CN109439554B - 一种空间富硒酵母以及富硒产品 - Google Patents

一种空间富硒酵母以及富硒产品 Download PDF

Info

Publication number
CN109439554B
CN109439554B CN201811311280.2A CN201811311280A CN109439554B CN 109439554 B CN109439554 B CN 109439554B CN 201811311280 A CN201811311280 A CN 201811311280A CN 109439554 B CN109439554 B CN 109439554B
Authority
CN
China
Prior art keywords
selenium
saccharomyces cerevisiae
medium
fermentation
seed
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811311280.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109439554A (zh
Inventor
郝红炜
黄英
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fuledun Bioengineering Technology Beijing Co ltd
Original Assignee
Fuledun Bioengineering Technology Beijing Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fuledun Bioengineering Technology Beijing Co ltd filed Critical Fuledun Bioengineering Technology Beijing Co ltd
Priority to CN201811311280.2A priority Critical patent/CN109439554B/zh
Publication of CN109439554A publication Critical patent/CN109439554A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109439554B publication Critical patent/CN109439554B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645Fungi ; Processes using fungi
    • C12R2001/85Saccharomyces
    • C12R2001/865Saccharomyces cerevisiae
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18Baker's yeast; Brewer's yeast
    • C12N1/185Saccharomyces isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K20/00Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/20Inorganic substances, e.g. oligoelements
    • A23K20/30Oligoelements
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/16Inorganic salts, minerals or trace elements
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16Yeasts; Culture media therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Abstract

本发明公开了一种空间富硒酵母以及富硒产品。本发明提供的酿酒酵母FH‑ST27‑801,保藏编号为CGMCC No.16420。本发明提供的酿酒酵母FH‑ST27‑12031,保藏编号为CGMCC No.16419。本发明还保护一种复合菌,由酿酒酵母FH‑ST27‑801和酿酒酵母FH‑ST27‑12031组成。本发明还保护一种富硒产品的制备方法:(1)制备酿酒酵母FH‑ST27‑801的种子液;(2)制备酿酒酵母FH‑ST27‑12031的种子液;(3)将种子液均接种至发酵培养基,进行发酵。本发明提供的菌株达到了富硒能力与生物量的平衡,工业化生产更具优势。本发明突破了当前富硒菌株工业化的瓶颈,开发出人体能高效吸收、利用的有机硒产品,可用作药品、保健品、特殊医学用途食品等。

