CN109744362A - 罗非鱼混合型饲料添加剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种罗非鱼混合型饲料添加剂，属于水产养殖领域，包括用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸发酵产物的饲料添加剂原料；在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益作用的羧酸酯；有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群的寡糖组合物。本发明还提供一种包含基础饲料和罗非鱼混合型饲料添加剂的罗非鱼混合型饲料。有益效果为：添加剂可显著增强罗非鱼的抗菌活性，在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期，可提高罗非鱼体内硒的累积，可提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力。

Description

罗非鱼混合型饲料添加剂
技术领域
本发明属于水产养殖领域，具体涉及罗非鱼混合型饲料添加剂。
背景技术
罗非鱼，俗称：非洲鲫鱼，非鲫、越南鱼、南洋鲫等。原指以莫桑比克为模式产地的口孵非鲫属鱼类物种：莫桑比克口孵非鲫(学名：Oreochromis mossambicus)，现为慈鲷科非鲫属及口孵非鲫属等属数种鱼类的共同俗称；英文里统称为Tilapia。现在它是世界水产业的重点科研培养的淡水养殖鱼类，且被誉为未来动物性蛋白质的主要来源之一。通常生活于淡水中，也能生活于不同盐份含量的咸水中，也可以存活于湖，河，池塘的浅水中。它有很强的适应能力，在面积狭小之水域中亦能繁殖，甚至在水稻田里能够生长，且对溶氧较少之水有极强之适应性。绝大部分罗非鱼是杂食性，常吃水中植物和碎物。每100克肉中含蛋白质约20.5g，脂肪约6.93g，热量约148千卡，钙约70mg，钠约50mg，磷约 37mg，铁约1mg，维生素B1约0.1mg，维生素B2约0.12mg，罗非鱼已成为世界性的主要养殖鱼类。罗非鱼的肉味鲜美，肉质细嫩，含有多种不饱和脂肪酸和丰富的蛋白质，在日本，称这种鱼为“不需要蛋白质的蛋白源”。目前，主要是以配合饲料为主要喂养方法，但配料中的营养成份不是很合理，这对罗非鱼生长非常不利，因此需要一种营养丰富的罗非鱼饲料。
发明内容
本发明的目的在于提供罗非鱼混合型饲料添加剂，添加剂可显著增强罗非鱼的抗菌活性，在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期，可提高罗非鱼体内硒的累积，可提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种罗非鱼混合型饲料添加剂，包括：
用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸发酵产物的饲料添加剂原料；
在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益作用的羧酸酯；
有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群的寡糖组合物。混合型饲料添加剂中硒的富集量较高，姬松茸发酵产物有助于强化罗非鱼的免疫体系，降低患病率与死亡率，其较高的硒含量可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，提高养殖效益；有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求；可显著增强罗非鱼的抗细菌活性，其在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，并且有助于提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期。
