CN109718365A - 重组人角质细胞生长因子的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了重组人角质细胞生长因子‑1、或者含有重组人角质细胞生长因子‑1的药物组合物，用于制备修复肠粘膜损伤的药物的应用。临床上应用不仅可以控制肿瘤治疗过程中粘膜损伤导致的住院期和再入院率的增加，同时还能保证治疗方案的持续，更能为患者减轻病痛以及节省治疗费用。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种重组人角质细胞生长因子-1的应用。
背景技术
目前癌症的主要治疗手段包括放射疗法(通常称为放疗)、化学药物疗法(通常称为化疗)和手术疗法。其中手术疗法对于非转移性实体瘤较为适用，对于中晚期肿瘤则需要联合放化疗进行治疗。但由于放疗、化疗缺乏选择性，在杀伤肿瘤组织的同时也会杀伤正常组织细胞，因此存在严重的不良反应，导致患者体质更为虚弱，降低患者对疾病的抵抗能力。常见的放化疗副作用包括骨髓抑制、消化道粘膜损伤、脱发等。其中消化道粘膜损伤根据具体损伤部位不同可能为口腔粘膜损伤、胃粘膜损伤或肠粘膜损伤。
上述粘膜损伤的发生会导致住院期和再入院率的增加，并导致治疗方案的打断或早期终止，同时也给患者带来更大的病痛和更多的治疗费用。
人角质细胞生长因子-1(human keratinocyte growth factor-1，hKGF-1)，即成纤维生长因子7(fibroblast growth factor-7，FGF-7)，hKGF-1由间质细胞产生，通过旁分泌特异性作用于上皮细胞，是一种可刺激胚胎发育，促进上皮细胞增殖和生长，参与免疫重建，以及肿瘤形成与发展等重要生物学功能的细胞生长因子。
含重组hKGF-1(rhKGF-1)的静脉注射液Palifermin(美国Amgen公司开发)于2004年12月获美国FDA批准上市，用于减少正在进行放化疗以准备骨髓移植的恶性血液病患者患口腔黏膜炎的几率，或缩短该疾病的发病时间。上述rhKGF-1是由大肠杆菌表达的天然hKGF-1的N末端前23个氨基酸残基缺失的hKGF类似物，可增强hKGF-1的稳定性和生物学活性。但目前还没有关于rhKGF-1用于放疗化疗导致的肠粘膜损伤修复的研究报道。
发明内容
本发明的目的是提供重组人角质细胞生长因子-1、或者含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物的应用。
本发明的另一目的是提供重组人角质细胞生长因子-1、或者含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物用于制备修复肠粘膜损伤的药物的应用。
本发明的目的可通过以下技术方案实现：重组人角质细胞生长因子-1、或者含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物，用于制备修复肠粘膜损伤的药物的应用。
所述的肠粘膜损伤是由化学药物治疗和/或放射治疗引起的。
具体的，所述的肠粘膜损伤是由化学药物治疗引起的。
具体的，所述的肠粘膜损伤是由放射治疗引起的。
具体的，所述的肠粘膜损伤是由放化综合治疗引起的。
所述的肠粘膜损伤为小肠粘膜损伤。
所述的肠粘膜损伤为结肠粘膜损伤。
其中，所述重组人角质细胞生长因子-1的序列为SEQ ID No:1。
所述含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物包括重组人角质细胞生长因子-1、甘露醇、蔗糖、L-组氨酸、吐温20、pH调节剂。
所述含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物由重组人角质细胞生长因子-1、甘露醇、蔗糖、L-组氨酸、吐温20、pH调节剂组成；重组人角质细胞生长因子-1、甘露醇、蔗糖、L-组氨酸、吐温20的质量比为1：(7.8～8.2)：(3.9～4.1)：(0.36～0.38)：(0.020～0.022)；当所述药物组合物溶于水中，浓度为5mg/mL时，pH为6.3～6.7。
