CN109730210A - 象拔蚌饲料添加剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供象拔蚌饲料添加剂，属于水产养殖饲料领域，该饲料添加剂中包括水溶性甲壳素、菠萝蜜叶黄酮浸膏、γ‑氨基丁酸、丁酸钠、蝇蛆粉；上述水溶性甲壳素是通过酸和碱以微波加热法从动物壳中提取甲壳素后，再在浓碱和激发剂的碱化作用下形成；上述激发剂中包括肉桂醇和对甲酚。本发明提供的象拔蚌饲料添加剂，其有效成分活性和稳定性高，结晶性差，溶解性和可调和性增强，可贮藏性高，生产成本低，能增加动物成活率和可食用性，提高饲料利用率，促进营养代谢、肠道功能、免疫和抗菌能力增强；其制备方法充分利用废弃物资源，升温快耗时短，反应脱乙酰度高，反应转化率和产率高，提高了资源利用率。

Description

象拔蚌饲料添加剂

技术领域

本发明属于水产养殖饲料领域，具体涉及象拔蚌饲料添加剂。

背景技术

象拔蚌：生物名称是太平洋潜泥蛤，又名皇帝蚌、女神蛤，海产商品名称“象拔蚌”。两扇壳一样大，薄且脆，前端有锯齿、副壳、水管(也称为触须)，是已知最大的钻穴双壳类。原产地在美国和加拿大北太平洋沿海。因其又大又多肉的虹管，很似大象的鼻子(象拔)被人们称为“象拔蚌”。象拔蚌的出肉率高达60～70％，其中主要食用部位为水管肌，占总食用量的30～35％，每100克含热量81千卡、蛋白质14.4克、脂肪1.3克，富含高度不饱和脂肪酸、牛磺酸，而且体内多糖还具有抗氧化活性，具有很高的营养价值，并且能维持钾钠平衡，消除水肿，提高免疫力，调低血压，缓冲贫血，有利于机体生长发育。

象拔蚌具有个体大、生长快、味道鲜美、经济价值高等优点，有着巨大的市场需求，市场消费主要集中在亚洲特别是我国及东南亚地区。近年来，由于原产地对象拔蚌的捕捞限制，加之栖息地破坏等原因，象拔蚌的渔获量正逐年下降，大幅度提高象拔蚌的供应量比较困难，同时受到人工费用、空运费用以及关税的影响，1996年中国市场开始人工养殖。我国山东、辽宁等地沿海滩涂面积广阔，引进这一名贵海产贝类，在我国开展象拔蚌的人工繁殖及增养殖，对于有效利用我国滩涂资源，开发养殖新品种等具有重要意义。

象拔蚌的养殖得到养殖业内的重视，象拔蚌是埋栖型贝类，栖息底质以泥沙为主，生长在自然海区中的象拔蚌主要以海水中的单细胞藻类为食，也可滤食沉积物和有机碎屑。目前养殖象拔蚌多投喂天然生物饵料，这些天然生物饵料营养成分比较单一，而且可能含有某些细菌、寄生虫等有害生物，造成象拔蚌生长缓慢，生长周期长，易被微生物侵袭，养殖经济效益较低，无法满足市场需求。

饲料添加剂对养殖业生产发挥着举足轻重的作用。长久以来，在规模化养殖生产中，人们普遍在饲料中添加抗生素、激素和化学合成药物，目的是来促进动物生长、改善肉的品质，因此饲料添加剂的研究与应用一直是动物营养学家的工作重点之一。在动物饲养方面，饲用抗生素、激素等作为饲料添加剂在提高动物生产能力方面曾经发挥过重要作用，但大量使用存在诸多弊端，如造成胃肠道正常菌群失衡、降低免疫功能水平、引起病原微生物产生抗药性和畜产品药物残留进而威胁人类健康，造成环境污染等。因此，寻找安全、有效、可以替代抗生素等使用的新型添加剂成为添加剂研究与应用的发展趋势。

发明内容

本发明的目的在于提供一种成分活性和稳定性高，结晶性差，溶解性和可调和性增强，可贮藏性高，生产成本低，增加动物成活率和可食用性，提高饲料利用率的象拔蚌饲料添加剂，其制备方法充分利用废弃物资源，升温快耗时短，反应脱乙酰度高，反应转化率和产率高，提高了资源利用率。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

