CN109554310A - 一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂 - Google Patents

一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂 Download PDF

Info

Publication number
CN109554310A
CN109554310A CN201811492635.2A CN201811492635A CN109554310A CN 109554310 A CN109554310 A CN 109554310A CN 201811492635 A CN201811492635 A CN 201811492635A CN 109554310 A CN109554310 A CN 109554310A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
nitrobacteria
bacteria
denitrifying bacteria
water body
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201811492635.2A
Other languages
English (en)
Inventor
肖梅
李建
向文良
庞凯
宋菲菲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SICHUAN QINGHE TECHNOLOGY Co Ltd
Original Assignee
SICHUAN QINGHE TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SICHUAN QINGHE TECHNOLOGY Co Ltd filed Critical SICHUAN QINGHE TECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201811492635.2A priority Critical patent/CN109554310A/zh
Publication of CN109554310A publication Critical patent/CN109554310A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C02F3/347—Use of yeasts or fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/10—Inorganic compounds
    • C02F2101/16—Nitrogen compounds, e.g. ammonia

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)

Abstract

本发明介绍了一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂，包括如下步骤：真菌菌丝球培养、耗氧反硝化细菌培养、硝化细菌培养、强适应能力硝化细菌富集培养、菌丝球固定反硝化细菌和硝化细菌；菌丝球固定反硝化细菌和硝化细菌时，先固定反硝化细菌，将其固定于菌丝球内，后固定强适应能力的硝化细菌，将其固定于菌丝球表面，通过两步包埋法，得到本发明的用于消减水体氨氮的生物菌剂。本发明介绍的用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂，能够提高硝化细菌和反硝化细菌在水体中的存活率，提升其繁殖能力和繁殖速度，使其能够充分降解污染水体中的氨氮，达到高效处理污水的效果。

Description

一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂
技术领域
本发明涉及水环境治理技术领域，具体涉及一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂。
背景技术
随着城市的发展，工业污染和生活污染虽然得到了一定的控制，但排到河道和湖泊的污水还是不容乐观，偷排、未达标的排放现象仍然存在，导致水体的自我修复能力减弱，以致水体发黑、发臭。现有的水环境治理方式可采用物理法、化学法、植物法、微生物法等几种，物理法对水体氨氮具有一定的降解效率，但其能耗高，易回复；化学法见效快，效果明显，但容易造成二次污染；采用植物法也可降低水环境的氨氮，但植物应用范围较窄，成本也高；采用微生物法处理水环境具有十分可观的前景。微生物繁殖快、易培养，容易获得大量生命体，处理污染水的能力也强。目前，利用硝化细菌和耗氧反硝化细菌处理污染水的研究越来越丰富，成果也越来越多。硝化细菌首先进行异氧硝化作用将水中的还原态氮(包括有机态氮)氧化成NO2－和NO3－，进而耗氧反硝化细菌能在有氧条件下利用水体中的NO2－和NO3－还原为含氮气体(NO，N2O和N2)，进而达到生物脱氮的作用。
近年来，硝化细菌和耗氧反硝化细菌处理水污染的研究日益完善，国内外在硝化细菌和耗氧反硝化细菌处理水污染方面也取得了一定的进展，以前认为反硝化细菌皆是厌氧的，直到耗氧反硝化细菌的发现打破了硝化细菌与反硝化细菌生长条件的界限，我们可以同时使用硝化细菌和反硝化细菌进而达到生物快速脱氮的目的。相对传统方法来说，利用微生物处理水污染具有不造成二次污染、成本低、能高效脱氮的优点，同时，耗氧反硝化细菌又能突破传统使用硝化细菌和反硝化细菌只能在不同的处理池中作用的界限，简化了处理步骤，在水环境治理中具有广阔的应用前景。
但是，细菌的细胞很小，在水中易分散、不易存活，且硝化细菌严格自养、生长缓慢，在水体中不易存活且易被其他细菌淘汰，采用真菌生成菌丝球固定细菌，将易分散、不易存活的细菌包埋在菌丝球中，能够很大程度的提高细菌在水中的存活率，然而，现有的菌丝球固定硝化细菌和反硝化细菌的方法，硝化细菌和反硝化细菌在菌丝球中分散不均匀，且二者同时分布于菌丝球内的不同部位，在水体中作用时，位于菌丝球内部的细菌获得溶解氧的速度和量远远小于位于菌丝球表面的细菌，硝化细菌属于好氧细菌，位于菌丝球内部的硝化细菌因为溶解氧不足难以起到作用，在一定程度上削弱了硝化细菌的作用，使得菌丝球固定硝化细菌并未起到增加硝化细菌的存活率的作用。硝化细菌、反硝化细菌在水体中的存活率依然很差，不能很好的起到消减水体中氨氮的作用。
发明内容
为了解决上述现有技术中的不足，本发明介绍了一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂，能够提高硝化细菌和反硝化细菌在水体中的存活率，提升其繁殖能力和繁殖速度，使其能够充分降解污染水体中的氨氮，达到处理污水的效果。
为了达到上述目的，本发明的技术方案为：一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)真菌菌丝球培养，将真菌接种至真菌培养基中，在真菌培养工艺下进行培养，得到菌丝球培养液；
(2)耗氧反硝化细菌培养，将好氧反硝化细菌接种至好氧反硝化细菌培养基中，在好氧反硝化细菌培养工艺下进行培养，得到好氧反硝化细菌培养液；
(3)硝化细菌培养，将硝化细菌接种至硝化细菌培养基中，在硝化细菌培养工艺下进行培养，得到硝化细菌培养液；
(4)强适应能力硝化细菌富集培养，将步骤(3)所得的硝化细菌培养液接种至强适应能力硝化细菌培养基中，在强适应能力硝化细菌培养工艺下进行培养，得到强适应能力硝化细菌培养液；
(5)菌丝球固定反硝化细菌和硝化细菌
步骤(5)包括如下步骤：a、将菌丝球培养液和反硝化细菌培养液按照比例加入到真菌培养基中进行培养，直到菌丝球直径长到2～2.5mm，得到一级菌丝球菌液；b、过滤一级菌丝球菌液，得到一级菌丝球；c、将一级菌丝球加入真菌培养基中制成二级菌丝球菌液；d、将二级菌丝球菌液和强适应能力硝化细菌培养液按照比例加入真菌培养基中进行培养直到菌丝球直径长到2.5～3mm，得到三级菌丝球菌液；d、过滤三级菌丝球菌液，得到最终的生物菌剂。
采用两步包埋法使硝化细菌和反硝化细菌分布在菌丝球的不同结构上，使硝化细菌处于菌丝球表面，反硝化细菌处于菌丝球内部，这样处理既能满足硝化细菌的耗氧需求，也能首先将水体中的氨氮降解为硝酸根，以便于进一步被反硝化细菌利用，与它们的作用特点和作用原理相适应。通过硝化细菌作用降解的硝酸根能在疏松的菌丝球网状结构内进行良好的传质，进一步被内部的反硝化细菌作用，此包埋方法使氨氮降解速率大大提高；另外，菌丝还能提供硝化细菌营养物质，在污染程度不高的水体，硝化细菌也能快速生长。
作为优选的，步骤(5)中菌丝球培养液和反硝化细菌培养液的体积比满足3～5:0.5～1.5；步骤(5)中二级菌丝球菌液和强适应能力硝化细菌培养液的体积比满足3～5:0.5～1.5。
作为优选的，步骤(5)的步骤a中的培养工艺满足：培养温度为28℃，搅拌转速为150～170r/min，培养时间为24～48h；步骤(5)的步骤c的培养工艺满足：培养温度为28℃，搅拌转速为150～170r/min，培养时间为24～48h。
作为优选的，步骤(4)中的强适应能力硝化细菌培养基包括有氯化铵，强适应能力硝化细菌培养基的氨氮含量为20～30mg/L，pH值为8.0～8.5，溶解氧为1～3mg/L。
作为优选的，步骤(4)中的强适应能力硝化细菌培养工艺为：37℃培养5～8d，每隔6～8h通一次氧，每次通氧时间为30～60min。
采用强适应能力硝化细菌富集培养的方法，在接近污染水体的条件下对硝化细菌进行驯化，使得硝化细菌在进入水体后能够快速适应水体环境，在水体中生长繁殖快，存活率高，能够迅速分解水体中的氨氮，提高水体氨氮的净化效率。
作为优选的，步骤(1)中的真菌为黑曲霉ATCC 38163。
作为优选的，步骤(1)和步骤(5)中的真菌培养基的制备方法包括如下步骤：a、马铃薯去皮，切成小块，加入水中，马铃薯小块的含量为200g/L；b、煮沸25～30min，用纱布过滤，补足水至原来刻度；c、向溶液中加入10g/L的葡萄糖；d、调节pH值至5.0～5.5；e、装入锥形瓶置于灭菌锅，115℃灭菌15～20min，取出备用；
步骤(1)中的真菌培养工艺为：按1.0×105～5.0×105孢子/mL真菌培养基的接种量接种霉菌孢子，培养温度为28℃，搅拌转速为150～170r/min，培养24～48h，得到菌球直径为1～2mm的菌丝球培养液。
作为优选的，步骤(2)中的好氧反硝化细菌培养基包括如下重量份数的组分：乙酸钠0.3～0.8份，硝酸钾0.05～0.15份，磷酸氢二钾0.01～0.03份，氯化镁0.01～0.03份，氯化钙0.005～0.15份，水998～1000份；
步骤(2)中的好氧反硝化细菌培养基的pH值为7.0～7.5，于121℃灭菌15～20min；
步骤(2)中的好氧反硝化细菌培养工艺为:将购买的反硝化细菌加入到好氧反硝化细菌培养基中，所述反硝化细菌的加入量为1g反硝化细菌/50mL好氧反硝化细菌培养基，24小时曝气通氧、37℃培养7～10d。
作为优选的，步骤(3)中的硝化细菌培养基包括如下重量份数的组分：亚硝酸钠1～2份，硫酸镁0.02～0.05份，硫酸锰0.005～0.02份，磷酸氢二钾0.5～1份，无水碳酸钠0.5～2份，磷酸二氢钠0.2～0.3份，水995～1000份；
步骤(3)中的硝化细菌培养基的pH值为7.0～7.5，于121℃灭菌15～20mi n；
步骤(3)中的硝化细菌培养工艺为:将购买的硝化细菌加入到硝化细菌培养基中，所述硝化细菌的加入量为1g硝化细菌/50mL硝化细菌培养基，24小时曝气通氧、37℃培养7～10d。
一种用于消减水体氨氮的生物菌剂，由权利要求1～9任一的制备方法制得。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
采用菌丝球两步法包埋硝化细菌和耗氧反硝化细菌，使硝化细菌处于菌丝球表面，反硝化细菌处于菌丝球内部，这样处理既能满足硝化细菌的耗氧需求，也能首先将氨氮降解为硝酸根，以便于进一步被反硝化细菌利用，与消化细菌和反硝化细菌的作用特点和作用原理相适应，此外本发明对硝化细菌进行了驯化，使得其进入水体后能够快速适应水体环境，存活率高，繁殖能力强，本发明提供的用于消减水体氨氮的生物菌剂具有稳定性高、生物活性不易流失、成本低、降解氨氮效率高的优点，解决了硝化细菌在实际水体中不易存活的缺点，缩短了处理历程，突破了传统方法处理污水的弊端，给水环境治理提供了一种新的思路。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明进行进一步的阐述。
实施例一
本实施例提供一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)真菌菌丝球培养
真菌为黑曲霉ATCC 38163(Aspergillus nidulans)，购买于美国菌种保藏中心；
真菌培养基的制备：a、马铃薯去皮，切成小块，加入水中，马铃薯小块的含量为200g/L；b、煮沸25～30min，用纱布过滤，补足水至原来刻度；c、向溶液中加入10g/L的葡萄糖；d、调节pH值至5.0～5.5；e、装入锥形瓶置于灭菌锅，115℃灭菌15～20min，取出备用；
真菌培养工艺为：按1.0×105～5.0×105孢子/mL真菌培养基的接种量接种霉菌孢子，培养温度为28℃，搅拌转速为150～170r/min，培养24～48h，得到菌球的直径1～2mm的菌丝球培养液；
(2)耗氧反硝化细菌培养
好氧反硝化细菌培养基组分及含量：乙酸钠0.5g/L，硝酸钾0.1g/L，磷酸氢二钾0.02g/L，氯化镁0.02g/L，氯化钙0.01g/L，水1L；
将好氧反硝化细菌培养基pH调至7.0～7.5，装入锥形瓶置于灭菌锅，121℃灭菌15～20min，取出备用；
好氧反硝化细菌培养条件：将购买的反硝化细菌按1∶50(W：V)加入到培养基中，24小时曝气通氧、37℃培养7～10天，得到耗氧反硝化细菌培养液；
(3)硝化细菌培养
硝化细菌培养基组分及含量：亚硝酸钠1g/L，硫酸镁0.03g/L，硫酸锰0.01g/L，磷酸氢二钾0.75g/L，无水碳酸钠1g/L，磷酸二氢钠0.25g/L，水1L；
将硝化细菌培养基的pH调至7.0～7.5，装入三角瓶置于灭菌锅，121℃灭菌15～20min，取出备用；
硝化细菌培养工艺：将购买的硝化细菌按1∶50(W∶V)加入到培养基中，24小时曝气通氧、37℃培养7～10d，得到硝化细菌培养液；
(4)强适应能力硝化细菌富集培养
强适应能力硝化细菌富集培养基：在硝化细菌培养基内添加氯化铵，使得培养基的氨氮浓度处于20～30mg/L，调pH至8.0-8.5，保持培养基中溶氧为1～3mg/L；
强适应能力硝化细菌富集培养工艺：向强适应能力硝化细菌富集培养基中加入步骤(4)所得的硝化细菌培养液，37℃培养5～8d，每隔6～8h通一次氧，每次通氧时间为30～60min，直到硝化细菌大量生长，得到强适应能力硝化细菌培养液；
(5)菌丝球固定反硝化细菌和硝化细菌
a、将菌丝球培养液和反硝化细菌培养液按照4:1的体积比加入到真菌培养基中进行培养，搅拌转速为150～170r/min，28℃培养24～48h，直到菌丝球直径长到2～2.5mm，得到一级菌丝球菌液；b、过滤一级菌丝球菌液，得到一级菌丝球；c、将一级菌丝球加入真菌培养基中制成二级菌丝球菌液；d、将二级菌丝球菌液和强适应能力硝化细菌培养液按照4:1的体积比加入真菌培养基中进行培养，搅拌转速为150～170r/min，28℃培养24～48h，直到菌丝球直径长到2.5～3mm，得到三级菌丝球菌液；d、过滤三级菌丝球菌液，得到最终的生物菌剂。
由本实施例的用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法制得的生物菌剂记为S-1。
实施例二
本实施例提供一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，除步骤(5)外，其余步骤同实施例一，本实施例的步骤(5)为：
a、将菌丝球培养液和反硝化细菌培养液按照3:1.5的体积比加入到真菌培养基中进行培养，搅拌转速为150～170r/min，28℃培养24～48h，直到菌丝球直径长到2～2.5mm，得到一级菌丝球菌液；b、过滤一级菌丝球菌液，得到一级菌丝球；c、将一级菌丝球加入真菌培养基中制成二级菌丝球菌液；d、将二级菌丝球菌液和强适应能力硝化细菌培养液按照3:1.5的体积比加入真菌培养基中进行培养，搅拌转速为150～170r/min，28℃培养24～48h，直到菌丝球直径长到2.5～3mm，得到三级菌丝球菌液；d、过滤三级菌丝球菌液，得到最终的生物菌剂。
由本实施例的用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法制得的生物菌剂记为S-2。
实施例三
本实施例提供一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，除步骤(5)外，其余步骤同实施例一，本实施例的步骤(5)为：
a、将菌丝球培养液和反硝化细菌培养液按照5:0.5的体积比加入到真菌培养基中进行培养，搅拌转速为150～170r/min，28℃培养24～48h，直到菌丝球直径长到2～2.5mm，得到一级菌丝球菌液；b、过滤一级菌丝球菌液，得到一级菌丝球；c、将一级菌丝球加入真菌培养基中制成二级菌丝球菌液；d、将二级菌丝球菌液和强适应能力硝化细菌培养液按照5:0.5的体积比加入真菌培养基中进行培养，搅拌转速为150～170r/min，28℃培养24～48h，直到菌丝球直径长到2.5～3mm，得到三级菌丝球菌液；d、过滤三级菌丝球菌液，得到最终的生物菌剂。
由本实施例的用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法制得的生物菌剂记为S-3。
实施例三
本实施例提供一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，除步骤(5)外，其余步骤同实施例一，本实施例的步骤(5)为：
a、将菌丝球培养液和反硝化细菌培养液按照3:0.5的体积比加入到真菌培养基中进行培养，搅拌转速为150～170r/min，28℃培养24～48h，直到菌丝球直径长到2～2.5mm，得到一级菌丝球菌液；b、过滤一级菌丝球菌液，得到一级菌丝球；c、将一级菌丝球加入真菌培养基中制成二级菌丝球菌液；d、将二级菌丝球菌液和强适应能力硝化细菌培养液按照5:1.5的体积比加入真菌培养基中进行培养，搅拌转速为150～170r/min，28℃培养24～48h，直到菌丝球直径长到2.5～3mm，得到三级菌丝球菌液；d、过滤三级菌丝球菌液，得到最终的生物菌剂。
由本实施例的用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法制得的生物菌剂记为S-4。
实验例
本实验例共设计五组实验，其中一组设计为空白对照组，将实施例一、实施例二、实施例三、实施例四所制得的生物菌剂S-1、S-2、S-3、S-4分别加入到四组实验的污水中，每组实验均添加曝气装置，每天取样检测水体中的氨氮含量，观察其对污水中氨氮的处理能力，本实验例中污水为天回镇鱼塘水样，生物菌剂的加入量为10g/L，表1为不同生物菌剂处理下水体中氨氮含量的数据对比。
表1不同生物菌剂处理下水体中氨氮含量(mg/L)对比
由表1可以看出，本发明的用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法制备的生物菌剂对水体中氨氮降解具有良好的效果，按照实施例一的制备方法制得的生物菌剂S-1加入水体作用72h后，其对于水体中氨氮的降解率已经达到79.6％。本发明的用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法制得的生物菌剂进入水体后具有较高的存活率，繁殖速度快，对氨氮的降解速率和降解率均有显著提高。
硝化细菌、反硝化细菌、真菌按照不同比例配比，制得的生物菌剂对水体中氨氮的消减能力不同，可根据实际需要调整各组分的配比。
以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)真菌菌丝球培养，将真菌接种至真菌培养基中，在真菌培养工艺下进行培养，得到菌丝球培养液；
(2)耗氧反硝化细菌培养，将好氧反硝化细菌接种至好氧反硝化细菌培养基中，在好氧反硝化细菌培养工艺下进行培养，得到好氧反硝化细菌培养液；
(3)硝化细菌培养，将硝化细菌接种至硝化细菌培养基中，在硝化细菌培养工艺下进行培养，得到硝化细菌培养液；
(4)强适应能力硝化细菌富集培养，将步骤(3)所得的硝化细菌培养液接种至强适应能力硝化细菌培养基中，在强适应能力硝化细菌培养工艺下进行培养，得到强适应能力硝化细菌培养液；
(5)菌丝球固定反硝化细菌和硝化细菌
所述步骤(5)包括如下步骤：a、将所述菌丝球培养液和所述反硝化细菌培养液按照比例加入到所述真菌培养基中进行培养，直到菌丝球直径长到2～2.5mm，得到一级菌丝球菌液；b、过滤所述一级菌丝球菌液，得到一级菌丝球；c、将所述一级菌丝球加入所述真菌培养基中制成二级菌丝球菌液；d、将所述二级菌丝球菌液和所述强适应能力硝化细菌培养液按照比例加入所述真菌培养基中进行培养直到菌丝球直径长到2.5～3mm，得到三级菌丝球菌液；d、过滤所述三级菌丝球菌液，得到最终的生物菌剂。
2.根据权利要求1所述的一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中所述菌丝球培养液和所述反硝化细菌培养液的体积比满足3～5:0.5～1.5；所述步骤(5)中所述二级菌丝球菌液和所述强适应能力硝化细菌培养液的体积比满足3～5:0.5～1.5。
3.根据权利要求1所述的一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)的所述步骤a中的培养工艺满足：培养温度为28℃，搅拌转速为150～170r/min，培养时间为24～48h；所述步骤(5)的所述步骤c的培养工艺满足：培养温度为28℃，搅拌转速为150～170r/min，培养时间为24～48h。
4.根据权利要求1所述的一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的所述强适应能力硝化细菌培养基包括有氯化铵，所述强适应能力硝化细菌培养基的氨氮含量为20～30mg/L，pH值为8.0～8.5，溶解氧为1～3mg/L。
5.根据权利要求1所述的一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的强适应能力硝化细菌培养工艺为：37℃培养5～8d，每隔6～8h通一次氧，每次通氧时间为30～60min。
6.根据权利要求1所述的一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的所述真菌为黑曲霉ATCC 38163。
7.根据权利要求1所述的一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)和所述步骤(5)中的真菌培养基的制备方法包括如下步骤：a、马铃薯去皮，切成小块，加入水中，马铃薯小块的含量为200g/L；b、煮沸25～30min，用纱布过滤，补足水至原来刻度；c、向溶液中加入10g/L的葡萄糖；d、调节pH值至5.0～5.5；e、装入锥形瓶置于灭菌锅，115℃灭菌15～20min，取出备用；
所述步骤(1)中的所述真菌培养工艺为：按1.0×105～5.0×105孢子/mL真菌培养基的接种量接种霉菌孢子，培养温度为28℃，搅拌转速为150～170r/min，培养24～48h，得到菌球直径为1～2mm的菌丝球培养液。
8.根据权利要求1所述的一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的所述好氧反硝化细菌培养基包括如下重量份数的组分：乙酸钠0.3～0.8份，硝酸钾0.05～0.15份，磷酸氢二钾0.01～0.03份，氯化镁0.01～0.03份，氯化钙0.005～0.15份，水998～1000份；
所述步骤(2)中的所述好氧反硝化细菌培养基的pH值为7.0～7.5，于121℃灭菌15～20min；
所述步骤(2)中的所述好氧反硝化细菌培养工艺为:将购买的反硝化细菌加入到所述好氧反硝化细菌培养基中，所述反硝化细菌的加入量为1g反硝化细菌/50mL好氧反硝化细菌培养基，24h曝气通氧、37℃培养7～10d。
9.根据权利要求1所述的一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中的所述硝化细菌培养基包括如下重量份数的组分：亚硝酸钠1～2份，硫酸镁0.02～0.05份，硫酸锰0.005～0.02份，磷酸氢二钾0.5～1份，无水碳酸钠0.5～2份，磷酸二氢钠0.2～0.3份，水995～1000份；
所述步骤(3)中的所述好氧反硝化细菌培养基的pH值为7.0～7.5，于121℃灭菌15～20min；
所述步骤(3)中的所述好氧反硝化细菌培养工艺为:将购买的硝化细菌加入到所述硝化细菌培养基中，所述硝化细菌的加入量为1g硝化细菌/50mL硝化细菌培养基，24h曝气通氧、37℃培养7～10d。
10.一种用于消减水体氨氮的生物菌剂，其特征在于，由权利要求1～9任一所述的制备方法制得。
CN201811492635.2A 2018-12-07 2018-12-07 一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂 Pending CN109554310A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811492635.2A CN109554310A (zh) 2018-12-07 2018-12-07 一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811492635.2A CN109554310A (zh) 2018-12-07 2018-12-07 一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109554310A true CN109554310A (zh) 2019-04-02

Family

ID=65869119

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811492635.2A Pending CN109554310A (zh) 2018-12-07 2018-12-07 一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109554310A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110819537A (zh) * 2019-09-17 2020-02-21 杭州师范大学 微色二孢属真菌hnu107及其氨气废气降解中的应用
CN110980961A (zh) * 2019-11-26 2020-04-10 浙江永续环境工程有限公司 一种脱氮菌剂及应用该菌剂的污水处理技术

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1149804A2 (en) * 2000-04-25 2001-10-31 Nisshinbo Industries, Inc. Process for nitrifying denitrifying organic waste water
CN1699220A (zh) * 2005-05-23 2005-11-23 南京工业大学 固定化细胞处理废水的方法及其装置
CN102826647A (zh) * 2012-08-15 2012-12-19 哈尔滨工业大学宜兴环保研究院 一种以菌丝球为载体的好氧反硝化反应器及同步硝化反硝化运行方法
CN107058282A (zh) * 2017-06-19 2017-08-18 曲阜师范大学 一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法
CN108707598A (zh) * 2018-05-29 2018-10-26 江南大学 一种以丝状真菌为载体强化反硝化细菌脱氮的方法
CN110407333A (zh) * 2019-07-23 2019-11-05 中国科学院南京地理与湖泊研究所 一种水平潜流湿地反硝化脱氮增强方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1149804A2 (en) * 2000-04-25 2001-10-31 Nisshinbo Industries, Inc. Process for nitrifying denitrifying organic waste water
CN1699220A (zh) * 2005-05-23 2005-11-23 南京工业大学 固定化细胞处理废水的方法及其装置
CN102826647A (zh) * 2012-08-15 2012-12-19 哈尔滨工业大学宜兴环保研究院 一种以菌丝球为载体的好氧反硝化反应器及同步硝化反硝化运行方法
CN107058282A (zh) * 2017-06-19 2017-08-18 曲阜师范大学 一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法
CN108707598A (zh) * 2018-05-29 2018-10-26 江南大学 一种以丝状真菌为载体强化反硝化细菌脱氮的方法
CN110407333A (zh) * 2019-07-23 2019-11-05 中国科学院南京地理与湖泊研究所 一种水平潜流湿地反硝化脱氮增强方法
US20210024390A1 (en) * 2019-07-23 2021-01-28 Nanjing Institute Of Geography And Limnology, Chinese Academy Of Sciences Method for enhancing nitrogen removal by denitrification in horizontal subsurface-flow constructed wetland

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YUXIANG LIU等: ""Simultaneous removal of carbon and nitrogen by mycelial pellets of a heterotrophic nitrifying fungus-Penicillium sp.L1"", 《JOURNAL OF BIOSCIENCE AND BIOENGINEERING》 *
何雪薇: ""固定化硝化污泥的定植方法及其去除水中氨氮的效能研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊）》 *
大学实验室基础训练教程 化学与生物专业": "《大学实验室基础训练教程 化学与生物专业》", 30 June 2018 *
孙晓杰编: "《生活垃圾生物反应器驯化填埋技术研究》", 30 September 2018 *
孙智毅: "一株异养硝化-好氧反硝化Cupriavidus sp.S1的筛选及降解特性研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊）》 *
孙移鹿: ""好氧反硝化菌的固定化应用及效能研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊）》 *
李友荣编: "《发酵生理学》", 30 November 1989 *
李望编: "《工业废水综合处理研究》", 30 June 2017 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110819537A (zh) * 2019-09-17 2020-02-21 杭州师范大学 微色二孢属真菌hnu107及其氨气废气降解中的应用
CN110819537B (zh) * 2019-09-17 2021-07-27 杭州师范大学 微色二孢属真菌hnu107及其氨气废气降解中的应用
CN110980961A (zh) * 2019-11-26 2020-04-10 浙江永续环境工程有限公司 一种脱氮菌剂及应用该菌剂的污水处理技术

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105712490B (zh) 一种兼养微生物营养转化处理高氨氮废水的方法
CN101899401B (zh) 含氨废水处理微生物菌剂及其制备方法
CN106242045B (zh) 一种好氧颗粒污泥快速培养方法
CN107324504B (zh) 一种用于养殖池塘水质改良的复合藻类菌剂及其制备方法
CN102718325B (zh) 培养高密度油脂微藻处理酵母工业废水的方法
CN101565240B (zh) 一种降氨氮和亚硝酸氮的水质改良微生态制剂的制备方法
CN109626584A (zh) 一种微藻处理酱油废水的方法
CN108545829A (zh) 一种水产养殖污水原位好氧脱氮处理净化的方法
CN103589672A (zh) 一种有效菌水质净化剂的制备方法
CN107364955A (zh) 一种用于处理生活污水的填料的挂膜方法
CN110002611A (zh) 一种养殖水体调节剂及其制备方法
CN104651282B (zh) 一种复合光合细菌制剂的制备方法
CN102745821B (zh) 用于污泥减量的复合微生物菌剂及其制备方法和应用
CN113215050A (zh) 一种用于污水治理的藻菌共生复合微生物制剂及其制备方法
CN109554310A (zh) 一种用于消减水体氨氮的生物菌剂的制备方法及生物菌剂
CN104651281A (zh) 一种改善水生动物产量和/或质量的光合细菌的制备方法
AU2020103345A4 (en) Method for treating phosphorus-containing wastewater with microalgae
CN103626302A (zh) 一种脱氮除磷菌种在线提取培养及驯化的污水处理方法
CN101724583B (zh) 处理含氨废水微生物菌群的生产方法
CN112574921A (zh) 利用餐厨垃圾制备有氧反硝化复合菌剂的方法及其应用
CN106434424B (zh) 具有污海水脱氮能力的弧菌及其用途
CN106754385B (zh) 一种利用蓝藻水华为原料培育小球藻属浮游植物的方法
CN109486723A (zh) 一种降解水体中氨氮的微生物菌及其应用
CN107827244A (zh) 一种用于养殖污水处理的菌藻复合剂及其制备方法
CN103436472A (zh) 一种用于改进池塘水质的复合微生态制剂

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190402

RJ01 Rejection of invention patent application after publication