CN109438447B - 5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物制备方法和应用 - Google Patents

5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

5,7‑二氢‑6H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑6‑酮类衍生物制备方法和应用，属于新化合物的制备和药物应用领域，尤其涉及免疫失调和肿瘤疾病技术领域，具体涉及一类5,7‑二氢‑6H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑6‑酮类衍生物化合物结构通式I作为PI3K/mTOR抑制剂的化合物。化合物结构通式为I

Description

5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物制备方法和 应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一类5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
肿瘤信号通路抑制剂是全球热门的抗肿瘤药物研发靶点，是针对与肿瘤发生和发展相关的信号通路异常的一类靶点，目前PI3K/Akt/mTOR抑制剂是最为活跃的肿瘤信号通路之一
RAS基因的下游信号通路主要有两个：一是RAF/MEK/ERK，另一个就是PI3K/Akt/mTOR(该信号通路由PI3K、Akt和mTOR这3个激酶组成)。PI3K(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase，磷脂酰肌醇-3-激酶)下游的信号通路是Akt(丝氨酸/苏氨酸激酶)，而Akt下游最重要的信号通路则是雷帕霉素靶蛋白(mammalian target ofrapamycin，mTOR)。PI3K/Akt/mTOR可以激活RAS基因，更为重要的是，3个激酶尤其是mTOR与肿瘤细胞生殖和凋亡的因素关系密切，并且参与T细胞表达，调节抗肿瘤免疫反应，因此PI3K/Akt/mTOR成为抗肿瘤治疗的最重要靶点之一。
本发明提供了一类5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物制备方法和应用。该类化合物在治疗与PI3K-AKT-mTOR信号通路介导的有关的疾病如免疫失调和肿瘤疾病方面的用途，和该类化合物的抗增生活性在治疗相关疾病的药物的应用，对新型抗肿瘤和免疫失调药物的研发具有重要意义。
发明内容
本发明提供一类新型的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物可作为PI3K/mTOR抑制剂的化合物。
本发明提供含有作为PI3K/mTOR抑制剂的化合物的药物组合物及应用。
另外，本发明提供了5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮衍生物的制备方法。
本发明的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物，具有如下结构通式(I)。
Figure GDA0002589926050000021
其中，R1选自未被取代或被1-5个取代基取代的苯基、吡啶基、嘧啶基、1-哌啶基、1-N-甲基哌嗪基、1-吗啉基、1-硫代吗啉基，取代基选自：氨基、甲酰胺基、磺酰胺基、卤素、C1-C4饱和烷基、羟基、羧基、甲胺甲酰基、硝基；
R2选自未被取代或取代的苄基、环己基、环丙基，其中取代基可选自：单个或两个相同或不同组合的氰基、卤素、羟基、C1-C3饱和烷基、C1-C3饱和烷氧基；
R3选自未被取代或取代的1-哌啶基、1-N-甲基哌嗪基、1-四氢吡咯基、1-吗啉基、1-硫代吗啉基，其中取代基可选自：C1-C3饱和烷基、羟基；
最优选的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类化合物，其特征在于，R1为未被取代或被取代的以下基团：苯基、吡啶基、嘧啶基，其取代基可选自：氨基、酰胺基、磺酰胺基、羟基、羧基、甲胺甲酰基；
R2选自4-甲氧基苄基、环己基；
R3选自1-哌啶基、1-N-甲基哌嗪基、1-吗啉基。
上述所述的卤素优选指氟、氯；酰胺基、磺酰胺基的酰基优选为甲酰基、乙酰基、丙烯酰基。
本发明所提供的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
Figure GDA0002589926050000031
(1)化合物1与2在乙醇钠的乙醇溶液中发生亲核取代反应，生成化合物3；
(2)化合物3在甲醇钠的甲醇溶液中与脲生成相应的巴比妥酸即化合物4；
(3)N,N-二异丙基乙胺滴加到化合物4的三氯氧磷溶液中，生成相应的氯化物即化合物5；
(4)化合物5与相应的胺R2-NH2在碱性条件下发生亲核取代反应，生成化合物6；
(5)化合物6与相应的胺R3-H在碱性条件下发生亲核取代反应，生成化合物7,R3-H中杂环基上的N原子为H取代；
(6)化合物7在酸性条件下关环，生成相应的关环产物即化合物8；
(7)化合物8与相应R1的硼酸或硼酸酯在钯催化下发生SUZUKI反应，或与相应的胺在碱性条件下发生亲核取代反应，生成目标化合物I；或进一步还包括目标化合物I与酰氯进一步反应得到的类似产物。
本发明提供了5H-吡咯并[2,3-D]嘧啶-6-酮类化合物(通式I)在制备抗肿瘤和免疫失调药物中的应用。
另外，上述反应中的起始原料及中间体容易得到，或对本领域熟练技术人员来说可以用有机合成中的常规方法很容易合成。通式I所述5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮衍生物可以溶剂化物或非溶剂化物的形式存在，利用不同的溶剂进行结晶可能得到不同的溶剂化物。通式I所述药学上可接受的碱性的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮衍生物可与不同酸成盐，其中酸可为下列无机酸或有机酸：盐酸，氢溴酸，磷酸，硫酸，甲磺酸，对甲苯磺酸，三氟乙酸，枸橼酸，马来酸，酒石酸，富马酸，柠檬酸，乳酸；通式I所述药学上可接受的酸性的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮衍生物可与不同碱成盐，其中碱可为下列碱金属、碱土金属、铵以及能提供生理上可接受的阳离子的有机碱：锂，钠，钾，钙，镁，甲胺，二甲胺，三甲胺，哌啶，吗啉及三(2-羟乙基)胺。在本发明范围内的所有这些盐都可采用常规方法制备。
本发明还提供以下方法：通过将治疗有效量的如以上所定义的通式I化合物与至少一种其它抗癌药组合给予(同时或先后)需要这种治疗的患者，经由调节PI3K/mTOR信号通路来治疗增生性疾病(诸如癌症)。在优选的实施方案中，增生性疾病为癌症。
具体地，通式I化合物可用于治疗多种癌症，最具体为依赖于PI3K/mTOR信号活化的那些癌症。通常，可将本发明的化合物用于治疗以下癌症：
1.头颈部癌症，包括甲状腺癌、鼻咽癌、脑膜癌、听神经瘤、垂体瘤、口腔癌、颅咽管瘤、丘脑和脑干肿瘤、血管源性肿瘤、颅内转移瘤；
2.呼吸系统癌症，包括肺癌；
3.消化系统癌症，包括肝癌、胃癌、食管癌、大肠癌、直肠癌、结肠癌、胰腺癌；
4.泌尿系统癌症，包括肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌；
5.骨骼系统癌症，骨癌；
6.妇科癌症，包括乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌；
7.血液系统癌症，包括白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤；
8.其他类型癌症，包括恶性黑色素瘤、神经胶质瘤、皮肤癌。
通式I化合物还可用于治疗特征为细胞异常增殖的任意疾病过程，例如良性前列腺增生、神经纤维瘤病、动脉粥样硬化、肺纤维化、关节炎、牛皮癣、肾小球肾炎、血管成形术或脉管手术之后出现的再狭窄、炎性肠病、移植排斥反应、内毒素性休克和真菌感染。
通式I化合物可调节细胞RNA和DNA合成的水平。因此，可将这些物质用于治疗病毒感染(包括但不限于HIV、人乳头瘤病毒、疤疹病毒、痘病毒、EB病毒、辛德毕斯病毒和腺病毒)。
通式I化合物可用于癌症的化学预防。将化学预防定义为通过阻断初始的致突变事件或通过阻断已遭受损伤的恶变前细胞的进展来抑制侵袭性癌症的发展或抑制肿瘤复发。
通式I化合物可用于抑制肿瘤血管生成和转移，血管内皮细胞增生、转移。
本发明的化合物也可与已知的抗癌药(包括但不限于上述“抗癌药”中提到的那些)或抗癌治疗(诸如放射治疗)组合使用(一起给予或先后给予)。
本发明还提供了5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类化合物(通式I)在抗肿瘤和免疫失调药物中的应用。采用CCK-8法，用酶标仪测定在450nm处的OD值，计算72个化合物及阳性对照对人恶性胶质母细胞瘤细胞U87MG和人前列腺癌细胞PC-3的抑制率。结果表明上述部分化合物具有优异的抗肿瘤活性，一些抗肿瘤活性优于阳性对照，为新型的抗肿瘤和免疫失调药物的研发提供了实验基础。
具体实施方式
为了能够更清楚的理解本发明的具体内容，下面结合实例对本发明作进一步说明，但本发明并不限于以下实施例。
实施例1：4-(3-氨基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮的合成(9a)
Figure GDA0002589926050000051
1,1,2-乙烷三羧酸三乙酯(3)
在0℃下将丙二酸二乙酯(1)(80g，0.5mol)滴加到乙醇钠(34g，0.5mol)的乙醇(600mL)溶液中，并搅拌30分钟。滴加氯乙酸乙酯(2)(62g，0.5mol)，将混合物加热回流6小时，然后冷却至室温。减压浓缩，将残余物分配在乙酸乙酯(600mL)和水(300mL)中，将有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到无色油状的中间体3(119g，粗产率97％)，其不经纯化即用于下一步骤。
Figure GDA0002589926050000061
2-(2,4,6-三氧代六氢嘧啶-5-基)乙酸甲酯(4)
将1,1,2-乙烷三羧酸三乙酯(3)(123g，0.5mol)和脲(30g，0.5mol)加入到乙醇钠(51g，0.75mol)的甲醇(500mL)溶液中，混合物加热回流10小时，然后冷却至室温。过滤并将滤饼溶于水(300mL)中。用2N盐酸将pH调节至1，产生大量固体产物。过滤，滤饼在真空干燥箱中干燥得到中间体4(30g，产率30％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.31(s,2H),4.00(t,J＝4.2Hz,1H),3.59(s,3H),3.00(d,J＝4.3Hz,2H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ171.78,169.57,150.81,52.01,44.60,30.32.
Figure GDA0002589926050000062
(2,4,6-三氯嘧啶-5-基)乙酸甲酯(5)
将N,N-二异丙基乙胺(10.1mL，0.1mol)滴加到中间体4(10g，0.05mol)在三氯氧磷(50mL)的溶液中，混合物加热回流3小时，然后冷却至室温。减压浓缩，将残余物小心地倒入冰水(200g)中，过滤收集深色固体。将滤饼溶于乙酸乙酯(300mL)并用无水硫酸钠干燥。过滤并减压浓缩。得到中间体5(7.3g，粗产率57％)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.02(s,2H),3.69(d,J＝1.2Hz,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ168.03,162.82,156.50,126.06,52.59,34.92.
Figure GDA0002589926050000063
2-(2,4-二氯-6-((4-甲氧基苄基)氨基)嘧啶-5-基)乙酸甲酯(6)
将DIPEA(0.5mL)和4-甲氧基苄胺(137mg，1mmol)依次滴加到中间体5(255mg，1mmol)的DMF(5mL)溶液中。室温搅拌1小时。加水(50mL)后乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，粗残余物通过柱色谱纯化，得到中间体6(295mg，产率83％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56–8.33(m,1H),7.33–7.13(m,2H),6.98–6.81(m,2H),4.49(d,J＝5.8Hz,2H),3.75(s,2H),3.72(s,3H),3.65(s,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ168.86,162.38,158.11,157.56,156.64,129.99,128.27,113.50,107.43,54.82,51.92,43.55,31.42.
Figure GDA0002589926050000071
2-(2-氯-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-6-吗啉代嘧啶-5-基)乙酸甲酯(7)
将DMAP(244mg，2mmol)和吗啉(348mg，4mmol)依次滴加到中间体6(712mg，2mmol)的DMF(10mL)溶液中。室温搅拌过夜。补加吗啉直到乙酸甲酯反应完全。加水(100mL)后乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，粗残余物通过柱色谱纯化，得到中间体7(577mg，产率71％)白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.64(t,J＝5.9Hz,1H),7.22(d,J＝8.3Hz,2H),6.93–6.81(m,2H),4.44(d,J＝5.7Hz,2H),3.71(s,3H),3.63(s,3H),3.61(s,2H),3.56(s,8H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ170.39,161.63,158.93,158.29,158.04,131.85,128.42,113.51,97.09,65.89,55.00,51.79,43.86,43.53,31.36.
Figure GDA0002589926050000072
4-氯-7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(8)
将对甲苯磺酸一水合物(570mg，3mmol)加入到中间体7(1.21g，3mmol)的甲苯(30mL)溶液。反应液加热回流直至反应完全。将水(200mL)加入到反应混合物中，然后用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。合并有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，粗残余物通过柱色谱纯化，得到中间体8(731mg，产率65％)粉色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.28(d,J＝8.6Hz,2H),6.91–6.81(m,2H),4.71(s,2H),3.74–3.60(m,11H),3.55(s,2H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ173.72,165.74,160.18,158.66,151.57,129.48,128.31,113.79,102.00,65.75,55.04,44.20,41.84,32.34.
Figure GDA0002589926050000081
4-(3-氨基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(9a)
在氮气保护下，将中间体8(100mg，0.27mmol)、3-氨基苯硼酸(44mg，0.32mmol)、Pd(dppf)2Cl2(10mg，0.014mmol)，2N Na2CO3水溶液(1.5mL)和1,4-二恶烷(5mL)的混合液在100瓦的微波辐射下加热30分钟。将水(50mL)加入到反应混合物中，然后用DCM(2×50mL)萃取。合并有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，粗残余物通过柱色谱纯化，得到目标化合物9a(57mg，产率49％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.32(d,J＝8.6Hz,2H),7.24(s,1H),7.11(d,J＝4.7Hz,2H),6.88(dd,J＝9.2,2.7Hz,2H),6.66(dt,J＝4.6,2.3Hz,1H),5.19(s,2H),4.76(s,2H),3.80(s,2H),3.78(t,J＝4.7Hz,4H),3.71(s,3H),3.68(t,J＝4.8Hz,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.60,165.61,160.26,158.57,156.43,148.76,137.52,129.47,128.85,128.78,115.54,115.51,113.77,113.76,113.27,100.95,65.94,55.02,44.19,41.44,34.32.
HRMS Calcd for C24H26O3N5,432.20302,found m/z 432.20209[(M+H)+].
实施例2：4-(4-氨基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(9b)的合成
Figure GDA0002589926050000082
目标化合物由实施例1中间体8(100mg，0.27mmol)和4-氨基苯基硼酸频哪醇酯(70mg，0.32mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物9b(82mg，产率71％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.74(d,J＝8.4Hz,2H),7.31(d,J＝8.3Hz,2H),6.87(d,J＝8.3Hz,2H),6.62(d,J＝8.3Hz,2H),5.60(s,2H),4.75(s,2H),3.80(s,2H),3.76(t,J＝4.6Hz,4H),3.71(s,3H),3.70–3.64(m,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.66,170.05,165.63,165.27,160.16,158.53,150.85,129.41,129.31,128.92,113.73,113.16,98.68,65.95,55.01,44.19,41.34,34.47.
HRMS Calcd for C24H26O3N5,432.20302,found m/z 432.20212[(M+H)+].
实施例3：4-(6-氨基吡啶-3-基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(9c)的合成
Figure GDA0002589926050000091
目标化合物由实施例1中间体8(100mg，0.27mmol)和6-氨基吡啶硼酸(44mg，0.32mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物9c(55mg，产率47％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(d,J＝2.3Hz,1H),8.02(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.34–7.29(m,2H),6.87(d,J＝8.6Hz,2H),6.52(d,J＝8.8Hz,1H),6.48(s,2H),4.74(s,2H),3.82(s,2H),3.75(d,J＝4.6Hz,4H),3.71(s,3H),3.68(d,J＝4.5Hz,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.60,165.34,160.51,160.20,158.58,154.31,148.46,136.45,129.47,128.85,120.85,113.77,107.47,99.05,65.96,55.04,44.19,41.40,34.14.
HRMS Calcd for C23H25O3N6,433.19827,found m/z 433.19846[(M+H)+].
实施例4：4-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(9d)的合成
Figure GDA0002589926050000101
目标化合物由实施例1中间体8(100mg，0.27mmol)和2-氨基嘧啶-5-硼酸频哪酯(70mg，0.32mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物9d(63mg，产率54％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(s,2H),7.36–7.27(m,2H),7.15(s,2H),6.89–6.85(m,2H),4.75(s,2H),3.87(s,2H),3.75(d,J＝4.7Hz,4H),3.71(s,3H),3.68–3.65(m,4H).
HRMS Calcd for C22H24O3N7,434.19351,found m/z 434.19302[(M+H)+].
实施例5：7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉代-4-苯基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(9e)的合成
Figure GDA0002589926050000102
目标化合物由实施例1中间体8(100mg，0.27mmol)和苯硼酸(39mg，0.32mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物9e(41mg，产率37％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.98(dd,J＝6.6,2.9Hz,2H),7.54–7.45(m,3H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),6.88(d,J＝8.5Hz,2H),4.78(s,2H),3.88(s,2H),3.79(t,J＝4.8Hz,4H),3.71(s,3H),3.71–3.66(m,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.62,168.57,165.79,160.38,151.56,136.99,129.96,129.52,128.74,128.52,127.87,113.80,101.33,65.95,55.06,44.21,41.51,33.98.
HRMS Calcd for C24H25O3N4,417.19212,found m/z 417.19150[(M+H)+].
实施例6：4-(7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉代-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苯甲酸(9f)的合成
Figure GDA0002589926050000111
目标化合物由实施例1中间体8(100mg，0.27mmol)和4-羧基苯硼酸(53mg，0.32mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物9f(47mg，产率38％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.05(s,1H),8.14–8.01(m,4H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),6.88(d,J＝8.5Hz,2H),4.78(s,2H),3.90(s,2H),3.79(t,J＝4.6Hz,4H),3.71(s,3H),3.69(t,J＝4.7Hz,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.47,166.84,165.92,160.32,158.61,154.48,140.87,131.77,129.49,129.36,128.62,127.97,113.78,102.11,65.91,55.02,44.17,41.53,33.91.
HRMS Calcd for C25H25O5N4,461.18195,found m/z 461.18143[(M+H)+].
实施例7：3-(7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-N-甲基苯甲酰胺(9g)的合成
Figure GDA0002589926050000112
目标化合物由实施例1中间体8(100mg，0.27mmol)和3-(N-甲基氨基羰基)苯硼酸频那醇酯(83mg，0.32mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物9g(17mg，产率13％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.51(d,J＝4.6Hz,1H),8.34(s,1H),8.11(d,J＝7.8Hz,1H),7.92(d,J＝7.7Hz,1H),7.58(t,J＝7.8Hz,1H),7.33(d,J＝8.3Hz,2H),6.88(d,J＝8.3Hz,2H),4.78(s,2H),3.92(s,2H),3.80(t,J＝4.7Hz,4H),3.70(d,J＝6.7Hz,7H),2.82(d,J＝4.4Hz,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.55,166.22,165.83,160.38,158.62,155.06,137.10,134.89,130.32,129.49,128.69,128.60,128.53,126.25,113.79,101.55,65.94,55.03,44.19,41.53,33.89,26.27.
HRMS Calcd for C26H28O4N5,474.21358,found m/z 474.21335[(M+H)+].
实施例8：4-(4-羟基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(9h)的合成
Figure GDA0002589926050000121
目标化合物由实施例1中间体8(100mg，0.27mmol)和4-羟基苯硼酸(44mg，0.32mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物9h(39mg，产率33％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.90(s,1H),7.87(d,J＝8.4Hz,2H),7.32(d,J＝8.2Hz,2H),6.87(dd,J＝8.7,3.2Hz,4H),4.75(s,2H),3.82(s,2H),3.77(t,J＝4.6Hz,4H),3.71(s,3H),3.68(t,J＝4.5Hz,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.61,165.53,160.23,159.29,158.57,155.52,129.63,129.47,128.83,127.72,115.25,113.76,99.79,65.95,55.02,44.18,41.41,34.24.
HRMS Calcd for C24H25O4N4,433.18703,found m/z 433.18686[(M+H)+].
实施例9：1-乙基-3-(4-(7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苯基)尿素(9i)的合成
Figure GDA0002589926050000122
目标化合物由实施例1中间体8(100mg，0.27mmol)和4-(3-乙基脲)苯基硼酸频哪醇酯(93mg，0.32mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物9i(19mg，产率14％)白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.23(s,1H),7.89(d,J＝8.5Hz,2H),7.52(d,J＝8.6Hz,2H),7.32(d,J＝8.6Hz,2H),6.87(d,J＝8.6Hz,2H),6.57(s,1H),4.76(s,2H),3.86(s,2H),3.81–3.74(m,4H),3.71(s,3H),3.68(t,J＝4.7Hz,4H),3.11(p,J＝6.8Hz,2H),1.05(t,J＝7.2Hz,3H).
HRMS Calcd for C27H31O4N6,502.23303,found m/z 502.23221[(M+H)+].
实施例10：N-(5-(7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡啶-2-基)乙酰胺(10a)的合成
Figure GDA0002589926050000131
冰浴下将乙酰氯(5mg，0.06mmol)滴加到实施例3目标化合物9c(20mg，0.05mmol)和DIPEA(8mg,0.06mmol)的DCM(5mL)溶液中。室温搅拌直到反应完全。加水(50mL)后DCM(2×30mL)萃取。合并有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，粗残余物通过柱色谱纯化，得到目标化合物10a(15mg，产率63％)白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.70(s,1H),8.90(s,1H),8.35(d,J＝9.0Hz,1H),8.17(d,J＝8.9Hz,1H),7.32(d,J＝8.6Hz,2H),6.88(d,J＝8.2Hz,2H),4.78(s,2H),3.92(s,2H),3.79(s,4H),3.71(s,3H),3.69(d,J＝4.6Hz,4H),2.13(s,3H).HRMS Calcd forC25H27O4N6,475.20883,found m/z 475.20956[(M+H)+].
实施例11：N-(4-(7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苯基)乙酰胺(10b)的合成
Figure GDA0002589926050000132
目标化合物由实施例2目标化合物9b(30mg，0.07mmol)和乙酰氯(7mg，0.09mmol)使用制备目标化合物10a所描述的方法制备，得到目标化合物10b(16mg，产率48％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.12(s,1H),7.95(d,J＝8.5Hz,2H),7.70(d,J＝8.6Hz,2H),7.32(d,J＝8.6Hz,2H),6.90–6.83(m,2H),4.77(s,2H),3.86(s,2H),3.78(t,J＝4.7Hz,4H),3.71(s,3H),3.69(d,J＝5.1Hz,4H),2.07(s,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.58,168.50,165.66,160.26,158.57,155.10,140.91,131.32,129.44,128.76,128.55,118.52,113.76,100.48,65.93,55.02,44.19,41.44,34.12,24.00.
HRMS Calcd for C26H28O4N5,474.21358,found m/z 474.21280[(M+H)+].
实施例12：N-(4-(7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苯基)甲磺酰胺(10c)的合成
Figure GDA0002589926050000141
目标化合物由实施例2目标化合物9b(30mg，0.07mmol)和甲基磺酰氯(10mg，0.09mmol)使用制备目标化合物10a所描述的方法制备，得到目标化合物10c(15mg，产率42％)黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),7.98(d,J＝8.1Hz,2H),7.36–7.24(m,4H),6.88(t,J＝4.4Hz,2H),4.77(s,2H),3.86(d,J＝4.1Hz,2H),3.81–3.74(m,4H),3.71(s,3H),3.68(d,J＝4.5Hz,4H),3.05(d,J＝3.9Hz,3H).
HRMS Calcd for C25H28O5N5S,510.18057,found m/z 510.18018[(M+H)+].
实施例13：4-(3-氨基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(哌啶-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13a)
Figure GDA0002589926050000142
2-(4-氯-6-((4-甲氧基苄基)氨基)-2-(哌啶-1-基)嘧啶-5-基)乙酸甲酯(11a)
目标化合物由实施例1中间体6(250mg，0.70mmol)和哌啶(120mg，1.40mmol)使用制备中间体7所描述的方法制备，得到中间体11a(181mg，产率64％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.55(s,1H),7.25–7.16(m,2H),6.90–6.82(m,2H),4.42(d,J＝5.7Hz,2H),3.71(s,3H),3.62(s,3H),3.59(d,J＝5.2Hz,6H),1.56(d,J＝5.5Hz,2H),1.43(d,J＝10.0Hz,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ170.50,161.61,158.65,158.35,157.99,132.00,128.37,113.48,96.01,55.00,51.72,44.12,43.53,31.33,25.17,24.25.
Figure GDA0002589926050000151
4-氯-7-(4-甲氧基苄基)-2-(哌啶-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(12a)
目标化合物由实施例13中间体11a(160mg，0.40mmol)使用制备中间体8所描述的方法制备，得到中间体12a(90mg，产率60％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.32–7.24(m,2H),6.86(d,J＝8.5Hz,2H),4.70(s,2H),3.71(d,J＝5.9Hz,7H),3.52(s,2H),1.62(t,J＝6.0Hz,2H),1.50(q,J＝5.6Hz,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ173.78,165.71,159.90,158.66,151.66,129.51,128.42,113.78,100.84,55.06,44.67,41.81,32.35,25.13,24.14.
Figure GDA0002589926050000152
4-(3-氨基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(哌啶-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13a)
目标化合物由实施例13中间体12a(80mg，0.22mmol)和3-氨基苯硼酸(32mg，0.24mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物13a(35mg，产率37％)紫色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.36–7.30(m,2H),7.26–7.18(m,1H),7.10(d,J＝6.6Hz,2H),6.90–6.85(m,2H),6.65(dd,J＝6.6,2.5Hz,1H),5.20(s,2H),4.75(s,2H),3.81(t,J＝5.3Hz,4H),3.77(s,2H),3.71(s,3H),1.64(s,2H),1.53(d,J＝7.2Hz,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.65,165.55,160.10,158.57,156.56,148.74,137.81,129.50,128.89,128.83,115.52,115.41,113.75,113.24,99.84,55.04,44.51,41.41,34.33,25.21,24.40.
HRMS Calcd for C25H28O2N5,430.22375,found m/z 430.22366[(M+H)+].
实施例14：4-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(哌啶-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13b)
Figure GDA0002589926050000161
目标化合物由实施例13中间体12a(56mg，0.15mmol)和2-氨基嘧啶-5-硼酸频哪酯(36mg，0.16mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物13b(25mg，产率39％)绿色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,2H),7.31(d,J＝8.7Hz,2H),7.14(s,2H),6.90–6.85(m,2H),4.74(s,2H),3.85(s,2H),3.82–3.76(m,4H),3.71(s,3H),1.63(s,2H),1.52(s,4H).
HRMS Calcd for C23H26O2N7,432.21425,found m/z 432.21375[(M+H)+].
实施例15：4-(4-氨基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(哌啶-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13c)
Figure GDA0002589926050000162
目标化合物由实施例13中间体12a(56mg，0.15mmol)和4-氨基苯硼酸频哪醇酯(35mg，0.16mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物13c(13mg，产率20％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.72(d,J＝8.7Hz,2H),7.32(d,J＝8.6Hz,2H),6.91–6.84(m,2H),6.62(d,J＝8.7Hz,2H),5.60(s,2H),4.74(s,2H),3.79(dd,J＝10.6,5.2Hz,6H),3.71(s,3H),1.63(d,J＝5.5Hz,2H),1.52(s,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.72,165.24,160.01,158.53,156.11,150.73,129.44,129.23,129.04,124.15,113.72,113.18,97.66,55.03,44.49,41.31,34.48,25.18,24.42.
HRMS Calcd for C25H28O2N5,430.22375,found m/z 430.22324[(M+H)+].
实施例16：4-(6-氨基吡啶-3-基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(哌啶-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13d)
Figure GDA0002589926050000171
目标化合物由实施例13中间体12a(56mg，0.15mmol)和6-氨基吡啶硼酸(22mg，0.16mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物13d(29mg，产率45％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54(d,J＝2.4Hz,1H),7.99(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38–7.28(m,2H),6.90–6.85(m,2H),6.51(d,J＝8.8Hz,1H),6.43(s,2H),4.74(s,2H),3.79(d,J＝7.1Hz,6H),3.71(s,3H),1.66–1.60(m,2H),1.53(d,J＝6.7Hz,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.65,165.29,160.54,160.03,158.56,154.48,148.54,136.31,129.47,128.95,121.10,113.74,107.37,98.00,55.04,44.52,41.36,40.15,34.12,25.17,24.39.
HRMS Calcd for C24H27O2N6,431.21900,found m/z 431.21838[(M+H)+].
实施例17：4-(3-氨基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13e)
Figure GDA0002589926050000172
2-(4-氯-6-((4-甲氧基苄基)氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)乙酸甲酯(11b)
目标化合物由实施例1中间体6(250mg，0.70mmol)和N-甲基哌嗪(140mg，1.40mmol)使用制备中间体7所描述的方法制备，得到中间体11b(232mg，产率79％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.60(s,1H),7.21(d,J＝8.5Hz,2H),6.93–6.77(m,2H),4.43(d,J＝5.8Hz,2H),3.71(s,3H),3.62(s,3H),3.58(dd,J＝9.6,4.9Hz,6H),2.25(t,J＝5.0Hz,4H),2.16(s,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ170.41,161.61,158.82,158.28,158.02,131.89,128.40,113.49,96.68,54.99,54.28,51.75,45.75,43.54,43.21,31.34.
Figure GDA0002589926050000181
4-氯-7-(4-甲氧基苄基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(12b)
目标化合物由实施例17中间体11b(210mg，0.50mmol)使用制备中间体8所描述的方法制备，得到中间体12b(113mg，产率58％)白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.28(d,J＝8.2Hz,2H),6.90–6.84(m,2H),4.70(s,2H),3.70(d,J＝3.7Hz,7H),3.53(s,2H),2.33(t,J＝5.1Hz,4H),2.20(s,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ173.74,165.72,160.05,158.65,151.57,129.48,128.34,113.77,101.60,55.04,54.12,45.67,43.62,41.82,32.34.
Figure GDA0002589926050000182
4-(3-氨基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13e)
目标化合物由实施例17中间体12b(100mg，0.25mmol)和3-氨基苯硼酸(39mg，0.28mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物13e(48mg，产率43％)白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.38–7.30(m,2H),7.23(t,J＝1.6Hz,1H),7.11(d,J＝5.9Hz,2H),6.90–6.84(m,2H),6.66(dt,J＝5.9,2.6Hz,1H),5.19(s,2H),4.76(s,2H),3.83–3.76(m,6H),3.71(s,3H),2.37(t,J＝5.0Hz,4H),2.22(s,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.64,165.58,160.20,158.58,156.49,148.76,137.65,129.48,128.86,128.83,115.54,115.48,113.77,113.26,100.56,55.04,54.37,45.82,43.57,41.44,34.33.
HRMS Calcd for C25H29O2N6,445.23465,found m/z 445.23407[(M+H)+].
实施例18：4-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13f)
Figure GDA0002589926050000191
目标化合物由实施例17中间体12b(58mg，0.15mmol)和2-氨基嘧啶-5-硼酸频哪酯(36mg，0.16mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物13f(24mg，产率36％)棕色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(s,2H),7.31(d,J＝8.7Hz,2H),7.17(s,2H),6.89–6.85(m,2H),4.75(s,2H),3.86(s,2H),3.78(s,4H),3.71(s,3H),2.37(t,J＝5.0Hz,4H),2.21(s,3H).
HRMS Calcd for C23H27O2N8,447.22515,found m/z 447.22440[(M+H)+].
实施例19：4-(4-氨基苯基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13g)
Figure GDA0002589926050000192
目标化合物由实施例17中间体12b(58mg，0.15mmol)和4-氨基苯硼酸频哪醇酯(35mg，0.16mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物13g(31mg，产率47％)棕色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.73(d,J＝8.7Hz,2H),7.31(d,J＝8.7Hz,2H),6.87(d,J＝8.7Hz,2H),6.62(d,J＝8.7Hz,2H),5.62(s,2H),4.74(s,2H),3.78(d,J＝8.2Hz,6H),3.71(s,3H),2.36(t,J＝5.0Hz,4H),2.21(s,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.79,165.30,160.14,158.57,156.06,150.90,129.50,129.37,129.02,123.95,113.78,113.22,98.36,55.07,54.45,45.91,43.60,41.38,34.55.
HRMS Calcd for C25H29O2N6,445.23465,found m/z 445.23364[(M+H)+].
实施例20：4-(6-氨基吡啶-3-基)-7-(4-甲氧基苄基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(13h)
Figure GDA0002589926050000201
目标化合物由实施例17中间体12b(58mg，0.15mmol)和6-氨基吡啶硼酸(22mg，0.16mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物13h(23mg，产率34％)棕色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.37–7.28(m,2H),6.91–6.84(m,2H),6.51(d,J＝8.8Hz,1H),6.44(s,2H),4.75(s,2H),3.82(s,2H),3.78(t,J＝5.1Hz,4H),3.71(s,3H),2.37(t,J＝5.0Hz,4H),2.21(s,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.71,165.35,160.65,160.16,158.59,154.44,148.72,136.39,129.52,128.93,120.92,113.79,107.41,99.54,55.08,54.41,45.87,43.59,41.40,34.19.
HRMS Calcd for C24H28O2N7,446.22990,found m/z 446.22910[(M+H)+].
实施例21：N-(3-(7-(4-甲氧基苄基)-6-氧代-2-(哌啶-1-基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苯基)乙酰胺(14a)
Figure GDA0002589926050000202
目标化合物由目标化合物13a(20mg，0.05mmol)使用制备目标化合物10a所描述的方法制备，得到目标化合物14a(14mg，产率64％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.07(s,1H),8.16(s,1H),7.77(d,J＝8.1Hz,1H),7.64(d,J＝7.8Hz,1H),7.39(t,J＝7.9Hz,1H),7.33(d,J＝8.2Hz,2H),6.87(d,J＝8.2Hz,2H),4.76(s,2H),3.82(dd,J＝11.1,5.7Hz,6H),3.71(s,3H),2.07(s,3H),1.64(d,J＝6.0Hz,2H),1.54(d,J＝7.5Hz,4H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.57,168.41,165.76,160.12,158.59,155.42,139.52,137.54,129.52,128.82,128.82,122.35,120.25,118.35,113.76,100.13,55.04,44.53,41.48,34.23,25.21,24.39,24.04.
HRMS Calcd for C27H30O3N5,472.23432,found m/z 472.23389[(M+H)+].
实施例22：N-(3-(7-(4-甲氧基苄基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基基)苯基)乙酰胺(14b)
Figure GDA0002589926050000211
目标化合物由目标化合物13e(30mg，0.07mmol)使用制备目标化合物10a所描述的方法制备，得到目标化合物14b(18mg，产率55％)绿色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.13(s,1H),8.18(t,J＝2.0Hz,1H),7.78(dd,J＝8.0,2.1Hz,1H),7.65(d,J＝7.8Hz,1H),7.39(t,J＝7.9Hz,1H),7.36–7.27(m,2H),6.91–6.82(m,2H),4.76(s,2H),3.86(s,4H),3.81(s,2H),3.70(s,3H),2.54(s,4H),2.32(s,3H),2.07(s,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.54,168.49,165.85,160.12,158.62,155.40,139.57,137.29,129.55,128.85,128.74,122.40,120.38,118.41,113.79,101.13,55.06,53.82,45.03,43.01,41.54,34.23,24.05.
HRMS Calcd for C27H31O3N6,487.24576,found m/z 487.24506[(M+H)+].
实施例23：4-(3-氨基苯基)-7-环己基-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(17a)
Figure GDA0002589926050000212
2-(4-氯-6-(环己基氨基)-2-吗啉代嘧啶-5-基)乙酸甲酯(15a)
将DIPEA(1.0mL)和环己胺(1.0g，10mmol)依次滴加到中间体5(2.5g，10mmol)的DMF(10mL)溶液中。室温搅拌1小时。将DMAP(1.22g，10mmol)和吗啉(870mg，10mmol)依次加到反应液中。室温搅拌过夜。补加吗啉直到中间体反应完全。加水(200mL)后乙酸乙酯(2×200mL)萃取。合并有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，粗残余物通过柱色谱纯化，得到中间体15a(1.9g，产率51％)白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.63(d,J＝7.4Hz,1H),3.89–3.78(m,1H),3.60(dt,J＝11.8,4.8Hz,13H),1.84(d,J＝10.0Hz,2H),1.78–1.68(m,2H),1.59(d,J＝12.7Hz,1H),1.28–1.21(m,4H),1.16–1.08(m,1H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ170.48,161.05,159.05,158.39,97.01,65.94,51.63,49.94,43.84,32.04,31.35,25.38,24.88.
Figure GDA0002589926050000221
4-氯-7-环己基-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(16a)
目标化合物由中间体15a(1.8g，4.9mmol)使用制备目标化合物8所描述的方法制备，得到中间体16a(1.1g，产率67％)白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.08(td,J＝12.2,10.4,6.0Hz,1H),3.66(s,8H),3.47(s,2H),2.27–2.10(m,2H),1.79(d,J＝13.0Hz,2H),1.60(d,J＝13.5Hz,3H),1.29(t,J＝13.4Hz,2H),1.15(q,J＝12.6Hz,1H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ173.45,166.09,160.14,151.57,101.95,65.77,51.22,44.19,32.35,28.55,25.39,24.99.
Figure GDA0002589926050000222
4-(3-氨基苯基)-7-环己基-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(17a)
标化合物由中间体16a(100mg，0.30mmol)和3-氨基苯硼酸(49mg，0.36mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物17a(28mg，产率24％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.30–7.18(m,1H),7.11(d,J＝5.8Hz,2H),6.65(dt,J＝5.9,2.7Hz,1H),5.20(s,2H),4.14(td,J＝10.2,8.3,6.0Hz,1H),3.73(tt,J＝9.3,4.3Hz,10H),2.29(tt,J＝12.8,7.1Hz,2H),1.82(d,J＝13.0Hz,2H),1.73–1.55(m,3H),1.39–1.25(m,2H),1.19(t,J＝12.9Hz,1H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.41,166.07,160.23,156.33,148.75,137.70,128.84,115.51,115.42,113.25,100.95,65.97,50.84,44.22,34.34,28.63,25.51,25.09.
HRMS Calcd for C22H28O2N5,394.22375,found m/z 394.22360[(M+H)+].
实施例24：4-(4-氨基苯基)-7-环己基-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(17b)
Figure GDA0002589926050000231
标化合物由中间体16a(100mg，0.30mmol)和4-氨基苯硼酸频哪醇酯(79mg，0.36mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物17b(39mg，产率33％)白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.73(d,J＝8.7Hz,2H),6.62(d,J＝8.7Hz,2H),5.62(s,2H),4.13(ddd,J＝12.2,8.4,3.8Hz,1H),3.71(dd,J＝10.8,4.6Hz,10H),2.29(qd,J＝12.6,11.5,2.9Hz,2H),1.81(d,J＝13.0Hz,2H),1.63(dd,J＝24.3,12.3Hz,3H),1.35–1.11(m,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.62,165.84,160.21,155.94,150.88,129.38,124.05,113.25,98.80,66.08,50.81,44.30,34.61,28.78,25.61,25.18.
HRMS Calcd for C22H28O2N5,394.22375,found m/z 394.22336[(M+H)+].
实施例25：4-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-环己基-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(17c)
Figure GDA0002589926050000232
标化合物由中间体16a(100mg，0.30mmol)和2-氨基嘧啶-5-硼酸频哪酯(80mg，0.36mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物17c(41mg，产率35％)淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(s,2H),7.16(s,2H),4.13(ddd,J＝12.2,8.4,3.7Hz,1H),3.81(s,2H),3.78–3.59(m,8H),2.27(qd,J＝12.8,3.6Hz,2H),1.81(d,J＝12.8Hz,2H),1.70–1.56(m,3H),1.36–1.13(m,3H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.43,165.89,163.65,160.20,157.78,152.22,119.34,99.37,66.00,50.86,44.20,33.75,28.66,25.52,25.10.
HRMS Calcd for C20H26O2N7,396.21425,found m/z 396.21381[(M+H)+].
实施例26：4-(6-氨基-吡啶-3-基)-7-环己基-2-吗啉代-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(17d)
Figure GDA0002589926050000241
标化合物由中间体16a(100mg，0.28mmol)和6-氨基吡啶硼酸(46mg，0.33mmol)使用制备目标化合物9a所描述的方法制备，得到目标化合物17d(19mg，产率16％)淡绿色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.51(d,J＝8.8Hz,1H),6.43(s,2H),4.13(ddt,J＝12.1,7.4,3.8Hz,1H),3.80–3.66(m,10H),2.35–2.20(m,2H),1.81(d,J＝12.9Hz,2H),1.62(dd,J＝23.6,12.3Hz,3H),1.31(dd,J＝9.9,6.7Hz,2H),1.16(d,J＝12.8Hz,1H).
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ174.56,165.90,160.66,160.26,154.34,148.69,136.46,121.06,107.48,99.15,66.07,50.89,44.29,34.25,28.76,25.61,25.18.
HRMS Calcd for C21H27O2N6,395.21900,found m/z 395.21811[(M+H)+].
实施例27：N-(3-(7-环己基-2-吗啉基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)苯基)乙酰胺(18a)
Figure GDA0002589926050000251
标化合物由目标化合物17a(20mg，0.05mmol)使用制备目标化合物10a所描述的方法制备，得到目标化合物18a(10mg，产率46％)绿色固体。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.13(d,J＝2.0Hz,1H),7.78(s,1H),7.65–7.54(m,2H),7.38(t,J＝7.9Hz,1H),4.30–4.19(m,1H),3.93–3.74(m,8H),3.64(s,2H),2.36(dd,J＝12.5,3.6Hz,2H),2.19(s,3H),1.90–1.83(m,2H),1.74–1.64(m,3H),1.37(d,J＝13.4Hz,3H).
HRMS Calcd for C27H30O3N5,472.23432,found m/z 472.23389[(M+H)+].
实施例28：CCK-8染色法检测细胞活力
取活细胞比例达90％以上的细胞进行实验。细胞增殖抑制试验采用EnoGeneCellTMCounting Kit-8(CCK-8)细胞活力检测试剂盒。细胞消化、计数、制成浓度为1×105个/mL的细胞悬液，96孔板中每孔加入100μL细胞悬液(每孔1×104个细胞)；96孔板置于37℃，5％CO2培养箱中培养24小时；每孔加入100μL相应的含药物的培养基，作用浓度为50μM，同时设立阴性对照组，溶媒对照组，阳性对照组，每组5复孔；96孔板置于37℃，5％CO2培养箱中培养72小时后；每孔加入10μL CCK-8溶液,将培养板在培养箱内孵育4小时，用酶标仪测定在450nm处的OD值，计算部分化合物及阳性对照对人恶性胶质母细胞瘤细胞U87MG和人前列腺癌细胞PC-3的抑制率。
Figure GDA0002589926050000252
Figure GDA0002589926050000261

Claims (6)

1.5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物，其特征在于，5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物具有如下结构通式(I)：
Figure FDA0002628369690000011
其中，R1选自未被取代或被1-5个取代基取代的苯基、吡啶基、嘧啶基、1-哌啶基、1-N-甲基哌嗪基、1-吗啉基、1-硫代吗啉基，取代基选自：氨基、酰胺基、磺酰胺基、卤素、羟基、羧基、甲胺甲酰基、硝基；酰胺基、磺酰胺基的酰基为甲酰基、乙酰基、丙烯酰基；
R2选自未被取代或取代的苄基、环己基，其中取代基选自：单个或两个相同或不同组合的氰基、卤素、羟基、甲氧基；
R3选自未被取代或取代的1-哌啶基、1-N-甲基哌嗪基、1-四氢吡咯基、1-吗啉基、1-硫代吗啉基，其中取代基选自：甲基、羟基。
2.按照权利要求1所述的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物，其特征在于，卤素是指氟、氯。
3.权利要求1-2任一项所述的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
Figure FDA0002628369690000021
(1)化合物1与2在乙醇钠的乙醇溶液中发生亲核取代反应，生成化合物3；
(2)化合物3在甲醇钠的甲醇溶液中与脲生成相应的巴比妥酸即化合物4；
(3)N,N-二异丙基乙胺滴加到化合物4的三氯氧磷溶液中，生成相应的氯化物即化合物5；
(4)化合物5与相应的胺R2-NH2在碱性条件下发生亲核取代反应，生成化合物6；
(5)化合物6与相应的胺R3-H在碱性条件下发生亲核取代反应，生成化合物7,R3-H中杂环基上的N原子为H取代；
(6)化合物7在酸性条件下关环，生成相应的关环产物即化合物8；
(7)化合物8与相应R1的硼酸或硼酸酯在钯催化下发生SUZUKI反应，或与相应的胺在碱性条件下发生亲核取代反应，生成目标化合物I。
4.按照权利要求3所述的方法，其特征在于，权利要求1所述的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮衍生物可与不同酸成盐，其中酸选自下列无机酸或有机酸中的一种：盐酸，氢溴酸，磷酸，硫酸，甲磺酸，对甲苯磺酸，三氟乙酸，枸橼酸，马来酸，酒石酸，富马酸，柠檬酸，乳酸；权利要求1所述的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮衍生物可与不同碱成盐，其中碱选自下列碱金属、碱土金属、铵以及能提供生理上可接受的阳离子的有机碱中的一种：锂，钠，钾，钙，镁，甲胺，二甲胺，三甲胺，哌啶，吗啉及三(2-羟乙基)胺。
5.权利要求1-2任一项所述的5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮类衍生物用于制备预防或治疗与PI3K-AKT-mTOR信号通路介导有关的肿瘤疾病、免疫学疾病、血管平滑肌细胞迁移和增生有关的疾病的药物的应用。
6.根据权利要求5应用，其特征在于，所述的肿瘤选自甲状腺癌、鼻咽癌、脑膜癌、听神经瘤、垂体瘤、口腔癌、颅咽管瘤、丘脑和脑干肿瘤、血管源性肿瘤、颅内转移瘤、肺癌、肝癌、胃癌、食管癌、大肠癌、直肠癌、结肠癌、胰腺癌、肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌、骨癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、恶性黑色素瘤、神经胶质瘤、皮肤癌。
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