CN109738406A - 一种定量测定儿茶素类物质的方法 - Google Patents
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Abstract
一种定量测定儿茶素类物质的方法，属于纳米材料制备及化学分析检测技术领域。本发明利用自组装纳米化的四‑(4‑吡啶基)锌卟啉光敏效应和ZnCdSe量子点在缓冲溶液体系中制备得到一种具有纳米效应的可逆纳米卟啉荧光传感器；再利用儿茶素类物质与纳米卟啉间强作用力，将纳米卟啉与量子点间可逆复合传感界面拉开不同程度的特异性变化，从而实现儿茶素类物质的定量检测。本发明所涉及的制备方法简单可控且对儿茶素类检测方法灵敏度高、选择性好、特异性强，可以在儿茶素类物质检测中发挥重要作用。
Description
技术领域
本发明属于纳米材料制备及含量测定技术领域，具体涉及一种新型可逆纳米卟啉荧光传感器可控制备及其高灵敏检测儿茶素类物质的方法。
背景技术
儿茶素具有多种有益的功效和用途，因而对其的检测和定量对于健康饮食非常重要。目前，已有多种检测方法用于儿茶素类物质的检测和定量。检测方法包括：电化学高效液相色谱法、毛细管电泳、电喷雾质谱、高速逆流色谱法、二极管阵列等。虽然这些方法具有高精密度，高灵敏度，交叉干扰小，但是需要复杂的衍生化步骤，实验过程中需要大量有机溶剂，操作繁琐且耗时，成本昂贵，且不方便进行现场检测。因此，我们需要一种高效、简便、可靠、成本低、适用性好的的手段检测儿茶素类物质。
发明内容
本发明的目的之一提供一种制备简单、反应条件温和的新型可逆纳米卟啉荧光传感器可控制备方法；目的之二是提供一种灵敏度高、选择性好，基于荧光开-关-开模式法快速定量测定儿茶素类物质的可逆纳米卟啉荧光传感器。
本发明使用的特异性儿茶素类物质的可逆纳米卟啉荧光传感器，采用ZnCdSe量子点作为荧光探针，四-(4-吡啶基)锌卟啉N,N-二甲基甲酰胺溶液与甜菜碱制备得到的自组装纳米卟啉为荧光猝灭剂，两者的特异性结合得到开关纳米卟啉荧光传感器。开关纳米卟啉荧光传感器与儿茶素类物质作用得到可逆(开-关-开)纳米卟啉荧光传感器。
一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)将二氯化锌和N-乙酰-L-半胱氨酸溶于超纯水中，在冰浴、常压下搅拌20分钟后用氢氧化钠溶液将溶液pH调为9.7，然后加入二氯化镉充氮气冰浴搅拌5分钟。加入NaHSe，搅拌5分钟。最后将此溶液放入反应釜中，在200℃的烘箱中反应65分钟。得到ZnCdSe量子点；
(2)将四-(4-吡啶基)锌卟啉溶于DMF中，超声溶解后置于4℃下备用；然后加入ZnTPyP的DMF溶液和十二烷基二甲基甜菜碱的水溶液，室温下搅拌10min后得到一种非常稳定的绿色透明胶体四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体纳米棒即纳米卟啉溶液；
(3)将四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体溶液加入ZnCdSe量子点荧光探针，再加入pH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液通过电子转移和荧光共振能量转移作用，猝灭量子点荧光，通过特异性结合得到的复合物，提供量子点一个“Turn-off”的状态，荧光强度由840左右降至360左右；从而得到具有双重复合纳米效应的开关纳米卟啉荧光传感器；
(4)将不同标准浓度的儿茶素类物质分别加入到相同的开关纳米卟啉荧光传感器中，开关纳米卟啉荧光传感器中的量子点荧光恢复，不同浓度的儿茶素类化合物致使量子点荧光恢复的现象产生明显的差异，实现了在可逆纳米卟啉荧光传感模式下儿茶素类物质的识别与定量；从而得到可逆“开-关-开”纳米卟啉荧光传感器；记录相关的现象；
或直接将步骤(3)和(4)合并：分别将不同浓度范围的儿茶素类化合物与步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液、pH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液混合，静置5分钟；再加入步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处进行荧光光谱测定，测得其5分钟后的光谱，记录相关的光谱；
(5)将待测浓度的儿茶素类物质溶液加入到与步骤(4)相同的开关纳米卟啉荧光传感器中，将得到的现象或光谱，同步骤(4)比较，得到相关的浓度。
进一步优选：
本发明中二氯化锌、N-乙酰-L-半胱氨酸、二氯化镉、NaHSe的物质的量的比为：1.0:3.0:0.01:0.1，一般步骤(1)ZnCdSe量子点荧光探针发射波长为465～480nm；
本发明步骤(2)中四-(4-吡啶基)锌卟啉与十二烷基二甲基甜菜碱的物质的量比为1:14～16；
本发明中步骤(3)四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒与ZnCdSe量子点的物质的量比为277～280:1；