具体的，所述含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物由重组人角质细胞生长因子-1、甘露醇、蔗糖、L-组氨酸、吐温20、pH调节剂组成；其中重组人角质细胞生长因子-1、甘露醇、蔗糖、L-组氨酸、吐温20的质量比为1：8：4：0.37：0.021；当所述药物组合物溶于水中，浓度为5mg/mL时，pH为6.5。
所述的pH调节剂为HCl和/或NaOH。
有益效果：
本发明提供了一种重组人角质细胞生长因子-1的新用途，该生长因子在针对实体瘤或非实体瘤的放化疗过程中引起的肠粘膜损伤的修复具有较好的效果。临床上不仅可以控制肿瘤治疗过程中粘膜损伤导致的住院期和再入院率的增加，同时还能保证治疗方案的持续，更能为患者减轻病痛以及节省治疗费用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物的制备
按照质量比为1：8：4：0.37：0.021的比例称取重组人角质细胞生长因子-1、甘露醇、蔗糖、L-组氨酸、吐温20，首先将重组人角质细胞生长因子-1进行纯化，将所得料液换液至含有蔗糖、L-组氨酸和甘露醇的溶液中，调整浓度至目标值，然后加入吐温20，最后用HCl调节pH至6.5，经冷冻干燥得到含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物。该药物组合物用ASK表示。进一步进行动物试验来验证重组人角质细胞生长因子-1在修复小肠粘膜损伤及结肠粘膜损伤上的作用和效果。
实施例2对联合化疗方案致白血病NOD/SCID小鼠黏膜损伤修复试验
(一)试验药物、动物、细胞株、试剂及仪器
试验药物：
(1)受试药物(ASK)，规格：6.25mg/瓶，批号：20160202。
(2)帕利夫明(Palifermin)，规格：6.25mg/瓶，批号：929594，美国AMGEN公司。
(3)阿糖胞苷，批号：54G507，Actavis Italy S.p.A公司。
(4)依托泊苷，批号：B11C1607004，齐鲁制药有限公司。
(5)柔红霉素，批号：15045411，海正辉瑞制药有限公司。
试验动物：
SPF级NOD/SCID小鼠，体重15-20g，90只，雌雄各半，北京维通利华实验动物技术有限公司，动物使用许可证号SYXK(鄂)2014-0013，动物许可证号No.11400700181196，No.11400700181197。
试验细胞株：
HL-60人早幼粒急性白血病细胞系细胞由武汉博士德生物科技有限公司提供，ATCC，Cat：CX0156。
试验试剂：
小鼠抗(人、兔、大鼠、小鼠)Brdu抗体，克隆号BU33，由武汉博士德生物有限公司提供；Cy3-兔抗鼠荧光二抗，批号：051016170629，由江苏碧云天生物有限公司提供；PE-antihuman CD33抗体，由北京达科为生物技术有限公司，批号B195145。
试验仪器：
OLYMPUS荧光倒置显微镜，奥林巴斯株式会社；
CytoFLEX流式细胞仪，贝克曼库尔特技术有限公司；
PTT-A600电子天平，福建华志科技有限公司。
(二)试验方法
(1)药物配制
受试药物用注射用水溶解，稀释至相应浓度临用时配制；帕利夫明用注射用水溶解，临用时配制。造模药物阿糖胞苷、柔红霉素、依托泊苷生理盐水配制相应浓度，临用时配制。
(2)白血病小鼠模型制备
无菌条件下收集处于对数生长期的细胞，800rpm，离心5min，弃上清，PBS清洗3次，充分去除胎牛血清。台盼蓝染色(活细胞＞95％)，细胞计数板计数并计算细胞密度，在15mLEP管中用PBS调整细胞密度为6×107/mL。在超净工作台密封瓶口，75％酒精消毒瓶身，经递物窗送入SPF室。
4-6周龄NOD-SCID小鼠，15-20g，90只，在层流架带盖鼠盒中饲养，饲养在室温20-25℃、相对湿度40-60％的SPF级动物中心，室内空气经中效过滤，饮用水标准化处理，12/12h的白天和黑夜周期，食用标准颗粒饲料，饲料和水随意饮用。每只经尾静脉输入6×106个HL-60细胞，四周后随机抽取八只小鼠，采用流式细胞术测定NOD/SCID小鼠外周血与骨髓中HL-60细胞所占比例(CD33阳性表达率)，待NOD/SCID小鼠外周血中HL-60细胞占非红系有核细胞比例>3％，小鼠骨髓细胞中HL-60细胞占>8.18％时，用于本实验。