Description

一种空间富硒酵母以及富硒产品
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种空间富硒酵母以及富硒产品。
背景技术
硒是一种化学元素,化学符号是Se,在化学元素周期表中位于第四周期VI A族,是一种非金属。可以用作光敏材料、电解锰行业催化剂、动物体必需的营养元素和植物有益的营养元素等。硒在自然界的存在方式分为两种:无机硒和有机硒。无机硒一般指亚硒酸钠和硒酸钠,从金属矿藏的副产品中获得。有机硒是硒通过生物转化与氨基酸结合而成,一般以硒蛋氨酸的形式存在。
硒的作用比较宽泛,原理主要为:(1)组成体内抗氧化酶,能提到保护细胞膜免受氧化损伤,保持其通透性;(2)硒-P蛋白具有螯合重金属等毒物,降低毒物毒性作用。因此,合理摄入硒可以增强免疫力,促进解毒排毒,对于糖尿病、白内障、关节炎、心脑血管疾病、肝癌等具有预防/治疗作用。
人体对于无机硒的吸收利用率很低,有机硒的人体吸收率达99%以上,既满足了人体硒元素需要,又解决了硒的吸收和代谢率偏低难题。
发明内容
本发明的目的是提供一种空间富硒酵母以及富硒产品。
本发明提供的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-801,简称为酿酒酵母FH-ST27-801,于2018年9月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC;地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;邮编:100101),保藏编号为CGMCC No.16420。
本发明提供的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-12031,简称为酿酒酵母FH-ST27-12031,于2018年9月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC;地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;邮编:100101),保藏编号为CGMCC No.16419。
本发明还保护一种复合菌,由酿酒酵母FH-ST27-801和酿酒酵母FH-ST27-12031组成。所述复合菌中,酿酒酵母FH-ST27-801和酿酒酵母FH-ST27-12031按照等质量配比。所述质量为菌体湿重。
本发明还保护一种富硒产品(富硒产品甲),包括酿酒酵母FH-ST27-801。
本发明还保护一种富硒产品的制备方法(方法甲),包括如下步骤:
(1)制备酿酒酵母FH-ST27-801的种子液;
(2)将步骤(1)得到的种子液接种至发酵培养基,进行发酵。
所述步骤(1)中,种子液的制备方法为:酿酒酵母接种至种子培养基,进行培养,得到种子液。培养条件具体可为:28℃、180rpm振荡培养12h。酿酒酵母与种子培养基的配比具体可为:30μg湿菌体:30mL种子培养基。种子培养基具体可为液体YPD培养基。
所述步骤(2)中,发酵条件具体可为:28℃、220rpm振荡培养24小时。所述步骤(2)中,发酵过程中进行补料。所述补料的方式为(各个时间均自发酵起始时刻计):10小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;13小时后补加80μL 10mg/mLNa2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液。所述步骤(2)中,种子液与发酵培养基的配比为:3mL种子液:30mL发酵培养基。发酵培养基具体可为改良培养基T3。
本发明还保护一种富硒产品(富硒产品乙),包括酿酒酵母FH-ST27-12031。
本发明还保护一种富硒产品的制备方法(方法乙),包括如下步骤:
(1)制备酿酒酵母FH-ST27-12031的种子液;
(2)将步骤(1)得到的种子液接种至发酵培养基,进行发酵。
所述步骤(1)中,种子液的制备方法为:酿酒酵母接种至种子培养基,进行培养,得到种子液。培养条件具体可为:28℃、180rpm振荡培养12h。酿酒酵母与种子培养基的配比具体可为:30μg湿菌体:30mL种子培养基。种子培养基具体可为液体YPD培养基。
所述步骤(2)中,发酵条件具体可为:28℃、220rpm振荡培养24小时。所述步骤(2)中,发酵过程中进行补料。所述补料的方式为(各个时间均自发酵起始时刻计):10小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;13小时后补加80μL 10mg/mLNa2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液。所述步骤(2)中,种子液与发酵培养基的配比为:3mL种子液:30mL发酵培养基。发酵培养基具体可为改良培养基T3。
本发明还保护一种富硒产品(富硒产品丙),包括酿酒酵母FH-ST27-801和酿酒酵母FH-ST27-12031。
本发明还保护一种富硒产品的制备方法(方法丙),包括如下步骤:
(1)制备酿酒酵母FH-ST27-801的种子液;
(2)制备酿酒酵母FH-ST27-12031的种子液;
(3)将步骤(1)得到的种子液和步骤(2)得到的种子液均接种至发酵培养基,进行发酵。
所述步骤(1)中,种子液的制备方法为:酿酒酵母接种至种子培养基,进行培养,得到种子液。培养条件具体可为:28℃、180rpm振荡培养12h。酿酒酵母与种子培养基的配比具体可为:30μg湿菌体:30mL种子培养基。种子培养基具体可为液体YPD培养基。
