CN109485705A - 水稻耐旱性相关转录因子OsTLP6及编码基因和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及水稻耐旱性相关转录因子OsTLP6及编码基因和应用。本发明的水稻转录因子OsTLP6的氨基酸序列SEQ ID No.1所示，水稻转录因子OsTLP6基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示。在水稻中提高基因OsTLP6的表达量，可以提高水稻在干旱条件下的存活率，上调下游耐旱基因的表达量，提高植株的耐旱性，用于农作物耐旱品种的培育。

Description

水稻耐旱性相关转录因子OsTLP6及编码基因和应用

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及水稻耐旱性相关转录因子OsTLP6及编码基因和应用。

背景技术

水稻是重要粮食作物和禾本科的模式植物。随着环境日益恶化，干旱、缺水等胁迫对水稻生长发育和产量的影响日益严重。因此，培育耐逆性强的水稻是提高胁迫条件下的水稻产量、保证粮食安全的重要途径之一。

Tubby蛋白家族最先发现于哺乳类动物细胞中，与生长发育过程中的神经发育、抗病和免疫相关。类Tubby蛋白(tubby-like protein,TLP)在植物中广泛存在，与Tubby蛋白同源性很高。水稻(Oryza sativa)基因组中有14个类Tubby蛋白，其中OsTLP家族参与宿主-病原体相互作用，OsTLP2、OsTLP7、OsTLP8和OsTLP9等4个蛋白质在抗病、感病反应和对照处理中有差异表达，参与了水稻抗白叶枯病的反应。在感染水稻黄单胞菌(Xanthomonasoryzae pv.oryza)时，水稻OsTLPs家族中的OsTLP2、OsTLP7、OsTLP8和OsTLP9蛋白被诱导表达。现有技术中未公开水稻OsTLPs蛋白在非生物胁迫方面的功能、机理。

发明内容

本发明的目的在于提供一种水稻转录因子OsTLP6。

本发明的再一目的在于提供一种水稻转录因子OsTLP6基因。

本发明的再一目的在于提供含有上述水稻转录因子OsTLP6基因的重组表达载体。

本发明的再一目的在于提供含有上述水稻转录因子OsTLP6基因的重组菌株。

本发明的再一目的在于提供上述水稻转录因子OsTLP6的应用。

根据本发明具体实施方式的水稻转录因子OsTLP6，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示：

MQCFIRRDKSTQTYYLYLSLGSAVLVDNGKFLLSAKRNWHATCTEYVISMNANNLSRSTNTNIGKLRSNFLGTKFVIYDTHTPYNATSDSQSGKTSRRFSNKGTAKHPCSTYSIANISYELNVFGTRGPRRMCCLMHSIPASSLEAGGTVPSQPDSILAHSLNESSFRSVSFSKSSVMDHSMHFSSAQFSDISIGDGPRIGGRVLSDDEECKETPLILQNKAPRWHEQLQCWCLNFRGRVTVASVKNFQLIAATQPAAGAPTPSQPVPPPPPEHDKVILQFGKVAKDMFTMDYHYPLSAFQAFAISLSSFDTKLAC

