组织中均有表达，且主要在维管组织表达(图4)。STOP1通过直接结合RAE1的启动子调控RAE1表达，从而两者形成一个环形的负反馈调控机制。
实施例4 RAE1与STOP1的结合关系
为了分析RAE1与STOP1的结合关系，首先进行了体外Pull-down试验。GST-STOP1可以特异拉下RAE1-His，反过来GST-RAE1可以特异拉下His-Trx-STOP1，说明RAE1和STOP1在体外可以直接结合(图5A)。
为了分析RAE1与STOP1在植物体内的互作，又进行了烟草Split-LUC试验，将RAE1/rae1-1(突变蛋白)/RAE1△F(去掉F-box结构域蛋白)的N端与cLUC融合，STOP1的C端与nLUC融合,当cLUC-rae1-1与STOP1-nLUC在烟草叶片中共表达时可以看到荧光，而cLUC-RAE1与STOP1-nLUC共表达则没有荧光(图3B)。又将cLUC-RAE1△F与STOP1-nLUC共表达，发现它们能够互作产生荧光(图5B)。Split-LUC试验结果表明RAE1与STOP1在体内能够互作，有功能的RAE1与STOP1结合促进了STOP1的降解，还表明rae1-1突变蛋白没有影响与STOP1的互作，而是影响了促进STOP1降解的功能。
进一步进行体内Co-IP试验，将带有FLAG标签的RAE1/rae1-1/RAE1△F和HA标签的STOP1在拟南芥原生质体中共表达，用FLAG抗体进行免疫沉淀。结果显示FLAG-RAE1,FLAG-rae1-1和FLAG-RAE1△F分别都可以将STOP1-HA免疫共沉淀下来(图5C)，并且野生型RAE1将STOP1-HA免疫共沉淀下来较少，这与Split-LUC试验一致。
通过以上体外Pull-down试验、烟草Split-LUC试验以及体内Co-IP试验证明了RAE1能够与STOP1蛋白互作。
实施例5研究RAE1对STOP1蛋白水平的调控
为了研究RAE1对STOP1蛋白水平的调控，构建了pSTOP1:STOP1-HA转基因株系，并将pSTOP1:STOP1-HA杂交到rae1-1突变体中，然后进行不加Al或加Al处理检测根中的STOP1蛋白。铝处理可以使STOP1蛋白积累，在rae1-1突变体中STOP1蛋白无论在无铝条件还是有铝条件下均比野生型增多，相反，过量表达RAE1可促进STOP1蛋白的降解(图6)。
为了研究STOP1是通过26S蛋白酶体途径进行降解，使用蛋白酶体抑制剂MG132对pSTOP1:STOP1-HA转基因株系进行处理，MG132处理1h便可以抑制STOP1的降解使STOP1蛋白增多(图7A)，并且在无铝条件或有铝条件下MG132均抑制STOP1的降解使STOP1蛋白增多(图7B)。进一步构建了pSTOP1:STOP1-GUS转基因株系，进行不加Al或加Al处理以及MG132处理，结果表明铝处理可以使STOP1蛋白积累，并且在无铝条件或有铝条件下MG132均抑制STOP1的降解使STOP1蛋白增多(图7C、7D)。
为了证明RAE1介导STOP1降解，将不同量的RAE1/rae1-1/RAE1△F和STOP1在拟南芥原生质体中共表达，随着提高RAE1的表达量，促进了STOP1的降解(图8A)，相反提高rae1-1/RAE1△F的表达量，不影响STOP1蛋白表达量(图8A)。原生质表达系统中验证STOP1蛋白被泛素化修饰,而突变体蛋白rae1-1和RAE1△F不能介导STOP1的泛素化修饰(图8B、8C)。以上表明RAE1通过泛素化修饰介导STOP1蛋白的降解，而rae1-1突变蛋白和去掉F-box结构域蛋白丧失了介导STOP1泛素化并降解的功能。
由于突变体rae1中STOP1积累，受STOP1调控的抗铝毒基因AtALMT1等表达上调，比较了野生型和突变体rae1中苹果酸的分泌。在无Al条件下，两者的苹果酸分泌都很少，并且没有差异(图9A)，当进行Al处理之后，两者苹果酸的分泌均增多，并且突变体rae1-1和rae1-2中苹果酸的分泌比野生型显著提高(图9A)。与此一致的是，突变体rae1中苹果酸分泌的提高，导致突变体rae1-1和rae1-2根中比野生型积累更少的Al(图9B)。进一步在铝浸泡板培养基上比较了野生型和突变体rae1对Al毒的抗性,在1mM Al处理条件下，突变体rae1-1和rae1-2的相对根长比野生型明显更长(图9C、9D)。以上表明RAE1突变导致的STOP1蛋白积累大幅提高了拟南芥对Al毒的抗性，而过表达RAE1减弱了拟南芥对Al毒的抗性。
实施例6 RAE1同源基因的功能具有保守性
RAE1在拟南芥中有一个同源基因RAL1(RAE1Like 1),RAL1的T-DNA敲除突变体ral1中AtALMT1、pAtALMT1:LUC的表达上调，但是上调幅度比在rae1-1中更低(图10A、10B)。pAtALMT1:LUC的表达在rae1-1ral1双突变体中比在各单突变体中表达更高，表明RAE1与RAL1存在功能冗余(图10B)。RAL1的表达也受铝毒的诱导，但是RAL1在根中表达的组织部位与RAE1不同(图10C、10D)。烟草Split-LUC试验证明RAL1能够与STOP1蛋白互作(图10E)。以上表明，RAL1具有与RAE1相同的降解STOP1蛋白的功能，但由于它不在根尖分生组织和伸长区表达，RAE1在植物抗铝毒方面起重要作用。
RAE1和RAL1在大多数单子叶(水稻、玉米、大麦等)和双子叶植物(芸薹属白菜、大豆等)中均有相应的同源基因。水稻中RAE1的同源基因是OsRAE1.1和OsRAE1.2，两个同源基因氨基酸序列有97.5％相似性，OsRAE1.1和OsRAE1.2在根尖和根基部均表达，而且表达均被Al诱导，被ART1(水稻中与STOP1同源的基因)调控(图11A、11B)。烟草Split-LUC试验证明OsRAE1.1能够与ART1蛋白互作(图11C)。以上表明，RAE1在调控植物抗铝毒转录因子STOP1稳定性机制上是保守的，对作物中的RAE1同源基因进行功能缺失突变有可能可以提高作物抗铝毒能力。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
序列表
<110> 中国科学院上海生命科学研究院
<120> 调控抗铝毒转录因子STOP1蛋白的基因及其应用
<130> P2019-0269
<150> 201810339581X
<151> 2018-04-16
<160> 77
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 51
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
ggggacaagt ttgtacaaaa aagcaggctc ctggctcctt ttggttgtct a 51
<210> 2
<211> 54
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
ggggaccact ttgtacaaga aagctgggta acaccttttg atggtcactc agct 54
<210> 3
<211> 47
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
gacctgcagg catgcaagct ttgtttcagc atatttgcat gtttgat 47
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<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
cacctgtaat tcacacgtgg tgtgctacag aggaaagaag gtttg 45
<210> 5
<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
ggtacccggg gatcctctag atttagggct tcaaactctt taccc 45
<210> 6
<211> 49
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
ggaacatcgt atgggtaaag cttgagacta gtatctgaaa cagactcac 49
<210> 7
<211> 45
<212> DNA
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ttggggccca acgttctcga gtttagggct tcaaactctt taccc 45
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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cggccgcaaa gtcgacgaat tcgagactag tatctgaaac agactcac 48
<210> 9
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
tccatggctg atatcggatc catgaagaag gttaaacaga ttcgt 45
<210> 10
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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gtggtggtgg tggtgctcga gaggcgccat ctcttccag 39
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<400> 11
tccgcgtgga tccccggaat tcatgaagaa ggttaaacag attcgt 46
<210> 12
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 12
gtcacgatgc ggccgctcga gttaaggcgc catctcttcc ag 42
<210> 13
<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 13
tccgcgtgga tccccggaat tcatggaaac tgaagacgat ttgtg 45
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<211> 46
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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gtcacgatgc ggccgctcga gttagagact agtatctgaa acagac 46
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<211> 44
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 15
ggtctggtgc cacgcggatc catggaaact gaagacgatt tgtg 44
<210> 16
<211> 46
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 16
acttaagcat tatgcggccg cttagagact agtatctgaa acagac 46
<210> 17
<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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gtacgcgtcc cggggcggta ccatgaagaa ggttaaacag attcg 45
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<211> 44
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 18
gaacgaaagc tctgcaggtc gacttaaggc gccatctctt ccag 44
<210> 19
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 19
gtacgcgtcc cggggcggta ccctcgatct taccttctgc cc 42
<210> 20
<211> 44
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 20
gaacgaaagc tctgcaggtc gacttaaggc gccatctctt ccag 44
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<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 21
acgagctcgg tacccgggat ccatggaaac tgaagacgat ttgtg 45
<210> 22
<211> 46
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 22
gacgcgtacg agatctggtc gacgagacta gtatctgaaa cagact 46
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<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 23
cttgctccgt ggatcctcta gaatggaaac tgaagacgat ttgtg 45
<210> 24
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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gaacatcgta tgggtatcta gagagactag tatctgaaac agact 45
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cttgctccgt ggatcctcta gaatgaagaa ggttaaacag at 42
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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gaacatcgta tgggtatcta gaaggcgcca tctcttcc 38
<210> 27
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cttgctccgt ggatcctcta gaatgctcga tcttaccttc tgccc 45
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 28
gaacatcgta tgggtatcta gaaggcgcca tctcttcc 38
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 29
cttgctccgt ggatcctcta gaatggaaac tgaagacgat ttgtg 45
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<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 30
tgtagtcaga aggcctggta ccgagactag tatctgaaac agact 45
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 31
cttgctccgt ggatcctcta gaatgaagaa ggttaaacag at 42
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<211> 38
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 32
tgtagtcaga aggcctggta ccaggcgcca tctcttcc 38
<210> 33
<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 33
cttgctccgt ggatcctcta gaatgctcga tcttaccttc tgccc 45
<210> 34
<211> 38
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 34
tgtagtcaga aggcctggta ccaggcgcca tctcttcc 38
<210> 35
<211> 665
<212> PRT
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400> 35
Met Lys Lys Val Lys Gln Ile Arg Val Leu Lys Pro Phe Asp Leu Leu
1 5 10 15
Ser Glu Glu Leu Val Phe Ile Ile Leu Asp Leu Ile Ser Pro Asn Pro
20 25 30
Ser Asp Leu Lys Ser Phe Ser Leu Thr Cys Lys Ser Phe Tyr Gln Leu
35 40 45
Glu Ser Lys His Arg Gly Ser Leu Lys Pro Leu Arg Ser Asp Tyr Leu
50 55 60
Pro Arg Ile Leu Thr Arg Tyr Arg Asn Thr Thr Asp Leu Asp Leu Thr
65 70 75 80
Phe Cys Pro Arg Val Thr Asp Tyr Ala Leu Ser Val Val Gly Cys Leu
85 90 95
Ser Gly Pro Thr Leu Arg Ser Leu Asp Leu Ser Arg Ser Gly Ser Phe
100 105 110
Ser Ala Ala Gly Leu Leu Arg Leu Ala Leu Lys Cys Val Asn Leu Val
115 120 125
Glu Ile Asp Leu Ser Asn Ala Thr Glu Met Arg Asp Ala Asp Ala Ala
130 135 140
Val Val Ala Glu Ala Arg Ser Leu Glu Arg Leu Lys Leu Gly Arg Cys
145 150 155 160
Lys Met Leu Thr Asp Met Gly Ile Gly Cys Ile Ala Val Gly Cys Lys
165 170 175
Lys Leu Asn Thr Val Ser Leu Lys Trp Cys Val Gly Val Gly Asp Leu
180 185 190
Gly Val Gly Leu Leu Ala Val Lys Cys Lys Asp Ile Arg Thr Leu Asp
195 200 205
Leu Ser Tyr Leu Pro Ile Thr Gly Lys Cys Leu His Asp Ile Leu Lys
210 215 220
Leu Gln His Leu Glu Glu Leu Leu Leu Glu Gly Cys Phe Gly Val Asp
225 230 235 240
Asp Asp Ser Leu Lys Ser Leu Arg His Asp Cys Lys Ser Leu Lys Lys
245 250 255
Leu Asp Ala Ser Ser Cys Gln Asn Leu Thr His Arg Gly Leu Thr Ser
260 265 270
Leu Leu Ser Gly Ala Gly Tyr Leu Gln Arg Leu Asp Leu Ser His Cys
275 280 285
Ser Ser Val Ile Ser Leu Asp Phe Ala Ser Ser Leu Lys Lys Val Ser
290 295 300
Ala Leu Gln Ser Ile Arg Leu Asp Gly Cys Ser Val Thr Pro Asp Gly
305 310 315 320
Leu Lys Ala Ile Gly Thr Leu Cys Asn Ser Leu Lys Glu Val Ser Leu
325 330 335
Ser Lys Cys Val Ser Val Thr Asp Glu Gly Leu Ser Ser Leu Val Met
340 345 350
Lys Leu Lys Asp Leu Arg Lys Leu Asp Ile Thr Cys Cys Arg Lys Leu
355 360 365
Ser Arg Val Ser Ile Thr Gln Ile Ala Asn Ser Cys Pro Leu Leu Val
370 375 380
Ser Leu Lys Met Glu Ser Cys Ser Leu Val Ser Arg Glu Ala Phe Trp
385 390 395 400
Leu Ile Gly Gln Lys Cys Arg Leu Leu Glu Glu Leu Asp Leu Thr Asp
405 410 415
Asn Glu Ile Asp Asp Glu Gly Leu Lys Ser Ile Ser Ser Cys Leu Ser
420 425 430
Leu Ser Ser Leu Lys Leu Gly Ile Cys Leu Asn Ile Thr Asp Lys Gly
435 440 445
Leu Ser Tyr Ile Gly Met Gly Cys Ser Asn Leu Arg Glu Leu Asp Leu
450 455 460
Tyr Arg Ser Val Gly Ile Thr Asp Val Gly Ile Ser Thr Ile Ala Gln
465 470 475 480
Gly Cys Ile His Leu Glu Thr Ile Asn Ile Ser Tyr Cys Gln Asp Ile
485 490 495
Thr Asp Lys Ser Leu Val Ser Leu Ser Lys Cys Ser Leu Leu Gln Thr
500 505 510
Phe Glu Ser Arg Gly Cys Pro Asn Ile Thr Ser Gln Gly Leu Ala Ala
515 520 525
Ile Ala Val Arg Cys Lys Arg Leu Ala Lys Val Asp Leu Lys Lys Cys
530 535 540
Pro Ser Ile Asn Asp Ala Gly Leu Leu Ala Leu Ala His Phe Ser Gln
545 550 555 560
Asn Leu Lys Gln Ile Asn Val Ser Asp Thr Ala Val Thr Glu Val Gly
565 570 575
Leu Leu Ser Leu Ala Asn Ile Gly Cys Leu Gln Asn Ile Ala Val Val
580 585 590
Asn Ser Ser Gly Leu Arg Pro Ser Gly Val Ala Ala Ala Leu Leu Gly
595 600 605
Cys Gly Gly Leu Arg Lys Ala Lys Leu His Ala Ser Leu Arg Ser Leu
610 615 620
Leu Pro Leu Ser Leu Ile His His Leu Glu Ala Arg Gly Cys Ala Phe
625 630 635 640
Leu Trp Lys Asp Asn Thr Leu Gln Ala Glu Leu Asp Pro Lys Tyr Trp
645 650 655
Lys Gln Gln Leu Glu Glu Met Ala Pro
660 665
<210> 36
<211> 3761
<212> DNA
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400> 36
gggttttttc caaaatcctc aaagagagac tatacttctc tcggatcctt cctgatttca 60
aaatttcttc aacccaccag cagcagcagc agatgaagaa ggttaaacag attcgtgtct 120
taaagccttt cgatcttctc tcggaagagc tcgtctttat catccttgac ctcatctctc 180
ccaacccttc cgatctcaaa tccttctctc ttacttgcaa atctttctac cagctcgagt 240
ccaagcaccg cggatcctta aaacctctcc gctccgacta tctccctcgc atcttgactc 300
gttaccggaa caccaccgat ctcgatctta ccttctgccc gcgtgtcact gactacgcgc 360
ttagcgtcgt tggctgtctc tccggaccta cgcttcgctc cctcgacctc tcgcgctctg 420
gctccttctc cgccgcggga ctactgcgat tggccctcaa atgtgtcaat ttagtcgaga 480
ttgacctgtc caatgcgacg gagatgagag acgccgatgc tgcggtggtg gcggaggcga 540
ggagtctgga gaggctgaag ctgggcagat gcaagatgct gacggacatg ggaatcggat 600
gtatagcagt tggatgtaag aagctcaata cggttagctt gaaatggtgt gttggcgtcg 660
gagatttagg ggttggcttg cttgccgtca aatgcaagga cattcgcacc ttagacctct 720
cctacttgcc ggtaattaac ttctctcttc acattttctt aatccgcaga gccaaatttc 780
gattaatatg gtaagtttgt cgaattggaa ttatttctaa atttgttctt cctgagacct 840
gttggttgat ttttcaagtt aacaacaagt tttggttgaa cttttggtct ttcaacatct 900
gtggatcatt atctatctga attcgacact ttaagtgcca tatgtttgga ttatatcttc 960
agaggagctg gaaattcaaa cctattcttt tgttccgtat tctacagatc acaggaaagt 1020
gtttacatga cattctgaaa cttcaacacc ttgaagaact tcttctagaa gggtgctttg 1080
gagtagatga tgacagtctt aaatcactca gacatgattg caagtcattg aaggtaacct 1140
ctattccaag aaatttgttt gattcttata catgagatca cataatagtt ttggaatcga 1200
cttgacagac aaacttttta gttgatattt tagaacagaa aacttggtat tctcagaata 1260
tggcttggag aagatgttac gcttcttctt gctcgctgca tttattctgg aaacatttaa 1320