所述用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸发酵产物的饲料添加剂原料中，所述甲壳类废料和豆类包括基于干物质的含量为2.5～3.0wt％的伞菌属物种，且所述饲料添加剂原料具有小于5.6％的含水量 (相对于干物质)；姬松茸发酵产物富含姬松茸多糖，硒的富集量较高，姬松茸发酵产物有助于强化罗非鱼的免疫体系，降低患病率与死亡率，其较高的硒含量可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，提高养殖效益。
作为优选，所述甲壳类废料选自虾类外壳和蟹类外壳的一种或两种，粉碎成粒径0.1～0.5mm。
作为优选，所述豆类选自绿豆、红豆、豌豆和黄豆的一种或多种，粉碎成粒径0.5～1mm。
作为优选，所述姬松茸发酵产物的制备方法如下：
将1L液体菌种培养基置于3L容器中，121℃灭菌30min，冷却后接入姬松茸固体菌种，然后将其置于100～120r/min往复式水平摇床中，25℃恒温振荡培养10～12d，得液体菌种；
取300～500mL液体发酵培养基于三角瓶中，于121℃灭菌30min，冷却后接入10mL液体菌种，置于25℃摇床中以80～120r/min转速发酵22～28d，待发酵结束后，将发酵液以3000～4000r/min离心15～30min，收集菌丝并冲洗干净，置于40～45℃电热干燥箱中烘干后称重，并研磨成粉，过80～120目筛备用。
作为对本发明的进一步选优，液体菌种培养基含有下述重量份的物质：去皮马铃薯20～25％、葡萄糖2.8～3.0％、硫酸铵0.25～0.3％、酵母膏0.25～0.3％、 KH2PO40.3～0.4％、环氧乙烷甲醇0.025～0.05％、MgSO4·7H2O0.1～0.12％、VB10.01～0.02％，余量为双蒸水，pH值为7.0；液体菌种培养基可为姬松茸菌种提供充足的氮源、碳源和各种元素，使姬松茸迅速扩大培养，液体菌种培养基中加入微量的环氧乙烷甲醇有利于促进姬松茸多糖的合成，环氧乙烷甲醇自聚合成2-5聚体，该低聚体可在基因层面上刺激姬松茸细胞，增强细胞多糖产量，使姬松茸多糖产量提高40～50％，大大提高姬松茸发酵产物中多糖的含量；姬松茸多糖经罗非鱼吸收利用后，有助于促进巨噬细胞增值、释放NO和分泌肿瘤坏死因子、γ-干扰素、白细胞介素1、白细胞介素8，对罗非鱼的非特异性免疫、特异性免疫和细胞免疫体系均有增强作用，增强罗非鱼体质，降低患病率和死亡率，增产增收。
作为对本发明的进一步选优，液体发酵培养基含有下述重量份的物质：玉米粉2.5～3％、葡萄糖1.8～2％、硫酸铵0.2～0.25％、酵母膏0.28～0.3％、 KH2PO40.2～0.22％、戊二醇0.15～0.2％、MgSO4·7H2O0.08～0.1％、VB10.01～ 0.02％，余量为双蒸水，pH值为7.0；在液体发酵培养基中无需添加硒源即可实现姬松茸菌丝体中硒的富集，戊二醇被姬松茸吸收后，能够促进硒与氨基酸特别是蛋氨酸的结合，从而促进姬松茸对发酵培养基中的硒的吸收与富集，从而强化罗非鱼对硒的积累效应，有助于罗非鱼对饲料和水环境中有害重金属的拮抗作用，从而既可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，还可以提高养殖效益。
所述羧酸酯选自：
根据式1的乳酰羧酸酯，
式1：R1-COO-[-CH(CH3)-COO]n-R2
或/和其P、Li、Mn、Ca、Na、NH4或Co(II)盐，
式2的丁醇酰羧酸酯，
式2：R1-COO-[-CH2-(CH3)2-COO]n-R2
或/和其P、Li、Mn(Ⅱ)、Ca、Na、NH4或Co(Ⅱ)盐，
在以上式中，R1选自苯基，n表示数值为2～8的整数，并且R2选自C3～C10烷基或者烯基链；上述羧酸酯产品应用于罗非鱼饲料或者饲料添加剂中，可显著增强罗非鱼的抗细菌活性，其在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，并且有助于提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期，增大经济效益。
所述寡糖组合物具有如下糖苷键类型分布：
至少5mol％α-(1,2)糖苷键；和
至少5mol％β-(1,4)糖苷键，以及
其中至少15干重％所述寡糖组合物的聚合度至少是3。
