CN109748920A - 一种l-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐及其合成方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种L‑5‑甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐及其合成方法，所述合成方法工艺简单、易于操控、成本低廉、易于实现，非常适合大规模工业化生产，特别是本发明方法制备的L‑5‑甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐稳定性好，溶解性优异，产率高，从而能够为L‑5‑甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的应用提供基础。

Description

一种L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐及其合成方法

技术领域

本发明属于有机化学合成技术领域，具体涉及一种L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐，且还涉及所述氨基葡萄糖盐的合成方法。

背景技术

叶酸，又名维生素B9，是一种水溶性维生素，由蝶啶、对氨基苯甲酸和L-谷氨酸组成，于1945年首次人工合成。由于人类自身无法合成叶酸，加上其水溶性低，及人体储备叶酸的程度有限，因此，叶酸缺乏是最常见的营养缺乏症。叶酸对细胞的分裂生长及核酸、氨基酸、蛋白质的合成起着重要的作用，其缺乏可导致红血球的异常，未成熟细胞的增加，贫血以及白血球减少，故而，在生命的所有阶段，叶酸缺乏对人体健康都有着深远的负面影响，且是许多失调症状的病因(如神经管缺陷、肠易激综合征、老年认知障碍、巨红血球性贫血症、癫痫症等)。特别地，在妊娠期，补充叶酸能够有效预防胎儿发生神经管缺陷症状，且同时在子代先天畸形、血管疾病、代谢疾病及肿瘤等方面也发挥着重要的作用。然而，在中国成年人中，血浆中叶酸浓度普遍不达标，即存在叶酸缺乏现象。

L-5-甲基四氢叶酸是叶酸最具生物活性和功能的形式，是叶酸参与生理代谢的唯一途径，也是出现在动物血浆和细胞游离叶酸存在的唯一形式，普通叶酸只有代谢为L-5-甲基四氢叶酸才能参与甲基化过程及DNA合成，且其生物利用度明显高于普通叶酸。近年来有研究表明，L-5-甲基四氢叶酸是唯一能能穿越血脑屏障且可以立即被生物体完全利用的叶酸类化合物。但是L-5-甲基四氢叶酸不稳定，特别对氧化高度敏感，因此有必要开发一种稳定的固体形态以用作药物活性成分和食品添加剂。

L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐作为一种有代谢活性的叶酸盐，是身体可以直接利用而不需要任何代谢的“成品”叶酸，且其已经过严格的安全性和一致性测试，允许将其推广到各种药物、常规食品、饮料和补充剂中使用。尤其L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐在水中表现出令人惊叹的高溶解性，甚至高于1g/ml，而常用叶酸类化合物(6S)-5-甲基四氢叶酸钙盐仅仅是微溶(1.1g/100ml)。L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的水溶性高意味着其可以更好地被黏膜细胞吸收，因此更容易进入血液和循环系统，从而可能更好地被生物体利用。

然而，L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的化学合成工艺复杂，控制严苛，生产成本较高，故而急需一种新的方法大量合成L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐。

Gnosis S.p.a.提出了一种L-5-甲基四氢叶酸葡氨盐制备方法和用途(US 7,947,662)。在该制备方法过程中，要先分别制备(游离酸)L-5-甲基四氢叶酸和(游离碱)氨基葡萄糖，然后以水为溶剂进行加成。然而，该制备方法忽略了溶液PH对反应物活性的影响，且收率低，稳定性差，而且需要专用设备冷冻干燥器或喷雾干燥器，从而造成成本昂贵。

专利CN103450202公开了由L-5-甲基四氢叶酸钙制备晶型的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖的方法。该制备方法需要在液体(乙醇/水)环境中离子化，并在液体(丙酮/乙醇/水)环境中结晶，其也忽略了PH对反应物活性的影响，同时反应物在有机溶剂环境中溶解度差致使反应缓慢，效率不高，且未对混合溶剂比例进行较明确比例规定致使产量不稳定。基于这些缺陷，目前未见相关表征附录和原材料或成品流入市场，可见此方法或重复性差，或不利于产业化生产。另外，通过该方法的到的是晶型的盐，其在水中的溶解度通常会低于无定型的盐。

