CN109414392A - 移除结石的方法和试剂盒 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于从牙齿上移除结石的方法和试剂盒。所述方法可包括将包含过氧化氢或其前体的组分A和包含过氧化氢酶的组分B施用到所述牙齿，从而生成氧气；以及从所述牙齿上移除所述结石的至少一部分。

Description

移除结石的方法和试剂盒
背景技术
牙结石可导致牙周病，包括齿龈炎和牙周炎。现有的移除牙结石的方法依赖于机械手段，诸如如由训练有素的牙科专业人员进行刮除。此类现有移除程序对于患者来说可能是痛苦的和不舒服的。此外，现有的移除程序可对卫生员造成重大的物理负担，通常导致肌肉和重复性运动疾病(例如腕管综合征)。此外，在牙科预防程序中大量的时间被分配给结石移除。尽管在2015年12约日提交的PCT专利申请序列号2015/063335“Methods andKits of Removing Calculus”中公开了用于结石移除的各种方法，但总是希望继续创造更好的解决方案以移除结石。
发明内容
本公开的一些方面提供从牙齿移除结石的方法。方法可包括提供组分A，其中组分A包含过氧化氢或其前体；提供组分B，其中组分B包含过氧化氢酶；将组分A和组分B施用到牙齿，从而生成氧气；和从牙齿上移除结石的至少一部分；其中组分A和组分B各自独立地为液体或凝胶；并且其中组分A和组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。
本公开的某些方面提供用于从牙齿上移除结石的部件的试剂盒。试剂盒可包括：包含过氧化氢或其前体的组分A；和包含过氧化氢酶的组分B；其中组分A和组分B各自独立地为液体或凝胶；并且其中组分A和组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。
附图说明
图1是根据本公开的一个实施方案的示出用于从牙齿上移除结石的本公开的步骤的框图；
图2是根据本公开的另一个实施方案的示出用于从牙齿上移除结石的本公开的步骤的框图；以及
图3是根据本公开的又一个实施方案的示出用于从牙齿上移除结石的本公开的步骤的框图。
具体实施方式
在详细说明本公开的任何实施方案之前，应当理解，本发明的应用并不限于在下文描述中阐述的组件的使用、构造和布置的细节。本发明容许其它实施方案并且容许以各种方式实施或执行，对于本领域的普通技术人员而言，在阅读本公开时，这些方式将显而易见。另外还应理解，本文中所用的用语和术语均出于说明目的，不应被视为限制性的。本文中“包括”、“包含”或“具有”以及其变型的使用意指涵盖其后所列举的项目及其等同形式以及附加的项目。应当理解，可利用其它的实施方案，并且可在不脱离本公开范围的前提下，作出结构变化或逻辑变化。
牙结石(也称为牙垢)被定义为填充有多种钙磷酸盐或牙斑的晶体的矿化牙科生物膜，其部分或完全钙化。这可能是由于来自口腔环境中的流体的矿物质持续积聚在牙齿上的牙斑上引起的。牙结石是一种影响人类和各种动物物种的常见口腔病症，并且牙结石的存在可能会导致牙周病。现有的移除牙结石的方法，其依赖于机械手段诸如刮除，对于牙科专业人士来说是耗时又费力的，并且对于患者来说可能是痛苦又不愉快的经历。
本公开一般涉及从牙齿上移除结石的方法和试剂盒。一般来讲，方法可包括提供包含过氧化氢或过氧化氢前体的组分A；提供包含过氧化氢酶的组分B；将组分A和组分B施用到牙齿，从而对牙齿生成氧气，从而生成氧气；以及从牙齿上移除结石的至少一部分。在一个优选的实施方案中，组分A和组分B各自独立地为液体或凝胶；并且组分A和组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。具体地，令人惊讶的是，当两种凝胶同时施用时，过氧化氢酶和过氧化氢凝胶粘度的窄范围使结石移除变容易，如下文更详细地论述和实例所示。
通常，由于结石对牙齿表面的一般强烈粘附以及结石和牙齿组织的类似无机组成，牙结石的移除是具有挑战性的。然而，通过在牙齿上的牙结石表面上或在牙齿上的结石的孔内产生氧气泡，使用本发明的方法，这物理地帮助破坏结石以使结石更容易从牙齿中移除。本公开的方法可例如提供更容易地移除牙结石。此外，本公开的方法可减少结石移除的时间。例如，在施用组分A和组分B之后，移除结石更容易并且更快。因此，本公开的方法可以使程序效率提高，有助于减少专门用于结石移除的牙科预防程序的时间量。这将增加结石移除过程中的患者舒适度，为更多患者创造机会，为其它程序提供额外的时间，并增加牙科专业人员的休息时间，减少肌肉和重复性运动疾病，诸如腕管综合征)。
在一个实施方案中，组分A可包括过氧化氢。过氧化氢可通过过氧化物生成酶与对应底物(例如葡萄糖氧化酶和超氧化物歧化酶(SOD))组合生成。例如，葡萄糖氧化酶可催化葡萄糖氧化成过氧化氢。在一些实施方案中，过氧化氢可为过氧化氢加合物的形式，诸如过氧化脲、过碳酸盐或酸和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)过氧化物以及它们的组合。合适的过碳酸盐或酸可包括但不限于过碳酸、过碳酸钠、过碳酸钾、过碳酸镁、过碳酸钙、过碳酸锌。
在一些实施方案中，组分A可包括过氧化氢前体，诸如过硼酸盐或酸、金属过氧化物、有机过氧化物、无机过氧酸或盐以及它们的组合。合适的过硼酸盐或酸可包括但不限于过硼酸、过硼酸钠、过硼酸钾、过硼酸镁、过硼酸钙和过硼酸锌。合适的金属过氧化物可包括但不限于过氧化钙和过氧化镁。合适的有机过氧化物可包括但不限于过氧羧酸，诸如过乙酸或其盐、过丙二酸或其盐、过酒石酸或其盐以及过柠檬酸或其盐。在一些实施方案中，有机过氧化物可以是过乙酸盐或酸。合适的无机过氧酸或盐可包括但不限于过氧单硫酸、过氧磷酸，和过氧硫酸的钾盐。
