CN109490557A - 一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法 - Google Patents

一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，涉及于血液促凝剂的技术领域。该方法包括以下步骤：前期准备、抽取血样、血样处理、混匀融合、多次试验、判定结果。本发明通过控制加入钙和血浆用量等条件反向对硅藻土无机型促凝剂和凝血酶类生物型促凝剂的效果进行测试，便于筛选出效果凝血效果优质的促凝剂，从而在医学检验工作中以更短的时间，更优质的检测效率加以利用。筛选出的血液促凝剂通过便降低检验时间、提高检测效率的，满足了市场需求，提高了医院工作人员的检测效率。

Description

一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法
技术领域
本发明涉及血液促凝剂的技术领域，尤其涉及一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法。
背景技术
医学检验的速度在临床上有着重要意义。有些检验需要从血液中分离出血清才能进行。而血液凝结到析出血清一般需要一小时，及时采用加温离心也需要半个小时左右，并且容易造成溶血现象，如果遇到急诊配血或急症诊断就会延长检测的时间，甚至耽误病情的治疗，因此如何缩短血清分离的时间是检验工作中的关键。
血液促凝剂是生产促凝管的核心原料，施用量大，技术要求高，进口产品价格昂贵，血液促凝剂的技术水平要求高，对所制成的分离胶-促凝管的技术性能影像很关键，血液促凝剂的缩短血清分离的时间的技术水平代表了企业在真空采血管领域的技术水平，使用好的促凝剂，产品的竞争力就会显著提高。
但是，就目前国内采血器的生产厂家来看，采用的促凝剂配方非常混乱。归纳总结起来，无外乎于生物型和无极型两种类型，或者两种类型的结合，这样地促凝剂水平参差不齐；此外因为促凝剂容易在环境的影响下失去活性，这两种情况都会导致促凝剂的效果下降。因此，如何运用好的促凝剂加快血液检测工作就了需要解决的问题。
发明内容
（1）要解决的技术问题
本发明的目的在于能够有效地筛选出优质的促凝剂运用在检验工作中以便降低检验时间、提高检测效率，即一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法。
（2）技术方案
为了解决上述技术问题，本发明公开了这样一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，包括以下步骤：
一、硅藻土类无机型促凝剂的检测：
1）前期准备：选择温度为20~25℃的室温下进行检测试验；
准备100~1000μL的移液器1支及配套吸样枪头；准备10~100uL移液器1支及配套吸样枪头；
2）抽取血样：根据血浆用量，定量抽取血液至采血袋的公称容量400mL；
3）血样处理：将步骤2）抽出的血静置30~45min后离心，离心力设定为1600~2000g之间，控制离心时间为5~10min；
检测硅藻土类无机型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤4）：
4）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；
5）将步骤4）的抗凝管中加入0.025mol/L的氯化钙溶液200uL，混匀，同时启动秒表计时，并记录硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
6）多次试验：将不同类型的硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~5）步骤；
7）判定结果：以“加入试剂0.025mol/L的氯化钙溶液，5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的硅藻土类无机型促凝剂的效果；
检测凝血酶类生物型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤8）：
8）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；
9）将步骤8）的混合液混匀，同时启动秒表计时，并记录凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
10）多次试验：将不同类型的凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~3）和8）~9）的步骤；
11）判定结果：以“5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的凝血酶类生物型促凝剂的效果。
优选的，所述的血液可以是人血或者是兔血。
优选的，所述的步骤4）中，具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量为3~20支。
优选的，所述的步骤8）中，具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量为3~20支。
（3）有益效果
本发明与现有技术相比，本发明运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法制备方法上采用不同的工艺方式：第一，在抽取血样时，采用枸橼酸钠对血浆进行处理，由于枸橼酸根离子个血液中的钙离子结合，形成不易解离的可溶性络合物，从而使血液中钙离子浓度降低，血液凝固不易发生，通过利用枸橼酸钠便于控制多余的变量，便于更好的观测反应结果；第二，在混匀融合上，选择0.025mol/L的氯化钙来判断硅藻土类无机型硅胶促凝剂，控制定量减少检测促凝剂时除了促凝剂之外的其他变量，便于筛选优质的硅藻土类无机型硅胶促凝剂，而凝血酶类生物型促凝剂只要控制计入的血浆的量就可以判断出优质的凝血酶类生物型促凝剂，方法简单而且节约材料，本发明中，使用的硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1:9的数量为3~20支，主要是运用不同含量的硅藻土类无机型促凝剂进行测试，从而筛选出最优质的硅藻土类无机型促凝剂；同理，在筛选凝血酶类生物型促凝剂时也是采用这种方法。因此，能够有效的测量促凝剂效果。
因此，此方法更加方便快捷的筛选出优质的硅藻土类无机型促凝剂和凝血酶类生物型促凝剂，有利于医学检测的效率。
具体实施方式
下面以不同的制备方法对本发明进行详细的描述，所列举的实施例可以使本专业的技术人员更理解本发明，但不以任何形式限制本发明，如可将本发明扩大至其他血液促凝剂的技术上加以应用。
实施例1：
运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，包括以下步骤：
1）前期准备：选择温度为25℃的室温下进行检测试验；
准备100~1000μL的移液器1支及配套吸样枪头；准备10~100uL移液器1支及配套吸样枪头；
2）抽取血样：根据血浆用量，定量抽取血液至采血袋的公称容量400mL；
3）血样处理：将步骤2）抽出的血静置30min后离心，离心力设定为1600g之间，控制离心时间为10min；
检测硅藻土类无机型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤4）：
4）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量准备3支；
5）将步骤4）的抗凝管中加入0.025mol/L的氯化钙溶液200uL，混匀，同时启动秒表计时，并记录硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
6）多次试验：将不同类型的硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~5）步骤；
