CN109379888A - 至少包含一种pI为5.8至8.5的基础胰岛素、餐时胰岛素和/或胃肠激素、以及带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的PH 7的可注射溶液 - Google Patents

至少包含一种pI为5.8至8.5的基础胰岛素、餐时胰岛素和/或胃肠激素、以及带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的PH 7的可注射溶液 Download PDF

Info

Publication number
CN109379888A
CN109379888A CN201780035320.2A CN201780035320A CN109379888A CN 109379888 A CN109379888 A CN 109379888A CN 201780035320 A CN201780035320 A CN 201780035320A CN 109379888 A CN109379888 A CN 109379888A
Authority
CN
China
Prior art keywords
group
amino acid
formula
insulin
composition according
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201780035320.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109379888B (zh
Inventor
亚历山大·盖斯勒
塞戈莱纳·拉格
里夏尔·沙尔韦
奥利维耶·索拉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Adocia SAS
Original Assignee
Adocia SAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Adocia SAS filed Critical Adocia SAS
Publication of CN109379888A publication Critical patent/CN109379888A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109379888B publication Critical patent/CN109379888B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明涉及pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的物理稳定组合物，其至少包含：a)等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素；b)餐时胰岛素或胃肠激素；以及c)带有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸。

Description

至少包含一种pI为5.8至8.5的基础胰岛素、餐时胰岛素和/或 胃肠激素、以及带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸 的PH 7的可注射溶液
本发明涉及用于治疗糖尿病的通过注射胰岛素的治疗。
本发明涉及pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的物理稳定组合物，其至少包含与以下组合的一种等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素：餐时胰岛素、或胃肠激素、或餐时胰岛素和胃肠激素；以及带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸。
胰岛素治疗或通过注射胰岛素的糖尿病治疗近年来已经取得了显著的进步，特别是由于新胰岛素的开发，所述新胰岛素与人胰岛素相比提供更好的患者血糖校正，并且使得可更好地模拟胰腺的生理活动。
当在患者中诊断出II型糖尿病时，开始逐步治疗。首先，患者服用经口抗糖尿病药物(OAD)，例如二甲双胍。当单独的OAD不再足以调节血液中的葡萄糖水平时，必须进行治疗的改变，并且根据患者的特异性，可建立不同的治疗组合。例如，除OAD之外，患者还可进行基于甘精胰岛素或地特胰岛素类型的基础胰岛素的治疗，并随后根据病理状况的发展，进行基于基础胰岛素和餐时胰岛素的治疗。
此外，现今，为了确保当在前的治疗不再能够控制血糖水平时将OAD 治疗转变为基础胰岛素/餐时胰岛素治疗，推荐注射GLP-1 RA的类似物。
代表胰高血糖素样肽-1受体激动剂的GLP-1 RA是促胰岛素释放肽或肠降血糖素，并且属于胃肠激素(或肠激素)家族，其在血糖过高时例如在餐后刺激胰岛素的分泌。
胃肠激素(肠激素)也称为饱腹感激素。其特别地包括GLP-1 RA(胰高血糖素样肽-1受体激动剂)和GIP(葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽)、胃泌酸调节素(胰高血糖素原的衍生物)、肽YY、胰淀素、缩胆囊素、胰多肽(PP)、食欲刺激素和肠抑肽，其具有肽或蛋白质结构。其还响应于葡萄糖和脂肪酸刺激胰岛素的分泌，并且因此其是用于治疗糖尿病的潜在候选物。