cttttatgag agaagatgta taaacaggtt tcatgttttc ttagactcag aaagctattt 1380
atcattgaaa gtctaatgct ggaagactat atagttgatt gttttcatca tcatcttatc 1440
catagacatt tgagatttta cttaccaaaa cctgtgttct gcagaagctt gatgcatcca 1500
gctgccagaa tttaactcat agaggtttaa cctcactttt aagcggggca ggatatcttc 1560
agcgacttga tctatcacac tgttcttctg taagttctcc gttttctcat tatcatcaga 1620
acacatgctt tccttgcttt gttctctggt tatggcctgt atgtaagtat ttgctaaatg 1680
gctgagtcaa cttagtttgg cactaaaact ctttagtagt agcaaaacca gtaattgcac 1740
ataccaccga atagaccatt tgtgtcatgg atcgatagca gtacacagac ccaccaagtt 1800
ctatgatgcc ttcttatatg aggtttattt actgatttag gtgatatcat tggattttgc 1860
gagtagctta aagaaggttt cagcattaca gtcgatcagg ttggatggtt gttctgttac 1920
gcctgatggt ttgaaggcga taggcacatt gtgcaattcc ctgaaagagg ttagcctaag 1980
caaatgcgtg agcgtaactg atgaaggtct ttcttctcta gtaatgaaac tgaaagacct 2040
cagaaaactt gacatcacat gttgccggaa actaagtaga gtttcaatca cccaaatcgc 2100
caattcgtgt cctttactag tctctttgaa gatggagtct tgttctcttg tttccagaga 2160
agccttttgg ttgatcggac aaaagtgtcg gctacttgaa gagcttgact taactgacaa 2220
cgagattgat gatgaaggtt ctttattttc ttcagatcaa ttcttagaac cgtggttttt 2280
ggattatacc ttatcttgtt agtctttcct cgtatgatgc aggactgaaa tccatatcta 2340
gttgtctgag tctttcctcg ttaaagctgg gaatttgtct taacataaca gacaaagggc 2400
tctcgtacat cgggatgggc tgttcaaatc tccgtgaact tgatctctat aggtatctcg 2460
cgtagaaatt tatttttcag tcgggtcaat aataaaattc tccgttctca atctagtctt 2520
tatctactcc aggtcagtgg gaataacaga cgtaggcatc tccacaattg cccaaggctg 2580
cattcatctg gaaacaataa acatttcata ctgccaagac ataacagaca agtccctggt 2640
ttcattgtcc aaatgctcgt tgttacaaac attcgagagc aggggatgtc ctaacatcac 2700
gtcccaagga cttgcagcca ttgctgttcg gtgcaagcga ctcgccaagg ttgacttgaa 2760
gaagtgccca tccatcaatg atgcggggtt gctcgctctg gctcacttct ctcagaatct 2820
caaacaggta ataaaccgtt gaatccttca ctgacagctg aaaaaactac aatatactgg 2880
ttgaatctgt tatctgattg cgatccccat gttgcagata aacgtgtcag acacagctgt 2940
gactgaagtg ggacttctct ccctagccaa catagggtgt ttacagaaca tagcggttgt 3000
gaactcgagt ggtttaagac cgagcggagt agcagcagca ttgctggggt gtggaggatt 3060
aaggaaagcg aaactacatg cgtccctaag atcactgctt cctctttctc taatccacca 3120
cttggaagct cgtggttgtg cgttcctctg gaaagacaat acccttcagg tgaatatata 3180
tacaagtata tgtagattac tacttactac actaaatagc cgcaaaaggt tggtgtagct 3240
ttttatgatt acaaatgaaa atcttagagc gaaggagtct gacatatgga aatgtaaatg 3300
atgtgggaac aggcggagtt agatcccaag tactggaagc aacagctgga agagatggcg 3360
ccttaaatta aaagtgagaa gaaacattct gaaatgggaa agaggagttc ctatgggagc 3420
cagcagacag gccctgtttt gggcccagtg tggattagct ggaacaattt tggtctcttt 3480
tgtgttgttg ttgacggcgc gtgttctaac aaccccacac aaccttacat tataagtcta 3540
gtcacatggt gggtgacatg gtaccgttgt atatgtagtt tttgtttctt tttttttttt 3600
ttttggttgg ggagccgaaa ttaacggacg taacagagtc acaaggggat gccttctctg 3660
tgcctttttg actttttcct cctttctttt ttttctgtaa tcatatgagt tttatgtaat 3720
ttaatgcctc atcaacttgc ctggataggg ccggcctttc c 3761
<210> 37
<211> 677
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 37
Met Ala Ser Pro Met Pro Thr Pro Thr His Arg Val Lys Arg Arg Arg
1 5 10 15
Leu Asp Leu Ser Pro Pro Pro His Leu Asn Asp Leu Ala Asp Glu Leu
20 25 30
Leu Phe Leu Ile Leu Asp Arg Ala Ala Ala His Asp Pro Arg Ala Leu
35 40 45
Lys Ser Phe Ser Leu Val Ser Arg Ala Cys His Ala Ala Glu Ser Arg
50 55 60
His Arg Arg Val Leu Arg Pro Phe Arg Pro Asp Leu Leu Pro Ala Ala
65 70 75 80
Leu Ala Arg Tyr Pro Ala Leu Ser Arg Leu Asp Leu Ser Leu Cys Pro
85 90 95
Arg Leu Pro Asp Ala Ala Leu Ala Ala Leu Pro Ala Ala Pro Ser Val
100 105 110
Ser Ala Val Asp Leu Ser Arg Ser Arg Gly Phe Gly Ala Ala Gly Leu
115 120 125
Ala Ala Leu Val Ala Ala Cys Pro Asn Leu Thr Asp Leu Asp Leu Ser
130 135 140
Asn Gly Leu Asp Leu Gly Asp Ala Ala Ala Ala Glu Val Ala Lys Ala
145 150 155 160
Arg Arg Leu Gln Arg Leu Ser Leu Ser Arg Cys Lys Arg Ile Thr Asp
165 170 175
Met Gly Leu Gly Cys Ile Ala Val Gly Cys Pro Asp Leu Arg Glu Leu
180 185 190
Ser Leu Lys Trp Cys Ile Gly Val Thr His Leu Gly Leu Asp Leu Leu
195 200 205
Ala Leu Lys Cys Asn Lys Leu Asn Ile Leu Asp Leu Ser Tyr Thr Met
210 215 220
Ile Val Lys Lys Cys Phe Pro Ala Ile Met Lys Leu Gln Ser Leu Gln
225 230 235 240
Val Leu Leu Leu Val Gly Cys Asn Gly Ile Asp Asp Asp Ala Leu Thr
245 250 255
Ser Leu Asp Gln Glu Cys Ser Lys Ser Leu Gln Val Leu Asp Met Ser
260 265 270
Asn Tyr Tyr Asn Val Thr His Val Gly Val Leu Ser Ile Val Lys Ala
275 280 285
Met Pro Asn Leu Leu Glu Leu Asn Leu Ser Tyr Cys Ser Pro Val Thr
290 295 300
Pro Ser Met Ser Ser Ser Phe Glu Met Ile His Lys Leu Gln Thr Leu
305 310 315 320
Lys Leu Asp Gly Cys Gln Phe Met Asp Asp Gly Leu Lys Ser Ile Gly
325 330 335
Lys Ser Cys Val Ser Leu Arg Glu Leu Ser Leu Ser Lys Cys Ser Gly
340 345 350
Val Thr Asp Thr Asp Leu Ser Phe Val Val Pro Arg Leu Lys Asn Leu
355 360 365
Leu Lys Leu Asp Val Thr Cys Cys Arg Lys Ile Thr Asp Val Ser Leu
370 375 380
Ala Ala Ile Thr Thr Ser Cys Pro Ser Leu Ile Ser Leu Arg Met Glu
385 390 395 400
Ser Cys Ser Leu Val Ser Ser Lys Gly Leu Gln Leu Ile Gly Arg Arg
405 410 415
Cys Thr His Leu Glu Glu Leu Asp Leu Thr Asp Thr Asp Leu Asp Asp
420 425 430
Glu Gly Leu Lys Ala Leu Ser Gly Cys Ser Lys Leu Ser Ser Leu Lys
435 440 445
Ile Gly Ile Cys Leu Arg Ile Thr Asp Glu Gly Leu Arg His Val Ser
450 455 460
Lys Ser Cys Pro Asp Leu Arg Asp Ile Asp Leu Tyr Arg Ser Gly Ala
465 470 475 480
Ile Ser Asp Glu Gly Val Thr His Ile Ala Gln Gly Cys Pro Met Leu
485 490 495
Glu Ser Ile Asn Leu Ser Tyr Cys Thr Lys Leu Thr Asp Cys Ser Leu
500 505 510
Arg Ser Leu Ser Lys Cys Ile Lys Leu Asn Thr Leu Glu Ile Arg Gly
515 520 525
Cys Pro Met Val Ser Ser Ala Gly Leu Ser Glu Ile Ala Thr Gly Cys
530 535 540
Arg Leu Leu Ser Lys Leu Asp Ile Lys Lys Cys Phe Glu Ile Asn Asp
545 550 555 560
Met Gly Met Ile Phe Leu Ser Gln Phe Ser His Asn Leu Arg Gln Ile
565 570 575
Asn Leu Ser Tyr Cys Ser Val Thr Asp Ile Gly Leu Ile Ser Leu Ser
580 585 590
Ser Ile Cys Gly Leu Gln Asn Met Thr Ile Val His Leu Ala Gly Val
595 600 605
Thr Pro Asn Gly Leu Ile Ala Ala Leu Met Val Cys Gly Leu Arg Lys
610 615 620
Val Lys Leu His Glu Ala Phe Lys Ser Met Val Pro Ser His Met Leu
625 630 635 640
Lys Val Val Glu Ala Arg Gly Cys Leu Phe Gln Trp Ile Asn Lys Pro
645 650 655
Tyr Gln Val Ala Val Glu Pro Cys Asp Val Trp Lys Gln Gln Ser Gln
660 665 670
Asp Leu Leu Val Gln
675
<210> 38
<211> 677
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 38
Met Ala Ser Pro Ala Pro Thr His His Ala Lys Arg Arg Arg Leu Ala
1 5 10 15
Leu Pro Pro Pro Pro Pro Pro His Leu Asn Asp Leu Ala Asp Glu Leu
20 25 30
Leu Phe Leu Ile Leu Asp Arg Ala Ala Ala His Asp Pro Arg Ala Leu
35 40 45
Lys Ser Phe Ser Leu Val Ser Arg Ala Cys His Ala Ala Glu Ser Arg
50 55 60
His Arg Arg Val Leu Arg Pro Phe Arg Pro Asp Leu Leu Pro Ala Ala
65 70 75 80
Leu Ala Arg Tyr Pro Ala Ile Ser His Leu Asp Leu Ser Leu Cys Pro
85 90 95
Arg Leu Pro Asp Ala Ala Leu Ala Ala Leu Pro Ala Ala Pro Phe Val
100 105 110
Ser Ala Val Asp Leu Ser Arg Ser Arg Gly Phe Gly Ala Ala Gly Leu
115 120 125
Ala Ala Leu Val Ala Ala Phe Pro Asn Leu Thr Asp Leu Asp Leu Ser
130 135 140
Asn Gly Leu Asp Leu Gly Asp Ala Ala Ala Ala Glu Val Ala Lys Ala
145 150 155 160
Arg Arg Leu Gln Arg Leu Ser Leu Ser Arg Cys Lys Arg Ile Thr Asp
165 170 175
Met Gly Leu Gly Cys Ile Ala Val Gly Cys Pro Asp Leu Arg Glu Leu
180 185 190
Ser Leu Lys Trp Cys Ile Gly Val Thr His Leu Gly Leu Asp Leu Leu
195 200 205
Ala Leu Lys Cys Asn Lys Leu Asn Ile Leu Asp Leu Ser Tyr Thr Met
210 215 220
Ile Val Lys Lys Cys Phe Pro Ala Ile Met Lys Leu Gln Asn Leu Gln
225 230 235 240
Val Leu Leu Leu Val Gly Cys Asn Gly Ile Asp Asp Asp Ala Leu Thr
245 250 255
Ser Leu Asp Gln Glu Cys Ser Lys Ser Leu Gln Val Leu Asp Met Ser
260 265 270
Asn Ser Tyr Asn Val Thr His Val Gly Val Leu Ser Ile Val Lys Ala
275 280 285
Met Pro Asn Leu Leu Glu Leu Asn Leu Ser Tyr Cys Ser Pro Val Thr
290 295 300
Pro Ser Met Ser Ser Ser Phe Glu Met Ile His Lys Leu Gln Lys Leu
305 310 315 320
Lys Leu Asp Gly Cys Gln Phe Met Asp Asp Gly Leu Lys Ser Ile Gly
325 330 335
Lys Ser Cys Val Ser Leu Arg Glu Leu Ser Leu Ser Lys Cys Ser Gly
340 345 350
Val Thr Asp Thr Asp Leu Ser Phe Val Val Pro Arg Leu Lys Asn Leu
355 360 365
Leu Lys Leu Asp Val Thr Cys Cys Arg Lys Ile Thr Asp Val Ser Leu
370 375 380
Ala Ala Ile Thr Thr Ser Cys Pro Ser Leu Ile Ser Leu Arg Met Glu
385 390 395 400
Ser Cys Ser Leu Val Ser Ser Lys Gly Leu Gln Leu Ile Gly Arg Arg
405 410 415
Cys Thr His Leu Glu Glu Leu Asp Leu Thr Asp Thr Asp Leu Asp Asp
420 425 430
Glu Gly Leu Lys Ala Leu Ser Gly Cys Ser Lys Leu Ser Ser Leu Lys
435 440 445
Ile Gly Ile Cys Leu Arg Ile Thr Asp Glu Gly Leu Arg His Val Ser
450 455 460
Lys Ser Cys Pro Asp Leu Arg Asp Ile Asp Leu Tyr Arg Ser Gly Ala
465 470 475 480
Ile Ser Asp Glu Gly Val Thr His Ile Ala Gln Gly Cys Pro Met Leu
485 490 495
Glu Ser Ile Asn Met Ser Tyr Cys Thr Lys Leu Thr Asp Cys Ser Leu
500 505 510
Arg Ser Leu Ser Lys Cys Ile Lys Leu Asn Thr Leu Glu Ile Arg Gly
515 520 525
Cys Pro Met Val Ser Ser Ala Gly Leu Ser Glu Ile Ala Thr Gly Cys
530 535 540
Arg Leu Leu Ser Lys Leu Asp Ile Lys Lys Cys Phe Glu Ile Asn Asp
545 550 555 560
Met Gly Met Ile Phe Leu Ser Gln Phe Ser His Asn Leu Arg Gln Ile
565 570 575
Asn Leu Ser Tyr Cys Ser Val Thr Asp Ile Gly Leu Ile Ser Leu Ser
580 585 590
Ser Ile Cys Gly Leu Gln Asn Met Thr Ile Val His Leu Ala Gly Val
595 600 605
Thr Pro Asn Gly Leu Ile Ala Ala Leu Met Val Cys Gly Leu Arg Lys
610 615 620
Val Lys Leu His Glu Ala Phe Lys Ser Met Val Pro Ser His Met Leu
625 630 635 640
Lys Val Val Glu Ala Arg Gly Cys Leu Phe Gln Trp Ile Asn Lys Pro
645 650 655
Tyr Gln Val Ala Val Glu Pro Cys Asp Val Trp Lys Gln Gln Ser Gln
660 665 670
Asp Leu Leu Val Gln
675
<210> 39
<211> 692
<212> PRT
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 39
Met Ala Met Ala Ala Gln Gln His Arg His His Lys Arg Arg Arg Ile
1 5 10 15
Ala Leu Ser Pro Ser Pro Ser Pro Ser Leu Ala Pro Ile Pro Gly Ala
20 25 30
Pro Thr Pro Pro Leu Asp Ser Leu Ala Asp Glu Leu Leu Phe Leu Val
35 40 45
Leu Asp Arg Val Ala Gln Ala Asp Pro Arg Ala Leu Lys Ser Phe Ala
50 55 60
Leu Ala Ser Arg Ala Cys His Ala Ala Glu Ser Arg His Arg Arg Thr
65 70 75 80
Leu Arg Pro Leu Arg Ala Asp Leu Leu Pro Ala Ala Leu Ala Arg Tyr
85 90 95
Pro Ser Ala Thr Arg Leu Asp Leu Thr Leu Cys Ala Arg Val Pro Asp
100 105 110
Ala Ala Leu Ala Ser Ala Ala Val Ser Gly Ser Ser Ala Leu Arg Ala
115 120 125
Val Asp Leu Ser Arg Ser Arg Gly Phe Gly Ala Ala Gly Val Ala Ala
130 135 140
Leu Ala Ala Ala Cys Pro Asp Leu Ala Asp Leu Asp Leu Ser Asn Gly
145 150 155 160
Val His Leu Gly Asp Ala Ala Ala Ala Glu Val Ala Arg Ala Arg Ala
165 170 175
Leu Arg Arg Leu Ser Leu Val Arg Trp Lys Pro Leu Thr Asp Met Gly
180 185 190
Leu Gly Cys Val Ala Val Gly Cys Thr Glu Leu Lys Asp Leu Ser Leu
195 200 205
Lys Trp Cys Leu Gly Leu Thr Asp Leu Gly Ile Gln Leu Leu Ala Leu
210 215 220
Lys Cys Arg Lys Leu Thr Ser Leu Asp Leu Ser Tyr Thr Met Ile Thr
225 230 235 240
Lys Asp Ser Leu Pro Ser Ile Met Lys Leu Pro Asn Leu Gln Glu Leu
245 250 255
Thr Leu Val Gly Cys Ile Gly Ile Asp Asp Gly Ala Leu Val Ser Leu
260 265 270
Glu Arg Glu Cys Ser Lys Ser Leu Gln Val Leu Asp Met Ser Gln Cys
275 280 285
Gln Asn Ile Thr Asp Val Gly Val Ser Ser Ile Leu Lys Ser Val Pro
290 295 300
Asn Leu Leu Glu Leu Asp Leu Ser Tyr Cys Cys Pro Val Thr Pro Ser
305 310 315 320
Met Val Arg Asn Phe Gln Lys Leu Pro Lys Leu Gln Ala Leu Lys Leu
325 330 335
Glu Gly Cys Lys Phe Met Ala Asn Gly Leu Lys Ala Ile Gly Thr Ser
340 345 350
Cys Val Ser Leu Arg Glu Leu Ser Leu Ser Lys Ser Ser Gly Val Thr
355 360 365
Asp Thr Glu Leu Ser Phe Val Val Ser Arg Leu Lys Asn Leu Leu Lys
370 375 380
Leu Asp Ile Thr Cys Cys Arg Ser Ile Thr Asp Val Ser Leu Ala Ala
385 390 395 400
Ile Thr Ser Ser Cys Thr Ser Leu Ile Ser Leu Arg Met Glu Ser Cys
405 410 415
Ser His Val Ser Ser Gly Ala Leu Gln Leu Ile Gly Lys His Cys Ser
420 425 430
His Leu Glu Glu Leu Asp Leu Thr Asp Ser Asp Leu Asp Asp Glu Gly
435 440 445
Leu Lys Ala Leu Ala Arg Cys Ser Glu Leu Ser Ser Leu Lys Ile Gly
450 455 460
Ile Cys Leu Lys Ile Ser Asp Glu Gly Leu Ser His Ile Gly Arg Ser
465 470 475 480
Cys Pro Lys Leu Arg Glu Ile Asp Leu Tyr Arg Cys Gly Val Ile Ser
485 490 495
Asp Asp Gly Ile Ile Gln Ile Ala Gln Gly Cys Pro Met Leu Glu Ser
500 505 510
Ile Asn Leu Ser Tyr Cys Thr Glu Ile Thr Asp Arg Ser Leu Ile Ser
515 520 525
Leu Ser Lys Cys Ala Lys Leu Asn Thr Leu Glu Ile Arg Gly Cys Pro
530 535 540
Ser Val Ser Ser Ile Gly Leu Ser Glu Ile Ala Met Gly Cys Arg Leu
545 550 555 560
Leu Ser Lys Leu Asp Ile Lys Lys Cys Phe Gly Ile Asn Asp Val Gly
565 570 575
Met Leu Tyr Leu Ser Gln Phe Ala His Ser Leu Arg Gln Ile Asn Leu
580 585 590
Ser Tyr Cys Ser Val Thr Asp Val Gly Leu Leu Ser Leu Ser Ser Ile