在一些实施方案中，组分A可包括至少约0.003M的过氧化氢。在这些实施方案中的一些中，组分A可包括约0.03M至约12M的过氧化氢。在这些实施方案中的一些中，组分A可包括约0.1M至约3M的过氧化氢。在一些实施方案中，组分A可包括过氧化氢，其量为约0.01重量％、约0.1重量％、约1重量％、约5重量％、约30重量％、约35重量％，或在这些值中的任何两个之间且包括其的范围。在其它实施方案中，组分A可包含能够产生类似浓度过氧化氢(例如至少约0.003M的过氧化氢)的过氧化氢前体或过氧化氢加合物例如，15重量％过氧化脲溶液可以产生包括约5重量％过氧化氢的溶液。
在一些实施方案中，组分B可包括过氧化物酶。在一些实施方案中，组分B可包括过氧化氢酶。过氧化氢酶可存在于多种真核和原核生物体中，所述生物体包括但不限于根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)、沙门氏嗜铁菌(Aliivibrio salmonicida)、冈比亚按蚊(Anopheles gambiae)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(Aspergillusniger)。可用于本公开中的合适的过氧化氢酶是本领域熟知的，并且可包括在国际公布号WO2012/072777中描述的那些。例如，合适的过氧化氢酶可包括来源于牛肝脏、黑曲霉和溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)或从其中分离的过氧化氢酶。在一些实施方案中，过氧化氢酶可以是未分离的形式，诸如整个真核和原核生物体的一部分。过氧化氢酶可催化两个过氧化氢分子歧化成两个分子水和一个分子氧气。
在一些实施方案中，组分B可包括大于约3单位/毫升的过氧化氢酶。在一些实施方案中，组分B可包括大于约17单位/毫升的过氧化氢酶。如本文所用，在25℃下在pH为7.0下，一个单位过氧化氢酶每分钟将分解1.0μmol的过氧化氢，而过氧化氢浓度从10.3mM降至9.2mM，通过A240的减小速率测量。在这些实施方案的一些中，组分B可包括过氧化氢酶，其量为约30单位/毫升、约300单位/毫升、约3,000单位/毫升、约5,500单位/毫升、约30,000单位/毫升、约300,000单位/毫升，或在这些值的任何两个之间且包括其的范围，例如从约30单位/毫升至约3,000单位/毫升。在一些实施方案中，组分B可包括约1,000单位/毫升至约20,000单位/毫升过氧化氢酶。
在一些实施方案中，在将组分B施用到牙齿表面之后，口腔内过氧化氢酶的浓度增加了至少约5单位/毫升唾液、约10单位/毫升唾液、约20单位/毫升唾液、约30单位/毫升唾液、约100单位/毫升唾液、约300单位/毫升唾液、约3,000单位/毫升唾液、约5,500单位/毫升唾液约30,000单位/毫升唾液、约30,000单位/毫升唾液或在这些值的任何两个之间且包括其的范围，高于在施用组分B之前存在于口腔内的过氧化氢酶的天然浓度。
图1中示出了本发明的本发明方法的一个实施方案。提供了包含过氧化氢或过氧化氢前体的组分A，如上所述。还提供了包含过氧化氢酶的组分B，如上所述。然后，将组分A和组分B同时施用到牙齿上以在牙齿结石内生成氧气，如上所述。例如，组分A或组分B可以施用大致相同时间、共同或甚至同时施用到牙齿。通常，当同时施用组分A和组分B时，使用者观察沿着结石的表面生成的氧气泡(即，此类气泡是肉眼可观察的)。
在将组分A和组分B同时施用到牙齿结石的表面之后，在结石内产生期望的氧气以帮助破碎结石，通过机械方法或工艺从牙齿上移除结石，诸如用手或超声刮除或通过洁牙粉或牙膏来从牙齿上移除。合适的牙科手动刮除器的一个示例是作为通用(即，Columbia)刮匙从韩国的OSUNG MND有限公司(OSUNG MND CO.,LTD.(Korea))或荷兰的豪孚迪(Hu–Friedy(Netherlands))商购获得。牙科超声波刮器的一个示例是作为SIROSONIC超声波刮器，C系列从美国的西诺徳牙科(Sirona Dental(US))商购获得。
在更具体的实施方案中，如图2所示，组分A和组分B可在它们正在同时施用时在牙齿上形成混合物。例如，可通过双筒注射器将组分A和组分B施用到牙齿表面，其中一个喷嘴开口递送组分A，而另一个喷嘴开口递送组分B到牙齿表面。喷嘴开口可被布置成使得组分A和组分B施用在解释的相同一般区域上，并且然后必要地混合和掺杂以形成混合物并在结石内产生期望的氧气生成。另选地，喷嘴开口可被布置成使得组分A和组分B的至少某些部分重叠并且然后必要地混合和掺杂以形成混合物并在结石内产生期望的氧气生成。作为另一种选择，如果组分A和组分B在施用到牙齿表面时不重叠，则它们可借助注射器的喷嘴或通过其它仪器诸如刮器混合，以在牙表面上形成组分A和组分B的混合物，从而在结石内产生期望的氧气生成。通常，当组分A和组分B混合时，使用者观察到沿着结石的表面生成的氧气泡。无论混合物究竟如何在牙齿表面上形成，随后通过机械手段或工艺、手动或超声刮除从牙齿上移除结石，如上所述。