(3)分组与给药
小鼠化疗方案如下：化疗第一天，腹腔注射10mg/kg柔红霉素和50mg/kg阿糖胞苷，尾静脉注射25mg/kg依托泊苷；化疗第二天，腹腔注射50mg/kg阿糖胞苷，尾静脉注射25mg/kg依托泊苷；化疗第三天至第五天，腹腔注射50mg/kg阿糖胞苷。
造白血病模型成功NOD/SCID小鼠，雌雄各半，按体重随机分为8组：
(1)正常对照组(Con)；
(2)白血病对照组(LCon)；
(3)白血病+化疗模型组(M)；
(4)模型+Palifermin 4.86mg/kg(M+4.86YY)；
(5)模型+Palifermin 0.54mg/kg(M+0.54YY)；
(6)模型+受试药物4.86mg/kg(M+4.86ASK)；
(7)模型+受试药物1.62mg/kg(M+1.62ASK)；
(8)模型+受试药物0.54mg/kg(M+0.54ASK)。
按各组试验用药剂量，经尾静脉注射给药，0.05mL/10g，一天一次，连续3天，正常组、白血病对照组和白血病+化疗模型组给予同等体积的安慰剂。分别记录为day-3、day-2、day-1。各组于注射后24h，进行化疗，化疗方案周期为五天，从建立小鼠化疗模型第一天至化疗第五天，记录为day0～day4，化疗组、给药组小鼠按照化疗方案给予柔红霉素、阿糖胞苷和依托泊苷，正常组与白血病对照组给予相同剂量的生理盐水，化疗结束后按照时间顺序依次记录为day5、day6、day7、day8、day9，day10、day11、day12、day13。给药组于化疗后(day5)开始，同前尾静脉注射相应药物，一天一次，连续3天。
由于该模型在试验过程中并不出现稀便，故不进行肉眼肠道损伤评分。于后day12(处理前1天)，腹腔注射Brdu 50mg/kg，一天一次，连续2天，于day13，处理动物，眼球取血流式细胞术测定外周血中HL-60细胞的比例，取小鼠双侧股骨，用1mL注射器吸取PBS反复将骨髓细胞冲入10mL离心管中，直至股骨外观呈白色。离心，PBS洗两次后，加入200μl重悬后取骨髓细胞测定小鼠骨髓中HL-60细胞的比例。取小肠、结肠、计算脏器指数；另取小肠、结肠，4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，观察病理变化。Brdu免疫荧光法，观察组织增殖程度。
(三)试验结果
数据结果以表示，两两比较采用t检验。
(1)对化疗白血病小鼠小肠、结肠指数的影响
结果可见，白血病小鼠，小肠、结肠指数均有下降趋势，但无显著差异；DEA化疗方案对小肠影响较大，可显著降低小肠指数，对结肠无明显影响。4.86mg/kg、1.62mg/kg受试药物可促进小肠增殖，与化疗模型组相比，差异显著(P<0.05)，4.86mg/kg Palifermin可促进小肠增殖，与化疗模型组相比，差异显著。对结肠也具有促增殖作用，结肠指数接近正常对照组。结果显示重组人角质细胞生长因子-1可降低死亡率的原因与促进小肠、结肠增殖，保护肠道损伤有关，结果见表1。
表1对DEA化疗方案白血病NOD/SCID小鼠结肠、小肠指数的影响统计表
| 组别 | 小肠指数(mg/cm) | 结肠指数(mg/cm) |
| Con | 30.1±3.21 | 35.8±5.58 |
| LCon | 27.1±3.58 | 30.0±8.52 |
| M | 23.5±1.90# | 31.3±6.38 |
| M+4.86YY | 27.0±1.89& | 36.7±10.43 |
| M+0.54YY | 26.3±3.24 | 36.24±7.96 |
| M+4.86ASK | 27.8±4.04& | 40.1±6.41& |
| M+1.62ASK | 26.9±3.49& | 42.9±11.9& |
| M+0.54ASK | 26.6±6.77 | 30.5±9.9 |
与正常组相比*P<0.05、**P<0.01；与白血病对照组相比#P<0.05、##P<0.01；与白血病+化疗组相比&P<0.05、&&P<0.01
