CN109468171A - 一种从植物油中脱除生育酚的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种从植物油中脱除生育酚的方法。该方法包括以下步骤:1)对植物油进行脱色脱臭处理,得到预处理油样;2)对预处理油样采用中性氧化铝柱、氨基柱依次分离,流出液除去溶剂,即得。本发明提供的从植物油中脱除生育酚的方法,对植物油进行脱色脱臭、中性氧化铝柱分离、氨基柱分离,得到不含游离生育酚的植物油样,该植物油样的杂质少,非常适于用作生育酚及生育酚氧化物相关研究的空白植物油样基质,其可有效解决单一甘油三酯不能完全模拟真实植物油的基质体系的问题,而且具有样品制备简单易操作、耗时少、成本低的特点。
Description
技术领域
本发明属于高纯度甘油三酯的制备领域,具体涉及一种从植物油中脱除生育酚的方法。
背景技术
植物油脂是人类三大主要营养素之一,除了提供机体生长代谢所需要的能量外,还向人体提供重要的营养物质,如必需脂肪酸、生育酚、植物甾醇以及多酚类化合物等。生育酚是一种重要的生物活性物质,广泛存在于各种植物油中,常见的有α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚。生育酚具有显著的生理活性功能,如促进生殖,改善脂质代谢,改善血液循环,降低心肌梗死和脑梗塞的危险性,改善烧伤和冻伤,减轻更年期综合症,并具有抗氧化、美容护肤等功能。然而,与甘油三酯相似,生育酚对氧敏感,容易受到光照、加热和金属离子的作用而发生氧化反应,形成种类繁多的氧化产物。生育酚氧化后不仅会失去其生理活性功能,而且还存在潜在的细胞毒性。目前,有关食用油及相关脂类食品中生育酚及其氧化产物的研究引起了国内外科学家的广泛关注。
脂质体系中无论是生育酚的检测技术、功能特性还是其氧化规律研究,都需要空白油样基质,即不含生育酚的植物油样。目前,有关植物油中生育酚的脱除方法尚未见报道,国内外研究者大多采用甘油三酯标准品来做空白基质,这不仅导致研究成本的增加,而且单一甘油三酯并不能完全模拟真实植物油的基质体系。因此,研究和开发一种脱除植物油中生育酚的方法,制备空白植物油样基质显得尤为迫切,并具有重要的实际应用价值。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从植物油中脱除生育酚的方法,以解决现有技术中缺少一种不含生育酚的空白植物油样基质的问题。
为实现上述目的,本发明的从植物油中脱除生育酚的方法所采用的技术方案是:
一种从植物油中脱除生育酚的方法,包括以下步骤:
1)对植物油进行脱色脱臭处理,得到预处理油样;
2)对预处理油样采用中性氧化铝柱、氨基柱依次分离,流出液除去溶剂,即得。
本发明提供的从植物油中脱除生育酚的方法,对植物油进行脱色脱臭、中性氧化铝柱分离、氨基柱分离,得到不含游离生育酚的植物油样,该植物油样的杂质少,非常适于用作生育酚及生育酚氧化物相关研究的空白植物油样基质,其可有效解决单一甘油三酯不能完全模拟真实植物油的基质体系的问题,而且具有样品制备简单易操作、耗时少、成本低的特点。
步骤1)中,为更好的去除植物油中的色素和异味,减少后续分离过程对目标物质的吸附影响,优选的,步骤1)中,所述脱色脱臭处理是采用第一吸附剂和第二吸附剂依次进行处理,所述第一吸附剂为活性白土,第二吸附剂为活性炭和凹凸棒土,活性炭和凹凸棒土的质量比为(15-30):(3-6)。为更进一步提高植物油样中色素和异味的去除效果,进一步优选的,每50-100ml植物油对应活性白土的用量为2-4g,对应活性炭的用量为15-30g,对应凹凸棒土的用量为3-6g。
为提高脱色脱臭处理的处理效率,优选的,所述活性白土的粒径为100-200目,所述活性炭的粒径为100-300目,所述凹凸棒土的粒径为100-300目。
为减少脱色脱臭处理过程的油样损失,并利于后续分离过程的进行,优选的,步骤1)中,所述脱色脱臭处理是对稀释的植物油进行处理,稀释所用的溶剂为正己烷或石油醚。从提高后续分离效果和分离效率方面综合考虑,优选的,植物油与所述溶剂的体积比为1:(4-5)。
