CN109668767B - 一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法 - Google Patents

一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109668767B
CN109668767B CN201910080191.XA CN201910080191A CN109668767B CN 109668767 B CN109668767 B CN 109668767B CN 201910080191 A CN201910080191 A CN 201910080191A CN 109668767 B CN109668767 B CN 109668767B
Authority
CN
China
Prior art keywords
parts
blood coagulation
dewaxing
tissue
dewaxing liquid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201910080191.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN109668767A (zh
Inventor
黄杰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201910080191.XA priority Critical patent/CN109668767B/zh
Publication of CN109668767A publication Critical patent/CN109668767A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109668767B publication Critical patent/CN109668767B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/30Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)
  • Treatments For Attaching Organic Compounds To Fibrous Goods (AREA)

Abstract

本发明提供了一种凝血组织专用脱蜡液,所述凝血组织专用脱蜡液的饱和溶蜡量为1011‑1024mg/ml,溶蜡速率为9.76‑10.22mg/(ml.min),脱蜡后的凝血组织,蜡含量低于0.0012%;包括D‑1‑甲基‑4‑(1‑甲基乙烯基)环己烷85‑120份、四氢呋喃2‑5份、丙酮2‑8份、松节油10‑20份、烷醇7‑12份、助剂15‑35份。本发明还提供了制备方法:绝氧升温、保温和超声。本发明得到的凝血组织专用脱蜡液,能够大大提高蜡的脱出率,降低蜡含量;得到的脱蜡组织,无裂痕、无破裂、无变形;得到的脱蜡凝血组织,组织细胞中脂质类分子损失率低于9.80%,能够保持凝血组织的结构完整性和避免生物分子信息丢失。

