CN109497266A - 一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，该方法包括以下步骤：1、菌种活化及扩培；2、复合液体发酵；3、发酵液双重辐照处理；4、固体发酵。本发明采用平菇、酵母菌和白腐真菌复合发酵，利用不同菌种之间的协同作用，共同完成单个菌种难以完成的复杂代谢活动。在培养过程中各菌种间互利共栖，使酶系比例协调，使得复合发酵产酶能力大大高于单一菌种，从而提高生物饲料发酵效率和生物利用率，极大的提升了生物饲料的品质。本发明的方法结合了液体发酵和固体发酵，提高了秸秆、饼粕的生物转化率，解决了现有单纯固体发酵法存在的底物无法充分利用，原料大量浪费的问题，变废为宝，进一步提升秸秆和饼粕的应用价值。

Description

一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法

技术领域

本发明属于饲料生产领域，具体涉及一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法。

背景技术

我国是一个农业大国，畜牧养殖业一直在我国农业经济中占有重要的地位。随着国民经济实力的快速增加，人均收入的不断提升，动物性食品如肉、蛋、奶、水产品的需求日益增长，随之而来养殖过程中饲料的需求也不断扩大。虽然目前我国饲料年产量世界第一，但饲料行业资源依然短缺，一些优质的饲料资源主要依赖进口。例如我国对蛋白质类饲料大豆和鱼粉的进口量居世界第一，进口依存度高达70%以上，这也大大增加了养殖业中的饲料成本。因此如何有效缓解我国饲料资源短缺是亟待解决的一大问题。

生物饲料一般是指以饲料和饲料添加剂为对象，以基因工程、蛋白质工程、发酵工程等高新技术为手段，在人工控制条件下，利用一些有益微生物自身的生长代谢活动，将原料中的抗营养因子分解或转化，产生更能被畜禽采食、消化、吸收，养分更高且无毒害作用的饲料。在人畜共粮问题日益突出的当今社会，发展生物饲料，一方面可大幅度提高现有饲料资源的利用和转化效率，另一方面有利于开发利用潜在的饲料资源，增加饲料原料的供给，缓解粮食供给压力。因此，生物饲料将为饲料粮的开源节流提供一种非常有效的新途径，对保障我国粮食和饲料安全具有重要意义。

生物饲料的原料来源非常广泛。除了常规的粮食、谷物及牧草等饲料来源外，还有很多非常规饲料来源如农作物秸秆和秕壳、饼粕、糟渣和林业副产物等。农作物秸秆是植物光合作用的产物，是农业的副产品，资源丰富。但是农作物秸秆中粗纤维含量高，并含有木质素等，不利于畜禽的消化吸收，而经过微生物的发酵处理，就能降低秸秆中粗纤维的含量，并提高蛋白质含量，使得饲料的适口性和畜禽对于秸秆饲料的利用率得到改善。而且微生物在生长繁殖过程中产生的活性物质（抗生素、维生素、有机酸、激素及氨基酸等）和菌体能够调节畜禽体内的微生态环境，提高动物体的免疫力。饼粕是油料作物榨油后的副产物，我国饼粕类资源十分丰富，主要包括大豆饼粕、菜籽饼粕、棉籽饼粕、花生饼粕、芝麻饼粕、葵花籽饼粕等。这些资源虽然含有丰富的蛋白质，但一些饼粕所含蛋白质品质不佳，氨基酸组成不理想，不能全面满足动物生长需求。更重要的是许多饼粕还含有很多抗营养因子，动物食用之后会产生腹泻，影响营养吸收等负面效应，从而限制了饼粕资源在动物饲料中广泛应用。国内外许多研究表明，微生物发酵法可以显著降低或者彻底消除饼粕中的抗营养因子，这些饼粕原料经过微生物发酵后，外观蓬松变软，气味芳香，抗营养因子降解，营养价值显著提高，变成优质的生物饲料。

