CN109642220B - 葡萄糖传感器用试剂、葡萄糖传感器、葡萄糖传感器的制造方法及葡萄糖测量装置 - Google Patents

葡萄糖传感器用试剂、葡萄糖传感器、葡萄糖传感器的制造方法及葡萄糖测量装置 Download PDF

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Abstract

一种葡萄糖传感器用试剂，用于葡萄糖传感器，该葡萄糖传感器用于电化学定量葡萄糖，该葡萄糖传感器用试剂含有黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶、单壁碳纳米管和分散剂。

Description

葡萄糖传感器用试剂、葡萄糖传感器、葡萄糖传感器的制造方 法及葡萄糖测量装置
技术领域
本发明涉及一种葡萄糖传感器用试剂、葡萄糖传感器、葡萄糖传感器的制造方法以及葡萄糖测量装置。
背景技术
已知一种利用电化学方法的血糖水平传感器等的葡萄糖传感器。这种葡萄糖传感器一般具备至少两个以上的含有工作电极和对电极的电极，在将用于在电极上形成空腔的垫片粘合之后，在空腔的一部分形成含有酶、介质等的试剂层，并将盖子粘合。
另外，当把标本(血液、间质液、汗等)导入到葡萄糖传感器的空腔(由垫片上形成的凹槽形成的空间)时，标本中含有的葡萄糖(基质)通过酶还原介质(电极活性材料)。在此，在电极上涂布预定的电压时，通过电化学反应，还原后的介质被反向氧化。这时通过测量发生的氧化电流，能够检测葡萄糖量。
此外，进行了如下研究：使用碳纳米管(以下简称“CNT”)等导电微粒子，通过测量直接电子转移产生的电流来测量葡萄糖量，该直接电子转移是经由与葡萄糖结合的酶和电极之间的CNT而进行的。
例如，专利文献1(国际公开第2014/002999号)公开的葡萄糖传感器的试剂层含有氧化还原酶、水溶性导电聚合物以及导电微粒子。需要说明的是，专利文献1公开了使用黄素腺嘌呤二核苷酸依赖性葡萄糖脱氢酶(以下有时简称“FAD-GDH”)作为氧化还原酶。
此外，专利文献2(国际公开第2014/002998号)公开的葡萄糖传感器的试剂层含有酶、导电微粒子以及不导电聚合物。需要说明的是，专利文献2公开了使用CNT作为导电微粒子。
另外，非专利文献1(六车等人，电子信息通信研究所技术研究报告有机电子110(409)，p.15-18，2011年1月31日)具体公开了将CNT作为葡萄糖传感器的试剂层(葡萄糖传感器用试剂)中的介质来使用。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：国际公开第2014/002999号
专利文献2：国际公开第2014/002998号
非专利文献1：六车等人，电子信息通信研究所技术研究报告有机电子110(409)，p.15-18，2011年1月31日
发明内容
发明所要解决的课题
然而，根据本发明的发明人的研究，当使用FAD-GDH作为酶时，根据CNT的种类，发现有的情况下不会发生直接电子转移。
本发明是鉴于上述问题而完成的，其目的在于，在使用CNT，使用FAD-GDH作为酶时，提供灵敏度高且准确的葡萄糖传感器。
用于解决课题的技术手段
[1]
一种葡萄糖传感器用试剂，用于葡萄糖传感器，所述葡萄糖传感器用于电化学定量葡萄糖，葡萄糖传感器用试剂含有黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶、单壁碳纳米管和分散剂。
[2]
在[1]所述的葡萄糖传感器用试剂的基础上，所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶被糖基化。
[3]
在[2]所述的葡萄糖传感器用试剂的基础上，所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的分子量大于等于90KDa。
[4]
在[3]所述的葡萄糖传感器用试剂的基础上，所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的分子量大于等于110KDa。
[5]
在[1]～[4]中任一项所述的葡萄糖传感器用试剂的基础上，所述分散剂包含选自阴离子类化合物、阳离子类化合物以及非离子类化合物中至少一种化合物。
[6]