所述步骤(2)中,种子液的制备方法为:酿酒酵母接种至种子培养基,进行培养,得到种子液。培养条件具体可为:28℃、180rpm振荡培养12h。酿酒酵母与种子培养基的配比具体可为:30μg湿菌体:30mL种子培养基。种子培养基具体可为液体YPD培养基。
所述步骤(3)中,两种种子液的按照等体积配比。所述步骤(3)中,发酵条件具体可为:28℃、220rpm振荡培养24小时。所述步骤(3)中,发酵过程中进行补料。所述补料的方式为(各个时间均自发酵起始时刻计):10小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL0.5g/mL红糖水溶液;13小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL0.5g/mL红糖水溶液。所述步骤(3)中,两种种子液与发酵培养基的配比为:1.5mL种子液:1.5mL种子液:30mL发酵培养基。发酵培养基具体可为改良培养基T3。
以上任一所述方法制备得到的富硒产品也属于本发明的保护范围。
低硒或缺硒人群通过适量补硒不但能够预防肿瘤、肝病等的发生,而且可以提高机体免疫能力,维护心、肝、肺、胃等重要器官正常功能,预防老年性心、脑血管疾病的发生;富硒酵母菌作为安全有效的有机硒源,可以对人体肿瘤癌症、心血管病、糖尿病、肝病、前列腺病、心脏病、克山病、大骨节病等40多种疾病进行治疗。此外,富硒酵母作为饲料添加剂,能够促进生长,提高机体免疫力,增强抗病能力,提高畜禽(肉、蛋、奶)等相关产品的质量。
本发明的发明人利用天宫和神舟系列航天器搭载返回地面经太空诱变后的酿酒酵母,然后依次进行菌株筛选、培养条件、菌株驯化等大量工作,得到了两株菌株,两株菌株单独培养即可实现极高的生物量和有机硒含量,混合培养可以实现更高的生物量和有机硒含量。本发明提供的菌株达到了富硒能力与生物量的平衡,工业化生产更具优势。本发明突破了当前富硒菌株工业化的瓶颈,开发出人体能高效吸收、利用的有机硒产品,可用作药品。
空间微生物由于受到太空微重力效应、高真空、极端温差、弱磁场和高能粒子(电子、质子、重离子)辐射等诱变作用,可显著提高突变频率而发生基因突变,将导致其生物学性状(如个体形态、菌落特征、生理生化特性、免疫原性等)、发酵生产性能(如生物量、产物量、酶活力、效价、发酵速度等)发生改变。利用天宫和神舟系列航天器搭载返回地面经太空诱变后的酿酒酵母,以地面原始的酿酒酵母作对照,选育出发生正向突变的具有强富硒能力优良的菌株,该富硒菌株既具有高富硒能力,又具有较高的生物量,充分达到富硒能力与生物量的平衡,具有巨大的工业应用潜力。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平均值。
固体YPD培养基:葡萄糖20g、蛋白胨10g、酵母膏5g、琼脂20g,用双蒸水溶解并定容至1000mL,pH值自然。
液体YPD培养基:葡萄糖20g、蛋白胨10g、酵母膏5g,用双蒸水溶解并定容至1000mL,pH值自然。
培养基T1:YPD培养基粉末30g、酵母浸出粉10g、红糖20g、磷酸二氢钾2g、无水氯化钙0.2g、生物素0.03g,用双蒸水溶解并定容至1000mL,pH值自然。
改良培养基T1:YPD培养基粉末30g、酵母浸出粉10g、PDA培养基粉末10g、磷酸二氢钾2g、无水氯化钙0.2g、生物素0.03g,用双蒸水溶解并定容至1000mL,pH值自然。
改良培养基T2:YPD培养基粉末30g、PDA培养基粉末6g、红糖4g、磷酸二氢钾2g、无水氯化钙0.2g、生物素0.03g,用双蒸水溶解并定容至1000mL,pH值自然。
改良培养基T3:YPD培养基粉末30g、酵母浸出粉10g、PDA培养基粉末10g、红糖20g、磷酸二氢钾2g、无水氯化钙0.2g、生物素0.03g,用双蒸水溶解并定容至1000mL,pH值自然。
一、生物量的测定方法
取发酵完成后体系,4℃、7000rpm离心4min,弃上清,收集菌体沉淀。无离子水洗涤沉淀两次,相同条件离心后弃上清。将菌体沉淀进行冷冻干燥至恒重,然后称重,即为生物量。每L发酵完成后体系中的生物量,即为生物量产量,单位为g/L。
二、总硒浓度和有机硒浓度的测定方法
1、有机硒制备(Tris-HCl缓冲液:pH7.5,50mmol/L)
(1)酵母细胞破壁:称取0.1g酵母粉(即生物量测定中得到的冷冻干燥至恒重的菌粉)和1mL Tris-HCl缓冲液加入1.5mL的EP管中,充分混匀后加入Tris-HCl缓冲液至10mL,再次充分混匀,然后取样1mL,在功率为20W、间歇为5s的超声波探头下,超声破壁30min。
(2)酵母细胞酶解:在完成步骤(1)中超声破壁后的体系(1mL)中加入1mg的Protease XIV,37℃水解24h,然后4℃、10000rpm离心3min,取1mL上清液用去离子水稀释至10mL,然后用0.22μm的微孔滤膜过滤,收集滤液。
2、总硒制备
称取0.01g酵母粉(即生物量测定中得到的冷冻干燥至恒重的菌粉)于消化管中,加入2mL消化液,室温静置12小时,然后在马沸炉中170℃密闭消化8h,然后悬蒸至略干,然后用10mL去离子水重溶,然后用0.22μm微孔滤膜过滤,收集滤液。消化液:将5体积份68%硝酸和1体积份H2O2混合得到。
3、Se浓度的测定
采用HPLC-ICP-MS测定。用Na2SeO3和水制作标准曲线,然后计算得到酵母粉中的Se浓度。酵母粉中的Se浓度的单位为:μg/g。