595 600 605
Ser Gly Leu Gln Asn Met Thr Ile Val His Leu Ala Gly Ile Thr Pro
610 615 620
Asn Gly Leu Thr Ala Thr Leu Met Val Cys Gly Gly Leu Thr Lys Val
625 630 635 640
Lys Leu His Glu Ala Phe Arg Ser Met Met Pro Pro His Thr Ile Lys
645 650 655
Asn Val Glu Ala Arg Gly Cys Val Phe Gln Trp Ile Asp Lys Pro Phe
660 665 670
Lys Val Glu Val Glu Pro Cys Asp Val Trp Lys Gln Gln Ser Gln Asp
675 680 685
Val Leu Val Arg
690
<210> 40
<211> 454
<212> PRT
<213> 大麦(Hordeum vulgare)
<400> 40
Ile Ser Lys Asp Cys Leu Pro Ala Ile Met Glu Leu Pro Asn Leu Glu
1 5 10 15
Val Leu Ala Leu Val Gly Cys Val Gly Ile Asp Asp Asp Ala Leu Ser
20 25 30
Gly Leu Glu Asn Glu Ser Ser Lys Ser Leu Arg Val Leu Asp Met Ser
35 40 45
Thr Cys Arg Asn Val Thr His Thr Gly Val Ser Ser Val Val Lys Ala
50 55 60
Leu Pro Asn Leu Leu Glu Leu Asn Leu Ser Tyr Cys Cys Asn Val Thr
65 70 75 80
Ala Ser Met Gly Lys Cys Phe Gln Met Leu Pro Lys Leu Gln Thr Leu
85 90 95
Lys Leu Glu Gly Cys Lys Phe Met Ala Asp Gly Leu Lys His Ile Gly
100 105 110
Ile Ser Cys Val Ser Leu Arg Glu Leu Ser Leu Ser Lys Cys Ser Gly
115 120 125
Val Thr Asp Thr Asp Leu Ser Phe Val Val Ser Arg Leu Lys Asn Leu
130 135 140
Leu Lys Leu Asp Ile Thr Cys Asn Arg Asn Ile Thr Asp Val Ser Leu
145 150 155 160
Ala Ala Ile Thr Ser Ser Cys His Ser Leu Ile Ser Leu Arg Ile Glu
165 170 175
Ser Cys Ser His Phe Ser Ser Glu Gly Leu Arg Leu Ile Gly Lys Arg
180 185 190
Cys Cys His Leu Glu Glu Leu Asp Ile Thr Asp Ser Asp Leu Asp Asp
195 200 205
Glu Gly Leu Lys Ala Leu Ser Gly Cys Ser Lys Leu Ser Ser Leu Lys
210 215 220
Ile Gly Ile Cys Met Arg Ile Ser Asp Gln Gly Leu Ile His Ile Gly
225 230 235 240
Lys Ser Cys Pro Glu Leu Arg Asp Ile Asp Leu Tyr Arg Ser Gly Gly
245 250 255
Ile Ser Asp Glu Gly Val Thr Gln Ile Ala Gln Gly Cys Pro Met Leu
260 265 270
Glu Ser Ile Asn Leu Ser Tyr Cys Thr Glu Ile Thr Asp Val Ser Leu
275 280 285
Met Ser Leu Ser Lys Cys Ala Lys Leu Asn Thr Leu Glu Ile Arg Gly
290 295 300
Cys Pro Ser Ile Ser Ser Ala Gly Leu Ser Glu Ile Ala Ile Gly Cys
305 310 315 320
Arg Leu Leu Ala Lys Leu Asp Val Lys Lys Cys Phe Ala Ile Asn Asp
325 330 335
Val Gly Met Phe Phe Leu Ser Gln Phe Ser His Ser Leu Arg Gln Ile
340 345 350
Asn Leu Ser Tyr Cys Ser Val Thr Asp Ile Gly Leu Leu Ser Leu Ser
355 360 365
Ser Ile Cys Gly Leu Gln Asn Met Thr Ile Val His Leu Ala Gly Ile
370 375 380
Thr Pro Asn Gly Leu Leu Ala Ala Leu Met Val Ser Gly Gly Leu Thr
385 390 395 400
Arg Val Lys Leu His Ala Ala Phe Arg Ser Met Met Pro Pro His Met
405 410 415
Leu Lys Val Val Glu Ala Arg Gly Cys Ala Phe Gln Trp Ile Asp Lys
420 425 430
Pro Phe Lys Val Glu Gln Glu Arg Cys Asp Ile Trp Gln Gln Gln Ser
435 440 445
Arg Asp Val Leu Val Arg
450
<210> 41
<211> 668
<212> PRT
<213> 芸薹属(Brassica rapa)
<400> 41
Met Lys Lys Ala Lys Gln Ile Gln His Met Ile Ser Lys Pro Phe Asp
1 5 10 15
Leu Leu Ser Glu Glu Leu Val Phe Ile Ile Leu Asp Leu Val Ala Gln
20 25 30
Asn Pro Ser Asp Leu Lys Ser Phe Ser Leu Thr Cys Lys Trp Phe Tyr
35 40 45
Gln Val Glu Ala Arg His Arg Arg Ser Leu Lys Pro Leu Arg Ala Glu
50 55 60
Tyr Leu Pro Arg Ile Leu Thr Arg Tyr Arg Asn Thr Ala Asp Leu Asp
65 70 75 80
Leu Ser Phe Cys Pro Arg Val Thr Asp Tyr Ala Leu Ser Val Val Gly
85 90 95
Cys Leu Ser Gly Pro Thr Leu Arg Ser Val Asp Leu Ser Arg Ser Phe
100 105 110
Ser Phe Ser Ala Ala Gly Leu Leu Arg Leu Ala Val Lys Cys Val Ser
115 120 125
Leu Val Glu Ile Asp Leu Ser Asn Ala Thr Glu Met Arg Asp Ala Ala
130 135 140
Ala Ala Val Val Ala Glu Ala Lys Ser Leu Glu Arg Leu Lys Leu Gly
145 150 155 160
Arg Cys Lys Lys Leu Thr Asp Met Gly Ile Gly Cys Ile Ala Val Gly
165 170 175
Cys Arg Lys Leu Lys Arg Val Ser Leu Lys Trp Cys Val Gly Val Gly
180 185 190
Asp Leu Gly Val Gly Leu Leu Ala Val Lys Cys Lys Asp Ile Arg Ser
195 200 205
Leu Asp Leu Ser Tyr Leu Pro Ile Thr Gly Lys Cys Leu His Asp Val
210 215 220
Leu Lys Leu Gln His Leu Glu Glu Leu Leu Leu Gln Gly Cys Phe Gly
225 230 235 240
Val Asp Asp Asp Ser Leu Lys Ser Leu Thr His His Cys Asn Ser Leu
245 250 255
Lys Asn Leu Asp Ala Ser Ser Cys Gln Asn Leu Thr Gln Arg Gly Leu
260 265 270
Thr Ser Leu Leu Ser Gly Ala Gly Cys Leu Glu Arg Leu Asp Leu Ala
275 280 285
His Ser Ser Ser Val Ile Ser Leu Asp Phe Ala Ser Ser Leu Asn Lys
290 295 300
Val Ser Ser Ala Leu Gln Ser Ile Arg Leu Asp Gly Cys Ala Val Thr
305 310 315 320
Cys Asp Gly Leu Lys Ala Ile Gly Thr Leu Cys Ile Ser Leu Arg Glu
325 330 335
Val Ser Leu Ser Lys Cys Val Thr Val Thr Asp Glu Gly Leu Ser Cys
340 345 350
Leu Val Met Lys Leu Lys Asp Leu Arg Lys Leu Asp Ile Thr Cys Cys
355 360 365
Arg Lys Leu Thr Gly Val Ser Ile Thr Gln Val Ala Ser Ser Cys Pro
370 375 380
Leu Leu Val Ser Leu Lys Met Glu Ser Cys Ser Leu Val Ser Arg Asp
385 390 395 400
Ala Phe Trp Leu Ile Gly His Lys Cys Arg Leu Leu Glu Glu Leu Asp
405 410 415
Phe Thr Asp Asn Glu Ile Asp Asp Glu Gly Leu Lys Ser Ile Ser Ser
420 425 430
Cys Arg Ser Leu Ser Ser Leu Lys Leu Gly Ile Cys Leu Asn Ile Thr
435 440 445
Asp Arg Gly Leu Ser Tyr Ile Gly Met Gly Cys Ser Asn Leu Arg Glu
450 455 460
Leu Asp Leu Tyr Arg Ser Val Gly Ile Thr Asp Val Gly Ile Ser Ser
465 470 475 480
Ile Ala Gln Gly Cys Cys His Leu Glu Thr Ile Asn Ile Ser Tyr Cys
485 490 495
Lys Asp Ile Thr Asp Lys Ser Leu Val Ser Leu Ser Lys Cys Ser Met
500 505 510
Leu Gln Thr Phe Glu Ser Arg Gly Cys Pro His Ile Thr Cys Gln Gly
515 520 525
Leu Ala Ala Ile Ala Val Arg Cys Lys Arg Leu Ser Lys Leu Asp Leu
530 535 540
Lys Lys Cys Pro Phe Ile Asn Asp Ser Gly Leu Leu Thr Leu Ala His
545 550 555 560
Phe Ser Gln Gly Leu Lys Gln Ile Ser Val Ser Glu Thr Gly Val Thr
565 570 575
Asp Val Gly Leu Val Ser Leu Ala Asn Ile Gly Cys Leu Gln Asn Ile
580 585 590
Ala Ala Val Asn Thr Arg Gly Leu Ser Pro Ser Gly Val Ala Ala Ala
595 600 605
Leu Val Gly Cys Gly Gly Leu Arg Lys Val Lys Leu His Ala Ser Leu
610 615 620
Arg Ser Leu Leu Pro Ser Ser Leu Ile Asn His Met Glu Ala Arg Gly
625 630 635 640
Cys Ser Phe Leu Trp Lys Asp Tyr Asn Asn His Asn Asn Ser Asn Thr
645 650 655
Leu Gln Ala Glu Leu Asp Pro Lys Tyr Trp Lys Val
660 665
<210> 42
<211> 708
<212> PRT
<213> 大豆(Glycine max)
<400> 42
Met Ser Arg Ile Tyr Ser Ser Asn Ile Glu Thr Lys Gln Thr Asn Pro
1 5 10 15
Ser Leu Leu Ser Pro Gln Leu Phe Ile Ile Asn Leu Gln Asn Asp Gln
20 25 30
Pro Asn Ala Lys Arg Arg Thr Met Lys Lys Gln Lys Leu Ser Glu Pro
35 40 45
Gln Asn Asp Thr Thr Asn Pro Phe Glu Val Leu Ser Glu Glu Leu Met
50 55 60
Phe Val Ile Leu Asp Phe Leu Gln Thr Thr Ser Leu Asp Lys Lys Ser
65 70 75 80
Phe Ser Leu Thr Cys Lys Leu Phe Tyr Ser Val Glu Ala Lys His Arg
85 90 95
Arg Leu Leu Arg Pro Leu Arg Ala Glu His Leu Pro Ala Leu Ala Ala
100 105 110
Arg Tyr Pro Asn Val Thr Glu Leu Asp Leu Ser Leu Cys Pro Arg Val
115 120 125
Gly Asp Gly Ala Leu Gly Leu Val Ala Gly Ala Tyr Ala Ala Thr Leu
130 135 140
Arg Arg Met Asp Leu Ser Arg Ser Arg Arg Phe Thr Ala Thr Gly Leu
145 150 155 160
Leu Ser Leu Gly Ala Arg Cys Glu His Leu Val Glu Leu Asp Leu Ser
165 170 175
Asn Ala Thr Glu Leu Arg Asp Ala Gly Val Ala Ala Val Ala Arg Ala
180 185 190
Arg Asn Leu Arg Lys Leu Trp Leu Ala Arg Cys Lys Met Val Thr Asp
195 200 205
Met Gly Ile Gly Cys Ile Ala Val Gly Cys Arg Lys Leu Arg Leu Leu
210 215 220
Cys Leu Lys Trp Cys Val Gly Ile Gly Asp Leu Gly Val Asp Leu Val
225 230 235 240
Ala Ile Lys Cys Lys Glu Leu Thr Thr Leu Asp Leu Ser Tyr Leu Pro
245 250 255
Ile Thr Glu Lys Cys Leu Pro Ser Ile Phe Lys Leu Gln His Leu Glu
260 265 270
Asp Leu Val Leu Glu Gly Cys Phe Gly Ile Asp Asp Asp Ser Leu Asp
275 280 285
Val Asp Leu Leu Lys Gln Gly Cys Lys Thr Leu Lys Arg Leu Asp Ile
290 295 300
Ser Gly Cys Gln Asn Ile Ser His Val Gly Leu Ser Lys Leu Thr Ser
305 310 315 320
Ile Ser Gly Gly Leu Glu Lys Leu Ile Leu Ala Asp Gly Ser Pro Val
325 330 335
Thr Leu Ser Leu Ala Asp Gly Leu Asn Lys Leu Ser Met Leu Gln Ser
340 345 350
Ile Val Leu Asp Gly Cys Pro Val Thr Ser Glu Gly Leu Arg Ala Ile
355 360 365
Gly Asn Leu Cys Ile Ser Leu Arg Glu Leu Ser Leu Ser Lys Cys Leu
370 375 380
Gly Val Thr Asp Glu Ala Leu Ser Phe Leu Val Ser Lys His Lys Asp
385 390 395 400
Leu Arg Lys Leu Asp Ile Thr Cys Cys Arg Lys Ile Thr Asp Val Ser
405 410 415
Ile Ala Ser Ile Ala Asn Ser Cys Thr Gly Leu Thr Ser Leu Lys Met
420 425 430
Glu Ser Cys Thr Leu Val Pro Ser Glu Ala Phe Val Leu Ile Gly Gln
435 440 445
Lys Cys His Tyr Leu Glu Glu Leu Asp Leu Thr Asp Asn Glu Ile Asp
450 455 460
Asp Glu Gly Leu Met Ser Ile Ser Ser Cys Ser Trp Leu Thr Ser Leu
465 470 475 480
Lys Ile Gly Ile Cys Leu Asn Ile Thr Asp Arg Gly Leu Ala Tyr Val
485 490 495
Gly Met Arg Cys Ser Lys Leu Lys Glu Leu Asp Leu Tyr Arg Ser Thr
500 505 510
Gly Val Asp Asp Leu Gly Ile Ser Ala Ile Ala Gly Gly Cys Pro Gly
515 520 525
Leu Glu Met Ile Asn Thr Ser Tyr Cys Thr Ser Ile Thr Asp Arg Ala
530 535 540
Leu Ile Ala Leu Ser Lys Cys Ser Asn Leu Glu Thr Leu Glu Ile Arg
545 550 555 560
Gly Cys Leu Leu Val Thr Ser Ile Gly Leu Ala Ala Ile Ala Met Asn
565 570 575
Cys Arg Gln Leu Ser Arg Leu Asp Ile Lys Lys Cys Tyr Asn Ile Asp
580 585 590
Asp Ser Gly Met Ile Ala Leu Ala His Phe Ser Gln Asn Leu Arg Gln
595 600 605
Ile Asn Leu Ser Tyr Ser Ser Val Thr Asp Val Gly Leu Leu Ser Leu
610 615 620
Ala Asn Ile Ser Cys Leu Gln Ser Phe Thr Leu Leu His Leu Gln Gly
625 630 635 640
Leu Val Pro Gly Gly Leu Ala Ala Ala Leu Leu Ala Cys Gly Gly Leu
645 650 655
Thr Lys Val Lys Leu His Leu Ser Leu Arg Ser Leu Leu Pro Glu Leu
660 665 670
Leu Ile Arg His Val Glu Ala Arg Gly Cys Val Phe Glu Trp Arg Asp
675 680 685
Lys Glu Phe Gln Ala Glu Leu Asp Pro Lys Cys Trp Lys Leu Gln Leu
690 695 700
Glu Asp Val Ile
705
<210> 43
<211> 2485
<212> DNA
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400> 43
gggttttttc caaaatcctc aaagagagac tatacttctc tcggatcctt cctgatttca 60
aaatttcttc aacccaccag cagcagcagc agatgaagaa ggttaaacag attcgtgtct 120
taaagccttt cgatcttctc tcggaagagc tcgtctttat catccttgac ctcatctctc 180
ccaacccttc cgatctcaaa tccttctctc ttacttgcaa atctttctac cagctcgagt 240
ccaagcaccg cggatcctta aaacctctcc gctccgacta tctccctcgc atcttgactc 300
gttaccggaa caccaccgat ctcgatctta ccttctgccc gcgtgtcact gactacgcgc 360
ttagcgtcgt tggctgtctc tccggaccta cgcttcgctc cctcgacctc tcgcgctctg 420
gctccttctc cgccgcggga ctactgcgat tggccctcaa atgtgtcaat ttagtcgaga 480
ttgacctgtc caatgcgacg gagatgagag acgccgatgc tgcggtggtg gcggaggcga 540
ggagtctgga gaggctgaag ctgggcagat gcaagatgct gacggacatg ggaatcggat 600
gtatagcagt tggatgtaag aagctcaata cggttagctt gaaatggtgt gttggcgtcg 660
gagatttagg ggttggcttg cttgccgtca aatgcaagga cattcgcacc ttagacctct 720
cctacttgcc gatcacagga aagtgtttac atgacattct gaaacttcaa caccttgaag 780
aacttcttct agaagggtgc tttggagtag atgatgacag tcttaaatca ctcagacatg 840
attgcaagtc attgaagaag cttgatgcat ccagctgcca gaatttaact catagaggtt 900
taacctcact tttaagcggg gcaggatatc ttcagcgact tgatctatca cactgttctt 960
ctgtgatatc attggatttt gcgagtagct taaagaaggt ttcagcatta cagtcgatca 1020
ggttggatgg ttgttctgtt acgcctgatg gtttgaaggc gataggcaca ttgtgcaatt 1080
ccctgaaaga ggttagccta agcaaatgcg tgagcgtaac tgatgaaggt ctttcttctc 1140
tagtaatgaa actgaaagac ctcagaaaac ttgacatcac atgttgccgg aaactaagta 1200
gagtttcaat cacccaaatc gccaattcgt gtcctttact agtctctttg aagatggagt 1260
cttgttctct tgtttccaga gaagcctttt ggttgatcgg acaaaagtgt cggctacttg 1320
aagagcttga cttaactgac aacgagattg atgatgaagg actgaaatcc atatctagtt 1380
gtctgagtct ttcctcgtta aagctgggaa tttgtcttaa cataacagac aaagggctct 1440
cgtacatcgg gatgggctgt tcaaatctcc gtgaacttga tctctatagg tcagtgggaa 1500
taacagacgt aggcatctcc acaattgccc aaggctgcat tcatctggaa acaataaaca 1560
tttcatactg ccaagacata acagacaagt ccctggtttc attgtccaaa tgctcgttgt 1620
tacaaacatt cgagagcagg ggatgtccta acatcacgtc ccaaggactt gcagccattg 1680
ctgttcggtg caagcgactc gccaaggttg acttgaagaa gtgcccatcc atcaatgatg 1740
cggggttgct cgctctggct cacttctctc agaatctcaa acagataaac gtgtcagaca 1800
cagctgtgac tgaagtggga cttctctccc tagccaacat agggtgttta cagaacatag 1860
cggttgtgaa ctcgagtggt ttaagaccga gcggagtagc agcagcattg ctggggtgtg 1920
gaggattaag gaaagcgaaa ctacatgcgt ccctaagatc actgcttcct ctttctctaa 1980
tccaccactt ggaagctcgt ggttgtgcgt tcctctggaa agacaatacc cttcaggcgg 2040
agttagatcc caagtactgg aagcaacagc tggaagagat ggcgccttaa attaaaagtg 2100
agaagaaaca ttctgaaatg ggaaagagga gttcctatgg gagccagcag acaggccctg 2160
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catggtaccg ttgtatatgt agtttttgtt tctttttttt ttttttttgg ttggggagcc 2340
gaaattaacg gacgtaacag agtcacaagg ggatgccttc tctgtgcctt tttgactttt 2400
tcctcctttc ttttttttct gtaatcatat gagttttatg taatttaatg cctcatcaac 2460
ttgcctggat agggccggcc tttcc 2485
<210> 44
<211> 2452
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 44
attattacta ccttcccttc ccttcttctt gttgcagtca acctcgccat ggcctcgcct 60