本发明提供水稻转录因子OsTLP6编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示：

ATGCAGTGTTTCATTAGGAGGGATAAGTCTACGCAGACCTACTATTTGTACCTCTCTCTTGGCTCTGGTATGTTACTTGTTACATCTCATATGCTTTATGTTGTATGCGCCTATGTACCAGAGCCCATATTTGCTTCTGCATAAGAAGATTCATATGTAGTTGTATATACTTGTGAGCTGCTGAATGAGTGCATATATTCTGCCAAAACTATGCTTGTATTGCATAGCAAATGAAGAGCTGTTCTTTCTTATAGCCCTTGCATAGGGTAGATGGTGCCTTGGGATGGTAATTGGTGCCATGTTTATCATTTGACATGAATATGCTAGAAACATATTATTCCTTATTTGTCATTGTCTATCTTCCACAATCATGCACAAGCGAACTTGTGAACAGATCATTCAGCATTCCTTGGCTTTCATACAGTTAAGTTAGGTTCTTTATAACTACAATTCTGTAATAAGTTGTCTCATTTTTGTAACCAAAATAATAGGATACAGCACACAATAGTTGTTATGTATAATTAAGTGCTATTTTTTAGTATTGTATACCTCTGTCATGCACTTGTTCTACTGTTTTACCTGACCTATACCACTTGGTATTTACTACTTGACTTGACAATCTGGAAAAAAAGTTGACCTGATCCATGATAATGTCAATTAAGCAACAGTACACTAATAAAATATATTCCCGTTGTTATGCACAAGTAGGTTGTTCTCTTGAGATTGTTTGCATTCGAACCACTTCAATAGTTCAATGACACCCATATGGTGCGAGTATATTCACAAGTGGGACTGGTTCTGTGCAATTGTAATTTGAGCTGCTGTGTCCTTTGCTTGATTGGAATTGCATGCTATCTGTTTGCTGTGTCCATGTGGGTGTGCATCTGTCATTGTTGGTTTCCAATTATAGGTAACATAGTGCACATCAGATACAAAGGGCCTCAAGGCTATACTGTTGTGCACGCATGCATCGTGAGAATGAGGCGATGAGCTCAGCGTGCTTGCATTGAGCTCCTAGCTGCACAAGCTCTGCCATCGGCCGGCACGGGCCTCAAAGTCGACCACTGCTAGCCCTTTGAGCCCTGTTGTGCGAACTCAATCCTCTTCTGTTGCCTTGCGTCCGCCTGCTAGTAACATCAAGTGAGCTTAGCTAATTGCCGACTAGATATATTAGGAAATGACGACGAAACAAAATAGGAGGGAATCTCGGGATGAGATGTATGGAAAGACATTTACTAATTTTATGTGTGTAAATGCAAGACATATTTGAGCTGCTTTGATGTCGGCATATGTTCTTAACTTCTCATAATATTTTTATGCACAACGAATTAATATTATATGGTGGAAACCGTTGTTTGTTTGTTATTTTTAATCGTCTTATGAGTTGTACCGTTTTAATATGCAAGCATTGTCATTCTTTTACTTCAGTATGTCTTGTGTGTCTGACCCACCTAATTTTTGCGCGTGCTCCGTCACTGGTGCACATATATGTTTTGTTTCCTTGCTGGAATACTTTTAGTATTTCAGTACCAGCATTTACTAATTTTAGATGTTTTGATTTCCCTTTTCTGCAGCTGTGCTTGTTGACAATGGCAAATTCCTTCTATCA GCAAAAAGAAACTGGCATGCAACATGTACAGAATATGTGATATCTATGAATGCTAACAATTTATCTAGGTCTACCAA CACAAACATTGGAAAATTGAGGTATTAACCCGAAGAAACTACAACCTTATTTCAGAACTTACCCCATTTTAATCTAAAAATTATTGCTGCTGCTAATATGTCTCCATTTTGAATTGTAGGTCAAACTTCCTTGGCACAAAGTTTGTAATATATG ATACCCACACTCCGTACAATGCAACTAGTGATTCACAGTCAGGGAAAACAAGCCGAAGATTCTCCAACAAGGGAACA GCAAAGCATCCCTGCAGCACATATAGCATAGCAAACATCTCATATGAGCTAAACGTCTTTGGAACTCGGGGTCCTAG GCGGATGTGCTGTTTAATGCACTCCATCCCTGCCTCATCTCTTGAGGCTGGTGGGACTGTTCCTAGCCAGCCGGATA GCATCCTTGCCCATTCCCTCAATGAATCCTCCTTTAGGAGTGTCTCCTTTTCGAAATCGTCCGTTATGGACCATTCC ATGCATTTCAGCAGTGCTCAGTTCTCTGACATCTCAATTGGAGATGGCCCAAGGATTGGGGGCCGGGTATTGAGCGA TGATGAGGAGTGCAAGGAGACACCTTTGATTCTCCAAAACAAGGCTCCAAGATGGCATGAGCAGCTACAGTGCTGGT GCTTAAACTTCCGGGGCCGGGTAACTGTTGCTTCTGTCAAGAACTTCCAGCTCATCGCAGCCACGCAGCCTGCTGCG GGAGCCCCAACTCCATCACAGCCTGTTCCACCACCCCCACCAGAGCATGATAAGGTCATACTGCAATTCGGGAAGGT TGCCAAGGACATGTTCACCATGGATTACCACTACCCGCTCTCAGCCTTCCAGGCATTTGCTATCTCCCTGAGTAGTT TCGACACCAAGCTGGCCTGCGAATAG