HPLC-ICP-MS测定具体方法参见文献:Margaret P.Rayman(2004)The use ofhigh-selenium yeast to raise selenium status:how does it measure up?BritishJournal of Nutrition 92:557–573;
Kotrebai,M,Birringer,M,Tyson,JF,Block,E&Uden,PC(2000)Seleniumspeciation in enriched and natural samples by HPLC-ICP-MS and HPLC-ESI-MSwith perfluorinated carboxylic acid ion-pairing agents.Analyst 125:71–78)。
实施例1、富硒酿酒酵母培养条件的优化
空间微生物由于受到太空微重力效应、高真空、极端温差、弱磁场和高能粒子(电子、质子、重离子)辐射等诱变作用,可显著提高突变频率而发生基因突变,将导致其生物学性状(如个体形态、菌落特征、生理生化特性、免疫原性等)、发酵生产性能(如生物量、产物量、酶活力、效价、发酵速度等)发生改变。本发明的发明人利用天宫和神舟系列航天器搭载返回地面经太空诱变后的酿酒酵母,以地面原始的酿酒酵母作对照,选育出发生正向突变的具有强富硒能力优良的菌株,既具有高富硒能力,又具有较高的生物量,充分达到富硒能力与生物量的平衡。
将航天搭载返程的酿酒酵母菌株传代至23代,得到酿酒酵母F2-26(23)。
一、培养基的优化
待测菌株:酿酒酵母F2-26(23)。
种子培养基:液体YPD培养基或培养基T1。
发酵培养基:改良培养基T1、改良培养基T2或改良培养基T3。
1、待测菌株(约30μg湿菌体)接种至30mL种子培养基,28℃、180rpm振荡培养12h,即为种子液。
2、完成步骤1后,取3ml种子液接种至30mL发酵培养基,28℃、220rpm振荡培养24小时进行发酵。发酵过程按照如下方式补料(各个时间均自发酵起始时刻计):12小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加160μL 10mg/mLNa2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液。
3、完成步骤2后,检测生物量,计算生物量产量。
结果见表1。对于种子培养基来说,YPD培养基的效果优于培养基T1。对于发酵培养基来说,改良培养基T3优于改良培养基T2优于改良T1培养基。
表1
种子培养基 发酵培养基 生物量产量(g/L)
YPD培养基 改良培养基T1 15.189±0.793
YPD培养基 改良培养基T2 16.265±0.312
YPD培养基 改良培养基T3 17.232±0.312
培养基T1 改良培养基T1 12.267±0.133
培养基T1 改良培养基T2 15.521±0.224
培养基T1 改良培养基T3 14.466±0.396
二、补料方式的优化
待测菌株:酿酒酵母F2-26(23)。
种子培养基:液体YPD培养基。
发酵培养基:改良培养基T3。
1、同步骤一的1。
2、完成步骤1后,取3ml种子液接种至30mL发酵培养基,28℃、220rpm振荡培养24小时进行发酵。发酵过程按照如下方式补料(各个时间均自发酵起始时刻计):12小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加160μL 10mg/mLNa2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液。
3、完成步骤1后,取3ml种子液接种至30mL发酵培养基,28℃、220rpm振荡培养24小时进行发酵。发酵过程按照如下方式补料(各个时间均自发酵起始时刻计):10小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;13小时后补加80μL 10mg/mLNa2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加80μL10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液。
4、完成步骤2或步骤3后,检测生物量,计算生物量产量。
完成步骤2后,生物量产量为17.232±0.312g/L。
完成步骤3后,生物量产量为18.033±0.072g/L。
酿酒酵母F2-26(23)的最佳培养条件如下:
种子培养基采用液体YPD培养基;
种子培养的条件为28℃、180rpm振荡培养12h;
发酵培养基采用改良培养基T3;
发酵培养的条件为28℃、220rpm振荡培养24小时;
发酵过程的补料方式为(各个时间均自发酵起始时刻计):10小时后补加80μL10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;13小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL0.5g/mL红糖水溶液。
实施例2、酿酒酵母F2-26(23)的驯化
一、驯化
酿酒酵母F2-26(23)在含80mg/L Na2SeO3的液体YPD培养基中发酵培养24h,然后涂布于含80mg/L Na2SeO3的固体YPD培养基平板上,观察培养1-3天;期间挑取大且颜色较浅(颜色过深说明有单质硒富集而非有机硒)的单菌落8-10个,菌株保存。
将保存的菌株混合后代替酿酒酵母F2-26(23),在含80-100mg/L Na2SeO3的YPD培养基中发酵培养24h,然后涂布于含80-100mg/L Na2SeO3的YPD平板上,观察培养1-3天;期间挑取大且颜色较浅(颜色过深说明有单质硒富集而非有机硒)的单菌落8-10个,菌株保存。重复按照本进行操作,连续进行12次。
