CN109722400A

CN109722400A - 一种用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂

Info

Publication number: CN109722400A
Application number: CN201910211840.5A
Authority: CN
Inventors: 杨宏志; 魏程程
Original assignee: Heilongjiang Bayi Agricultural University
Current assignee: Heilongjiang Bayi Agricultural University
Priority date: 2019-03-20
Filing date: 2019-03-20
Publication date: 2019-05-07

Abstract

一种用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂。属于微生物技术领域。它解决了目前缺少适用于以尾菜为主原料进行厌氧发酵的菌剂的问题。该复合菌剂按体积份数比包括19～25份氯酸杆菌DSM 19522发酵液、21～27份阿米尼弧菌DSM 25964发酵液、12～17份梭状芽胞杆菌ATCC TSD‑31发酵液、22～28份甲烷螺菌ATCC 27890发酵液、25～30份甲烷丝菌DSM 3013发酵液；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。本发明的复合菌剂适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵工艺，接种后，能够起到稳定发酵体系pH值以及提高甲烷产量和纯度的作用。

Description

一种用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种由多种微生物菌液制成的复合菌剂。

背景技术

尾菜是指新鲜蔬菜在采收、加工、运输、售卖过程及净菜加工处理时产生的叶、根、茎、果实和大量残次蔬菜，占了蔬菜产量的近1/3。与新鲜蔬菜一样，尾菜也富含多种维生素、矿物质、糖类和膳食纤维等营养成分。然而，长期以来由于没有科学合理的利用途径，大量的尾菜被随意倾倒和堆集。引发地下水污染、病虫害加剧、农药化肥投入增加等系列环境问题，也对百姓的身体健康以及蔬菜产业的持续健康发展形成威胁，同时还导致了资源浪费。将尾菜厌氧发酵产生沼气是变坏为好、变废为宝的一个有效途径。

目前，国内外实际应用的尾菜集中处理方法主要包括堆肥和饲料化，但这两种技术都存在一定的弊端。高含水量使尾菜堆肥处理的难度加大，堆肥质量不高，同时也易产生二次环境污染问题。脱水成本高和蛋白含量偏低不利于其饲料化，由于需要配合大量高蛋白饲料使用，所以难以实现大规模利用。因此，以上两种方法均不是尾菜的最佳处理和利用方法。

厌氧发酵技术是一种具有可持续发展意义的技术，特别是在生物质垃圾处理领域，发酵后产生的沼气可以作为清洁能源，可以减少温室效应气体排放量。固态基质被消化后还可以得到高品质的有机肥料和土壤改良剂。同时厌氧发酵不需要额外提供氧气，因而既可以降低处理成本，又可以实现垃圾的变废为宝，相对于堆肥和饲料化处理具有明显技术优势。

厌氧发酵技术虽然优点诸多，但尾菜具有水分糖分含量高、易腐败等特点，极易被起始发酵微生物利用，导致短时间内累积大量有机酸，造成发酵体系过酸化，从而抑制甲烷的产生，最终导致发酵的失败。优良的发酵剂可以很好地控制尾菜的过酸化问题，保证其发酵产气稳定性。

据报道，目前厌氧发酵的接种物多为沼气液、活性污泥或牛粪。且主要原料为畜禽粪便、秸秆和污泥。专利(201510227272.X)利用污泥或沼液混菌培养制备一种包含Clostridium beijernckii拜氏梭菌、Kosmotoga olearia、竹节状甲烷鬃菌Methanosaetaharundinacea等十多种菌种的混合菌剂，主要针对奶牛粪便的厌氧发酵；专利(201510818782.4)公布一种抑制蔬菜废弃物厌氧发酵过酸化的复合微生物制剂，包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母等6种微生物，该菌剂可维持蔬菜废弃物厌氧发酵体系的酸碱平衡；专利(201710998947.X)公开了一种由解磷巨大芽孢杆菌、脂肪芽孢杆菌、脱氮副球菌、亚硝化菌、荧光假单胞菌和粪肠球菌组成的污泥厌氧发酵微生物处理剂；专利(201710018942.6)公开了一种用于污泥厌氧发酵的微生物制剂，由短小芽孢杆菌、阴沟肠杆菌、反硝化菌、脱氮副球菌、解淀粉芽孢杆菌和乳酸乳球菌构成。该制剂可以极大提高污泥产生甲烷量，增大了污泥利用率。但这些发明都不涉及以尾菜为主要原料的厌氧发酵。