本发明中步骤(3)最后的混合溶液中四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒的浓度、ZnCdSe量子点浓度分别为0.84～5.04μmol/L、4.2×10-9mol/L。
进一步优选：本发明的可逆纳米卟啉荧光传感器是通过量子点与纳米卟啉特异性结合得到的复合物。荧光强度由840左右降至360左右。
本发明的方法，用于生物基质中儿茶素类物质的微量检测。
本发明所述可逆纳米卟啉荧光传感器检测到的儿茶素的浓度可以达到2.0×10- 9mol/L、表儿茶素8.0×10-9mol/L、表没食子儿茶素没食子酸酯1.0×10-8mol/L、没食子儿茶5.0×10-9mol/L。
本发明的可逆纳米卟啉荧光传感器灵敏度高。ZnCdSe量子点荧光探针的荧光强度随着四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液的增加逐渐减弱，甚至可以猝灭到底，本发明只要进行了部分淬灭或完全猝灭(优选在直线关系部分范围内)，均能实现步骤(4)的定性定量检测；四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒浓度(0.84～5.04μmol/L)与ZnCdSe量子点(4.2×10-9mol/L)的荧光强度成很好的线性关系；在一定的范围内检测儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素的荧光强度具有线性关系。
本发明的可逆纳米卟啉荧光传感器定量检测儿茶素浓度从(2.0×10-9mol/L～1.0×10-8mol/L)。随着儿茶素的浓度增加而增强，并成很好的线性关系。线性相关系数分别为0.9715。表儿茶素(8.0×10-9～1.0×10-7mol/L)与可逆纳米卟啉荧光传感器结合后的荧光强度随着表儿茶素的浓度增加而增强，并成很好的线性关系。线性相关系数分别为0.9898。表没食子儿茶素没食子酸酯(1.0×10-8-1.0×10-7mol/L)与可逆纳米卟啉荧光传感器结合后的荧光强度随着表没食子儿茶素没食子酸酯的浓度增加而增强，并成很好的线性关系。线性相关系数分别为0.9973。没食子儿茶素(5.0×10-9-1.0×10-7mol/L)与可逆纳米卟啉荧光传感器结合后的荧光强度随着没食子儿茶素的浓度增加而增强，并成很好的线性关系。线性相关系数分别为0.9908。从而得到可逆“开-关-开”纳米卟啉荧光传感器；所以步骤(3)和(4)合并和分开能得到相同的效果。
本发明的可逆纳米卟啉传感器稳定性好。该可逆纳米卟啉荧光传感器在1.0×10- 5mol/L离子(KCl、Na2SO4、CaCl2、Mg2SO4、ZnCl2)、1μg/mL生物基质(细胞培养液、小牛血浆、新生牛血清、牛血清白蛋白)和1μg/mL混合干扰的情况下，与儿茶素类物质作用荧光恢复的强度几乎不变。
本发明的可逆纳米卟啉荧光传感器对儿茶素类物质响应速度快。可逆纳米卟荧光传感器中加入儿茶素类物质后，荧光快速恢复，5分钟达到最稳定值。
本发明所述的方法，相比传统以色谱发法测定儿茶素类物质的方法有诸多优势，包括制备简单、反应条件温和，对儿茶素类物质检测的灵敏度高、抗干扰能力强、响应良好，该纳米卟啉荧光传感器在生物化学、医药等领域具有实际的应用价值。
附图说明
图1为本发明新型可逆(开-关-开)纳米卟啉荧光传感器的可控制备方法及其高灵敏检测儿茶素类物质的方法示意图。
图2为本发明可逆纳米卟啉传感器中的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液的紫外可见光光谱，横坐标为波长，纵坐标为吸光度。
图3为本发明可逆纳米卟啉传感器中的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液的透射式电子显微镜图片，其为纳米棒。
图4为本发明可逆纳米卟啉传感器中ZnCdSe量子点与四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液特异性结合后的荧光光谱图，横坐标为波长，纵坐标为荧光强度。
图5为本发明可逆纳米卟啉传感器的灵敏度。四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液(0.84～5.04μmol/L)与ZnCdSe量子点在Tris-HCl缓冲溶液(pH＝8.0)作用后的荧光光谱图，横坐标为波长，纵坐标为荧光强度。
图6为本发明可逆纳米卟啉传感器与不同浓度儿茶素(2.0×10-9-1.0×10-8mol/L)作用后的荧光恢复光谱，横坐标为波长，纵坐标为荧光强度。
图7为本发明可逆纳米卟啉传感器与不同浓度表儿茶素(8.0×10-9-1.0×10- 7mol/L)作用后的荧光恢复光谱，横坐标为波长，纵坐标为荧光强度。
图8为本发明可逆纳米卟啉传感器与不同浓度表没食子儿茶素没食子酸酯(1.0×10-8-1.0×10-7mol/L)作用后的荧光恢复光谱，横坐标为波长，纵坐标为荧光强度。
图9为本发明可逆纳米卟啉传感器与不同浓度没食子儿茶素(5.0×10-9-1.0×10-7mol/L)作用后的荧光恢复光谱，横坐标为波长，纵坐标为荧光强度。
图10为本发明可逆纳米卟啉传感器与不同浓度儿茶素作用后线性相关图，横坐标为儿茶素的浓度，纵坐标为荧光恢复强度(F2)与ZnCdSe量子点原始荧光强度(F0)的比值。
