CN109620785A - 一种含竹叶黄酮提取物的美白面膜及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种含竹叶黄酮提取物的美白面膜及其制备方法，每制备1000ml面膜精华液中，其有效成分为以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α‑熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克。本发明与常规美白面膜相比较，效果显著，同时使用安全方便，副作用更少。

Description

一种含竹叶黄酮提取物的美白面膜及其制备方法
技术领域
本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种含竹叶黄酮提取物的面膜及其制备方法。
背景技术
随着社会的发展和人们生活水平的提高,追求健康幸福和美丽成为人们的共同诉求。东方人想要得到白皙红润、细腻光滑的肌肤,欧美消费者希望消除或减轻黄褐斑、老年斑,因此,使用美白化妆品已成为人们日常生活的必需。
作为一种常用的化妆品，美白面膜在市面上主要有两种，一种以化学成分为主要原料，虽然功效显著，但是存在化学换肤、长期使用有副作用的潜在危害；一种是中药面膜，虽然副作用少，但使用不便，气味不佳。因此，研发一款疗效显著，使用安全方便，气味宜人的美白面膜是十分必要的。
竹叶黄酮又名竹叶抗氧化剂，是从竹叶中提取出来的具有生理活性的生物黄酮，是中国首创、具有中国本土资源特色和自主知识产权的植物类黄酮制剂，其成分除了黄酮类化合物以外，还有酚酸、蒽醌类化合物、芳香成分和锰、锌、锡等微量元素，它们共同构成了竹叶黄酮广泛的生理和药理活性的基础。其中，竹叶黄酮的抗氧化性非常显著，对保健品和化妆品的开发研究具有重大意义。目前以竹叶黄酮为主要功效成分的美白面膜还未见有报道，因此，研发一款以竹叶黄酮为主要功效成分的美白面膜将具有广阔的应用市场。
发明内容
本发明的目的是提供一种含竹叶黄酮提取物的美白面膜，其采用中药成分进行有效配比，经过一定的工艺制成，实现保湿美白祛斑的效果。
本发明的另一个目的是提供给上述美白面膜的制备方法。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种含竹叶黄酮提取物的美白面膜，其特征在于：每制备1000ml面膜精华液中，其有效成分为以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α-熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克。
每制备1000ml面膜精华液包括以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α -熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克，其余为面膜基质的常规辅料。
每制备1000ml面膜精华液包括以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α -熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克、黄原胶1～3克、丙二醇45～55克、三甲基甘氨酸25～35克、海藻提取物25～35克、尿囊素1～3克、透明质酸钠0.1～0.5克、香精1～5滴、维生素E 4～6ml、苯氧乙醇3～5ml、羟苯甲酯0.5～1.5克、尼泊金0.5～1.5克，水余量。
优选的，每制备1000ml面膜精华液中，其有效成分为以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.1克。
上述含竹叶黄酮提取物的美白面膜的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(3)制备面膜基质；
(4)制备面膜精华液：称取竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α-熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌20-30小时，得面膜精华液。
所述步骤(1)中，称取黄原胶1～3克、丙二醇45～55克、三甲基甘氨酸25～35克、海藻提取物25～35克、尿囊素1～3克、羟苯甲酯0.5～1.5克、尼泊金0.5～1.5克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.1～0.5克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精1～5滴及维生素E 4～6ml，再加入苯氧乙醇3～5ml，用电磁搅拌器搅拌基质20-30小时，得面膜基质。
本发明与常规美白面膜相比较，效果显著，同时使用安全方便，副作用更少。
具体实施方式
本发明的是一种美白面膜，有效成分为竹叶黄酮提取物、α-熊果苷和光果甘草提取物。
每制备1000ml面膜精华液中，其有效成分为以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物 0.1～0.3克、α-熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克；其余为面膜基质的常规辅料。