所述寡糖组合物包括：海藻糖-壳聚糖-寡糖、大豆低聚糖-寡糖、半乳糖-葡萄糖-寡糖、果糖-寡糖、木糖-果糖-低聚糖、潘糖-寡糖、果糖-牛乳糖-寡糖、蔗糖-果糖-寡糖、木糖低聚糖-寡糖、蔗糖低聚糖-寡糖、牛乳糖-寡糖、半乳糖-寡糖、麦芽糖-牛乳糖-寡糖、半乳糖-麦芽糖-寡糖、龙胆二糖-葡萄糖-寡糖、木糖-葡萄糖-寡糖、果糖-龙胆二糖-寡糖。在饲料或者饲料添加剂中施入寡糖组合物投喂罗非鱼具有有益的健康作用，有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求，增大养殖收益。
本发明还提供一种罗非鱼混合型饲料，所述混合型饲料中含有基础饲料和添加剂，所述基础饲料包含：
1800～2000cal/1b的表观代谢能；
25～31wt％的粗蛋白；
0.8～1.0wt％的酪氨酸；
0.5～0.9wt％的丙氨酸；
2.0～3.5wt％的含硫氨基酸；
0.8～0.9wt％的总有效钙；
0.45～0.8wt％的总有效磷；
0.2～0.25wt％的钠。
所述罗非鱼混合型饲料添加剂，包括：
用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸的饲料添加剂原料；
在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益作用的羧酸酯；
有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群的寡糖组合物。
本发明的有益效果为：
1)培养姬松茸的液体菌种培养基中加入微量的环氧乙烷甲醇有利于促进姬松茸多糖的合成，环氧乙烷甲醇可自聚合成2～5聚体，该低聚体可在基因层面上刺激姬松茸细胞，增强细胞多糖产量，使姬松茸多糖产量提高40～50％，大大提高姬松茸发酵产物中多糖的含量；
2)发酵姬松茸的液体发酵培养基中无需添加硒源即可实现姬松茸菌丝体中硒的富集，戊二醇被姬松茸吸收后，促进硒与氨基酸特别是蛋氨酸的结合，促进姬松茸对发酵培养基中的硒的吸收与富集，从而强化罗非鱼对硒的积累效应；
3)姬松茸发酵产物有助于强化罗非鱼的免疫体系，降低患病率与死亡率，其较高的硒含量可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值；
4)羧酸酯应用于罗非鱼饲料或者饲料添加剂中，可显著增强罗非鱼的抗细菌活性，其在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，并且有助于提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期，增大经济效益；
5)在饲料或者饲料添加剂中施入寡糖组合物投喂罗非鱼具有有益的健康作用，有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求，增大养殖收益。
本发明采用了上述技术方案提供罗非鱼混合型饲料添加剂，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述：
实施例1：
一种罗非鱼混合型饲料添加剂，包括：
用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸发酵产物的饲料添加剂原料；
在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益作用的羧酸酯；
有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群的寡糖组合物。混合型饲料添加剂中硒的富集量较高，姬松茸发酵产物有助于强化罗非鱼的免疫体系，降低患病率与死亡率，其较高的硒含量可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，提高养殖效益；有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求；可显著增强罗非鱼的抗细菌活性，其在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，并且有助于提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期。
在用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸发酵产物的饲料添加剂原料中，所述甲壳类废料和豆类包括基于干物质的含量为2.5wt％的伞菌属物种，且所述饲料添加剂原料具有相对于干物质5.0％的含水量；姬松茸发酵产物富含姬松茸多糖，硒的富集量较高，姬松茸发酵产物有助于强化罗非鱼的免疫体系，降低患病率与死亡率，其较高的硒含量可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，提高养殖效益。