图11为本发明可逆纳米卟啉传感器与不同浓度表儿茶素作用后线性相关图，横坐标为表儿茶素的浓度，纵坐标为荧光恢复强度与ZnCdSe量子点原始荧光强度的比值。
图12为本发明可逆纳米卟啉传感器与不同浓度表没食子儿茶素没食子酸酯作用后线性相关图，横坐标为表没食子儿茶素没食子酸酯的浓度，纵坐标为荧光恢复强度(F2)与ZnCdSe量子点原始荧光强度(F0)的比值。
图13为本发明可逆纳米卟啉传感器与不同浓度没食子儿茶素作用后线性相关图，横坐标为没食子儿茶素的浓度，纵坐标为荧光恢复强度与ZnCdSe量子点原始荧光强度的比值。
图14为本发明可逆纳米卟啉传感器的稳定性。可逆纳米卟啉传感器与儿茶素在Ca2+、Zn2+、Mg2+、K+、Na+、细胞培养液、小牛血浆、新生牛血清、牛血清白蛋白和混合干扰(Mixture)的情况下作用后的稳定性。横坐标为所加入的干扰物质，纵坐标为荧光恢复强度(F2)与ZnCdSe量子点原始荧光强度(F0)的比值。
图15为本发明可逆纳米卟啉传感器的稳定性。可逆纳米卟啉传感器与表儿茶素在Ca2+、Zn2+、Mg2+、K+、Na+、细胞培养液、小牛血浆、新生牛血清、牛血清白蛋白和混合干扰(Mixture)的情况下作用后的稳定性。横坐标为所加入的干扰物质，纵坐标为荧光恢复强度(F2)与ZnCdSe量子点原始荧光强度(F0)的比值。
图16为本发明可逆纳米卟啉传感器的稳定性。可逆纳米卟啉传感器与表没食子儿茶素没食子酸酯在Ca2+、Zn2+、Mg2+、K+、Na+、细胞培养液、小牛血浆、新生牛血清、牛血清白蛋白和混合干扰(Mixture)的情况下作用后的稳定性。横坐标为所加入的干扰物质，纵坐标为荧光恢复强度(F2)与ZnCdSe量子点原始荧光强度(F0)的比值。
图17为本发明可逆纳米卟啉传感器的稳定性。可逆纳米卟啉传感器与没食子儿茶素在Ca2+、Zn2+、Mg2+、K+、Na+、细胞培养液、小牛血浆、新生牛血清、牛血清白蛋白和混合干扰(Mixture)的情况下作用后的稳定性。横坐标为所加入的干扰物质，纵坐标为荧光恢复强度(F2)与ZnCdSe量子点原始荧光强度(F0)的比值。
具体实施方式
下面申请人将结合具体的实施例对本发明作进一步的详细说明，以使本领域的技术人员更加清楚地理解本发明。但以下内容不应理解为是对本发明的权利要求书请求保护范围的限制。
实施例中所使用的化学试剂和溶剂均为分析纯。所述实验操作为磁力搅拌方式。所述的荧光光谱测定条件均为发射波长400-550nm，激发波长为360nm，狭缝宽度为10-15nm。
实施例1：可逆纳米卟啉荧光传感器对儿茶素的识别和定量分析，所述方法示意图如1，步骤如下：
(1)ZnCdSe量子点荧光探针的合成
将二氯化锌(0.035g,6.4mM)和N-乙酰-L-半胱氨酸(0.1253g,19.2mM)溶于40mL超纯水中，在冰浴、常压下搅拌20分钟后用氢氧化钠溶液将溶液PH调为9.7，调好PH加入100μL二氯化镉(0.00058g,0.237mM)，然后充氮气冰浴搅拌5～10分钟。加入NaHSe，搅拌5分钟。最后将此溶液放入反应釜中，在200℃的烘箱中反应65分钟。冷却至室温，得到4.9×10-9mol/LZnCdSe量子点荧光探针。
(2)纳米卟啉溶液的合成
将适量四-(4-吡啶基)锌卟啉溶于N,N-二甲基甲酰胺溶液中，得到浓度为3×10- 4mol/L四-(4-吡啶基)锌卟啉N,N-二甲基甲酰胺溶液，其紫外光谱图如图2。将将适量四-(4-吡啶基)锌卟啉溶于适量DMF中，超声溶解后置于4℃下备用。向圆底烧瓶中加入2.8mlZnTPyP的DMF溶液和45.5ml2.7％十二烷基二甲基甜菜碱，室温下搅拌10min后得到一种非常稳定的绿色透明胶体溶液。得到纳米化卟啉浓度为1.68×10-5mol/l，其紫外光谱图如图2。其透射式电子显微镜表征显示为粒径160nm左右的纳米棒，如图3。
(3)开关纳米卟啉荧光传感器的制备
在1.5mL比色皿中加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点和890μLpH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，在400-550nm处进行荧光光谱测定，476nm处得到荧光强度为840的峰，如图4。在1.5mL比色皿中加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点和300μL1.68×10-5mol/L步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液，再加入620μLpH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，混匀5分钟后，在400-550nm处进行荧光光谱测定,474nm处得到荧光强度为350的峰，如图4。
(4)可逆纳米卟啉荧光传感器对儿茶素的定量分析