atgccaacgc ctacccaccg cgtcaagcgc cgccgcctcg acctctcccc gcccccgcac 120
ctcaacgacc tcgccgacga gctcctcttc ctcatcctcg accgtgccgc cgcccatgac 180
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ctagacctcc tcgccctcaa gtgcaacaag ctcaacatcc tggatctctc ctacaccatg 720
attgtaaaaa aatgctttcc agccatcatg aagctacaaa gtctacaagt gttactactg 780
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tgccaattca tggatgatgg attaaaatcc attgggaaat cctgtgtttc tttgagggag 1080
ttaagtctga gcaaatgttc tggagtgaca gacacagatc tttcttttgt cgtgccaaga 1140
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gtttccagca aaggactaca gctgattgga aggcgctgca ctcacttgga ggaattggat 1320
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ggggttactc atatagctca aggatgccca atgttagagt ctatcaattt gtcctactgc 1560
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aggctacttt ctaagcttga tatcaagaaa tgctttgaga tcaatgacat gggaatgatt 1740
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gacattgggc ttatatccct ttcaagcata tgtggcttgc agaacatgac cattgtgcat 1860
ttagcgggtg ttacgcctaa tggactgata gctgctctta tggtctgtgg tttgagaaaa 1920
gtgaagcttc atgaagcatt caaatccatg gtgccatcac atatgctcaa agttgttgaa 1980
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gttgtggaaa ctggggcgtg ttttgtggtg ttgaatttat ctagagcaat atctccagtc 2160
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<210> 45
<211> 2463
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 45
gccaaacgcc caccattatt actaccttcc cttcccttct ctcgtttcag tcaacttcgc 60
catggcctcg cctgcgccca cccaccacgc caagcgccgc cgcctcgccc tgcccccgcc 120
cccgcccccg cacctcaacg acctcgccga cgagctcctc ttcctcatcc tcgaccgtgc 180
cgccgcccat gacccacgcg ccctcaagtc cttctccctc gtctcccgcg cctgccacgc 240
cgccgagtcg cgccaccgcc gcgtcctccg ccccttccgc cccgacctcc tccccgccgc 300
gctcgcccgc taccccgcca tctcccacct cgatctctcc ctctgccccc gcctccccga 360
cgccgccctc gccgcgctcc ccgccgcgcc gttcgtctcc gccgtcgacc tctcccgctc 420
ccgcgggttc ggcgccgccg gcctcgccgc gctcgtcgcc gcgttcccca atctcacgga 480
cctcgacctc tccaatggcc tcgacctcgg ggatgccgcg gcggcggagg tggccaaggc 540
gcgccgcctc cagaggctct cgctgtcgcg atgcaagcgc atcactgaca tggggctcgg 600
atgcatcgcc gtcggatgcc ccgacctgcg cgagctctcg ctcaagtggt gcatcggggt 660
cactcatctg ggactagacc tccttgccct caagtgcaac aagctcaaca tcctggatct 720
ctcctacacc atgatagtaa aaaaatgctt tccagccatc atgaagctac aaaatctaca 780
agtgttacta ctggtgggat gtaatggaat tgatgatgat gcccttacta gtcttgatca 840
agaatgcagc aaatcactac aggttcttga tatgtcaaac tcttacaatg tcactcatgt 900
cggtgttctg tccattgtga aggcaatgcc gaatctgttg gaactcaatc tatcatactg 960
ctctcctgtt actccttcta tgtcaagcag cttcgaaatg attcataaat tgcagaaact 1020
gaagctggat ggttgccaat tcatggatga tggattaaaa tccattggga aatcctgtgt 1080
ttctttgagg gagttaagtc tgagcaaatg ttctggagtg acagacacag acctttcttt 1140
tgtcgtgcca agactgaaaa atttgctgaa gctggatgtt acttgttgtc gcaaaatcac 1200
tgatgtttca ttagctgcca tcacaacctc atgcccatcc ctcatctctc tgagaatgga 1260
gtcctgtagc cttgtttcca gcaaaggact acagctgatt ggaaggcgct gcactcactt 1320
ggaggaattg gatcttactg acactgattt ggatgatgaa ggtttgaaag ctctctctgg 1380
atgcagcaaa ctttcaagcc taaaaattgg catatgcttg aggataactg atgagggcct 1440
tagacacgtt agcaagtcct gtccagatct ccgagatatc gatttgtaca ggtctggggc 1500
gatcagtgat gaaggggtta ctcatatagc tcaaggatgc ccaatgttag agtctatcaa 1560
tatgtcctac tgcacaaaat taacagactg ttcactgaga tcactttcaa aatgcataaa 1620
gctgaacaca ttggagattc gtggctgccc catggtttca tctgctggtc tctcggaaat 1680
tgcaacagga tgcaggctac tttctaagct tgatatcaag aaatgctttg agatcaatga 1740
catgggaatg attttccttt cccaattctc tcacaacctc cggcagataa acttgtcata 1800
ttgttcggtc accgacattg ggcttatatc cctttcaagc atatgtggct tgcagaacat 1860
gaccattgtg catttagcgg gtgttacgcc taatggactg atagctgctc ttatggtctg 1920
tggtttgaga aaagtgaagc ttcatgaagc attcaaatcc atggtgccat cacatatgct 1980
caaagttgtt gaagcccgtg gttgtctttt ccagtggatt aataaaccct accaggttgc 2040
ggtagaaccg tgtgacgtat ggaagcagca gtcgcaggat ttgcttgtac agtgaaatgt 2100
ttcaaagata aacgttgtgg aaactggggc gtgttttgtg gtgttgaatt tatcttagag 2160
caatatctcc agtcctagag aatgagctcc aaaagttttg tgccataact ggctgaatag 2220
tgtattgaat tactgacggt agtattgtca gaacaacata ctagtactgg tattttgctt 2280
gtatgccagt ggaggcgagg gaggttatat tcttgatgtg ttgtatatag cgcaggtagg 2340
aatcaacaat caaagagaga ttattggggt aaagcatgta gtaagtgtgg agtatgtgat 2400
atgccttgtt gtgccttttt gatgcacaat ttgattaatg gaatggaaca ttgcattcgc 2460
act 2463
<210> 46
<211> 2585
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 46
ctccatctcc atcgccggcc tccatttctt gcctcccgtg ccagccagtc actctcgtcc 60
gccgcagatc gagaagccac caccaccacc accaccaccg catggccatg gcagcccagc 120
agcaccggca ccacaagcgc cgccgcatcg ccctctcccc ctccccgtcc ccgtccctcg 180
cgcccatccc cggcgccccc acgccgccgc tcgactcgct ggccgacgag ctcctcttcc 240
tggtcctgga ccgcgtggcc caggccgacc cgcgggcgct caagtccttc gcgctggcct 300
cccgcgcctg ccacgccgcg gagtcacggc accgccggac gctccgcccg ctccgcgcgg 360
acctcctgcc cgccgcgctg gcgcggtacc cgtccgcgac ccgcctcgac ctcaccctct 420
gcgcgcgcgt ccccgacgcc gccctcgcct ccgccgccgt ctccggctcc tccgccctcc 480
gcgccgtcga cctctcccgc tcccgcgggt tcggcgccgc gggcgtcgcc gcgctcgccg 540
ccgcgtgccc ggacctcgcc gacctcgacc tctccaatgg ggtccacctc ggggacgccg 600
cggcggccga ggtagcgcgg gccagggcgc tgcggaggct ctcgctggtc cgctggaagc 660
cgctcaccga catgggcctc ggatgcgtcg ccgtcgggtg cacggagctg aaggacctct 720
cgctcaagtg gtgccttgga ctcacggatc tggggatcca gctcctcgcc ctcaagtgca 780
ggaagctcac cagcctggat ctctcctaca ccatgatcac aaaggatagc ttgccttcta 840
tcatgaagct acccaatctt caagagctga cactggtggg gtgtattgga atcgatgatg 900
gtgctcttgt tagtcttgag agagaatgca gtaaatcact acaggtgctt gatatgtctc 960
agtgtcagaa tatcaccgat gtaggagttt catccatcct gaagtcggta cccaatctat 1020
tggaactgga tctttcatac tgctgtcctg ttactccttc tatggtgaga aacttccaga 1080
agcttcctaa actgcaggcc ctgaagctgg aaggctgcaa attcatggcc aatggactaa 1140
aagccattgg gacctcttgt gtttctttaa gggagctaag tcttagcaag tcatctggag 1200
tgacagatac agaactctct tttgttgtgt caaggctaaa gaacctgctg aagctggaca 1260
ttacctgttg tcgcagtatt actgatgttt cactagcggc cataactagt tcgtgcactt 1320
ccctcatctc tctgaggatg gagtcttgta gccatgtttc cagtggagca ctccaactga 1380
ttgggaagca ctgttctcac ttggaagagt tggaccttac tgacagtgat ttggatgatg 1440
aaggattgaa agctcttgcc agatgtagcg aactttcgag cctaaaaatt ggcatttgct 1500
tgaagataag tgatgaaggt cttagccaca ttggaaggtc ttgcccaaaa ctccgcgaga 1560
ttgatttgta caggtgtgga gttattagcg atgatggaat tattcaaatt gcgcagggtt 1620
gtccgatgct agagtctatc aacctatcat actgcacaga aataacagac cgttcactga 1680
tttcactctc aaaatgcgca aagctgaata ctttggagat ccgtggctgc cccagtgttt 1740
catcgattgg gctctcagaa atagcgatgg ggtgcaggct gctttccaag cttgatatta 1800
agaaatgctt cgggattaat gatgttggaa tgctttacct ttcccagttc gctcatagcc 1860
tccgtcagat aaacttgtca tactgttcag tcaccgatgt tgggctcctt tccctttcta 1920
gcatatccgg cctgcagaac atgaccatcg tccatttggc gggtataaca cccaatggct 1980
tgacagcaac tcttatggtt tgcggtgggt tgacgaaagt gaagcttcat gaagcattca 2040
gatccatgat gcctcctcat acgataaaaa atgttgaggc acgtggctgt gttttccagt 2100
ggatcgataa accgttcaag gttgaggtgg agccttgtga tgtatggaag caacagtcac 2160
aagatgtgct tgtgcgatga gaatacagga gacctcgagc gtagccgcta tcgtggaaat 2220
cgtggcatgc atcgtatgga tggatgagtt gttgttggct ggcaatggca tccagaagtg 2280
aagtctgatg gggggagctc caaactcagc gttgtaatca gtgcgattcg gcacaaagat 2340
accagcattt gagcagaggt gtatgtatgt cttgatgttg ttttatactg ctatagatgt 2400
gtagatccca ttgtttggtg aggtgatcat ttgcgaggaa gttgactatt agcatgtatt 2460
aagataaaaa ggaaagagat gagaaaatgt ttttgaaatt tagtacgata tgccttgcag 2520
tgcctgtatc tgttgcattc atatttgtga tcagctggaa tgaagtggct tgcattcatg 2580
tttta 2585
<210> 47
<211> 2458
<212> DNA
<213> 大麦(Hordeum vulgare)
<400> 47
gaggttggcc gtggccagcc attgctactc ctccctccct tcttggtgtc gccgcagcgg 60
acaaccaact gccaacttgc cttgcccgtc atggccatgg cgacccacag ccacctcccc 120
aagcgccgac gcgtatgccc tgccgcgggc gcgccgatcg acgagctgcc cgacgagctc 180
ctcttcttgg tcctggaccg ggtggcggcc gccgatccgc gcgcgctcaa gtccttcgcg 240
ctggcctccc gcgcctgcca cgccgccgag tcgcgccacc gccgcgtgct ccgcccgtac 300
cgcgccgacc tactccgcgc cgcgcttgcc cgctacccca ccgccgcccg cctcgacctc 360
accctctgcg cgcgcgtgcc cggcgcggcc ctctcctccg cgcccgtgcc ttccctccgc 420
gccgtcgacc tctcccgctc ccgcggcttc ggggcgcccg gcctcgccgc gctcgtcgcc 480
gcctgccccg ccctggccga cctcgacctc tccaatgggg tcgacctcgg ggacgcggcg 540
gccgcggagc tggcgcgggc gcggggcctg cagaggctct gcctctcgcg ctgcaagccc 600
atcacggaca tgggcctcgg ctgcatcgcc gtcggctgcc cagacctgcg ggacctcacg 660
ctcaactggt gcctcgggat cacggatttg gggatccagc tcctcgccct caagtgcaac 720
aaactcagga acctgcatct ttcctacacc atggttagat ctccaaagac tgccttccag 780
ccatcatgga gctacccaat cttgaggtgt tggcactggt gggatgtgtt ggaatagatg 840
atgatgccct tagtggtctt gagaatgaaa gcagcaaatc actacgggtt ctcgatatgt 900
ctacctgtcg aaatgtcact catacgggag tttcatcagt tgtgaaggca ctgccaaatc 960
tcttggagtt gaatctgtcc tactgctgta atgttactgc atctatggga aaatgcttcc 1020
aaatgcttcc taaattgcag accttgaaat tggaaggctg caagttcatg gctgatggac 1080
taaaacacat tggaatttct tgtgtctctt taagagagtt gagcctgagc aagtgctcag 1140
gagtgacaga tactgatctg tctttcgttg tgtcaagact aaagaatttg ctgaagctgg 1200
acattacttg caatcgcaat atcactgatg tttcgttagc tgccatcact agctcatgcc 1260
attccctcat ctctctaaga atagagtcct gtagccattt ttctagtgaa gggctccgac 1320
ttattgggaa gcgatgttgc catttggaag agttggatat caccgacagt gatttggacg 1380
atgaaggttt gaaagctttg tctggatgca gcaaactgtc aagcttaaaa attggaatat 1440
gcatgaggat aagtgaccaa ggccttatcc acattgggaa gtcttgtcca gaactccgag 1500
atattgattt gtataggtct gggggtatta gtgatgaggg ggttactcaa attgcccaag 1560
gttgtccaat gctagagtct atcaacctgt cgtactgtac agaaataaca gatgtctcgt 1620
tgatgtcgct ctcaaaatgt gcaaagctaa acacactgga gatccgtggt tgccccagta 1680
tttcatctgc tgggctctca gaaatagcaa tcggatgcag gctacttgcc aagcttgatg 1740
tcaagaagtg ctttgcgatc aatgatgtgg ggatgttttt tctttcccag ttctctcata 1800
gcctccgtca gataaacttg tcatactgtt cggtcaccga tattgggctt ctgtccctct 1860
ctagcatatg cgggcttcag aacatgacga ttgtacactt ggcgggtatt acgcctaatg 1920
gcttgctggc tgctctgatg gtctctggtg gtttgacaag ggtgaagctt catgcagcgt 1980
tcagatctat gatgcccccg catatgctca aagtcgttga ggctcgcggc tgtgctttcc 2040
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ctcgagacgt gcttgtacga tgagaaatgt ttgacgtcgt cgtcttggct gtcagcctac 2160
aggatatggt gtagaacgag gctttgcacc aaggtggact tgtgtacaga acagacatta 2220
tcggaacaat gttgtatact catgtttcct tcagtgcact aggaggttct tttgttgtgc 2280
cgtatcctgt atatagagca gcaggagatg gatgaaatca tagaggaatt gctggaggtc 2340
gacgtgtact taatagaaac tcaccgatca atgtgagagt gtgcacagtt ctattacctg 2400
tccaatgcgc tcttgtttcg aatgagtagt agtttagcct gtgtttctcc tggtgtcc 2458
<210> 48
<211> 2465
<212> DNA
<213> 芸薹属(Brassica rapa)
<400> 48
ctgtcctttt ttattctctg tttcccatag aaactgtgaa tctgtgggtt tttagcaaat 60
cctcatcgaa actgtttctc catttgataa aaaaaaaaat cagtaagtag ttgggttcga 120
atgaagaagg cgaagcagat tcaacacatg atctcaaagc ctttcgatct tctgtcggag 180
gagctggtct tcataatcct agacctcgtc gctcagaacc cttccgatct caaatccttc 240
tctcttacct gcaaatggtt ctaccaagtg gaggccaggc accggagatc cctgaaacct 300
ctcagagcgg agtatcttcc tcgaatcctg acaaggtacc ggaataccgc cgatctcgat 360
cttagcttct gcccgcgcgt cacggactac gcgcttagcg tggtcgggtg cctctccgga 420
ccgacgctga ggtcagtaga cttatcgagg tcattctcct tctcggcggc ggggctgctg 480
agactggccg tgaaatgtgt gagtctggtg gagatagacc tgtcgaacgc gacggagatg 540
agggacgcgg cagcggcggt ggtggcggag gcgaagagcc tggagaggct gaagctgggg 600
agatgcaaga agctgacgga catgggaata ggatgcatag cggtgggatg taggaagctg 660
aagagggtga gcttgaagtg gtgtgtaggc gtcggagatt taggagtcgg tctgcttgcc 720
gtcaaatgca aggacattcg ctccttagac ctctcctact tgccgatcac aggcaagtgt 780
ttgcatgatg ttctcaaact tcaacacctt gaagaacttc ttctacaagg ttgcttcgga 840
gtcgatgatg actctcttaa atcactcact catcattgca actccttaaa gaacctggat 900
gcatcgagct gccagaattt aactcagaga ggtttaacct cacttttaag cggggccgga 960
tgtcttgagc gccttgatct agcacactct tcttctgtga tctcattgga ttttgcaagt 1020
agcctgaaca aggtttcttc agcattacag tcgatcaggt tggatggttg tgcggtaact 1080
tgtgatgggt tgaaggcgat agggacactg tgcatttccc tcagagaggt tagcctaagc 1140
aaatgtgtca ccgtaactga tgaaggtctc tcttgtcttg ttatgaaact caaagacctt 1200
agaaaacttg acatcacctg ttgccggaaa ctaactggag tttcaatcac ccaagtcgcc 1260
agttcttgtc ccttactagt ctccttgaag atggagtctt gttctcttgt ttccagagat 1320
gccttttggt tgatcggaca caagtgtcgc ctacttgaag agcttgactt tactgacaat 1380
gagattgatg atgaaggact aaaatccata tccagttgtc gtagtctttc ctcgttgaag 1440
ttgggaatat gtctgaatat aacagacaga ggactctcgt acattggtat gggctgctca 1500
aatctccgtg aacttgatct ctacaggtcg gtgggaataa cagacgtagg aatctcatcg 1560
atcgctcaag gctgctgtca tctcgaaaca ataaacatat catactgcaa agacatcaca 1620
gacaagtcgt tggtgtcatt gtcaaaatgc tcaatgttac aaacattcga gagccgggga 1680