象拔蚌饲料添加剂，该饲料添加剂中包括水溶性甲壳素；水溶性甲壳素是通过酸和碱以微波加热法从动物壳中提取甲壳素后，再在浓碱和激发剂的碱化作用下形成的；上述激发剂中包括肉桂醇和对甲酚。动物壳中的甲壳素以蛋白聚糖的形式存在，并伴生着碳酸钙，直接添加于饲料中难以被消化，经一系列处理后，降解为水溶性寡糖，消除其抗营养因子作用，较甲壳素的生物活性更高，既可作为免疫增强剂也可作为营养性多糖利用，以提高动物的消化吸收和利用。

作为优选，饲料添加剂中包括以下重量份的原料：水溶性甲壳素8～12份、菠萝蜜叶黄酮浸膏4～10份、γ-氨基丁酸3～7份、丁酸钠2～5份、蝇蛆粉6～12份。该饲料添加剂能对动物体内的糖代谢和脂肪代谢产生有益影响，有利于动物营养代谢和健康，调节动物体内胆固醇、脂肪代谢，增强肠道功能，提高免疫和抗菌能力，抗氧化活性明显，也增加了动物的可食用性。

本发明中还公开一种上述象拔蚌饲料添加剂的制备方法，包括提取甲壳素，制备水溶性甲壳素，制备黄酮浸膏，调制，其中制备水溶性甲壳素步骤如下：取甲壳素悬浮于含有激发剂的NaOH溶液中，冷冻浸滞得到碱化甲壳素，再在冰浴中超声碱化，然后调节溶液pH并煮沸，离心，将沉淀进行除杂并洗涤后，干燥即得。甲壳素稳定的化学结构限制了其溶解能力，在浓碱作用下，其分子结构中的乙酰胺基就会水解，脱去乙酰基，留下游离的氨基，成为水溶性甲壳素。

作为优选，激发剂在NaOH溶液的重量占比为0.05～0.15％，其中肉桂醇和对甲酚的重量比为2.5～3.5:1；NaOH溶液浓度为40～50％。激发剂的加入一方面能降低体系中的空间位阻，而空间位阻因子的减少，使得反应平衡向着脱乙酰基的方向进行，对反应速率有所促进，同时能打破体系中的电荷平衡，电荷密度改变促使反应向着聚电解质电荷密度增加的方向进行，从而促进胺基质子化，增大脱乙酰度，进而使得产物产率增加，反应转化率提高，增加资源利用率，另一方面激发剂破坏了甲壳素分子内及分子间的氢键作用，在相同脱乙酰条件下，能进一步破坏甲壳素结晶性，结晶尺寸显著变小，分子链难以进行有序化排列，使其水溶性增强，进而增强了添加剂溶解性和可调和性。

作为优选，冷冻浸滞温度为-10～-20，℃时间为10～12h；超声碱化温度为-2～0，℃超声功率为400～600W，时间为24～32h。甲壳素分子内和分子间有强烈的氢键作用，不溶于水、低浓度的酸及常见的有机溶剂，仅溶于浓盐酸、浓硫酸、浓磷酸等。但是，甲壳素在浓酸中溶解的同时也发生降解，因此本发明中以浓碱液处理甲壳素后，再在低温条件下，借助超声辅助，利用激发剂和碱进行反应，制备了水溶性甲壳素，获得了较高的提取得率和反应效率。

进一步优选，制备水溶性甲壳素具体步骤如下：取甲壳素悬浮于15～20倍量浓度为40～50％的NaOH溶液中，于-10～-20℃条件下冷冻浸滞10～12h，得到碱化甲壳素，然后向其中加入2～3倍量的冰水混合物，搅拌成胶状物，再于超声功率400～600W、-2～0℃的冰浴中搅拌碱化24～32h，然后调节溶液pH为7.5～8.5，煮沸25～35min，再于8000～10000rpm条件下离心10～20min，用去离子水洗涤沉淀至中性，然后将沉淀悬浮于5～8倍量的水中，用浓度为2mol/L的盐酸调节悬浮液pH为6.0～6.5，搅拌使沉淀完全溶解后，过滤，取滤液用丙酮进行沉淀，再将沉淀用90％的丙酮溶液洗涤2～3次，70～90℃干燥即得。