Description

一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法
技术领域
本发明属于溶解液技术领域,涉及一种凝血组织专用脱蜡液,具体涉及一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法。
背景技术
石蜡切片( paraffin section )技术的应用已经有300多年的历史,是病理学和法医学等学科用以观察、研究及判断细胞组织的形态变化的主要方法,已相当广泛地用于基础生物学等多学科领域的研究中。
目前最常用的石蜡切片的脱蜡液主要是二甲苯,二甲苯在病理科手工制片、自动脱水机及自动染色机上均大量使用。虽然二甲苯具有良好的脱蜡和透明效果,但是由于二甲苯属于具有强烈刺激性气味的神经毒素,对长期接触的人员生理系统具有特殊伤害,产生靶器官效应,可出现眼及上呼吸道明显的刺激症状、眼结膜及咽充血、头晕、恶心、呕吐、胸闷、四肢无力、意识模糊等症状,此外,还可引起免疫功能低下、贫血、皮炎、湿疹和皮肤干燥等症状,对病理工作人员的身体健康产生严重危害和造成环境污染。
公开号为CN104655460A的专利,提供了一种病理组织透明脱蜡液及其制备方法,包括高度支链饱和烷烃92.5-98重量份、稳定剂0.5-5重量份和增效剂0.1-2.5重量份;所述高度支链饱和烷烃为环烷油、四环庚烷、顺-1-异丙基-4-甲基环己烷、反-1-异丙基-4-甲基环己烷中的一种或几种的混合物;解决了现有技术中病理组织透明脱蜡液有毒及有刺激性气味,长时间浸泡组织会使组织变脆和收缩不利切片的技术问题。
专利号为US7070951的美国专利,提供了一种采用醇类与柠檬烯的混合物,辅以表面活性剂的脱蜡液。醇类本身脱蜡效果很差,会造成组织过度脱水,使标本发收缩、硬化、脆裂。
公开号为ZL00122030.6的中国专利,提供了一种组织石蜡切片脱蜡、透明剂,它以化学纯液体石蜡、分析纯石油醚、航空煤油为原料配制而成。采用的是航空煤油和石油醚(航空煤油和石油醚都是短链烷烃的混合物)。短链烷烃的缺点是气味强烈,沸点低,在环境中迅速弥散,使用者难于接受。航空煤油含有不会挥发的多种添加剂,如四乙基铅,碱性酚,二壬基萘磺酸等,这些添加剂对组织的影响尚待认识。
发明内容
本发明为解决以上技术问题,提供了一种凝血组织专用脱蜡液,实现了以下目的:
(1)本发明凝血组织专用脱蜡液,饱和溶蜡量高,溶蜡速率快;
(2)本发明凝血组织专用脱蜡液,能够大大提高蜡的脱出率,降低蜡含量;
(3)采用本发明凝血组织专用脱蜡液,得到的脱蜡组织,切片无裂痕、无破裂、无变形;
(4)采用本发明凝血组织专用脱蜡液,得到的脱蜡凝血组织,组织细胞中脂质类分子损失率低,能够保持凝血组织的结构完整性和避免生物分子信息丢失。
为解决上述技术问题,采用以下技术方案:
一种凝血组织专用脱蜡液,饱和溶蜡量为1011-1024mg/ml,溶蜡速率为9.76-10.22mg/(ml.min)。
以下是对本发明的技术方案的进一步优化:
采用所述凝血组织专用脱蜡液得到的脱蜡凝血组织,蜡含量低于0.0012%。
所述的一种凝血组织专用脱蜡液,包括以下成分:D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷、四氢呋喃、丙酮、松节油、烷醇、助剂。
所述的一种凝血组织专用脱蜡液,按照重量份,包括以下成分:D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷85-120份、四氢呋喃2-5份、丙酮2-8份、松节油10-20份、烷醇7-12份、助剂15-35份。
所述的一种凝血组织专用脱蜡液,所述烷醇,为十二烷醇、十五烷醇、三十烷醇中的一种或任几种的组合,优选为十二烷醇、十五烷醇、三十烷醇质量比为15:6:1的混合物。
所述的一种凝血组织专用脱蜡液,所述助剂,包括:杂多糖树胶、促溶剂、蜂蜡和甘油,质量比为5:1:1:8。
本发明还提供了一种凝血组织专用脱蜡液的制备方法, 所述一种凝血组织专用脱蜡液的制备方法,包括绝氧升温、保温和超声。
所述绝氧升温,将D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷、丙酮、烷醇混合,在氮气气流下,在水浴温度为35℃下保温20min,接着升温至55℃,升温速率为3℃/min,保温放置5min后,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理7s,氮气流速为5L/min。
所述保温,加入松节油、助剂,保持水浴温度为55℃下,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理10s。
所述超声,加入四氢呋喃,将水浴温度降温至25℃,降温速率为5℃/min,超声30s,得到脱蜡液。
本发明还提供了一种凝血组织专用脱蜡液的脱蜡方法,包括:
将待脱蜡的凝血组织加入足量脱蜡液中,使其完全覆盖凝血组织,并置于85-92℃水浴锅水浴半小时,然后向脱蜡液中吹入氧气,吹氧时间为16分钟,吹氧速率为1.5-2.5米/秒,氧气浓度为85%,室温静置半小时,8000转/分离心5分钟,弃上清液,然后加入95%的乙醇,混匀,再次离心,离心速度3000转/分,离心3分钟,弃上清液,得到脱蜡组织;得到的脱蜡组织,蜡含量<0.0012%,切片无裂痕、无破裂、无变形。
