CN109406502A - 一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,所述检测试剂为至少包含汞离子、亚汞离子、镍离子、配对阴离子以及还原性稳定试剂的酸性溶液。本发明制备的检测试剂具有亚汞离子含量可控,重复性好、稳定性高以及配制方法简单安全易于推广的特点,适用于肿瘤等早期尿检筛查与跟踪。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,属于检测试剂技术领域。
背景技术
恶性肿瘤,即人们常说的癌症。由于在目前科技水平下大多癌症不可治愈,因而癌症已愈益成为人们健康的杀手,严重困扰人们的生活,以至于谈癌色变。国际抗癌联盟认为,1/3的癌症是可以预防的,1/3的癌症如能早期诊断是可以治愈的,1/3的癌症可以减轻痛苦,延长生命。据此提出了恶性肿瘤的三级预防概念:一级预防是消除或减少可能致癌的因素,防止癌症的发生,包括改善生活习惯,保护环境,加强职业防护等。二级预防是指癌症一旦发生,如何在早期阶段发现并予以及时治疗。包括对癌症危险信号的认识和重视,对高发区和高危人群定期检查,发现癌前病变并及时治疗,加强对易感人群的监测以及肿瘤自检。三级预防是治疗后的康复,防止病情恶化,提高生存质量,减轻痛苦,延长生命。
上述三种预防中,能通过一级预防减少癌症发生是最佳选择。但在癌症日益高发的今天,如何在早期阶段发现癌症、日常肿瘤自测,以便及时治疗也是关注的重点。事实上癌症在早期发现并加以控制,治愈的概率很大。目前肿瘤检测的方法大都需要精密仪器和专业技术,普通影像学也难以在癌症早期有效诊断,加之医疗资源紧张,普通人群基本没有条件定期做癌症筛查。鉴于此,基于人体尿液中癌症标志物检测的癌症早期排查方法受到了极大关注。专利CN201010505793.4和CN201510962013.1报道了改进Millon试剂方法用于尿液中酪氨酸标志物检测的方法,但试剂制备中采用金属汞作为原料之一,安全性低。专利CN201510537446.2在上述CN201010505793.4试剂的基础上添加磷钼酸根以提高试剂检测灵敏度。
以上检测试剂均基于Millon试剂改进,通过与酪氨酸中酚基团的显色反应检测酪氨酸标志物。Millon试剂中既含有汞离子,也含有亚汞离子,其中亚汞离子在与酪氨酸络合显色中起着重要作用,但在制备过程中由于氧化条件不能完全控制,亚汞离子含量难以重复,加上亚汞离子不稳定,易沉淀等特性,导致试剂稳定性不高,批次间重复性不够好。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,提供一种亚汞离子含量可控,重复性好、、稳定性高以及配制方法简单安全易于推广的用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案为:
一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,所述检测试剂为至少包含汞离子、亚汞离子、镍离子、配对阴离子以及还原性稳定试剂的酸性溶液。
所述还原性稳定试剂为具有还原性的有机螯合试剂。
所述有机螯合试剂选自乙二醇、丙二醇、甘油、丁二醇、二乙二醇、二乙醇胺、三乙醇胺、季戊四醇、聚乙二醇、葡萄糖、乙二胺四乙酸或其钠盐中的至少一种。
所述还原性稳定试剂与亚汞离子的浓度比为1:1~10:1。
汞离子浓度为0.02 mol/L ~ 1.5 mol/L,亚汞离子浓度为汞离子浓度的1/100 ~1/10。
镍离子浓度为0.01 mol/L ~ 1.0 mol/L。
所述配对阴离子选自硫酸根、亚硫酸根、硝酸根、亚硝酸根、磷酸根、卤素阴离子、卤酸根、高卤酸根、醋酸根、草酸根或柠檬酸根中的至少一种。
所述酸性溶液pH< 1。
本发明所达到的有益效果:本发明中通过加入还原性稳定试剂,螯合配位亚汞离子,提高其稳定性,避免其被氧化,进而使亚汞离子通过简单的溶液配制即可保证其在溶液中的稳定性以及加入量的可重复性,相比米伦试剂配制方法更加简单快捷以及安全,本发明制备的检测试剂可用于含酚基团氨基酸溶液的检测,如尿液(肿瘤标志物酪氨酸)或其他含酚基团氨基酸体液,本发明制备的检测试剂,不仅适用于日常尿液癌症早期筛查,还适合普通人群日常肿瘤自测与跟踪,也适合医疗条件不足的偏远地区人群的大病筛查,同时适合医院详细癌症检查前的初步排查。
附图说明
图1是模拟尿液阳性检测结果示例。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案,而不能以此来限制本发明的保护范围。
实施例1
采用去离子水或蒸馏水配制试剂,使汞离子Hg2+浓度为0.02 mol/L,亚汞离子Hg2 2+浓度为0.002 mol/L,镍离子浓度为1 mol/L,配对阴离子为硝酸根,还原性稳定试剂为乙二醇,浓度0.02 mol/L。添加硝酸使最终pH<1。
实施例2
采用去离子水或蒸馏水配制试剂,使汞离子Hg2+浓度为0.5 mol/L,亚汞离子Hg2 2+浓度为0.005 mol/L,镍离子浓度为0.5mol/L,配对阴离子为硫酸根,还原性稳定试剂为丙二醇,浓度0.05 mol/L。添加硫酸使最终pH<1。
实施例3
采用去离子水或蒸馏水配制试剂,使汞离子Hg2+浓度为1.0 mol/L,亚汞离子Hg2 2+浓度为0.01 mol/L,镍离子浓度为0.1mol/L,配对阴离子为硝酸根,还原性稳定试剂为甘油,浓度0.1 mol/L。添加磷酸使最终pH<1。
实施例4
采用去离子水或蒸馏水配制试剂,使汞离子Hg2+浓度为1.5 mol/L,亚汞离子Hg2 2+浓度为0.015 mol/L,镍离子浓度为0.01mol/L,配对阴离子为高氯酸根,还原性稳定试剂为丁二醇,浓度0.15 mol/L。添加盐酸使最终pH<1。
实施例5
采用去离子水或蒸馏水配制试剂,使汞离子Hg2+浓度为1.5 mol/L,亚汞离子Hg2 2+浓度为0.015 mol/L,镍离子浓度为0.5mol/L,配对阴离子为硫酸根,还原性稳定试剂为三乙醇胺,浓度0.15 mol/L。添加亚硫酸使最终pH<1。
实施例6
采用去离子水或蒸馏水配制试剂,使汞离子Hg2+浓度为0.1 mol/L,亚汞离子Hg2 2+浓度为0.01 mol/L,镍离子浓度为1.0mol/L,配对阴离子为氯酸根,还原性稳定试剂为季戊四醇,浓度0.1 mol/L。添加硫酸使最终pH<1。
实施例7
采用去离子水或蒸馏水配制试剂,使汞离子Hg2+浓度为0.2 mol/L,亚汞离子Hg2 2+浓度为0.002 mol/L,镍离子浓度为1.0mol/L,配对阴离子为硝酸根和硫酸根,还原性稳定试剂为二乙二醇,浓度0.02 mol/L。添加硫酸使最终pH<1。
实施例8
采用去离子水或蒸馏水配制试剂,使汞离子Hg2+浓度为0.1 mol/L,亚汞离子Hg2 2+浓度为0.001 mol/L,镍离子浓度为0.1mol/L,配对阴离子为硫酸根,还原性稳定试剂为1:1的二乙醇胺和三乙醇胺,浓度0.01 mol/L。添加硝酸使最终pH<1。
实施例9
采用去离子水或蒸馏水配制试剂,使汞离子Hg2+浓度为1.5 mol/L,亚汞离子Hg2 2+浓度为0.15 mol/L,镍离子浓度为0.15mol/L,配对阴离子为硝酸根,还原性稳定试剂为1:5的聚乙二醇和乙二胺四乙酸二钠,浓度1.0 mol/L。添加硫酸使最终pH<1。
实施例10
取十只干净试管,分别编号为1~10。取实施例1~9的试剂各0.5 mL,分别加入编号为1~9的试管中;向编号为10的试管中加入0.5 mL蒸馏水。
另取十只干净试管,分别编号为A~J。取实施例1~9的试剂各0.5 mL,分别加入编号为A~I的试管中;向编号为J的试管中加入0.5 mL蒸馏水。
取正常人新鲜尿液足量。
取正常人新鲜尿液,向其中加入酪氨酸使酪氨酸浓度为2.5 mmol/L,配制成模拟尿液。
向编号为1~10的试管中分别加入3 mL正常人尿液,震荡后静置3分钟,检测结果为阴性。
向编号为A~J的试管中分别加入3 mL模拟尿液,震荡后静置3分钟,A~I检测结果为阳性,J对比试管无明显反应,结果阴性。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和变形,这些改进和变形也应视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,其特征是,所述检测试剂为至少包含汞离子、亚汞离子、镍离子、配对阴离子以及还原性稳定试剂的酸性溶液。
2.根据权利要求1所述的一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,其特征是,所述还原性稳定试剂为具有还原性的有机螯合试剂。
3.根据权利要求2所述的一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,其特征是,所述有机螯合试剂选自乙二醇、丙二醇、甘油、丁二醇、二乙二醇、二乙醇胺、三乙醇胺、季戊四醇、聚乙二醇、葡萄糖、乙二胺四乙酸或其钠盐中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,其特征是,所述还原性稳定试剂与亚汞离子的浓度比为1:1~10:1。
5.根据权利要求1所述的一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,其特征是,汞离子浓度为0.02 mol/L ~ 1.5 mol/L,亚汞离子浓度为汞离子浓度的1/100 ~ 1/10。
6.根据权利要求1所述的一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,其特征是,镍离子浓度为0.01 mol/L ~ 1.0 mol/L。
7.根据权利要求1所述的一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,其特征是,所述配对阴离子选自硫酸根、亚硫酸根、硝酸根、亚硝酸根、磷酸根、卤素阴离子、卤酸根、高卤酸根、醋酸根、草酸根或柠檬酸根中的至少一种。
8.根据权利要求1所述的一种用于含酚基氨基酸溶液的检测试剂,其特征是,所述酸性溶液pH< 1。
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