目前，市场上用于发酵生物饲料的微生物种类主要是乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌和霉菌。这些微生物在生长过程中能够产生多种酶，将饲料中的纤维素、蛋白质等大分子有机物质降解为小分子的单糖、双糖、各种氨基酸及其他营养物质，使畜禽更易于吸收，还能积累大量菌体蛋白并产生多种有益的代谢产物，从而提高饲料的营养价值。生物饲料的发酵方法多为固体发酵，是指体系在没有或几乎没有自由水存在下，微生物在固态物质上生长的过程，过程中维持微生物活性需要的水主要为结合水或与固体基质结合的状态。此种方法发酵量大，工艺简单，无需复杂的发酵设备，但也存在着基料发酵不均匀，局部菌种生长不良，基料利用率和转化率不高的问题。

平菇也称侧耳、糙皮侧耳、蚝菇、黑牡丹菇，是担子菌门下伞菌目侧耳科一种，是最常见的人工栽培食用菌品种。平菇属木腐生菌类，菌丝体也具有很强的产酶能力，能将纤维素、半纤维素、木质素及淀粉、果胶等成分分解成单糖或双糖供自身利用，因此对于前文所述的秸秆、饼粕等非常规饲料来源平菇也都可以利用，并且平菇菌丝体中富含白质、碳水化合物、矿物质和维生素，氨基酸种类齐全，营养更丰富。但是目前关于利用平菇和其它微生物复合发酵生物饲料的文献报道较少，如果能成功应用于实践，必能极大地提升饲料的适口性和营养价值，具有广阔的市场前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种以平菇、酵母菌和白腐真菌作为复合菌种，以液体发酵和固体发酵相结合来生产优质生物饲料的方法，解决现有技术中生物饲料发酵不均匀，基料利用率和转化率不高的问题，提升饲料的适口性和营养价值。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1、菌种活化及扩培

1）平菇：将平菇菌种接种到改良PDA培养基斜面上，置于28℃培养进行活化，等菌丝长满斜面后，将菌丝块切割成1cm²小块，接种1-2块到装有100mL液体培养基的250mL三角瓶中，置于28℃进行扩培，先静置培养24h，然后置于140r/min的摇床上培养72h；

2）产朊假丝酵母：将产朊假丝酵母菌种接种到YPD琼脂培养基平板上，置于30℃活化培养48h，用接种环刮取1环接种到装有80mL YPD肉汤培养基的250mL三角瓶中，置于30℃、160r/min的摇床上培养48h；

3）黄孢原毛平革菌：将黄孢原毛平革菌菌种接种到改良PDA培养基平板上，置于30℃活化培养48h，用接种环刮取1环接种到装有80mL液体培养基的250mL三角瓶中，置于30℃、160r/min的摇床上培养36h；

2、复合液体发酵

将发酵培养基按照60%左右的装液量装入发酵罐中高压蒸汽灭菌，发酵培养基冷却后接入4%扩培后的平菇菌种，培养66-78h，再将扩培后的产朊假丝酵母和黄孢原毛平革菌菌种分别按照3%的接种量接入，继续培养60-80h，发酵培养的温度控制在28-30℃、转速控制在140-160r/min、通气量控制在0.8-1.0V/V/M，获得复合发酵液；

3、发酵液双重辐照处理

上述复合发酵液在接种前先进行特定电磁波辐照处理，照射距离为30cm，辐照度为54mW/cm²，处理15min，再进行超声波辐照处理，超声频率为30kHz，功率为10W，超声时间30s，间隔时间30s，处理60min；

4、固体发酵

按照15%左右的接种量将处理后的发酵液接入生物饲料基料中，基料的组分为（按质量分数计）：玉米秸秆17-23%，大豆秸秆17-23%，小麦秸秆10-12%，大豆饼粕14-18%，花生饼粕8-10%，芝麻饼粕7-9%，平菇菌糠6.6-7.8%，黄腐酸3.5-4.0%，微晶纤维素2.5-3.0%，（NH₄）₂SO₄ 1.6-2.2%，KH₂PO₄ 0.25-0.29%，K₂HPO₄0.11-0.15%，MgSO₄·7H₂O 0.19-0.21%，含水量调节为40-60%，初始pH值为5.0-6.0，混合均匀后在温度28-30℃的条件下通风培养5-6d，将发酵后的产物于80℃烘干，粉碎，即得生物饲料。