二、筛选
将步骤一中最后一次驯化获得的多个单菌落分别培养并保存,活化后作为待测菌。
种子培养基:液体YPD培养基。
发酵培养基:改良培养基T3。
1、待测菌(约30μg湿菌体)接种至30mL种子培养基,28℃、180rpm振荡培养12h,即为种子液。
2、完成步骤1后,取3ml种子液接种至30mL发酵培养基,28℃、220rpm振荡培养24小时进行发酵。发酵过程按照如下方式补料(各个时间均自发酵起始时刻计):10小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;13小时后补加80μL 10mg/mLNa2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加80μL10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液。
3、完成步骤2后,检测生物量并计算生物量产量,检测有机硒浓度。
部分结果见表2。
表2
Figure GDA0003132717090000071
Figure GDA0003132717090000081
菌株801,全称为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-801,简称为酿酒酵母FH-ST27-801,于2018年9月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC;地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;邮编:100101),保藏编号为CGMCC No.16420。
菌株12031,全称为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-12031,简称为酿酒酵母FH-ST27-12031,于2018年9月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC;地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;邮编:100101),保藏编号为CGMCC No.16419。
实施例3、酿酒酵母FH-ST27-801进行发酵的效果
种子培养基:液体YPD培养基。
发酵培养基:改良培养基T3。
1、酿酒酵母FH-ST27-801(约30μg湿菌体)接种至30mL种子培养基,28℃、180rpm振荡培养12h,即为种子液。
2、完成步骤1后,取3ml种子液接种至30mL发酵培养基,28℃、220rpm振荡培养24小时进行发酵。发酵过程按照如下方式补料(各个时间均自发酵起始时刻计):10小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;13小时后补加80μL 10mg/mLNa2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液。
3、完成步骤2后检测生物量并计算生物量产量,检测有机硒浓度和总硒浓度并计算有机硒比例(有机硒占总硒的比例)。
结果见表3。
实施例4、酿酒酵母FH-ST27-12031进行发酵的效果
种子培养基:液体YPD培养基。
发酵培养基:改良培养基T3。
1、酿酒酵母FH-ST27-12031(约30μg湿菌体)接种至30mL种子培养基,28℃、180rpm振荡培养12h,即为种子液。
2、完成步骤1后,取3ml种子液接种至30mL发酵培养基,28℃、220rpm振荡培养24小时进行发酵。发酵过程按照如下方式补料(各个时间均自发酵起始时刻计):10小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;13小时后补加80μL 10mg/mLNa2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液。
3、完成步骤2后检测生物量并计算生物量产量,检测有机硒浓度和总硒浓度并计算有机硒比例(有机硒占总硒的比例)。
结果见表3。
实施例5、酿酒酵母FH-ST27-801和酿酒酵母FH-ST27-12031进行混合发酵的效果种子培养基:液体YPD培养基。
发酵培养基:改良培养基T3。
1、酿酒酵母FH-ST27-801(约30μg湿菌体)接种至30mL种子培养基,28℃、180rpm振荡培养12h,即为种子液。
2、酿酒酵母FH-ST27-12031(约30μg湿菌体)接种至30mL种子培养基,28℃、180rpm振荡培养12h,即为种子液。
3、完成步骤1后,取1.5ml步骤1制备的种子液和1.5ml步骤2制备的种子液接种至30mL发酵培养基,28℃、220rpm振荡培养24小时进行发酵。发酵过程按照如下方式补料(各个时间均自发酵起始时刻计):10小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;13小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液;16小时后补加80μL 10mg/mL Na2SeO3水溶液、1.5mL 0.5g/mL红糖水溶液。
4、完成步骤3后检测生物量并计算生物量产量,检测有机硒浓度和总硒浓度并计算有机硒比例(有机硒占总硒的比例)。
结果见表3。
表3
Figure GDA0003132717090000091