发明内容

本发明的目的是为了解决目前缺少适用于以尾菜为主原料进行厌氧发酵的菌剂的问题，而提供一种用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂。

该用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂按体积份数比包括19～25份氯酸杆菌(Cloacibacillus evryensis)DSM 19522发酵液、21～27份阿米尼弧菌(Aminivibriopyruvatiphilus)DSM 25964发酵液、12～17份梭状芽胞杆菌(Clostridium sp.)ATCC TSD-31发酵液、22～28份甲烷螺菌(Methanospirillum hungatii)ATCC 27890发酵液、25～30份甲烷丝菌(Methanothrix soehngenii)DSM 3013发酵液及20～30份的甘油；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。

该复合菌剂按体积份数比还包括20～30份的甘油。

按照微生物所起作用，厌氧发酵微生物可分为酸化细菌和产甲烷菌。酸化细菌主要水解有机废物产生有机酸引起体系酸化，该阶段并不产生甲烷；产甲烷菌(古细菌)则是在厌氧条件下将前一阶段代谢产物转化为甲烷。

本发明的复合菌剂中的氯酸杆菌DSM 19522和阿米尼弧菌DSM 25964属于酸化细菌。其中，氯酸杆菌DSM 19522在厌氧发酵过程中能将纤维素、半纤维素和氨基酸降解，生成乙酸、丙酸和甲酸，该菌种保藏于德国微生物菌种保藏中心(DSMZ)，保藏号DSM No.19522；阿米尼弧菌DSM 25964能够利用氨基酸等复杂有机物产酸，促进有机质的利用，该菌种保藏于德国微生物菌种保藏中心(DSMZ)，保藏号DSM No.25964。

本发明的复合菌剂中的梭状芽胞杆菌ATCC TSD-31属于产氢细菌，在厌氧发酵过程中能将有机酸转化为氢气，该菌种保藏于美国标准菌种收藏中心(ATCC)，保藏号ATCCNo.TSD-31。

本发明的复合菌剂中的甲烷丝菌和甲烷螺菌属于产甲烷菌，其中，甲烷丝菌DSM3013能够利用乙酸盐产生甲烷，该菌种保藏于德国微生物菌种保藏中心(DSMZ)，保藏号DSMNo.3013。甲烷螺菌ATCC 27890可以利用甲酸、H₂、CO₂、乙酸和乙醇等产生甲烷，该菌种保藏于美国标准菌种收藏中心(ATCC)，保藏号ATCC No.27890。

以上五种菌种均可通过其保藏机构购买获得。

本发明的复合菌剂的应用：将其接种于总固形物(TS)含量为2～3％，以尾菜为主要原料的沼气发酵罐中，在35℃条件下进行厌氧发酵。在发酵的第3～4天，发酵体系pH值从初始的6.4上升到6.5～6.7，然后略微下降，发酵的第6～7天开始回升至6.5以上，最后稳定在7.2左右。由此可知，接种了本发明复合菌剂的尾菜在整个厌氧发酵过程中，发酵体系的pH值经历了发酵初期的略微下降后即可快速回升并稳定在7.2左右，不需人工调节即能实现正常发酵，有效保证了发酵效率。而以牛粪厌氧发酵产生的沼液为接种物的对照组，在发酵的第3～4天，发酵体系的pH值即由初始的7.4降至6.6～6.8，第4～5天值降至6.0～6.2，需要人工添加碱液调节至7.0，随后pH值反复下降，故其整个发酵过程中需多次人工调节pH值才能保证发酵的正常进行，因此并不适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵体系。接种本发明的复合菌剂的发酵体系的累积产气率可以达到550～610(mL·g^-1TS)，甲烷含量达到48.2％～53.6％，而对照组的累积产气率为360～420(mL·g^-1TS)，甲烷含量仅为38.4％～44.7％，由此可以看出，接种本发明的复合菌剂可提高产甲烷率41.2～136.5％。以上数据可以说明，本发明的复合菌剂适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵工艺，接种后，能够起到稳定发酵体系pH值以及提高甲烷产量和纯度的作用。