在另一个具体的实施方案中，如图3所示，组分A和组分B的混合物可刚好在将此类混合物施用到牙齿表面之前形成，以在牙齿上的结石内生成期望的氧气产生。例如，组分A和组分B可通过具有静态混合器的双筒注射器施用到牙齿表面一。每个筒递送组分，并且静态搅拌器刚好在组分A和组分B离开静态搅拌器的喷嘴之前混合组分A和组分B，所述喷嘴将混合物递送至牙齿表面。虽然组分A和组分B在静态搅拌器内混合，但它可开始产生期望的氧气生成，然后随后将其施用到牙齿上的结石。通常，当组分A和组分B的混合物施用到结石时，使用者观察到沿着结石的表面生成的氧气泡。合适的双筒静态混合器注射器的一个示例公开于题为“A Cartridge,A Piston and A Syringe Comprising the Cartridge andthe Piston”的PCT公布的专利申请2015/073246，所述专利申请以引用方式并入本文。另一种合适的双筒静态混合器注射器可从美国的苏尔寿Mixpac(Sulzer Mixpac(USA))商购获得。
在一实施方案中，在通过机械方法移除结石之前，组分A和组分B的混合物同时施用在单个牙齿上持续至少5-10秒。在另一个实施方案中，在移除步骤之前，向所述牙齿施用组分A和组分B的混合物同时小于约1小时的时间段。在另一个实施方案中，移除步骤在使用步骤之后的24小时内进行。在又一个实施方案中，施用步骤和移除步骤全部在小于24小时内完成。在另一个实施方案中，施用步骤和移除步骤在小于1小时内完成，对于典型牙科患者对于此过程理想地小于20-35分钟完成。然而，完成本发明的方法的时间长度可以并将基于任何数量的因素而变化，所述因素包括但不限于患者牙齿上的结石的数量、面积、强度、深度，以及所处理的牙齿的总数量和位置(例如后与前)。预期该方法将由牙科专业人员(诸如牙科卫生员或牙医)执行，并且该方法将针对个体患者定制。例如，组分A和组分B可同时施用到患者的具有结石的各个牙齿，并且其后从所述特定牙齿上移除结石。又如，组分A和组分B可在静态混合器中混合并且然后施用到患者的整弓牙齿。
在一些实施方案中，组分A或组分B同时施用持续小于约1小时、小于约30分钟、小于约10分钟、小于约5分钟、小于约2分钟或小于约1分钟的时间段。在这些实施方案中的一些中，组分A或组分B同时施用持续约10分钟、约5分钟、约2分钟、约1分钟、约30秒、约15秒或在这些值中的任何两个之间且包括其的范围。在一些实施方案中，组分A和组分B两者各自同时施用持续小于约1小时、小于约30分钟、小于约10分钟、小于约5分钟、小于约2分钟或小于约1分钟的时间段。
无论使用上述图1-图3中所示的方法的哪一个实施方案，如果组分A包括过氧化氢加合物，则过氧化氢在口腔内的环境中从加合物解离以产生过氧化氢。在一些实施方案中，在过氧化物酶(例如过氧化氢酶)存在下的过氧化氢可引起氧气释放，从而使结石从牙齿上松动。所生成的氧气可例如弱化结石和牙齿表面之间的粘附性，使得可在暴露于组分A和组分B的混合物的相对短的暴露时间之后容易地移除结石，所生成的氧气可软化和/或松动结石，使得通过手动刮除来移除结石容易得多。例如，可在较短的时间内或使用较少的力来移除结石。通常存在于人唾液或口腔中的过氧化氢酶浓度不足以提供这些效果。
在组分A和组分B同时施用之后，可通过任何合适的机械手段例如刮除(诸如使用牙科刮器)、刷洗、擦拭、涂搽、超声、空气抛光或喷射水来从牙齿上移除结石的至少一部分。在一些实施方案中，部分的结石可通过除刷牙之外的机械手段来移除，例如通过牙科刮器来移除。在一些实施方案中，移除步骤在施用步骤之后的1天、12小时、6小时、3小时、1小时、30分钟、10分钟、5分钟、2分钟、1分钟、30秒或15秒内进行。在一些实施方案中，移除步骤持续小于约10分钟、小于约5分钟、小于约分钟或小于约1分钟的时间段。在其它实施方案中，移除步骤持续约10分钟、约5分钟、约2分钟、约1分钟、约30秒，或在这些值中的任何两个之间且包括其的范围。因此，本公开的方法可例如提供更容易和/或更快地移除结石。在一些实施方案中，施用步骤和移除步骤全部在小于约1天、约12小时、约6小时、约3小时、约1小时、约30分钟、约10分钟、约5分钟、约2分钟或约1分钟内完成。通常，本发明的方法在单次牙科门诊过程中完成。
组分A或组分B可(独立地)呈适于口腔递送的任何形式的液体或凝胶形式，诸如呈水溶液(例如漱口液)、糊剂或凝胶形式。例如，元件A和元件B可同时作为漱口液施用。在一些实施方案中，同时地，组分A可作为凝胶施用，组分B可作为涑口液施用。在其它实施方案中，组分A和组分B可同时全部作为凝胶施用。
如上所述，优选地，至少组分A或组分B在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。在另选的实施方案中，组分A和组分B各自在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。在其它实施方案中，组分A和组分B各自在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于16Pa·s的粘度。在其它实施方案中，组分A和组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有大于2Pa·s的粘度。在一些实施方案中，组分A和组分B各自在25℃下在1/s的剪切速率下具有大于2Pa·s的粘度。在一些实施方案中，组分A和B的粘度相似，例如粘度可相差小于5、4、3或2Pa·s。下面这样可能是理想的：组分A和B使用静态混合器器作为混合物递送以确保组分的有效缺失。
在一些实施方案中，本公开的方法包括组分A和组分B的组合的相对短的暴露时间，使得当方法完成时肉眼未观察到明显的漂白或牙齿美白，例如在单个实例中，并且在一些情况下，在多个实例中。
在一些实施方案中，添加剂可施用到牙齿表面。在这些实施方案中的一些中，添加剂可与组分A和/或组分B一起施用。用于方法中的添加剂可包括但不限于抗菌剂和防腐剂、抗生素、调味材料、表面活性剂、研磨剂、增稠剂和粘结剂、推进剂、载体、牙垢控制剂、钙多价螯合剂、氟化物盐和染料。
