CN109701014B - 一种用于微波动力治疗肿瘤的微球及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于微波动力治疗肿瘤的微球及其制备方法和应用。本发明提供的用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法包括如下步骤：将Si源或Zr源和有机溶剂A混合，获得混合液A；将金属、表面活性剂和有机溶剂B混合，获得混合液B；将混合液B和氨水混合，获得混合液C；将混合液A和混合液C混合，搅拌，获得用于微波动力治疗肿瘤的微球。本发明还提供了上述制备方法制得的微球及其在制备微波动力治疗肿瘤的药物或制剂中的应用。本发明中提供的微球用于治疗肿瘤，首次将微波动力疗法用于肿瘤的治疗，即通过微波刺激作为单一能量源，使得材料产生活性氧，活性氧对脂质，蛋白质和DNA造成氧化损伤，导致癌细胞功能失调，从而治疗肿瘤。

Description

一种用于微波动力治疗肿瘤的微球及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及微球技术领域。更具体地，涉及一种用于微波动力治疗肿瘤的微球及其制备方法和应用。

背景技术

癌症是一种可怕的疾病，是全球重大的死亡原因之一，也是世界各地卫生系统面临的真正挑战。而医学界常规治疗都有不小缺陷，如手术的创口大，恢复缓慢，癌细胞的转移可能性较大；化疗所服用的药物如紫杉醇、盐酸阿霉素等通过全身性用药，靶向效果差，对全身正常细胞损伤大；放疗是利用放射线治疗肿瘤的一种局部治疗方法，放射线在杀死癌细胞的同时，对正常细胞也会造成极大的伤害。人们发现活性氧，如单线态氧，超氧化物，过氧化物和羟基自由基，在细胞行为中扮演双刃。预计低水平的活性氧会支持细胞周期，而高水平的活性氧通常会对脂质，蛋白质和DNA造成氧化损伤，从而导致细胞功能失调。而且发现活性氧通常由于它们与正常细胞的不同氧化还原状态而导致优先杀死肿瘤细胞，对人体正常细胞损伤小。因此，已经开发了许多用于癌症治疗的活性氧产生方法。

其中，光动力学治疗技术被人们广泛研究，已经有许多药物被研制出来用于增强光动力疗法。但由于光的皮肤穿透浅，只对浅表的肿瘤有好的疗效。所以，需要研制出穿透深度深的动力学技术的微球。人们发现微波进入生物组织时，会产生微波的传输和能量的吸收，而微波的穿透深度较光更深，用微波来刺激产生活性氧的研究具有很大的应用前景。

有文献报道微波辐照可以提高Mn²⁺掺杂的Zr金属-有机骨架纳米立方体纳米材料的过氧化物酶样催化活性，从而通过催化H₂O₂使其分解导致大量的羟基自由基产生(ACSNano 2017,12(3),2201-2210)。虽然这微波促进动力学治疗有好的治疗疗效，但其产生活性氧需要H₂O₂的存在。

因此，本发明提供了一种与H₂O₂等物质完全无关，只在微波辐射这一单一能量源下产生活性氧，用于微波动力治疗肿瘤的微球及其制备方法和应用。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本发明的第二个目的在于提供一种用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法。

本发明的第三个目的在于提供一种用于微波动力治疗肿瘤的微球的应用。

为达到上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法，包括如下步骤：

将Si源或Zr源和有机溶剂A混合，获得混合液A；

将金属、表面活性剂和有机溶剂B混合，获得混合液B；

将混合液B和氨水混合，获得混合液C；

将混合液A和混合液C混合，搅拌，获得用于微波动力治疗肿瘤的微球。本发明工艺简单，生成效率高，易实现大规模生产。该微球合成方法简单，无毒副作用，粒度可控，可以直接用于动物体内。

优选地，所述搅拌时间为1～8h。本发明中搅拌能让混合液充分反应，获得尺寸均匀的微球；其中搅拌时间过短，反应不充分，时间过长会破坏微球形貌。进一步地，在本发明的某些具体实施方式中，例如，所述搅拌时间为1～2h、1～3h、1～4h、1～5h、1～6h、1～7h、2～3h、2～4h、2～5h、2～6h、2～7h、2～8h、3～4h、3～5h、3～6h、3～7h、3～8h、4～5h、4～6h、4～7h、4～8h、5～6h、5～7h、5～8h、6～7h、6～8h、7～8h等。