具体实施方式

具体实施方式：本实施方式的用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂按体积份数比包括19份氯酸杆菌DSM 19522发酵液、21份阿米尼弧菌DSM 25964发酵液、12份梭状芽胞杆菌ATCCTSD-31发酵液、22份甲烷螺菌ATCC 27890发酵液及25份甲烷丝菌DSM 3013发酵液；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。

该复合菌剂的制备方法的步骤如下：

(一)菌种活化：将保藏的氯酸杆菌DSM 19522、阿米尼弧菌DSM 25964和梭状芽胞杆菌ATCC TSD-31分别接种于装有活化培养基A的厌氧管中，然后用真空泵反复抽真空和充入氮气至培养基变为无色为止，置于35℃培养7天。活化培养基A成分(g/L)为：酪蛋白胨10～12，葡萄糖5～7，氯化钠5～7，乙酸钠3～5，琼脂粉0.5～1.5，酵母浸出粉3～5，牛肉浸出粉10～12，盐酸半胱氨酸0.5～0.8，可溶性淀粉1～1.5，煮沸溶解后分装，121℃高压灭菌20min备用。

将保藏的将甲烷丝菌DSM 3013和甲烷螺菌ATCC 27890分别接种到装有活化培养基B的厌氧管中，然后用真空泵反复抽真空和充入氮气至培养基变为无色为止。置于35℃条件下培养10天。活化培养基B成分(g/L)为：CH₃COONa 6.5～7.0，KH₂PO₄ 0.2～0.5，NaCl 0.5～0.8，MgCl₂ 0.05～0.15，CaCl₂0.05～0.1，NH₄Cl 0.8～1.2，刃天青0.0005～0.0015，KHCO₃ 3.0～5.0，半胱氨酸盐酸盐0.2～0.4，Na₂S 0.5～0.8，微量元素液10mL，维生素液10mL。其中，微量元素液成分为(g·L^-1)：氨三乙酸12～13，FeCl₃ 1.2～1.4，MnCl₂ 0.05～0.15，CoCl₂ 0.03～0.06，CaCl₂ 0.1～0.3，ZnCl₂ 0.1～0.3，CuCl₂ 0.03～0.05，H₃BO₃ 0.01～0.03，Na₂MoO₄ 0.03～0.05，NaCl 1.0～1.2，NiCl₂ 0.1～0.2，Na₂SeO₃ 0.03～0.04。维生素液成分为(mg·L^-1)：生物素2.0～3.0，叶酸1.5～2.0，维生素B₆ 8.0～11.0，盐酸硫胺4.0～5.0，核黄素5.0～6.0，烟酸5.0～5.5，D-泛酸钙5.0～6.0，维生素B₁₂ 0.08～0.12，对氨基苯甲酸4.0～6.0，硫辛酸4.0～6.0。

(二)菌种的扩配：将活化好的氯酸杆菌DSM 19522、阿米尼弧菌DSM25964和梭状芽胞杆菌ATCC TSD-31分别接种于装有扩培培养基A的35℃厌氧管中，逐级扩大培养，每次接种量按照8％～15％的体积比。扩培培养基A成分(g/L)为：酪蛋白胨10～12，葡萄糖5～7，氯化钠5～7，乙酸钠3～5，琼脂粉0.5～1.5，酵母浸出粉3～5，牛肉浸出粉10～12，盐酸半胱氨酸0.5～0.8，可溶性淀粉1～1.5，煮沸溶解后分装，121℃高压灭菌20min备用。