tgtccacaca ttacttgcca aggacttgcc gccattgctg ttcgatgtaa gcggctcagc 1740
aagctcgact tgaaaaagtg tcctttcatc aatgactccg gtttgctcac tctagctcac 1800
ttttcacagg gcctcaaaca gataagcgtg tccgaaacgg gggtgacaga cgtgggactt 1860
gtgtcgctag caaacatagg gtgtttgcag aacatagcgg cagtgaacac aaggggttta 1920
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cacgcttccc tcagatcact acttccttcg tctcttataa accacatgga agctcgtggc 2040
tgctccttcc tgtggaaaga ctataacaac cataataata gtaatacact tcaggcggag 2100
ttagatccca agtactggaa ggtatagccg gaagaagata ttgagcttta gaagaaagaa 2160
acatccacaa ggggaaagag acggagccac catacaggcc aaggccccat ccattgtttg 2220
gatttagaaa gaggaactaa agcttggtat ctatctatgt cgatggcgcg tgttgcctca 2280
cacacataca cgtatatcca tccttacgta tgtagtatat ggttgtgaca tggattggtg 2340
gttagtttgt atgtaccctt ttgtaatttc atttcctttt tttggatgcc aaagttaacg 2400
gacgtcacaa gagattgcat ttgtgtcctt tttttgagtt tttcttttct ggatggttct 2460
atcaa 2465
<210> 49
<211> 2682
<212> DNA
<213> 大豆(Glycine max)
<400> 49
actcattcaa tattaataaa tgtctcgcat ttattcctca aacatagaaa ccaaacaaac 60
aaacccttcc cttctctccc cacagttatt catcattaac ctccaaaacg accaaccaaa 120
cgcaaaacgc agaaccatga agaagcagaa gctctccgag cctcaaaacg acaccaccaa 180
ccccttcgag gttctctccg aggagctaat gttcgtcatc ctcgacttcc tccaaacgac 240
gtcgttggac aaaaaatctt tctcgctcac gtgtaagttg ttttactccg tcgaggccaa 300
gcaccgtcgt ttgcttcgcc cgctacgtgc ggaacacctg cccgcgctcg ctgcccgcta 360
cccgaacgta acggaattgg atctttcctt gtgtccgcgc gtgggcgacg gcgcgctggg 420
gctcgtcgct ggcgcgtacg cggcgacgct gcggcgaatg gacctgtcgc ggtcgcggcg 480
gttcacggcg accgggctgc taagcctcgg cgcacggtgc gagcacctgg tggagctgga 540
cttgtcgaac gcgacggagc tgagggacgc cggcgtcgcc gcggtggcgc gtgcgcggaa 600
cttgcggaag ctgtggctgg cgaggtgcaa gatggtgacg gatatgggga ttgggtgtat 660
tgcggtgggg tgcaggaagc tgaggctgct ttgcttgaag tggtgtgtgg gaattgggga 720
tttgggtgtg gatttggttg cgattaagtg taaggagctc acaacattgg atctctctta 780
tttgcctatc acggagaaat gtctaccgtc aatcttcaaa ttgcaacatc ttgaagattt 840
ggtccttgaa ggatgctttg gcattgatga cgacagcctt gatgttgatc tcttaaaaca 900
agggtgcaag acattgaaga gacttgatat ctcaggttgt caaaacataa gtcatgttgg 960
gttatcaaag cttacaagca tttctggagg tttagagaaa ctcattttag cagatggctc 1020
tcctgtcacc ctttctcttg ctgatggttt gaataaactt tccatgttgc aatcaattgt 1080
attagatggc tgccctgtta catctgaagg attacgggcc attggaaatt tgtgcatttc 1140
acttagggag cttagtctaa gcaaatgttt gggagtgaca gatgaggcac tctcatttct 1200
tgtgtcaaaa cacaaagatt taaggaaact tgacatcaca tgctgtcgca agataactga 1260
tgtttccatt gccagcattg caaattcatg cacaggtcta acttctctca aaatggagtc 1320
atgtacacta gttccaagtg aagcatttgt cttgattgga cagaaatgcc attatcttga 1380
ggagcttgac ctaacagata atgaaattga tgatgaaggt cttatgtcca tttcttcttg 1440
ttcttggctt accagcttga aaataggaat atgcctgaac ataactgaca gaggacttgc 1500
ctatgttggc atgcgttgct caaaattaaa ggagctggat ctatacaggt ctactggagt 1560
agatgatttg ggcatttcag caattgctgg tggttgccct ggccttgaga tgataaacac 1620
atcctattgt actagcatta ctgacagggc actaattgcc ttgtcaaaat gttcaaattt 1680
ggagacactt gaaattcgag gatgtcttct cgttacatcc ataggtctgg cagctattgc 1740
aatgaattgc agacaactaa gtcgtctaga cataaaaaag tgttacaaca ttgatgacag 1800
tgggatgatt gctctggctc atttctccca aaatctaaga cagataaatt tgtcatatag 1860
ctcagttaca gatgtggggc ttctgtcact tgctaatatc agttgccttc aaagctttac 1920
cttgcttcac ctgcaaggct tggttccagg aggactggcg gcagccttat tagcttgtgg 1980
agggctaaca aaagtgaagc tccatctttc actaagatct ctgttacctg agctacttat 2040
cagacatgtg gaagcacgtg gctgtgtatt tgaatggaga gataaagagt ttcaggctga 2100
attggacccc aagtgttgga aattacagtt ggaagatgtg atataatagg atttttctca 2160
ggttctttga agttttgata aagacaactc tgctgcatgg ctcatgaaat tcaattcgga 2220
agtcatcatc ttctctctct tctctgttca cctaacctac actacaagaa atgaagaaag 2280
cagcatgaaa aatgccagaa gtattctgtt tagtccattg gaggctacac aggcatttgg 2340
aatggagatt gttgatcatc cttccttaag tctcgctcgc ctaactagga tgagttttgt 2400
ttattctttt ttcttttttt tgctgcaaat agcaggatta gtgaagtact taaagtgtta 2460
caaaccccat ctaacgtctt tcatttattt attttgggag tacaattgga aatgttcaga 2520
gaatggagaa gcagtggcta tcgaatgtat aaaaacacta acttctgttc aatcttttct 2580
tttgacagtg aaaagcaaga ttaagtgtgt aaaacttaga aacctgtttt gtttatatat 2640
gattagagct gttcatggac atccagaata gaagtttcaa aa 2682
<210> 50
<211> 642
<212> PRT
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400> 50
Met Ser Thr Ser Pro Ser Ile Leu Ser Val Leu Ser Glu Asp Leu Leu
1 5 10 15
Val Arg Val Tyr Glu Cys Leu Asp Pro Pro Cys Arg Lys Thr Trp Arg
20 25 30
Leu Ile Ser Lys Asp Phe Leu Arg Val Asp Ser Leu Thr Arg Thr Thr
35 40 45
Ile Arg Ile Leu Arg Val Glu Phe Leu Pro Thr Leu Leu Phe Lys Tyr
50 55 60
Pro Asn Leu Ser Ser Leu Asp Leu Ser Val Cys Pro Lys Leu Asp Asp
65 70 75 80
Asp Val Val Leu Arg Leu Ala Leu Asp Gly Ala Ile Ser Thr Leu Gly
85 90 95
Ile Lys Ser Leu Asn Leu Ser Arg Ser Thr Ala Val Arg Ala Arg Gly
100 105 110
Leu Glu Thr Leu Ala Arg Met Cys His Ala Leu Glu Arg Val Asp Val
115 120 125
Ser His Cys Trp Gly Phe Gly Asp Arg Glu Ala Ala Ala Leu Ser Ser
130 135 140
Ala Thr Gly Leu Arg Glu Leu Lys Met Asp Lys Cys Leu Ser Leu Ser
145 150 155 160
Asp Val Gly Leu Ala Arg Ile Val Val Gly Cys Ser Asn Leu Asn Lys
165 170 175
Ile Ser Leu Lys Trp Cys Met Glu Ile Ser Asp Leu Gly Ile Asp Leu
180 185 190
Leu Cys Lys Ile Cys Lys Gly Leu Lys Ser Leu Asp Val Ser Tyr Leu
195 200 205
Lys Ile Thr Asn Asp Ser Ile Arg Ser Ile Ala Leu Leu Val Lys Leu
210 215 220
Glu Val Leu Asp Met Val Ser Cys Pro Leu Ile Asp Asp Gly Gly Leu
225 230 235 240
Gln Phe Leu Glu Asn Gly Ser Pro Ser Leu Gln Glu Val Asp Val Thr
245 250 255
Arg Cys Asp Arg Val Ser Leu Ser Gly Leu Ile Ser Ile Val Arg Gly
260 265 270
His Pro Asp Ile Gln Leu Leu Lys Ala Ser His Cys Val Ser Glu Val
275 280 285
Ser Gly Ser Phe Leu Lys Tyr Ile Lys Gly Leu Lys His Leu Lys Thr
290 295 300
Ile Trp Ile Asp Gly Ala His Val Ser Asp Ser Ser Leu Val Ser Leu
305 310 315 320
Ser Ser Ser Cys Arg Ser Leu Met Glu Ile Gly Leu Ser Arg Cys Val
325 330 335
Asp Val Thr Asp Ile Gly Met Ile Ser Leu Ala Arg Asn Cys Leu Asn
340 345 350
Leu Lys Thr Leu Asn Leu Ala Cys Cys Gly Phe Val Thr Asp Val Ala
355 360 365
Ile Ser Ala Val Ala Gln Ser Cys Arg Asn Leu Gly Thr Leu Lys Leu
370 375 380
Glu Ser Cys His Leu Ile Thr Glu Lys Gly Leu Gln Ser Leu Gly Cys
385 390 395 400
Tyr Ser Met Leu Val Gln Glu Leu Asp Leu Thr Asp Cys Tyr Gly Val
405 410 415
Asn Asp Arg Gly Leu Glu Tyr Ile Ser Lys Cys Ser Asn Leu Gln Arg
420 425 430
Leu Lys Leu Gly Leu Cys Thr Asn Ile Ser Asp Lys Gly Ile Phe His
435 440 445
Ile Gly Ser Lys Cys Ser Lys Leu Leu Glu Leu Asp Leu Tyr Arg Cys
450 455 460
Ala Gly Phe Gly Asp Asp Gly Leu Ala Ala Leu Ser Arg Gly Cys Lys
465 470 475 480
Ser Leu Asn Arg Leu Ile Leu Ser Tyr Cys Cys Glu Leu Thr Asp Thr
485 490 495
Gly Val Glu Gln Ile Arg Gln Leu Glu Leu Leu Ser His Leu Glu Leu
500 505 510
Arg Gly Leu Lys Asn Ile Thr Gly Val Gly Leu Ala Ala Ile Ala Ser
515 520 525
Gly Cys Lys Lys Leu Gly Tyr Leu Asp Val Lys Leu Cys Glu Asn Ile
530 535 540
Asp Asp Ser Gly Phe Trp Ala Leu Ala Tyr Phe Ser Lys Asn Leu Arg
545 550 555 560
Gln Ile Asn Leu Cys Asn Cys Ser Val Ser Asp Thr Ala Leu Cys Met
565 570 575
Leu Met Ser Asn Leu Ser Arg Val Gln Asp Val Asp Leu Val His Leu
580 585 590
Ser Arg Val Thr Val Glu Gly Phe Glu Phe Ala Leu Arg Ala Cys Cys
595 600 605
Asn Arg Leu Lys Lys Leu Lys Leu Leu Ala Pro Leu Arg Phe Leu Leu
610 615 620
Ser Ser Glu Leu Leu Glu Thr Leu His Ala Arg Gly Cys Arg Ile Arg
625 630 635 640
Trp Asp
<210> 51
<211> 659
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 51
Met Ser Glu Glu Val Gln Arg Tyr Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly
1 5 10 15
Gly Gly Val Ala Ala Leu Ser Leu Asp Leu Leu Gly Gln Val Leu Asp
20 25 30
Arg Val Arg Glu Pro Arg Asp Arg Lys Ala Cys Arg Leu Val Ser Arg
35 40 45
Ala Phe Ala Arg Ala Glu Ala Ala His Arg Arg Ala Leu Arg Val Leu
50 55 60
Arg Arg Glu Pro Leu Ala Arg Leu Leu Arg Ala Phe Arg Ala Leu Glu
65 70 75 80
Arg Leu Asp Leu Ser Ala Cys Ala Ser Leu Asp Asp Ala Ser Leu Ala
85 90 95
Ala Ala Leu Ser Gly Ala Asp Leu Ala Gly Val Arg Arg Val Cys Leu
100 105 110
Ala Arg Ala Ser Gly Val Gly Trp Arg Gly Leu Asp Ala Leu Val Ala
115 120 125
Ala Cys Pro Arg Leu Glu Ala Val Asp Leu Ser His Cys Val Gly Ala
130 135 140
Gly Asp Arg Glu Ala Ala Ala Leu Ala Ala Ala Thr Gly Leu Arg Glu
145 150 155 160
Leu Ser Leu Glu Lys Cys Leu Gly Val Thr Asp Met Gly Leu Ala Lys
165 170 175
Val Val Val Gly Cys Pro Arg Leu Glu Lys Leu Ser Leu Lys Trp Cys
180 185 190
Arg Glu Ile Ser Asp Ile Gly Ile Asp Leu Leu Ser Lys Lys Cys His
195 200 205
Glu Leu Arg Ser Leu Asp Ile Ser Tyr Leu Lys Val Gly Asn Glu Ser
210 215 220
Leu Arg Ser Ile Ser Ser Leu Glu Lys Leu Glu Glu Leu Ala Met Val
225 230 235 240
Cys Cys Ser Cys Ile Asp Asp Asp Gly Leu Glu Leu Leu Gly Lys Gly
245 250 255
Ser Asn Ser Leu Gln Ser Val Asp Val Ser Arg Cys Asp His Val Thr
260 265 270
Ser Gln Gly Leu Ala Ser Leu Ile Asp Gly His Asn Phe Leu Gln Lys
275 280 285
Leu Asn Ala Ala Asp Ser Leu His Glu Met Arg Gln Ser Phe Leu Ser
290 295 300
Asn Leu Ala Lys Leu Lys Asp Thr Leu Thr Val Leu Arg Leu Asp Gly
305 310 315 320
Leu Glu Val Ser Ser Ser Val Leu Leu Ala Ile Gly Gly Cys Asn Asn
325 330 335
Leu Val Glu Ile Gly Leu Ser Lys Cys Asn Gly Val Thr Asp Glu Gly
340 345 350
Ile Ser Ser Leu Val Thr Gln Cys Ser His Leu Arg Val Ile Asp Leu
355 360 365
Thr Cys Cys Asn Leu Leu Thr Asn Asn Ala Leu Asp Ser Ile Ala Glu
370 375 380
Asn Cys Lys Met Val Glu His Leu Arg Leu Glu Ser Cys Ser Ser Ile
385 390 395 400
Ser Glu Lys Gly Leu Glu Gln Ile Ala Thr Ser Cys Pro Asn Leu Lys
405 410 415
Glu Ile Asp Leu Thr Asp Cys Gly Val Asn Asp Ala Ala Leu Gln His
420 425 430
Leu Ala Lys Cys Ser Glu Leu Leu Val Leu Lys Leu Gly Leu Cys Ser
435 440 445
Ser Ile Ser Asp Lys Gly Leu Ala Phe Ile Ser Ser Ser Cys Gly Lys
450 455 460
Leu Ile Glu Leu Asp Leu Tyr Arg Cys Asn Ser Ile Thr Asp Asp Gly
465 470 475 480
Leu Ala Ala Leu Ala Asn Gly Cys Lys Lys Ile Lys Met Leu Asn Leu
485 490 495
Cys Tyr Cys Asn Lys Ile Thr Asp Ser Gly Leu Gly His Leu Gly Ser
500 505 510
Leu Glu Glu Leu Thr Asn Leu Glu Leu Arg Cys Leu Val Arg Ile Thr
515 520 525
Gly Ile Gly Ile Ser Ser Val Ala Ile Gly Cys Lys Asn Leu Ile Glu
530 535 540
Ile Asp Leu Lys Arg Cys Tyr Ser Val Asp Asp Ala Gly Leu Trp Ala
545 550 555 560
Leu Ala Arg Tyr Ala Leu Asn Leu Arg Gln Leu Thr Ile Ser Tyr Cys
565 570 575
Gln Val Thr Gly Leu Gly Leu Cys His Leu Leu Ser Ser Leu Arg Cys
580 585 590
Leu Gln Asp Val Lys Met Val His Leu Ser Trp Val Ser Ile Glu Gly
595 600 605
Phe Glu Met Ala Leu Arg Ala Ala Cys Gly Arg Leu Lys Lys Leu Lys
610 615 620
Met Leu Ser Gly Leu Lys Ser Val Leu Ser Pro Glu Leu Leu Gln Met
625 630 635 640
Leu Gln Ala Cys Gly Cys Arg Ile Arg Trp Val Asn Lys Pro Leu Val
645 650 655
Tyr Lys Asp
<210> 52
<211> 660
<212> PRT
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 52
Met Ser Arg Glu Ala Gln Lys Leu Asp Cys Ala Ala Gly Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ile Gly Val Leu Ser Leu Asp Leu Leu Gly Gln Val Leu Glu His Leu
20 25 30
Arg Glu Pro Arg Asp Arg Lys Thr Cys Arg Leu Val Ser Arg Ala Phe
35 40 45
Glu Arg Ala Glu Ala Ala His Arg Arg Ala Leu Arg Val Leu Arg Arg
50 55 60
Glu Pro Leu Pro Arg Leu Leu Arg Ala Phe Pro Ala Leu Glu Arg Leu
65 70 75 80
Asp Leu Ser Ala Cys Ala Ser Leu Asp Asp Ala Ser Leu Ala Ala Ala
85 90 95
Val Ala Asp Ala Gly Gly Gly Leu Ala Gly Leu Arg Ser Val Cys Leu
100 105 110
Ala Arg Ala Asn Gly Val Gly Trp Arg Gly Leu Glu Ala Leu Val Ala
115 120 125
Ala Cys Pro Lys Leu Ala Ala Val Asp Leu Ser His Cys Val Thr Ala
130 135 140
Gly Asp Arg Glu Ala Ala Ala Leu Ala Ala Ala Ser Glu Leu Arg Asp
145 150 155 160
Leu Arg Leu Asp Lys Cys Leu Ala Val Thr Asp Met Gly Leu Ala Lys
165 170 175
Val Ala Val Gly Cys Pro Lys Leu Glu Lys Leu Ser Leu Lys Trp Cys
180 185 190
Arg Glu Ile Ser Asp Ile Gly Ile Asp Leu Leu Ala Lys Lys Cys Pro
195 200 205
Glu Leu Arg Ser Leu Asn Ile Ser Tyr Leu Lys Val Gly Asn Gly Ser
210 215 220
Leu Gly Ser Ile Ser Ser Leu Glu Arg Leu Glu Glu Leu Ala Met Val
225 230 235 240
Cys Cys Ser Gly Ile Asp Asp Glu Gly Leu Glu Leu Leu Ser Lys Gly
245 250 255
Ser Asp Ser Leu Gln Ser Val Asp Val Ser Arg Cys Asp His Val Thr
260 265 270
Ser Glu Gly Leu Ala Ser Leu Ile Asp Gly Arg Asn Phe Leu Gln Lys
275 280 285
Leu Tyr Ala Ala Asp Cys Leu His Glu Ile Gly Gln Arg Phe Leu Ser
290 295 300
Lys Leu Ala Arg Leu Lys Glu Thr Leu Thr Leu Leu Lys Leu Asp Gly
305 310 315 320
Leu Glu Val Ser Asp Ser Leu Leu Gln Ala Ile Gly Glu Ser Cys Asn
325 330 335
Lys Leu Val Glu Ile Gly Leu Ser Lys Cys Ser Gly Val Thr Asp Gly
340 345 350
Gly Ile Ser Ser Leu Val Ala Arg Cys Ser Asp Leu Arg Thr Ile Asp
355 360 365
