CN109628539A - 一种从芦笋中提取蛋白多肽的方法 - Google Patents

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孙德林
刘永
孙研
孙辉
崔云前
陆丕聪
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Abstract

本发明属于芦笋食品深加工领域，特别涉及一种从芦笋中提取蛋白多肽的方法，本发明首次公开了一种从芦笋中提取蛋白多肽的方法，将新鲜芦笋制成芦笋粉，然后通过碱溶、酶解得到蛋白肽液，最后浓缩得到芦笋蛋白多肽。本发明提供了一种便于商业化生产的从芦笋中提取蛋白多肽的方法，所提取的芦笋蛋白多肽易于人体吸收，可抑制细胞变性、排毒和抗病毒，可被广泛应用于化妆品、保健食品和医药制品等领域，适于广泛推广。

Description

一种从芦笋中提取蛋白多肽的方法
技术领域
本发明属于芦笋食品深加工领域，特别涉及一种从芦笋中提取蛋白多肽的方法。
背景技术
芦笋中含有蛋白质、微量元素和人体所必需的各种氨基酸。芦笋蛋白多肽可作为功能食品或医药制品、保健食品的原料，许多研究表明芦笋蛋白多肽中存在大量的生物活性组分，包括易于人体吸收，提高免疫力，激活细胞抗感染、抗病毒等生物活性的多肽。芦笋中的蛋白多肽以肽和游离氨基酸的形式存在，易于人体吸收，可抑制细胞变性，增强人体免疫能力，激活细胞，清除人体有害的自由基和重金属化合物，进行有效的排毒，激活体内多种激素和酶，使免疫功能抗菌更活跃，具有抗感染、抗病毒、识别和清除自身衰老残损细胞能力，可被广泛应用于化妆品、保健食品和医药制品等领域。但目前还未有从芦笋中提取蛋白多肽的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种简单易行、反应条件温和、提取效率高、成本低、便于商业化生产的从芦笋中提取蛋白多肽的方法。所制备的芦笋蛋白多肽易于人体吸收，可抑制细胞变性、排毒和抗病毒。
发明内容
本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种从芦笋中提取蛋白多肽的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种从芦笋中提取蛋白多肽的方法，包括以下步骤：
（一）原料预处理：取新鲜的芦笋经洗涤去除杂质，烘干后，放入粉碎机中粉碎10-15min，得到芦笋粉。
（二）碱溶：向得到的芦笋粉中加入纯净水调配成浆液，调节pH值为8-9，再加热至53-57℃，并保温0.8h-1.2h，然后过滤，取滤液得到蛋白液。
（三）一次酶解：将蛋白液降至常温，调节PH值为7-8，向蛋白液中加入碱性蛋白酶，然后搅拌均匀，得到第一混合液，再次加热12-17min，温度控制在51-59℃，并保持第一混合液的pH值在7.0以上8.0以下，得到一次酶解液。
（四）二次酶解：待一次酶解液降至常温，调节PH值为6-7，向一次酶解液中加入多肽复合酶，搅拌均匀，再次加热12-17min，温度控制在51-59℃，当PH值降至5-6，得到二次酶解液。
（五）灭酶：将二次酶解液加温至85-95℃，保持8-12min，然后离心得到蛋白肽液。
（六）浓缩：将步骤（五）得到的蛋白肽液的温度降至室温，进行浓缩处理，得到蛋白多肽。
作为优选方案：
所述步骤（二）中，芦笋粉与纯净水的质量比为1：(17-23)。
所述步骤（二）中，向芦笋粉和纯净水调配成的浆液中加入稳定剂，加入的稳定剂的质量为芦笋粉质量的2-5‰。
所述稳定剂为果聚糖。
所述步骤（四）中，所述多肽复合酶各组分及质量比为：枯草杆菌蛋白酶：木瓜蛋白酶：菠萝蛋白酶=1：2：2或中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：菠萝蛋白酶=1.2：2：2。
所述步骤（二）中，pH值的调节通过0.1mol/L的醋酸溶液或0.1mol/L的碳酸钠溶液调节。
所述步骤（四）中，一次酶解液与多肽复合酶的质量比为1：(0.001-0.003)。
本发明的有益效果：本发明提供了一种简单易行、反应条件温和、提取效率高、成本低、便于商业化生产的从芦笋中提取蛋白多肽的方法，利用酶活高的中性蛋白酶，所提取的芦笋蛋白多肽易于人体吸收，可抑制细胞变性、排毒和抗病毒，可被广泛应用于化妆品、保健食品和医药制品等领域，适于广泛推广。
具体实施方式
以下给出本发明的具体实施例，需要说明的是本发明并不局限于以下具体实施例，凡在本申请技术方案基础上做的等同变换均落入本发明的保护范围。
实施例1：
本发明一种从芦笋中提取蛋白多肽的方法，包括以下步骤：
（一）原料预处理
取新鲜的芦笋经洗涤去除杂质，烘干后，放入粉碎机中粉碎10-15min，得到芦笋粉。
（二）碱溶
向得到的芦笋粉中加入纯净水调配成浆液，芦笋粉与纯净水的质量比为1：17，并加入稳定剂，稳定剂为果聚糖，加入的稳定剂的质量为芦笋粉质量的5‰，通过0.1mol/L的醋酸溶液调节pH值为8，再加热至53℃，并保温0.8h，然后过滤，取滤液得到蛋白液。
（三）一次酶解
将蛋白液降至常温，调节PH值为8，向蛋白液中加入碱性蛋白酶，得到第一混合液，然后搅拌均匀，再次加热12min，温度控制在51℃，并调节保持第一混合液的pH值在7.0以上8.0以下，得到一次酶解液。
（四）二次酶解
待一次酶解液降至常温，调节PH值为6，向一次酶解液中加入多肽复合酶，优选的，多肽复合酶包括枯草杆菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶，三者质量比为：枯草杆菌蛋白酶：木瓜蛋白酶：菠萝蛋白酶=1：2：2，一次酶解液与多肽复合酶的质量比为1：0.003，搅拌均匀，再次加热17min，温度控制在58℃，当PH值降至5，得到二次酶解液。
（五）灭酶
将二次酶解液加温至95℃，保持12min，然后离心得到蛋白肽液。
（六）浓缩
将步骤（五）得到的蛋白肽液的温度降至室温，进行浓缩处理，得到蛋白多肽。
实施例2：
（一）原料预处理
取新鲜的芦笋经洗涤去除杂质，烘干后，放入粉碎机中粉碎10-15min，得到芦笋粉。
（二）碱溶
向得到的芦笋粉中加入纯净水调配成浆液，芦笋粉与纯净水的质量比为1：23，并加入稳定剂，稳定剂为果聚糖，加入的稳定剂的质量为芦笋粉质量的2‰， 通过0.1mol/L的醋酸溶液调节pH值为9，再加热至55℃，并保温1h，然后过滤，取滤液得到蛋白液。
（三）一次酶解
将蛋白液降至常温，调节PH值为7，向蛋白液中加入碱性蛋白酶，得到第一混合液，然后搅拌均匀，再次加热15min，温度控制在58℃，并调节保持第一混合液的pH值在7.0以上8.0以下，得到一次酶解液。
（四）二次酶解
待一次酶解液降至常温，调节PH值为7，向一次酶解液中加入多肽复合酶，本实施例多肽复合酶为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶，三者质量比为：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：菠萝蛋白酶=1.2：2：2，一次酶解液与多肽复合酶的质量比为1：0.002，搅拌均匀，再次加热14min，温度控制在52℃，当PH值降至6，得到二次酶解液。
（五）灭酶
将二次酶解液加温至85℃，保持10min，然后离心得到蛋白肽液。
（六）浓缩
将步骤（五）得到的蛋白肽液的温度降至室温，进行浓缩处理，得到蛋白多肽。
实施例3：
（一）原料预处理
取新鲜的芦笋经洗涤去除杂质，烘干后，放入粉碎机中粉碎10-15min，得到芦笋粉。
（二）碱溶
向得到的芦笋粉中加入纯净水调配成浆液，芦笋粉与纯净水的质量比为1：20，并加入稳定剂，稳定剂为果聚糖，加入的稳定剂的质量为芦笋粉质量的4‰， 通过0.1mol/L的碳酸钠溶液调节pH值为9，再加热至57℃，并保温1.2h，然后过滤，取滤液得到蛋白液。
（三）一次酶解
将蛋白液降至常温，调节PH值为8，向蛋白液中加入碱性蛋白酶，得到第一混合液，然后搅拌均匀，再次加热17min，温度控制在59℃，并调节保持第一混合液的pH值在7.0以上8.0以下，得到一次酶解液。
（四）二次酶解
待一次酶解液降至常温，调节PH值为7，向一次酶解液中加入多肽复合酶，多肽复合酶为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶，三者质量比为：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：菠萝蛋白酶=1.2：2：2，一次酶解液与多肽复合酶的质量比为1：0.001，搅拌均匀，再次加热12min，温度控制在51℃，当PH值降至6，得到二次酶解液。
（五）灭酶
将二次酶解液加温至90℃，保持8min，然后离心得到蛋白肽液。
（六）浓缩
将步骤（五）得到的蛋白肽液的温度降至室温，进行浓缩处理，得到蛋白多肽。
以上所述的实施例，只是本发明较优选的具体实施方式的一种，本领域的技术人员在本发明技术方案范围内进行的通常变化和替换都应包含在本发明的保护范围内。

Claims (8)

1.一种从芦笋中提取蛋白多肽的方法，其特征为：包括以下步骤：
（一）原料预处理：取新鲜的芦笋经洗涤去除杂质，烘干后，放入粉碎机中粉碎10-15min，得到芦笋粉；
（二）碱溶：向得到的芦笋粉中加入纯净水调配成浆液，调节pH值为8-9，再加热至53-57℃，并保温0.8h-1.2h，然后过滤，取滤液得到蛋白液；
（三）一次酶解：将蛋白液降至常温，调节PH值为7-8，向蛋白液中加入碱性蛋白酶，然后搅拌均匀，得到第一混合液，再次加热12-17min，温度控制在51-59℃，并保持第一混合液的pH值在7.0以上8.0以下，得到一次酶解液；
（四）二次酶解：待一次酶解液降至常温，调节PH值为6-7，向一次酶解液中加入多肽复合酶，搅拌均匀，再次加热12-17min，温度控制在51-59℃，当PH值降至5-6，得到二次酶解液；
（五）灭酶：将二次酶解液加温至85-95℃，保持8-12min，然后离心得到蛋白肽液；
（六）浓缩：将步骤（五）得到的蛋白肽液的温度降至室温，进行浓缩处理，得到蛋白多肽。
2.根据权利要求1所述的从芦笋中提取蛋白多肽的方法，其特征在于：所述步骤（二）中，芦笋粉与纯净水的质量比为1：(17-23)。
3.根据权利要求1所述的从芦笋中提取蛋白多肽的方法，其特征在于：所述步骤（二）中，向芦笋粉和纯净水调配成的浆液中加入稳定剂，加入的稳定剂的质量为芦笋粉质量的2-5‰。
4.根据权利要求3所述的从芦笋中提取蛋白多肽的方法，其特征在于：所述稳定剂为果聚糖。
5.根据权利要求1所述的从芦笋中提取蛋白多肽的方法，其特征在于：所述多肽复合酶各组分及质量比为：枯草杆菌蛋白酶：木瓜蛋白酶：菠萝蛋白酶=1：2：2。
6.根据权利要求1所述的从芦笋中提取蛋白多肽的方法，其特征在于：所述多肽复合酶各组分及质量比为：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：菠萝蛋白酶=1.2：2：2。
7.根据权利要求1所述的从芦笋中提取蛋白多肽的方法，其特征在于：所述步骤（二）中，pH值的调节通过0.1mol/L的醋酸溶液或0.1mol/L的碳酸钠溶液调节。
8.根据权利要求1-7任一项所述的从芦笋中提取蛋白多肽的方法，其特征在于：所述步骤（四）中，一次酶解液与多肽复合酶的质量比为1：(0.001-0.003)。
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