CN109394843B - 一种制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物的方法 - Google Patents
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Abstract
一种生产贯叶连翘提取物的方法，特别涉及制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物的方法。本发明以贯叶连翘全草干药材为原料，经酶活化、酶解、微波处理、乙醇提取、反渗透、冷冻干燥等生产得到富含金丝桃素的贯叶连翘提取物。本发明方法具有生产工艺简单、稳定、易于放大，产品收率高，设备投资成本低，生产成本低，贯叶连翘资源综合利用率高等特点。采用本发明方法制备出的贯叶连翘提取物具有金丝桃素含量高、性能稳定等特点。
Description
技术领域
本发明属于生产贯叶连翘提取物的技术领域，特别涉及一种制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物的方法。
背景技术
贯叶连翘（Hypericum perforatum L.），又名贯叶金丝桃、千层楼、上天梯、赶山草鞭、小过路黄和圣约翰草（St. John’s wort）等，属藤黄科金丝桃属多年生草本植物，其全草或带根的全草具有抗抑郁、抗菌、抗病毒和抗肿瘤等较为广泛的药理作用，目前它已经成为世界上最为畅销的植物性药材之一。
传统中医认为贯叶连翘是清烦心明视力、调经络活气血、解百毒消炎症的良药。现代大量中药药理学实验证明，它具有收缩血管进而升高血压、利胆通便、抗菌消炎等作用，被用来治疗黄疸、尿路感染。贯叶连翘中含有多种生物活性物质，其植物提取物已被美国FDA批准为食品添加剂，并收入德国、英国、法国等国药典。金丝桃素（C30H16O8，hypericin）属于二蒽酮类化合物，被认为是贯叶连翘提取物中最具有生物活性的物质，具有抗病毒、抗抑郁等作用。国内外已完成了金丝桃素抗艾滋病的Ⅱ期临床试验，治疗恶性神经胶质瘤的临床研究也在进行之中。现代人们对天然药物和天然保健品的需求日益增长，以及人民生活水平的提高和人民对贯叶连翘认识的加强，推动了对贯叶连翘系列产品的需求。
现有生产贯叶连翘提取物的方法，如2016年5月25日公布的公布号为CN105596387A“一种贯叶连翘提取物的生产方法”的发明专利，该专利公开的方法是：以贯叶连翘地上部分为原料，经原料预处理、碱性溶剂与提取剂提取、乙酸乙酯萃取、真空浓缩、喷雾干燥等步骤得到贯叶连翘提取物。该方法存在的缺点有：①使用了大量的碱性溶剂提取与有机溶剂萃取，生产周期长、污染严重，增加了生产成本；②采用传统提取法生产，工艺提取率低，造成贯叶连翘资源的严重浪费；③该生产过程中的提取、浓缩等加热工艺操作时间较长，导致部分活性成分长时间受热氧化变质，产品品质低。
发明内容
本发明的目的是针对现有生产贯叶连翘提取物方法的不足之处，提供一种制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物的方法，该方法具有生产工艺简单、稳定、易于放大，产品收率高，设备投资成本低，生产成本低，贯叶连翘资源综合利用率高等特点。采用本发明方法制备出的贯叶连翘提取物具有金丝桃素含量高、性能稳定等特点。
本发明的机理是：贯叶连翘中大多生物活性成分存在于细胞内，少量存在于细胞间隙。植物细胞壁主要是由纤维素、半纤维素、果胶质等大分子组成，植物中小分子化学成分渗透到溶液中，必须穿透植物细胞壁的障碍。新鲜贯叶连翘经干燥后，组织内的水分蒸发，细胞逐渐萎缩。这时，在细胞液泡中溶解的活性成分等物质呈结晶或无定形状态沉积于细胞内，使细胞形成空腔，细胞质膜的半透性丧失，导致了细胞内的成分溶出障碍。采用生物酶解技术，在提取中加入生物酶（木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶、蛋白酶等），从而降解植物细胞壁以及细胞间质当中的成分，破坏细胞渗透阻力，减小成分扩散阻力，不仅增加成分的提取率，还可以缩短提取时间，这对于降低生产能耗和药材成本是非常有利的。经酶解后，继续使用微波技术处理，加速细胞壁破裂或溶解，达到增强提取效率和收率的目的。将酶解与微波技术耦合，在显著提高提取率的同时，可降低后续提取温度、提取时间，使提取物中的金丝桃素得以溶出而不氧化，保持其药用功效。
本发明的目的是这样实现的：一种制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物的方法，以贯叶连翘全草干药材为原料，经酶活化、酶解、微波处理、乙醇提取、反渗透、冷冻干燥等生产得到富含金丝桃素的贯叶连翘提取物。其具体的方法步骤如下：
（1）制备酶活化液
首先按照市售木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶的质量（g）：纯化水的体积（mL）比为1：40～60的比例，将木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶分散到纯化水中，再放入超声波处理器中，控制温度为35～45℃，进行超声处理10～15min，用于对木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶的活化与分散。超声完成后，收集混合液，即为酶活化液，用作下一步处理。