将活化好的甲烷丝菌DSM 3013和甲烷螺菌ATCC 27890接种于装有扩培培养基B的35℃厌氧管中，逐级扩大培养，每次接种量按照8％～15％的体积比。扩培培养基B成分(g/L)为：CH₃COONa 6.5～7.0，KH₂PO₄ 0.2～0.5，NaCl 0.5～0.8，MgCl₂ 0.05～0.15，CaCl₂0.05～0.1，NH₄Cl 0.8～1.2，刃天青0.0005～0.0015，KHCO₃ 3.0～5.0，半胱氨酸盐酸盐0.2～0.4，Na₂S 0.5～0.8，微量元素液10mL，维生素液10mL。其中，微量元素液成分为(g·L^-1)：氨三乙酸12～13，FeCl₃ 1.2～1.4，MnCl₂ 0.05～0.15，CoCl₂ 0.03～0.06，CaCl₂ 0.1～0.3，ZnCl₂ 0.1～0.3，CuCl₂ 0.03～0.05，H₃BO₃ 0.01～0.03，Na₂MoO₄ 0.03～0.05，NaCl1.0～1.2，NiCl₂ 0.1～0.2，Na₂SeO₃ 0.03～0.04。维生素液成分为(mg·L^-1)：生物素2.0～3.0，叶酸1.5～2.0，维生素B₆ 8.0～11.0，盐酸硫胺4.0～5.0，核黄素5.0～6.0，烟酸5.0～5.5，D-泛酸钙5.0～6.0，维生素B₁₂ 0.08～0.12，对氨基苯甲酸4.0～6.0，硫辛酸4.0～6.0。

(三)菌剂的复配：将步骤(二)得到的五个菌种的发酵液按实施方法要求的体积份数比混合即可得到本实施方式的复合菌剂。

将其接种于总固形物(TS)含量为2～3％，以尾菜为主要原料的沼气发酵罐中，在35℃条件下进行厌氧发酵。在发酵的第3～4天，发酵体系pH值从初始的6.4上升到6.5～6.7，然后略微下降，发酵的第6～7天开始回升至6.5以上，最后稳定在7.2左右。由此可知，接种了本发明复合菌剂的尾菜在整个厌氧发酵过程中，发酵体系的pH值经历了发酵初期的略微下降后即可快速回升并稳定在7.2左右，不需人工调节即能实现正常发酵，有效保证了发酵效率。而以牛粪厌氧发酵产生的沼液为接种物的对照组，在发酵的第3～4天，发酵体系的pH值即由初始的7.4降至6.6～6.8，第4～5天值降至6.0～6.2，需要人工添加碱液调节至7.0，随后pH值反复下降，故其整个发酵过程中需多次人工调节pH值才能保证发酵的正常进行，因此并不适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵体系。接种本发明的复合菌剂的发酵体系的累积产气率可以达到550(mL·g^-1TS)，甲烷含量达到48.2％，而对照组的累积产气率为420(mL·g^-1TS)，甲烷含量仅为38.4％，由此可以看出，接种本发明的复合菌剂可提高产甲烷率41.2％。以上数据可以说明，本发明的复合菌剂适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵工艺，接种后，能够起到稳定发酵体系pH值以及提高甲烷产量和纯度的作用。

本实施方式可按体积份数比向复合菌剂中加入20份的甘油，甘油可用于菌种活性的长期保持。

具体实施方式二：本实施方式的用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂按体积份数比包括20份氯酸杆菌DSM 19522发酵液、22份阿米尼弧菌DSM 25964发酵液、13份梭状芽胞杆菌ATCC TSD-31发酵液、23份甲烷螺菌ATCC 27890发酵液及26份甲烷丝菌DSM 3013发酵液；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。本实施方式的复合菌剂的制备方法与具体实施方式一相同。

将其接种于总固形物(TS)含量为2～3％，以尾菜为主要原料的沼气发酵罐中，在35℃条件下进行厌氧发酵。在发酵的第3～4天，发酵体系pH值从初始的6.4上升到6.5～6.7，然后略微下降，发酵的第6～7天开始回升至6.5以上，最后稳定在7.2左右。由此可知，接种了本发明复合菌剂的尾菜在整个厌氧发酵过程中，发酵体系的pH值经历了发酵初期的略微下降后即可快速回升并稳定在7.2左右，不需人工调节即能实现正常发酵，有效保证了发酵效率。而以牛粪厌氧发酵产生的沼液为接种物的对照组，在发酵的第3～4天，发酵体系的pH值即由初始的7.4降至6.6～6.8，第4～5天值降至6.0～6.2，需要人工添加碱液调节至7.0，随后pH值反复下降，故其整个发酵过程中需多次人工调节pH值才能保证发酵的正常进行，因此并不适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵体系。接种本发明的复合菌剂的发酵体系的累积产气率可以达到596(mL·g^-1TS)，甲烷含量达到50.5％，而对照组的累积产气率为390(mL·g^-1TS)，甲烷含量仅为40.7％，由此可以看出，接种本发明的复合菌剂可提高产甲烷率89.6％。以上数据可以说明，本发明的复合菌剂适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵工艺，接种后，能够起到稳定发酵体系pH值以及提高甲烷产量和纯度的作用。

本实施方法可按体积份数比向复合菌剂中加入22份的甘油，甘油可用于菌种活性的长期保持。

具体实施方式三：本实施方式的用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂按体积份数比包括22份氯酸杆菌DSM 19522发酵液、24份阿米尼弧菌DSM 25964发酵液、14份梭状芽胞杆菌ATCC TSD-31发酵液、25份甲烷螺菌ATCC 27890发酵液及27份甲烷丝菌DSM 3013发酵液；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。本实施方式的复合菌剂的制备方法与具体实施方式一相同。

将其接种于总固形物(TS)含量为2～3％，以尾菜为主要原料的沼气发酵罐中，在35℃条件下进行厌氧发酵。在发酵的第3～4天，发酵体系pH值从初始的6.4上升到6.5～6.7，然后略微下降，发酵的第6～7天开始回升至6.5以上，最后稳定在7.2左右。由此可知，接种了本发明复合菌剂的尾菜在整个厌氧发酵过程中，发酵体系的pH值经历了发酵初期的略微下降后即可快速回升并稳定在7.2左右，不需人工调节即能实现正常发酵，有效保证了发酵效率。而以牛粪厌氧发酵产生的沼液为接种物的对照组，在发酵的第3～4天，发酵体系的pH值即由初始的7.4降至6.6～6.8，第4～5天值降至6.0～6.2，需要人工添加碱液调节至7.0，随后pH值反复下降，故其整个发酵过程中需多次人工调节pH值才能保证发酵的正常进行，因此并不适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵体系。接种本发明的复合菌剂的发酵体系的累积产气率可以达到610(mL·g^-1TS)，甲烷含量达到53.6％，而对照组的累积产气率为360(mL·g^-1TS)，甲烷含量仅为38.4％，由此可以看出，接种本发明的复合菌剂可提高产甲烷率136.5％。以上数据可以说明，本发明的复合菌剂适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵工艺，接种后，能够起到稳定发酵体系pH值以及提高甲烷产量和纯度的作用。

本实施方法可按体积份数比向复合菌剂中加入25份的甘油，甘油可用于菌种活性的长期保持。

具体实施方式四：本实施方式的用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂按体积份数比包括24份氯酸杆菌DSM 19522发酵液、26份阿米尼弧菌DSM 25964发酵液、16份梭状芽胞杆菌ATCC TSD-31发酵液、27份甲烷螺菌ATCC 27890发酵液及29份甲烷丝菌DSM 3013发酵液；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。本实施方式的复合菌剂的制备方法与具体实施方式一相同。

将其接种于总固形物(TS)含量为2～3％，以尾菜为主要原料的沼气发酵罐中，在35℃条件下进行厌氧发酵。在发酵的第3～4天，发酵体系pH值从初始的6.4上升到6.5～6.7，然后略微下降，发酵的第6～7天开始回升至6.5以上，最后稳定在7.2左右。由此可知，接种了本发明复合菌剂的尾菜在整个厌氧发酵过程中，发酵体系的pH值经历了发酵初期的略微下降后即可快速回升并稳定在7.2左右，不需人工调节即能实现正常发酵，有效保证了发酵效率。而以牛粪厌氧发酵产生的沼液为接种物的对照组，在发酵的第3～4天，发酵体系的pH值即由初始的7.4降至6.6～6.8，第4～5天值降至6.0～6.2，需要人工添加碱液调节至7.0，随后pH值反复下降，故其整个发酵过程中需多次人工调节pH值才能保证发酵的正常进行，因此并不适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵体系。接种本发明的复合菌剂的发酵体系的累积产气率可以达到570(mL·g^-1TS)，甲烷含量达到50.3％，而对照组的累积产气率为377(mL·g^-1TS)，甲烷含量仅为39.8％，由此可以看出，接种本发明的复合菌剂可提高产甲烷率91.1％。以上数据可以说明，本发明的复合菌剂适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵工艺，接种后，能够起到稳定发酵体系pH值以及提高甲烷产量和纯度的作用。

本实施方法可按体积份数比向复合菌剂中加入28份的甘油，甘油可用于菌种活性的长期保持。

具体实施方式五：本实施方式的用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂按体积份数比包括25份氯酸杆菌DSM 19522发酵液、27份阿米尼弧菌DSM 25964发酵液、17份梭状芽胞杆菌ATCC TSD-31发酵液、28份甲烷螺菌ATCC 27890发酵液及30份甲烷丝菌DSM 3013发酵液；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。本实施方式的复合菌剂的制备方法与具体实施方式一相同。

将其接种于总固形物(TS)含量为2～3％，以尾菜为主要原料的沼气发酵罐中，在35℃条件下进行厌氧发酵。在发酵的第3～4天，发酵体系pH值从初始的6.4上升到6.5～6.7，然后略微下降，发酵的第6～7天开始回升至6.5以上，最后稳定在7.2左右。由此可知，接种了本发明复合菌剂的尾菜在整个厌氧发酵过程中，发酵体系的pH值经历了发酵初期的略微下降后即可快速回升并稳定在7.2左右，不需人工调节即能实现正常发酵，有效保证了发酵效率。而以牛粪厌氧发酵产生的沼液为接种物的对照组，在发酵的第3～4天，发酵体系的pH值即由初始的7.4降至6.6～6.8，第4～5天值降至6.0～6.2，需要人工添加碱液调节至7.0，随后pH值反复下降，故其整个发酵过程中需多次人工调节pH值才能保证发酵的正常进行，因此并不适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵体系。接种本发明的复合菌剂的发酵体系的累积产气率可以达到566(mL·g^-1TS)，甲烷含量达到48.9％，而对照组的累积产气率为415(mL·g^-1TS)，甲烷含量仅为42.8％，由此可以看出，接种本发明的复合菌剂可提高产甲烷率55.8％。以上数据可以说明，本发明的复合菌剂适用于以尾菜为主要原料的厌氧发酵工艺，接种后，能够起到稳定发酵体系pH值以及提高甲烷产量和纯度的作用。

本实施方法可按体积份数比向复合菌剂中加入30份的甘油，甘油可用于菌种活性的长期保持。

Claims

1.一种用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂，其特征在于：该复合菌剂按体积份数比包括19～25份氯酸杆菌(Cloacibacillus evryensis)DSM 19522发酵液、21～27份阿米尼弧菌(Aminivibrio pyruvatiphilus)DSM 25964发酵液、12～17份梭状芽胞杆菌(Clostridiumsp.)ATCC TSD-31发酵液、22～28份甲烷螺菌(Methanospirillum hungatii)ATCC 27890发酵液、25～30份甲烷丝菌(Methanothrix soehngenii)DSM 3013发酵液；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。

2.根据权利要求1所述的一种用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂，其特征在于：该复合菌剂按体积份数比包括20～24份氯酸杆菌DSM 19522发酵液、22～26份阿米尼弧菌DSM 25964发酵液、13～16份梭状芽胞杆菌ATCC TSD-31发酵液、23～27份甲烷螺菌ATCC 27890发酵液及26～29份甲烷丝菌DSM 3013发酵液；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。

3.根据权利2要求所述的一种用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂，其特征在于：该复合菌剂按体积份数比包括22份氯酸杆菌DSM 19522发酵液、24份阿米尼弧菌DSM 25964发酵液、14份梭状芽胞杆菌ATCC TSD-31发酵液、25份甲烷螺菌ATCC 27890发酵液及27份甲烷丝菌DSM3013发酵液；以上五种菌的发酵液中的有效活菌数均为10⁹个/mL以上。

4.根据权利1、2或3要求所述的一种用于尾菜厌氧发酵的复合菌剂，其特征在于：该复合菌剂按体积份数比还包括20～30份的甘油。