作为优选，提取甲壳素步骤如下：取动物壳磨碎后，依次用盐酸溶液脱钙、NaOH溶液脱蛋白、过氧化氢溶液脱色，所得产物干燥即得。

作为优选，脱钙、脱蛋白、脱色过程中配合使用微波加热法；微波功率为600～800W。甲壳素通常采用酸和碱在加热条件下处理，分别脱去盐和蛋白质得到，微波使溶剂中的极性分子间加速运动和碰撞，从而摩擦并产生大量的热，使材料温度升高，相比于传统的加热方式，其优点是受热均匀、升温速度快，缩短酸或碱处理时间，有助于提高反应速度和化学产率。

进一步优选，提取甲壳素具体步骤如下：取动物壳磨碎后，与3～5倍量、浓度为10～15％的盐酸溶液混合，于微波功率600～800W条件下加热30～40min，冷却后用水将沉淀洗至中性，然后将沉淀与3～5倍量、浓度为10～15％的NaOH溶液混合，于微波功率600～800W条件下加热30～40min，冷却后用水将沉淀洗至中性，再将沉淀与2～3倍量、浓度为10～15％的过氧化氢溶液混合，于微波功率600～800W条件下加热10～15min，冷却后用水洗涤至中性，然后将沉淀于40～50℃条件下干燥，即得甲壳素。

作为优选，制备黄酮浸膏步骤如下：将菠萝蜜叶干燥磨碎后，按料液比为1:30～40g/mL加入体积浓度为35～45％的乙醇，于80～90℃条件下提取60～90min，然后将提取液于40～60℃条件下蒸发浓缩成膏状即得。在我国作为废弃物的菠萝蜜叶产量非常高，并未被肠粉利用，而叶片中含有大量有抗氧化作用的黄酮类化合物，其能对人和动物免疫能力起到促进作用，有抗炎、抗菌抗病毒、免疫调节、降血糖降血脂、防治心脑血管疾病、抑制肿瘤细胞生长的作用。

作为优选，调制步骤如下：按重量份称取各原料后，混合，送入温度为80～90、℃蒸汽压力为0.2～0.3MPa的调质器中调制3～5min，然后于70～85℃条件下烘干，即得饲料添加剂。

本发明的有益效果为：

1)本发明中用微波辅助酸碱预处理动物壳，然后在低温和超声辅助下，利用激发剂和碱制备水溶性甲壳素，获得了水溶性甲壳素，消除其中抗营养因子作用，获得更高的生物活性，既可作为免疫增强剂也可作为营养性多糖利用，以提高动物的消化吸收和利用；

2)本发明中的饲料添加剂中各原料协同作用，有效成分活性和稳定性高，能对动物体内的糖代谢和脂肪代谢产生有益影响，有利于动物营养代谢和健康，调节动物体内胆固醇、脂肪代谢，增强肠道功能，提高免疫和抗菌能力，抗氧化活性明显，也增加了动物的成活率和可食用性，提高饲料利用率；

3)本发明中饲料添加剂的制备方法设计合理，升温速度快，耗时短，反应产物脱乙酰度高，转化率和产率高，结晶性差，水溶性高，增强了添加剂的溶解性和可调和性，增加了可贮藏性，利于长期保存，也有效利用了废弃物资源，降低了生产成本。

本发明采用了上述技术方案提供象拔蚌饲料添加剂，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。

附图说明

图1为水溶性甲壳素的红外光谱图。

具体实施方式

以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述：

实施例1：

象拔蚌饲料添加剂，该饲料添加剂中包括水溶性甲壳素；水溶性甲壳素是通过酸和碱以微波加热法从动物壳中提取甲壳素后，再在浓碱和激发剂的碱化作用下形成的；上述激发剂中包括肉桂醇和对甲酚。动物壳中的甲壳素以蛋白聚糖的形式存在，并伴生着碳酸钙，直接添加于饲料中难以被消化，经一系列处理后，降解为水溶性寡糖，消除其抗营养因子作用，较甲壳素的生物活性更高，既可作为免疫增强剂也可作为营养性多糖利用，以提高动物的消化吸收和利用。