7）判定结果：以“加入试剂0.025mol/L的氯化钙溶液，5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的硅藻土类无机型促凝剂的效果；
检测凝血酶类生物型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤8）：
8）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量准备3支；
9）将步骤8）的混合液混匀，同时启动秒表计时，并记录凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
10）多次试验：将不同类型的凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~3）和8）~9）的步骤；
11）判定结果：以“5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的凝血酶类生物型促凝剂的效果。
实施例2：
运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
1）前期准备：选择温度为20℃的室温下进行检测试验；
准备100~1000μL的移液器1支及配套吸样枪头；准备10~100uL移液器1支及配套吸样枪头；
2）抽取血样：根据血浆用量，定量抽取血液至采血袋的公称容量400mL；
3）血样处理：将步骤2）抽出的血静置40min后离心，离心力设定为2000g之间，控制离心时间为5min；
检测硅藻土类无机型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤4）：
4）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量准备20支；
5）将步骤4）的抗凝管中加入0.025mol/L的氯化钙溶液200uL，混匀，同时启动秒表计时，并记录硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
6）多次试验：将不同类型的硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~5）步骤；
7）判定结果：以“加入试剂0.025mol/L的氯化钙溶液，5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的硅藻土类无机型促凝剂的效果；
检测凝血酶类生物型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤8）：
8）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量准备20支；
9）将步骤8）的混合液混匀，同时启动秒表计时，并记录凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
10）多次试验：将不同类型的凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~3）和8）~9）的步骤；
11）判定结果：以“5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的凝血酶类生物型促凝剂的效果。
实施例3：
运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，包括以下步骤：
1）前期准备：选择温度为23℃的室温下进行检测试验；
准备100~1000μL的移液器1支及配套吸样枪头；准备10~100uL移液器1支及配套吸样枪头；
2）抽取血样：根据血浆用量，定量抽取血液至采血袋的公称容量400mL；
3）血样处理：将步骤2）抽出的血静置45min后离心，离心力设定为1800g之间，控制离心时间为7min；
检测硅藻土类无机型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤4）：
4）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量准备17支；
5）将步骤4）的抗凝管中加入0.025mol/L的氯化钙溶液200uL，混匀，同时启动秒表计时，并记录硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
6）多次试验：将不同类型的硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~5）步骤；
7）判定结果：以“加入试剂0.025mol/L的氯化钙溶液，5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的硅藻土类无机型促凝剂的效果；
检测凝血酶类生物型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤8）：
8）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量准备17支；
9）将步骤8）的混合液混匀，同时启动秒表计时，并记录凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
10）多次试验：将不同类型的凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~3）和8）~9）的步骤；
11）判定结果：以“5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的凝血酶类生物型促凝剂的效果。
实施例4：
运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，包括以下步骤：
一、硅藻土类无机型促凝剂的检测：
1）前期准备：选择温度为25℃的室温下进行检测试验；
准备100~1000μL的移液器1支及配套吸样枪头；准备10~100uL移液器1支及配套吸样枪头；
2）抽取血样：根据血浆用量，定量抽取血液至采血袋的公称容量400mL；
3）血样处理：将步骤2）抽出的血静置30min后离心，离心力设定为1800g之间，控制离心时间为5min；
检测硅藻土类无机型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤4）：
4）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量准备12支；
5）将步骤4）的抗凝管中加入0.025mol/L的氯化钙溶液200uL，混匀，同时启动秒表计时，并记录硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
6）多次试验：将不同类型的硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~5）步骤；
7）判定结果：以“加入试剂0.025mol/L的氯化钙溶液，5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的硅藻土类无机型促凝剂的效果；
检测凝血酶类生物型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤8）：
8）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量准备12支；
9）将步骤8）的混合液混匀，同时启动秒表计时，并记录凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
10）多次试验：将不同类型的凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~3）和8）~9）的步骤；
11）判定结果：以“5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的凝血酶类生物型促凝剂的效果。