所述步骤1中，平菇选择中高温类或广温类品种。

所述步骤1中，改良PDA培养基的组分为（按1L计）：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉20g，KH₂PO₄ 2g，MgSO₄·7H₂O 1g，FeSO₄·7H₂O 5mg，CuSO₄·5H₂O 0.3mg，维生素B110mg，余量为纯化水，自然pH值。

所述步骤1中，液体培养基的组分为（按1L计）：葡萄糖28-32g，酵母膏3.8-4.4g，蛋白胨2.6-3.0g，麦芽汁10-15ml，KH₂PO₄ 2.8-3.2g，MgSO₄·7H₂O1.4-1.6g，蛋氨酸锌2.6-3.0mg，甘氨酸铁6.3-6.5mg，6-BA 2.8-3.4mg，余量为纯化水，自然pH值。

所述步骤2中，发酵培养基的组分为（按1L计）：玉米秸秆粉12-14g，大豆秸秆粉12-14g，葡萄糖15-19g，酵母膏4.2-4.8g，大豆饼粕5-6g，花生饼粕5-6g，平菇菌糠4-6g，微晶纤维素2.6-3.0g，淡豆豉水提液8-10ml，薄荷水提液13-15ml，KH₂PO₄ 2.8-3.2g，MgSO₄·7H₂O1.4-1.6g，CuSO₄·5H₂O 0.2-0.4mg，5mmol/L硝普钠水溶液2.0-2.4ml，6-BA 5.3-5.9mg，硅酮消泡剂8-12ml，余量为纯化水，初始pH值为5.0-6.0。

所述步骤2中，高压蒸汽灭菌是指在温度121℃、压力0.1MPa的条件下保压灭菌30min。

所述步骤3中，特定电磁波辐照处理所用仪器为台式TDP治疗仪，超声波辐照处理所用仪器为超声波生物刺激生长仪。

所述步骤4中，大豆秸秆、玉米秸秆、小麦秸秆、大豆饼粕、花生饼粕、芝麻饼粕需经粉碎后过40目筛备用。

本发明具有以下有益效果：

1、本发明采用平菇、产朊假丝酵母和黄孢原毛平革菌复合发酵，利用不同菌种之间的协同作用，共同完成单个菌种难以完成的复杂代谢活动。在培养过程中各菌种间互利共栖，使酶系比例协调，使得复合发酵产酶能力大大高于单一菌种，从而提高生物饲料发酵效率和生物利用率。获得的生物饲料在蛋白质含量、氨基酸含量以及酶活力方面得到了极大的提升，粗纤维得到了有效降解，使得饲料的适口性和畜禽对于饲料的利用率也得到改善。

2、对生物饲料的生产流程进行优化，结合了液体发酵和固体发酵，液体发酵均一性好，生物量大，生物转化率高，解决了现有单纯固体发酵法存在的底物无法充分利用，原料大量浪费的问题；对发酵液进行双重辐照处理，促进微生物细胞的生长和代谢产物的合成，提高酶的活性，使固体发酵更加彻底，秸秆和饼粕的利用率大大提高。

3、以农作物秸秆和饼粕类副产物为原料，来源广泛，价格低廉，既节约了生产成本，又解决了生物资源利用问题，无环境污染，适宜工业化应用，具有良好的经济和社会效益。

附图说明

图1不同接种比例对菌体干重的影响；

图2不同接种比例对酶活力的影响；

图3不同培养温度对菌体干重的影响；

图4不同培养温度对酶活力的影响；

图5不同初始pH值对菌体干重的影响；

图6不同初始pH值对酶活力的影响；

图7不同接种量对粗蛋白含量的影响；

图8不同培养时间对粗蛋白含量的影响。

具体实施方式

下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。下述实施例中，如无特殊说明，所使用的实验方法均为常规方法，所用菌种、试剂等均可从常规渠道购买。