合适的抗菌剂和防腐剂可包括但不限于氯己定以及它们的盐、聚六亚甲基双胍、辛替尼啶、季铵盐以及它们的聚合物、有机酸、螯合剂例如钙螯合剂(例如乙二胺四乙酸(EDTA))、精油和对羟基苯甲酸酯。抗菌剂和防腐剂的示例可包括美国专利号8,647,608中所述的那些。抗生素的非限制性示例可包括青霉素、四环素、明环素等。抗生素的示例还可包括美国专利号6,685,921中所述的那些。调味材料的示例可以、包括人造甜味剂、植物油和合成香料。研磨剂的示例可包括二氧化硅颗粒、合成无机颗粒和合成或植物衍生的有机颗粒。合适的表面活性剂可包括在美国专利公布号2006/0051385中所述的那些。此类表面活性剂的示例包括阳离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂。
增稠剂的示子可包括甘油、二氧化硅、多糖(包括纤维素基聚合物和衍生物)、植物树胶(例如瓜尔胶和黄原胶)、石油衍生材料诸如凡士林、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮以及它们的共聚物、聚乳酸、长链脂肪酸醇、丙烯酸酯聚合物和聚丙烯酸明胶，或它们的组合。合适的聚丙烯酸的一个示例是可以商品名CARBOPOL(例如Carbopol 971，从位于俄亥俄州威克利夫(Wickliffe,OH))的路博润公司(Lubrizol Corporations)商购获得的交联聚丙烯酸。增稠剂可包括一种或多种无机或天然的或合成的增稠剂或胶凝剂。可使用任何口服可接受的增稠剂。合适的增稠剂或胶凝剂包括无定形二氧化硅(例如，可以商品名ZEODENT 165购自胡贝尔公司(Huber Corporation))、热解法二氧化硅、沉淀二氧化硅、胶态二氧化硅、天然和合成的树胶和胶体、泊洛沙姆、卡波姆(也称为羧基乙烯基聚合物)、角叉菜胶、爱尔兰苔藓、i-角叉菜胶、纤维素聚合物诸如羟乙基纤维素、羧甲基纤维素(carmellose，纤维素胶)及其它们的，例如，纤维素钠，天然树胶诸如梧桐、黄原胶、阿拉伯树胶、黄蓍胶、聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、胶态硅酸镁铝以及它们的组合。增稠剂或胶凝剂可独立地溶解、分散、悬浮或乳化在组分A、组分B或两者中。在一些实施方案中，可将增稠剂或胶凝剂溶解、分散、悬浮或乳化在载体中。
合适的载体可包括在美国专利号8,647,608中所述的那些。载体可包括适用于受试者口腔中的任何醇，包括乙醇和异丙醇和甘油。
在各种实施方案中，组分A和组分B中的至少一种包括载体。载体(如果存在的话)可包括液体、凝胶或两者。在一些实施方案中，载体在约室温下可为液体。在一些实施方案中，载体在约人的口腔的温度下(即，在约37℃下)下可为液体。应当理解，可使用多种载体。液体载体的示例包括但不限于水、甘油、丙二醇、聚亚烷基二醇(例如聚乙二醇、聚丙二醇等)、聚甘油以及它们的组合。
合适的载体的另外示例包括美国专利号6,669,929(Boyd等人)、6,379,654(Gebreselassie等人)和4,894,220(Nabi等人)中所述的那些，每一个全文以引用方式并入本文。
合适的染料可包括在美国专利号8,647,608中所述的那些。牙垢控制剂的示例包括美国专利号6,685,921中所述的那些。已知用于牙科护理产品的抗牙垢剂可包括但不限于磷酸盐。磷酸盐可包括焦磷酸盐、多磷酸盐、聚膦酸酯以及它们的混合物。焦磷酸盐可包括二碱金属焦磷酸盐、四碱金属焦磷酸盐以及它们的混合物。氟化物盐的示例可包括美国专利号6,685,921、美国专利号3,535,421和美国专利号3,678,154中所述的那些。
本公开的从牙齿上移除结石的试剂盒可包括包含过氧化氢或其前体的组分A和包含过氧化氢酶的组分B。在试剂盒的组分B施用到牙齿之前或之后，试剂盒的组分A施用到牙齿。
以下实施方案旨在举例说明本公开而非进行限制。
实施方案
实施方案1是一种从牙齿上移除结石的方法，包括：
提供组分A，其中所述组分A包含过氧化氢或其前体；
提供组分B，其中所述组分B包含过氧化氢酶；
将所述组分A和所述组分B施用到所述牙齿，从而生成氧气；和
从所述牙齿上移除所述结石的至少一部分；
其中组分A和组分B各自独立地为液体或凝胶；并且
其中所述组分A和所述组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。
实施方案2是根据实施方案1所述的方法，其中在所述施用步骤中，组分A和组分B同时施用到所述牙齿。
实施方案3是根据实施方案1至2所述的方法，其中在所述施用步骤中，组分A和组分B在所述牙齿上形成混合物。
实施方案4是根据实施方案1至2所述的方法，其中在所述施用步骤之前，混合组分A和组分B以形成混合物，并且其中在所述施用步骤中，将所述混合物施用到所述牙齿。
实施方案5是根据实施方案1至4所述的方法，其中在所述施用步骤中，在所述移除步骤之前，向所述牙齿施用组分A和所述组分B的混合物小于约1小时的时间段。
实施方案6是根据实施方案1至5所述的方法，其中在所述施用步骤中，在所述移除步骤之前，向所述牙齿施用组分A和所述组分B小于1小时的时间段。
实施方案7是根据实施方案1至6所述的方法，其中所述移除步骤在所述施用步骤之后的24小时内进行。
实施方案8是根据实施方案1至7所述的方法，其中所述施用步骤和所述移除步骤全部在小于24小时内完成。
实施方案9是根据实施方案1至8所述的方法，其中所述施用步骤和所述移除步骤在小于1小时内完成。
实施方案10是根据实施方案1至9所述的方法，其中所述组分A包含至少约0.003M的过氧化氢。
实施方案11是根据实施方案1至10所述的方法，其中所述组分A包含约0.03M至约12M的过氧化氢。
实施方案12是根据实施方案1至11所述的方法，其中所述组分A包含约0.1M至约3M的过氧化氢。
实施方案13是根据实施方案1至12所述的方法，其中所述组分B包含大于约3单位/毫升的过氧化氢酶。
实施方案14是根据实施方案1至13所述的方法，其中所述组分B包含约30单位/毫升至约300,000单位/毫升的过氧化氢酶。
实施方案15是根据实施方案1至14的方法，其中所述组分B包含约1,000单位/毫升至约20,000单位/毫升的过氧化氢酶。
实施方案16是根据实施方案1至15所述的方法，其中所述组分A和所述组分B各自在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。
实施方案17是根据实施方案1至16所述的方法，其中所述组分A和所述组分B各自在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于16Pa·s的粘度。
实施方案18是根据实施方案1至17所述的方法，其中所述组分A和所述组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有大于2Pa·s的粘度。
实施方案19是根据实施方案1至18所述的方法，其中所述组分A和所述组分B各自在25℃下在1/s的剪切速率下具有大于2Pa·s的粘度。
实施方案20是根据实施方案1至19所述的方法，其中所述过氧化氢为过氧化氢加合物。
实施方案21是根据实施方案1至20所述的方法，其中所述过氧化氢加合物选自过氧化脲、过碳酸盐或酸、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)过氧化物以及它们的组合。
实施方案22是根据实施方案1至21所述的方法，其中所述过氧化氢前体选自过硼酸盐或酸、金属过氧化物、有机过氧化物、无机过氧酸或盐以及它们的组合。
实施方案23是根据实施方案1至22所述的方法，其中所述前体是有机过氧化物，并且其中所述有机过氧化物为过乙酸盐或酸。
实施方案24是根据实施方案1至23所述的方法，其中通过过氧化物生成酶生成所述过氧化氢。
实施方案25是根据实施方案1至24所述的方法，其中所述组分A和所述组分B中的至少一种包含载体。
实施方案26是根据实施方案25所述的方法，其中所述载体包含水、甘油、聚乙二醇、聚甘油，或它们的组合。
实施方案27是根据实施方案1至26所述的方法，其中所述组分A和所述组分B中的至少一种包含增稠剂。
实施方案28是根据实施方案27所述的方法，其中所述增稠剂为聚丙烯酸、明胶、多糖、二氧化硅，或它们的组合。
实施方案29是根据实施方案1至27所述的方法，其中所述移除步骤包括通过机械手段移除。
实施方案30是根据实施方案1至29所述的方法，其中所述移除步骤包括通过除刷牙以外的机械手段移除。
实施方案31是根据实施方案1至30所述的方法，其中所述移除步骤包括借助牙科刮器从所述牙齿上移除所述结石的至少一部分。
实施方案32是根据实施方案1至31所述的方法，其中在所述施用步骤或移除步骤之后，肉眼无法观察到牙齿美白。
实施方案33是一种用于从牙齿上移除结石的部件的试剂盒，所述试剂盒包括：
组分A，所述组分A包含过氧化氢或其前体；和
组分B，所述组分B包含过氧化氢酶；
其中组分A和组分B各自独立地为液体或凝胶；并且
其中组分A和组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。
实施例
以下的实施例用来说明本发明，而非限制本发明的范围。除非另外指明，如本文所用，所有份数和百分数均按重量计。所有商业材料均按从供应商获得。除非另外指明，否则材料可得自密苏里州圣路易斯的西格玛奥德里奇化学公司(Sigma–Aldrich Corp.(St.Louis,MO))。
材料和方法
具有967,500单位(U)/克(g)的活性的黑曲霉过氧化氢酶得自内布拉斯加州奥马哈的美国实验室(American Laboratories(Omaha,NE))。在25℃下在pH为7.0下，一个单位的该酶每分钟分解1.0μmol的过氧化氢(H2O2)。如本文所用，在25℃下在pH为7.0下，一个单位过氧化氢酶每分钟将分解1.0μmol的过氧化氢，而过氧化氢浓度从10.3mM降至9.2mM，通过A240的减小速率测量。Carbopol 971P NF，交联的聚丙烯酸聚合物，得自俄亥俄州威克利夫的路博润公司(Lubrizol Corporation(Wickliffe,OH))。H2O2以30重量％的水溶液形式得自宾夕法尼亚州中心谷的艾万拓高性能材料(Avantor Performance Materials(CenterValley,PA))。使用去离子水制备稀释的过氧化氢水溶液。由溶液的重量百分比和大致密度在室温(～23℃)下计算过氧化氢水溶液的摩尔浓度(在25℃下使用公式(3)计算密度，公式(3)在Easton,M.F.,Mitchell,A.G.,Wynne-Jones,W.F.K.,“过氧化氢与水混合物的行为。第一部分：测定过氧化氢与水的混合物的密度(The Behaviour of Mixtures of HydrogenPeroxide and Water.Part I.Determination of the Densities of Mixtures ofHydrogen Peroxide and Water)”，《法拉第学会会刊(Trans.Faraday Soc.)》中。
测试制剂(过氧化氢和过氧化氢酶组分)的制备
通过以下制备各自具有3.0重量％(大约0.88M)过氧化氢的具有不同粘度的含过氧化氢凝胶：用去离子水稀释浓缩的(3.0重量％)的过氧化氢水溶液，添加足够的Carbopol971P NF(美国俄亥俄州威克利夫的路博润公司)以达到具有期望量的Carbopol 971P NF的含过氧化氢凝胶(即，含有3重量％过氧化氢和0.5重量％、1.0重量％或2.0重量％Carbopol971P NF的凝胶)，并且然后通过添加小体积40重量％氢氧化钾水溶液调节pH到7.4。含3重量％过氧化氢的低粘度溶液通过用去离子水稀释30重量％过氧化氢来制备。
如下制备各自具有5,000U过氧化氢酶/g凝胶(大约5,500U过氧化氢酶/mL凝胶)的具有不同粘度的含黑曲霉凝胶。。将过氧化氢酶溶解于磷酸盐缓冲盐水中，并且添加足量的甘油，使得最终的凝胶包括35重量％甘油。添加足够的Carbopol 971P NF以达到具有期望量的Carbopol 971P NF的含过氧化氢酶凝胶(即，含有35重量％甘油和5,000U过氧化氢酶/g凝胶以及0.5重量％、1.0重量％或2.0重量％Carbopol 971P NF的凝胶)。通过添加小体积的40重量％氢氧化钾水溶液将pH调节到7.4。通过将适量的过氧化氢酶溶解到磷酸盐缓冲盐水中来制备含有3,000U黑曲霉/g溶液(大约3,300U/mL溶液)的低粘度溶液。
粘度测量
在ARG2流变仪(特拉华州纽卡斯尔的TA仪器(TA Instruments,New Castle,DE))上使用平坦的20mm不锈钢板在25℃下以约1/s的剪切速率使用1mm间隙测量粘度。组分的粘度测量值以Pa·s为单位报告。
一般测试制剂的评估
获得包含具有结石沉积物的多个区域的提取的人牙齿(购自各种供应商，诸如德国韦尔登的enretec有限公司(enretec GmbH,Velten,Germany))并在使用之前存储在0.5-1.0重量％氯胺T水溶液中。为了制备用于结石移除测试的提取牙齿，用去离子水冲洗牙齿。使用从韩国的OSUNG MND有限公司或荷兰的豪孚迪(Hu–Friedy(Netherlands))商购获得的通用(即Columbia)刮匙来执行如以下实施例所述的结石沉积物的手动刮除。
用水(对照)或测试制剂处理提取的人牙齿上的结石覆盖区域。通过比较在将水施用到结石之后手动刮除一半的每个结石覆盖区域的结石移除容易性与在将制剂施用到相同牙齿上的第二半每个结石覆盖区域之后手动刮除的容易性来确定处理的有效性。如果制剂改善了用手动刮器移除结石的容易性，则将制剂评分为有效(+)。如果没有观察到改善的结石移除容易性，则将制剂评分为(-)。
实施例1(EX-1)
组分A：具有3重量％过氧化氢和0.5重量％Carbopol 971P NF的含过氧化氢凝胶，pH调节至7.4，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度为2.05Pa·s。
组分B：具有5,000U黑曲霉/g凝胶(5,500U/mL凝胶)、35重量％甘油和0.5重量％Carbopol 971P NF的含过氧化氢酶凝胶，pH调节至7.4，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度为3.14Pa·s。
在将水或处理制剂施用到每个牙齿上的结石覆盖区域后，手动刮除三个单独的牙齿。通过比较在将水施用到结石之后手动刮除一半的每个结石覆盖区域的结石移除容易性与在将处理制剂施用到相同牙齿上的第二半每个结石覆盖区域之后手动刮除的容易性来确定处理的有效性。将组分A和组分B装入配有静态混合尖端的双筒注射器(1:1体积比)中。通过在双筒注射器的柱塞上使用手动压力将组分挤出通过静态搅拌器，将组分作为混合物以足够的量施用到结石所覆盖的牙齿表面，以覆盖结石沉积物。在施用混合物之后，操作者等待5至20秒，然后开始刮除。在三颗牙齿的两颗中，操作者观察到结石移除的容易性的改善。
实施例2(EX-2)
组分A：具有3重量％过氧化氢和1.0重量％Carbopol 971P NF的含过氧化氢凝胶，pH调节至7.4，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度为11.53Paπs。
组分B：具有5,000U黑曲霉/g凝胶(5,500U/mL凝胶)、35重量％甘油和1.0重量％Carbopol 971P NF的含过氧化氢酶凝胶，pH调节至7.4，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度为15.24Pa·s。
在将水或处理制剂施用到每个牙齿上的结石覆盖区域后，手动刮除三个单独的牙齿。通过比较在将水施用到结石之后手动刮除一半的每个结石覆盖区域的结石移除容易性与在将处理制剂施用到相同牙齿上的第二半每个结石覆盖区域之后手动刮除的容易性来确定处理的有效性。将组分A和组分B装入配有静态混合尖端的双筒注射器(1:1体积比)中。通过在双筒注射器的柱塞上使用手动压力将组分挤出通过静态搅拌器，将组分作为混合物以足够的量施用到结石所覆盖的牙齿表面，以覆盖结石沉积物。在施用混合物之后，操作者等待5至20秒，然后开始刮除。在三颗牙齿的两颗中，操作者观察到结石移除的容易性的改善。
实施例3(EX-3)
组分A：粘度与水相似(大约0.001Pa·s)的3重量％过氧化氢溶液。
组分B：具有3,000U黑曲霉过氧化氢酶/g溶液(3,300U/mL溶液)的含过氧化氢酶磷酸盐缓冲盐水溶液，粘度类似于水。