(2)对化疗白血病小鼠小肠、结肠组织病理变化的影响(HE染色)
结果可见，正常对照组，结肠黏膜及黏膜下层、肌层形态完整，10例均未见病变；白血病小鼠出现粘液分泌增加，黏膜局部上皮脱落，5例未见病变，正常率为71％；白血病化疗鼠，2例未见病变，正常率为40％；Palifermin4.86mg/kg、0.54mg/kg，结肠未见明显病变的比率分别为67％、56％；4.86mg/kg、1.62mg/kg、0.54mg/kg受试药物的比率分别为85.7％、66.7％、50％，结果显示受试药物对白血病及化疗引起的结肠黏膜损伤有显著保护作用。正常对照组70％鼠小肠绒毛和黏膜形态完整，未见异常，出现3例黏膜固有层局部淋巴细胞增多，绒毛黏膜上皮细胞坏死脱落；白血病小鼠小肠黏膜仅2例正常，正常率仅为28.6％；化疗可加重肠黏膜损伤，出现黏膜变薄，上皮细胞坏死脱落现象，绒毛黏膜上皮细胞坏死脱落，黏膜变薄等现象，正常率为0％；Palifermin4.86mg/kg、0.54mg/kg，小肠正常率分别为16.7％、22.2％；受试药物4.86mg/kg、1.62mg/kg、0.54mg/kg，小肠正常率分别为14.3％、22.2％、12.5％，白血病病变及化疗对小肠黏膜的损伤程度大于结肠，结果显示重组人角质细胞生长因子-1对白血病及化疗引起的小肠黏膜损伤有一定保护作用，结果见表2。
表2对化疗白血病小鼠小肠、结肠组织病理变化的影响统计表
(3)对化疗白血病小鼠小肠、结肠组织增殖程度的影响(Brdu免疫荧光染色)
结果可见，与正常对照组相比，白血病小鼠小肠、结肠细胞增殖有一定程度抑制，但无显著差异；与白血病空白对照组相比，DEA化疗方案可显著抑制小肠、结肠的增殖；4.86mg/kg受试药物可显著促进小肠、结肠的增殖，1.62mg/kg受试药物对小肠也有明显的促增殖作用，Palifermin与受试药物作用趋势一致，结果见表3。
表3对DEA化疗方案白血病小鼠结肠、小肠增殖的影响统计表
| 组别 | 结肠Brdu阳性细胞率 | 小肠Brdu阳性细胞率 |
| Con | 26.1±9.69 | 21.5±6.73 |
| LCon | 23.7±7.49 | 18.2±6.22 |
| M | 14.1±5.12# | 10.8±1.28# |
| M+4.86ASK | 23.6±8.73& | 19.5±7.02& |
| M+1.62ASK | 22.9±8.83 | 18.3±7.39& |
| M+0.54ASK | 14.6±5.78 | 13.6±4.89 |
| M+4.86YY | 26.2±10.82& | 20.8±7.36& |
| M+0.54YY | 14.9±7.05 | 13.2±5.66 |
与正常组相比*P<0.05、**P<0.01；与白血病对照组相比#P<0.05、##P<0.01；与白血病+化疗组相比&P<0.05、&&P<0.01实施例3对结肠癌荷瘤裸鼠抗化疗黏膜损伤试验
(一)试验药物、动物、细胞株、试剂及仪器
试验药物：
(1)受试药物(ASK)，规格：6.25mg/瓶，批号：20160202，江苏奥赛康药业股份有限公司。
(2)帕利夫明(Palifermin)，规格：6.25mg/瓶，批号：929594，美国AMGEN公司。
(3)5-氟尿嘧啶(5-Fu)，批号：1511181，天津金耀药业有限。
试验动物：
SPF级裸小鼠BABL/c-nu 80只，15-20g，湖南斯莱克斯景达实验动物有限公司；动物使用许可证号SYXK(鄂)2014-0013，动物合格证号No.43004700026302。
试验细胞株：
HCT116人结肠癌细胞系细胞由武汉博士德生物科技有限公司提供，ATCCNumberCCL-247TM。
试验试剂：
小鼠抗(人、兔、大鼠、小鼠)Brdu抗体，克隆号BU33，由武汉博士德生物有限公司提供；Cy3-兔抗鼠荧光二抗，批号：051016170629，由江苏碧云天生物有限公司提供。
试验仪器：
OLYMPUS荧光倒置显微镜，奥林巴斯株式会社；
MNT-150型游标卡尺，上海美奈特实业有限公司；
PTT-A600电子天平，福建华志科技有限公司。
(二)试验方法
(1)药物配制