Claims (4)

1.一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
1）前期准备：选择温度为20~25℃的室温下进行检测试验；
准备100~1000μL的移液器1支及配套吸样枪头；准备10~100uL移液器1支及配套吸样枪头；
2）抽取血样：根据血浆用量，定量抽取血液至采血袋的公称容量400mL；
3）血样处理：将步骤2）抽出的血静置30~45min后离心，离心力设定为1600~2000g之间，控制离心时间为5~10min；
检测硅藻土类无机型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤4）：
4）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；5）将步骤4）的抗凝管中加入0.025mol/L的氯化钙溶液200uL，混匀，同时启动秒表计时，并记录硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
6）多次试验：将不同类型的硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~5）步骤；
7）判定结果：以“加入试剂0.025mol/L的氯化钙溶液，5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的硅藻土类无机型促凝剂的效果；
检测凝血酶类生物型促凝剂时：在步骤3）后，进入步骤8）：
8）混匀融合：抽取步骤3）中的血浆200uL加入具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中，将抗凝管摇匀，使抗凝管内试剂充分融入血浆；
9）将步骤8）的混合液混匀，同时启动秒表计时，并记录凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管中出现纤维蛋白的时间；
10）多次试验：将不同类型的凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9的抗凝管重复1）~3）和8）~9）的步骤；
11）判定结果：以“5min内出现纤维蛋白现象”为合格的判定标准，进而判断不同类型的凝血酶类生物型促凝剂的效果。
2.根据权利要求1所述的一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，其特征在于：所述的血液可以是人血或者是兔血。
3.根据权利要求1所述的一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，其特征在于：所述的步骤4）中，具有硅藻土类无机型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量为3~20支。
4.根据权利要求1所述的一种运用血液凝固方式测量促凝剂效果的检测方法，其特征在于：所述的步骤8）中，具有凝血酶类生物型促凝剂和枸橼酸钠1：9抗凝管的数量为3~20支。
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