Leu Thr Cys Cys Asn Leu Ile Thr Asn Asn Ala Leu Asp Ser Ile Ala
370 375 380
Asp Asn Cys Lys Met Leu Glu Cys Leu Arg Leu Glu Ser Cys Ser Leu
385 390 395 400
Ile Asn Glu Lys Gly Leu Glu Arg Ile Thr Thr Cys Cys Pro Asn Leu
405 410 415
Lys Glu Ile Asp Leu Thr Asp Cys Gly Val Asp Asp Ala Ala Leu Gln
420 425 430
His Leu Ala Lys Cys Ser Glu Leu Arg Ile Leu Lys Leu Gly Leu Cys
435 440 445
Ser Ser Ile Ser Asp Arg Gly Ile Ala Phe Ile Ser Ser Asn Cys Gly
450 455 460
Lys Leu Val Glu Leu Asp Leu Tyr Arg Cys Asn Ser Ile Thr Asp Asp
465 470 475 480
Gly Leu Ala Ala Leu Ala Asn Gly Cys Lys Arg Ile Lys Leu Leu Asn
485 490 495
Leu Cys Tyr Cys Asn Lys Ile Thr Asp Thr Gly Leu Gly His Leu Gly
500 505 510
Ser Leu Glu Glu Leu Thr Asn Leu Glu Leu Arg Cys Leu Val Arg Val
515 520 525
Thr Gly Ile Gly Ile Ser Ser Val Ala Ile Gly Cys Lys Asn Leu Ile
530 535 540
Glu Leu Asp Leu Lys Arg Cys Tyr Ser Val Asp Asp Ala Gly Leu Trp
545 550 555 560
Ala Leu Ala Arg Tyr Ala Leu Asn Leu Arg Gln Leu Thr Ile Ser Tyr
565 570 575
Cys Gln Val Thr Gly Leu Gly Leu Cys His Leu Leu Ser Ser Leu Arg
580 585 590
Cys Leu Gln Asp Ile Lys Met Val His Leu Ser Trp Val Ser Ile Glu
595 600 605
Gly Phe Glu Met Ala Leu Arg Ala Ala Cys Gly Arg Leu Lys Lys Leu
610 615 620
Lys Met Leu Cys Gly Leu Lys Thr Val Leu Ser Pro Glu Leu Leu Gln
625 630 635 640
Met Leu Gln Ala Cys Gly Cys Arg Ile Arg Trp Val Asn Lys Pro Leu
645 650 655
Val Tyr Lys Asp
660
<210> 53
<211> 661
<212> PRT
<213> 大麦(Hordeum vulgare)
<400> 53
Met Ser Glu Glu Glu Ala Gln Arg Tyr Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly
1 5 10 15
Gly Val Gly Ala Leu Ser Val Asp Leu Leu Gly Gln Val Leu Asp Arg
20 25 30
Val Leu Glu Arg Arg Asp Arg Lys Ala Cys Arg Leu Val Ser Arg Ala
35 40 45
Phe Ala Arg Ala Glu Ala Ala His Arg Arg Ala Leu Arg Val Leu Arg
50 55 60
Arg Glu Pro Leu Pro Arg Leu Leu Arg Ala Phe Pro Ala Leu Glu Arg
65 70 75 80
Leu Asp Leu Ser Ala Cys Ala Ser Leu Asp Asp Ala Ser Leu Ala Ala
85 90 95
Ala Leu Ala Gly Ala Asp Leu Gly Thr Val Arg Gln Val Cys Leu Ala
100 105 110
Arg Ala Ser Gly Val Gly Trp Arg Gly Leu Glu Ala Leu Val Ala Ala
115 120 125
Cys Pro Arg Leu Glu Ala Val Asp Leu Ser His Cys Val Gly Ala Gly
130 135 140
Asp Arg Glu Ala Ala Ala Leu Ala Ala Ala Ser Gly Leu Arg Glu Leu
145 150 155 160
Asn Leu Glu Lys Cys Leu Gly Val Thr Asp Met Gly Leu Ala Lys Val
165 170 175
Ala Val Gly Cys Pro Arg Leu Glu Thr Leu Ser Phe Lys Trp Cys Arg
180 185 190
Glu Ile Ser Asp Ile Gly Val Asp Leu Leu Val Lys Lys Cys Arg Asp
195 200 205
Leu Arg Ser Leu Asp Ile Ser Tyr Leu Lys Val Ser Asn Glu Ser Leu
210 215 220
Arg Ser Ile Ser Thr Leu Glu Lys Leu Glu Glu Leu Ala Met Val Ala
225 230 235 240
Cys Ser Cys Ile Asp Asp Glu Gly Leu Glu Leu Leu Ser Arg Gly Ser
245 250 255
Asn Ser Leu Gln Ser Val Asp Val Ser Arg Cys Asn His Val Thr Ser
260 265 270
Gln Gly Leu Ala Ser Leu Ile Asp Gly His Ser Phe Leu Gln Lys Leu
275 280 285
Asn Ala Ala Asp Ser Leu His Glu Ile Gly Gln Asn Phe Leu Ser Lys
290 295 300
Leu Val Thr Leu Lys Ala Thr Leu Thr Val Leu Arg Leu Asp Gly Phe
305 310 315 320
Glu Val Ser Ser Ser Leu Leu Ser Ala Ile Gly Glu Gly Cys Thr Asn
325 330 335
Leu Val Glu Ile Gly Leu Ser Lys Cys Asn Gly Val Thr Asp Glu Gly
340 345 350
Ile Ser Ser Leu Val Ala Arg Cys Ser Tyr Leu Arg Lys Ile Asp Leu
355 360 365
Thr Cys Cys Asn Leu Val Thr Asn Asp Ser Leu Asp Ser Ile Ala Asp
370 375 380
Asn Cys Lys Met Leu Glu Cys Leu Arg Leu Glu Ser Cys Ser Ser Ile
385 390 395 400
Asn Glu Lys Gly Leu Glu Arg Ile Ala Ser Cys Cys Pro Asn Leu Lys
405 410 415
Glu Ile Asp Leu Thr Asp Cys Gly Val Asn Asp Glu Ala Leu His His
420 425 430
Leu Ala Lys Cys Ser Glu Leu Leu Ile Leu Lys Leu Gly Leu Ser Ser
435 440 445
Ser Ile Ser Asp Lys Gly Leu Gly Phe Ile Ser Ser Lys Cys Gly Lys
450 455 460
Leu Ile Glu Leu Asp Leu Tyr Arg Cys Ser Ser Ile Thr Asp Asp Gly
465 470 475 480
Leu Ala Ala Leu Ala Asn Gly Cys Lys Lys Ile Lys Leu Leu Asn Leu
485 490 495
Cys Tyr Cys Asn Lys Ile Thr Asp Ser Gly Leu Ser His Leu Gly Ala
500 505 510
Leu Glu Glu Leu Thr Asn Leu Glu Leu Arg Cys Leu Val Arg Ile Thr
515 520 525
Gly Ile Gly Ile Ser Ser Val Val Ile Gly Cys Lys Ser Leu Val Glu
530 535 540
Leu Asp Leu Lys Arg Cys Tyr Ser Val Asn Asp Ser Gly Leu Trp Ala
545 550 555 560
Leu Ala Arg Tyr Ala Leu Asn Leu Arg Gln Leu Thr Ile Ser Tyr Cys
565 570 575
Gln Val Thr Gly Leu Gly Leu Cys His Leu Leu Ser Ser Leu Arg Cys
580 585 590
Leu Gln Asp Val Lys Met Val His Leu Ser Trp Val Ser Ile Glu Gly
595 600 605
Phe Glu Met Ala Leu Arg Ala Ala Cys Gly Arg Leu Lys Lys Leu Lys
610 615 620
Ile Leu Gly Gly Leu Lys Ser Val Leu Ser Pro Asp Leu Leu Gln Leu
625 630 635 640
Leu Gln Ala Cys Gly Cys Arg Ile Arg Trp Val Asn Lys Pro Leu Val
645 650 655
Tyr Lys Asp Ala Ile
660
<210> 54
<211> 639
<212> PRT
<213> 芸薹属(Brassica rapa)
<400> 54
Met Pro Leu Ser Pro Ser Ile Leu Ser Val Leu Ser Glu Asp Leu Leu
1 5 10 15
Val Arg Val Tyr Gly Phe Leu Asp Pro Pro Cys Arg Lys Lys Trp Arg
20 25 30
Leu Val Ser Lys Glu Phe His Arg Val Asp Ser Leu Ser Arg Thr Ser
35 40 45
Ile Arg Ile Leu Arg Val Glu Phe Leu Pro Ala Leu Leu Ser Asn Tyr
50 55 60
Pro His Leu Ser Ser Leu Asp Leu Ser Val Cys Pro Lys Leu Asp Asp
65 70 75 80
Asp Val Val Leu Arg Leu Ala Ser Tyr Gly Ala Val Ser Ile Lys Ser
85 90 95
Leu Asn Leu Ser Arg Ala Thr Ala Leu Arg Ala Arg Gly Leu Glu Thr
100 105 110
Leu Ala Arg Leu Cys Arg Gly Leu Glu Arg Val Asp Val Ser His Cys
115 120 125
Trp Gly Phe Gly Asp Arg Glu Ala Ala Ala Leu Ser Val Ala Ala Gly
130 135 140
Leu Arg Glu Val Arg Leu Asp Lys Cys Leu Ser Leu Ser Asp Val Gly
145 150 155 160
Leu Ala Arg Ile Val Leu Gly Cys Ser Asn Leu Ser Lys Ile Ser Leu
165 170 175
Lys Trp Cys Met Glu Ile Ser Asp Leu Gly Ile Asp Leu Leu Cys Lys
180 185 190
Lys Cys Lys Asp Leu Lys Ser Leu Asp Val Ser Tyr Leu Lys Ile Thr
195 200 205
Asn Asp Ser Ile Arg Ser Ile Ala Leu Leu Pro Lys Leu Glu Val Leu
210 215 220
Glu Met Val Asn Cys Pro Leu Val Asp Asp Asp Gly Leu Gln Tyr Leu
225 230 235 240
Glu Asn Gly Cys Pro Ser Leu Gln Glu Ile Asp Val Thr Arg Cys Glu
245 250 255
Arg Val Ser Leu Ser Gly Val Val Ser Ile Val Arg Gly His Pro Asp
260 265 270
Leu Gln His Leu Lys Ala Ser His Cys Val Ser Glu Val Ser Leu Ser
275 280 285
Phe Leu His Asn Ile Lys Ala Leu Lys His Leu Lys Thr Leu Trp Ile
290 295 300
Asp Gly Ala Arg Val Ser Asp Ser Ser Leu Leu Thr Leu Ser Ser Ser
305 310 315 320
Cys Arg Pro Leu Thr Asp Ile Gly Val Ser Lys Cys Val Gly Val Thr
325 330 335
Asp Ile Gly Ile Thr Gly Leu Ala Arg Asn Cys Ile Asn Leu Lys Thr
340 345 350
Leu Asn Leu Ala Cys Cys Gly Phe Val Thr Asp Ala Ala Ile Ser Ala
355 360 365
Val Ala Gln Ser Cys Arg Asn Leu Glu Thr Leu Lys Leu Glu Ser Cys
370 375 380
His Met Ile Thr Glu Lys Gly Leu Gln Ser Leu Gly Cys Tyr Ser Lys
385 390 395 400
His Leu Gln Glu Leu Asp Leu Thr Asp Cys Tyr Gly Val Asn Asp Arg
405 410 415
Gly Leu Glu Tyr Ile Ser Lys Cys Ser Asn Leu Leu Arg Leu Lys Leu
420 425 430
Gly Leu Cys Thr Asn Ile Ser Asp Lys Gly Met Phe His Ile Gly Ser
435 440 445
Lys Cys Ser Lys Leu Leu Glu Leu Asp Leu Tyr Arg Cys Gly Gly Phe
450 455 460
Gly Asp Asp Gly Leu Ala Ala Ile Ser Arg Gly Cys Lys Ser Leu Asn
465 470 475 480
Arg Leu Ile Ile Ser Tyr Cys Gly Glu Leu Thr Asp Thr Gly Val Glu
485 490 495
Gln Ile Arg Gln Leu Glu His Leu Ser His Leu Glu Leu Arg Gly Leu
500 505 510
Lys Asn Ile Thr Gly Ala Gly Leu Ala Ala Val Ala Cys Gly Cys Lys
515 520 525
Lys Leu Asp Tyr Leu Asp Leu Lys Lys Cys Glu Asn Ile Asp Asp Ser
530 535 540
Gly Phe Trp Ala Leu Ala Tyr Phe Ala Arg Asn Leu Arg Gln Ile Asn
545 550 555 560
Leu Cys Tyr Cys Ser Val Ser Asp Thr Ala Leu Cys Met Leu Met Ser
565 570 575
Asn Leu Ser Arg Val Gln Asp Val Asp Leu Val Asn Leu Asn Arg Val
580 585 590
Thr Val Glu Gly Ser Glu Phe Ala Leu Arg Ala Cys Cys Asn Arg Leu
595 600 605
Lys Lys Leu Lys Leu Phe Ala Pro Leu Arg Phe Leu Leu Ser Ser Glu
610 615 620
Leu Leu Glu Met Leu His Ala Arg Gly Cys Arg Ile Arg Trp Asp
625 630 635
<210> 55
<211> 641
<212> PRT
<213> 大豆(Glycine max)
<400> 55
Met Leu Ser Glu Ser Val Phe Cys Leu Leu Thr Glu Asp Leu Leu Ile
1 5 10 15
Arg Val Leu Glu Lys Leu Gly Pro Asp Arg Lys Pro Trp Arg Leu Val
20 25 30
Cys Lys Glu Phe Leu Arg Val Glu Ser Ser Thr Arg Lys Lys Ile Arg
35 40 45
Ile Leu Arg Ile Glu Phe Leu Leu Gly Leu Leu Glu Lys Phe Cys Asn
50 55 60
Ile Glu Thr Leu Asp Leu Ser Met Cys Pro Arg Ile Glu Asp Gly Ala
65 70 75 80
Val Ser Val Val Leu Ser Gln Gly Ser Ala Ser Trp Thr Arg Gly Leu
85 90 95
Arg Arg Leu Val Leu Ser Arg Ala Thr Gly Leu Gly His Val Gly Leu
100 105 110
Glu Met Leu Ile Arg Ala Cys Pro Met Leu Glu Ala Val Asp Val Ser
115 120 125
His Cys Trp Gly Tyr Gly Asp Arg Glu Ala Ala Ala Leu Ser Cys Ala
130 135 140
Ala Arg Leu Arg Glu Leu Asn Met Asp Lys Cys Leu Gly Val Thr Asp
145 150 155 160
Ile Gly Leu Ala Lys Ile Ala Val Gly Cys Gly Lys Leu Glu Arg Leu
165 170 175
Ser Leu Lys Trp Cys Leu Glu Ile Ser Asp Leu Gly Ile Asp Leu Leu
180 185 190
Cys Lys Lys Cys Leu Asp Leu Lys Phe Leu Asp Val Ser Tyr Leu Lys
195 200 205
Val Thr Ser Glu Ser Leu Arg Ser Ile Ala Ser Leu Leu Lys Leu Glu
210 215 220
Val Phe Val Met Val Gly Cys Ser Leu Val Asp Asp Val Gly Leu Arg
225 230 235 240
Phe Leu Glu Lys Gly Cys Pro Leu Leu Lys Ala Ile Asp Val Ser Arg
245 250 255
Cys Asp Cys Val Ser Ser Ser Gly Leu Ile Ser Val Ile Ser Gly His
260 265 270
Gly Gly Leu Glu Gln Leu Asp Ala Gly Tyr Cys Leu Ser Glu Leu Ser
275 280 285
Ala Pro Leu Val Lys Cys Leu Glu Asn Leu Lys Gln Leu Arg Ile Ile
290 295 300
Arg Ile Asp Gly Val Arg Val Ser Asp Phe Ile Leu Gln Thr Ile Gly
305 310 315 320
Thr Asn Cys Lys Ser Leu Val Glu Leu Gly Leu Ser Lys Cys Val Gly
325 330 335
Val Thr Asn Lys Gly Ile Val Gln Leu Val Ser Gly Cys Gly Tyr Leu
340 345 350
Lys Ile Leu Asp Leu Thr Cys Cys Arg Phe Ile Ser Asp Ala Ala Ile
355 360 365
Ser Thr Ile Ala Asp Ser Cys Pro Asp Leu Val Cys Leu Lys Leu Glu
370 375 380
Ser Cys Asp Met Val Thr Glu Asn Cys Leu Tyr Gln Leu Gly Leu Asn
385 390 395 400
Cys Ser Leu Leu Lys Glu Leu Asp Leu Thr Asp Cys Ser Gly Val Asp
405 410 415
Asp Ile Ala Leu Arg Tyr Leu Ser Arg Cys Ser Glu Leu Val Arg Leu
420 425 430
Lys Leu Gly Leu Cys Thr Asn Ile Ser Asp Ile Gly Leu Ala His Ile
435 440 445
Ala Cys Asn Cys Pro Lys Met Thr Glu Leu Asp Leu Tyr Arg Cys Val
450 455 460
Arg Ile Gly Asp Asp Gly Leu Ala Ala Leu Thr Ser Gly Cys Lys Gly
465 470 475 480
Leu Thr Asn Leu Asn Leu Ser Tyr Cys Asn Arg Ile Thr Asp Arg Gly
485 490 495
Leu Glu Tyr Ile Ser His Leu Gly Glu Leu Ser Asp Leu Glu Leu Arg
500 505 510
Gly Leu Ser Asn Ile Thr Ser Ile Gly Ile Lys Ala Val Ala Ile Ser
515 520 525
Cys Lys Arg Leu Ala Asp Leu Asp Leu Lys His Cys Glu Lys Ile Asp
530 535 540
Asp Ser Gly Phe Trp Ala Leu Ala Phe Tyr Ser Gln Asn Leu Arg Gln
545 550 555 560
Ile Asn Met Ser Tyr Cys Ile Val Ser Asp Met Val Leu Cys Met Leu
565 570 575
Met Gly Asn Leu Lys Arg Leu Gln Asp Ala Lys Leu Val Cys Leu Ser
580 585 590
Lys Val Ser Val Lys Gly Leu Glu Val Ala Leu Arg Ala Cys Cys Gly
595 600 605
Arg Ile Lys Lys Val Lys Leu Gln Arg Ser Leu Arg Phe Ser Leu Ser
610 615 620
Ser Glu Met Leu Glu Thr Met His Ala Arg Gly Cys Lys Ile Arg Trp
625 630 635 640
Asp
<210> 56
<211> 3093
<212> DNA
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400> 56
ctttctttat tttatttacc ttttaccaaa gttacacttc tacccctatt tttcttcaat 60
aagagatgga agagcaaggg caattaagta atttgacaat atccttctcc ttcaagactc 120
tctctctccc acagaaaaca aactgtttgt tgttaataac tgtgggtttt ttccaaaatc 180
ctcaaagaga gactatactt ctctcggatc cttcctgatt tcaaaatttc ttcaacccac 240
cagcagcagc agcagatgaa gaaggttaaa cagattcgtg tcttaaagcc tttcgatctt 300
ctctcggaag agctcgtctt tatcatcctt gacctcatct ctcccaaccc ttccgatctc 360
aaatccttct ctcttacttg caaatctttc taccagctcg agtccaagca ccgcggatcc 420
ttaaaacctc tccgctccga ctatctccct cgcatcttga ctcgttaccg gaacaccacc 480
gatctcgatc ttaccttctg cccgcgtgtc actgactacg cgcttagcgt cgttggctgt 540
ctctccggac ctacgcttcg ctccctcgac ctctcgcgct ctggctcctt ctccgccgcg 600
ggactactgc gattggccct caaatgtgtc aatttagtcg agattgacct gtccaatgcg 660
acggagatga gagacgccga tgctgcggtg gtggcggagg cgaggagtct ggagaggctg 720
aagctgggca gatgcaagat gctgacggac atgggaatcg gatgtatagc agttggatgt 780
aagaagctca atacggttag cttgaaatgg tgtgttggcg tcggagattt aggggttggc 840
ttgcttgccg tcaaatgcaa ggacattcgc accttagacc tctcctactt gccgatcaca 900
ggaaagtgtt tacatgacat tctgaaactt caacaccttg aagaacttct tctagaaggg 960
tgctttggag tagatgatga cagtcttaaa tcactcagac atgattgcaa gtcattgaag 1020
aagcttgatg catccagctg ccagaattta actcatagag gtttaacctc acttttaagc 1080
ggggcaggat atcttcagcg acttgatcta tcacactgtt cttctgtgat atcattggat 1140
tttgcgagta gcttaaagaa ggtttcagca ttacagtcga tcaggttgga tggttgttct 1200
gttacgcctg atggtttgaa ggcgataggc acattgtgca attccctgaa agaggttagc 1260