因此，寻找到可重复性更强、收率高、稳定好且成本更可控的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐制备方法是非常有必要的。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明发明人对现有合成方法不断研究和试验，提供了一种新的合成L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的工艺，其操作简便，成本低廉、易于实现，可重复性高，从而可实现工业化生产，有利于L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的大规模推广应用。此外，通过本发明合成工艺合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐稳定性好，溶解性好，能够大量获得。

为了实现上述目的，在本发明的第一方面，提供一种L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的合成方法，其依次包括如下步骤：

(1)在惰性气氛和冰盐浴条件下，将L-5-甲基四氢叶酸或其盐加入碱性溶液中以获得混合均匀的水溶液；

(2)将步骤(1)获得的水溶液进行避光处理，并在避光条件下向反应体系中加入分批加入氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐进行混合，同时加入pH调节剂以使整个反应体系的pH值维持在6-7之间，然后在常温、避光和氮气气氛下继续反应9-16小时；

(3)随后将有机溶剂加入到步骤(2)的反应体系中以析出固体产物，之后进行分离和干燥，获得本发明L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐。

本发明合成方法工艺简单、易于操控、成本低廉、易于实现，非常适合大规模工业化生产，特别是本发明方法制备的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐稳定性好，溶解性优异，产率高，从而能够为L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的应用提供基础。

优选地，在上述合成方法中，所述冰盐浴为冰和氯化钠溶液混合而成的能够维持将温度在-5-10℃条件下的混合物。众所周知，叶酸的活性与温度有关，因此在制备和保存过程中需要保持在低温下以免其失去活性。

优选地，在上述合成方法中,所述惰性气氛为氮气、氩气和/或氦气等气氛。

优选地，在上述合成方法中，所述步骤(1)中L-5-甲基四氢叶酸与碱性溶液的质量比为1:1-40，优选为1：1-20，更优选1:3-10。

优选地，在上述合成方法中，所述步骤(1)中的碱性溶液包括但不限于氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸钠、磷酸钾、碳酸钠和/或碳酸钾的水溶液，且所述碱性溶液的质量百分浓度为20-35％。通过加入合适的量和合适浓度的碱性溶液，从而调节反应物的活性，从而使反应能够在较高的速率下进行。

优选地，在上述合成方法中，所述步骤(1)中的L-5-甲基四氢叶酸盐为L-5-甲基四氢叶酸钙盐。

在本发明步骤(1)中，为了加快述L-5-甲基四氢叶酸或其盐的溶解速率可以采用超声的方式加速溶解。

优选地，在上述合成方法中，所述L-5-甲基四氢叶酸或其盐与氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的摩尔比1：(1-5)，优选1:2，通过控制这两个原料的投料比来使所获得产物具有上述结构。

优选地，在上述合成方法中，所述步骤(2)中的pH调节剂为质子酸，优选盐酸和或硫酸溶液，更优选盐酸，最优选质量百分浓度为20％的盐酸。

优选地，在上述合成方法中，所述步骤(2)中的加入pH调节剂使整个反应体系的pH值维持在6.5-6.8之间。

优选地，在上述合成方法中，所述步骤(2)中加入的氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的原则是少量多次以保证整个反应体系的温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在较低温度下，从而使反应体系中各个物质维持较好的活性。

优选地，在上述合成方法中，所述步骤(3)中的有机溶剂选自可与水混合的与水混溶的有机溶剂、其混合物及其与水的混合物，更优选地，选自C1～C6的醇类、酮类、酰胺类、腈类、亚砜和砜，最优选甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、丁酮和乙腈。

本发明合成方法既可以用L-5-甲基四氢叶酸钙盐为原料，也可直接用5-甲基四氢叶酸为原料，同时既可用氨基葡萄糖盐为原料，也可直接用氨基葡萄糖为原料，操作简便，成本低廉，易于实现，可实现工业化生产。

此外，在本发明的第二方面，本发明还提供一种通过上述合成方法合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐，所述L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的化学结构式为