在1.5mL比色皿中加入100μL儿茶素水溶液，300μL1.68×10-5mol/L步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液和520μLPH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，静置5分钟。再加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处进行荧光光谱测定，测得其5分钟后的光谱。儿茶素(2.0×10-9-1.0×10-8mol/L)与纳米卟啉荧光传感器结合后的荧光强度随着儿茶素的浓度增加而增强，如图6，线性相关系数为0.9715，如图10。
在1.5mL比色皿中加入100μL儿茶素(2.0×10-9mol/L)、100μL干扰物质(1.0×10- 5mol/L)、300μL1.68×10-5mol/L步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液和520μLpH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，静置5分钟。再加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处用荧光光谱测定,测得其5分钟后的光谱，荧光恢复几乎不受干扰因素的影响，表现出很强的抗干扰能力，如图14。
实施例2：可逆纳米卟啉荧光传感器对表儿茶素定量分析，所述方法示意图如1，步骤如下：
(1)ZnCdSe量子点荧光探针的合成
采用实施例1中步骤(1)的方法合成ZnCdSe量子点荧光探针。
(2)四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液的合成
采用实施例1中步骤(2)的方法合成四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液。
(3)开关纳米卟啉荧光传感器的制备
采用实施例1中步骤(3)的方法制备纳米卟啉荧光传感器。
(4)可逆纳米卟啉荧光传感器对表儿茶素的定量分析
在1.5mL比色皿中加入100μL表儿茶素水溶液，300μL1.68×10-5mol/L步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液和520μLpH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，静置5分钟。再加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处进行荧光光谱测定，测得其5分钟后的光谱。表儿茶素(8.0×10-9-1.0×10-7mol/L)与纳米卟啉荧光传感器结合后的荧光强度随着表儿茶素的浓度增加而增强，如图7，线性相关系数为0.9898如图11。
在1.5mL比色皿中加入100μL表儿茶素(1.0×10-8mol/L)、100μL干扰物质(1.0×10-5mol/L)、300μL1.68×10-5mol/L步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液和520μLpH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，静置5分钟。再加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处用荧光光谱测定,测得其5分钟后的光谱，荧光恢复几乎不受干扰因素的影响，表现出很强的抗干扰能力，如图15。
实施例3：可逆纳米卟啉荧光传感器对表没食子儿茶素没食子酸酯定量分析，所述方法示意图如1，步骤如下：
(1)ZnCdSe量子点荧光探针的合成
采用实施例1中步骤(1)的方法合成ZnCdSe量子点荧光探针。
(2)四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液的合成
采用实施例1中步骤(2)的方法合成四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液。
(3)开关纳米卟啉荧光传感器的制备
采用实施例1中步骤(3)的方法制备纳米卟啉荧光传感器。
(4)可逆纳米卟啉荧光传感器对表没食子儿茶素没食子酸酯的定量分析
在1.5mL比色皿中加入100μL表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液，300μL1.68×10- 5mol/L步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液和520μLpH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，静置5分钟。再加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处进行荧光光谱测定，测得其5分钟后的光谱。表没食子儿茶素没食子酸酯(1.00×10-8-1.00×10-7mol/L)与纳米卟啉荧光传感器结合后的荧光强度随着表没食子儿茶素没食子酸酯的浓度增加而增强，如图8，线性相关系数为0.9973如图12。在1.5mL比色皿中加入100μL表没食子儿茶素没食子酸酯(1.00×10-8mol/L)、100μL干扰物质(1.00×10-5mol/L)、300μL1.68×10-5mol/L步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液和520μLpH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，静置5分钟。再加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处用荧光光谱测定,测得其5分钟后的光谱，荧光恢复几乎不受干扰因素的影响，表现出很强的抗干扰能力，如图16。