受试药物用注射用水溶解，稀释至相应浓度临用时配制；帕利夫明用注射用水溶解，临用时配制。造模药物5-氟尿嘧啶注射用水配制相应浓度，临用时配制。
(2)模型制备
无菌条件下收集处于对数生长期的HCT116细胞，800rpm，离心5min，弃上清，PBS清洗3次，充分去除胎牛血清。台盼蓝染色(活细胞＞95％)，细胞计数板计数并计算细胞密度。在15mL EP管中用PBS调整细胞密度为1×108/mL。在超净工作台密封瓶口，75％酒精消毒瓶身，经递物窗送入SPF室。
4-6周龄裸小鼠BABL/c-nu小鼠，15-20g，80只，在层流架带盖鼠盒中饲养，饲养在室温20-25℃、相对湿度40-60％的SPF级动物中心，室内空气经中效过滤，饮用水标准化处理，12/12h的白天和黑夜周期，食用标准颗粒饲料，饲料和水随意饮用。文献报道小鼠接种细胞量为1×106～1×107个不等，故在研究中使用1×107个/只的细胞量，细胞随机分为正常组和结肠癌荷瘤组，正常组每只腋下注射PBS 0.1mL作为对照，结肠癌荷瘤组小鼠每只腋下注射1×108/mL HCT116细胞悬液0.1mL，每周测量肿瘤的长轴(a)和短轴(b)，按公式V＝ab2/2(cm3)求出近似体积代表肿瘤体积直至实验结束，两周后，肿瘤直径大于0.4cm，模型成功。
(3)分组与给药
造模成功裸小鼠雌雄各半，按体重随机分为8组：
(1)正常对照组(Con)；
(2)荷瘤对照组(CCon)；
(3)荷瘤+化疗模型组(M)；
(4)模型+Palifermin4.86mg/kg(M+4.86YY)；
(5)模型+Palifermin0.54mg/kg(M+0.54YY)；
(6)模型+受试药物4.86mg/kg(M+4.86ASK)；
(7)模型+受试药物1.62mg/kg(M+1.62ASK)；
(8)模型+受试药物0.54mg/kg(M+0.54ASK)。
按各组试验用药剂量，经尾静脉注射给药，0.05mL/10g，一天一次，连续3天，正常组、荷瘤对照组和荷瘤+化疗模型组给予同等体积的安慰剂。分别记录为day-3、day-2、day-1。各组于注射后24h，进行化疗方案，化疗方案周期为五天，从建立小鼠化疗模型第一天至化疗第四天，记录为day0-day3，化疗组小鼠按照化疗方案腹腔给予40mg/kg 5-Fu，正常组与荷瘤对照组给予相同剂量的生理盐水，化疗结束后按照时间顺序依次记录为day4、day5、day6、day7、day8、day9，day10、day11。给药组于化疗后(day4)开始，同前尾静脉注射相应药物，一天一次，连续3天。试验过程中记录肠道损伤评分，评分标准见表4。于day10(处理前1天)，腹腔注射Brdu 50mg/kg，一天一次，连续2天，于day11，处死裸小鼠。取心脏、肝脏、肾脏、脾脏称重；取小肠、结肠称重、量取长度，计算小肠结肠指数；取小肠、结肠固定于4％多聚甲醛，石蜡包埋，HE染色，组织病理学观察；免疫组化观察组织增殖情况。
表4肠道损伤评分标准表
| 级别 | 现象及症状 | 评分 |
| 0级 | 正常粪便 | 0 |
| 1级 | 便稀软，颗粒状 | 1 |
| 2级 | 粪便不成颗粒状 | 2 |
| 3级 | 水样便 | 3 |
(三)试验结果
数据结果以表示，两两比较采用t检验。
(1)对对化疗结肠癌裸小鼠结肠、小肠指数的影响
结果可见，结肠癌荷瘤，可导致结肠指数下降，但对小肠指数无显著影响。5-Fu化疗，能进一步降低结肠、小肠指数，损伤肠道；4.86mg/kg受试药物可显著提升结肠指数(P<0.01)，其余剂量也有提升结肠指数的趋势，Parifermin与受试药物作用一致；4.86mg/kg受试药物及Parifermin均有提升小肠指数的趋势，但无显著差异，结果见表5。
表5对5-Fu化疗后结肠癌裸鼠脏器指数的影响统计表
| 组别 | 结肠指数(mg/cm) | 小肠指数(mg/cm) |
| Con | 36.4±3.70 | 25.8±05.03 |
| CCon | 29.4±6.42** | 25.0±3.04 |
| M | 26.6±1.05 | 17.3±7.08 |
| M+4.86YY | 37.2±4.01&& | 24.4±2.88 |