饲料添加剂中包括以下重量份的原料：水溶性甲壳素8份、菠萝蜜叶黄酮浸膏4份、γ-氨基丁酸3份、丁酸钠2份、蝇蛆粉6份。该饲料添加剂能对动物体内的糖代谢和脂肪代谢产生有益影响，有利于动物营养代谢和健康，调节动物体内胆固醇、脂肪代谢，增强肠道功能，提高免疫和抗菌能力，抗氧化活性明显，也增加了动物的可食用性。

上述象拔蚌饲料添加剂的制备方法，包括提取甲壳素，制备水溶性甲壳素，制备黄酮浸膏，调制，其中制备水溶性甲壳素步骤如下：取甲壳素悬浮于含有激发剂的NaOH溶液中，冷冻浸滞得到碱化甲壳素，再在冰浴中超声碱化，然后调节溶液pH并煮沸，离心，将沉淀进行除杂并洗涤后，干燥即得。甲壳素稳定的化学结构限制了其溶解能力，在浓碱作用下，其分子结构中的乙酰胺基就会水解，脱去乙酰基，留下游离的氨基，成为水溶性甲壳素。

激发剂在NaOH溶液的重量占比为0.06％，其中肉桂醇和对甲酚的重量比为2.5:1；NaOH溶液浓度为40％。激发剂的加入一方面能降低体系中的空间位阻，而空间位阻因子的减少，使得反应平衡向着脱乙酰基的方向进行，对反应速率有所促进，同时能打破体系中的电荷平衡，电荷密度改变促使反应向着聚电解质电荷密度增加的方向进行，从而促进胺基质子化，增大脱乙酰度，进而使得产物产率增加，反应转化率提高，增加资源利用率，另一方面激发剂破坏了甲壳素分子内及分子间的氢键作用，在相同脱乙酰条件下，能进一步破坏甲壳素结晶性，结晶尺寸显著变小，分子链难以进行有序化排列，使其水溶性增强，进而增强了添加剂溶解性和可调和性。

冷冻浸滞温度为-10℃，时间为12h；超声碱化温度为-2℃，超声功率为400W，时间为32h。甲壳素分子内和分子间有强烈的氢键作用，不溶于水、低浓度的酸及常见的有机溶剂，仅溶于浓盐酸、浓硫酸、浓磷酸等。但是，甲壳素在浓酸中溶解的同时也发生降解，因此本发明中以浓碱液处理甲壳素后，再在低温条件下，借助超声辅助，利用激发剂和碱进行反应，制备了水溶性甲壳素，获得了较高的提取得率和反应效率。

制备水溶性甲壳素具体步骤如下：取甲壳素悬浮于15倍量浓度为40％的NaOH溶液中，于-10℃条件下冷冻浸滞12h，得到碱化甲壳素，然后向其中加入2倍量的冰水混合物，搅拌成胶状物，再于超声功率400W、-2℃的冰浴中搅拌碱化32h，然后调节溶液pH为7.5，煮沸25min，再于8000rpm条件下离心10min，用去离子水洗涤沉淀至中性，然后将沉淀悬浮于5倍量的水中，用浓度为2mol/L的盐酸调节悬浮液pH为6，搅拌使沉淀完全溶解后，过滤，取滤液用丙酮进行沉淀，再将沉淀用90％的丙酮溶液洗涤2次，70℃干燥即得。

提取甲壳素步骤如下：取动物壳磨碎后，依次用盐酸溶液脱钙、NaOH溶液脱蛋白、过氧化氢溶液脱色，所得产物干燥即得。

脱钙、脱蛋白、脱色过程中配合使用微波加热法；微波功率为600W。甲壳素通常采用酸和碱在加热条件下处理，分别脱去盐和蛋白质得到，微波使溶剂中的极性分子间加速运动和碰撞，从而摩擦并产生大量的热，使材料温度升高，相比于传统的加热方式，其优点是受热均匀、升温速度快，缩短酸或碱处理时间，有助于提高反应速度和化学产率。