上述核苷酸序列中，下划线部分为外显子序列，cDNA基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示：

ATGCAGTGTTTCATTAGGAGGGATAAGTCTACGCAGACCTACTATTTGTACCTCTCTCTTGGCTCTGCTGTGCTTGTTGACAATGGCAAATTCCTTCTATCAGCAAAAAGAAACTGGCATGCAACATGTACAGAATATGTGATATCTATGAATGCTAACAATTTATCTAGGTCTACCAACACAAACATTGGAAAATTGAGGTCAAACTTCCTTGGCACAAAGTTTGTAATATATGATACCCACACTCCGTACAATGCAACTAGTGATTCACAGTCAGGGAAAACAAGCCGAAGATTCTCCAACAAGGGAACAGCAAAGCATCCCTGCAGCACATATAGCATAGCAAACATCTCATATGAGCTAAACGTCTTTGGAACTCGGGGTCCTAGGCGGATGTGCTGTTTAATGCACTCCATCCCTGCCTCATCTCTTGAGGCTGGTGGGACTGTTCCTAGCCAGCCGGATAGCATCCTTGCCCATTCCCTCAATGAATCCTCCTTTAGGAGTGTCTCCTTTTCGAAATCGTCCGTTATGGACCATTCCATGCATTTCAGCAGTGCTCAGTTCTCTGACATCTCAATTGGAGATGGCCCAAGGATTGGGGGCCGGGTATTGAGCGATGATGAGGAGTGCAAGGAGACACCTTTGATTCTCCAAAACAAGGCTCCAAGATGGCATGAGCAGCTACAGTGCTGGTGCTTAAACTTCCGGGGCCGGGTAACTGTTGCTTCTGTCAAGAACTTCCAGCTCATCGCAGCCACGCAGCCTGCTGCGGGAGCCCCAACTCCATCACAGCCTGTTCCACCACCCCCACCAGAGCATGATAAGGTCATACTGCAATTCGGGAAGGTTGCCAAGGACATGTTCACCATGGATTACCACTACCCGCTCTCAGCCTTCCAGGCATTTGCTATCTCCCTGAGTAGTTTCGACACCAAGCTGGCCTGCGAATAG

本发明还提供含有上述基因OsTLP6的重组表达载体和重组菌株。

本发明还提供水稻转录因子OsTLP6的制备方法，包括以下步骤：

(1)用包含编码水稻转录因子OsTLP6的基因的重组载体转化宿主细胞，得到重组菌株；

(2)培养重组菌株，诱导水稻转录因子OsTLP6表达；

(3)分离纯化获得的水稻转录因子OsTLP6。

本发明还提供水稻转录因子OsTLP6基因的应用，应用该基因可以提高植物耐旱性，尤其是提高禾本科植物水稻的耐旱性。

本发明取得的有益效果：

本发明的基因OsTLP6过表达提高了转基因水稻在不同发育时期的耐旱表型，同时改善了耐逆相关的生理指标，提高了耐旱标记基因的表达量。因此，在水稻中提高基因OsTLP6的表达量，可以提高水稻在干旱条件下的存活率，上调下游耐旱基因的表达量，提高植株的耐旱性，用于农作物耐旱品种的培育。

基因OsTLP6在20％PEG、175mM NaCl和5μM ABA处理后均有不同程度的上调，上升倍数最高可达15.14倍，8.97倍和1.91倍，说明本发明基因OsTLP6强烈响应干旱胁迫。通过对不同生长发育时期的基因OsTLP6过表达转基因水稻进行干旱处理，结果发现，OsTLP6基因的上调表达提高了转基因水稻在萌发期、幼苗期和灌浆期的耐旱性；OsTLP6过表达提高了转基因水稻的叶绿素含量和脯氨酸含量，降低了转基因水稻的丙二醛含量和失水率，提高了全闭气孔的比率。OsTLP6基因过表达上调了耐旱标记基因OsDREB2A和OsSNAC1的表达。因此，本发明的基因OsTLP6上调表达能够在生理水平和分子水平提高转基因植物对干旱的耐受性，对解释水稻耐旱胁迫机制和培育抗旱作物具有重要意义。