（2）制备贯叶连翘酶解提取物
第（1）步完成后，以市售贯叶连翘全草干药材为原料，先经粉碎机粉碎至40～80目，收集贯叶连翘粉末。再按照贯叶连翘粉末的质量（g）：纯化水的体积（mL）比为1：6～10的比例，将贯叶连翘粉末分散于纯化水中，完全浸透，在温度为50～60℃下，浸泡30～45min，再用0.1～0.5mol/L的盐酸溶液调节pH至4.4～4.8。最后再按照贯叶连翘粉末的质量（g）：酶活化液的体积（mL）比为1：1～3的比例，加入酶活化液，在温度为40～50℃下酶解处理5～7h，酶解结束后在温度为80～90℃下，酶灭活5～10min，收集混合物，即为贯叶连翘酶解提取物，用作下一步处理。
（3）制备贯叶连翘微波提取物
第（2）步完成后，先将第（2）步收集得到的贯叶连翘酶解提取物置于微波反应器中，在温度为40～50℃、功率为300～400W的条件下，微波提取6～12min，再泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣。对于收集的过滤液，即为贯叶连翘微波提取液，用作下一步处理；对于收集的滤渣，即为贯叶连翘微波提取物，用作下一步处理。
（4）制备贯叶连翘提取液
第（3）步完成后，按照贯叶连翘粉末的质量（g）：体积分数为70～95%乙醇的体积（mL）比为1：5～10的比例，将70～95%乙醇加入到贯叶连翘微波提取物中，在搅拌速度为150～200r/min、温度为80～90℃的条件下提取2～3h，然后趁热泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣。对于收集的滤渣，可用于制备天然复合絮凝剂或制备提高动物免疫力的饲料添加剂；对于收集的过滤液，与第（3）步得到的贯叶连翘微波提取液合并，即为贯叶连翘提取液，用作下一步处理。
（5）制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物
第（4）步完成后，将贯叶连翘提取液泵入反渗透浓缩器中，在0.15～0.25MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原体积的10～15%为止，分别收集反渗透透过液和反渗透截留液。对于收集的反渗透透过液为乙醇和纯化水的混合液，经减压蒸馏回收乙醇，调配后可继续使用；对于收集的反渗透截留液，置于-16～-18℃下，预冻2～3h，然后再放置于冷冻干燥机中，在5～7Pa、-50～-60℃下，进行冷冻干燥24～30h，就制备得到富含金丝桃素的贯叶连翘提取物；提取物中金丝桃素含量为1.2～1.4%，总金丝桃素含量为0.88～1.01%，贯叶连翘提取物提取率为82.1～84.4%，金丝桃素提取率为87.2～89.7%。
本发明采用上述技术方案后，主要有以下效果：
1、本发明在生产过程中，方法步骤简单、产品收率高、资源综合利用率高，非常便于工业化生产。
2、本发明在生产过程中，采用酶解技术，大大提高了金丝桃素及其它有效成分的溶出率，同时提高提取率，缩短提取时间，进而提高产量，节约成本。
3、本发明中酶解与微波技术耦合，集成解决了传统植提技术中强酸（碱）、高温（压）导致的高能耗、高污染等问题，而且改善了活性成分长时间受热导致的氧化变质，为构建清洁、稳定、高品质天然产物提取生产提供技术支撑。
4、本发明在生产过程中避免使用有毒有害溶剂，使用乙醇、纯化水等无毒物质，且回收循环利用。
5、本发明得到的贯叶连翘提取物中金丝桃素含量高、稳定性较好。
采用本发明方法制备的产品，可广泛应用于医药、保健品、食品和日化等行业。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，进一步说明本发明。
实施例1
一种制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物的方法，具体方法步骤如下：
（1）制备酶活化液
首先按照市售木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶的质量（g）：纯化水的体积（mL）比为1：40的比例，将木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶分散到纯化水中，再放入超声波处理器中，控制温度为35℃，进行超声处理10min，用于对木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶的活化与分散。超声完成后，收集混合液，即为酶活化液，用作下一步处理。
（2）制备贯叶连翘酶解提取物
第（1）步完成后，以市售贯叶连翘全草干药材为原料，先经粉碎机粉碎至40目，收集贯叶连翘粉末。再按照贯叶连翘粉末的质量（g）：纯化水的体积（mL）比为1：6的比例，将贯叶连翘粉末分散于纯化水中，完全浸透，在温度为50℃下，浸泡30min，再用0.1mol/L的盐酸溶液调节pH至4.4。最后再按照贯叶连翘粉末的质量（g）：酶活化液的体积（mL）比为1：1的比例，加入酶活化液，在温度为40℃下酶解处理5h，酶解结束后在温度为80℃下，酶灭活5min，收集混合物，即为贯叶连翘酶解提取物，用作下一步处理。
（3）制备贯叶连翘微波提取物
第（2）步完成后，先将第（2）步收集得到的贯叶连翘酶解提取物置于微波反应器中，在温度为40℃、功率为300W的条件下，微波提取6min，再泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣。对于收集的过滤液，即为贯叶连翘微波提取液，用作下一步处理；对于收集的滤渣，即为贯叶连翘微波提取物，用作下一步处理。
（4）制备贯叶连翘提取液
第（3）步完成后，按照贯叶连翘粉末的质量（g）：体积分数为70%乙醇的体积（mL）比为1：5的比例，将70%乙醇加入到贯叶连翘微波提取物中，在搅拌速度为150r/min、温度为80℃的条件下提取2h，然后趁热泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣。对于收集的滤渣，可用于制备天然复合絮凝剂或制备提高动物免疫力的饲料添加剂；对于收集的过滤液，与第（3）步得到的贯叶连翘微波提取液合并，即为贯叶连翘提取液，用作下一步处理。
（5）制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物
第（4）步完成后，将贯叶连翘提取液泵入反渗透浓缩器中，在0.15MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原体积的10%为止，分别收集反渗透透过液和反渗透截留液。对于收集的反渗透透过液为乙醇和纯化水的混合液，经减压蒸馏回收乙醇，调配后可继续使用；对于收集的反渗透截留液，置于-16℃下，预冻2h，然后再放置于冷冻干燥机中，在5Pa、-50℃下，进行冷冻干燥24h，就制备得到富含金丝桃素的贯叶连翘提取物；提取物中金丝桃素含量为1.2%，总金丝桃素含量为0.88%，贯叶连翘提取物提取率为82.1%，金丝桃素提取率为87.2%。
实施例2
一种制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物的方法，具体方法步骤如下：
（1）制备酶活化液
首先按照市售木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶的质量（g）：纯化水的体积（mL）比为1：50的比例，将木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶分散到纯化水中，再放入超声波处理器中，控制温度为40℃，进行超声处理12min，用于对木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶的活化与分散。超声完成后，收集混合液，即为酶活化液，用作下一步处理。
（2）制备贯叶连翘酶解提取物
第（1）步完成后，以市售贯叶连翘全草干药材为原料，先经粉碎机粉碎至60目，收集贯叶连翘粉末。再按照贯叶连翘粉末的质量（g）：纯化水的体积（mL）比为1：8的比例，将贯叶连翘粉末分散于纯化水中，完全浸透，在温度为55℃下，浸泡40min，再用0.3mol/L的盐酸溶液调节pH至4.6。最后再按照贯叶连翘粉末的质量（g）：酶活化液的体积（mL）比为1：2的比例，加入酶活化液，在温度为45℃下酶解处理6h，酶解结束后在温度为85℃下，酶灭活8min，收集混合物，即为贯叶连翘酶解提取物，用作下一步处理。
（3）制备贯叶连翘微波提取物
第（2）步完成后，先将第（2）步收集得到的贯叶连翘酶解提取物置于微波反应器中，在温度为45℃、功率为350W的条件下，微波提取10min，再泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣。对于收集的过滤液，即为贯叶连翘微波提取液，用作下一步处理；对于收集的滤渣，即为贯叶连翘微波提取物，用作下一步处理。
（4）制备贯叶连翘提取液
第（3）步完成后，按照贯叶连翘粉末的质量（g）：体积分数为85%乙醇的体积（mL）比为1：8的比例，将85%乙醇加入到贯叶连翘微波提取物中，在搅拌速度为180r/min、温度为85℃的条件下提取2.5h，然后趁热泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣。对于收集的滤渣，可用于制备天然复合絮凝剂或制备提高动物免疫力的饲料添加剂；对于收集的过滤液，与第（3）步得到的贯叶连翘微波提取液合并，即为贯叶连翘提取液，用作下一步处理。
（5）制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物
第（4）步完成后，将贯叶连翘提取液泵入反渗透浓缩器中，在0.20MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原体积的12%为止，分别收集反渗透透过液和反渗透截留液。对于收集的反渗透透过液为乙醇和纯化水的混合液，经减压蒸馏回收乙醇，调配后可继续使用；对于收集的反渗透截留液，置于-17℃下，预冻2.5h，然后再放置于冷冻干燥机中，在6Pa、-55℃下，进行冷冻干燥28h，就制备得到富含金丝桃素的贯叶连翘提取物；提取物中金丝桃素含量为1.3%，总金丝桃素含量为0.96%，贯叶连翘提取物提取率为83.5%，金丝桃素提取率为88.5%。
实施例3
一种制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物的方法，具体方法步骤如下：
（1）制备酶活化液
首先按照市售木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶的质量（g）：纯化水的体积（mL）比为1：60的比例，将木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶分散到纯化水中，再放入超声波处理器中，控制温度为45℃，进行超声处理15min，用于对木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶的活化与分散。超声完成后，收集混合液，即为酶活化液，用作下一步处理。
（2）制备贯叶连翘酶解提取物
第（1）步完成后，以市售贯叶连翘全草干药材为原料，先经粉碎机粉碎至80目，收集贯叶连翘粉末。再按照贯叶连翘粉末的质量（g）：纯化水的体积（mL）比为1：10的比例，将贯叶连翘粉末分散于纯化水中，完全浸透，在温度为60℃下，浸泡45min，再用0.5mol/L的盐酸溶液调节pH至4.8。最后再按照贯叶连翘粉末的质量（g）：酶活化液的体积（mL）比为1：3的比例，加入酶活化液，在温度为50℃下酶解处理7h，酶解结束后在温度为90℃下，酶灭活10min，收集混合物，即为贯叶连翘酶解提取物，用作下一步处理。
（3）制备贯叶连翘微波提取物
第（2）步完成后，先将第（2）步收集得到的贯叶连翘酶解提取物置于微波反应器中，在温度为50℃、功率为400W的条件下，微波提取12min，再泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣。对于收集的过滤液，即为贯叶连翘微波提取液，用作下一步处理；对于收集的滤渣，即为贯叶连翘微波提取物，用作下一步处理。
（4）制备贯叶连翘提取液
第（3）步完成后，按照贯叶连翘粉末的质量（g）：体积分数为95%乙醇的体积（mL）比为1：10的比例，将95%乙醇加入到贯叶连翘微波提取物中，在搅拌速度为200r/min、温度为90℃的条件下提取3h，然后趁热泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣。对于收集的滤渣，可用于制备天然复合絮凝剂或制备提高动物免疫力的饲料添加剂；对于收集的过滤液，与第（3）步得到的贯叶连翘微波提取液合并，即为贯叶连翘提取液，用作下一步处理。
（5）制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物
第（4）步完成后，将贯叶连翘提取液泵入反渗透浓缩器中，在0.25MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原体积的15%为止，分别收集反渗透透过液和反渗透截留液。对于收集的反渗透透过液为乙醇和纯化水的混合液，经减压蒸馏回收乙醇，调配后可继续使用；对于收集的反渗透截留液，置于-18℃下，预冻3h，然后再放置于冷冻干燥机中，在7Pa、-60℃下，进行冷冻干燥30h，就制备得到富含金丝桃素的贯叶连翘提取物；提取物中金丝桃素含量为1.4%，总金丝桃素含量为1.01%，贯叶连翘提取物提取率为84.4%，金丝桃素提取率为89.7%。
Claims (1)
1.一种制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物的方法，其特征在于具体方法步骤如下：
（1）制备酶活化液
首先按照市售木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶的质量：纯化水的体积比为1 g：40～60mL的比例，将木聚糖酶或果胶酶或纤维素酶分散到纯化水中，再放入超声波处理器中，控制温度为35～45℃，进行超声处理10～15min；超声完成后，收集混合液，即为酶活化液，用作下一步处理；
（2）制备贯叶连翘酶解提取物
第（1）步完成后，以市售贯叶连翘全草干药材为原料，先经粉碎机粉碎至40～80目，收集贯叶连翘粉末；再按照贯叶连翘粉末的质量：纯化水的体积比为1 g：6～10 mL的比例，将贯叶连翘粉末分散于纯化水中，完全浸透，在温度为50～60℃下，浸泡30～45min，再用0.1～0.5mol/L的盐酸溶液调节pH至4.4～4.8；最后再按照贯叶连翘粉末的质量：酶活化液的体积比为1 g：1～3 mL的比例，加入酶活化液，在温度为40～50℃下酶解处理5～7h，酶解结束后在温度为80～90℃下，酶灭活5～10min，收集混合物，即为贯叶连翘酶解提取物，用作下一步处理；
（3）制备贯叶连翘微波提取物
第（2）步完成后，先将第（2）步收集得到的贯叶连翘酶解提取物置于微波反应器中，在温度为40～50℃、功率为300～400W的条件下，微波提取6～12min，再泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣；对于收集的过滤液，即为贯叶连翘微波提取液，用作下一步处理；对于收集的滤渣，即为贯叶连翘微波提取物，用作下一步处理；
（4）制备贯叶连翘提取液
第（3）步完成后，按照贯叶连翘粉末的质量：体积分数为70～95%乙醇的体积比为1 g：5～10 mL的比例，将70～95%乙醇加入到贯叶连翘微波提取物中，在搅拌速度为150～200r/min、温度为80～90℃的条件下提取2～3h，然后趁热泵入真空过滤机中，进行真空过滤，分别收集过滤液和滤渣；对于收集的过滤液，与第（3）步得到的贯叶连翘微波提取液合并，即为贯叶连翘提取液，用作下一步处理；
（5）制备富含金丝桃素的贯叶连翘提取物
第（4）步完成后，将贯叶连翘提取液泵入反渗透浓缩器中，在0.15～0.25MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原体积的10～15%为止，分别收集反渗透透过液和反渗透截留液；对于收集的反渗透截留液，置于-16～-18℃下，预冻2～3h，然后再放置于冷冻干燥机中，在5～7Pa、-50～-60℃下，进行冷冻干燥24～30h，就制备得到富含金丝桃素的贯叶连翘提取物；提取物中金丝桃素含量为1.2～1.4%，总金丝桃素含量为0.88～1.01%，贯叶连翘提取物提取率为82.1～84.4%，金丝桃素提取率为87.2～89.7%。
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|---|---|---|---|---|
| CN116333362B (zh) * | 2023-02-10 | 2024-03-29 | 西北农林科技大学 | 一种金丝桃素/紫磷量子点/细菌纤维素复合膜的制备方法和应用 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1385412A (zh) * | 2002-06-07 | 2002-12-18 | 牛勃 | 一种用贯叶连翘中提取金丝桃素的方法及以金丝桃素为主分制成的药品 |
| CN101829164A (zh) * | 2010-05-07 | 2010-09-15 | 河南中医学院 | 一种贯叶连翘提取物的生物制备方法 |
| CN103450000A (zh) * | 2013-10-08 | 2013-12-18 | 白心亮 | 一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法 |
| CN104610039A (zh) * | 2015-02-05 | 2015-05-13 | 西安盛兴生物科技有限公司 | 一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法 |
| CN105085224A (zh) * | 2015-08-31 | 2015-11-25 | 桂林三宝生物科技有限公司 | 一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法 |
| CN105777522A (zh) * | 2014-12-18 | 2016-07-20 | 六安裕发农业科技有限公司 | 一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法 |
| CN105831422A (zh) * | 2016-04-08 | 2016-08-10 | 重庆工商大学 | 一种提高动物免疫力的饲料添加剂的制备方法 |
| CN106668088A (zh) * | 2017-02-08 | 2017-05-17 | 内蒙古昶辉生物科技股份有限公司 | 一种贯叶连翘提取物的制备方法 |
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| CN101829164A (zh) * | 2010-05-07 | 2010-09-15 | 河南中医学院 | 一种贯叶连翘提取物的生物制备方法 |
| CN103450000A (zh) * | 2013-10-08 | 2013-12-18 | 白心亮 | 一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法 |
| CN105777522A (zh) * | 2014-12-18 | 2016-07-20 | 六安裕发农业科技有限公司 | 一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法 |
| CN104610039A (zh) * | 2015-02-05 | 2015-05-13 | 西安盛兴生物科技有限公司 | 一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法 |
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| CN105831422A (zh) * | 2016-04-08 | 2016-08-10 | 重庆工商大学 | 一种提高动物免疫力的饲料添加剂的制备方法 |
| CN106668088A (zh) * | 2017-02-08 | 2017-05-17 | 内蒙古昶辉生物科技股份有限公司 | 一种贯叶连翘提取物的制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 优化酶提取贯叶连翘药材活性成分工艺;郝鹏飞等;《中国实验方剂学杂志》;20110731;第17卷(第14期);39-42 * |
| 果胶酶提取金丝桃素工艺研究;郝鹏飞等;《中药材》;20110731;第34卷(第07期);1133-1137 * |
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