提取甲壳素具体步骤如下：取动物壳磨碎后，与3倍量、浓度为10％的盐酸溶液混合，于微波功率600W条件下加热30min，冷却后用水将沉淀洗至中性，然后将沉淀与3倍量、浓度为10％的NaOH溶液混合，于微波功率600W条件下加热30min，冷却后用水将沉淀洗至中性，再将沉淀与2倍量、浓度为10％的过氧化氢溶液混合，于微波功率600W条件下加热10min，冷却后用水洗涤至中性，然后将沉淀于40℃条件下干燥，即得甲壳素。

制备黄酮浸膏步骤如下：将菠萝蜜叶干燥磨碎后，按料液比为1:30g/mL加入体积浓度为35％的乙醇，于80℃条件下提取90min，然后将提取液于40℃条件下蒸发浓缩成膏状即得。在我国作为废弃物的菠萝蜜叶产量非常高，并未被肠粉利用，而叶片中含有大量有抗氧化作用的黄酮类化合物，其能对人和动物免疫能力起到促进作用，有抗炎、抗菌抗病毒、免疫调节、降血糖降血脂、防治心脑血管疾病、抑制肿瘤细胞生长的作用。

调制步骤如下：按重量份称取各原料后，混合，送入温度为80、℃蒸汽压力为0.2MPa的调质器中调制5min，然后于70℃条件下烘干，即得饲料添加剂。

实施例2：

象拔蚌饲料添加剂，该添加剂中包括以下重量份的原料：水溶性甲壳素12份、菠萝蜜叶黄酮浸膏10份、γ-氨基丁酸7份、丁酸钠5份、蝇蛆粉12份。

一种象拔蚌饲料添加剂的制备方法，具体包括以下步骤：

1)取动物壳磨碎后，与5倍量、浓度为15％的盐酸溶液混合，于微波功率700W条件下加热40min，冷却后用水将沉淀洗至中性，然后将沉淀与5倍量、浓度为15％的NaOH溶液混合，于微波功率700W条件下加热40min，冷却后用水将沉淀洗至中性，再将沉淀与3倍量、浓度为15％的过氧化氢溶液混合，于微波功率700W条件下加热15min，冷却后用水洗涤至中性，然后将沉淀于50℃条件下干燥，即得甲壳素；

2)取甲壳素悬浮于20倍量浓度为50％的NaOH溶液中，于-20℃条件下冷冻浸滞10h，得到碱化甲壳素，然后向其中加入3倍量的冰水混合物，搅拌成胶状物，再于超声功率500W、-2℃的冰浴中搅拌碱化24h，然后调节溶液pH为8.5，煮沸25min，再于10000rpm条件下离心10min，用去离子水洗涤沉淀至中性，然后将沉淀悬浮于8倍量的水中，用浓度为2mol/L的盐酸调节悬浮液pH为6.5，搅拌使沉淀完全溶解后，过滤，取滤液用丙酮进行沉淀，再将沉淀用90％的丙酮溶液洗涤3次，90℃干燥，即得水溶性甲壳素，上述激发剂在NaOH溶液的重量占比为0.15％，其中肉桂醇和对甲酚的重量比为3.5:1；

3)将菠萝蜜叶干燥磨碎后，按料液比为1:40g/mL加入体积浓度为45％的乙醇，于90℃条件下提取60min，然后将提取液于60℃条件下蒸发浓缩成膏状，即得黄酮浸膏；

4)按重量份称取各原料后，混合，送入温度为90、℃蒸汽压力为0.3MPa的调质器中调制3min，然后于85℃条件下烘干，即得饲料添加剂。

实施例3：

象拔蚌饲料添加剂，该添加剂中包括以下重量份的原料：水溶性甲壳素10份、菠萝蜜叶黄酮浸膏9份、γ-氨基丁酸5份、丁酸钠4份、蝇蛆粉10份。

一种象拔蚌饲料添加剂的制备方法，具体包括以下步骤：

1)取动物壳磨碎后，与4倍量、浓度为10％的盐酸溶液混合，于微波功率800W条件下加热35min，冷却后用水将沉淀洗至中性，然后将沉淀与4倍量、浓度为10％的NaOH溶液混合，于微波功率800W条件下加热35min，冷却后用水将沉淀洗至中性，再将沉淀与2倍量、浓度为10％的过氧化氢溶液混合，于微波功率800W条件下加热10min，冷却后用水洗涤至中性，然后将沉淀于45℃条件下干燥，即得甲壳素；