附图说明

图1显示基因OsTLP6在NaCl、PEG和ABA处理后的表达量变化情况；

图2显示OsTLP6蛋白的亚细胞定位情况；

图3显示OsTLP6蛋白的转录激活活性鉴定；

图4显示OsTLP6过表达转基因水稻种子在干旱条件下的萌发率；

图5显示OsTLP6过表达转基因水稻幼苗在干旱条件下的表型；

图6显示灌浆期的OsTLP6过表达转基因水稻在干旱条件下的表型；

图7显示野生型和OsTLP6过表达转基因水稻在干旱胁迫前后的不同生理指标的测定结果；

图8显示OsTLP6过表达对耐逆相关基因OsABA8ox2、OsDREB2A和OsSNAC1的表达量的影响情况。

具体实施方式

实验材料

供试植物材料为水稻(Oryza sativa)日本晴(Nipponbare)和OsTLP6过表达转基因水稻。

供试菌种：大肠杆菌DH5α菌种、农杆菌EHA105菌种、酵母菌AH109。

实施例1

以日本晴水稻叶片为材料，提取其总RNA，并反转录获得cDNA。以此cDNA为模板，用上游引物:5′-TGGAAGAAAGTGAGGCTAC-3′和下游引物:5′-GTAACATACAACAGAACGGC-3′进行PCR，对PCR产物进行加A、电泳、回收、克隆和测序，得到核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的OsTLP6基因。

实施例2分析基因OsTLP6在不同处理条件下的表达模式

对日本晴进行20％PEG、175mMNaCl和5μM ABA处理，取处理不同时间的水稻叶片为材料，分别提取其总RNA，并分别反转录cDNA。以cDNA的10倍体积稀释液为模板，进行荧光定量PCR。用于检测OsTLP6基因的表达量的引物对为：上游引物:5′-GAACAGCAAAGCATCCCTGC-3′；下游引物:5′-CCCACCAGCCTCAAGAGATG-3′。用于检测内参基因(actin)的表达量的引物对为：上游引物:5′-TGGCATCTCTCAGCACATTCC-3′；下游引物:5′-TGCACAATGGATGGGTCAGA-3′。

如图1所示，基因OsTLP6在20％PEG模拟干旱处理6h时表达量迅速升高，为0h的15.14倍；175mM NaCl胁迫12h后，基因OsTLP6表达量是0h的8.97倍；经5μM ABA处理3h时，基因OsTLP6表达量升高为0h的1.91倍。以上结果表明OsTLP6基因受干旱的强诱导表达，受ABA的弱诱导表达。

实施例3 OsTLP6蛋白的转录因子特征检测

1.OsTLP6蛋白定位于细胞核里

将分别转化了p1300-GFP、p1300-OsTLP6::GFP质粒的农杆菌活化、集菌后，分别注射烟草表皮细胞，注射后培养40-48h内取叶片进行显微观察。

如图2所示，转化p1300-GFP的烟草表皮细胞的细胞核和细胞膜中都有绿色荧光，而转化p1300-OsTLP6::GFP的烟草中只在细胞核中发现绿色荧光，证明OsTLP6蛋白定位在细胞核中。

2.OsTLP6蛋白具有转录激活活性

构建pGBKT7-OsTLP6质粒，构建成功后转化酵母菌AH109，利用一缺培养基(SD/Trp-)筛选出转化成功的酵母菌。之后，将转化成功的菌斑分别挑取5-6个克隆，悬浮于20μL的超纯水中，并梯度稀释至10倍、100倍，分别从中吸取2μL点在二缺培养基(SD/Trp-/His-)上，于28℃培养箱静置培养3d后观察结果。以pGBKT7空载体转化酵母AH109做为对照组。

如图3中的A所示，pGBKT7和pGBKT7-OsTLP6转化的酵母菌均能在一缺培养基上能够正常生长；而pGBKT7转化子不能在二缺培养基上生长，pGBKT7-OsTLP6转化子全部能正常生长，因此，OsTLP6蛋白能够启动报告基因His的表达。