本发明采用以上技术方案,与现有技术相比,具有以下优点:
(1)本发明凝血组织专用脱蜡液,饱和溶蜡量为1011-1024mg/ml,溶蜡速率为9.76-10.22mg/(ml.min);
(2)本发明凝血组织专用脱蜡液,能够大大提高蜡的脱出率,降低蜡含量,蜡含量为0.0008-0.0010%;
(3)采用本发明凝血组织专用脱蜡液,得到的脱蜡组织,切片无裂痕、无破裂、无变形;
(4)采用本发明凝血组织专用脱蜡液,得到的脱蜡凝血组织,组织细胞中脂质类分子损失率低于9.80%,能够保持凝血组织的结构完整性和避免生物分子信息丢失。
具体实施方式
实施例1 一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法
本发明的一种凝血组织专用脱蜡液,包括以下成分:D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷、四氢呋喃、丙酮、松节油、烷醇、助剂;
按照重量份,D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷85-120份、四氢呋喃2-5份、丙酮2-8份、松节油10-20份、烷醇7-12份、助剂15-35份;
优选地,本实施例中的凝血组织专用脱蜡液,按照重量份,D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷85份、四氢呋喃5份、丙酮2份、松节油20份、烷醇7份、助剂35份。
所述烷醇,为十二烷醇、十五烷醇、三十烷醇中的一种或任几种的组合,优选为十二烷醇、十五烷醇、三十烷醇质量比为15:6:1的混合物;
所述助剂,包括:杂多糖树胶、促溶剂、蜂蜡和甘油,质量比为5:1:1:8;
所述促溶剂,为十二烷基苯磺酸钠。
所述一种凝血组织专用脱蜡液的制备方法如下:
(1)称取以上重量份的原料;
(2)绝氧升温:将D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷、丙酮、烷醇混合,在氮气气流下,在水浴温度为35℃下保温20min,接着升温至55℃,升温速率为3℃/min,保温放置5min后,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理7s,氮气流速为5L/min;
(3)保温:加入松节油、助剂,保持水浴温度为55℃下,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理10s;
(4)超声:加入四氢呋喃,将水浴温度降温至25℃,降温速率为5℃/min,超声30s,得到脱蜡液。
实施例2 一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法
本发明的一种凝血组织专用脱蜡液,包括以下成分:D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷、四氢呋喃、丙酮、松节油、烷醇、助剂;
按照重量份,D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷85-120份、四氢呋喃2-5份、丙酮2-8份、松节油10-20份、烷醇7-12份、助剂15-35份;
优选地,本实施例中的凝血组织专用脱蜡液,按照重量份,D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷85份、四氢呋喃3份、丙酮6份、松节油12份、烷醇10份、助剂20份。
所述烷醇,为十二烷醇、十五烷醇、三十烷醇中的一种或任几种的组合,优选为十二烷醇、十五烷醇、三十烷醇质量比为15:6:1的混合物;
所述助剂,包括:杂多糖树胶、促溶剂、蜂蜡和甘油,质量比为5:1:1:8;
所述促溶剂,为十二烷基苯磺酸钠。
所述一种凝血组织专用脱蜡液的制备方法如下:
(1)称取以上重量份的原料;
(2)绝氧升温:将D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷、丙酮、烷醇混合,在氮气气流下,在水浴温度为35℃下保温20min,接着升温至55℃,升温速率为3℃/min,保温放置5min后,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理7s,氮气流速为5L/min;
(3)保温:加入松节油、助剂,保持水浴温度为55℃下,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理10s;
(4)超声:加入四氢呋喃,将水浴温度降温至25℃,降温速率为5℃/min,超声30s,得到脱蜡液。
本发明的凝血组织专用脱蜡液的脱蜡方法:
将待脱蜡的凝血组织加入足量脱蜡液中,使其完全覆盖凝血组织,并置于85-92℃水浴锅水浴半小时,然后向脱蜡液中吹入氧气,吹氧时间为16分钟,吹氧速率为1.5-2.5米/秒,氧气浓度为85%,室温静置半小时,8000转/分离心5分钟,弃上清液,然后加入95%的乙醇,混匀,再次离心,离心速度3000转/分,离心3分钟,弃上清液,得到脱蜡组织。
实施例3一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法
本发明的一种凝血组织专用脱蜡液,包括以下成分:D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷、四氢呋喃、丙酮、松节油、烷醇、助剂;
按照重量份,D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷120份、四氢呋喃2份、丙酮8份、松节油10-20份、烷醇12份、助剂15份;
所述烷醇,为十二烷醇、十五烷醇、三十烷醇中的一种或任几种的组合,优选为十二烷醇、十五烷醇、三十烷醇质量比为15:6:1的混合物;
所述助剂,包括:杂多糖树胶、促溶剂、蜂蜡和甘油,质量比为5:1:1:8;
所述促溶剂,为十二烷基苯磺酸钠。
所述一种凝血组织专用脱蜡液的制备方法如下:
(1)称取以上重量份的原料;
(2)绝氧升温:将D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷、丙酮、烷醇混合,在氮气气流下,在水浴温度为35℃下保温20min,接着升温至55℃,升温速率为3℃/min,保温放置5min后,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理7s,氮气流速为5L/min;
(3)保温:加入松节油、助剂,保持水浴温度为55℃下,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理10s;
(4)超声:加入四氢呋喃,将水浴温度降温至25℃,降温速率为5℃/min,超声30s,得到脱蜡液。
本发明得到的脱蜡组织,蜡含量<0.0012%,切片无裂痕、无破裂、无变形。
本发明的实施例1-3的凝血组织专用脱蜡液的技术效果如下表所示:
Figure DEST_PATH_IMAGE002
由上表可知:
(1)本发明凝血组织专用脱蜡液,饱和溶蜡量为1011-1024mg/ml,溶蜡速率为9.76-10.22mg/(ml.min);
(2)本发明凝血组织专用脱蜡液,能够大大提高蜡的脱出率,降低蜡含量,蜡含量为0.0010%;
(3)采用本发明凝血组织专用脱蜡液,得到的脱蜡组织,切片无裂痕、无破裂、无变形;
(4)采用本发明凝血组织专用脱蜡液,得到的脱蜡凝血组织,组织细胞中脂质类分子损失率低于6.27-19.80%,能够保持凝血组织的结构完整性和避免生物分子信息丢失。
除非另有说明,本发明所采用的百分数均为重量百分数,本发明所述的比例,均为质量比例。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种凝血组织专用脱蜡液,其特征在于,
所述凝血组织专用脱蜡液,按照重量份,包括以下成分:D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷85-120份、四氢呋喃2-5份、丙酮2-8份、松节油10-20份、烷醇7-12份、助剂15-35份;
所述烷醇为十二烷醇、十五烷醇、三十烷醇质量比为15:6:1的混合物;
所述助剂,包括:杂多糖树胶、促溶剂、蜂蜡和甘油,质量比为5:1:1:8;
采用所述凝血组织专用脱蜡液脱蜡,饱和溶蜡量为1011-1024mg/ml,溶蜡速率为9.76-10.22mg/(ml.min);得到的脱蜡凝血组织,蜡含量低于0.0012%。
2.根据权利要求1所述的一种凝血组织专用脱蜡液,其特征在于,
所述凝血组织专用脱蜡液的制备方法,包括绝氧升温、保温和超声;
所述绝氧升温,将D-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烷、丙酮、烷醇混合,在氮气气流下,在水浴温度为35℃下保温20min,接着升温至55℃,升温速率为3℃/min,保温放置5min后,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理7s,氮气流速为5L/min;
所述保温,加入松节油、助剂,保持水浴温度为55℃下,采用频率为15Hz、电场强度为1.5kV/cm的脉冲电场处理10s;
所述超声,加入四氢呋喃,将水浴温度降温至25℃,降温速率为5℃/min,超声30s,得到脱蜡液。
CN201910080191.XA 2019-01-28 2019-01-28 一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法 Expired - Fee Related CN109668767B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910080191.XA CN109668767B (zh) 2019-01-28 2019-01-28 一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910080191.XA CN109668767B (zh) 2019-01-28 2019-01-28 一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109668767A CN109668767A (zh) 2019-04-23
CN109668767B true CN109668767B (zh) 2021-07-20