所述L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐稳定性和溶解性均优异，能够大量用作食品添加剂和药物活性成分，克服了现有叶酸类化合物或稳定性差或溶解性差的缺陷，从而为以后治疗我国成年人叶酸缺乏症提供优异廉价的药物选择。

与现有技术相比，本发明反应体系以水为介质，原料易得，操作简便，易于实现，可实现工业化生产。在反应过程中，通过控制温度(先是冰盐浴然后是常温)、惰性气氛(氮气、氩气或氦气)、反应体系的pH，避光等措施实现反应体系中各物质的活性保持最优异，从而达到提高产量和产物稳定性的目的。此外，本发明合成方法获得L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐溶解性均较好。

附图说明

图1为本发明实施例1所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振碳谱图；

图2为本发明实施例1所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振氢谱图。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加简洁明了，本发明将用以下具体实施例进行阐明，但本发明绝非仅限于这些实施例。以下实施例仅为本发明较优选的实施例，且仅用于阐述本发明，不能理解为对本发明的范围的限制。应当指出的是，凡在本发明的实质和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

以下实施例制备的L-5-甲基四氢叶酸氨基酸盐的纯度均用HPLC进行检测，并给出面积百分数。其中，采用HPLC检测的条件为：

色谱柱：反相C18柱4.6mm×250mm，粒径5μm；或其他等效的色谱柱；

流动相A：称取6.8g磷酸二氢钾溶解于1L水中，用氢氧化钾溶液调节pH至6.5，过滤并超声；

流动相B：称取4.08g磷酸二氢钾溶解于650mL水中，与350mL乙腈混合，用氢氧化钾溶液调节pH至8.0，过滤并超声；

流速:1.0mL/min；

检测波长：280nm；

柱温：25℃；

运行时长：36min；

进样体积：10μL。

制备实施例

制备实施例1

在氮气气氛和冰盐浴条件下，将4.6g L-5-甲基四氢叶酸(10mmol)加入20ml质量百分浓度为30％的氢氧化钠水溶液中，并通过超声加速L-5-甲基四氢叶酸的溶解速率，从而获得混合均匀的水溶液。然后将所获得的水溶液进行避光处理以使反应体系在避光条件下进行处理，之后在避光条件下向反应体系中少量多次加入3.58g氨基葡萄糖(20mmol)进行混合(L-5-甲基四氢叶酸与氨基葡萄糖的摩尔比为1：2)，只要保证整个反应体系的实时温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在0-5℃范围内即可，同时滴加质量百分浓度为20％的盐酸水溶液以调节整个反应体系的pH值维持在6.8。添加完氨基葡萄糖之后，撤去冰盐浴，之后在常温避光惰性气体条件下反应12h。随后，将200ml乙醇加入到反应体系中，析出淡黄色固，对产物进行抽滤分离并在冻干机中干燥16h，得到7.20g L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐(产率为92％)，HPLC纯度99.2％。

所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振碳谱图数据为：13C NMR(400MHz,D₂O),δ182.17,179.33,169.74,160.19,154.68,152.21,151.52,128.92,121.17,112.20,98.43,92.78,89.09,76.13,72.09,72.54,69,64,69.62,69.56,60.42,60.27,56.70,56.82,54.67,54.25,42.84,42.79,35.60,34.17,28.33。

所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振氢谱图的数据为：1H NMR(400MHz,D₂O),δ7.45(d,2H)；6.49(d,2H)；5.25(d,2H)；4.13(q,H)；3.73-3.46(m,7H)；3.31-3.26(m,3H)；3.12-3.07(m,3H)；3.00-2.94(m,2H)；2.86-2.73(m,2H)；2.36(s,3H)；2.19-2.09(m,1H)；1.90-1.81(m,1H)。