实施例4：可逆纳米卟啉荧光传感器对没食子儿茶素定量分析，所述方法示意图如1，步骤如下：
(1)ZnCdSe量子点荧光探针的合成
采用实施例1中步骤(1)的方法合成ZnCdSe量子点荧光探针。
(2)四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液的合成
采用实施例1中步骤(2)的方法合成四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液。
(3)开关纳米卟啉荧光传感器的制备
采用实施例1中步骤(3)的方法制备纳米卟啉荧光传感器。
(4)可逆纳米卟啉荧光传感器对没食子儿茶素的定量分析
在1.5mL比色皿中加入100μL没食子儿茶素水溶液，300μL1.68×10-5mol/L步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液和520μLpH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，静置5分钟。再加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处进行荧光光谱测定，测得其5分钟后的光谱。没食子儿茶素(5.0×10-9-1.0×10-7mol/L)与纳米卟啉荧光传感器结合后的荧光强度随着没食子儿茶素的浓度增加而增强，如图9，线性相关系数为0.9908如图13。在1.5mL比色皿中加入100μL没食子儿茶素(5.0×10-9mol/L)、100μL干扰物质(1.0×10-5mol/L)、300μL1.68×10-5mol/L步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液和520μLpH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，静置5分钟。再加入80μL4.9×10-9mol/L步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处用荧光光谱测定,测得其5分钟后的光谱，荧光恢复几乎不受干扰因素的影响，表现出很强的抗干扰能力，如图17。
Claims (7)
1.一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)将二氯化锌和N-乙酰-L-半胱氨酸溶于超纯水中，在冰浴、常压下搅拌20分钟后用氢氧化钠溶液将溶液pH调为9.7，然后加入二氯化镉充氮气冰浴搅拌5分钟。加入NaHSe，搅拌5分钟。最后将此溶液放入反应釜中，在200℃的烘箱中反应65分钟；得到ZnCdSe量子点；
(2)将四-(4-吡啶基)锌卟啉溶于DMF中，超声溶解后置于4℃下备用；然后加入ZnTPyP的DMF溶液和十二烷基二甲基甜菜碱的水溶液，室温下搅拌10min后得到一种非常稳定的绿色透明胶体四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体纳米棒即纳米卟啉溶液；
(3)将四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体溶液加入ZnCdSe量子点荧光探针，再加入pH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液通过电子转移和荧光共振能量转移作用，猝灭量子点荧光，通过特异性结合得到的复合物，提供量子点一个“Turn-off”的状态，从而得到具有双重复合纳米效应的开关纳米卟啉荧光传感器；
(4)将不同标准浓度的儿茶素类物质分别加入到相同的开关纳米卟啉荧光传感器中，开关纳米卟啉荧光传感器中的量子点荧光恢复，不同浓度的儿茶素类化合物致使量子点荧光恢复的现象产生明显的差异，从而得到可逆“开-关-开”纳米卟啉荧光传感器；记录相关的现象；
或直接将步骤(3)和(4)合并：分别将不同浓度范围的儿茶素类化合物与步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液、pH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液混合，静置5分钟；再加入步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处进行荧光光谱测定，测得其5分钟后的光谱，记录相关的光谱；
(5)将待测浓度的儿茶素类物质溶液加入到与步骤(4)相同的开关纳米卟啉荧光传感器中，将得到的现象或光谱，同步骤(4)比较，得到相关的浓度。
2.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，二氯化锌、N-乙酰-L-半胱氨酸、二氯化镉、NaHSe的物质的量的比为：1.0:3.0:0.01:0.1。