在[5]所述的葡萄糖传感器用试剂的基础上，所述阴离子类化合物为十二烷基硫酸钠、胆酸钠以及十二烷基苯磺酸钠中至少一种。
[7]
在[5]或[6]所述的葡萄糖传感器用试剂的基础上，所述阳离子类化合物为十六烷基三甲基溴化铵。
[8]
在[5]～[7]中任一项所述的葡萄糖传感器用试剂的基础上，所述非离子类化合物为辛基酚乙氧基化物或聚山梨酯类中至少一种。
[9]
在[1]～[8]中任一项所述的葡萄糖传感器用试剂的基础上，所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶源自曲霉菌属丝状菌、嗜热子囊属丝状菌或踝节菌属丝状菌。
[10]
一种葡萄糖传感器，用于电化学定量葡萄糖，葡萄糖传感器具备电极，所述电极的表面至少一部分被由[1]～[9]所述的试剂组成的试剂层覆盖。
[11]
一种制造方法，用于[10]所述的葡萄糖传感器，将含有所述单壁碳纳米管和所述分散剂的碳纳米管液以及含有所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的酶液依次涂布到所述电极上，并进行干燥，从而形成所述试剂层。
[12]
一种制造方法，用于[10]所述的葡萄糖传感器，将含有所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的酶液以及含有所述单壁碳纳米管和所述分散剂的碳纳米管液依次涂布到所述电极上，并进行干燥，从而形成所述试剂层。
[13]
一种制造方法，用于[10]所述的葡萄糖传感器，将含有所述单壁碳纳米管和所述分散剂的碳纳米管液以及含有所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的酶液混合而成的混合液涂布到所述电极上，并进行干燥，从而形成所述试剂层。
[14]
一种葡萄糖测量装置，使用[10]所述的葡萄糖传感器。
发明的效果
通过本发明，能够在使用CNT/使用FAD-GDH作为酶时，提供灵敏度高且准确的葡萄糖传感器。
附图说明
图1是表示实施方式1的葡萄糖传感器构成的分解立体图。
图2是用于描述实施方式1的葡萄糖传感器的制造工序的一例的立体图。
图3是用于描述实施方式1的葡萄糖传感器的制造工序的一例的另一立体图。
图4是用于描述实施方式1的葡萄糖传感器的制造工序的一例的另一立体图。
图5是用于描述实施方式1的葡萄糖传感器的制造工序的一例的另一立体图。
图6是用于描述实施方式1的葡萄糖传感器的制造工序的一例的另一立体图。
图7是描述实施例1、比较例1以及比较例2中的试剂层的形成过程的示意图。
图8是用于描述实施例1的碳纳米管(CNT)液中的分散剂的作用的示意图。
图9是用于描述FAD-GDH的活性中心和CNT的大小关系的示意图。
图10是表示测试例1的电流值的测量结果的图表。
图11是表示试剂层的形成过程(方法A～C)的示意图。
图12是表示测试例2的电流值的测量结果的图表。
图13是表示测试例2的电流值的测量结果的另一图表。
具体实施方式
以下，参照附图对本发明的实施方式进行说明。需要说明的是，在附图中，同一附图标记表示相同的部件或相应的部件。另外，为了使附图清晰化和简单化，已经适当地改变了长度、宽度、厚度、深度等的尺寸关系，并且不代表实际的尺寸关系。每个实施方式是示例，并且可以对不同的实施方式中示出的构成进行部分替换和组合。
[实施方式1]
参照图1，本实施方式的葡萄糖传感器是用于测量样品溶液中含有的葡萄糖(基质)的葡萄糖传感器(传感器芯片)，具备绝缘基板1、电极、试剂层3、垫片4以及盖子5。
电极含有设置在绝缘基板1的一个表面上的工作电极21以及对电极22。试剂层3形成在与电极的绝缘基板1相反的表面一部分上。
垫片4具有切口部42，该切口部42用于形成将样品溶液引导至试剂层3的空腔41，并且垫片4以使试剂层3位于切口部42(空腔41)的内部的方式配置在电极上。需要说明的是，在电极的表面中，优选的是，空腔41内暴露的至少一部分被试剂层覆盖。
盖子5设置在与垫片4的绝缘基板1相反侧的表面上，以至少覆盖切口部42。并且，盖子5具有连通空腔41的气孔5a。
在本实施方式中，试剂层3由含有黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH)、单壁碳纳米管(单层CNT)以及分散剂的试剂(葡萄糖传感器用试剂)构成。
根据发明人的研究，在使用FAD-GDH作为酶的葡萄糖传感器中，当使用多层CNT或束状(Bundling)的单层CNT作为CNT时，很难发生酶和电极之间的经由CNT的直接电子转移。另一方面，如果使用非束状(Debundling)的单层CNT，则会发生直接电子转移。
这些结果表明：当FAD-GDH(酶33)的活性中心的大小约为1nm并且在使用具有较大粒径的多层CNT或者束状的单层CNT时，CNT31不能进入活性中心中(参照图9的(b)和(c))，推测CNT31不能与酶33交换电子。另一方面，在使用非束状的单层CNT时(在试剂液中混合单层CNT以及分散剂时)，CNT31能够进入酶33的活性中心中(参照图9的(a))，推测CNT31能够与酶33交换电子。
因此，在使用FAD-GDH作为酶的情况下，通过使用非束状的单层CNT(含有单层CNT以及分散剂的试剂液)，能够提供使用CNT作为介质的灵敏度高且准确的葡萄糖传感器。
在与FAD-GDH的活性中心的大小的关系中，上述单层CNT的外径(圆柱的直径)优选为0.75～2.0nm，进一步优选为0.75～1.7nm。单层CNT的粒径能够通过透射电子显微镜(TEM)或原子力显微镜(AFM)来测量。
需要说明的是，例如，可以在电极的表面上形成亲水性聚合物膜。这是因为当试剂层覆盖电极(电极膜)的表面时，试剂液与电极表面的润湿性得到改善，容易形成试剂层。亲水性聚合物膜例如有乙腈等离子体聚合膜、羧甲基纤维素或甲基纤维素等的亲水性聚合物，或者是聚乙烯吡咯烷酮等的两亲聚合物组成的膜。
FAD-GDH优选被糖基化(添加糖链)。由于FADGDH被糖基化，因此抑制了试剂层的剥离，并且抑制了酶(FAD-GDH)的失活。
在形成试剂层的过程中，当搭载CNT等的微粒子时，由于微粒子层的膜应力，可能会剥离酶等的试剂层。当剥离试剂时，不能有效的通过CNT在酶和电极间直接电子转移。并且，制作的传感器间的品质、特性等的变化变大。
并且，当CNT液与酶接触时，受CNT液中含有的分散剂的影响，酶可能会失活。
相反，当FAD-GDH被糖基化时，酶的三维结构被强制保留。因此，将酶作为基底逐渐滴加CNT液形成试剂层时，试剂层的剥离被抑制。由此，能够通过CNT在酶和电极之间有效地进行直接电子转移。并且制作的传感器间的品质、特性等的波动减少了。
并且，当CNT液与酶接触时，即使分散剂或CNT作用于酶，酶的三维立体结构被糖链强制保留，因此酶不会失活且酶原本的活性能够得到保证。
需要说明的是，作为FAD-GDH，例如，可以适当使用源自曲霉菌(Aspergillus)属丝状菌、嗜热子囊(Thermoascus)属丝状菌或者踝节菌(Talaromyces)属丝状菌的FAD-GDH(例如，参照日本特开2015－167506号公告、日本特开2016－7191号公告、日本特开2016－7192号公告、日本特开2016－7193号公告)。
分散剂没有特别限定，只要是能够防止单层CNT的束状(bundling)的化合物即可。作为分散剂，可以使用选自例如阴离子类化合物、阳离子类化合物以及非离子类化合物的至少一种化合物。
阴离子类化合物例如有十二烷基硫酸钠、胆酸钠或者十二烷基苯磺酸钠。阳离子类化合物例如有六烷基三甲基溴化铵。非离子类化合物有辛基酚乙氧基化物(陶氏化学公司制的Triton-X-100、Triton-X-114、Triton-X-305、Triton-X-405等)，或者聚山梨酯(聚山梨酯20(吐温20)、聚山梨酯40(吐温40)、聚山梨酯60(吐温60)、聚山梨酯80(吐温80)等)。
需要说明的是，试剂层3可以含有亲水性聚合物(羧甲基纤维素等)。这种亲水性聚合物具有很容易的将试剂层3固定到电极表面或是过滤样品溶液中的污染物(血液中的血细胞等)的效果。
绝缘基板1的材料没有特别限定，可以是PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)薄膜等的塑料材料、感光性材料、纸、玻璃、陶瓷或者可生物降解材料等。这些材料用作垫片4、盖子5的材料。
设置在绝缘基板1上的电极至少含有工作电极21和对电极22。除了工作电极21和对电极22外，电极可以含有用作测量电极电位时的电位的参考的参照电极或用于检测样品向空腔41内供给的检测电极。