在将水或处理制剂施用到每颗牙齿上的结石覆盖区域后，手动刮除总共三颗单独牙齿上的四个单独的结石覆盖区域(即，三颗牙齿中的一颗在同一颗牙齿上含有两个结石覆盖区域)。通过比较在将水施用到结石之后手动刮除一半的每个结石覆盖区域的结石移除容易性与在将处理制剂施用到相同牙齿上的第二半每个结石覆盖区域之后手动刮除的容易性来确定处理的有效性。将组分A和组分B装入配有静态混合尖端的双筒注射器(1:1体积比)中。通过在双筒注射器的柱塞上使用手动压力将组分挤出通过静态搅拌器，将组分作为混合物以足够的量施用到结石所覆盖的牙齿表面，以覆盖结石沉积物。在施用混合物之后，操作者等待5至20秒，然后开始刮除。在总共三颗牙齿上的四个结石覆盖区域中的两个中，操作者观察到结石移除的容易性的改善。
比较例1(CE-1)
组分A：具有3重量％过氧化氢和0.5重量％Carbopol 971P NF的含过氧化氢凝胶，pH调节至7.4，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度为2.05Pa·s。
组分B：干黑曲霉过氧化氢酶粉末。
在将水或处理制剂施用到每个牙齿上的结石覆盖区域后，手动刮除三颗单独的牙齿。通过比较在将水施用到结石的第一结石区域中之后手动刮除的结石移除容易性与在将处理制剂施用在相同牙齿上的第二结石区域上之后结石移除的容易性来确定处理的有效性。将1-2mg干过氧化氢酶粉末(组分B)施用到棉签的尖端上，然后在一片称量纸上的组分A中滚动有过氧化氢酶的拭子的尖端来将棉签覆盖在组分A中。在20-30秒之后，拭子用来将混合物以足够的量施用到结石以覆盖结石沉积物。在施用混合物之后，操作者等待5至20秒，然后开始刮除。在三颗牙齿的三颗中，操作者没有观察到结石移除的容易性的改善。
比较例2(CE-2)
组分A：具有3重量％过氧化氢和2.0重量％Carbopol 971P NF的含过氧化氢凝胶，pH调节至7.4，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度为26.22Pa·s。
组分B：具有5,000U黑曲霉/g凝胶(5,500U/mL凝胶)、35重量％甘油和2.0重量％Carbopol 971P NF的含过氧化氢酶凝胶，pH调节至7.4，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度为39.53Pa·s。
在将水或处理制剂施用到每个牙齿上的结石覆盖区域后，手动刮除总共三颗单独牙齿上的三个单独的结石覆盖区域。通过比较在将水施用到结石之后手动刮除一半的每个结石覆盖区域的结石移除容易性与在将处理制剂施用到相同牙齿上的第二半每个结石覆盖区域之后的结石移除容易性来确定处理的有效性。将组分A和组分B装入配有静态混合尖端的双筒注射器(1:1体积比)中。通过在双筒注射器的柱塞上使用手动压力将组分挤出通过静态搅拌器，将组分作为混合物以足够的量施用到结石所覆盖的牙齿表面，以覆盖结石沉积物。在施用凝胶之后，操作者等待5至20秒，然后开始刮除。在三颗牙齿上的六个结石覆盖区域中的六个中，操作者没有观察到结石移除的容易性的改善。
如表1所示，当同时递送到牙齿表面上时，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度低于26Pa.s的液体和凝胶使通过手动刮除移除牙结石变容易。
表1
实施例4(EX-4)
组分A：具有3重量％过氧化氢和0.5重量％Carbopol 971P NF的含过氧化氢凝胶，pH调节至7.4，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度为2.05Pa·s。
组分B：具有5,000U曲霉/g凝胶(5,500U/mL凝胶)、35重量％甘油和0.5重量％Carbopol 971P NF的含过氧化氢酶凝胶，pH调节至7.4，在25℃下在1/s的剪切速率下粘度为3.14Pa·s。
重复实验1，不同的是组分A和组分B同时施用，但单独且不混合，到单个牙齿的结石覆盖区域。组分A和组分B施用到结石覆盖区域可通过将组分装入配备有包括隔膜的双筒注射器(1:1体积比)中来进行，所述隔膜防止组分在注射器尖端中混合。在施用之后，使用注射器顶端将组分A和组分B(呈在结石覆盖区域上相邻凝胶滴形式)在结石覆盖区域处混合几秒。在混合之后，操作者等待5至20秒，然后开始刮除。预期操作者移除结石的容易性改善(与使用水相比)。
在不脱离本发明范围和实质的前提下，对本发明的各种变型和更改对本领域的技术人员而言将显而易见。应理解，本发明并不旨在受本文示出的说明性实施方案和实施例的不当限制，这些实施例和实施方案仅以举例的方式给出，本发明的范围仅旨在受本文示出的权利要求书的限制。
本文引用的专利、专利文献和出版物的全部公开内容均全文以引用方式并入本文，如同每个文件都单独引用一样。例如，用于结石移除的其它各种方法公开于2015年12月2日提交的PCT专利申请序列号PCT/US2015/063335，“Methods and Kits of RemovingCalculus”中，该专利据此以引用方式并入本文。

Claims (33)

1.一种从牙齿上移除结石的方法，所述方法包括：
提供组分A，其中所述组分A包含过氧化氢或其前体；
提供组分B，其中所述组分B包含过氧化氢酶；
将所述组分A和所述组分B施用到所述牙齿，从而生成氧气；以及
从所述牙齿上移除所述结石的至少一部分；
其中组分A和组分B各自独立地为液体或凝胶；并且
其中所述组分A和所述组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。
2.根据权利要求1所述的方法，其中在所述施用步骤中，组分A和组分B同时施用到所述牙齿。
3.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其中在所述施用步骤中，组分A和组分B在所述牙齿上形成混合物。