将一缺培养基上生长2d的质粒pGBKT7和pGBKT7-OsTLP6的转化子菌落用牙签挑起划线涂布于干净滤纸上，经液氮冻融裂解后进行X-gal显色。

如图3中的B所示，含pGBKT7的酵母菌没有被染蓝，而含pGBKT7-OsTLP6的酵母菌被染蓝了，表明OsTLP6蛋白成功激活LacZ报告基因的表达。

因此，OsTLP6蛋白是定位在细胞核里的具有转录激活活性的转录因子。

实施例4测定基因OsTLP6的耐逆功能

构建pTCK303-OsTLP6过表达载体，转化农杆菌EHA105；鉴定正确后，侵染日本晴水稻愈伤组织，经过抗生素筛选培养、分化后获得转化的水稻再生植株。对鉴定正确的水稻转基因株系进行培养3-4代，获得纯合体株系。

1.OsTLP6过表达对水稻幼苗萌发阶段的影响

分别选取野生型水稻和3个不同的OsTLP6过表达转基因水稻株系的种子各25粒，分别接种于MS0和含20％PEG的MS培养基上进行萌发率检测.

如图4所示，正常生长3d后的对照组中过表达转基因株系与野生型水稻种子在萌发率上没有显著差异，经20％PEG处理后3个转基因株系种子的萌发率均显著高于野生型日本晴的萌发率。因此，基因OsTLP6的上调表达，提高了水稻种子在萌发阶段对干旱胁迫的耐受性。

2.OsTLP6过表达对水稻幼苗的耐逆性的影响

将正常生长3d的OsTLP6过表达转基因水稻株系和野生型日本晴水稻幼苗转移到20％PEG培养基中进行干旱处理，7d后对水稻地上部分及根的长度分别进行测量。

如图5所示，对照组中3个OsTLP6过表达转基因株系与野生型日本晴的地上部分及根的长度没有显著差异，而旱处理后，3个OsTLP6过表达转基因株系的平均株高和根长均高于野生型日本晴，因此，OsTLP6基因的上调表达增强了转基因水稻幼苗对旱胁迫的耐受性。

3.OsTLP6过表达转基因水稻灌浆期耐旱性检测

(1)生理水平上检测OsTLP6过表达对细胞耐逆性的影响

如图6中的A所示，盆栽水稻在大田中生长至灌浆期时，过表达转基因水稻株系与野生型水稻长势基本一致。将水稻转移进温室中停止浇水，进行干旱处理，结果发现，停止浇水7d后，日本晴水稻茎部和叶片发生枯萎变黄，而转基因水稻叶片维持绿色，如图6中的B所示。如图6中的C所示，停止浇水7d，恢复浇水5d后，野生型水稻几乎不能恢复生长，而过表达转基因株系水稻有部分叶片变绿，恢复坚挺。

因此，OsTLP6基因上调表达提高了转基因水稻在灌浆期的耐旱性。

对胁迫处理7d的不同水稻株系为材料，进行叶绿素含量，脯氨酸含量，丙二醛含量，失水率及气孔导度等耐逆相关生理指标的检测。

结果显示，自然条件下，过表达转基因水稻与野生型日本晴的各项生理指标无显著差异；如图7中的A所示，干旱胁迫后OsTLP6过表达转基因水稻的叶绿素含量是野生型水稻的1.45-1.81倍；如图7中的B所示，脯氨酸含量是野生型水稻的1.59-1.92倍，如图7中的E所示，叶片中全闭气孔的比例是野生型的1.94-2.05倍；如图7中的C,D所示，转基因水稻的丙二醛含量和失水率均低于野生型水稻的相应指标。可见，旱胁迫后，OsTLP6上调表达导致了叶片细胞在生理水平发生综合改变，提高了水稻的耐旱能力。

(2)检测OsTLP6过表达对转基因株系中抗旱相关的Marker基因的影响

利用表1所示的引物，通过Real time PCR检测OsTLP6过表达株系中非生物胁迫相关的Marker基因的表达量的变化情况，选用的基因包括OsDREB2A和OsSNAC1和OsABA8ox2。