这些电极(工作电极、对电极、参照极、检测电极等)的材料有铂金、金、钯等的贵金属、碳、铜、铝、镍、钛、ITO(Indium Tin Oxide：氧化铟锡)、ZnO(氧化锌)等。
盖子5的材料优选为绝缘性材料，例如能够用于PET薄膜等的塑料、感光性材料、纸、玻璃、陶瓷、可生物降解材料。需要说明的是，盖子5优选为具有与由垫片4形成的空腔41连通的气孔5a。样品通过毛细现象被吸引到气孔5a，并且便于将样品导入到空腔41中。
<葡萄糖传感器的制造方法>
参照图1～图6对本实施方式的葡萄糖传感器的制造方法进行说明。图1是表示本实施方式的葡萄糖传感器构成的分解立体图。图2～图6是用于描述本实施方式的葡萄糖传感器的制造工序的一例的立体图，且分别表示不同的过程。本实施方式能够同时制作多个葡萄糖传感器。
首先，参照图2，在多个绝缘基板1的每一个上形成电极(用于定量确定基质的工作电极21和对电极22)。具体来说，通过溅射方法在绝缘基板1的一面上形成导电层，通过激光加工、光刻等在所形成的导电层上形成图案，以此形成电极(电极膜)。需要说明的是，除了工作电极21和对电极22，还可以形成上述参照电极、检测电极等。另外，可以在电极和绝缘基板1的表面上实施等离子处理。
电极膜可以利用例如溅射方法、真空沉积法、离子电镀法、CVD(化学沉积)法、MBE(分子束外延)法、熔体运输法、熔体温度下降法、溶胶-凝胶法、电镀法、涂层法、丝网印刷等形成。电极膜的厚度没有特别限定，例如5～500nm。
接着，参照图3，在电极(工作电极21和对电极22)的与绝缘基板1相反一侧的一部分上、以及在绝缘基板1的没有形成电极的区域的电极侧表面的一部分上粘合有具有切口部42的垫片4。
[试剂层形成方法]
接着，参照图4，在电极(工作电极21和对电极22)的与绝缘基板1相反的一侧(切口部42的内部)上，滴加含有酶(FAD-GDH)、单层CNT以及分散剂的试剂液，并使试剂液干燥，从而能够形成试剂层3。
(方法A)
更具体来说，例如，参照图11的(a)，通过工序(方法A)能够形成试剂层3，该工序为将碳纳米管(CNT)液(CNT31和分散剂32)以及酶液(酶33)按此顺序依次涂布到电极2(亲水性聚合物膜20)上。
(方法B)
另外，参照图11的(b)，也可以通过在CNT液(CNT31以及分散剂32)之前涂布酶液(酶33)的工序(方法B)来形成试剂层3。
(方法C)
另外，参照图11的(c)，也可以通过工序(方法C)来形成试剂层3，该工序为首先制备CNT液(CNT31及分散剂32)和酶液(酶33)的混合液，然后将该混合液涂布到电极2(亲水性聚合物膜20)上。
接着，参照图5，将具有气孔5a的盖子5以至少覆盖切口部42的方式层叠在垫片4上，从而形成用于将样品溶液引导至试剂层3的空腔41。需要说明的是，气孔5a设置为在空腔41的开口的相反侧与空腔41的内部连通。
接着，通过划分通过以上工序形成的葡萄糖传感器的束状基板，获得具有空腔41的葡萄糖传感器(图6、图1)。
<葡萄糖传感器的使用方法>
本发明的葡萄糖传感器(传感器芯片)用于探测器。即，当样品(血液等)被供给到安装在探测器上的葡萄糖传感器的空腔41时，样品中的测量目标物质(葡萄糖)和酶(FAD-GDH)彼此结合，并通过隧道效应将电子传递到紧邻活性中心FAD设置的CNT，然后生成电流。通过与葡萄糖传感器的工作电极21和对电极22电连接的探测器测量该电流，由此量化包含在样品中的测量目标物质。
以下，对本发明的葡萄糖传感器的使用方法的一个示例进行说明。首先，使空腔41的前端部(入口41c)接触血液，然后利用毛细现象将血液导入到空腔41内部。然后，在工作电极21和对电极22之间施加电压，在一定时间内测量电流值。施加电压例如是0.3V。血液被导入到空腔41内时，血液中的分析物导致酶和CNT的直接电子转移。当在工作电极21和对电极22之间施加电压时流动的电流与分析物浓度有关。
接着，在施加电压后经过一段时间后测量电流值。例如，测量3～5秒后的电流值。使用该电流值，能够从先前获得的校准曲线中确定分析物的浓度。
以下通过实施例对本发明进行更详细的说明，但本发明不仅限于此。
[实施例1]
基本上，制作具有上述实施方式1描述的如图1所示构成的葡萄糖传感器。使用金作为电极材料。通过溅射方法形成由金组成的金属膜，通过对其进行图案化，制作电极(工作电极和对电极)。并且，在电极的表面(形成试剂层的部分)上形成乙腈等离子体聚合膜。需要说明的是，没有制造参照极、检测用电极。