以下各实施例中指标测定方法：

1、菌体干重测定：取一定量的复合发酵液，于4000r/min离心15min，取沉淀置于干燥箱中在80℃下烘至恒重，冷却后称重，得菌体干重。

2、蛋白酶活力测定：取一定量的复合发酵液，于4000r/min离心15min，取上清液作为粗酶液，采用福林法测定蛋白酶活力。

3、纤维素酶活力测定：取一定量的复合发酵液，于4000r/min离心15min，取上清液作为粗酶液，采用DNS显色法测定纤维素酶活力。

4、粗蛋白含量测定：称取固体发酵产物约10.0g，加入0.9%生理盐水100ml，在40℃、100 r/min的条件下水浴振荡1h，然后于4℃、4000r/min离心10min，取上清液作为分析样品，采用凯氏定氮法测定粗蛋白含量。

5、总氨基酸含量测定：取上述上清液20ml，旋转蒸发浓缩至5ml左右，无损转移到氨基酸水解管，运用全自动分析仪根据AOAC氨基酸测定方法分析总氨基酸含量。

6、粗纤维含量测定：根据GB/T 6434-2006的过滤法，称取固体发酵产物约1.0g，经过酸消煮、碱消煮、干燥称重、灰化，测定粗纤维含量。

7、植酸含量测定：称取固体发酵产物约0.5g，加入10ml 2.4%盐酸溶液，于室温下200r/min搅拌浸提16h，然后于3000r/min离心20min，取上清液，加入1.0g氯化钠，并在-20℃处理20min，再于3000r/min离心20min，取上清液1ml，稀释25倍，采用改良Wade试剂法测定植酸含量。

实施例1

一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，该方法包括以下步骤：

1、菌种活化及扩培

1）平菇：选择广温类平菇“苏平1号”，将平菇菌种接种到改良PDA培养基（该培养基的组分按1L计为：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉20g，KH₂PO₄ 2g，MgSO₄·7H₂O 1g，FeSO₄·7H₂O 5mg，CuSO₄·5H₂O 0.3mg，维生素B1 10mg，余量为纯化水，自然pH值）斜面上，置于28℃培养进行活化，等菌丝长满斜面后，将菌丝块切割成1cm²小块，接种1-2块到装有100mL液体培养基（该培养基的组分按1L计为：葡萄糖30g，酵母膏4.1g，蛋白胨2.8g，麦芽汁12.5ml，KH₂PO₄ 3.0g，MgSO₄·7H₂O1.5g，蛋氨酸锌2.8mg，甘氨酸铁6.4mg，6-BA 3.1mg，余量为纯化水，自然pH值）的250mL三角瓶中，置于28℃进行扩培，先静置培养24h，然后置于140r/min的摇床上培养72h；

2）产朊假丝酵母：将产朊假丝酵母菌种接种到YPD琼脂培养基平板上，置于30℃活化培养48h，用接种环刮取1环接种到装有80mL YPD肉汤培养基的250mL三角瓶中，置于30℃、160r/min的摇床上培养48h；

3）黄孢原毛平革菌：将黄孢原毛平革菌菌种接种到改良PDA培养基平板上，置于30℃活化培养48h，用接种环刮取1环接种到装有80mL液体培养基的250mL三角瓶中，置于30℃、160r/min的摇床上培养36h。

2、复合液体发酵

将发酵培养基（该培养基的组分按1L计为：玉米秸秆粉13g，大豆秸秆粉13g，葡萄糖17g，酵母膏4.5g，大豆饼粕5.5g，花生饼粕5.5g，平菇菌糠5g，微晶纤维素2.8g，淡豆豉水提液9ml，薄荷水提液14ml，KH₂PO₄ 3.0g，MgSO₄·7H₂O1.5g，CuSO₄·5H₂O 0.3mg，5mmol/L硝普钠水溶液2.2ml，6-BA 5.6mg，硅酮消泡剂10ml，余量为纯化水，初始pH值为5.5）按照60%的装液量装入发酵罐中在温度121℃、压力0.1MPa的条件下保压灭菌30min，发酵培养基冷却后接入4%扩培后的平菇菌种，培养72h，再将扩培后的产朊假丝酵母和黄孢原毛平革菌菌种分别按照3%的接种量接入，继续培养70h，发酵培养的温度控制在29℃、转速控制在150r/min、通气量控制在0.9V/V/M，获得复合发酵液。

3、发酵液双重辐照处理

上述复合发酵液在接种前先进行特定电磁波辐照处理，所用仪器为台式TDP治疗仪，照射距离为30cm，辐照度为54mW/cm²，处理15min，再进行超声波辐照处理，所用仪器为超声波生物刺激生长仪，超声频率为30kHz，功率为10W，超声时间30s，间隔时间30s，处理60min。

4、固体发酵

按照15%的接种量将处理后的发酵液接入生物饲料基料中，基料的组分为（按质量分数计）：玉米秸秆20%，大豆秸秆11%，小麦秸秆20%，大豆饼粕16%，花生饼粕9%，芝麻饼粕8%，平菇菌糠7.2%，黄腐酸3.75%，微晶纤维素2.75%，（NH₄）₂SO₄ 1.9%，KH₂PO₄ 0.27%，K₂HPO₄0.13%，MgSO₄·7H₂O 0.2%，含水量调节为50%，初始pH值为5.5，其中大豆秸秆、玉米秸秆、小麦秸秆、大豆饼粕、花生饼粕、芝麻饼粕需经粉碎后过40目筛备用，混合均匀后在温度29℃的条件下通风培养6d，将发酵后的产物于80℃烘干，粉碎，即得生物饲料。

实施例2

不同接种比例对复合液体发酵的影响

按照实施例1所述方法，步骤2中总接种量10%不变，平菇、产朊假丝酵母和黄孢原毛平革菌菌种的接种比例分别设置为4:3:3、3:3:4、2:1:2、1:2:2，以研究接种比例对复合液体发酵的影响，对获得的复合发酵液进行菌体干重、蛋白酶活力和纤维素酶活力测定，结果如图1和图2所示。

从图1和图2可以看出，当菌种比例为4:3:3时，菌体干重、蛋白酶活力和纤维素酶活力都达到最大值，说明在这个菌种比例下，平菇、产朊假丝酵母和黄孢原毛平革菌之间达到一种良好的共生关系，菌体生长相互促进，代谢活动旺盛，产酶量能力强。

实施例3

不同培养温度对复合液体发酵的影响

按照实施例1所述方法，将步骤2中培养温度分别设置为26℃、28℃、30℃、32℃，以研究培养温度对复合液体发酵的影响，对获得的复合发酵液进行菌体干重、蛋白酶活力和纤维素酶测定，结果如图3和图4所示。

从由图3可以看出，当培养温度为28℃和30℃时，菌体干重达到最大值；从图4可以看出，当培养温度为28℃时，蛋白酶的活力最高，但与30℃时的酶活力差异不显著，当培养温度为30℃时，纤维素酶的活力最高，但与28℃时的酶活力差异不显著，因此可以确定28-30℃为适合的培养温度。

实施例4

不同初始pH值对复合液体发酵的影响

按照实施例1所述方法，将步骤2中发酵培养基的初始pH值分别设置为4.0、5.0、6.0、7.0，以研究初始pH值对复合液体发酵的影响，对获得的复合发酵液进行菌体干重、蛋白酶活力和纤维素酶测定，结果如图5和图6所示。

从由图5可以看出，当发酵培养基的初始pH值在5.0和6.0时，菌体干重达到最大值；从图6可以看出，初始pH值在5.0和6.0时，蛋白酶活力和纤维素酶活力都达到较高水平，并且两者之间差异不大，因此可以确定5.0-6.0为适合的初始pH值。

实施例5

不同接种量对固体发酵的影响

按照实施例1所述方法，将步骤4中发酵液的接种量调整为5%、10%、15%、20%，以研究不同接种量对固体发酵的影响，对获得的固体发酵产物进行粗蛋白含量测定，结果如图7所示。

从由图7可以看出，随着接种量的增大，发酵产物中粗蛋白含量也逐渐增加，但接种量 的增大并不与发酵产物中粗蛋白的增加成正比。在实际生产中，增加接种量意味着增加生产成本，但接种量太少会延长发酵时间，同时发挥不了菌种优势，影响产物品质。当接种量为15%时，发酵产物中粗蛋白含量达到较高水平，可以作为合适的接种量。

实施例5

不同培养时间对固体发酵的影响

按照实施例1所述方法，将步骤4中培养时间设置为3d、4d、5d、6d、7d，以研究不同培养时间对固体发酵的影响，对获得的固体发酵产物进行粗蛋白含量测定，结果如图8所示。

培养时间对生产至关重要，培养时间过短不利于微生物的生长繁殖，直接影响微生物的产量，从而影响发酵产物中粗蛋白含量，培养时间过长则容易将已降解的氨基酸和小肽降解为氨挥发掉，致使粗蛋白含量降低，还会延长生产周期，增加生产成本。从由图8可以看出，当培养时间为5d左右时，发酵产物中粗蛋白含量达到较高水平，可以作为合适的培养时间。

对比例1

为了验证本发明的发酵液双重辐照处理产生的有益效果，本对比例取消实施例1中步骤3这一步，其他与实施例1相同。

对比例2

为了验证本发明的液体发酵和固体发酵相结合的方法产生的有益效果，本对比例采用常规固体发酵方法，具体步骤如下：

1、菌种活化及扩培

与实施例1相同。

2、双重辐照处理

将扩培后的平菇菌种、产朊假丝酵母菌种和黄孢原毛平革菌菌种分别进行双重辐照处理，处理方法与实施例1相同。

3、固体发酵

总接种量15%保持不变，将处理后的平菇菌种、产朊假丝酵母菌种和黄孢原毛平革菌菌种按照4:3:3的比例直接接入生物饲料基料中，混合均匀后在温度30℃的条件下通风培养6d。

以未经发酵的生物饲料基料作为对照组，与实施例1、对比例1和对比例2获得的固体发酵产物进行蛋白酶活力、纤维素酶活力、粗蛋白含量、总氨基酸含量、粗纤维含量、植酸含量测定，结果如表1所示。

比较实施例1与对照组的数据，可以看出发酵前后基料的营养成分有了显著变化，蛋白酶和纤维素酶活力分别达到3845U/g和2207U/g，当然还能产生其它多种酶类，本试验没有一一测定，粗蛋白含量和总氨基酸含量有了显著提高，粗纤维含量和抗营养因子植酸含量有了显著降低，达到提升饲料营养价值的目的。

比较实施例1与对比例1的数据，可以证明对发酵液进行双重辐照处理能够产生有益效果。本发明用特定电磁波和超声波辐照处理发酵液，能够促进微生物细胞的生长和代谢产物的合成，还能使微生物体内酶系统发生变化，提高酶的活性，增加生长因子。

比较实施例1与对比例2的数据，可以证明液体发酵和固体发酵相结合能够产生有益效果。本发明先进行复合液体发酵，液体发酵物料交换充分，发酵均一度高，质量稳定，菌种生物量大，活性好，产酶能力强，再接种进行固体发酵效果更好，还能实现对秸秆、饼粕的综合利用。

虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (8)

1.一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1、菌种活化及扩培

1）平菇：将平菇菌种接种到改良PDA培养基斜面上，置于28℃培养进行活化，等菌丝长满斜面后，将菌丝块切割成1cm²小块，接种1-2块到装有100mL液体培养基的250mL三角瓶中，置于28℃进行扩培，先静置培养24h，然后置于140r/min的摇床上培养72h；

2）产朊假丝酵母：将产朊假丝酵母菌种接种到YPD琼脂培养基平板上，置于30℃活化培养48h，用接种环刮取1环接种到装有80mL YPD肉汤培养基的250mL三角瓶中，置于30℃、160r/min的摇床上培养48h；

3）黄孢原毛平革菌：将黄孢原毛平革菌菌种接种到改良PDA培养基平板上，置于30℃活化培养48h，用接种环刮取1环接种到装有80mL液体培养基的250mL三角瓶中，置于30℃、160r/min的摇床上培养36h；

2、复合液体发酵

将发酵培养基按照60%左右的装液量装入发酵罐中高压蒸汽灭菌，发酵培养基冷却后接入4%扩培后的平菇菌种，培养66-78h，再将扩培后的产朊假丝酵母和黄孢原毛平革菌菌种分别按照3%的接种量接入，继续培养60-80h，发酵培养的温度控制在28-30℃、转速控制在140-160r/min、通气量控制在0.8-1.0V/V/M，获得复合发酵液；

3、发酵液双重辐照处理

上述复合发酵液在接种前先进行特定电磁波辐照处理，照射距离为30cm，辐照度为54mW/cm²，处理15min，再进行超声波辐照处理，超声频率为30kHz，功率为10W，超声时间30s，间隔时间30s，处理60min；

4、固体发酵

按照15%左右的接种量将处理后的发酵液接入生物饲料基料中，基料的组分为（按质量分数计）：玉米秸秆17-23%，大豆秸秆17-23%，小麦秸秆10-12%，大豆饼粕14-18%，花生饼粕8-10%，芝麻饼粕7-9%，平菇菌糠6.6-7.8%，黄腐酸3.5-4.0%，微晶纤维素2.5-3.0%，（NH₄）₂SO₄ 1.6-2.2%，KH₂PO₄ 0.25-0.29%，K₂HPO₄0.11-0.15%，MgSO₄·7H₂O 0.19-0.21%，含水量调节为40-60%，初始pH值为5.0-6.0，混合均匀后在温度28-30℃的条件下通风培养5-6d，将发酵后的产物于80℃烘干，粉碎，即得生物饲料。

2.根据权利要求1所述的一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，其特征在于，所述步骤1中，平菇选择中高温类或广温类品种。

3.根据权利要求1所述的一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，其特征在于，所述步骤1中，改良PDA培养基的组分为（按1L计）：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉20g，KH₂PO₄ 2g，MgSO₄·7H₂O 1g，FeSO₄·7H₂O 5mg，CuSO₄·5H₂O 0.3mg，维生素B1 10mg，余量为纯化水，自然pH值。

4.根据权利要求1所述的一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，其特征在于，所述步骤1中，液体培养基的组分为（按1L计）：葡萄糖28-32g，酵母膏3.8-4.4g，蛋白胨2.6-3.0g，麦芽汁10-15ml，KH₂PO₄ 2.8-3.2g，MgSO₄·7H₂O1.4-1.6g，蛋氨酸锌2.6-3.0mg，甘氨酸铁6.3-6.5mg，6-BA 2.8-3.4mg，余量为纯化水，自然pH值。

5.根据权利要求1所述的一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，其特征在于，所述步骤2中，发酵培养基的组分为（按1L计）：玉米秸秆粉12-14g，大豆秸秆粉12-14g，葡萄糖15-19g，酵母膏4.2-4.8g，大豆饼粕5-6g，花生饼粕5-6g，平菇菌糠4-6g，微晶纤维素2.6-3.0g，淡豆豉水提液8-10ml，薄荷水提液13-15ml，KH₂PO₄ 2.8-3.2g，MgSO₄·7H₂O1.4-1.6g，CuSO₄·5H₂O 0.2-0.4mg，5mmol/L硝普钠水溶液2.0-2.4ml，6-BA 5.3-5.9mg，硅酮消泡剂8-12ml，余量为纯化水，初始pH值为5.0-6.0。

6.根据权利要求1所述的一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，其特征在于，所述步骤2中，高压蒸汽灭菌是指在温度121℃、压力0.1MPa的条件下保压灭菌30min。

7.根据权利要求1所述的一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，其特征在于，所述步骤3中，特定电磁波辐照处理所用仪器为台式TDP治疗仪，超声波辐照处理所用仪器为超声波生物刺激生长仪。

8.根据权利要求1所述的一种多菌种复合发酵生产优质生物饲料的方法，其特征在于，所述步骤4中，大豆秸秆、玉米秸秆、小麦秸秆、大豆饼粕、花生饼粕、芝麻饼粕需经粉碎后过40目筛备用。