3.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，ZnCdSe量子点荧光探针发射波长为465～480nm。
4.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，步骤(2)中四-(4-吡啶基)锌卟啉与十二烷基二甲基甜菜碱的物质的量比为1:14～16。
5.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，步骤(3)四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒与ZnCdSe量子点的物质的量比为277～280:1。
6.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，步骤(3)最后的混合溶液中四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒的浓度、ZnCdSe量子点浓度分别为0.84～5.04μmol/L、4.2×10-9mol/L。
7.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，用于生物基质中儿茶素类物质的微量检测。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111766212A (zh) * | 2020-07-26 | 2020-10-13 | 中南民族大学 | 一种卟啉紫外探针鉴别不同名优绿茶的方法 |
| CN112129735A (zh) * | 2020-09-08 | 2020-12-25 | 浙江工业大学上虞研究院有限公司 | 一种ZnCdSe QDs荧光探针的制备方法及应用 |
| CN113960024A (zh) * | 2021-09-27 | 2022-01-21 | 中南民族大学 | 一种百合品质的可视化识别方法 |
Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101268510A (zh) * | 2005-09-29 | 2008-09-17 | 通用电气公司 | 具有光检测器的介质驱动器和检测可信制品的方法 |
| US8486620B2 (en) * | 2007-05-23 | 2013-07-16 | Ventana Medical Systems, Inc. | Polymeric carriers for immunohistochemistry and in situ hybridization |
| CN104718214A (zh) * | 2012-05-31 | 2015-06-17 | 国立科学研究中心 | 具有改性外表面的改善的有机-无机杂化固体 |
| CN104998261A (zh) * | 2015-08-12 | 2015-10-28 | 金陵科技学院 | 一种双重载药的荧光磁性微球复合体系及其制备方法 |
| CN105056252A (zh) * | 2015-07-29 | 2015-11-18 | 金陵科技学院 | 一种荧光标记的磁性山奈酚微球体系及其制备方法 |
| CN105358979A (zh) * | 2013-03-15 | 2016-02-24 | 普林斯顿大学理事会 | 借助靶向固定、表面放大、以及像素化读取和分析的分析物检测增强 |
| WO2016161325A1 (en) * | 2015-04-02 | 2016-10-06 | University Of Washington | Optical painting and fluorescence-activated sorting of adherent cells |
| CN106916159A (zh) * | 2017-02-27 | 2017-07-04 | 中南民族大学 | 一种开关纳米卟啉荧光传感器可控制备方法 |
| CN106970059A (zh) * | 2017-05-05 | 2017-07-21 | 上海健康医学院 | 一种高效双光子纳米诊疗剂的制备及其应用 |
| CN107247041A (zh) * | 2017-06-06 | 2017-10-13 | 四川农业大学 | 一种检测焦性没食子酸的比率荧光探针及制备方法和应用 |
| CN107854689A (zh) * | 2017-11-27 | 2018-03-30 | 南京大学 | 激活型纳米探针及其生物应用 |
-
2019
- 2019-01-03 CN CN201910005774.6A patent/CN109738406B/zh active Active
Patent Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101268510A (zh) * | 2005-09-29 | 2008-09-17 | 通用电气公司 | 具有光检测器的介质驱动器和检测可信制品的方法 |