ctaagcaaat gcgtgagcgt aactgatgaa ggtctttctt ctctagtaat gaaactgaaa 1320
gacctcagaa aacttgacat cacatgttgc cggaaactaa gtagagtttc aatcacccaa 1380
atcgccaatt cgtgtccttt actagtctct ttgaagatgg agtcttgttc tcttgtttcc 1440
agagaagcct tttggttgat cggacaaaag tgtcggctac ttgaagagct tgacttaact 1500
gacaacgaga ttgatgatga aggactgaaa tccatatcta gttgtctgag tctttcctcg 1560
ttaaagctgg gaatttgtct taacataaca gacaaagggc tctcgtacat cgggatgggc 1620
tgttcaaatc tccgtgaact tgatctctat aggtcagtgg gaataacaga cgtaggcatc 1680
tccacaattg cccaaggctg cattcatctg gaaacaataa acatttcata ctgccaagac 1740
ataacagaca agtccctggt ttcattgtcc aaatgctcgt tgttacaaac attcgagagc 1800
aggggatgtc ctaacatcac gtcccaagga cttgcagcca ttgctgttcg gtgcaagcga 1860
ctcgccaagg ttgacttgaa gaagtgccca tccatcaatg atgcggggtt gctcgctctg 1920
gctcacttct ctcagaatct caaacagata aacgtgtcag acacagctgt gactgaagtg 1980
ggacttctct ccctagccaa catagggtgt ttacagaaca tagcggttgt gaactcgagt 2040
ggtttaagac cgagcggagt agcagcagca ttgctggggt gtggaggatt aaggaaagcg 2100
aaactacatg cgtccctaag atcactgctt cctctttctc taatccacca cttggaagct 2160
cgtggttgtg cgttcctctg gaaagacaat acccttcagg cggagttaga tcccaagtac 2220
tggaagcaac agctggaaga gatggcgcct taaattaaaa gtgagaagaa acattctgaa 2280
atgggaaaga ggagttccta tgggagccag cagacaggcc ctgttttggg cccagtgtgg 2340
attagctgga acaattttgg tctcttttgt gttgttgttg acggcgcgtg ttctaacaac 2400
cccacacaac cttacattat aagtctagtc acatggtggg tgacatggta ccgttgtata 2460
tgtagttttt gtttcttttt tttttttttt tggttgggga gccgaaatta acggacgtaa 2520
cagagtcaca aggggatgcc ttctctgtgc ctttttgact ttttcctcct ttcttttttt 2580
tctgtaatca tatgagtttt atgtaattta atgcctcatc aacttgcctg gatagggccg 2640
gcctttccac gtcaccttag tcgcgttttg cggtaaaaaa agtaaaaaga aaggccgtga 2700
ctcagtaggg cccattactg gtccagtcca ggctctcacc gtctgtacaa aaatagcgag 2760
tcagcgactc ggtgtgacag caacaaccct ctctcgttga aaaacggcta atgcgcccga 2820
cacttccatc ctcatattcc attacaaaag aaatccagct atgtagtatc aaactaccga 2880
aaacatacac atgtcaatca agtccaaaaa gtatcaccgt caaatgagtg attcagattt 2940
tgtttgctca tgaaagataa accaaatgat tacttcctta atcacctgcc ccttgttttc 3000
cattttttaa ttacataatg gaacccccca ttattaaaac atgatcattt tctttcgtaa 3060
taattaaact tcccaactaa atgcctctta ata 3093
<210> 57
<211> 2563
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 57
atgagcgagg aggtgcagag gtatggaggt ggtgggggtg ggggaggagg tggggtggcg 60
gcgctgtcgc tggatttgct cggccaggtg ctcgaccggg tgcgggagcc gcgggaccgc 120
aaggcgtgca ggctcgtgag ccgcgccttc gcccgcgccg aggccgcgca ccgccgcgcg 180
ctgcgggtgc tccgccgcga gcccctggcg cgcctcctcc gcgcgttccg ggcgctggag 240
cggctcgacc tctccgcctg cgcctccctc gacgacgcct ccctcgccgc cgcgctctcc 300
ggcgcggatc tcgccggggt gcgccgggtc tgcctcgccc gcgccagcgg cgtcgggtgg 360
cgcggcctcg acgcgctcgt ggcggcgtgc ccgaggctgg aggccgtcga cctgtcgcac 420
tgcgtcggcg ccggcgaccg cgaggccgcc gcgctggccg cggcgacggg gctgagggaa 480
ttgagcctcg agaagtgcct cggcgtcacg gacatggggc tcgccaaggt ggtggtcggg 540
tgcccgaggc tggagaagct gagcctcaag tggtgccgcg agatctccga catcggcatc 600
gatttgctct ccaagaagtg ccacgagctc cggagcctcg acatctccta cctcaaggtt 660
ggaaatgaat cccttagatc aatatcctca cttgagaaac ttgaggagtt ggcaatggtt 720
tgttgctcat gcatagatga tgatggcctg gaattactag gcaaggggag caactcactg 780
cagagcgttg atgtttcaag atgtgatcat gtaacctccc agggattagc ttcactcata 840
gatggtcaca attttctcca gaagttaaat gctgctgata gtttgcatga gatgagacag 900
tcgtttctgt ccaacttggc aaaactgaag gataccttga cagtgcttag acttgatggt 960
cttgaagtct catcctctgt tcttctggcc attggtggtt gtaataactt ggtcgagatt 1020
ggccttagca aatgcaatgg cgttacagat gaaggaatct cttcacttgt aactcaatgc 1080
agccacttaa gggttattga tctcacatgc tgtaacctcc ttaccaacaa tgcccttgat 1140
tcaatagctg agaactgtaa gatggttgaa catctccgtt tggaatcctg ttcttccata 1200
agcgaaaagg gactggagca gattgcaacc tcctgcccca atctaaagga gatagacctc 1260
actgactgtg gagtgaatga tgcagcattg cagcacttgg ccaagtgctc tgaactgctt 1320
gtactgaaat taggcctgtg ctcaagtatt tctgacaaag gtcttgcttt tatcagttca 1380
agctgtggaa agctgattga gcttgatctc tatcgctgca attctattac cgatgatggg 1440
ctggcagctt tagctaatgg ctgcaagaag attaagatgc taaacctatg ctactgcaac 1500
aagattaccg acagtggttt gggccaccta ggctctctag aggagctcac aaaccttgaa 1560
ctgaggtgct tggtccgtat aacaggtatt ggaatctcat cagttgccat cggctgcaag 1620
aacctgatag agatagactt gaagcgttgc tattctgtcg atgatgctgg cttgtgggct 1680
cttgcccgat atgcactaaa ccttagacag cttactatat catactgcca agtcactggc 1740
ctgggcctgt gtcacctgtt aagctccctg aggtgcctcc aggatgttaa gatggtacac 1800
ctctcatggg tctctataga agggttcgag atggcactga gagcggcttg cgggaggctg 1860
aagaaactga agatgctgag tgggctgaag tctgtgctgt ctcctgagct gctccagatg 1920
ctgcaggcct gcggctgccg catccgttgg gtcaacaagc ctcttgtcta caaggactaa 1980
acctgctctc atatcatcat ctgtgcagtg ttaatatcct cggatcatac accatggagc 2040
ccttaccaag tctagcatgc ttacaagcca tgttagatac ccgcaataat cgtcaatttt 2100
catacccaag atgtactgac gatggtgtct ctgcattgct gcagtgccat ccttatgttt 2160
ggcaactcct agaccaatgt tgtcatcttc agattaaaat ccaacatttg caaacatgag 2220
gcatcgaaac agttatgttc tgagcaagtg atccttgtac cagactgcaa tgaaatgctc 2280
tacactttca attggtatat gcaaagaaca atggcatgtt tgcctttgtc attgctccaa 2340
ctccaggctt gctgaccgat gcatctttta gagtttaaga acagctttag atcgcagaaa 2400
aactcttcct tgatgctcca ggatctgggc tgggacactg gtttcatggt tgtctgtatt 2460
gtatgactgg tggacccgtc cttttttttt taccttgatt acaataatct cgatgtactc 2520
attcaggcag agatttgaag taatgtattg aatcagtttt tat 2563
<210> 58
<211> 2844
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 58
cggcatcacc tatccacatc tttctccctc tctctctctc tcctcttccg tccctcctct 60
ctccctctct acgccacgcc tccacctcca cacctgcacg cctctcgctc tctctcctca 120
cctgtcgagc tgcccacagc ccgtacgtac ctgcccccag tcccagtccc cgccgccccg 180
cctgcccgac ccgcggctta tccaccacgt ccgccgctgg gctggatcga tcgggaccgg 240
tatcgcgccg ccgccgctgc cctcggcact cgcgggatcc tgttcctacc atgcagcagc 300
gctgcgccct tgcccgaccg cgccggcccg ccgaaccgcg cgttccgctc cccgacgatc 360
actccctcgt cgccgtcttc tccttcctct tcatccccac ctaaatcaac ctcctcgccg 420
cgaaattctg ctacaatttc ttcatcttcc cttcccgccg ggagcggacg gatcgccgct 480
tcctcggccg gcgggatgag ccgggaggcg cagaaactcg actgcgccgc cggcgccggg 540
gggatcgggg tcctgtcgct ggacctactg ggccaggtgc tggaacacct gcgggagccc 600
cgggaccgca agacgtgccg cctcgtcagc cgcgccttcg agcgcgccga ggccgcgcac 660
cgccgcgcgc ttcgggtgct ccgacgcgag ccgctcccgc gcctgctccg cgcgttcccg 720
gcgctcgagc ggctcgacct ctccgcctgc gcctcgctcg acgacgcctc cctcgccgcg 780
gccgtcgccg acgccggcgg agggctcgcc ggcctccgca gcgtgtgcct cgcgcgggcc 840
aatggtgtcg gctggcgcgg cctcgaggcg ctcgtcgcgg cctgccccaa gctcgcggcc 900
gtcgacctgt cgcactgcgt caccgccggg gaccgcgagg ccgccgcgtt ggcggcggcg 960
tccgagctca gggacctgag gctggacaaa tgccttgccg tcaccgacat ggggctcgcc 1020
aaggtggctg ttgggtgccc caagctggag aagctcagcc tcaagtggtg ccgtgagatc 1080
tctgacattg gaattgatct gctggccaag aagtgccctg agctccgcag cctcaacata 1140
tcctacctca aggtgggcaa tggatccctt ggatcaattt cgtcacttga gaggcttgag 1200
gaattggcaa tggtttgttg ttcaggtata gatgacgaag gcttggaatt gctgagcaag 1260
gggagcgatt cgctgcagag tgttgatgtg tcaagatgtg atcatgtgac ttccgagggg 1320
ttagcttcac tcatagatgg tcgcaatttt cttcagaagt tatatgctgc agattgtttg 1380
catgagatag gacagcgttt tctatccaag ttggcaagac tgaaggaaac cttgacattg 1440
ctgaaactcg acggtcttga ggtctcggac tctcttcttc aagccattgg tgaaagctgt 1500
aacaaattgg ttgagattgg gcttagcaaa tgcagtggtg ttactgatgg aggaatctca 1560
tctcttgtag ctcggtgtag tgacctaaga acaattgatc tcacatgctg caatctcatt 1620
accaacaatg cgcttgattc aatagctgac aactgtaaga tgcttgaatg tttgcggttg 1680
gaatcatgct ctttgataaa tgagaaggga ctagagcgaa ttacaacttg ttgccccaac 1740
cttaaggaga tagacctcac tgactgcgga gtagatgatg cagcattgca gcacttggct 1800
aaatgctctg aattgcgaat attgaaatta ggcctatgct caagtatttc tgacagaggc 1860
attgcattta tcagttcgaa ttgtggaaag ctcgtggagc ttgatctcta ccggtgcaac 1920
tctattactg atgatgggtt ggcagcttta gcaaatgggt gcaagaggat taagttactg 1980
aacttgtgtt actgcaacaa gatcactgat actggtttgg gtcacctagg ctccctggag 2040
gagctcacaa accttgaact gaggtgcttg gtccgcgtaa caggcattgg gatctcctca 2100
gttgcaatcg gatgcaagaa cctgatagag ctggacttga aacgatgcta ttcggttgat 2160
gacgctggcc tgtgggccct tgctcgttat gctttgaacc ttagacagct tacgatatcg 2220
tactgccaag tcacggggtt gggcctgtgc cacctgctga gctccctgcg atgcctccag 2280
gacattaaga tggtgcacct ctcatgggtc tcaatagaag ggtttgagat ggctctgcga 2340
gcagcctgcg ggaggctgaa gaagctgaag atgctctgcg ggctgaagac cgtgctctcc 2400
cctgagctcc tccagatgct gcaggcttgt ggctgccgaa taagatgggt caacaagcct 2460
cttgtctaca aggactagac agactcgtgt tcctcattgt gtgtgcagtg tcagcatcag 2520
catgtattgt caagatcttg caggtttgcc ctggctcacg ttgtgagtcc gcaataatcg 2580
ttgggggcgt aagctcccgt cccccagatg tggttatggt gcctttgggg cacttcttgc 2640
gccatttgtc actctctgct ccggtgtatc tgtgtatgca aacggaggca ccggtaatgt 2700
tcatgtgtat atagcgtgca gtagaatgat cccattttat gggattagtt agtgtgtaat 2760
tgttacctca tttcgcatga ttcgaatctt gagatgaaag aatcataagg ggtatgatcg 2820
atgcattgca ttcaccggtt ctta 2844
<210> 59
<211> 2642
<212> DNA
<213> 大麦(Hordeum vulgare)
<400> 59
ggggtgctac ctatccacat ctttctcctc ccatcctccc tccctctccc cactccccac 60
ccatcgaccc accttcctcc ctccgtacct tcgccaccac cggccgtcgc cttgccgctc 120
ctccgccgcc cggatcagga acgatcgcac cgtgcggccg cctcccgccc tgcgcgcgga 180
tcctaccatg ctgaggcgct gcgccccata ccgaccccgc agggccgccg ccgtaccgcg 240
cctcccgatc cccggcggcc acccctacct cgtcgccctc tccttcctct tcatcccgac 300
ctaagctcca cgcctcgccg acaggccggc cctcgccgcc ggagctgccc ggtggaatcg 360
tcagccgcga tgagcgagga ggaggcgcag aggtacggcg gcgggaccgg cggcggcggc 420
gtcggtgcgc tgtccgtgga tctgctcggc caggtgctcg atcgcgtgct ggagcggcgg 480
gaccgcaagg cctgccgcct cgtcagccgc gccttcgcgc gcgctgaggc cgcgcaccgc 540
cgggccctcc gggtgctccg ccgggagccg ctccctcgcc tgctccgcgc cttcccggcg 600
ctcgagcgcc tcgatctctc agcctgtgcc tcgctcgacg acgcgtctct tgcagccgct 660
ttagccggcg cggacctcgg caccgtccga caggtctgcc tggcgcgggc cagcggagtg 720
ggctggcgcg ggctggaagc cctcgtggcc gcctgcccca ggctcgaggc tgtcgacctg 780
tcgcactgcg tcggtgctgg ggatagggag gctgccgccc tggccgccgc ctctgggctg 840
agggagctaa atctggaaaa gtgccttggg gtcactgata tggggctcgc caaggtagcc 900
gtgggctgcc ccagactgga gactctgagc ttcaagtggt gccgtgaaat ctctgacatc 960
ggcgtcgatc tgcttgtcaa aaagtgccgc gacctccgca gccttgacat ctcctaccta 1020
aaggtgagca atgagtccct tagatcaata tcgactcttg agaagctaga ggagttggcc 1080
atggttgctt gctcatgtat agatgatgaa ggcctggaat tgcttagcag aggaagcaat 1140
tcattgcaga gtgttgatgt ctcaagatgc aatcacgtga cttcccaggg gttagcttca 1200
ctgatagatg gtcacagttt tctccagaag ttaaatgccg cagatagttt gcatgagatt 1260
ggacagaatt ttctatccaa gttggtaaca ctgaaggcaa ccttgaccgt gttgagactt 1320
gacggctttg aagtgtcatc ctctcttctt tcagcgattg gtgaaggttg taccaacttg 1380
gttgagattg gactaagcaa atgcaacggt gttacagatg aaggcatctc ttcgcttgta 1440
gctcgctgta gctacctaag gaaaattgat ctcacatgct gcaatctagt cacaaacgat 1500
tcccttgatt caatagctga caactgtaag atgcttgaat gcctccggtt ggagtcctgc 1560
tcttctataa acgagaaagg actagagaga attgcaagct gttgccccaa tctaaaggag 1620
atagatctca ctgattgtgg agtgaacgac gaagcgttgc atcatttggc gaagtgctct 1680
gaactgctga tattgaaatt aggcctgagc tcaagtattt cggacaaagg ccttggtttt 1740
attagttcaa agtgtgggaa gctcattgaa cttgacctct atcgctgcag ttctatcact 1800
gatgatgggc tggcagcctt agccaacggc tgcaagaaaa ttaagctgct gaacctttgt 1860
tactgcaaca agataactga tagtggtttg agccacctgg gcgctcttga ggagctcaca 1920
aaccttgagc tgaggtgcct cgttcgcatt acaggcatcg gaatttcttc cgttgtcatt 1980
ggctgtaaga gcctggtaga acttgacttg aagcgctgct attctgtcaa tgattctggg 2040
ctatgggctc ttgcccgata tgctctaaac cttagacagc tcaccatatc atactgccaa 2100
gttactggcc taggcttgtg ccacctgctt agctccttga ggtgcctcca ggacgtgaag 2160
atggtgcacc tgtcatgggt ttccatagaa gggttcgaga tggctctgcg agccgcttgc 2220
gggaggctga agaagctgaa gatactcggc ggtttgaagt ccgtgctatc ccctgacctg 2280
ctccagcttc tgcaagcctg cggctgccgc atcagatggg tcaacaagcc tcttgtctac 2340
aaggatgcca tctgatctga gaagtaccat attgttcatc ctttcggcaa gtttgtcatc 2400
gctgcgtagc cctgttagaa aattcacaat aactacacgc ctcgtcaatg ccatgcctaa 2460
ggtgtggtca agatcatgtc tgtttgagat gtcgagtaaa catggcagct gctgtcgaat 2520
atatgtcatg tacagtgaag cctttttttt tggacgggat gtacagtgaa gcccttttgc 2580
atagcagagt tgtgcaactg gagttctcta cttgatgtga aggaacctga aaaatatgct 2640
gt 2642
<210> 60
<211> 2389
<212> DNA
<213> 芸薹属(Brassica rapa)
<400> 60
gggaaacaat tgaagtaaag agagagaggt tcggttttgt gtttccaacc ggaaaaaaaa 60
ccccgaaggt ttgacgatga acccgaatct aataacccgt aacccaattc ggatcctgga 120
tcaaccggtt caccactctc tcctctatct ccgagctgtc tttctcttca tcccgactta 180
aaagatccgt actttttttt ttttgaaact ttccgaccaa actaaaagta aacacatact 240
tgtctttttt tttcttgttc tgtcgcgaaa tgccgctgtc tccatccatt ctatccgttc 300
tgtcggaaga tcttctagtt cgtgtctacg ggttcctaga cccgccctgt cggaaaaaat 360
ggcgactcgt cagcaaagag tttcaccgag tcgactcact gagccgcaca tcgatccgaa 420