2)取甲壳素悬浮于15倍量浓度为45％的NaOH溶液中，于-15℃条件下冷冻浸滞10h，得到碱化甲壳素，然后向其中加入3倍量的冰水混合物，搅拌成胶状物，再于超声功率600W、0℃的冰浴中搅拌碱化30h，然后调节溶液pH为8.5，煮沸30min，再于10000rpm条件下离心15min，用去离子水洗涤沉淀至中性，然后将沉淀悬浮于6倍量的水中，用浓度为2mol/L的盐酸调节悬浮液pH为6.5，搅拌使沉淀完全溶解后，过滤，取滤液用丙酮进行沉淀，再将沉淀用90％的丙酮溶液洗涤3次，80℃干燥，即得水溶性甲壳素，上述激发剂在NaOH溶液的重量占比为0.1％，其中肉桂醇和对甲酚的重量比为3.2:1；

3)将菠萝蜜叶干燥磨碎后，按料液比为1:35g/mL加入体积浓度为40％的乙醇，于85℃条件下提取75min，然后将提取液于50℃条件下蒸发浓缩成膏状，即得黄酮浸膏；

4)按重量份称取各原料后，混合，送入温度为85℃、蒸汽压力为0.2MPa的调质器中调制5min，然后于80℃条件下烘干，即得饲料添加剂。

实施例4：

一种象拔蚌饲料添加剂的制备方法，其中对菠萝蜜叶黄酮浸膏制备步骤进行优化，具体优化措施如下：将菠萝蜜叶干燥磨碎后，按料液比为1:35g/mL加入体积浓度为40％的乙醇，于85℃条件下提取75min，然后将提取液于50℃条件下蒸发浓缩成膏状，即得黄酮浸膏，上述乙醇中含有0.15mM的D-异抗坏血酸和0.1mM的亚硝酸钠，两者协同作用，能够在渗透细胞膜进入细胞内部时，破坏细胞黏膜，在其上形成孔洞，加速胞内物质向外扩散，使得提取效率得到提高，同时能有效保持黄酮类化合物的高活性，不易变质，增加产物的稳定性和可贮藏性，利于长期保存。

本实施例是在实施例3的基础上行进优化，其他原料及制备步骤与实施例3一致，制得饲料添加剂。

实施例5：

一种象拔蚌饲料添加剂的制备方法，其中制备水溶性甲壳素的步骤如下：取甲壳素悬浮于15倍量浓度为45％的NaOH溶液中，于-15℃条件下冷冻浸滞10h，得到碱化甲壳素，然后向其中加入3倍量的冰水混合物，搅拌成胶状物，再于超声功率600W、0℃的冰浴中搅拌碱化30h，然后调节溶液pH为8.5，煮沸30min，再于10000rpm条件下离心15min，用去离子水洗涤沉淀至中性，然后将沉淀悬浮于6倍量的水中，用浓度为2mol/L的盐酸调节悬浮液pH为6.5，搅拌使沉淀完全溶解后，过滤，取滤液用丙酮进行沉淀，再将沉淀用90％的丙酮溶液洗涤3次，80℃干燥，即得水溶性甲壳素，上述NaOH溶液中未添加含有肉桂醇和对甲酚的激发剂。

本实施例是在实施例3的基础上行进对比试验，其他原料及制备步骤与实施例3一致，制得饲料添加剂。

实施例6：

饲料添加剂成分提取与制备试验

1)水溶性甲壳素结构表征测定

分别取实施例3和实施例5中所制水溶性甲壳素设为试验组1和2，取甲壳素设为空白组，采用KBr压片法，在Nicolet 5DX FTIR红外光谱仪上测定红外光谱。采用Rigaku D/max-2500X-射线衍射仪测定WAXD，Cu(K-ALPHA1/40KV/100mA)，扫描3°～40°。

测定结果见附图1。

由附图1中可知，在波数3584cm^-1、1723cm^-1和711cm^-13处红外吸收的甲壳素的结晶敏感吸收区，而试验组1的水溶性甲壳素在上述3处都没有明显的吸收峰，说明水溶性甲壳素的结晶性被破坏的较彻底，而试验组2还有红外吸收峰，其分子中结晶性破坏程度较低。