| M+0.54YY | 33.2±4.11& | 20.0±7.23 |
| M+4.86ASK | 35.1±5.24&& | 24.1±1.08 |
| M+1.62ASK | 32.4±6.68 | 21.3±3.17 |
| M+0.54ASK | 33.3±7.00 | 22.3±2.62 |
与正常组相比*P<0.05、**P<0.01；与荷瘤鼠组相比#P<0.05、##P<0.01；与荷瘤鼠+5-Fu组相比&P<0.05、&&P<0.01
(2)对化疗结肠癌裸小鼠结肠、小肠组织病理变化的影响(HE染色)
结果可见，正常裸鼠对照组，10例结肠组织结肠黏膜及黏膜下层、肌层形态未见明显病变；荷瘤鼠组，80％结肠组织，黏膜及黏膜下层、肌层形态未见明显病变。2例出现黏膜皱襞显著缩短，出现黏膜面见粘液分泌增加等现象；5-Fu化疗后，结肠组织正常率为33％；Palifermin4.86mg/kg、0.54mg/kg，结肠正常率分别为43％、75％；受试药物4.86mg/kg、1.62mg/kg、0.54mg/kg，结肠正常率分别为100％、100％、75％；结果表明重组人角质细胞生长因子-1对结肠癌及化疗引起的结肠黏膜损伤有显著保护作用。
正常对照组裸鼠10例小肠绒毛和黏膜形态完整，未见异常；结肠癌荷瘤小鼠10例小肠绒毛和黏膜形态完整，未见异常；5-Fu化疗可引起小肠黏膜损伤，出现绒毛变短和黏膜变薄现象，正常率33％；Palifermin4.86mg/kg、0.54mg/kg，小肠正常率分别为86％、50％；受试药物4.86mg/kg、1.62mg/kg、0.54mg/kg，小肠正常率分别为67％、80％、75％；结果显示荷瘤及化疗对小肠黏膜、结肠黏膜均具有损伤作用，rhKGF-1对荷瘤及化疗引起的肠黏膜损伤有保护作用，可能是其降低化疗死亡率的原因之一，结果见表6。
表6对化疗化疗结肠癌裸小鼠小肠、结肠组织病理变化的影响统计表
(3)对化疗结肠癌裸小鼠小肠、结肠组织增殖程度的影响(Brdu免疫荧光染色)
结果可见，与正常裸鼠相比，结肠癌荷瘤小鼠结肠未见明显变化；5-Fu化疗后，可显著抑制结肠组织增殖，4.86mg/kg受试药物可促进结肠细胞的增殖，与5-Fu化疗组相比，差异显著；Palifermin与受试药物趋势一致。其余各剂量组，具有促增殖趋势，但无显著差异，结果见表7。
与正常裸鼠相比，结肠癌荷瘤小鼠小肠未见明显变化；5-Fu化疗后，可显著抑制小肠组织增殖，受试药物各剂量组具有促进小肠增殖的趋势，但与5-Fu化疗组相比，无显著差异；Palifermin与受试药物趋势一致，结果见表7。
表7对5-Fu化疗后结肠癌裸鼠结肠、小肠细胞增殖的影响统计表
| 组别 | 结肠Brdu阳性率 | 小肠Brdu阳性率 |
| Con | 25.0±6.99 | 24.8±5.04 |
| CCon | 23.8±4.26 | 25.8±3.15 |
| M | 12.3±2.93## | 16.0±2.33## |
| M+4.86YY | 20.1±3.53& | 19.1±2.99 |
| M+0.54YY | 16.6±2.31 | 17.6±3.96 |
| M+4.86ASK | 20.4±4.45& | 19.1±2.48 |
| M+1.62ASK | 17.5±3.15 | 16.5±3.82 |
| M+0.54ASK | 16.7±4.63 | 16.5±2.79 |
与正常组相比*P<0.05、**P<0.01；与荷瘤鼠组相比#P<0.05、##P<0.01；与荷瘤鼠+5-Fu组相比&P<0.05、&&P<0.01
本发明的重组人角质细胞生长因子-1在针对实体瘤或非实体瘤的放化疗过程中引起的肠粘膜损伤的修复具有较好的效果。临床上不仅可以控制肿瘤治疗过程中粘膜损伤导致的住院期和再入院率的增加，同时还能保证治疗方案的持续，更能为患者减轻病痛以及节省治疗费用。
序列表
<110> 江苏奥赛康药业股份有限公司
<120> 重组人角质细胞生长因子的应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 140