制备实施例2

在氮气气氛和冰盐浴条件下，将4.6g L-5-甲基四氢叶酸(10mmol)加入30ml质量百分浓度为30％的氢氧化钠水溶液中，并通过超声加速L-5-甲基四氢叶酸的溶解速率，从而获得混合均匀的水溶液。然后将所获得的水溶液进行避光处理以使反应体系在避光条件下进行处理，之后在避光条件下向反应体系中少量多次加入3.58g氨基葡萄糖(20mmol)进行混合(L-5-甲基四氢叶酸与氨基葡萄糖的摩尔比为1：2)，只要保证整个反应体系的实时温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在0-5℃范围内即可，同时滴加质量百分浓度为20％的盐酸水溶液以调节整个反应体系的pH值维持在6.5。添加完氨基葡萄糖之后，撤去冰盐浴，之后在常温避光惰性气体条件下反应12h。随后，将200ml乙醇加入到反应体系中，析出淡黄色固，对产物进行抽滤分离并在冻干机中干燥16h，得到7.10g L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐(产率为90.8％)，HPLC纯度99.5％。所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振氢谱图、核磁共振碳谱图和实施例1类似。

制备实施例3

在氮气气氛和冰盐浴条件下，将4.6g L-5-甲基四氢叶酸(10mmol)加入40ml质量百分浓度为30％的氢氧化钠水溶液中，并通过超声加速L-5-甲基四氢叶酸的溶解速率，从而获得混合均匀的水溶液。然后将所获得的水溶液进行避光处理以使反应体系在避光条件下进行处理，之后在避光条件下向反应体系中少量多次加入3.58g氨基葡萄糖(20mmol)进行混合(L-5-甲基四氢叶酸与氨基葡萄糖的摩尔比为1：2)，只要保证整个反应体系的实时温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在0-5℃范围内即可，同时滴加质量百分浓度为20％的盐酸水溶液以调节整个反应体系的pH值维持在6.5。添加完氨基葡萄糖之后，撤去冰盐浴，之后在常温避光惰性气体条件下反应12h。随后，将200ml乙醇加入到反应体系中，析出淡黄色固，对产物进行抽滤分离并在冻干机中干燥16h，得到7.16g L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐(产率为91.6％)，HPLC纯度98.0％。所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振氢谱图、核磁共振碳谱图和实施例1类似。

制备实施例4

在氮气气氛和冰盐浴条件下，将4.6g L-5-甲基四氢叶酸(10mmol)加入20ml质量百分浓度为30％的氢氧化钠水溶液中，并通过超声加速L-5-甲基四氢叶酸的溶解速率，从而获得混合均匀的水溶液。然后将所获得的水溶液进行避光处理以使反应体系在避光条件下进行处理，之后在避光条件下向反应体系中少量多次加入3.58g氨基葡萄糖(20mmol)进行混合(L-5-甲基四氢叶酸与氨基葡萄糖的摩尔比为1：2)，只要保证整个反应体系的实时温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在0-5℃范围内即可，同时滴加质量百分浓度为20％的盐酸水溶液以调节整个反应体系的pH值维持在7.0。添加完氨基葡萄糖之后，撤去冰盐浴，之后在常温避光惰性气体条件下反应12h。随后，将200ml乙醇加入到反应体系中，析出淡黄色固，对产物进行抽滤分离并在冻干机中干燥16h，得到7.32g L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐(产率为93.6％)，HPLC纯度98.3％。所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振氢谱图、核磁共振碳谱图和实施例1类似。

制备实施例5

在氮气气氛和冰盐浴条件下，将4.6g L-5-甲基四氢叶酸(10mmol)加入20ml质量百分浓度为30％的氢氧化钠水溶液中，并通过超声加速L-5-甲基四氢叶酸的溶解速率，从而获得混合均匀的水溶液。然后将所获得的水溶液进行避光处理以使反应体系在避光条件下进行处理，之后在避光条件下向反应体系中少量多次加入4.48g氨基葡萄糖(25mmol)进行混合(L-5-甲基四氢叶酸与氨基葡萄糖的摩尔比为1：2.5)，只要保证整个反应体系的实时温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在0-5℃范围内即可，同时滴加质量百分浓度为20％的盐酸水溶液以调节整个反应体系的pH值维持在7.0。添加完氨基葡萄糖之后，撤去冰盐浴，之后在常温避光惰性气体条件下反应12h。随后，将200ml乙醇加入到反应体系中，析出淡黄色固，对产物进行抽滤分离并在冻干机中干燥16h，得到7.36g L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐(产率为94.1％)，HPLC纯度97.9％。所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振氢谱图、核磁共振碳谱图和实施例1类似。