使用FAD-GDH的水分散体作为酶液。使用表1所示的酶编号1的FAD-GDH作为FAD-GDH。
使用将水作为分散介质的分散液来作为CNT液，其中含有0.15质量％的单层CNT(非束状：外径1.1～1.7nm)和2.0质量％的分散剂(胆酸钠)。
需要说明的是，参照图8，在这种CNT液中，即使添加束状的单层CNT31，由于分散剂32的存在，单层CNT31也处于非束状的状态。例如，能够参照非专利文献1来获得这样的单层CNT、制备CNT液等。
另外，如图7的(a)所示，将上述CNT液(含有单层CNT31和分散剂32)及酶液(含有酶33)按此顺序逐渐滴到电极2(亲水性聚合物膜20)上，通过干燥形成试剂层3(上述方法A)。
[比较例1]
使用将水作为分散介质的分散液来作为CNT液，其中含有0.1质量％的多层CNT(非束状：外径10～15nm，5～15层)和2.0质量％的分散剂(胆酸钠)，除了这一点以外，以与实施例1相同的方式制作比较例1的葡萄糖传感器。需要说明的是，试剂层3是通过与图7的(b)所示的实施例1相同的工序(方法A)形成的。
[比较例2]
除了不在CNT液中添加分散剂以外，以与实施例1相同的方式制作比较例2的葡萄糖传感器。即，在比较例2中，使用将水和乙醇的混合液(水：乙醇＝50：50)作为分散介质的分散液来作为CNT液，其中含有0.15质量％的单层CNT(束状)，不含分散剂。需要说明的是，试剂层3是通过与图7的(c)所示的实施例1同样的工序(方法A)形成的。
<测试例1>
作为检测对象的样品溶液(葡萄糖溶液)，通过将葡萄糖溶解到20mM磷酸盐缓冲液(pH7.4)来制备溶液。需要说明的是，葡萄糖的浓度为0、2.5、14或者48mM。
将该样品溶液供给到上述实施例1、比较例1以及比较例2制作的葡萄糖传感器的空腔内，通过循环伏安法(扫描速度：0.05V/s)，测量工作电极和对电极之间流动的电流值。
图10显示电流值的测量结果。需要说明的是，图10的(a)～(c)分别对应实施例1、比较例1以及比较例2。
如图10所示(特别是参照电压为0.8V的地方)，使用非束状的多层CNT(比较例1)和使用束状的CNT(比较例2)的情况下，不能检测到取决于葡萄糖浓度的电化学反应(电流)的发生。与此相反，使用非束状的单层CNT(包含单层CNT和分散剂的试剂液)的情况下(实施例1)，能够检测到电流。
如图9的(b)和(c)所示，FAD-GDH(酶33)的活性中心(两个黑色三角形标记之间)具有约1nm左右的大小，使用具有1nm以上粒径的多层CNT31(图9的(b))或者束状的单层CNT31(图9的(c))的情况下(比较例1和2)，CNT31不能进入酶33的活性中心中，推测CNT31不能与酶33交换电子。另一方面，参照图9的(a)，使用非束状的单层CNT31的情况下(实施例1)，CNT13能够进入酶33的活性中心中，推测CNT31能够与酶33交换电子。
[实施例2]
除了使用表1所示的7种类型的FAD-GDH(酶编号1～7)的每一种之外，通过与实施例1同样的工序，制作实施例2的葡萄糖传感器(7种类型)。需要说明的是，使用酶编号1的情况，与实施例1相同。可以参照例如日本特开2015－167506号公告、日本特开2016－7191号公告、日本特开2016－7192号公告、日本特开2016－7193号公告来制造FAD-GDH。
[实施例3]
除了代替实施例1中的试剂层的形成工序(方法A)，通过上述方法B(在CNT液之前涂布酶液的工序：参照图11的(b))来形成试剂层以外，以与实施例2相同的方式制作实施例3的葡萄糖传感器(7种类型)。
[实施例4]
除了代替实施例1中的试剂层的形成工序(方法A)，通过上述方法C(首先制备CNT液与酶液的混合液，然后将该混合液涂布到电极2(亲水性聚合物膜20)上的工序：参照图11的(c))来形成试剂层以外，以与实施例2相同的方式制作实施例4的葡萄糖传感器(7种类型)。
【表1】
<测试例2>
作为检测对象的样品溶液(葡萄糖溶液)，通过将葡萄糖溶解到20mM磷酸盐缓冲液(pH7.4)来制备溶液。需要说明的是，葡萄糖的浓度为0、14或者48mM。
将该样品溶液供给到上述实施例2～4制作的葡萄糖传感器(共计21种类型)的每个空腔内，通过与测试例1相同的循环伏安法测量电流值。测量结果如图12和图13所示。
另外，表1示出了关于图12和图13的测量结果的传感器动作(是否检测电流)的评估结果。需要说明的是，在表1的“传感器动作(电流检测)”部分中，“+”表示已生成电流值，“-”表示未生成电流值。
从表1、图12以及图13所示的结果来看，在滴加酶液后滴加单层CNT分散液的实施例3(方法B)以及将酶液和单层CNT分散液混合后滴加该混合液的实施例4(方法C)的葡萄糖传感器中，当FAD-GDH的整体外观的分子量越大(糖链添加量多)，就能越稳定地检测电流。
特别地，FAD-GDH的分子量大于等于90万时，在方法A和B(实施例2和3)中任一方都可以确保酶和电极之间经由CNT的直接电子转移。
此外，FAD-GDH的分子量大于等于110万时，在方法A、B和C(实施例2、3和4)中任一方都可以确保酶和电极之间经由CNT的直接电子转移。
需要说明的是，按照由方法A制造的实施例2、由方法B制造的实施例3、由方法C制造的实施例4的顺序被认为能够稳定地检测电流。通过以这种方式稳定地检测电流，能够提供灵敏度高且准确的葡萄糖传感器。
附图标记说明
1绝缘基板，2电极，20亲水性聚合物膜，21工作电极，22对电极，3试剂层，31 CNT，32分散剂，33酶，4垫片，41空腔，41c入口，42切口部，5盖子，5a气孔，6样品溶液。

Claims (14)

1.一种葡萄糖传感器用试剂，用于葡萄糖传感器，所述葡萄糖传感器用于电化学定量葡萄糖，
所述葡萄糖传感器用试剂含有黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶、能够使所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶与电极之间进行直接电子转移的非束状的单壁碳纳米管、以及分散剂，
所述单壁碳纳米管接近所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的活性中心。
2.根据权利要求1所述的葡萄糖传感器用试剂，其中，
所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶被糖基化。
3.根据权利要求2所述的葡萄糖传感器用试剂，其中，
所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的分子量大于等于90KDa。
4.根据权利要求3所述的葡萄糖传感器用试剂，其中，
所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的分子量大于等于110KDa。
5.根据权利要求1所述的葡萄糖传感器用试剂，其中，
所述分散剂包含选自阴离子类化合物、阳离子类化合物以及非离子类化合物中至少一种化合物，
所述单壁碳纳米管的外径为0.75～2.0nm。
6.根据权利要求5所述的葡萄糖传感器用试剂，其中，
所述阴离子类化合物为十二烷基硫酸钠、胆酸钠以及十二烷基苯磺酸钠中至少一种。
7.根据权利要求5所述的葡萄糖传感器用试剂，其中，
所述阳离子类化合物为十六烷基三甲基溴化铵。
8.根据权利要求5所述的葡萄糖传感器用试剂，其中，
所述非离子类化合物为辛基酚乙氧基化物和聚山梨酯类中至少一种。
9.根据权利要求1所述的葡萄糖传感器用试剂，其中，
所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶源自曲霉菌属丝状菌、嗜热子囊属丝状菌或踝节菌属丝状菌。
10.一种葡萄糖传感器，用于电化学定量葡萄糖，其中，
所述葡萄糖传感器具备电极，
所述电极的表面至少一部分被由权利要求1至9中任一项所述的试剂组成的试剂层覆盖。
11.一种制造方法，用于制造权利要求10所述的葡萄糖传感器，
在所述制造方法中，将含有所述单壁碳纳米管和所述分散剂的碳纳米管液以及含有所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的酶液按照所述碳纳米管液、所述酶液的顺序涂布到所述电极上，并进行干燥，从而形成所述试剂层。
12.一种制造方法，用于制造权利要求10所述的葡萄糖传感器，
在所述制造方法中，将含有所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的酶液以及含有所述单壁碳纳米管和所述分散剂的碳纳米管液按照所述酶液、所述碳纳米管液的顺序涂布到所述电极上，并进行干燥，从而形成所述试剂层。
13.一种制造方法，用于制造权利要求10所述的葡萄糖传感器，
在所述制造方法中，将含有所述单壁碳纳米管和所述分散剂的碳纳米管液以及含有所述黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶的酶液混合而成的混合液涂布到所述电极上，并进行干燥，从而形成所述试剂层。
14.一种葡萄糖测量装置，使用权利要求10所述的葡萄糖传感器。
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP7398744B2 (ja) * 2018-03-29 2023-12-15 東洋紡株式会社 ナノカーボンの電子伝達作用
JP2020085759A (ja) * 2018-11-29 2020-06-04 東洋紡株式会社 グルコースセンサ用試薬
JP6891372B2 (ja) * 2019-06-28 2021-06-18 東洋紡株式会社 酵素−電極間電子伝達増強作用の有無の予測方法
WO2021060097A1 (ja) * 2019-09-26 2021-04-01 東洋紡株式会社 Ｃｎｔ分散ｃｍｃ層を有する電極
CN117398094B (zh) * 2023-12-15 2024-03-15 北京大学 一种检测血糖的自供电可穿戴生物传感器及其制备方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101327415A (zh) * 2008-07-24 2008-12-24 中国科学院上海硅酸盐研究所 一维碳纳米材料的聚合物分散剂分散方法
CN103189311A (zh) * 2010-10-29 2013-07-03 东丽株式会社 碳纳米管集合体分散液的制造方法
WO2013164477A1 (en) * 2012-05-03 2013-11-07 Roche Diagnostics Gmbh A glycosylated modified flavin adenine dinucleotide dependent glucose dehydrogenase
CN103518238A (zh) * 2011-05-13 2014-01-15 国立大学法人熊本大学 碳纳米管复合电极及其制造方法
EP2845908A1 (en) * 2012-05-02 2015-03-11 i-Sens, Inc. Reagent composition for redox reaction
CN105408245A (zh) * 2013-07-25 2016-03-16 东丽株式会社 碳纳米管复合体、半导体元件和使用其的传感器

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7052591B2 (en) * 2001-09-21 2006-05-30 Therasense, Inc. Electrodeposition of redox polymers and co-electrodeposition of enzymes by coordinative crosslinking
US7285198B2 (en) * 2004-02-23 2007-10-23 Mysticmd, Inc. Strip electrode with conductive nano tube printing
US7955559B2 (en) * 2005-11-15 2011-06-07 Nanomix, Inc. Nanoelectronic electrochemical test device
US7955483B2 (en) * 2002-03-18 2011-06-07 Honeywell International Inc. Carbon nanotube-based glucose sensor
US8765488B2 (en) * 2004-07-22 2014-07-01 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Sensors employing single-walled carbon nanotubes
JP4982734B2 (ja) 2005-07-08 2012-07-25 国立大学法人北海道大学 カーボンナノチューブ分散ペースト、カーボンナノチューブ分散溶液およびその製造方法
US7625702B2 (en) * 2005-12-20 2009-12-01 International Business Machines Corporation Helical wrapping of single-walled carbon nanotubes by genomic DNA
US8784624B2 (en) * 2006-07-12 2014-07-22 Arkray, Inc. Enzyme electrode
EP2083074B1 (en) * 2006-11-14 2011-01-19 Toyo Boseki Kabushiki Kaisha Modified flavine-adenine-dinucleotide-dependent glucose dehydrogenase
CN101462713A (zh) * 2007-12-20 2009-06-24 索尼株式会社 处理碳纳米管的方法、碳纳米管以及碳纳米管器件
EP2085357A1 (en) * 2008-02-01 2009-08-05 UNIVERSITE JOSEPH FOURIER - Grenoble 1 Electropolymerizable surfactant for dispersing carbon nanotubes
JP2012021220A (ja) * 2010-07-12 2012-02-02 Kawajun Industry Co Ltd カーボンナノチューブ複合多層めっき体および当該センサー。
US9128039B2 (en) * 2011-10-05 2015-09-08 Joinsoon Medical Technology Co., Ltd. Biosensor test strip
BR112014032201A2 (pt) 2012-06-25 2017-06-27 Bioengineering Laboratories Llc eletrodo de enzima
BR112014032559A2 (pt) 2012-06-25 2017-06-27 Bioengineering Laboratories Llc eletrodo de enzima
JP6159564B2 (ja) * 2013-04-23 2017-07-05 田中貴金属工業株式会社 センサー用電極およびその製造方法
KR101531384B1 (ko) * 2013-07-02 2015-06-24 주식회사 인포피아 바이오센서용 시약조성물 및 이를 포함하는 바이오센서

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101327415A (zh) * 2008-07-24 2008-12-24 中国科学院上海硅酸盐研究所 一维碳纳米材料的聚合物分散剂分散方法
CN103189311A (zh) * 2010-10-29 2013-07-03 东丽株式会社 碳纳米管集合体分散液的制造方法
CN103518238A (zh) * 2011-05-13 2014-01-15 国立大学法人熊本大学 碳纳米管复合电极及其制造方法
EP2845908A1 (en) * 2012-05-02 2015-03-11 i-Sens, Inc. Reagent composition for redox reaction
WO2013164477A1 (en) * 2012-05-03 2013-11-07 Roche Diagnostics Gmbh A glycosylated modified flavin adenine dinucleotide dependent glucose dehydrogenase
CN105408245A (zh) * 2013-07-25 2016-03-16 东丽株式会社 碳纳米管复合体、半导体元件和使用其的传感器

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