优选地，所述Si源为正硅酸甲酯或正硅酸乙酯；所述Zr源为正丙醇锆或异丙醇锆；所述Si源或Zr源易于水解生成SiO₂或ZrO₂。

优选地，所述有机溶剂A选自甲醇、乙醇、丙醇、乙腈、丙腈和丁腈的一种或多种。

优选地，所述混合液A的浓度为1～100mmol/L。

优选地，所述有机溶剂B选自甲醇、乙醇、丙醇、乙腈、丙腈和丁腈的一种或多种。

优选地，所述金属选自Ga，In和Sn中的一种或多种。

优选地，所述金属与所述Si源或所述Zr源的摩尔比为1～10:1。

优选地，所述有机溶剂A和有机溶剂B的体积比为1:1～10。

优选地，所述表面活性剂为Tween和/或Span。

优选地，所述表面活性剂与有机溶剂B的体积比为1:100～5000。

优选地，所述氨水与所述Si源或所述Zr源的摩尔比为10～50:1。

优选地，所述Tween表面活性剂选自Tween 20，Tween 60和Tween 80中的一种或多种。

优选地，所述Span表面活性剂选自Span60，Span80和Span85中的一种或多种。

优选地，所述混合液A和混合液C的体积比为1:1～10。

优选地，所述用于微波动力治疗肿瘤的微球直径为0.1～10μm；进一步地，在本发明的某些具体实施方式中，例如，所述用于微波动力治疗肿瘤的微球直径为0.1～0.3μm、0.1～0.4μm、0.1～0.55μm、0.1～0.7μm、0.1～1μm、0.1～1.5μm、0.1～3μm、0.1～4μm、0.1～6μm、0.1～8μm、0.3～0.4μm、0.3～0.55μm、0.3～0.7μm、0.3～1μm、0.3～1.5μm、0.3～3μm、0.3～4μm、0.3～6μm、0.3～8μm、0.3～10μm、0.4～0.55μm、0.4～0.7μm、0.4～1μm、0.4～1.5μm、0.4～3μm、0.4～4μm、0.4～6μm、0.4～8μm、0.4～10μm、0.55～0.7μm、0.55～1μm、0.55～1.5μm、0.55～3μm、0.55～4μm、0.55～6μm、0.55～8μm、0.55～10μm、0.7～1μm、0.7～1.5μm、0.7～3μm、0.7～4μm、0.7～6μm、0.7～8μm、0.7～10μm、1～1.5μm、1～3μm、1～4μm、1～6μm、1～8μm、1～10μm、1.5～3μm、1.5～4μm、1.5～6μm、1.5～8μm、1.5～10μm、4～6μm、4～8μm、4～10μm、6～8μm、6～10μm、8～10μm等；更优选地，所述用于微波动力治疗肿瘤的微球直径0.1～1μm。

优选地，所述金属、表面活性剂和有机溶剂B的混合方式为将金属超声分散于表面活性剂和有机溶剂B的混合液中。

优选地，所述制备方法在混合液A和C混合搅拌后还包括洗涤过程，所述洗涤方式为用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次。

本发明还提供了一种由上述制备方法制备得到的用于微波动力治疗肿瘤的微球。本方法制备的微球形貌良好，呈规则的球形；该微球通过微波刺激可产生活性氧，活性氧对脂质，蛋白质和DNA造成氧化损伤，导致癌细胞功能失调，从而能够用于治疗肿瘤。

优选地，所述用于微波动力治疗肿瘤的微球包括金属；进一步地，所述金属选自Ga，In和Sn中的一种或多种。本发明提供的微球掺杂了所述金属如Ga、In、Sn等，即将金属掺杂在氧化硅或氧化锆中，在微波作用下，金属失去电子，吸附在微球的介孔中的水和氧气得到电子形成活性氧。

优选地，所述用于微波动力治疗肿瘤的微球直径为0.1～10μm。

本发明还提供了上述的用于微波动力治疗肿瘤的微球在制备微波动力治疗肿瘤的药物或制剂中的应用。

另外，如无特殊说明，本发明所记载的任何范围包括端值以及端值之间的任何数值以及端值或者端值之间的任意数值所构成的任意子范围。

本发明的有益效果如下：

(1)本发明中提供的微球可用于治疗肿瘤，首次将微波动力疗法用于肿瘤的治疗，即通过微波刺激作为单一能量源，使得材料产生活性氧，活性氧对脂质，蛋白质和DNA造成氧化损伤，导致癌细胞功能失调，从而治疗肿瘤。并且取得了良好的治疗效果，具有很好的临床应用价值。

(2)本发明所述的用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法简单，不需要特殊设备，生产效率高，该方法制备的微球尺寸均一。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。

图1示出本发明实施例1所得到的用于微波动力治疗肿瘤的微球的透射电子显微照片；

图2示出本发明实施例1所得到的用于微波动力治疗肿瘤的微球的粒径分布图片；

图3示出本发明实施例1所得到的用于微波动力治疗肿瘤的微球的透射电子显微镜照片；

图4示出本发明实施例1所得到的用于微波动力治疗肿瘤的微球表面的扫描电子显微镜照片；

图5示出本发明实施例1所得到的用于微波动力治疗肿瘤的微球的微波产活性氧的荧光强度图。

具体实施方式

为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例和附图对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。

本发明中，制备方法如无特殊说明则均为常规方法，所用的原料如无特别说明均可从公开的商业途径获得，所述百分比如无特殊说明均为质量百分比。

实施例1

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将1mmol的正硅酸甲酯分散于40mL的甲醇和20mL的乙腈的混合溶剂中，得到混合液A；

2)将1mmol的GaIn共晶超声分散于40mL的甲醇、20mL的乙腈与0.1mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入10mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌1h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

从图1～图4可知，本实施例制备的用于微波动力治疗肿瘤的微球的粒径大小为200-350nm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生结果如图5所示，荧光强度显著增强，结果表明：活性氧含量显著升高，微球在微波照射下产生了大量的活性氧。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经尾静脉注射，六小时后微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例2

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将1mmol的正硅酸甲酯分散于40mL的甲醇和20mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将5mmol的GaIn共晶超声分散于40mL的甲醇、20mL的乙腈与0.15mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入20mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌1h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为100-400nm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经尾静脉注射，六小时后微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例3

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将1mmol的正硅酸甲酯分散于30mL的甲醇和30mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将10mmol的GaIn共晶超声分散于40mL的甲醇、40mL的乙腈与0.2mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入10mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌2h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为300-700nm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经尾静脉注射，六小时后微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例4

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将1mmol的正硅酸乙酯分散于25mL的甲醇和25mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将10mmol的GaIn共晶超声分散于30mL的甲醇、30mL的乙腈和0.25mL的Tween 20混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入50mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌3h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为550-700nm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经尾静脉注射，六小时后微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例5

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将1mmol的正硅酸乙酯分散于20mL的甲醇和20mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将5mmol的GaIn共晶超声分散于30mL的甲醇、30mL的乙腈与0.08mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中40mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌4h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为1.5-3μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例6

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将1mmol的正丙醇锆分散于25mL的甲醇和25mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将2.5mmol的GaIn共晶超声分散于35mL的甲醇、35mL的乙腈与0.1mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入30mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌5h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为1.5-3μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例7

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将1mmol的正丙醇锆分散于30mL的甲醇和10mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将10mmol的GaIn共晶超声分散于60mL的甲醇、20mL的乙腈与0.1mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中10mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌6h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为1.5-3μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例8

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将1mmol的异丙醇锆分散于40mL的甲醇和20mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将5mmol的GaIn共晶超声分散于40mL的甲醇、20mL的乙腈与0.3mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中50mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌8h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为1-4μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例9

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将2mmol的异丙醇锆分散于60mL的甲醇和40mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将5mmol的GaIn共晶超声分散于300mL的甲醇、200mL的乙腈与0.8mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入30mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌8h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为3.5-6μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例10

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将3mmol的正硅酸乙酯分散于50mL的甲醇和10mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将5mmol的GaIn共晶超声分散于50mL的甲醇、10mL的乙腈与0.1mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入60mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌8h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为6-10μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例11

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将5mmol的正硅酸乙酯分散于100mL的乙醇和100mL的丙腈中，得到混合液A；

2)将20mmol的GaIn共晶超声分散于150mL的乙醇、150mL的丙腈与1mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入200mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌6h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为8-10μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例12

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将3mmol的正硅酸乙酯分散于50mL的乙醇和10mL的乙腈中，得到混合液A；

2)将5mmol的GaIn共晶超声分散于50mL乙醇、10mL的乙腈与0.1mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入30mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌1h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为6-10μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例13