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<400> 1
Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp Ile Arg Val Arg Arg Leu Phe
1 5 10 15
Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg Ile Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys
20 25 30
Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn Ile Met Glu Ile Arg Thr
35 40 45
Val Ala Val Gly Ile Val Ala Ile Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr
50 55 60
Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn
65 70 75 80
Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu Ile Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr
85 90 95
Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala
100 105 110
Leu Asn Gln Lys Gly Ile Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu
115 120 125
Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala Ile Thr
130 135 140
Claims (10)
1.重组人角质细胞生长因子-1、或者含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物，用于制备修复肠粘膜损伤的药物的应用。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于所述的肠粘膜损伤是由化学药物治疗和/或放射治疗引起的。
3.根据权利要求1所述应用，其特征在于所述的肠粘膜损伤是由化学药物治疗引起的。
4.根据权利要求1所述应用，其特征在于所述的肠粘膜损伤是由放射治疗引起的。
5.根据权利要求1所述应用，其特征在于所述的肠粘膜损伤是由放化综合治疗引起的。
6.根据权利要求1所述应用，其特征在于所述的肠粘膜损伤为小肠粘膜损伤。
7.根据权利要求1所述应用，其特征在于所述的肠粘膜损伤为结肠粘膜损伤。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的应用，其特征在于所述重组人角质细胞生长因子-1的序列为SEQ ID No:1。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于所述含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物包括重组人角质细胞生长因子-1、甘露醇、蔗糖、L-组氨酸、吐温20、pH调节剂。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于所述含有重组人角质细胞生长因子-1的药物组合物由重组人角质细胞生长因子-1、甘露醇、蔗糖、L-组氨酸、吐温20、pH调节剂组成；重组人角质细胞生长因子-1、甘露醇、蔗糖、L-组氨酸、吐温20的质量比为1：(7.8~8.2)：(3.9~4.1)：(0.36~0.38) ：(0.020~0.022)；当所述药物组合物溶于水中，浓度为5mg/mL时，pH为6.3～6.7。
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