所述甲壳类废料是虾类外壳，粉碎成粒径0.1mm。
所述豆类是黄豆，粉碎成粒径0.5mm。
所述姬松茸发酵产物的制备方法如下：
1液体菌种培养基含有下述重量份的物质：去皮马铃薯20％、葡萄糖2.8％、硫酸铵0.25％、酵母膏0.25％、KH2PO40.3％、环氧乙烷甲醇0.025％、 MgSO4·7H2O0.1％、VB10.01％，余量为双蒸水，pH值为7.0；液体菌种培养基可为姬松茸菌种提供充足的氮源、碳源和各种元素，使姬松茸迅速扩大培养，液体菌种培养基中加入微量的环氧乙烷甲醇有利于促进姬松茸多糖的合成，环氧乙烷甲醇自聚合成2-5聚体，该低聚体可在基因层面上刺激姬松茸细胞，增强细胞多糖产量，使姬松茸多糖产量提高40～50％，大大提高姬松茸发酵产物中多糖的含量；姬松茸多糖经罗非鱼吸收利用后，有助于促进巨噬细胞增值、释放NO和分泌肿瘤坏死因子、γ-干扰素、白细胞介素1、白细胞介素8，对罗非鱼的非特异性免疫、特异性免疫和细胞免疫体系均有增强作用，增强罗非鱼体质，降低患病率和死亡率，增产增收；
2培养：将1L液体菌种培养基置于3L容器中，121℃灭菌30min，冷却后接入姬松茸固体菌种，然后将其置于100r/min往复式水平摇床中，25℃恒温振荡培养10d，得液体菌种；
3液体发酵培养基含有下述重量份的物质：玉米粉2.5％、葡萄糖1.8％、硫酸铵0.2％、酵母膏0.28％、KH2PO40.2％、戊二醇0.15％、MgSO4·7H2O0.08％、VB10.01％，余量为双蒸水，pH值为7.0；在液体发酵培养基中无需添加硒源即可实现姬松茸菌丝体中硒的富集，戊二醇被姬松茸吸收后，能够促进硒与氨基酸特别是蛋氨酸的结合，从而促进姬松茸对发酵培养基中的硒的吸收与富集，从而强化罗非鱼对硒的积累效应，有助于罗非鱼对饲料和水环境中有害重金属的拮抗作用，从而既可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，还可以提高养殖效益；
4发酵：取300mL液体发酵培养基于三角瓶中，于121℃灭菌30min，冷却后接入10mL液体菌种，置于25℃摇床中以80r/min转速发酵22d，待发酵结束后，将发酵液以3000r/min离心15min，收集菌丝并冲洗干净，置于40℃电热干燥箱中烘干后称重，并研磨成粉，过80目筛备用。
所述羧酸酯为根据式1的乳酰羧酸酯Ph-COO-[-CH(CH3)-COO]3-R2和根据式2的丁醇酰羧酸酯Ph-COO-[-CH2-(CH3)2-COO]4-R2，在以上式中，式1中R2为C3的烷基，式2中R2为C4的烷基；上述羧酸酯产品应用于罗非鱼饲料或者饲料添加剂中，可显著增强罗非鱼的抗细菌活性，其在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，并且有助于提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期，增大经济效益。
所述寡糖组合物具有如下糖苷键类型分布：5mol％α-(1,2)糖苷键和 5mol％β-(1,4)糖苷键，以及15干重％所述寡糖组合物的聚合度至少是3。
所述寡糖组合物选自：海藻糖-壳聚糖-寡糖、大豆低聚糖-寡糖、半乳糖-葡萄糖-寡糖、果糖-寡糖、木糖-果糖-低聚糖、潘糖-寡糖、果糖-牛乳糖-寡糖、蔗糖-果糖-寡糖、木糖低聚糖-寡糖、蔗糖低聚糖-寡糖、牛乳糖-寡糖、半乳糖-寡糖、麦芽糖-牛乳糖-寡糖、半乳糖-麦芽糖-寡糖、龙胆二糖-葡萄糖-寡糖、木糖-葡萄糖-寡糖、果糖-龙胆二糖-寡糖。在饲料或者饲料添加剂中施入寡糖组合物投喂罗非鱼具有有益的健康作用，有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求，增大养殖收益。
对比例1：
对比例1和实施例1基本相同，不同之处在于液体菌种培养基未含有环氧乙烷甲醇。
实施例2：
一种罗非鱼混合型饲料添加剂，包括：
组分A：用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸发酵产物的饲料添加剂原料；