制备实施例6

在氮气气氛和冰盐浴条件下，将4.6g L-5-甲基四氢叶酸(10mmol)加入20ml质量百分浓度为30％的氢氧化钠水溶液中，并通过超声加速L-5-甲基四氢叶酸的溶解速率，从而获得混合均匀的水溶液。然后将所获得的水溶液进行避光处理以使反应体系在避光条件下进行处理，之后在避光条件下向反应体系中少量多次加入5.37g氨基葡萄糖(30mmol)进行混合(L-5-甲基四氢叶酸与氨基葡萄糖的摩尔比为1：3)，只要保证整个反应体系的实时温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在0-5℃范围内即可，同时滴加质量百分浓度为20％的盐酸水溶液以调节整个反应体系的pH值维持在6.8，之后加入0.206g 4-二甲氨基吡啶(1mmol)和0.206g N,N,-二环已基碳二亚胺(1mmol)。搅拌均匀之后，撤去冰盐浴，之后在常温避光惰性气体条件下反应8h。随后，将200ml乙醇加入到反应体系中，析出淡黄色固，对产物进行抽滤分离并在冻干机中干燥16h，得到7.41g L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐(产率为94.8％)，HPLC纯度98.2％。所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振氢谱图、核磁共振碳谱图和实施例1类似。

制备实施例7

在氮气气氛和冰盐浴条件下，将4.97g L-5-甲基四氢叶酸钙盐(10mmol)加入16ml质量百分浓度为30％的氢氧化钾水溶液中，并通过超声加速L-5-甲基四氢叶酸的溶解速率，从而获得混合均匀的水溶液。然后将所获得的水溶液进行避光处理以使反应体系在避光条件下进行处理，之后在避光条件下向反应体系中少量多次加入6.465g氨基葡萄糖盐酸盐(30mmol)进行混合(L-5-甲基四氢叶酸与氨基葡萄糖的摩尔比为1：3)，只要保证整个反应体系的实时温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在0-5℃范围内即可，同时滴加质量百分浓度为20％的盐酸水溶液以调节整个反应体系的pH值维持在6.5。添加完氨基葡萄糖之后，撤去冰盐浴，之后在常温避光惰性气体条件下反应12h。随后，将200ml乙醇加入到反应体系中，析出淡黄色固，对产物进行抽滤分离并在冻干机中干燥16h，得到7.31g L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐(产率为90.6％)，HPLC纯度98.6％。所合成的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的核磁共振氢谱图、核磁共振碳谱图和实施例1类似。

对比实施例

对比实施例1

在氮气气氛和冰盐浴条件下，将4.6g L-5-甲基四氢叶酸(10mmol)加入20ml质量百分浓度为30％的氢氧化钠水溶液中，并通过超声加速L-5-甲基四氢叶酸的溶解速率，从而获得混合均匀的水溶液。然后将所获得的水溶液进行避光处理以使反应体系在避光条件下进行处理，之后在避光条件下向反应体系中少量多次加入3.58g氨基葡萄糖(20mmol)进行混合(L-5-甲基四氢叶酸与氨基葡萄糖的摩尔比为1：2)，只要保证整个反应体系的实时温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在0-5℃范围内即可，同时滴加质量百分浓度为20％的盐酸水溶液以调节整个反应体系的pH值维持在5.5。添加完氨基葡萄糖之后，撤去冰盐浴，之后在常温避光惰性气体条件下反应12h。随后，将200ml乙醇加入到反应体系中，析出淡黄色固，对产物进行抽滤分离并在冻干机中干燥16h，得到4.5g L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐(产率为57.5％)，HPLC纯度84.0％。