tcctccgagt cgagttcctc cccgcgcttc tctccaacta ccctcacctc tcctccctcg 480
acctctccgt ctgccccaaa ctcgacgacg acgtcgttct gcgcctagcg tcctacggcg 540
ccgtttcgat aaagtcgctg aacctgagcc gcgccaccgc gctccgagcg aggggactgg 600
agacgctggc tcgcttgtgc cgaggcctcg agcgagtcga cgtgtctcac tgctgggggt 660
tcggagacag ggaagcggcg gcgctctccg tcgcggcggg gctgagggag gtgaggttgg 720
acaagtgctt gagcctaagc gacgtcggat tggcgaggat cgtcctcggg tgtagtaatc 780
tgagcaagat tagtttgaag tggtgtatgg agatctctga tctagggatc gatcttctct 840
gtaagaaatg caaagacttg aagtctctcg acgtctctta tcttaagatc acgaatgatt 900
cgatccggtc catagctttg ttgccaaagc tcgaggtttt agagatggtg aactgtccgt 960
tggtagatga tgatgggtta cagtatcttg agaatggttg tccttcgtta caggagattg 1020
atgtcacaag gtgtgagcgt gtgagtttgt ctggcgttgt ctccattgtc agaggccatc 1080
ctgatcttca acacctgaaa gccagtcact gtgtatcaga agtatctctg agcttcttac 1140
ataacatcaa agctttgaag catctcaaga ctctatggat cgatggagct cgtgtctctg 1200
actcctctct cttaacccta agctccagct gtagaccctt aacagatatc ggagtgagca 1260
aatgtgtggg tgtgacggat attggcatca caggactagc acgcaactgc ataaacctga 1320
aaaccctaaa cctagcgtgc tgcgggtttg tgactgatgc agccatctct gcggtagctc 1380
agtcttgccg caatctggag actcttaagt tagagtcttg tcatatgata accgagaaag 1440
gtcttcaatc actcggatgt tactccaagc atcttcaaga actcgatctt accgactgtt 1500
atggcgtcaa tgacagaggg ctagaatata tctcaaagtg ttcgaatctt ctaaggttga 1560
aacttggcct ctgcacaaat atctcagaca aagggatgtt tcatatcggt tccaaatgtt 1620
ccaagcttct agaacttgat ctataccgct gtggtggttt tggagatgac ggtttagcag 1680
ctatatcccg aggttgcaag agcttgaacc ggctcattat atcgtactgt ggtgagctaa 1740
cagacacagg ggttgaacaa atccgccagc ttgaacatct aagccatctt gaacttcgag 1800
ggctaaagaa tataaccggt gctggtctag ctgcagttgc gtgcggctgc aagaaattgg 1860
attacttgga cctcaagaag tgcgagaata tagatgactc aggcttctgg gcgcttgctt 1920
actttgcaag aaacctaaga cagataaact tgtgctattg ctcggtttct gatacggctc 1980
tatgcatgtt aatgagcaat ctaagtcggg ttcaagacgt tgacttagtc aacctgaacc 2040
gtgtgacagt ggaagggtct gagtttgctc taagagcctg ttgcaatagg ctcaagaagc 2100
ttaaactttt cgctcctctc agattcttgc tctcatctga attgcttgag atgcttcatg 2160
ctcgtggttg ccgcattaga tgggactgaa agacgaaact ttcttcaatg gaactttact 2220
agtaacactt taacgtgttc atatgtctac ttgttgtatc tataaaaaat tcgactatgt 2280
ttttaaattc ggtttaccaa ttatatgtct accgctttgg tattatcttc caacataaac 2340
aatagtagtt ttagaaaaca aaaatattat tttggtattc tatgcaaaa 2389
<210> 61
<211> 2687
<212> DNA
<213> 大豆(Glycine max)
<400> 61
tttcaacaat ttttctctca tgtccaagtt ttgtcctgag caggacaact taattggcgg 60
ttcccttctc gcccttggat ctttaattgg ttgttccctc cgctccaaga aaaaaaaggg 120
catttatggc aaaaaagagc agcagcattc aacaagttgc gagaggaaca caggactcaa 180
ttcacatggc cgtacccgaa gaaagcgaaa agtgtgaaac acgcaccctc tgaaatctaa 240
aattcaattt tcccttccct gaccctgttt cttctattca cattgtattc tccttgtttt 300
ttcgcttttc aattttccat tgaactcaga caaaaacaga aagaaagggg aaaaaaatga 360
acccagagaa atctcgttgc aggttgccac ttcgcacgct ctctaaacac acgcaccacc 420
ctcttctcca cctccgcctc cttttcctct tcgttcccac ctaaactgtt tcccttcagt 480
tccacgtcac attaacaaac cttttttttt cttaaaaaaa aaactttagt aattacgaaa 540
tttctgatac cttaatgttg tctgaatccg ttttctgcct cttgaccgag gacctgctca 600
tccgggtcct cgaaaagctc gggccggatc ggaaaccgtg gcggctggtg tgcaaggagt 660
ttctccgggt cgaatcgtcg acccggaaga agattcggat cctccgaatc gagtttctgc 720
ttgggttgtt ggagaagttc tgcaacattg agacgctgga cctgtcgatg tgtccgcgga 780
tcgaggacgg agctgtgtcg gttgtgctga gtcagggatc ggcgagttgg actcggggac 840
tgaggagact cgtgctgagt cgcgccaccg ggttggggca tgtgggcttg gagatgctga 900
ttcgggcgtg tcccatgttg gaggccgtgg atgtgtccca ttgttggggg tatggcgaca 960
gagaggctgc ggcgctatcg tgcgccgcga ggttgaggga actcaacatg gataagtgtt 1020
tgggagttac tgatattggg ttggccaaga ttgctgtcgg gtgtgggaaa ttggagaggc 1080
tgagtttgaa gtggtgcttg gagatttctg atctggggat tgatcttctt tgcaaaaagt 1140
gcttggattt gaaatttctc gacgtgtcat atctcaaggt aacaagtgaa tctttgagat 1200
caatagcttc tctgttaaag cttgaggttt ttgttatggt tggctgctct ttagtggatg 1260
acgttggatt gcggtttctt gaaaaagggt gtccactgct taaggcaatt gatgtatcaa 1320
ggtgtgattg tgttagctct tccggtttaa tatctgtaat tagtggacat ggaggtcttg 1380
agcagttgga tgcaggatat tgcctctctg agctttcagc acctcttgtt aaatgcttgg 1440
agaatttaaa gcagctgaga ataattagaa ttgatggtgt tcgagtttct gactttatcc 1500
tccagacaat tggcaccaat tgcaagtctt tagtggaact tggtttaagc aaatgcgttg 1560
gagtgaccaa caagggaatt gtgcagctag tatctggctg tggctatttg aagatacttg 1620
atttgacttg ttgtcggttc atatctgatg cagcaatctc tactatagca gactcttgtc 1680
cagaccttgt ctgtctgaag ctagaatctt gtgatatggt gactgagaat tgtctttatc 1740
aacttggatt aaattgctcg cttctcaaag agcttgatct tactgattgc tctggtgttg 1800
atgacatagc tctaagatat ctatcaagat gttcagaact tgtaagattg aaattaggat 1860
tatgcacaaa tatatcagac ataggattgg cacacattgc ttgtaactgc ccaaaaatga 1920
ctgaacttga tctctatcga tgtgtacgta ttggagatga tgggctagcg gcactaacga 1980
gtggatgcaa ggggttgaca aacctcaact tgtcatattg caatagaatt acagacagag 2040
ggttggagta tatcagccat cttggtgaac tatctgatct ggagttgcgt gggctttcta 2100
atatcacaag cattggtata aaagcagttg caataagttg caagagattg gcagatttag 2160
atttgaaaca ttgcgaaaaa attgatgatt caggtttctg ggcccttgct ttttattcgc 2220
aaaacctgcg gcagataaat atgagctact gtatcgtgtc agatatggtg ttgtgcatgc 2280
ttatgggtaa cctgaaacgc ctgcaagatg ccaaactggt ttgtctttct aaagtgagtg 2340
taaaaggatt ggaagttgcc cttagagctt gctgtggtcg gattaaaaag gttaaactgc 2400
agaggtccct caggttctcg ctttcctctg aaatgctcga gacaatgcat gcacgagggt 2460
gcaagatcag atgggattag ccaattgtca cgctattaat ctgttatact ttcttttctt 2520
ggaagggtgc tgcttcatta agatcttttt tattcaaaat tttatatttc tctagcattt 2580
tcttttcttt aaactctgtt accagatttc tacggaaggt atttttttca ccttcttaag 2640
ttacatcatc tccaataaag catgaggtta cttatcttcg aattaaa 2687
<210> 62
<211> 46
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 62
ttggggccca acgttctcga gtgtttcagc atatttgcat gtttga 46
<210> 63
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 63
cggccgcaaa gtcgacgaat tctgctgctg ctgctggtgg gt 42
<210> 64
<211> 52
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 64
cgacctgcag gcatgcaagc ttaaagtctg tatatatgac acagaagaaa cc 52
<210> 65
<211> 43
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 65
cacctgtaat tcacacgtgg tgttaaggcg ccatctcttc cag 43
<210> 66
<211> 41
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 66
ttggggccca acgttctcga gtgacctgag gctgaaaatc g 41
<210> 67
<211> 47
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 67
cggccgcaaa gtcgacgaat tctttgcaac agaaccagaa ataaaca 47
<210> 68
<211> 47
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 68
gcctgcaggc tctagaggat cctgtttcag catatttgca tgtttga 47
<210> 69
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 69
atgtttttgg cgtcttccat ggtgctgctg ctgctggtgg gt 42
<210> 70
<211> 47
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 70
gcctgcaggc tctagaggat cctgtttcag catatttgca tgtttga 47
<210> 71
<211> 57
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 71
agactatctc ggttaaagac tgcctcgatt aacagattcg agtgcggaca gtacgat 57
<210> 72
<211> 51
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 72
taatcgaggc agtctttaac cgagatagtc ttctactacc aatggcctaa c 51
<210> 73
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 73
atgtttttgg cgtcttccat ggtgctgctg ctgctggtgg gt 42
<210> 74
<211> 96
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 74
tcaatctatc gtactgtccg cactcgaatc tgtccttcct cgcatgctta ctccaccata 60
tacttctact accaatggcc taacttgttg attgcg 96
<210> 75
<211> 96
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 75
cgcaatcaac aagttaggcc attggtagta gaagtatatg gtggagtaag catgcgagga 60
aggacagatt cgagtgcgga cagtacgata gattga 96
<210> 76
<211> 96
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 76
tcaatctatc gtactgtccg cactcgaatc tgttaatcga ggcagtcttt aaccgagata 60
gtcttctact accaatggcc taacttgttg attgcg 96
<210> 77
<211> 96
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 77
cgcaatcaac aagttaggcc attggtagta gaagactatc tcggttaaag actgcctcga 60
ttaacagatt cgagtgcgga cagtacgata gattga 96

Claims (15)

1.一种RAE1基因或RAL1基因，或其编码蛋白的用途，其特征在于，用于选自下组的一种或多种用途：
(1)降低STOP1蛋白的表达量；
(2)降低或下调选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；
(3)降低植物抗铝毒能力；和/或
(4)制备制剂或农用组合物，且所述的制剂或农用组合物用于降低STOP1蛋白的表达量、降低植物抗铝毒能力、或下调选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；
所述RAE1基因、或其编码蛋白来源于拟南芥；OsRAE1.1、OsRAE1.2；XM_008677340.2；AK372025.1；XM_009132381.2；XM_003521974.4；或其组合；所述RAL1基因、或其编码蛋白来源于AT5G27920、LOC_Os12g36670、XM_008664387.2、AK358574.1、XM_009113489.2、XM_003521631.4、或其组合。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述RAE1蛋白的氨基酸序列选自下组：
(i)如SEQ ID NO.:35、37-42中任一所示氨基酸序列的多肽。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述RAL1蛋白的氨基酸序列选自下组：
(i)如SEQ ID NO.:50-55中任一所示氨基酸序列的多肽。
4.一种RAE1突变蛋白的用途，所述的RAE1突变蛋白为与野生型RAE1蛋白相比活性下降的RAE1突变蛋白，其特征在于，用于选自下组的一种或多种用途：
(1)提高STOP1蛋白的表达量；
(2)提高或上调选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；
(3)增强植物抗铝毒能力；和/或
(4)制备制剂或农用组合物，且所述的制剂或农用组合物用于提高STOP1蛋白的表达量、增强植物抗铝毒能力、或上调选自下组基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；
所述的活性下降指所述突变蛋白的介导STOP1蛋白降解的活性A1与野生型RAE1蛋白或野生型RAL1蛋白的介导STOP1蛋白降解的活性A0之比≤0.8，较佳地≤0.6；
所述的RAE1突变蛋白在对应于野生型的RAE1蛋白具有选自下组的突变：G167R、G439R、R466K、Q524STOP、S568L、G116R、G193R、W400STOP、或其组合。
5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述的增强植物抗铝毒能力包括上调选自下组的基因表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合。
6.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述野生型RAE1蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.:35、37-42中任一所示。
7.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述野生型RAL1蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.:50-55中任一所示。
8.一种调控植物抗铝毒能力的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：调节所述植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而调控植物抗铝毒能力；其中，所述调控植物抗铝毒能力为增强植物抗铝毒能力时，下调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，或使RAE1蛋白或RAL1蛋白丧失活性；所述调控植物抗铝毒能力为降低植物抗铝毒能力时，上调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性；
并且所述RAE1蛋白来源于拟南芥；OsRAE1.1、OsRAE1.2；XM_008677340.2；AK372025.1；XM_009132381.2；XM_003521974.4；或其组合；所述RAL1蛋白来源于AT5G27920、LOC_Os12g36670、XM_008664387.2、AK358574.1、XM_009113489.2、XM_003521631.4、或其组合；所述的植物选自下组：拟南芥、水稻、或其组合。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述调控植物抗铝毒能力包括调控植物分泌的有机酸水平。
10.一种调控基因的表达的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
(i)调节所述植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而调控基因的表达；
其中，所述基因选自下组：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；
步骤(i)包括：上调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而下调选自下组的基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；或
下调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而上调选自下组的基因的表达：AtALMT1、AtMATE、ALS3、或其组合；
并且所述RAE1蛋白来源于拟南芥；OsRAE1.1、OsRAE1.2；XM_008677340.2；AK372025.1；XM_009132381.2；XM_003521974.4；或其组合；所述RAL1蛋白来源于AT5G27920、LOC_Os12g36670、XM_008664387.2、AK358574.1、XM_009113489.2、XM_003521631.4、或其组合。
11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述方法还包括步骤：
(ii)调控所述植物中STOP1蛋白的表达量和/或活性，从而调控RAE1基因的表达。
12.一种调控STOP1蛋白水平的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
(a)调节所述植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而调控STOP1蛋白水平；
其中，步骤(a)包括：上调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而下调STOP1蛋白水平；或
下调植物中RAE1蛋白或RAL1蛋白的表达量和/或活性，从而上调STOP1蛋白水平；
并且所述RAE1蛋白来源于拟南芥；OsRAE1.1、OsRAE1.2；XM_008677340.2；AK372025.1；XM_009132381.2；XM_003521974.4；或其组合；所述RAL1蛋白来源于AT5G27920、LOC_Os12g36670、XM_008664387.2、AK358574.1、XM_009113489.2、XM_003521631.4、或其组合
13.一种RAE1蛋白或RAL1蛋白，或其编码基因的用途，其特征在于，用于筛选具有调控植物抗铝毒能力的药物；其中，所述RAE1蛋白、或其编码基因来源于拟南芥；OsRAE1.1、OsRAE1.2；XM_008677340.2；AK372025.1；XM_009132381.2；XM_003521974.4；或其组合；所述RAL1蛋白、或其编码基因来源于AT5G27920、LOC_Os12g36670、XM_008664387.2、AK358574.1、XM_009113489.2、XM_003521631.4、或其组合。
14.一种鉴定植物抗铝毒能力调控剂的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
(a)提供待鉴定的调控剂，和RAE1基因或RAL1基因或其编码蛋白；
(b)将所述待鉴定的化合物和所述RAE1基因或RAL1基因或其编码蛋白接触；
(c)测定所述RAE1蛋白或RAL1蛋白的活性或表达量；
(d)基于步骤(c)的结果，鉴定所述化合物为植物抗铝毒能力促进剂或抑制剂；
其中，所述RAE1基因、或其编码蛋白来源于拟南芥；OsRAE1.1、OsRAE1.2；XM_008677340.2；AK372025.1；XM_009132381.2；XM_003521974.4；或其组合；所述RAL1基因、或其编码蛋白来源于AT5G27920、LOC_Os12g36670、XM_008664387.2、AK358574.1、XM_009113489.2、XM_003521631.4、或其组合；
步骤(c)的结果为RAE1蛋白的活性和/或表达量降低或下调，则所述待鉴定的化合物为植物抗铝毒能力促进剂；
步骤(c)的结果为RAE1蛋白的活性和/或表达量增加或上调，则所述待鉴定的化合物为植物抗铝毒能力抑制剂；
步骤(c)的结果为RAL1蛋白的活性和/或表达量降低或下调，则所述待鉴定的化合物为植物抗铝毒能力促进剂；
步骤(c)的结果为RAL1蛋白的活性和/或表达量增加或上调，则所述待鉴定的化合物为植物抗铝毒能力抑制剂。
15.一种调控RAE1的表达的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
(a)调控所述植物中STOP1蛋白的表达量和/或活性，从而调控RAE1基因的表达；
其中所述方法为上调RAE1的表达的方法，所述方法包括步骤：
(a)下调所述植物中STOP1蛋白的表达量和/或活性；
并且，所述RAE1基因来源于拟南芥；OsRAE1.1、OsRAE1.2；XM_008677340.2；AK372025.1；XM_009132381.2；XM_003521974.4；或其组合。
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