组分B：在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益作用的羧酸酯；
组分C：有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群的寡糖组合物。
罗非鱼混合型饲料添加剂中硒的富集量较高，姬松茸发酵产物有助于强化罗非鱼的免疫体系，降低患病率与死亡率，其较高的硒含量可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，提高养殖效益；有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求；可显著增强罗非鱼的抗细菌活性，其在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，并且有助于提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期。
在组分A中，所述甲壳类废料和豆类包括基于干物质的含量为3.0wt％的伞菌属物种，且所述饲料添加剂原料具有4.5％的含水量(相对于干物质)；姬松茸发酵产物富含姬松茸多糖，硒的富集量较高，姬松茸发酵产物有助于强化罗非鱼的免疫体系，降低患病率与死亡率，其较高的硒含量可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，提高养殖效益。
所述甲壳类废料是蟹类外壳，粉碎成粒径0.5mm。
所述豆类是黄豆，粉碎成粒径1mm。
所述组分A中姬松茸发酵产物的制备方法如下：
培养：将1L液体菌种培养基置于3L容器中，121℃灭菌30min，冷却后接入姬松茸固体菌种，然后将其置于120r/min往复式水平摇床中，25℃恒温振荡培养12d，得液体菌种；
发酵：取500mL液体发酵培养基于三角瓶中，于121℃灭菌30min，冷却后接入10mL液体菌种，置于25℃摇床中以120r/min转速发酵28d，待发酵结束后，将发酵液以4000r/min离心30min，收集菌丝并冲洗干净，置于45℃电热干燥箱中烘干后称重，并研磨成粉，过120目筛备用。
液体菌种培养基含有下述重量份的物质：去皮马铃薯25％、葡萄糖3.0％、硫酸铵0.3％、酵母膏0.3％、KH2PO40.4％、环氧乙烷甲醇0.05％、 MgSO4·7H2O0.12％、VB10.02％，余量为双蒸水，pH值为7.0；液体菌种培养基可为姬松茸菌种提供充足的氮源、碳源和各种元素，使姬松茸迅速扩大培养，液体菌种培养基中加入微量的环氧乙烷甲醇有利于促进姬松茸多糖的合成，环氧乙烷甲醇自聚合成低聚体，该低聚体可在基因层面上刺激姬松茸细胞，增强细胞多糖产量，使姬松茸多糖产量提高40～50％，大大提高姬松茸发酵产物中多糖的含量；姬松茸多糖经罗非鱼吸收利用后，有助于促进巨噬细胞增值、释放NO和分泌肿瘤坏死因子、γ-干扰素、白细胞介素1、白细胞介素8，对罗非鱼的非特异性免疫、特异性免疫和细胞免疫体系均有增强作用，增强罗非鱼体质，降低患病率和死亡率，增产增收。
液体发酵培养基含有下述重量份的物质：玉米粉3％、葡萄糖2％、硫酸铵 0.25％、酵母膏0.3％、KH2PO40.22％、戊二醇0.2％、MgSO4·7H2O0.1％、VB10.02％，余量为双蒸水，pH值为7.0；在液体发酵培养基中无需添加硒源即可实现姬松茸菌丝体中硒的富集，戊二醇被姬松茸吸收后，能够促进硒与氨基酸特别是蛋氨酸的结合，从而促进姬松茸对发酵培养基中的硒的吸收与富集，从而强化罗非鱼对硒的积累效应，有助于罗非鱼对饲料和水环境中有害重金属的拮抗作用，从而既可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，还可以提高养殖效益。
所述组分B的羧酸酯为根据式1的乳酰羧酸酯Ph-COO-[-CH(CH3)-COO]4-R2及其Ca盐，还包括根据式2的丁醇酰羧酸酯：Ph-COO-[-CH2-(CH3)2-COO]8-R2及其Na盐，在以上式中，式1中的R2为C5烯基链，式2中的R2为C4烯基链；上述羧酸酯产品应用于罗非鱼饲料或者饲料添加剂中，可显著增强罗非鱼的抗细菌活性，其在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，并且有助于提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期，增大经济效益。