优选的，每制备1000ml面膜精华液包括以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.1～ 0.3克、α-熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克、黄原胶1～3克、丙二醇45～55克、三甲基甘氨酸25～35克、海藻提取物25～35克、尿囊素1～3克、透明质酸钠 0.1～0.5克、香精1～5滴、维生素E 4～6ml、苯氧乙醇3～5ml、羟苯甲酯0.5～1.5克、尼泊金0.5～1.5克，水余量。
最优选的，每制备1000ml面膜精华液中包含竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.1克。
所述含竹叶黄酮提取物的美白面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)采用常规工艺制备面膜基质。例如，称取黄原胶1～3克、丙二醇45～55克、三甲基甘氨酸25～35克、海藻提取物25～35克、尿囊素1～3克、羟苯甲酯0.5～1.5克、尼泊金0.5～1.5克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精1～5滴及维生素E 4～ 6ml，再加入苯氧乙醇3～5ml，用电磁搅拌器搅拌基质20-30小时。
(2)制备面膜精华液
称取竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α-熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15 克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌20-30小时。
(5)制备美白面膜
取15-20ml(最优选20ml)面膜精华液倒入铝箔袋中(例如一般规格为15cm*15cm)，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜。
由上述方法制得含竹叶黄酮提取物的美白面膜。
实施例1
【处方】竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.1克、黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、透明质酸钠0.3克、香精3滴、维生素E 5ml、苯氧乙醇4ml、羟苯甲酯1克、尼泊金1克。
【制法】称取黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、羟苯甲酯1克、尼泊金1克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.3克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精3滴及维生素E 5ml，再加入苯氧乙醇4ml，用电磁搅拌器搅拌基质24小时。称取竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.1克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌24小时，得1000ml面膜精华液。取20ml面膜精华液倒入15cm*15cm铝箔袋中，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜，即得。
实施例2
【处方】竹叶黄酮提取物0.1克、α-熊果苷0.05克、光果甘草提取物0.05克、黄原胶1克、丙二醇45克、三甲基甘氨酸25克、海藻提取物25克、尿囊素1克、透明质酸钠0.1克、香精1滴、维生素E 4ml、苯氧乙醇3ml、羟苯甲酯0.5克、尼泊金0.5克。
【制法】称取黄原胶1克、丙二醇45克、三甲基甘氨酸25克、海藻提取物25克、尿囊素1克、羟苯甲酯0.5克、尼泊金0.5克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.1克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精1滴及维生素E 4ml，再加入苯氧乙醇3ml，用电磁搅拌器搅拌基质24小时。称取竹叶黄酮提取物0.1克、α-熊果苷0.05克、光果甘草提取物0.05克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌24小时，得1000ml面膜精华液。取20ml面膜精华液倒入15cm*15cm 铝箔袋中，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜，即得。
实施例3
【处方】竹叶黄酮提取物0.3克、α-熊果苷0.15克、光果甘草提取物0.15克、黄原胶3克、丙二醇55克、三甲基甘氨酸35克、海藻提取物35克、尿囊素3克、透明质酸钠0.5克、香精5滴、维生素E 6ml、苯氧乙醇5ml、羟苯甲酯1.5克、尼泊金1.5克。