2)取实施例1～5中所制得水溶性甲壳素和黄酮浸膏为样品，测定在提取和制备过程的得率以及最终含量，具体结果如下表1。

表1饲料添加剂成分提取与制备试验结果

	水溶性甲壳素得率％	芦丁含量μg/g	槲皮素含量μg/g
				实施例1	28.23	69.9	7.2
实施例2	28.18	70.2	7.6
				实施例3	28.36	69.4	7.4
实施例4	28.31	74.3	8.2
				实施例5	27.65	69.6	7.5

由上表可知，由于实施例5中水溶性甲壳素制备中未添加激发剂，故其得率显著低于其它实施例中得率，说明激发剂对水溶性甲壳素的提取有增益效果；实施例4中由于对黄酮浸膏的制备进行优化，因此实施例4中黄酮类化合物芦丁和槲皮素的含量显著高于其他实施例所得，说明优化措施达到了有益效果。

实施例7：

饲料添加剂饲养试验

在某水产养殖基地，取2000粒壳长5mm的象拔蚌种苗，随机分为4组，每组500粒。取实施例3～5所制饲料添加剂设为试验组1～3，取不添加添加剂为对照组，投喂同一种市售水产饲料，在相同条件下进行培养，试验时长为1年，结果如下表2。

表2饲料添加剂对象拔蚌的生长影响

由上表可知，对照组中象拔蚌的生长明显不如试验组，试验组由于添加了饲料添加剂，添加剂中有效成分对象拔蚌生长中的各种代谢、肠道功能、免疫抗菌能力等均有有益影响，尤其是试验组成活率均能达到80％以上，能显著增加养殖用户的有益，节约了成本和养殖资源。

上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。

以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (9)

1.象拔蚌饲料添加剂，其特征在于：饲料添加剂中包括水溶性甲壳素；所述水溶性甲壳素是通过酸和碱以微波加热法从动物壳中提取甲壳素后，再在浓碱和激发剂的碱化作用下形成；所述激发剂中包括肉桂醇和对甲酚。

2.根据权利要求1所述的象拔蚌饲料添加剂，其特征在于：所述饲料添加剂中包括以下重量份的原料：水溶性甲壳素8~12份、菠萝蜜叶黄酮浸膏4~10份、γ-氨基丁酸3~7份、丁酸钠2~5份、蝇蛆粉6~12份。

3.一种如权利要求1~2任一项所述的象拔蚌饲料添加剂的制备方法，包括提取甲壳素，制备水溶性甲壳素，制备黄酮浸膏，调制，其特征在于：所述制备水溶性甲壳素步骤如下：取甲壳素悬浮于含有激发剂的NaOH溶液中，冷冻浸滞得到碱化甲壳素，再在冰浴中超声碱化，然后调节溶液pH并煮沸，离心，将沉淀进行除杂并洗涤后，干燥即得。

4.根据权利要求3所述的象拔蚌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述激发剂在NaOH溶液的重量占比为0.05~0.15%，其中肉桂醇和对甲酚的重量比为2.5~3.5:1；所述NaOH溶液浓度为40~50%。

5.根据权利要求3所述的象拔蚌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述冷冻浸滞温度为-10~-20℃，时间为10~12h；所述超声碱化温度为-2~0℃，超声功率为400~600W，时间为24~32h。

6.根据权利要求3所述的象拔蚌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述提取甲壳素步骤如下：取动物壳磨碎后，依次用盐酸溶液脱钙、NaOH溶液脱蛋白、过氧化氢溶液脱色，所得产物干燥即得。

7.根据权利要求6所述的象拔蚌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述脱钙、脱蛋白、脱色过程中配合使用微波加热法；所述微波功率为600~800W。

8.根据权利要求3所述的象拔蚌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述制备黄酮浸膏步骤如下：将菠萝蜜叶干燥磨碎后，按料液比为1:30~40g/mL加入体积浓度为35~45%的乙醇，于80~90℃条件下提取60~90min，然后将提取液于40~60℃条件下蒸发浓缩成膏状即得。

9.根据权利要求3所述的象拔蚌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述调制步骤如下：按重量份称取各原料混合，然后送入温度为80~90℃、蒸汽压力为0.2~0.3MPa的调质器中调制3~5min，然后于70~85℃下烘干，即得饲料添加剂。