所述组分C的寡糖组合物具有如下糖苷键类型分布：10mol％α-(1,2)糖苷键和10mol％β-(1,4)糖苷键，以及20干重％所述寡糖组合物的聚合度是4。
所述寡糖组合物包括：海藻糖-壳聚糖-寡糖、大豆低聚糖-寡糖、半乳糖-葡萄糖-寡糖、果糖-寡糖、木糖-果糖-低聚糖、潘糖-寡糖、果糖-牛乳糖-寡糖、蔗糖-果糖-寡糖、木糖低聚糖-寡糖、蔗糖低聚糖-寡糖、牛乳糖-寡糖、半乳糖-寡糖、麦芽糖-牛乳糖-寡糖、半乳糖-麦芽糖-寡糖、龙胆二糖-葡萄糖-寡糖、木糖-葡萄糖-寡糖、果糖-龙胆二糖-寡糖。在饲料或者饲料添加剂中施入寡糖组合物投喂罗非鱼具有有益的健康作用，有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求，增大养殖收益。
对比例2：
对比例2和实施例2基本相同，不同之处在于液体发酵培养基未含有戊二醇。
实施例3：
一种罗非鱼混合型饲料添加剂，包括：
用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸发酵产物的饲料添加剂原料；
在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益作用的羧酸酯；
有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群的寡糖组合物。混合型饲料添加剂中硒的富集量较高，姬松茸发酵产物有助于强化罗非鱼的免疫体系，降低患病率与死亡率，其较高的硒含量可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，提高养殖效益；有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求；可显著增强罗非鱼的抗细菌活性，其在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，并且有助于提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期。
所述用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸发酵产物的饲料添加剂原料，所述甲壳类废料和豆类包括基于干物质的含量为2.8wt％的伞菌属物种，且所述饲料添加剂原料具有3.5％的含水量(相对于干物质)；姬松茸发酵产物富含姬松茸多糖，硒的富集量较高，姬松茸发酵产物有助于强化罗非鱼的免疫体系，降低患病率与死亡率，其较高的硒含量可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，提高养殖效益。
所述甲壳类废料是虾类外壳和蟹类外壳的混合物，粉碎成粒径0.2mm。
所述豆类选自绿豆、红豆、豌豆和黄豆的混合物，粉碎成粒径0.6mm。
所述姬松茸发酵产物的制备方法如下：
将1L液体菌种培养基置于3L容器中，121℃灭菌30min，冷却后接入姬松茸固体菌种，然后将其置于100r/min往复式水平摇床中，25℃恒温振荡培养12d，得液体菌种；
取400mL液体发酵培养基于三角瓶中，于121℃灭菌30min，冷却后接入 10mL液体菌种，置于25℃摇床中以100r/min转速发酵25d，待发酵结束后，将发酵液以3500r/min离心20min，收集菌丝并冲洗干净，置于42℃电热干燥箱中烘干后称重，并研磨成粉，过100目筛备用。
液体菌种培养基含有下述重量份的物质：去皮马铃薯22％、葡萄糖2.9％、硫酸铵0.28％、酵母膏0.28％、KH2PO40.35％、环氧乙烷甲醇0.03％、 MgSO4·7H2O0.1％、VB10.015％，余量为双蒸水，pH值为7.0；液体菌种培养基可为姬松茸菌种提供充足的氮源、碳源和各种元素，使姬松茸迅速扩大培养，液体菌种培养基中加入微量的环氧乙烷甲醇有利于促进姬松茸多糖的合成，环氧乙烷甲醇自聚合成低聚体，该低聚体可在基因层面上刺激姬松茸细胞，增强细胞多糖产量，使姬松茸多糖产量提高40～50％，大大提高姬松茸发酵产物中多糖的含量；姬松茸多糖经罗非鱼吸收利用后，有助于促进巨噬细胞增值、释放NO和分泌肿瘤坏死因子、γ-干扰素、白细胞介素1、白细胞介素8，对罗非鱼的非特异性免疫、特异性免疫和细胞免疫体系均有增强作用，增强罗非鱼体质，降低患病率和死亡率，增产增收。