【制法】称取黄原胶3克、丙二醇55克、三甲基甘氨酸35克、海藻提取物35克、尿囊素3克、羟苯甲酯1.5克、尼泊金1.5克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.5克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精5滴及维生素E 6ml，再加入苯氧乙醇5ml，用电磁搅拌器搅拌基质24小时。称取竹叶黄酮提取物0.3克、α-熊果苷0.15克、光果甘草提取物0.15克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌24小时，得1000ml面膜精华液。取20ml面膜精华液倒入15cm*15cm 铝箔袋中，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜，即得。
实施例4
【处方】竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.15克、黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、透明质酸钠0.3克、香精3滴、维生素E 5ml、苯氧乙醇4ml、羟苯甲酯1克、尼泊金1克。
【制法】称取黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、羟苯甲酯1克、尼泊金1克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.3克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精3滴及维生素E 5ml，再加入苯氧乙醇4ml，用电磁搅拌器搅拌基质24小时。称取竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.15克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌24小时，得1000ml面膜精华液。取20ml面膜精华液倒入15cm*15cm 铝箔袋中，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜，即得。
实施例5
【处方】竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.15克、光果甘草提取物0.1克、黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、透明质酸钠0.3克、香精3滴、维生素E 5ml、苯氧乙醇4ml、羟苯甲酯1克、尼泊金1克。
【制法】称取黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、羟苯甲酯1克、尼泊金1克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.3克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精3滴及维生素E 5ml，再加入苯氧乙醇4ml，用电磁搅拌器搅拌基质24小时。称取竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.15克、光果甘草提取物0.1克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌24小时，得1000ml面膜精华液。取20ml面膜精华液倒入15cm*15cm 铝箔袋中，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜，即得。
实施例6
【处方】竹叶黄酮提取物0.1克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.1克、黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、透明质酸钠0.3克、香精3滴、维生素E 5ml、苯氧乙醇4ml、羟苯甲酯1克、尼泊金1克。
【制法】称取黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、羟苯甲酯1克、尼泊金1克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.3克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精3滴及维生素E 5ml，再加入苯氧乙醇4ml，用电磁搅拌器搅拌基质24小时。称取竹叶黄酮提取物0.1克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.1克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌24小时，得1000ml面膜精华液。取20ml面膜精华液倒入15cm*15cm铝箔袋中，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜，即得。
实施例7
【处方】竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.15克、光果甘草提取物0.15克、黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、透明质酸钠0.3克、香精3滴、维生素E 5ml、苯氧乙醇4ml、羟苯甲酯1克、尼泊金1克。
【制法】称取黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、羟苯甲酯1克、尼泊金1克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.3克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精3滴及维生素E 5ml，再加入苯氧乙醇4ml，用电磁搅拌器搅拌基质24小时。称取竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.15克、光果甘草提取物0.15克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌24小时，得1000ml面膜精华液。取20ml面膜精华液倒入15cm*15cm 铝箔袋中，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜，即得。
实施例8
【处方】竹叶黄酮提取物0.3克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.1克、黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、透明质酸钠0.3克、香精3滴、维生素E 5ml、苯氧乙醇4ml、羟苯甲酯1克、尼泊金1克。
【制法】称取黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、羟苯甲酯1克、尼泊金1克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.3克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精3滴及维生素E 5ml，再加入苯氧乙醇4ml，用电磁搅拌器搅拌基质24小时。称取竹叶黄酮提取物0.3克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.1克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌24小时，得1000ml面膜精华液。取20ml面膜精华液倒入15cm*15cm铝箔袋中，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜，即得。
实施例9
【处方】竹叶黄酮提取物0.3克、α-熊果苷0.05克、光果甘草提取物0.05克、黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、透明质酸钠0.3克、香精3滴、维生素E 5ml、苯氧乙醇4ml、羟苯甲酯1克、尼泊金1克。
【制法】称取黄原胶2克、丙二醇48克、三甲基甘氨酸30克、海藻提取物30克、尿囊素2克、羟苯甲酯1克、尼泊金1克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.3克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精3滴及维生素E 5ml，再加入苯氧乙醇4ml，用电磁搅拌器搅拌基质24小时。称取竹叶黄酮提取物0.3克、α-熊果苷0.05克、光果甘草提取物0.05克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌24小时，得1000ml面膜精华液。取20ml面膜精华液倒入15cm*15cm 铝箔袋中，再放入折叠好的空白蚕丝面膜，用封口机封口，按压使面膜液均匀沾湿蚕丝面膜，即得。
实验例1清除DPPH自由基能力测定
(1)DPPH溶液配制
精密称取DPPH粉末0.00508g溶于100ml无水乙醇中，超声5min，充分振摇，使上下各部分均匀。取1ml该DPPH溶液，在519nm处测A值。
(2)样本液配制
含竹叶黄酮提取物面膜配方水溶液配制：精密称取α-熊果苷0.01g、光果甘草提取物0.01g、竹叶黄酮提取物0.02g于烧杯中，加适量蒸馏水搅拌，定容于100ml容量瓶中，于70℃,100Hz条件下超声溶解60min。
维生素C溶液配制：精密称取0.02gVc(含量≥99.7％)于烧杯中，加入10ml蒸馏水溶解，定容于100ml棕色容量瓶中，避光低温保存。
茶多酚配制：精密称取0.02g茶多酚(纯度UV≥98％)于烧杯中，加入10ml蒸馏水溶解，定容于100ml棕色容量瓶中，避光低温保存。
(3)DPPH自由基清除实验预试
取DPPH溶液2ml，往其中滴加少量样品液，加样时，先少加后渐加，边加边混合均匀，并观察溶液褪色情况，当溶液基本褪色时，记下样品量。此加样量为样本最大用量，在此基础上往前设置5个用量，计算相对应的浓度梯度，使之成等差数列。
(4)一系列梯度浓度样本液的配制
分别量取4ml,8ml,12ml,16ml,20ml的0.2mg/ml维生素C溶液、茶多酚溶液、含竹叶黄酮提取物面膜配方水溶液于烧杯中，加入适量蒸馏水，使各烧杯中溶液总体积为20ml,配制成浓度为0.04mg/ml,0.08mg/ml,0.12mg/ml,0.16mg/ml,0.2mg/ml的一系列梯度浓度面膜配方溶液。
(5)清除自由基能力的测定
取2ml 0.05mg/ml DPPH和2ml无水乙醇，充分混合，测定A值，此值为A0；取2ml0.05mg/ml DPPH和2ml不同浓度样本混合，于室温下避光放置30min，在波长517nm处测其吸光度，此值为Ai；以4ml无水乙醇为空白对照组。
清除率R计算公式：E(DPPH)(％)＝[A0－Ai/A0]×100％。
(6)实验结果
DPPH自由基是一种很稳定的以氮为中心的自由基，对其清除的效果表明受试药物具有降低羟自由基、烷自由基或过氧自由基的浓度及打断脂质过氧化反应链的作用。当DPPH 自由基被清除后，其在519nm处的吸光度减小。
由表1可以看出，随着浓度的增加，三者都表现出很强的清除自由基能力，清除率均在90％以上。在相同浓度下，DPPH自由基清除能力：VC>面膜水溶液>茶多酚。
表1. DPPH自由基清除结果
实验例2超氧负离子(O2－)的清除能力测定
(1)pH8.2的Tris-Hcl缓冲液配制
Tris溶液配制：称取0.60gTris粉末于烧杯中，加入50ml水，搅拌溶解。
0.1mol/L Hcl配制：量取0.3ml36％浓盐酸加水稀释至100ml，备用。
pH8.2的Tris-Hcl缓冲液配制：量取22.9ml 0.1mol/L Hcl于50ml Tris溶液中，搅拌均匀，加水至100ml，搅拌均匀，测定pH值并加水调pH值至8.2。
(2)样本液与邻苯三酚溶液配制
样本液的配制与实验例1步骤(2)相同。
邻苯三酚溶液配制：取0.06g邻苯三酚粉末，加水10ml溶解，搅拌均匀，超声均匀。
(3)超氧负离子(O2－)的清除实验
取5mlTris-Hcl+50uL邻苯三酚，充分混合，25℃水浴加热30min，在325nm下测定吸光度，30s时测定一次吸光度值，此值为A030s,300s时测定一次吸光度值，此值为A0300s； A0＝A0300s-A030s。
取5ml Tris-Hcl与1ml样本液充分混合，25℃恒温水浴30min，加入25℃预热4.5mmol/l 的邻苯三酚50ul，立刻振摇，在325nm下测定吸光度，30s时测定一次吸光度值，此值为 Ai30s,300s时测定一次吸光度值，此值为Ai300s，Ai＝Ai300s-Ai30s。
取5ml Trisz-Hcl为空白对照组；
清除率R计算公式：E(O2－)(％)＝[(A0－Ai)/A0]×100％。
(4)实验结果
邻苯三酚自氧化法：超氧自由基难用于一般方法和检测，但是在弱碱性条件下，邻苯三酚能发生自氧化反应，生成O2－和有色中间产物，该中间产物在波长320nm处有一特征吸收峰。在初始阶段，中间产物量与时间成线性关系。当加入O2－清除剂时，它能迅速与 O2－反应，从而阻止中间产物的积累，致使溶液在波长325nm处吸光度下降。故可以通过测定A320值来评价清除剂对O2－的清除作用。
由表2可知,三者均具有一定的超氧负离子清除作用,在相同浓度下，超氧负离子清除能力：VC>茶多酚>面膜水溶液。但随着浓度变化，VC与面膜水溶液的超氧负离子清除率与浓度不成比例关系,实验结果不稳定。重复实验2次，结果相差不大。可判断三者均具有一定的超氧自由基清除作用。
表2超氧负离子(O2－)清除结果
实验例3对羟自由基的清除能力测定
(1)9mmol/L FESO4溶液配制
精密称取0.25g FeSO4粉末于烧杯中，加100ml水，搅拌溶解，得淡黄绿色溶液，密封避光保存。
(2)8.8mmol/L双氧水配制
称取9.94g 30％过氧化氢，蒸馏水定容至100ml，取1ml稀释100倍。
(3)9mmol/L乙醇-水杨酸溶液配制
精密称取0.13g水杨酸，乙醇溶解，定容至100ml。
(4)样本液配制
样本液的配制与实验例1步骤(2)相同。
(5)羟自由基的清除作用
各溶液的加入量按照表3所示，在试管中依次加入9mmol/L FeSO4溶液、9mmol/L乙醇-水杨酸溶液，后加入适量蒸馏水，最后加入8.8mmol/L双氧水后摇匀，37℃水浴加热15min 后取出，在510nm处测其吸光度A0。A0测定时，参比溶液为不加双氧水的体系。按上述方法，加入表3所示的各溶液，来测定吸光度AX，Ax0，Ax和A0测定时，参比溶液为蒸馏水。
表3
注：反应溶液的总体积为15ml 清除率％＝(A0+Ax0-Ax)/A0×100％
(7)实验结果
水杨酸捕获法：利用Fenton反应产生羟自由基：H2O2+Fe2+＝·OH+H2O+Fe3+在反应体系中加入水杨酸，Fenton反应生成的羟自由基与水杨酸反应，生成于510nm处有特殊吸收的2,3-二羟基苯甲酸，如果向反应体系中加入具有清除羟自由基功能的被测物，就会减少生成的羟自由基，从而使有色化合物的生成量相应减少。采用固定反应时间法，在510 nm处测量含被测物反应液的吸光度，并与空白液比较，以测定被测物对羟自由基的清除作用。
由表4可得，三者均对羟自由基有一定的清除作用。其中VC对羟自由基的清除作用很强，随着浓度增大，清除率逐渐增大。茶多酚对对羟自由基的清除作用明显，在一定浓度后趋于稳定。面膜水溶液对对羟自由基的清除作用较弱，同时不够稳定。相同浓度下，清除羟基自由基能力：VC>茶多酚>面膜水溶液。
表4羟自由基清除结果
实验例4美白实验
(1)细胞培养
取生长状况良好的小鼠黑色素瘤细胞，用含有10％胎牛血清的1640培养液进行培养，置于37℃，5％CO2的恒温孵育箱内，取对数生长期的细胞进行实验。
(2)黑色素含量测定
取对数生长期细胞，孵育24小时后，分别给予不同浓度的竹叶黄酮提取物，每孔加入 100μl，观察细胞状态，转移到恒温孵育箱内孵育24小时；作用24小时后，弃上清液，用PBS缓冲液轻轻冲洗次，然后加入100μl浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液，37℃水浴1小时，最后通过多功能酶标仪测460nm处的吸光值，计算相对黑素含量。
(3)酪氨酸酶活性测定
取对数生长期细胞，孵育24小时后，分别给予不同浓度的竹叶黄酮提取物，给药后转移到恒温孵育箱内孵育24小时；作用24小时后，弃上清液，用PBS缓冲液轻轻冲洗2次，每孔加入100μl 1％TritonX-100，震荡5min，转移到-20℃冰箱内作用1h，1h后取出，随室温融化使细胞完全裂解，然后每孔再加入100μl0.1％L-DOPA，转移到恒温孵育箱内孵育2 小时，最后通过多功能酶标仪测460nm处的吸光值，计算相对酪氨酸酶活性。
(4)实验结果
由表5可以看出，随着竹叶黄酮提取物浓度的增加，细胞内黑色素的相对含量逐渐下降，其中200μg/ml的竹叶黄酮提取物干预下细胞内黑色素的含量与50μg/ml的熊果苷干预下的黑色素含量差不多，说明对黑色素合成的抑制作用，200μg/ml的竹叶黄酮提取物与50μg/ml的熊果苷药效相当。
由表6可以看出，随着竹叶黄酮提取物浓度的增加，细胞内酪氨酸酶的活性呈现下降的趋势，其中200μg/ml的竹叶黄酮提取物干预下细胞内酪氨酸酶的活性与50μg/ml的熊果苷干预下酪氨酸酶的活性差不多，说明竹叶黄酮提取物可能通过抑制酪氨酸酶的活性，进而影响了细胞黑色素的合成。
表5不同浓度竹叶黄酮提取物小鼠黑色素瘤细胞内相对黑素含量(X±SD，n＝3)
注：与空白对照组相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01
表6不同浓度竹叶黄酮提取物小鼠黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性(X±SD，n＝3)
注：与空白对照组相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01。

Claims (6)

1.一种含竹叶黄酮提取物的美白面膜，其特征在于：每制备1000ml面膜精华液中，其有效成分为以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α-熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克。
2.根据权利要求1所述的含竹叶黄酮提取物的美白面膜，其特征在于：每制备1000ml面膜精华液包括以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α-熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克，其余为面膜基质的常规辅料。
3.根据权利要求2所述的含竹叶黄酮提取物的美白面膜，其特征在于：每制备1000ml面膜精华液包括以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α-熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克、黄原胶1～3克、丙二醇45～55克、三甲基甘氨酸25～35克、海藻提取物25～35克、尿囊素1～3克、透明质酸钠0.1～0.5克、香精1～5滴、维生素E 4～6ml、苯氧乙醇3～5ml、羟苯甲酯0.5～1.5克、尼泊金0.5～1.5克，水余量。
4.根据权利要求1、2或3所述的含竹叶黄酮提取物的美白面膜，其特征在于：每制备1000ml面膜精华液中，其有效成分为以下重量配比的组分：竹叶黄酮提取物0.2克、α-熊果苷0.1克、光果甘草提取物0.1克。
5.一种含竹叶黄酮提取物的美白面膜的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)制备面膜基质；
(2)制备面膜精华液：称取竹叶黄酮提取物0.1～0.3克、α-熊果苷0.05～0.15克、光果甘草提取物0.05～0.15克，加入到面膜基质中，用电磁搅拌器搅拌20-30小时，得面膜精华液。
6.根据权利要求5所述的含竹叶黄酮提取物的美白面膜的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，称取黄原胶1～3克、丙二醇45～55克、三甲基甘氨酸25～35克、海藻提取物25～35克、尿囊素1～3克、羟苯甲酯0.5～1.5克、尼泊金0.5～1.5克，加入适量水，在85℃水浴锅中加热搅拌至完全溶解。搅拌冷却到70～65℃时加入水预溶好的透明质酸钠0.1～0.5克，继续冷却到50～45℃，搅拌加入香精1～5滴及维生素E 4～6ml，再加入苯氧乙醇3～5ml，用电磁搅拌器搅拌基质20-30小时，得面膜基质。
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