为减少油样的损失,提高中性氧化铝柱和氨基柱的分离效率,优选的,步骤2)中,中性氧化铝柱、氨基柱分离均包括上样和溶剂淋洗步骤,溶剂淋洗步骤所使用的溶剂为正己烷或石油醚,所述流出液包括上样流出液和淋洗流出液。
为使获得的空白植物油样基质不含生育酚及其他杂质,从而能够替代甘油三酯标准品使用,优选的,所述植物油为花生油、菜籽油、大豆油、玉米胚芽油、葵花籽油、橄榄油、山茶籽油、亚麻籽油、棕榈油中的任意一种。
附图说明
图1为本发明从植物油中脱除生育酚的方法实施例1的工艺流程图。
具体实施方式
本发明主要通过对植物油进行脱色脱臭处理、中性氧化铝柱分离、氨基柱分离,来获得不含游离生育酚并可以替代甘油三酯标准品应用的空白植物油样基质,从而为脂质体系中生育酚及生育酚氧化物的相关基础研究创造良好条件。
脱色脱臭处理主要是对色素和异味以及少量生育酚进行吸附处理,吸附处理利用搅拌混匀操作即可实现,搅拌速度可设定为40-60r/min,吸附时间可设定为30-40min。活性白土、活性炭、凹凸棒土等吸附剂在干燥后使用,干燥条件可设定为102-150℃下干燥2-3h。
中性氧化铝柱分离主要是去除游离脂肪酸等阴离子化合物及少量生育酚,游离脂肪酸等阴离子化合物的去除可使最终获得的空白植物油样基质的杂质含量更少,而且为后续的氨基柱分离创造了良好条件,减少了对目标物质的吸附影响,可提高氨基柱分离的分离效率,实现游离生育酚的充分脱除。中性氧化铝柱分离时,中性氧化铝的规格为100-200目,Ⅰ级活性,使用量为35-85g。氧化铝层析柱的柱管内径可选择为14-20mm,填充后柱高20-25cm;采用湿法装柱,溶剂为正己烷。上样后,可加入100-150ml正己烷或石油醚淋洗,合并上样流出液和淋洗流出液,作为后续氨基柱分离的上样溶液。
氨基柱分离实现了油样中剩余生育酚的充分脱除。氨基柱分离时,可在氨基柱上方设置无水硫酸钠层,以除去水分的影响,获得更加良好的分离效果。氨基柱可选择粒径为55-75μm、孔径为的氨基硅胶填料,使用量为15-45g,使用前在300℃活化3-4h,在干燥器中冷却至室温,采用湿法装柱,溶剂为正己烷。氨基柱的柱管内径可选择为14-20mm,填充后柱高20-25cm,无水硫酸钠的添加量可选择为4-8g。上样后,可加入100-150ml正己烷或石油醚淋洗,合并上样流出液和淋洗流出液,再在35-40℃的条件下减压蒸馏,去除有机溶剂,即得不含游离生育酚的植物油。
下面结合具体实施例对本发明的实施方式作进一步说明。
本发明的从植物油中脱除生育酚的方法的实施例1,工艺流程图如图1所示,采用以下步骤:
1)量取70ml葵花籽油,用280ml正己烷溶解,加入2g活性白土,搅拌混匀,搅拌速度为40r/min,吸附时间为30min,吸附结束后经3层中速滤纸过滤,收集滤液a;将滤液a用正己烷定容至350ml,加入15g活性炭和3g凹凸棒土,搅拌混匀,搅拌速度为40r/min,吸附时间为30min,吸附结束后经4层中速滤纸过滤,去除植物油中的色素和异味,收集滤液b。
活性白土为食品级,粒径为100目,使用前在102℃干燥箱中干燥2h;活性炭为食品级,粒径为100目,使用前在102℃干燥箱中干燥2h;凹凸棒土为食品级,粒径为100目,使用前在102℃干燥箱中干燥2h。
2)将步骤1)所得滤液b注入到中性氧化铝中,待液面下降至与中性氧化铝柱上表面平齐时,加入100ml正己烷淋洗,收集上样流出液和淋洗流出液,统称为流出液Ⅰ。
中性氧化铝柱所用填料的规格为100目,Ⅰ级活性,使用量为35g。中性氧化铝柱的柱管内径为14mm,填充后柱高20cm;采用湿法装柱,溶剂为正己烷。
3)在氨基柱上方添加4g无水硫酸钠,将步骤2)所得流出液Ⅰ注入到氨基柱中,待液面下降至与氨基柱的上表面平齐时,加入100ml正己烷淋洗,收集上样流出液和淋洗流出液,统称为流出液Ⅱ。将流出液Ⅱ在35℃的条件下减压蒸馏,去除有机溶剂,得到不含游离生育酚的葵花籽油。氨基柱所用填料的粒径为55-75μm、孔径为使用量为20g;使用前在300℃活化3h,在干燥器中冷却至室温,待装柱。氨基柱的柱管内径为15mm,填充后柱高20cm;采用湿法装柱,溶剂为正己烷。
本发明的从植物油中脱除生育酚的方法的实施例2,采用以下步骤:
1)量取70ml菜籽油,用280ml正己烷溶解,加入3g活性白土,搅拌混匀,搅拌速度为50r/min,吸附时间为35min,吸附结束后经4层中速滤纸过滤,收集滤液a;将滤液a用正己烷定容至350ml,加入20g活性炭和4g凹凸棒土,搅拌混匀,搅拌速度为50r/min,吸附时间为35min,吸附结束后经4层中速滤纸过滤,去除植物油中的色素和异味,收集滤液b。
活性白土为食品级,粒径为200目,使用前在105℃干燥箱中干燥3h;活性炭为食品级,粒径为200目,使用前在105℃干燥箱中干燥3h;凹凸棒土为食品级,粒径为200目,使用前在105℃干燥箱中干燥3h。
2)将步骤1)所得滤液b注入到中性氧化铝中,待液面下降至与中性氧化铝柱上表面平齐时,加入130ml正己烷淋洗,收集上样流出液和淋洗流出液,统称为流出液Ⅰ。
中性氧化铝柱所用填料的规格为200目,Ⅰ级活性,使用量为60g。中性氧化铝柱的柱管内径为18mm,填充后柱高22cm;采用湿法装柱,溶剂为正己烷。
3)在氨基柱上方添加6g无水硫酸钠,将步骤2)所得流出液Ⅰ注入到氨基柱中,待液面下降至与氨基柱的上表面平齐时,加入130ml正己烷淋洗,收集上样流出液和淋洗流出液,统称为流出液Ⅱ。将流出液Ⅱ在38℃的条件下减压蒸馏,去除有机溶剂,得到不含游离生育酚的菜籽油。氨基柱所用填料的粒径为55-75μm、孔径为使用量为30g;使用前在300℃活化4h,在干燥器中冷却至室温,待装柱。氨基柱的柱管内径为18mm,填充后柱高22cm;采用湿法装柱,溶剂为正己烷。
本发明的从植物油中脱除生育酚的方法的实施例3,采用以下步骤:
1)量取70ml玉米胚芽油,用280ml正己烷溶解,加入4g活性白土,搅拌混匀,搅拌速度为60r/min,吸附时间为40min,吸附结束后经4层中速滤纸过滤,收集滤液a;将滤液a用正己烷定容至350ml,加入30g活性炭和6g凹凸棒土,搅拌混匀,搅拌速度为60r/min,吸附时间为40min,吸附结束后经4层中速滤纸过滤,去除植物油中的色素和异味,收集滤液b。
活性白土为食品级,粒径为200目,使用前在105℃干燥箱中干燥3h;活性炭为食品级,粒径为300目,使用前在105℃干燥箱中干燥3h;凹凸棒土为食品级,粒径为300目,使用前在105℃干燥箱中干燥3h。
2)将步骤1)所得滤液b注入到中性氧化铝中,待液面下降至与中性氧化铝柱上表面平齐时,加入150ml正己烷淋洗,收集上样流出液和淋洗流出液,统称为流出液Ⅰ。
中性氧化铝柱所用填料的规格为200目,Ⅰ级活性,使用量为85g。中性氧化铝柱的柱管内径为20mm,填充后柱高25cm;采用湿法装柱,溶剂为正己烷。
3)在氨基柱上方添加8g无水硫酸钠,将步骤2)所得流出液Ⅰ注入到氨基柱中,待液面下降至与氨基柱的上表面平齐时,加入150ml正己烷淋洗,收集上样流出液和淋洗流出液,统称为流出液Ⅱ。将流出液Ⅱ在40℃的条件下减压蒸馏,去除有机溶剂,得到不含游离生育酚的玉米胚芽油。氨基柱所用填料的粒径为55-75μm、孔径为使用量为45g;使用前在300℃活化4h,在干燥器中冷却至室温,待装柱。氨基柱的柱管内径为20mm,填充后柱高25cm;采用湿法装柱,溶剂为正己烷。
采用实施例1的方法制备的脱生育酚葵花籽油和葵花籽原油中游离生育酚的含量如表1所示。
表1实施例1制备的脱生育酚葵花籽油和葵花籽原油中游离生育酚的含量a
(a油样中生育酚的含量以mg/kg表示;同一样品进行3次独立测定试验,样品中各生育酚化合物的含量以平均值±标准偏差表示。ND表示未检出。)
采用实施例2的方法制备的脱生育酚菜籽油和菜籽原油中游离生育酚的含量如表2所示。
表2实施例2制备的脱生育酚菜籽油和菜籽原油中游离生育酚的含量a
(a油样中生育酚的含量以mg/kg表示;同一样品进行3次独立测定试验,样品中各生育酚化合物的含量以平均值±标准偏差表示。ND表示未检出。)
采用实施例3的方法制备的脱生育酚玉米胚芽油和玉米胚芽原油中游离生育酚的含量如表3所示。
表3实施例3制备的脱生育酚玉米胚芽油和玉米胚芽原油中游离生育酚的含量a
(a油样中生育酚的含量以mg/kg表示;同一样品进行3次独立测定试验,样品中各生育酚化合物的含量以平均值±标准偏差表示。ND表示未检出。)
由表1、表2和表3的试验结果可知,实施例制备的脱生育酚葵花籽油、脱生育酚菜籽油和脱生育酚玉米胚芽油中均未检出游离α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚,表明采用实施例的方法可以完全脱除植物油中的游离生育酚,所得产品可以替代甘油三酯标准品用于脂质体系中生育酚及生育酚氧化物氧化机理及控制技术等研究,使研究成本降低80%以上,具有较高的经济效益和良好的应用开发前景。
在本发明的从植物油中脱除生育酚的方法的其他实施例中,可以参考实施例1的方法对花生油、大豆油、橄榄油、山茶籽油、亚麻籽油、棕榈油等植物油样进行处理,从而获得不含生育酚的其他植物油基质,其可以进一步丰富油样基质的类型,为相关基础研究提供更加丰富的空白油样基质。以上实施例示出了针对少量植物油样进行处理的实施情形,在大批量处理时,可根据试验装置、处理量等实际情况灵活调整中性氧化铝和氨基柱的规格。以上实施例示出了正己烷作为稀释溶剂和淋洗溶剂的实施情形,可使用石油醚等溶剂对正己烷进行替换,其可获得与实施例相当的试验效果。
Claims (8)
1.一种从植物油中脱除生育酚的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)对植物油进行脱色脱臭处理,得到预处理油样;
2)对预处理油样采用中性氧化铝柱、氨基柱依次分离,流出液除去溶剂,即得。
2.如权利要求1所述的从植物油中脱除生育酚的方法,其特征在于,步骤1)中,所述脱色脱臭处理是采用第一吸附剂和第二吸附剂依次进行处理,所述第一吸附剂为活性白土,第二吸附剂为活性炭和凹凸棒土,活性炭和凹凸棒土的质量比为(15-30):(3-6)。
3.如权利要求2所述的从植物油中脱除生育酚的方法,其特征在于,每50-100ml植物油对应活性白土的用量为2-4g,对应活性炭的用量为15-30g,对应凹凸棒土的用量为3-6g。
4.如权利要求2所述的从植物油中脱除生育酚的方法,其特征在于,所述活性白土的粒径为100-200目,所述活性炭的粒径为100-300目,所述凹凸棒土的粒径为100-300目。
5.如权利要求1-4中任一项所述的从植物油中脱除生育酚的方法,其特征在于,步骤1)中,所述脱色脱臭处理是对稀释的植物油进行处理,稀释所用的溶剂为正己烷或石油醚。
6.如权利要求5所述的从植物油中脱除生育酚的方法,其特征在于,植物油与所述溶剂的体积比为1:(4-5)。
7.如权利要求1所述的从植物油中脱除生育酚的方法,其特征在于,步骤2)中,中性氧化铝柱、氨基柱分离均包括上样和溶剂淋洗步骤,溶剂淋洗步骤所使用的溶剂为正己烷或石油醚,所述流出液包括上样流出液和淋洗流出液。
8.如权利要求1所述的从植物油中脱除生育酚的方法,其特征在于,所述植物油为花生油、菜籽油、大豆油、玉米胚芽油、葵花籽油、橄榄油、山茶籽油、亚麻籽油、棕榈油中的任意一种。
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Application publication date: 20190315 Assignee: Dengzhou Yongsheng Oil Co.,Ltd. Assignor: HENAN University OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Contract record no.: X2023980035308 Denomination of invention: A Method for Removing Tocopherols from Vegetable Oil Granted publication date: 20220422 License type: Exclusive License Record date: 20230509 |