4.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中在所述施用步骤之前，混合组分A和组分B以形成混合物，并且其中在所述施用步骤中，将所述混合物施用到所述牙齿。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在所述施用步骤中，在所述移除步骤之前，向所述牙齿施用组分A和所述组分B的混合物小于约1小时的时间段。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中在所述施用步骤中，在所述移除步骤之前，向所述牙齿施用组分A和所述组分B小于1小时的时间段。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述移除步骤在所述施用步骤之后的24小时内进行。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述施用步骤和所述移除步骤全部在小于24内完成。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述施用步骤和所述移除步骤在小于1小时内完成。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述组分A包含至少约0.003M的过氧化氢。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述组分A包含约0.03M至约12M的过氧化氢。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述组分A包含约0.1M至约3M的过氧化氢。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述组分B包含大于约3单位/毫升的过氧化氢酶。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述组分B包含约30单位/毫升至约300,000单位/毫升的过氧化氢酶。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述组分B包含约1,000单位/毫升至约20,000单位/毫升的过氧化氢酶。
16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述组分A和所述组分B各自在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述组分A和所述组分B各自在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于16Pa·s的粘度。
18.根据权利要求1-17中任一项所述的方法，其中所述组分A和所述组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有大于2Pa·s的粘度。
19.根据权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述组分A和所述组分B各自在25℃下在1/s的剪切速率下具有大于2Pa·s的粘度。
20.根据权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述过氧化氢是过氧化氢加合物。
21.根据权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述过氧化氢加合物选自过氧化脲、过碳酸盐或酸、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)过氧化物以及它们的组合。
22.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中所述过氧化氢前体选自过硼酸盐或酸、金属过氧化物、有机过氧化物、无机过氧酸或盐以及它们的组合。
23.根据权利要求1-22中任一项所述的方法，其中所述前体是有机过氧化物，并且其中所述有机过氧化物为过乙酸盐或酸。
24.根据权利要求1-23中任一项所述的方法，其中通过过氧化物生成酶生成所述过氧化氢。
25.根据权利要求1-26中任一项所述的方法，其中所述组分A和所述组分B中的至少一种包含载体。
26.根据权利要求25所述的方法，其中所述载体包含水、甘油、聚乙二醇、聚甘油或它们的组合。
27.根据权利要求1-26中任一项所述的方法，其中所述组分A和所述组分B中的至少一种包含增稠剂。
28.根据权利要求27所述的方法，其中所述增稠剂为聚丙烯酸、明胶、多糖、二氧化硅或它们的组合。
29.根据权利要求1-27中任一项所述的方法，其中所述移除步骤包括通过机械手段移除。
30.根据权利要求1-29中任一项所述的方法，其中所述移除步骤包括通过除刷牙以外的机械手段移除。
31.根据权利要求1-30中任一项所述的方法，其中所述移除步骤包括借助牙科刮器从所述牙齿上移除所述结石的至少一部分。
32.根据权利要求1-31中任一项所述的方法，其中在所述施用步骤或移除步骤之后，肉眼无法观察到牙齿美白。
33.一种用于从牙齿上移除结石的部件的试剂盒，所述试剂盒包括：
组分A，所述组分A包含过氧化氢或其前体；和
组分B，所述组分B包含过氧化氢酶；
其中组分A和组分B各自独立地为液体或凝胶；并且
其中组分A和组分B中的至少一种在25℃下在1/s的剪切速率下具有小于26Pa·s的粘度。
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