对比实施例2

在氮气气氛和冰盐浴条件下，将4.6g L-5-甲基四氢叶酸(10mmol)加入20ml质量百分浓度为30％的氢氧化钠水溶液中，并通过超声加速L-5-甲基四氢叶酸的溶解速率，从而获得混合均匀的水溶液。然后将所获得的水溶液进行避光处理以使反应体系在避光条件下进行处理，之后在避光条件下向反应体系中少量多次加入3.58g氨基葡萄糖(20mmol)进行混合(L-5-甲基四氢叶酸与氨基葡萄糖的摩尔比为1：2)，只要保证整个反应体系的实时温度在氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的加入过程中维持在0-5℃范围内即可，同时滴加质量百分浓度为20％的盐酸水溶液以调节整个反应体系的pH值维持在7.5。添加完氨基葡萄糖之后，撤去冰盐浴，之后在常温避光惰性气体条件下反应12h。随后，将200ml乙醇加入到反应体系中，析出淡黄色固，对产物进行抽滤分离并在冻干机中干燥16h，得到3.8g L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐(产率为48.6％)，HPLC纯度79.5％。

性能测试实施例

性能测试实施例1稳定性试验

为了测定本发明制备实施例1-7及对比实施例1-2制备的及市售的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的稳定性，在温度为25℃和相对湿度为60％的空气中将制备实施例1-7及对比实施例1-2制备及市售的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐分别贮存，定期测量剩余L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的含量。结果示于下表1中。

表1 L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的稳定性数据

长时间贮存之后，发现本发明制备实施例1-7，特别是制备实施例2，制备的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐无明显变化，且上表数据也证明本发明L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐具有优异的稳定性，无论是纯度还是含量都具有较好的稳定性。

性能测试实施例2水溶性试验

为了测定本发明制备实施例1-7及对比实施例1-2制备的及市售的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的水溶性，将制备实施例1-7及对比实施例制备及市售的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐和(6S)-5-甲基四氢叶酸钙盐分别在常温下溶于水中测定其饱和溶解度。结果示于下表2中。

表2 L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的水溶性数据

由表2的数据可知，本发明制备的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐具有优异的水溶性，明显好于对比实施例制备的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐及市售的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐和(6S)-5-甲基四氢叶酸钙盐。

根据上述说明书的揭示和教导，本发明所属领域的技术人员还可以对上述实施方式进行变更和修改。因此，本发明并不局限于上面揭示和描述的具体实施方式，对发明的一些修改和变更也应当落入本发明的权利要求的保护范围内。此外，尽管本说明书中使用了一些特定的术语，但这些术语只是为了方便说明，并不对本发明构成任何限制。

Claims (8)

1.一种L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的合成方法，其特征在于，所述合成方法依次包括如下步骤：

(1)在惰性气氛和冰盐浴条件下，将L-5-甲基四氢叶酸或其盐加入碱性溶液中以获得混合均匀的水溶液；

(2)将步骤(1)获得的水溶液进行避光处理，并在避光条件下向反应体系中加入分批加入氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐进行混合，同时加入pH调节剂以使整个反应体系的pH值维持在6-7之间，然后在常温、避光和氮气气氛下继续反应9-16小时；

(3)随后将有机溶剂加入到步骤(2)的反应体系中以析出固体产物，之后进行分离和干燥，获得L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐。

2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤(1)中L-5-甲基四氢叶酸与碱性溶液的质量比为1:1-40，优选为1：1-20，更优选1:3-10。

3.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤(1)中的碱性溶液为氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸钠、磷酸钾、碳酸钠和/或碳酸钾的水溶液，且所述碱性溶液的质量百分浓度为20-35％。

4.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤(1)中的L-5-甲基四氢叶酸盐为L-5-甲基四氢叶酸钙盐。

5.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述L-5-甲基四氢叶酸或其盐与氨基葡萄糖或氨基葡萄糖盐的摩尔比1：(1-5)，优选1:2。

6.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤(2)中的pH调节剂为质子酸，优选盐酸和或硫酸溶液，更优选盐酸，最优选质量百分浓度为20％的盐酸。

7.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤(3)中的有机溶剂选自可与水混合的与水混溶的有机溶剂、其混合物及其与水的混合物，更优选地，选自C1～C6的醇类、酮类、酰胺类、腈类、亚砜和砜，最优选甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、丁酮和乙腈。

8.一种通过权利要求1-7中任一项所述的方法获得的L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐，其特征在于，所述L-5-甲基四氢叶酸氨基葡萄糖盐的化学结构式为