Claims (4)

1.一种复合菌,由酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-801和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-12031组成;酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)FH-ST27-801,其保藏编号为CGMCC No.16420;酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)FH-ST27-12031,其保藏编号为CGMCC No.16419。
2.一种富硒药品,包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-801和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-12031;酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-801,其保藏编号为CGMCC No.16420;酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-12031,其保藏编号为CGMCC No.16419。
3.一种富硒药品的制备方法,包括如下步骤:
(1)制备酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-801的种子液;酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-801,其保藏编号为CGMCC No.16420;
(2)制备酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-12031的种子液;酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FH-ST27-12031,其保藏编号为CGMCC No.16419;
(3)将步骤(1)得到的种子液和步骤(2)得到的种子液均接种至发酵培养基,进行发酵。
4.权利要求3所述方法在制备富硒药品中的应用。
CN201811311280.2A 2018-11-06 2018-11-06 一种空间富硒酵母以及富硒产品 Active CN109439554B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811311280.2A CN109439554B (zh) 2018-11-06 2018-11-06 一种空间富硒酵母以及富硒产品

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811311280.2A CN109439554B (zh) 2018-11-06 2018-11-06 一种空间富硒酵母以及富硒产品

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109439554A CN109439554A (zh) 2019-03-08
CN109439554B true CN109439554B (zh) 2021-08-17

Family

ID=65551064

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811311280.2A Active CN109439554B (zh) 2018-11-06 2018-11-06 一种空间富硒酵母以及富硒产品

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109439554B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101045908A (zh) * 2006-03-30 2007-10-03 安琪酵母股份有限公司 一种富硒酿酒酵母、富硒酵母产品及其生产方法
CN103820342A (zh) * 2014-03-13 2014-05-28 恩施清江生物工程有限公司 一种超富硒酵母及其应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101045908A (zh) * 2006-03-30 2007-10-03 安琪酵母股份有限公司 一种富硒酿酒酵母、富硒酵母产品及其生产方法
CN103820342A (zh) * 2014-03-13 2014-05-28 恩施清江生物工程有限公司 一种超富硒酵母及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
The bioavailability of selenium in Saccharomyces cerevisiae;Mona M et al;《Annals of Agricultural Sciences》;20151231;第307-315页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109439554A (zh) 2019-03-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106260540B (zh) 一种用于教槽料的生物饲料及教槽料
CN111304115B (zh) 一株可高产3种形态有机硒的干酪乳杆菌及其应用
CN109161498B (zh) 枯草芽孢杆菌m406及其在制备细菌素和纤维素酶中的应用
CN111534459B (zh) 一株高产淀粉酶的发酵乳杆菌及其在制备发酵饲料中的应用
WO2019080454A1 (zh) 一株桦褐孔菌及其应用
CN112457999A (zh) 一种富硒酿酒酵母菌株及其应用
CN105886422B (zh) 枯草芽孢杆菌by7及其降解残饵和氨氮的应用
CN116042469A (zh) 一种具有抑菌功能的乳酸菌后生元复合物及其制备方法和应用
CN106566788B (zh) 利用耐银土壤芽孢杆菌生物合成纳米硒的方法及其应用
CN108330086A (zh) 一种产胞外多糖空间植物乳杆菌ss18-33及其在提高生物抗氧化活性中的应用
CN109568518B (zh) 中药混合菌固体发酵的方法和所得到的发酵中药及其应用
CN117070428B (zh) 枯草芽孢杆菌bs-22株在改善养殖环境中的应用
CN112574924B (zh) 一种枯草芽孢杆菌菌株及其微生态制剂和应用
CN104342372B (zh) 一种利用益生菌发酵生产酵母水解物的方法
KR20130003639A (ko) 가축용 생균제 효능을 보유한 사카로마이세스 세레비지애 균주 및 이를 이용한 가축용 생균제 조성물
CN102669432B (zh) 一种鹅用复合益生菌制剂及其制备方法
CN109439554B (zh) 一种空间富硒酵母以及富硒产品
CN115895974A (zh) 一株富硒且高产γ-氨基丁酸的植物乳杆菌及其应用
CN112143669B (zh) 一株蓝菌藻及其培养方法和应用
CN110423788B (zh) 一种利用诱变产生的灰树花菌株生产灰树花多糖的方法
CN113249425A (zh) 一种提高海洋红酵母菌种高产虾青素的方法
CN111676160A (zh) 牛大力内生菌rh5在促进牛大力生长中的应用
CN117106676B (zh) 一株枯草芽孢杆菌及其在饲料生产中的应用
CN109161490B (zh) 一种产核酸的热带假丝酵母菌hy4-17-21及其制备方法
CN114854611B (zh) 一种富硒酵母菌、益生菌复合菌液以及发酵豆粕饲料

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant