CN109663582B - 一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法 - Google Patents

一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及水污染处理技术领域,为解决现有自来水中重金属吸附去除的效果不理想的问题,本发明提供了一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法。所述方法包括以下步骤:1)培育菌株:将所选考克氏菌接种于微生物培养液中形成菌液,对菌液所选菌株进行培育;2)提取絮凝剂:对培育好的菌液进行浓缩,进行透析和离心分离后提取得到微生物絮凝剂;3)制备吸附剂:将微生物絮凝剂溶于琼脂和淀粉的混合水溶液中,凝固后制得有害重金属吸附剂。本发明方法整体步骤简洁,制备效率和产率均较高;所制得的吸附剂具有安全无害的优点,可直接添加到饮用水中,实现对有害重金属成分的吸附去除,并且对有害重金属成分吸附效率高、吸附效果好。

Description

一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法
技术领域
本发明涉及水污染处理技术领域,尤其涉及一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法。
背景技术
人们在生产生活中使用的水大多为自来水,主要是通过自来水厂将从地下水或河水等水源抽取的水进行处理获得。由于部分水源受到工业或生活污水排放影响而导致重金属含量超标,虽然在供人畜饮用前经过自来水厂的处理,但是部分重金属的含量依然处于较高的指标,部分甚至超标;另外城市自来水输水管路老旧也会导致重金属如铅等渗入水体中造成重金属含量超标。
如新加坡联合早报网2016年3月17日报道,美国有600万人的自来水受到重金属铅污染。法新社引述《今日美国》的报道称,美国有2000个自来水系统受到铅污染,水中的含铅量比联邦条例许可的含量高。报道也说,美国全部50个州都出现含铅量高于联邦条例许可的情况。
又如2016年3月,江苏省质监局发布电水壶等小家电产品的抽检报告:部分样品使用的钢材是高锰钢,使用时很容易析出重金属,长期使用会让人记忆力衰退、精神萎靡,而其中55.6%的电水壶都存在这样的问题,锰含量在10%左右。
另外,城市供水系统普遍采用的二次供水高位水箱,常常出现管理不善导致清洗不及时而出现的自来水污染,也使得居民饮用水中重金属离子超标的风险大增。
居民生活饮用水重金属超标的情况原因很多,除上述外,由于工业污染加重导致饮用水水源地受污染,自来水厂难以全部或勉强可以实现水质重金属指标达标,大多数居民难以喝到优质水,甚至简单的煮沸都可能导致处于达标临界点的合格水变成不合格水。
而目前市场上虽然出售具有重金属脱除功能的净水器,净水器主要靠内部的滤芯对金属离子进行吸附脱除,长期使用后滤芯的吸附能力达到饱和,脱除重金属离子的能力下降,而部分重金属离子还有可能从滤芯上脱附重新进入水体被人引饮用,带来健康风险,而普通市民缺少净水器的维护保养知识和意识,不能对滤芯进行及时科学的更换。除以上原因外不排除其它潜在原因都会导致饮用水存在饮用健康隐患,因此需要对饮用水进行饮用前的重金属终端脱除。
生物吸附法是新兴的水处理方法,具有成本低、可处理低浓度重金属水体、适用的pH值与温度范围宽等优点。生物吸附法包括微生物体吸附法,微生物体吸附主要是利用细胞壁表面具有的络合、配位基团与金属离子形成离子键达到吸附目的,但是微生物体在水中生存条件要求较为严苛限制了微生物体吸附的应用。而微生物体分泌物主要是微生物体分泌的细菌胞外多糖、荚膜多糖等。胞外多糖具有较大的比表面积、丰富的表面羧基、氨基等和强负电性,对重金属具有较强的吸附能力。目前的多数研究肯定了胞外多糖在微生物体吸附过程中的吸附作用,但是专门将胞外多糖分离进行吸附重金属的研究还较少,尤其是用于饮用水饮用前的重金属处理,而且从部分微生物体上分离胞外多糖制备的吸附剂的吸附效率低,吸附剂性能不稳定。
发明内容
为解决现有自来水中有害重金属吸附去除的效果不理想的问题,本发明提供了一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法。其旨在实现所制得的吸附剂能够有效吸附去除饮用水中对人体有害的重金属成分,如铅和锰等有害重金属,并且保持长期的高效性同时确保对人体安全无毒的目的。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法,所述方法包括以下步骤:
1)培育菌株:将所选考克氏菌接种于微生物培养液中形成菌液,对菌液所选菌株进行培育;
2)提取絮凝剂:对培育好的菌液进行浓缩,进行透析和离心分离后提取得到微生物絮凝剂;
3)制备吸附剂:将微生物絮凝剂溶于琼脂和淀粉的混合水溶液中,凝固后制得有害重金属吸附剂。
对接种后的所选考克氏菌菌种进行扩大培育,培育后浓缩利于后续透析和离心分离步骤的进行,能够加快后续透析和离心分离的进度并提高微生物絮凝剂的浓度,经过透析和离心分离能够有效去除菌株和其余杂质成分,使其仅余有效成分微生物絮凝剂,再在琼脂和淀粉的混合水溶液中共同凝固即可方便地制得有害重金属吸附剂。整体工艺较为简洁,能够有效且高效率地制备得有害重金属吸附剂,并且所制得有害重金属吸附剂中有效成分含量可控,纯度较高杂质较少。
本发明所采用的海洋考克氏菌菌株Kocuria sp.GHF12是从菲律宾蛤仔黏附淤泥中分离获得,经实验发现该海洋考克氏菌菌株Kocuria sp.GHF12的代谢产物为具有较高絮凝活性的胞外多糖。
上述海洋考克氏菌菌株Kocuria sp.GHF12已于2018年10月12日向中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心提交保藏,保藏地址:中国,北京,中国科学院微生物研究所,保藏编号CGMCC No.16579,建议类命名为Kocuria sp.;上述海洋考克氏菌菌株Kocuria sp.GHF12的16S rDNA全序列(1267bp)已向美国国家生物技术信息中心(NCBI)的GenBank基因序列数据库提交,登录号为KX702258,其全序列如下:
acgtgagtaa cctgcccttg actctgggat aagcccggga aactgggtct aatactggat
gctacatgtc accgcatggt ggtgtgtgga aagggtttac tggtcttgga tgggctcacg
gcctatcagc ttgttggtga ggtaatggct caccaaggcg acgacgggta gccggcctga
gagggtgacc ggccacactg ggactgagac acggcccaga ctcctacggg aggcagcagt
ggggaatatt gcacaatggg cgaaagcctg atgcagcgac gccgcgtgag ggatgacggc
cttcgggttg taaacctctt tcagcaggga agaagccaca agtgacggta cctgcagaag
aagcgccggc taactacgtg ccagcagccg cggtaatacg tagggcgcaa gcgttgtccg
gaattattgg gcgtaaagag ctcgtaggcg gtttgtcgcg tctgctgtga aagcccgggg
cttaaccccg ggtgtgcagt gggtacgggc agactagagt gcagtagggg agactggaat
tcctggtgta gcggtggaat gcgcagatat caggaggaac accgatggcg aaggcaggtc
tctgggctgt tactgacgct gaggagcgaa agcatgggga gcgaacagga ttagataccc
tggtagtcca tgccgtaaac gttgggcact aggtgtgggg gacattccac gttttccgcg
ccgtagctaa cgcattaagt gccccgcctg gggagtacgg ccgcaaggct aaaactcaaa
ggaattgacg ggggcccgca caagcggcgg agcatgcgga ttaattcgat gcaacgcgaa
gaaccttacc aaggcttgac atataccgga tcgttccaga gatggttctt cccctttggg
gtcggtatac aggtggtgca tggttgtcgt cagctcgtgt cgtgagatgt tgggttaagt
cccgcaacga gcgcaaccct cgttccatgt tgccagcacg tgatggtggg gactcatggg
agactgccgg ggtcaactcg gaggaaggtg gggatgacgt caaatcatca tgccccttat
gtcttgggct tcacgcatgc tacaatggcc ggtacaaagg gttgcgatac tgtgaggtgg
agctaatccc aaaaagccgg tctcagttcg gattgaggtc tgcaactcga cctcatgaag
tcggagtcgc tagtaatcgc agatcagcaa cgctgcggtg aatacgttcc cgggccttgt
acacacc。
作为优选,步骤1)所述微生物培养液中含有以下重量百分比的物质:马铃薯汁5~8%、蛤肉汤1~3%、磷酸氢二钾0.06~0.18%和葡萄糖2~3%,余量为陈化海水。
该微生物培养液中的营养成分能够满足菌种扩大培育的需求,并且能够提高胞外多糖,即所需的有效成分微生物絮凝剂的产量。
作为优选,步骤1)所述培育条件为:在25~30℃环境中,置于150~200r/min的摇床上培育3~5d。
菌种在扩大培育过程中经充分振荡能够使得其扩大培育效果更优,菌种生长分布更加均匀、更加分散且有利于提高其与微生物培养液的平均接触面积,进而实现提高微生物絮凝剂产量的目的。
作为优选,步骤2)所述浓缩过程将菌液浓缩至原体积的9~12%。
浓缩过程采用旋蒸的方式对菌液进行浓缩,将菌液浓缩后可使得菌液中有效成分微生物絮凝剂浓度提高,进而可简化后续透析和离心分离的步骤,提高透析和离心分离的效率。
作为优选,步骤2)所述透析过程为:将浓缩后的菌液装入透析袋中,透析36~60h。
透析袋优选为2000~5000道尔顿透析袋,透析过程将菌株和菌液中盐分、葡萄糖等小分子物质分离,将菌株及菌株外包覆的胞外多糖截留于透析袋中,即实现减少杂质的目的,提高了微生物絮凝剂的清洁程度。
作为优选,步骤2)所述离心分离的过程为:将透析后的截留物利用离心机去除沉淀,留下上清液,随后向上清液中加入无水乙醇,低温静置沉淀18~30h后再利用离心机将沉淀分离,提取得到微生物絮凝剂。
无水乙醇优选为预冷至4~6℃的无水乙醇,低温静置沉淀在4~6℃环境下进行,其能够保持微生物絮凝剂的活性,并且能够进一步沉降以提高所制得微生物絮凝剂的纯度。
作为优选,步骤3)所述琼脂和淀粉的混合水溶液中,所用琼脂、淀粉和水的质量比为(2~6):(2~6):100。
琼脂和淀粉不会对微生物絮凝剂的吸附有害重金属能力造成影响,能够保持其特性。
作为优选,所述步骤3)制备吸附剂的具体步骤为:将琼脂和淀粉加入至水中,搅拌的同时进行加热至琼脂完全溶解,随后冷却至45~60℃时将微生物絮凝剂加入至琼脂和淀粉的混合水溶液中,混合均匀后静置冷却,凝固后即得到吸附剂。
利用琼脂和淀粉对微生物絮凝剂进行均匀分散和凝固固定后,微生物絮凝剂的性能更加稳定,使得整体吸附剂对有害重金属成分的吸附性更加稳定且具备更高的吸附率。
作为优选,凝固后得到的吸附剂可进一步置于85~95℃条件下烘至干燥,即可得到干燥的吸附剂。
干燥后的吸附剂更有利于保存和运输。
本发明的有益效果是:
1)本发明方法整体步骤简洁,制备效率和产率均较高;
2)所制得的吸附剂具有安全无害的优点;
3)所制得的吸附剂可直接添加到饮用水中,实现对有害重金属成分的吸附去除;
4)具有对有害重金属成分吸附效率高和吸附效果好的优点。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作出进一步清楚详细的描述说明。本领域普通技术人员在基于这些说明的情况下将能够实现本发明。此外,下述说明中涉及到的本发明的实施例通常仅是本发明一分部的实施例,而不是全部的实施例。因此,基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本发明保护的范围。
如无特殊说明,本发明实施例中所用原料均为可从市场购得购得或本领域常用原料;如无特殊说明,本发明实施例中所用方法均为本领域的常规方法。
本发明所采用的海洋考克氏菌菌株Kocuria sp.GHF12是从菲律宾蛤仔黏附淤泥中分离获得,经实验发现该海洋考克氏菌菌株Kocuria sp.GHF12的代谢产物为具有较高絮凝活性的胞外多糖。海洋考克氏菌菌株Kocuria sp.GHF12的16S rDNA全序列(1267bp)已向美国国家生物技术信息中心(NCBI)的GenBank基因序列数据库提交,登录号为KX702258。
实施例1
一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法,所述方法包括以下步骤:
1)培育菌株:配制2.7L的微生物培养液,微生物培养液中含有以下重量百分比的物质:马铃薯汁5、蛤肉汤1%、磷酸氢二钾0.06%和葡萄糖2%,余量为陈化海水;将所选考克氏菌接种于微生物培养液中形成菌液,对菌液所选菌株进行培育,所述培育条件为:在30℃环境中,置于150r/min的摇床上培育3d;
2)提取絮凝剂:对培育好的菌液进行浓缩,浓缩过程将菌液浓缩至原体积的12%,将浓缩后的菌液装入2000道尔顿透析袋中,透析60h,随后将透析后的截留物利用离心机以6000r/min的转速去除沉淀,留下上清液,随后向上清液中加入其2倍体积且预冷至6℃的无水乙醇,在6℃条件下静置30h后再利用离心机再以6000r/min的转速将沉淀分离,提取得到微生物絮凝剂;
3)制备吸附剂:将6g的琼脂和2g的淀粉加入至100mL的纯水中,搅拌的同时进行加热至琼脂完全溶解,随后冷却至45℃时将微生物絮凝剂加入至琼脂和淀粉的混合水溶液中,混合均匀后静置冷却,凝固后即得到吸附剂。
实施例2
一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法,所述方法包括以下步骤:
1)培育菌株:配制3.0L的微生物培养液,微生物培养液中含有以下重量百分比的物质:马铃薯汁8%、蛤肉汤3%、磷酸氢二钾0.18%和葡萄糖3%,余量为陈化海水;将所选考克氏菌接种于微生物培养液中形成菌液,对菌液所选菌株进行培育,所述培育条件为:在25℃环境中,置于200r/min的摇床上培育5d;
2)提取絮凝剂:对培育好的菌液进行浓缩,浓缩过程将菌液浓缩至原体积的9%,将浓缩后的菌液装入5000道尔顿透析袋中,透析36h,随后将透析后的截留物利用离心机以6000r/min的转速去除沉淀,留下上清液,随后向上清液中加入其2倍体积且预冷至4℃的无水乙醇,在4℃条件下静置沉淀18h后再利用离心机再以6000r/min的转速将沉淀分离,提取得到微生物絮凝剂;
3)制备吸附剂:将2g的琼脂和6g的淀粉加入至100mL的纯水中,搅拌的同时进行加热至琼脂完全溶解,随后冷却至60℃时将微生物絮凝剂加入至琼脂和淀粉的混合水溶液中,混合均匀后静置冷却,凝固后即得到吸附剂。
实施例3
一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法,所述方法包括以下步骤:
1)培育菌株:配制2.7L的微生物培养液,微生物培养液中含有以下重量百分比的物质:马铃薯汁6.5%、蛤肉汤1.5%、磷酸氢二钾0.12%和葡萄糖2.25%,余量为陈化海水;将所选考克氏菌接种于微生物培养液中形成菌液,对菌液所选菌株进行培育,所述培育条件为:在27℃环境中,置于180r/min的摇床上培育4d;
2)提取絮凝剂:对培育好的菌液进行浓缩,浓缩过程将菌液浓缩至300mL,将浓缩后的菌液装入2000道尔顿透析袋中,透析48h,随后将透析后的截留物利用离心机以6000r/min的转速去除沉淀,留下上清液,随后向上清液中加入其2倍体积且预冷至4℃的无水乙醇,在4℃条件下静置沉淀24h后再利用离心机再以6000r/min的转速将沉淀分离,提取得到微生物絮凝剂;
3)制备吸附剂:将4g的琼脂和4g的淀粉加入至100mL的纯水中,搅拌的同时进行加热至琼脂完全溶解,随后冷却至50℃时将微生物絮凝剂加入至琼脂和淀粉的混合水溶液中,混合均匀后静置冷却,凝固后即得到吸附剂。
实施例4
一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法,所述方法包括以下步骤:
1)培育菌株:配制2.7L的微生物培养液,微生物培养液中含有以下重量百分比的物质:马铃薯汁6.5%、蛤肉汤1.5%、磷酸氢二钾0.12%和葡萄糖2.25%,余量为陈化海水;将所选考克氏菌接种于微生物培养液中形成菌液,对菌液所选菌株进行培育,所述培育条件为:在27℃环境中,置于180r/min的摇床上培育4d;
2)提取絮凝剂:对培育好的菌液进行浓缩,浓缩过程将菌液浓缩至300mL,将浓缩后的菌液装入2000道尔顿透析袋中,透析48h,随后将透析后的截留物利用离心机以6000r/min的转速去除沉淀,留下上清液,随后向上清液中加入其2倍体积且预冷至4℃的无水乙醇,在4℃条件下静置沉淀24h后再利用离心机再以6000r/min的转速将沉淀分离,提取得到微生物絮凝剂;
3)制备吸附剂:将2g的琼脂和4g的淀粉加入至100mL的纯水中,搅拌的同时进行加热至琼脂完全溶解,随后冷却至50℃时将微生物絮凝剂加入至琼脂和淀粉的混合水溶液中,混合均匀后静置冷却,凝固后即得到吸附剂,进一步置于95℃条件下烘至干燥,即可得到干燥的吸附剂。
实施例5
一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法,所述方法包括以下步骤:
1)培育菌株:配制2.7L的微生物培养液,微生物培养液中含有以下重量百分比的物质:马铃薯汁6.5%、蛤肉汤1.5%、磷酸氢二钾0.12%和葡萄糖2.25%,余量为陈化海水;将所选考克氏菌接种于微生物培养液中形成菌液,对菌液所选菌株进行培育,所述培育条件为:在27℃环境中,置于180r/min的摇床上培育4d;
2)提取絮凝剂:对培育好的菌液进行浓缩,浓缩过程将菌液浓缩至300mL,将浓缩后的菌液装入5000道尔顿透析袋中,透析48h,随后将透析后的截留物利用离心机以6000r/min的转速去除沉淀,留下上清液,随后向上清液中加入其2倍体积且预冷至4℃的无水乙醇,在4℃条件下静置沉淀24h后再利用离心机再以6000r/min的转速将沉淀分离,提取得到微生物絮凝剂;
3)制备吸附剂:将4g的琼脂和2g的淀粉加入至100mL的纯水中,搅拌的同时进行加热至琼脂完全溶解,随后冷却至50℃时将微生物絮凝剂加入至琼脂和淀粉的混合水溶液中,混合均匀后静置冷却,凝固后即得到吸附剂,进一步置于85℃条件下烘至干燥,即可得到干燥的吸附剂。
实施例6
一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法,所述方法包括以下步骤:
1)培育菌株:配制2.7L的微生物培养液,微生物培养液中含有以下重量百分比的物质:马铃薯汁6.5%、蛤肉汤1.5%、磷酸氢二钾0.12%和葡萄糖2.25%,余量为陈化海水;将所选考克氏菌接种于微生物培养液中形成菌液,对菌液所选菌株进行培育,所述培育条件为:在27℃环境中,置于180r/min的摇床上培育4d;
2)提取絮凝剂:对培育好的菌液进行浓缩,浓缩过程将菌液浓缩至300mL,将浓缩后的菌液装入2000道尔顿透析袋中,透析48h,随后将透析后的截留物利用离心机以6000r/min的转速去除沉淀,留下上清液,随后向上清液中加入其2倍体积且预冷至4℃的无水乙醇,在4℃条件下静置沉淀24h后再利用离心机再以6000r/min的转速将沉淀分离,提取得到微生物絮凝剂;
3)制备吸附剂:将4g的琼脂和6g的淀粉加入至100mL的纯水中,搅拌的同时进行加热至琼脂完全溶解,随后冷却至50℃时将微生物絮凝剂加入至琼脂和淀粉的混合水溶液中,混合均匀后静置冷却,凝固后即得到吸附剂,进一步置于90℃条件下烘至干燥,即可得到干燥的吸附剂。
利用实施例1~6所制得的吸附剂对待测液进行吸附检测,待测液为纯水配制的有害重金属盐溶液,其分别为含二价锰离子的锰液、含六价铬离子的铬液、含二价镉离子的镉液、含二价铜离子的铜液、含二价铅离子的铅液和含一价或二价汞离子的汞液,其浓度依次为0.5mg/L、0.25mg/L、0.025mg/L、2.0mg/L、0.05mg/L和0.01mg/L。每种待测液分组后各取六份、每份50mL,每组每份中各加入实施例1~6所制得的吸附剂10g,摇晃十分钟后检测铬待测液中所含重金属离子的浓度,计算吸附率。其结果如下表表1所示。
表1实施例1~6对有害重金属离子的吸附检测结果
Figure GDA0001977136210000081
序列表
<110> 浙江海洋大学
<120> 一种利用考克氏菌活性多糖制备有害重金属吸附剂的方法
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1267
<212> DNA
<213> 考克氏菌(Kocuria sp. strain GHF12)
<400> 1
acgtgagtaa cctgcccttg actctgggat aagcccggga aactgggtct aatactggat 60
gctacatgtc accgcatggt ggtgtgtgga aagggtttac tggtcttgga tgggctcacg 120
gcctatcagc ttgttggtga ggtaatggct caccaaggcg acgacgggta gccggcctga 180
gagggtgacc ggccacactg ggactgagac acggcccaga ctcctacggg aggcagcagt 240
ggggaatatt gcacaatggg cgaaagcctg atgcagcgac gccgcgtgag ggatgacggc 300
cttcgggttg taaacctctt tcagcaggga agaagccaca agtgacggta cctgcagaag 360
aagcgccggc taactacgtg ccagcagccg cggtaatacg tagggcgcaa gcgttgtccg 420
gaattattgg gcgtaaagag ctcgtaggcg gtttgtcgcg tctgctgtga aagcccgggg 480
cttaaccccg ggtgtgcagt gggtacgggc agactagagt gcagtagggg agactggaat 540
tcctggtgta gcggtggaat gcgcagatat caggaggaac accgatggcg aaggcaggtc 600
tctgggctgt tactgacgct gaggagcgaa agcatgggga gcgaacagga ttagataccc 660
tggtagtcca tgccgtaaac gttgggcact aggtgtgggg gacattccac gttttccgcg 720
ccgtagctaa cgcattaagt gccccgcctg gggagtacgg ccgcaaggct aaaactcaaa 780
ggaattgacg ggggcccgca caagcggcgg agcatgcgga ttaattcgat gcaacgcgaa 840
gaaccttacc aaggcttgac atataccgga tcgttccaga gatggttctt cccctttggg 900
gtcggtatac aggtggtgca tggttgtcgt cagctcgtgt cgtgagatgt tgggttaagt 960
cccgcaacga gcgcaaccct cgttccatgt tgccagcacg tgatggtggg gactcatggg 1020
agactgccgg ggtcaactcg gaggaaggtg gggatgacgt caaatcatca tgccccttat 1080
gtcttgggct tcacgcatgc tacaatggcc ggtacaaagg gttgcgatac tgtgaggtgg 1140
agctaatccc aaaaagccgg tctcagttcg gattgaggtc tgcaactcga cctcatgaag 1200
tcggagtcgc tagtaatcgc agatcagcaa cgctgcggtg aatacgttcc cgggccttgt 1260
acacacc 1267

Claims (9)

1.一种考克氏菌活性多糖在吸附有害重金属中的应用,其特征在于,将考克氏菌活性多糖制备成有害重金属吸附剂,用于吸附有害重金属,所述制备方法包括以下步骤:
1)培育菌株:将所选考克氏菌接种于微生物培养液中形成菌液,对菌液所选菌株进行培育,所述考克氏菌菌株为从菲律宾蛤仔黏附淤泥中分离获得Kocuria sp.GHF12;
2)提取絮凝剂:对培育好的菌液进行浓缩,进行透析和离心分离后提取得到微生物絮凝剂;
3)制备吸附剂:将微生物絮凝剂溶于琼脂和淀粉的混合水溶液中,凝固后制得有害重金属吸附剂。
2.根据权利要求1所述的一种考克氏菌活性多糖在吸附有害重金属中的应用,其特征在于,步骤1)所述微生物培养液中含有以下重量百分比的物质:马铃薯汁5~8%、蛤肉汤1~3%、磷酸氢二钾0.06~0.18%和葡萄糖2~3%,余量为陈化海水。
3.根据权利要求1所述的一种考克氏菌活性多糖在吸附有害重金属中的应用,其特征在于,步骤1)所述培育条件为:在25~30℃环境中,置于150~200r/min的摇床上培育3~5d。
4.根据权利要求1所述的一种考克氏菌活性多糖在吸附有害重金属中的应用,其特征在于,步骤2)所述浓缩过程将菌液浓缩至原体积的9~12%。
5.根据权利要求1所述的一种考克氏菌活性多糖在吸附有害重金属中的应用,其特征在于,步骤2)所述透析过程为:将浓缩后的菌液装入透析袋中,透析36~60h。
6.根据权利要求1所述的一种考克氏菌活性多糖在吸附有害重金属中的应用,其特征在于,步骤2)所述离心分离的过程为:将透析后的截留物利用离心机去除沉淀,留下上清液,随后向上清液中加入无水乙醇,低温静置沉淀18~30h后再利用离心机将沉淀分离,提取得到微生物絮凝剂。
7.根据权利要求1所述的一种考克氏菌活性多糖在吸附有害重金属中的应用,其特征在于,步骤3)所述琼脂和淀粉的混合水溶液中,所用琼脂、淀粉和水的质量比为(2~6):(2~6):100。
8.根据权利要求1所述的一种考克氏菌活性多糖在吸附有害重金属中的应用,其特征在于,所述步骤3)制备吸附剂的具体步骤为:将琼脂和淀粉加入至水中,搅拌的同时进行加热至琼脂完全溶解,随后冷却至45~60℃时将微生物絮凝剂加入至琼脂和淀粉的混合水溶液中,混合均匀后静置冷却,凝固后即得到吸附剂。
9.根据权利要求8所述的一种考克氏菌活性多糖在吸附有害重金属中的应用,其特征在于,凝固后得到的吸附剂进一步置于85~95℃条件下烘至干燥,即得到干燥的吸附剂。
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