液体发酵培养基含有下述重量份的物质：玉米粉2.8％、葡萄糖1.9％、硫酸铵0.22％、酵母膏0.28％、KH2PO40.2％、戊二醇0.18％、MgSO4·7H2O0.1％、 VB10.015％，余量为双蒸水，pH值为7.0；在液体发酵培养基中无需添加硒源即可实现姬松茸菌丝体中硒的富集，戊二醇被姬松茸吸收后，能够促进硒与氨基酸特别是蛋氨酸的结合，从而促进姬松茸对发酵培养基中的硒的吸收与富集，从而强化罗非鱼对硒的积累效应，有助于罗非鱼对饲料和水环境中有害重金属的拮抗作用，从而既可以提高罗非鱼体内硒的累积，也有助于提高罗非鱼抗氧化作用和拮抗重金属的能力，使罗非鱼作为一种硒补品而提升其保健价值，还可以提高养殖效益。
所述羧酸酯选自：
根据式1的乳酰羧酸酯，
式1：R1-COO-[-CH(CH3)-COO]3-R2的Co(II)盐，
式2的丁醇酰羧酸酯，
式2：R1-COO-[-CH2-(CH3)2-COO]4-R2
在以上式中，R1是苯基，式1中的R2是C4的烷基，式2中的R2是C6的烯基链；上述羧酸酯产品应用于罗非鱼饲料或者饲料添加剂中，可显著增强罗非鱼的抗细菌活性，其在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用，并且有助于提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期，增大经济效益。
所述寡糖组合物具有如下糖苷键类型分布：
12mol％α-(1,2)糖苷键；和
13mol％β-(1,4)糖苷键，以及
其中20干重％所述寡糖组合物的聚合度是3。
所述寡糖组合物包括：海藻糖-壳聚糖-寡糖、大豆低聚糖-寡糖、半乳糖-葡萄糖-寡糖、果糖-寡糖、木糖-果糖-低聚糖、潘糖-寡糖、果糖-牛乳糖-寡糖、蔗糖-果糖-寡糖、木糖低聚糖-寡糖、蔗糖低聚糖-寡糖、牛乳糖-寡糖、半乳糖-寡糖、麦芽糖-牛乳糖-寡糖、半乳糖-麦芽糖-寡糖、龙胆二糖-葡萄糖-寡糖、木糖-葡萄糖-寡糖、果糖-龙胆二糖-寡糖。在饲料或者饲料添加剂中施入寡糖组合物投喂罗非鱼具有有益的健康作用，有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求，增大养殖收益。
对比例3：
对比例3和实施例3基本相同，不同之处在于：1)对比例3中的液体菌种培养基中未含有环氧乙烷甲醇；2)对比例3中的液体发酵培养基中未含有戊二醇。
实施例4：
一种罗非鱼混合型饲料，含有基础饲料和添加剂，所述基础饲料包含：
2000cal/1b的表观代谢能；
30wt％的粗蛋白；
1wt％的酪氨酸；
0.8wt％的丙氨酸；
3wt％的含硫氨基酸；
0.8wt％的总有效钙；
0.7wt％的总有效磷；
0.2wt％的钠。
所述罗非鱼混合型饲料添加剂分别选自实施例1～3和对比例1～3。
对上述实施例1～3和对比例1～3中的姬松茸发酵产物进行下列测试：
A富硒率测定：采用原子荧光分光光度法测定发酵产物硒含量，并计算富硒率，计算公式为：
式中：Y为富硒率(％)，C1为为富硒发酵产物的硒含量(μg/g)，C0为空白对照组发酵产物的硒含量(μg/g)，H为发酵液中硒总量(μg)，M为烘干后的发酵产物重量(g)。
B蛋白质含量：采用考马斯亮蓝法测定。
C可溶性糖含量：采用蒽酮比色法测定。
D多糖含量：采用苯酚-硫酸法测定。
分别测定上述6种罗非鱼混合型饲料中姬松茸发酵产物的富硒率、蛋白质含量、可溶性糖含量和多糖含量，结果如表1所示。
表1姬松茸发酵产物的测定结果
项目 实施例1 实施例2 实施例3 对比例1 对比例2 对比例3
富硒率(％) 5.06 5.02 5.10 3.25 3.38 3.02
蛋白质含量(％) 35.83 34.22 36.05 25.05 26.47 24.42
可溶性糖含量(％) 24.62 25.28 26.56 18.54 16.96 16.03
多糖含量(％) 7.52 7.40 7.65 4.20 4.15 4.03
由表1可知，在本发明方法的优选实施例1～3中，即便未加入硒源，其富硒率依然超过了5％，可见其对硒的富集效果较为显著，硒富集的强化促使姬松茸发酵产物中的蛋白质、可溶性糖和多糖含量均较高，大大提升了饲料添加剂的经济价值。
将上述6种罗非鱼混合型饲料分别投喂给养殖罗非鱼，其他因素完全一致，投喂8个月后，分别测量罗非鱼的平均体长和平均体重以及死亡率，统计结果如表2所示。
表2养殖罗非鱼的测定结果
项目 实施例1 实施例2 实施例3 对比例1 对比例2 对比例3
平均体重(g) 200.6 200.4 204.5 160.2 155.6 152.8
死亡率(％) 0.5 0.0 0.0 3.5 2.5 4.5
由表2可知，在本发明方法的优选实施例1～3中，罗非鱼的平均体重和成活率均显著优于对比例，说明本发明中的罗非鱼混合型饲料添加剂可有效低提高罗非鱼的生长速率，降低料肉比与养殖周期，是一种高效、经济的罗非鱼混合型饲料添加剂。
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (10)

1.罗非鱼混合型饲料添加剂，其特征在于包括：
用于施用给罗非鱼以改进罗非鱼肉质品质的包含甲壳类废料、豆类和姬松茸发酵产物的饲料添加剂原料；
在罗非鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益作用的羧酸酯；
有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群的寡糖组合物。
2.根据权利要求1所述的罗非鱼混合型饲料添加剂，其特征在于：所述甲壳类废料和豆类包括基于干物质的含量为2.5～3.0wt％的伞菌属物种，且所述饲料添加剂原料具有小于5.6％的含水量(相对于干物质)。
3.根据权利要求1或2所述的罗非鱼混合型饲料添加剂，其特征在于：所述姬松茸发酵产物的制备方法为：将姬松茸固体菌种接入液体菌种培养基中培养的液体菌种，将液体菌种接种入液体发酵培养基发酵，收集菌丝经冲洗、烘干、研磨并过筛即得。
4.根据权利要求3所述的罗非鱼混合型饲料添加剂，其特征在于：所述液体菌种培养基含有下述重量份的物质：去皮马铃薯20～25％、葡萄糖2.8～3.0％、硫酸铵0.25～0.3％、酵母膏0.25～0.3％、KH2PO40.3～0.4％、环氧乙烷甲醇0.025～0.05％、MgSO4·7H2O0.1～0.12％、VB10.01～0.02％，余量为双蒸水，pH值为7.0。
5.根据权利要求3所述的罗非鱼混合型饲料添加剂，其特征在于：所述液体发酵培养基含有下述重量份的物质：玉米粉2.5～3％、葡萄糖1.8～2％、硫酸铵0.2～0.25％、酵母膏0.28～0.3％、KH2PO40.2～0.22％、戊二醇0.15～0.2％、MgSO4·7H2O0.08～0.1％、VB10.01～0.02％，余量为双蒸水，pH值为7.0。
6.根据权利要求1所述的罗非鱼混合型饲料添加剂，其特征在于：所述羧酸酯选自：
根据式1的乳酰羧酸酯，
式1：R1-COO-[-CH(CH3)-COO]n-R2或/和其P、Li、Mn、Ca、Na、NH4或Co(II)盐，
式2的丁醇酰羧酸酯，
式2：R1-COO-[-CH2-(CH3)2-COO]n-R2或/和其P、Li、Mn(Ⅱ)、Ca、Na、NH4或Co(Ⅱ)盐，在以上式中，R1选自苯基，n表示数值为2～8的整数，并且R2选自C3～C10烷基或者烯基链。
7.根据权利要求1所述的罗非鱼混合型饲料添加剂，其特征在于：所述寡糖组合物具有如下糖苷键类型分布：
至少5mol％α-(1,2)糖苷键；和
至少5mol％β-(1,4)糖苷键，以及
其中至少15干重％所述寡糖组合物的聚合度至少是3。
8.根据权利要求1或7所述的罗非鱼混合型饲料添加剂，其特征在于：所述寡糖组合物包括：海藻糖-壳聚糖-寡糖、大豆低聚糖-寡糖、半乳糖-葡萄糖-寡糖、果糖-寡糖、木糖-果糖-低聚糖、潘糖-寡糖、果糖-牛乳糖-寡糖、蔗糖-果糖-寡糖、木糖低聚糖-寡糖、蔗糖低聚糖-寡糖、牛乳糖-寡糖、半乳糖-寡糖、麦芽糖-牛乳糖-寡糖、半乳糖-麦芽糖-寡糖、龙胆二糖-葡萄糖-寡糖、木糖-葡萄糖-寡糖、果糖-龙胆二糖-寡糖。
9.包含权利要求1-8任一项所述的罗非鱼混合型饲料添加剂的罗非鱼混合型饲料，其特征在于：所述罗非鱼混合型饲料包括基础饲料和如权利要求1-8任一项所述的罗非鱼混合型饲料添加剂。
10.包含权利要求1-8任一项所述的罗非鱼混合型饲料添加剂的罗非鱼混合型饲料在养殖罗非鱼中的应用。
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