表1耐逆相关基因的荧光定量引物

如图8所示，OsTLP6上调表达提高了OsDREB2A和OsSNAC1的表达量，而OsABA8ox2的表达量变化不明显。OsDREB2A和OsSNAC1是已经报道的具有耐旱功能的基因，其上调表达有利于植株耐旱。因此，OsTLP6基因上调表达提高了与耐旱功能相关的基因OsDREB2A和OsSNAC1的表达量，进而利于植株耐旱。

序列表

<110> 河北师范大学

<120> 水稻耐旱性相关转录因子OsTLP6及编码基因和应用

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 316

<212> PRT

<213> 水稻日本晴(Oryza sativa Nipponbare)

<400> 1

Met Gln Cys Phe Ile Arg Arg Asp Lys Ser Thr Gln Thr Tyr Tyr Leu

1 5 10 15

Tyr Leu Ser Leu Gly Ser Ala Val Leu Val Asp Asn Gly Lys Phe Leu

20 25 30

Leu Ser Ala Lys Arg Asn Trp His Ala Thr Cys Thr Glu Tyr Val Ile

35 40 45

Ser Met Asn Ala Asn Asn Leu Ser Arg Ser Thr Asn Thr Asn Ile Gly

50 55 60

Lys Leu Arg Ser Asn Phe Leu Gly Thr Lys Phe Val Ile Tyr Asp Thr

65 70 75 80

His Thr Pro Tyr Asn Ala Thr Ser Asp Ser Gln Ser Gly Lys Thr Ser

85 90 95

Arg Arg Phe Ser Asn Lys Gly Thr Ala Lys His Pro Cys Ser Thr Tyr

100 105 110

Ser Ile Ala Asn Ile Ser Tyr Glu Leu Asn Val Phe Gly Thr Arg Gly

115 120 125

Pro Arg Arg Met Cys Cys Leu Met His Ser Ile Pro Ala Ser Ser Leu

130 135 140

Glu Ala Gly Gly Thr Val Pro Ser Gln Pro Asp Ser Ile Leu Ala His

145 150 155 160

Ser Leu Asn Glu Ser Ser Phe Arg Ser Val Ser Phe Ser Lys Ser Ser

165 170 175

Val Met Asp His Ser Met His Phe Ser Ser Ala Gln Phe Ser Asp Ile

180 185 190

Ser Ile Gly Asp Gly Pro Arg Ile Gly Gly Arg Val Leu Ser Asp Asp

195 200 205

Glu Glu Cys Lys Glu Thr Pro Leu Ile Leu Gln Asn Lys Ala Pro Arg

210 215 220

Trp His Glu Gln Leu Gln Cys Trp Cys Leu Asn Phe Arg Gly Arg Val

225 230 235 240

Thr Val Ala Ser Val Lys Asn Phe Gln Leu Ile Ala Ala Thr Gln Pro

245 250 255

Ala Ala Gly Ala Pro Thr Pro Ser Gln Pro Val Pro Pro Pro Pro Pro

260 265 270

Glu His Asp Lys Val Ile Leu Gln Phe Gly Lys Val Ala Lys Asp Met

275 280 285

Phe Thr Met Asp Tyr His Tyr Pro Leu Ser Ala Phe Gln Ala Phe Ala

290 295 300

Ile Ser Leu Ser Ser Phe Asp Thr Lys Leu Ala Cys

305 310 315

<210> 2

<211> 2559

<212> DNA

<213> 水稻日本晴(Oryza sativa Nipponbare)