Family

ID=66150840

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910080191.XA Expired - Fee Related CN109668767B (zh) 2019-01-28 2019-01-28 一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109668767B (zh)

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7070951B2 (en) * 1994-03-11 2006-07-04 Biogenex Laboratories Dewaxing kit for immunostaining tissue specimens
CN1865407A (zh) * 2005-05-16 2006-11-22 中国石油化工股份有限公司 一种改进的溶剂脱蜡方法
CN102279121A (zh) * 2011-06-28 2011-12-14 黑龙江八一农垦大学 动物组织石蜡切片的绿色环保制作技术
CN104155160A (zh) * 2014-08-12 2014-11-19 陆可望 一种不含苯的组织脱蜡透明剂
CN104334717A (zh) * 2012-01-23 2015-02-04 理查艾伦科学公司 含水溶性有机溶剂的脱蜡缓冲液及其使用方法
CN106053187A (zh) * 2016-05-20 2016-10-26 北京九州柏林生物科技有限公司 生物组织样本切片染色套液
CN108387420A (zh) * 2018-02-09 2018-08-10 李西启 一种不含二甲苯的新型环保脱蜡透明剂

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7070951B2 (en) * 1994-03-11 2006-07-04 Biogenex Laboratories Dewaxing kit for immunostaining tissue specimens
CN1865407A (zh) * 2005-05-16 2006-11-22 中国石油化工股份有限公司 一种改进的溶剂脱蜡方法
CN102279121A (zh) * 2011-06-28 2011-12-14 黑龙江八一农垦大学 动物组织石蜡切片的绿色环保制作技术
CN104334717A (zh) * 2012-01-23 2015-02-04 理查艾伦科学公司 含水溶性有机溶剂的脱蜡缓冲液及其使用方法
CN104155160A (zh) * 2014-08-12 2014-11-19 陆可望 一种不含苯的组织脱蜡透明剂
CN106053187A (zh) * 2016-05-20 2016-10-26 北京九州柏林生物科技有限公司 生物组织样本切片染色套液
CN108387420A (zh) * 2018-02-09 2018-08-10 李西启 一种不含二甲苯的新型环保脱蜡透明剂

Also Published As

Publication number Publication date
CN109668767A (zh) 2019-04-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106267309B (zh) 一种藻酸盐复合抗菌敷料及其制备方法
CN107843470B (zh) 一种皮肤组织切片的制作方法
CN102279121A (zh) 动物组织石蜡切片的绿色环保制作技术
CN102920612A (zh) 一种广谱抗菌化妆品防腐剂及其应用
CN103110549B (zh) 一种含羟基酪醇的橄榄叶提取物微乳的制备方法
CN111658590A (zh) 一种祛痘组合物及其应用
CN109668767B (zh) 一种凝血组织专用脱蜡液及其制备方法
Gris et al. Conjunctival resection with and without amniotic membrane graft for the treatment of superior limbic keratoconjunctivitis
CN109944077A (zh) 一种具有杀菌除防臭的生产工艺
CN102813607A (zh) 一种水包油型岩藻聚糖硫酸酯护肤膏及其制备方法
CN108079074A (zh) 复方盐酸特比萘芬乳膏及其制备方法
CN110618010A (zh) 一种骨组织石蜡切片制作方法
CN104055706A (zh) 去红血丝化妆品组合物及其制备方法
CN107049832A (zh) 一种复合精油保湿乳液及其制作方法
CN109122672A (zh) 一种油茶良种穗条保温保鲜的储藏方法
CN113476361B (zh) 一种桃胶和丝胶蛋白的混合提取液及其制备方法与应用
CN109280226A (zh) 一种高粘弹性保水可食用橡皮泥的制备方法
CN116358950A (zh) 一种病理切片的快速脱水透明方法
CN102854043B (zh) 医用制片溶剂
CN108559670B (zh) 一种复合男性私处保健皂及其制备方法
Samisch The location of oxidase in the apricot
CN112237600A (zh) 复方藤椒凝胶在制备预防和/或治疗冻疮、烫伤的产品中的用途
CN112107633A (zh) 一种复方藤椒凝胶及其制备方法
KR20200109068A (ko) 겨우살이 발효물을 포함하는 비누 및 그 제조방법
ES2711139T3 (es) Composición fijadora para muestras de material biológico

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20210720

Termination date: 20220128

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee