CN109529102A - 一种基于细胞培养的医用功能敷料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种基于细胞培养的医用功能敷料，其组分如下：0.01～5％(w/v)糖胺聚糖类物质；0.002～0.005％(w/v)L‑盐酸组氨酸；0.01～0.018％(w/v)L‑盐酸赖氨酸；0.0005～0.001％(w/v)肌醇；0.0002～0.0005％(w/v)烟酰胺；0.001～1％(w/v)pH调节剂；0.1～5％(w/v)渗透压调节剂；其余为注射用水。本发明还公开了上述基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法。本发明公开的一种基于细胞培养的医用功能敷料中各种物质配比科学，pH值接近中性，渗透压接近人体渗透压，有利于受损黏膜的修复，并为黏膜表面提供了防护屏障。

Description

一种基于细胞培养的医用功能敷料及其制备方法
技术领域
本发明属于医疗药物领域，具体涉及一种基于细胞培养的医用功能敷料及其制备方法。
背景技术
黏膜是覆盖在人体消化道、呼吸道、膀胱、尿道等腔道内壁表面的一层薄膜，能分泌黏液，保持管腔湿润，在人体充当免疫系统的第一道防线。黏膜一般包括上皮层、固有层及黏膜肌层，黏膜上皮层细胞连接紧密，主要连接方式有紧密连接、中间连接、桥粒连接及半桥粒连接，这些连接方式可以阻止内毒素、微生物、热原等进入。黏膜在人体免疫反应中有着重要的屏障作用，包括机械屏障、生物屏障、化学屏障和免疫屏障，其中以机械屏障尤为重要。
正常膀胱黏膜表面存在一种保护机制，它能阻止晶体、细菌团块、致癌物质等沾附到膀胱黏膜上，这种保护机制即血——尿屏障，主要由尿路上皮黏膜表层GAG(葡萄糖氨基聚糖)层来实现的。因此尿路上皮功能至关重要，若尿路上皮GAG层损伤或缺陷，会影响血——尿屏障功能而导致膀胱黏膜通透性增加，尿中的微晶体、蛋白、细菌、离子或其他物质可以进入到黏膜固有层、黏膜肌层，甚至肌层而导致一系列不良反应，令患者苦不堪言。
膀胱炎是泌尿外科中的一种常见的、多发性疾病，近年来在我国的发病率呈不断上升趋势。该病具有顽固性、迁延性，治疗时间长且复发率高等特征。主要表现为尿频、尿急、尿痛、血尿、脓尿、腰腹酸痛等症状。患者若不尽早治疗或治疗方法不正确、不彻底，会对身心皆造成巨大伤害。严重者还会导致癌变的发生。据统计，我国肿瘤登记地区膀胱癌的发病率为6.61/10万，列恶性肿瘤发病率的第九位，占我国泌尿生殖系肿瘤发病率的第一位。其中，膀胱炎是诱发膀胱黏膜产生恶性肿瘤的主要病因之一。
从发病情况来看，膀胱炎可分为急性与慢性两种，两者又可互相转化，急性膀胱炎得不到彻底治疗可迁延成慢性，慢性膀胱炎在机体抵抗力降低或局部病变因素加重时，又可转化成急性发作。从致病机理来看，又可以分为细菌性膀胱炎和非细菌性膀胱炎。细菌性膀胱炎多为微生物感染，多采用抗生素治疗。非细菌性膀胱炎是一类病因学复杂、诊断较为困难、临床上不能完全治愈的一种膀胱慢性炎症状态，临床表现主要为尿频、尿急、夜尿、耻骨上膀胱区疼痛而排尿后缓解，部分患者可伴有尿痛、血尿等，尿培养无细菌生长。非细菌性膀胱炎的常见形式包括腺性膀胱炎、间质性膀胱炎、氯胺酮相关性膀胱炎、肿瘤治疗相关性(放射性/化学性)膀胱炎等。细菌性膀胱炎的治疗主要是抗菌药物的使用；而对于非细菌性膀胱炎的治疗，目前由于各种流行病学相关数据缺乏，病因、发病机制及生物学转归不完全明确，对各种治疗方式及疗效分析尚未形成统一标准，使得非细菌性膀胱炎的治疗显得异常混乱。
目前针对非细菌性膀胱炎的治疗方式有口服药物、膀胱灌注、手术治疗。口服药物副作用较大，起效慢，多用于炎症症状的缓解，易复发；膀胱灌注目前应用较为广泛，向膀胱内灌注药物，某些药物及其代谢产物可刺激膀胱黏膜引起严重的膀胱炎，引起化学性膀胱炎造成二次损伤；手术治疗作为一种侵入性治疗方式，风险高，易产生术后并发症。
研究表明，向膀胱内灌注氨基聚糖等物质，可帮助修复非细菌性膀胱炎患者受损的GAG层。此疗法目前应用较为广泛，但较单一用药，短期内虽能有效改善非细菌性膀胱患者不适症状，病情却容易反复发作，尚缺少双盲随机对照试验及队列研究评估其近期及远期效果。
L-盐酸赖氨酸、L-盐酸组氨酸、烟酰胺和肌醇是细胞基础培养基本组成成分，是细胞体外培养所需的必需营养成分，有利于细胞的存活以及增殖，促进受损黏膜的修复。并且L-盐酸赖氨酸和L-盐酸组氨酸为身体所需氨基酸，烟酰胺和肌醇也是B族维生素有利于黏膜损伤的修复。
发明内容
发明目的：针对现有技术的不足，本发明公开的一种基于细胞培养的医用功能敷料及其制备方法。本发明以糖胺聚糖类物质为基质，联合L-盐酸赖氨酸、L-盐酸组氨酸、烟酰胺和肌醇等细胞培养成分制备医用功能敷料；本产品能够暂时代替患者膀胱黏膜的机械屏障作用，使患者免受外界和自身炎性细胞侵害，并且促进受损黏膜修复，加快黏膜愈合速度。本发明中各成分为生物机体内天然存在的物质，生物相容性好，各组分配比科学合理，不会对机体造成二次伤害。
技术方案：一种基于细胞培养的医用功能敷料，其组分如下：
0.01％(w/v)～5％(w/v)糖胺聚糖类物质；
0.002％(w/v)～0.005％(w/v)L-盐酸组氨酸；
0.01％(w/v)～0.018％(w/v)L-盐酸赖氨酸；
0.0005％(w/v)～0.001％(w/v)肌醇；
0.0002％(w/v)～0.0005％(w/v)烟酰胺；
0.001％(w/v)～1％(w/v)pH调节剂；
0.1％(w/v)～5％(w/v)渗透压调节剂；
其余为注射用水。
进一步地，糖胺聚糖类物质为透明质酸钠、透明质酸锌、透明质酸铋、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、肝素中的至少一种。糖胺聚糖类物质具有良好的黏弹性、润滑性、成膜性和抑制炎性反应的功能，可在膀胱黏膜表面形成透气网状水化膜，有效地隔绝外界细菌微生物等病原体的侵入，并且能够促进细胞迁移有效促进损伤组织的修复。
更进一步地，糖胺聚糖类物质的含量优选为0.02％(w/v)～5％(w/v)。
更进一步地，糖胺聚糖类物质的分子量选择范围为1×103～3×106Da，优选为2.0×105～1.8×106Da，更优选为6.0×105～1.0×106Da。
进一步地，L-盐酸组氨酸的含量优选为0.003％(w/v)～0.0045％(w/v)。
进一步地，L-盐酸赖氨酸的含量优选为0.012％(w/v)～0.015％(w/v)。
进一步地，肌醇的含量优选为0.0006％(w/v)～0.0008％(w/v)。
进一步地，烟酰胺的含量优选为0.0003％(w/v)～0.0004％(w/v)。
进一步地，所述pH调节剂为磷酸缓冲液、碳酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液中的至少一种。
进一步地，所述pH调节剂的浓度优选0.001％(w/v)～0.01％(w/v)。
进一步地，所述渗透压调节剂为氯化钠、甘油、丙二醇、葡萄糖、海藻糖、山梨醇中的至少一种。
一种上述基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)按照比例将糖胺聚糖类物质加入到占注射用水总体积的1/2～2/3的注射用水中，以50～200rpm的速度低速搅拌12～16h，混合均匀后得到第一组分；
(2)按照比例将渗透压调节剂、L-盐酸组氨酸、L-盐酸赖氨酸、肌醇、烟酰胺、pH调节剂溶入到占注射用水总体积的1/10～1/4的注射用水中，分散均匀后得到第二组分；
(3)将步骤(1)得到的第一组分、步骤(2)得到的第二组分混合，然后添加剩余的注射用水，混合均匀后得到混合液，然后进入步骤(4)；
(4)将混合均匀的混合液灭菌或除菌，完成后即得到基于细胞培养的医用功能敷料。
进一步地，步骤(4)中是通过蒸汽湿热灭菌或辐照灭菌的方式进行灭菌，或者通过过滤除菌的方式进行除菌。
一种上述基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)按照比例将糖胺聚糖类物质加入到占注射用水总体积的1/2～2/3的注射用水中，以50～200rpm的速度低速搅拌12～16h，混合均匀后得到第一组分；
(2)按照比例将渗透压调节剂、L-盐酸组氨酸、L-盐酸赖氨酸、肌醇、烟酰胺、pH调节剂溶入到剩余的注射用水中，分散均匀后得到第二组分；
(3)将步骤(1)得到的第一组分、步骤(2)得到的第二组分混合，混合均匀后得到混合液，然后进入步骤(4)；
(4)将混合均匀的混合液灭菌或除菌，完成后即得到基于细胞培养的医用功能敷料。
进一步地，步骤(4)中是通过蒸汽湿热灭菌或辐照灭菌的方式进行灭菌，或者通过过滤除菌的方式进行除菌。
有益效果：本发明公开的一种基于细胞培养的医用功能敷料及其制备方法具有以下有益效果：
医用功能敷料的各种物质配比科学，pH值近中性，渗透压接近人体渗透压，利于黏膜的修复。糖胺聚糖类物质通过其分子的网状结构，在黏膜周围形成物理屏障；L-盐酸赖氨酸、L-盐酸组氨酸、烟酰胺和肌醇等细胞培养组分有利于膀胱黏膜上皮细胞的存活以及增殖，促进受损黏膜的修复；pH值近中性(和膀胱黏膜环境接近)，渗透压为270mOsmol/L～350mOsmol/L，接近人体的渗透压，也利于膀胱黏膜上皮细胞的修复。
附图说明
图1A为SD大鼠腺性膀胱炎动物模型对照组的病理切片。
图1B为SD大鼠腺性膀胱炎动物模型实验组的病理切片。
图2A为医用功能敷料对SD大鼠膀胱炎治疗效果治疗组的病理切片。
图2B为医用功能敷料对SD大鼠膀胱炎治疗效果对照组的病理切片。
具体实施方式：
下面对本发明的具体实施方式详细说明。
实施例1
一种基于细胞培养的医用功能敷料，其组分如下：
0.08％(w/v) 糖胺聚糖类物质；
0.0042％(w/v) L-盐酸组氨酸；
0.0146(w/v) L-盐酸赖氨酸；
0.00072％(w/v) 肌醇；
0.0004％(w/v) 烟酰胺；
0.022％(w/v) pH调节剂；
0.9％(w/v) 渗透压调节剂；
其余为注射用水。
进一步地，糖胺聚糖类物质为透明质酸钠。
更进一步地，透明质酸钠的分子量选择范围为1×103～3×106Da。
进一步地，所述pH调节剂为磷酸缓冲液，磷酸缓冲液中含有质量比为10:1的磷酸二氢钠和十二水合磷酸氢二钠。
进一步地，所述渗透压调节剂为氯化钠。
一种上述基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)按照比例将糖胺聚糖类物质加入到占注射用水总体积的1/2的注射用水中，以150rpm的速度低速搅拌15h，混合均匀后得到第一组分；
(2)按照比例将渗透压调节剂、L-盐酸组氨酸、L-盐酸赖氨酸、肌醇、烟酰胺、pH调节剂溶入到占注射用水总体积的1/10的注射用水中，分散均匀后得到第二组分；
(3)将步骤(1)得到的第一组分、步骤(2)得到的第二组分混合，然后添加剩余的注射用水，混合均匀后得到混合液，然后进入步骤(4)；
(4)将混合均匀的混合液灭菌，完成后即得到基于细胞培养的医用功能敷料。
进一步地，步骤(4)中是通过蒸汽湿热灭菌。
实施例2
一种基于细胞培养的医用功能敷料，其组分如下：
0.12％(w/v) 糖胺聚糖类物质；
0.0044％(w/v) L-盐酸组氨酸；
0.0143％(w/v) L-盐酸赖氨酸；
0.00075％(w/v) 肌醇；
0.0003％(w/v) 烟酰胺；
0.086％(w/v) pH调节剂；
0.9％(w/v) 渗透压调节剂；
其余为注射用水。
进一步地，糖胺聚糖类物质为质量比为2:1的硫酸软骨素与硫酸皮肤素的混合物。
更进一步地，硫酸软骨素的分子量、硫酸皮肤素的分子量选择范围为1×103～3×106Da。
进一步地，所述pH调节剂为磷酸缓冲液，磷酸缓冲液中含有质量比为80:6的磷酸二氢钠和十二水合磷酸氢二钠。
进一步地，所述渗透压调节剂为氯化钠。
一种上述基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)按照比例将糖胺聚糖类物质加入到占注射用水总体积的2/3的注射用水中，以200rpm的速度低速搅拌12h，混合均匀后得到第一组分；
(2)按照比例将渗透压调节剂、L-盐酸组氨酸、L-盐酸赖氨酸、肌醇、烟酰胺、pH调节剂溶入到占注射用水总体积的1/4的注射用水中，分散均匀后得到第二组分；
(3)将步骤(1)得到的第一组分、步骤(2)得到的第二组分混合，然后添加剩余的注射用水，混合均匀后得到混合液，然后进入步骤(4)；
(4)将混合均匀的混合液灭菌，完成后即得到基于细胞培养的医用功能敷料。
进一步地，步骤(4)中是通过辐照灭菌的方式进行灭菌。
实施例3
一种基于细胞培养的医用功能敷料，其组分如下：
0.08％(w/v) 糖胺聚糖类物质；
0.004％(w/v) L-盐酸组氨酸；
0.0139％(w/v) L-盐酸赖氨酸；
0.00069％(w/v) 肌醇；
0.0003％(w/v) 烟酰胺；
0.022％(w/v) pH调节剂；
2.5％(w/v) 渗透压调节剂；
其余为注射用水。
进一步地，糖胺聚糖类物质为质量比为3:1的透明质酸钠与肝素的混合物。
进一步地，透明质酸钠的分子量、肝素的分子量选择范围为1×103～3×106Da。
更进一步地，透明质酸钠的分子量选择范围2.0×105～1.8×106Da。
进一步地，所述pH调节剂为磷酸缓冲液，磷酸缓冲液中含有质量比为1:10的磷酸二氢钠和十二水合磷酸氢二钠。
进一步地，所述渗透压调节剂为甘油。
一种上述基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)按照比例将糖胺聚糖类物质加入到占注射用水总体积的13/24的注射用水中，以50rpm的速度低速搅拌16h，混合均匀后得到第一组分；
(2)按照比例将渗透压调节剂、L-盐酸组氨酸、L-盐酸赖氨酸、肌醇、烟酰胺、pH调节剂溶入到占注射用水总体积的5/24的注射用水中，分散均匀后得到第二组分；
(3)将步骤(1)得到的第一组分、步骤(2)得到的第二组分混合，然后添加剩余的注射用水，混合均匀后得到混合液，然后进入步骤(4)；
(4)将混合均匀的混合液除菌，完成后即得到基于细胞培养的医用功能敷料。
进一步地，步骤(4)中是通过过滤除菌的方式进行除菌。
实施例4
一种基于细胞培养的医用功能敷料，其组分如下：
0.15％(w/v) 糖胺聚糖类物质；
0.0045％(w/v) L-盐酸组氨酸；
0.015％(w/v) L-盐酸赖氨酸；
0.00078％(w/v) 肌醇；
0.0004％(w/v) 烟酰胺；
0.033％(w/v) pH调节剂；
0.85％(w/v) 渗透压调节剂；
其余为注射用水。
进一步地，糖胺聚糖类物质为质量比为10:5的硫酸软骨素与肝素的混合物。
更进一步地，硫酸软骨素的分子量、肝素的分子量选择范围为1×103～3×106Da。
进一步地，所述pH调节剂为磷酸缓冲液，磷酸缓冲液中含有质量比为1:10的磷酸二氢钠和十二水合磷酸氢二钠。
进一步地，所述渗透压调节剂为氯化钠。
一种上述基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)按照比例将糖胺聚糖类物质加入到占注射用水总体积的1/2的注射用水中，以100rpm的速度低速搅拌16h，混合均匀后得到第一组分；
(2)按照比例将渗透压调节剂、L-盐酸组氨酸、L-盐酸赖氨酸、肌醇、烟酰胺、pH调节剂溶入到剩余的注射用水中，分散均匀后得到第二组分；
(3)将步骤(1)得到的第一组分、步骤(2)得到的第二组分混合，混合均匀后得到混合液，然后进入步骤(4)；
(4)将混合均匀的混合液灭菌，完成后即得到基于细胞培养的医用功能敷料。
进一步地，步骤(4)中是通过辐照灭菌的方式进行灭菌。
实施例5
一种基于细胞培养的医用功能敷料，其组分如下：
0.1％(w/v) 糖胺聚糖类物质；
0.0045％(w/v) L-盐酸组氨酸；
0.014％(w/v) L-盐酸赖氨酸；
0.00065％(w/v) 肌醇；
0.0005％(w/v) 烟酰胺；
0.023％(w/v) pH调节剂；
0.9％(w/v) 渗透压调节剂；
其余为注射用水。
进一步地，糖胺聚糖类物质为透明质酸钠。
更进一步地，透明质酸钠的分子量选择范围为6.0×105～1.0×106Da。
进一步地，所述pH调节剂为磷酸缓冲液，磷酸缓冲液中含有质量比为3:20的磷酸二氢钠和十二水合磷酸氢二钠。
进一步地，所述渗透压调节剂为氯化钠。
一种上述基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)按照比例将糖胺聚糖类物质加入到占注射用水总体积的2/3的注射用水中，以80rpm的速度低速搅拌13h，混合均匀后得到第一组分；
(2)按照比例将渗透压调节剂、L-盐酸组氨酸、L-盐酸赖氨酸、肌醇、烟酰胺、pH调节剂溶入到剩余的注射用水中，分散均匀后得到第二组分；
(3)将步骤(1)得到的第一组分、步骤(2)得到的第二组分混合，混合均匀后得到混合液，然后进入步骤(4)；
(4)将混合均匀的混合液除菌，完成后即得到基于细胞培养的医用功能敷料。
进一步地，步骤(4)中通过过滤除菌的方式进行除菌。
实施例6～实施例11
与实施例1大致相同，区别仅仅在于：糖胺聚糖类物质的组成不同，具体如下表所示：
实施例12～实施例16
与实施例1大致相同，区别仅仅在于：糖胺聚糖类物质的含量不同：
糖胺聚糖类物质的含量
实施例12 0.01％(w/v)
实施例13 0.02％(w/v)
实施例14 0.4％(w/v)
实施例15 0.8％(w/v)
实施例16 5％(w/v)
实施例17～实施例19
与实施例2大致相同，区别仅仅在于L-盐酸组氨酸的含量不同：
实施例20～实施例22
与实施例2大致相同，区别仅仅在于：L-盐酸赖氨酸的含量不同：
L-盐酸赖氨酸的含量
实施例20 0.012％(w/v)
实施例21 0.01％(w/v)
实施例22 0.018％(w/v)
实施例23～实施例26
与实施例3大致相同，区别仅仅在于：肌醇的含量不同：
肌醇的含量
实施例23 0.0006％(w/v)
实施例24 0.0008％(w/v)
实施例25 0.0005％(w/v)
实施例26 0.001％(w/v)
实施例27
与实施例3大致相同，区别仅仅在于：烟酰胺的含量为0.0002％(w/v)。
实施例28～实施例31
与实施例3大致相同，区别仅仅在于：pH调节剂的种类不同：
实施例32～实施例34
与实施例3大致相同，区别仅仅在于：pH调节剂的含量不同：
pH调节剂的含量
实施例32 0.001％(w/v)
实施例33 0.01％(w/v)
实施例34 1％(w/v)
实施例35～实施例39
与实施例4大致相同，区别仅仅在于：渗透压调节剂的种类不同：
医用功能敷料对SD大鼠膀胱炎的治疗作用
1、SD大鼠腺性膀胱炎动物模型的建立
实验动物：取成年雌性健康SD大鼠40只，体重(240±25g)。
动物分组：分成2组，A组为空白组，B组为实验组，分笼饲养，自由饮水，适应性饲养1周。一周以后进行实验；
A组：每隔2天向SD大鼠膀胱内灌注生理盐水，共15次；
B组：每隔2天向SD大鼠膀胱内灌注DH5α大肠埃希菌的溶液，共15次。
膀胱内灌注的方法为：用4％的水合氯醛按1ml/100g腹腔注射麻醉，仰卧固定大鼠，常规消毒会阴部，将无菌硬膜外导管用无菌液体石蜡润滑后，提起尿道外口的皮肤，沿尿道后壁插入尿道3cm以上。通过抽吸管排除大鼠残余尿液，用1ml注射器分别向大鼠膀胱注入0.2ml生理盐水或大肠杆菌溶液。然后退出导管，将大鼠放入鼠笼等待自然苏醒。
制作切片的方法：A、B组膀胱灌注45d后处死大鼠，用4％的水合氯醛按1ml/100g腹腔注射麻醉仰卧固定,剪开会阴部皮肤,提起大鼠膀胱底部,分离至尿道近端剪断,取出膀胱后,观察膀胱的大体形态后,迅速将膀胱体部和膀胱三角固定在10％的甲醛溶液中。标本经10％甲醛溶液中固定、流水冲洗,再行酒精脱水,然后经过二甲苯透明两次。将透明后的标本浸蜡。浸蜡后,将标本用硬蜡包埋做好标签。把包埋后的蜡块修切,通过连续常规切片、展片、HE染色。做好切片,置于100倍放大镜下观察膀胱黏膜固有层是否有炎性细胞浸润、腺体样结构、囊腔和Brunn巢结构。
结果：如图1A所示：A组膀胱黏膜正常，细胞大小一致，未见Brunn巢，腺体细胞和炎症细胞浸润。如图1B所示：B组：大鼠膀胱黏膜均有炎性细胞浸润,膀胱三角区黏膜固有层出现Brunn巢及囊腔。因而经大肠埃希菌灌注后，建立了大鼠膀胱炎模型。
2、采用医用功能敷料治疗SD大鼠膀胱炎
实验动物：取30只健康雌性SD大鼠，体重(240±25g)。
动物分组：随机分为2组，分别为治疗组和对照组，建立膀胱炎模型。
治疗组：每天给予医用功能敷料(实施例1所得产品)1ml进行治疗，保留30min后放出。
对照组：每天给予生理盐水1ml，保留30min后放出。
治疗时间：每天灌注1次，治疗时间为1周。
制作切片：用4％的水合氯醛按1ml/100g腹腔注射麻醉仰卧固定,剪开会阴部皮肤,提起大鼠膀胱底部,分离至尿道近端剪断,取出膀胱后,观察膀胱的大体形态后,迅速将膀胱体部和膀胱三角固定在10％的甲醛溶液中。标本经10％甲醛溶液中固定、流水冲洗,再行酒精脱水,然后经过二甲苯透明两次。将透明后的标本浸蜡。浸蜡后,将标本用硬蜡包埋做好标签。把包埋后的蜡块修切,通过连续常规切片、展片、HE染色。做好切片,置于100倍放大镜下观察膀胱黏膜固有层是否有炎性细胞浸润、腺体样结构、囊腔和Brunn巢结构。
治疗结果：如图2A和图2B所示：治疗组炎症明显减轻，黏膜恢复正常，细胞大小一致，炎症细胞消失；对照组炎症依旧存在，细胞大小不一，炎细胞浸润。
上面对本发明的实施方式做了详细说明。但是本发明并不限于上述实施方式，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下做出各种变化。

Claims (14)

1.一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，其组分如下：
0.01％(w/v)～5％(w/v)糖胺聚糖类物质；
0.002％(w/v)～0.005％(w/v)L-盐酸组氨酸；
0.01％(w/v)～0.018％(w/v)L-盐酸赖氨酸；
0.0005％(w/v)～0.001％(w/v)肌醇；
0.0002％(w/v)～0.0005％(w/v)烟酰胺；
0.001％(w/v)～1％(w/v)pH调节剂；
0.1％(w/v)～5％(w/v)渗透压调节剂；
其余为注射用水。
2.根据权利要求1所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，糖胺聚糖类物质为透明质酸钠、透明质酸锌、透明质酸铋、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、肝素中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，糖胺聚糖类物质的含量优选为0.02％(w/v)～5％(w/v)。
4.根据权利要求2所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，糖胺聚糖类物质的分子量选择范围为1×103～3×106Da，优选为2.0×105～1.8×106Da，更优选为6.0×105～1.0×106Da。
5.根据权利要求1所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，L-盐酸组氨酸的含量优选为0.003％(w/v)～0.0045％(w/v)。
6.根据权利要求1所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，L-盐酸赖氨酸的含量优选为0.012％(w/v)～0.015％(w/v)。
7.根据权利要求1所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，肌醇的含量优选为0.0006％(w/v)～0.0008％(w/v)。
8.根据权利要求1所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，烟酰胺的含量优选为0.0003％(w/v)～0.0004％(w/v)。
9.根据权利要求1所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，所述pH调节剂为磷酸缓冲液、碳酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液中的至少一种。
10.根据权利要求1所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，所述pH调节剂的浓度优选0.001％(w/v)～0.01％(w/v)。
11.根据权利要求1所述的一种基于细胞培养的医用功能敷料，其特征在于，所述渗透压调节剂为氯化钠、甘油、丙二醇、葡萄糖、海藻糖、山梨醇中的至少一种。
12.一种权利要求1～11任意一项所述的基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)按照比例将糖胺聚糖类物质加入到占注射用水总体积的1/2～2/3的注射用水中，以50～200rpm的速度低速搅拌12～16h，混合均匀后得到第一组分；
(2)按照比例将渗透压调节剂、L-盐酸组氨酸、L-盐酸赖氨酸、肌醇、烟酰胺、pH调节剂溶入到占注射用水总体积的1/10～1/4的注射用水中，分散均匀后得到第二组分；
(3)、将步骤(1)得到的第一组分、步骤(2)得到的第二组分混合，然后添加剩余的注射用水，混合均匀后得到混合液，然后进入步骤(4)；
(4)将混合均匀的混合液灭菌或除菌，完成后即得到基于细胞培养的医用功能敷料。
13.如权利要求12所述的基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中是通过蒸汽湿热灭菌或辐照灭菌的方式进行灭菌，或者通过过滤除菌的方式进行除菌。
14.一种权利要求1～11任意一项所述的基于细胞培养的医用功能敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)按照比例将糖胺聚糖类物质加入到占注射用水总体积的1/2～2/3的注射用水中，以50～200rpm的速度低速搅拌12～16h，混合均匀后得到第一组分；
(2)按照比例将渗透压调节剂、L-盐酸组氨酸、L-盐酸赖氨酸、肌醇、烟酰胺、pH调节剂溶入到剩余的注射用水中，分散均匀后得到第二组分；
(3)将步骤(1)得到的第一组分、步骤(2)得到的第二组分混合，混合均匀后得到混合液，然后进入步骤(4)；
(4)将混合均匀的混合液灭菌或除菌，完成后即得到基于细胞培养的医用功能敷料。
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Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105030656A (zh) * 2015-06-30 2015-11-11 苏州吉欧生物科技有限公司 用于非细菌性膀胱炎治疗的透明质酸钠灌洗液
CN105709267A (zh) * 2015-12-04 2016-06-29 陕西巨子生物技术有限公司 一种类人胶原蛋白粘膜修复凝胶
CN106620831A (zh) * 2016-12-22 2017-05-10 石佳明 一种护理皮肤溃疡的敷料
WO2017171497A1 (ko) * 2016-04-01 2017-10-05 주식회사 바이오코즈글로벌코리아 세포배양배지에 알부민, 히알루론산, 또는 콜라겐을 유효성분으로 포함하는 화장용 조성물
CN107854469A (zh) * 2016-09-21 2018-03-30 刘力 局部眼或耳或鼻用或皮肤外用的沙星药物及其组合物
CN108261562A (zh) * 2017-08-11 2018-07-10 上海建华精细生物制品有限公司 一种透明质酸钠皮肤保护膜及其制备方法和应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105030656A (zh) * 2015-06-30 2015-11-11 苏州吉欧生物科技有限公司 用于非细菌性膀胱炎治疗的透明质酸钠灌洗液
CN105709267A (zh) * 2015-12-04 2016-06-29 陕西巨子生物技术有限公司 一种类人胶原蛋白粘膜修复凝胶
WO2017171497A1 (ko) * 2016-04-01 2017-10-05 주식회사 바이오코즈글로벌코리아 세포배양배지에 알부민, 히알루론산, 또는 콜라겐을 유효성분으로 포함하는 화장용 조성물
CN107854469A (zh) * 2016-09-21 2018-03-30 刘力 局部眼或耳或鼻用或皮肤外用的沙星药物及其组合物
CN106620831A (zh) * 2016-12-22 2017-05-10 石佳明 一种护理皮肤溃疡的敷料
CN108261562A (zh) * 2017-08-11 2018-07-10 上海建华精细生物制品有限公司 一种透明质酸钠皮肤保护膜及其制备方法和应用

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