<400> 2

atgcagtgtt tcattaggag ggataagtct acgcagacct actatttgta cctctctctt 60

ggctctggta tgttacttgt tacatctcat atgctttatg ttgtatgcgc ctatgtacca 120

gagcccatat ttgcttctgc ataagaagat tcatatgtag ttgtatatac ttgtgagctg 180

ctgaatgagt gcatatattc tgccaaaact atgcttgtat tgcatagcaa atgaagagct 240

gttctttctt atagcccttg catagggtag atggtgcctt gggatggtaa ttggtgccat 300

gtttatcatt tgacatgaat atgctagaaa catattattc cttatttgtc attgtctatc 360

ttccacaatc atgcacaagc gaacttgtga acagatcatt cagcattcct tggctttcat 420

acagttaagt taggttcttt ataactacaa ttctgtaata agttgtctca tttttgtaac 480

caaaataata ggatacagca cacaatagtt gttatgtata attaagtgct attttttagt 540

attgtatacc tctgtcatgc acttgttcta ctgttttacc tgacctatac cacttggtat 600

ttactacttg acttgacaat ctggaaaaaa agttgacctg atccatgata atgtcaatta 660

agcaacagta cactaataaa atatattccc gttgttatgc acaagtaggt tgttctcttg 720

agattgtttg cattcgaacc acttcaatag ttcaatgaca cccatatggt gcgagtatat 780

tcacaagtgg gactggttct gtgcaattgt aatttgagct gctgtgtcct ttgcttgatt 840

ggaattgcat gctatctgtt tgctgtgtcc atgtgggtgt gcatctgtca ttgttggttt 900

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tgagttgtac cgttttaata tgcaagcatt gtcattcttt tacttcagta tgtcttgtgt 1440

gtctgaccca cctaattttt gcgcgtgctc cgtcactggt gcacatatat gttttgtttc 1500

cttgctggaa tacttttagt atttcagtac cagcatttac taattttaga tgttttgatt 1560

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ctggcatgca acatgtacag aatatgtgat atctatgaat gctaacaatt tatctaggtc 1680

taccaacaca aacattggaa aattgaggta ttaacccgaa gaaactacaa ccttatttca 1740

gaacttaccc cattttaatc taaaaattat tgctgctgct aatatgtctc cattttgaat 1800

tgtaggtcaa acttccttgg cacaaagttt gtaatatatg atacccacac tccgtacaat 1860

gcaactagtg attcacagtc agggaaaaca agccgaagat tctccaacaa gggaacagca 1920

aagcatccct gcagcacata tagcatagca aacatctcat atgagctaaa cgtctttgga 1980

actcggggtc ctaggcggat gtgctgttta atgcactcca tccctgcctc atctcttgag 2040

gctggtggga ctgttcctag ccagccggat agcatccttg cccattccct caatgaatcc 2100

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tccctgagta gtttcgacac caagctggcc tgcgaatag 2559

<210> 3

<211> 954

<212> DNA

<213> 水稻日本晴(Oryza sativa Nipponbare)

<400> 3

atgcagtgtt tcattaggag ggataagtct acgcagacct actatttgta cctctctctt 60

ggctctgctg tgcttgttga caatggcaaa ttccttctat cagcaaaaag aaactggcat 120

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ctaaacgtct ttggaactcg gggtcctagg cggatgtgct gtttaatgca ctccatccct 420

gcctcatctc ttgaggctgg tgggactgtt cctagccagc cggatagcat ccttgcccat 480

tccctcaatg aatcctcctt taggagtgtc tccttttcga aatcgtccgt tatggaccat 540

tccatgcatt tcagcagtgc tcagttctct gacatctcaa ttggagatgg cccaaggatt 600

gggggccggg tattgagcga tgatgaggag tgcaaggaga cacctttgat tctccaaaac 660

aaggctccaa gatggcatga gcagctacag tgctggtgct taaacttccg gggccgggta 720

actgttgctt ctgtcaagaa cttccagctc atcgcagcca cgcagcctgc tgcgggagcc 780

ccaactccat cacagcctgt tccaccaccc ccaccagagc atgataaggt catactgcaa 840

ttcgggaagg ttgccaagga catgttcacc atggattacc actacccgct ctcagccttc 900

caggcatttg ctatctccct gagtagtttc gacaccaagc tggcctgcga atag 954

Claims (9)

1.水稻耐旱相关基因，其特征在于，所述基因编码水稻转录因子OsTLP6，所述水稻转录因子OsTLP6的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的提高水稻耐旱性的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNO.2或SEQ ID NO.3所示。

3.水稻转录因子OsTLP6，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.包含权利要求1所述的水稻耐旱相关基因的重组表达载体。

5.包含权利要求1所述的水稻耐旱相关基因的重组菌株。

6.权利要求1所述的水稻耐旱相关基因的应用。

7.提高植物耐旱性的方法，其特征在于，所述方法中包括在植物中过表达权利要求1所述的基因的步骤。

8.根据权利要求7所述的提高植物耐旱性的方法，其特征在于，所述植物为禾本科植物。

9.根据权利要求7所述的提高植物耐旱性的方法，其特征在于，所述植物为水稻。