| US8486620B2 (en) * | 2007-05-23 | 2013-07-16 | Ventana Medical Systems, Inc. | Polymeric carriers for immunohistochemistry and in situ hybridization |
| CN104718214A (zh) * | 2012-05-31 | 2015-06-17 | 国立科学研究中心 | 具有改性外表面的改善的有机-无机杂化固体 |
| CN105358979A (zh) * | 2013-03-15 | 2016-02-24 | 普林斯顿大学理事会 | 借助靶向固定、表面放大、以及像素化读取和分析的分析物检测增强 |
| WO2016161325A1 (en) * | 2015-04-02 | 2016-10-06 | University Of Washington | Optical painting and fluorescence-activated sorting of adherent cells |
| CN105056252A (zh) * | 2015-07-29 | 2015-11-18 | 金陵科技学院 | 一种荧光标记的磁性山奈酚微球体系及其制备方法 |
| CN104998261A (zh) * | 2015-08-12 | 2015-10-28 | 金陵科技学院 | 一种双重载药的荧光磁性微球复合体系及其制备方法 |
| CN106916159A (zh) * | 2017-02-27 | 2017-07-04 | 中南民族大学 | 一种开关纳米卟啉荧光传感器可控制备方法 |
| CN106970059A (zh) * | 2017-05-05 | 2017-07-21 | 上海健康医学院 | 一种高效双光子纳米诊疗剂的制备及其应用 |
| CN107247041A (zh) * | 2017-06-06 | 2017-10-13 | 四川农业大学 | 一种检测焦性没食子酸的比率荧光探针及制备方法和应用 |
| CN107854689A (zh) * | 2017-11-27 | 2018-03-30 | 南京大学 | 激活型纳米探针及其生物应用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| M. ASHA JHONSI等: "Investigations on the photoinduced interaction of water soluble thioglycolic acid (TGA) capped CdTe quantum dots with certain porphyrins", 《JOURNAL OF COLLOID AND INTERFACE SCIENCE》 * |
| OU HU 等: """Turn-off" fluorescent sensor based on double quantum dots coupled with chemometrics for highly sensitive and specific recognition of 53 famous green teas"", 《ANALYTICA CHIMICA ACTA》 * |
| TIAN-MINGYANG 等: "Turn-off-on" fluorescent sensor for (N-methyl-4-pyridyl) porphyrin -DNA and G-quadruplex interactions based on ZnCdSe quantum dots", 《ANALYTICA CHIMICA ACTA》 * |
| YAOFANA 等: "Turn-off" fluorescent data array sensor based on double quantum dots coupled with chemometrics for highly sensitive and selective detection of multicomponent pesticides", 《ANALYTICA CHIMICA ACTA》 * |
| 张奎: "量子点光学床干起的设计及其对痕量有害物质的可视化检测", 《万方博士学位论文》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111766212A (zh) * | 2020-07-26 | 2020-10-13 | 中南民族大学 | 一种卟啉紫外探针鉴别不同名优绿茶的方法 |
| CN112129735A (zh) * | 2020-09-08 | 2020-12-25 | 浙江工业大学上虞研究院有限公司 | 一种ZnCdSe QDs荧光探针的制备方法及应用 |
| CN113960024A (zh) * | 2021-09-27 | 2022-01-21 | 中南民族大学 | 一种百合品质的可视化识别方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109738406B (zh) | 2021-06-18 |
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