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将3mmol的正硅酸乙酯分散于30mL的乙醇和30mL的丙腈中，得到混合液A；

2)将15mmol的GaIn共晶超声分散于80mL的乙醇、80mL的丙腈与0.1mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入60mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌1h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为6-10μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例14

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将3mmol的正硅酸乙酯分散于10mL的乙醇和50mL的丙腈中，得到混合液A；

2)将30mmol的GaIn共晶超声分散于10mL的乙醇、50mL的丙腈与0.1mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中90mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌1h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为6-10μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

实施例15

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，包括如下步骤：

1)将3mmol的正硅酸乙酯分散于20mL的乙醇和40mL的丙腈中，得到混合液A；

2)将10mmol的GaIn共晶超声分散于20mL的乙醇、40mL的丙腈与0.1mL的Tween 20的混合液中，得到混合液B；向混合液B中加入120mmol的氨水，得到混合液C；

3)将步骤1)得到的混合液A和步骤2)得到的混合液C均匀的混合在一起，磁力搅拌1h；

4)将步骤3)得到的产物用乙醇洗涤2-3次，再用去离子水洗涤2-3次，得到用于微波动力治疗肿瘤的微球。

本实施例制备的微球的粒径大小为6-10μm。

检验本实施例制得微球的微波动力治疗肿瘤效果，其体外微波实验及治疗试验效果如下：

将微球分散于缓冲溶液中，置于体外微波设备中，微波照射处理，加入染料DCFHDA并放置一段时间后，检测荧光，其产生活性氧含量显著升高。用H22荷瘤小鼠来评估微球抑瘤效果，将微球分散于生理盐水中，经患处局部注射，用微波辐照患处，将小鼠饲养二周后对比不经治疗的荷瘤小鼠，其抑瘤率达80％以上；比不注射微球只微波辐照患处的小鼠抑瘤率高20％以上。结果表明：微球在微波照射下对肿瘤有杀伤作用，微球用于微波动力治疗肿瘤效果显著。

一些实施例

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，步骤同实施例1，其不同之处仅在于，步骤1)和步骤2)加入的甲醇和乙腈用甲醇、乙醇、丙醇、乙腈、丙腈和丁腈的一种或几种代替，结果列于表1中。

表1不同有机溶剂获得的微球

一些实施例

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，步骤同实施例2，其不同之处仅在于，步骤2)加入的GaIn共晶用Ga，In，Sn中的一种或几种代替，结果列于表2中。

表2不同金属获得的微球

一些实施例

用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备，步骤同实施例3，其不同之处仅在于，步骤2)加入的Tween 20用Tween 60，Tween 80，Span60，Span80和Span85中的一种或几种代替，结果列于表3中。

表3不同表面活性剂获得的微球

显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定，对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无法对所有的实施方式予以穷举，凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。

Claims (8)

1.一种用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

将Si源或Zr源和有机溶剂A混合，获得混合液A；

将金属、表面活性剂和有机溶剂B混合，获得混合液B；

将混合液B和氨水混合，获得混合液C；

将混合液A和混合液C混合，搅拌，获得用于微波动力治疗肿瘤的微球；

所述Si源为正硅酸甲酯或正硅酸乙酯；所述Zr源为正丙醇锆或异丙醇锆；所述金属选自Ga，In和Sn中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法，其特征在于，所述搅拌时间为1～8h。

3.根据权利要求1所述的用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂A选自甲醇、乙醇、丙醇、乙腈、丙腈和丁腈的一种或多种；所述有机溶剂B选自甲醇、乙醇、丙醇、乙腈、丙腈和丁腈的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法，其特征在于，所述混合液A的浓度为1～100mmol/L。

5.根据权利要求1所述的用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法，其特征在于，所述金属与所述Si源或所述Zr源的摩尔比为1～10:1；所述有机溶剂A和有机溶剂B的体积比为1:1～10；所述表面活性剂与有机溶剂B的体积比为1:100～5000；所述氨水与所述Si源或所述Zr源的摩尔比为10～50:1；所述混合液A和混合液C的体积比为1:1～10。

6.根据权利要求1所述的用于微波动力治疗肿瘤的微球的制备方法，其特征在于，所述表面活性剂为Tween和/或Span。

7.一种如权利要求1～6任一项所述的制备方法制备得到的用于微波动力治疗肿瘤的微球。

8.一种如权利要求7所述的微球在制备微波动力治疗肿瘤的药物或制剂中的应用。

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