在所述胃肠激素中，GLP-1 RA是迄今为止在药物开发中贡献最佳结果的那些。其使患有II型糖尿病的患者可减轻体重，同时更好地控制他们的血糖。
还已开发了GLP-1 RA的类似物或衍生物，特别地是为了提高其稳定性。
此外，为了满足糖尿病患者的每日胰岛素需求，糖尿病患者目前可以以简化方式获得两种类型的具有互补作用的胰岛素：餐时胰岛素(或所谓的速效胰岛素)和基础胰岛素(或所谓的短效胰岛素)。
餐时胰岛素允许在餐时和零食中摄入的葡萄糖的迅速管理(代谢和/ 或储存)。患者在每次摄入食物之前必须自施用餐时胰岛素的注射剂，即每天约2至3次注射。最常用的餐时胰岛素是：人重组胰岛素， (来自NOVO NORDISK的门冬胰岛素)、(来自ELI LILLY的赖脯胰岛素)和(来自SANOFI的赖谷胰岛素)。
基础胰岛素确保在食物摄入期之外维持患者的血糖稳态。其基本上通过阻断内源性葡萄糖产生(肝葡萄糖)而发挥作用。基础胰岛素的日剂量通常相当于每日总胰岛素需要量的40％至50％。根据使用的基础胰岛素，该剂量以在一天内定期分配的1次或2次注射施用。最常用的基础胰岛素是(来自NOVO NORDISK的地特胰岛素)和(来自 SANOFI的甘精胰岛素)。
为了完整起见，应注意NPH(胰岛素NPH代表中性鱼精蛋白Hagedorn 胰岛素；Humuline)是最古老的基础胰岛素。该制剂是通过阳离子蛋白质鱼精蛋白使人胰岛素(在中性pH下为阴离子)沉淀的结果。由此形成的微晶分散在水性混悬液中，并且在皮下注射之后缓慢溶解。这种缓慢溶解确保了胰岛素的延长释放。然而，这种释放不确保随时间的恒定胰岛素浓度。释放曲线为钟形的，并且持续仅12至16小时。因此，所述胰岛素每天注射两次。在此的这种基础胰岛素NPH的效果比现代基础胰岛素和差得多。NPH是中效基础胰岛素。
随着速效胰岛素类似物的出现，NPH的原理已经发展，产生所谓的“预混合”产品，其同时提供迅速作用和中等作用。(NOVO NORDISK)和(ELI LILLY)是包含部分地被鱼精蛋白复合的速效胰岛素类似物和的制剂。因此，这些制剂包含被认为具有中等作用的胰岛素类似物微晶和具有迅速作用的保持可溶的胰岛素部分。这些制剂确实提供速效胰岛素的优点，但是其也具有NPH 的缺陷，即，限制于12至16小时的作用持续时间和“钟形”胰岛素释放曲线。然而，这些产品使得患者可自施用中效基础胰岛素与速效餐时胰岛素一起的单注射。然而，许多患者希望降低其注射次数。
目前市售的基础胰岛素可基于使得可获得延长作用的技术方案进行分类，并且迄今为止，使用两种方法。
第一种方法，即地特胰岛素的方法，是与白蛋白的体内结合。这涉及在pH 7下可溶的类似物，其包含在B29位结合的脂肪酸侧链(十四烷酰基)，这在体内允许该胰岛素与白蛋白结合。其延长作用主要是由于皮下注射后对白蛋白的这种亲和力。
然而，其药动学特征不能覆盖一天，并且因此其通常以每天两次注射使用。
在pH 7下可溶的另一种胰岛素是以名称销售的德谷胰岛素。其也包含与胰岛素结合的脂肪酸侧链(十六烷二酰基-γ-L-Glu)。
第二种方法，甘精胰岛素的方法，是在生理pH下的沉淀。甘精胰岛素是如下获得的人胰岛素的类似物：通过两个精氨酸残基延伸人胰岛素B 链的C端部分并用甘氨酸残基替代天冬酰胺残基A21(US 5,656,722)。添加两个精氨酸残基旨在调节甘精胰岛素在生理pH下的pI(等电点)，并且以这种方式使人胰岛素的这种类似物不溶于生理介质。
另外，A21的替代旨在使甘精胰岛素在酸性pH下稳定，并且能够将其配制成在酸性pH下为可注射溶液的溶液形式。在皮下注射期间，甘精胰岛素从酸性pH(pH 4-4.5)至生理pH(中性pH)的过渡导致其沉淀在皮肤下。甘精胰岛素微粒的缓慢再溶解确保缓慢且延长的作用。
甘精胰岛素的降血糖作用在24小时的持续时间内几乎恒定，这允许大多数患者每天自身限于单次注射。
现今认为甘精胰岛素是最常用的基础胰岛素。
然而，甘精胰岛素类型的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的制剂的必需酸性pH可以是真正的缺点，因为甘精胰岛素制剂的这种酸性pH有时在注射期间会给患者带来疼痛，尤其是这会阻止与其他蛋白质的任何配制，特别是与餐时胰岛素的配制，因为后者在酸性pH下不稳定。由于以下事实在酸性pH下配制餐时胰岛素是不可能的：在这些条件下，餐时胰岛素经历A21位中脱酰胺的二次反应，这使其不满足适用于可注射药物的稳定性要求。
迄今为止，在申请WO 2013/021143 A1、WO 2013/104861 A1、WO 2014/124994 A1和WO 2014/124993 A1中，示出了可在中性pH下溶解等电点为5.8至8.5的甘精胰岛素类型的这些基础胰岛素，同时独立于pH维持体外介质(含有它的体外介质)和体内介质(皮肤下)之间的溶解度差异。
特别地，申请WO 2013/104861 A1描述了pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的组合物，其至少包含(a)等电点pI为5.8至8.5的基础胰岛素和(b)带有羧酸根电荷并且被疏水性基团取代的共聚氨基酸。
现有技术的这些组合物的主要缺点是其不足够稳定而不满足适用于药物制剂的规范。
在本专利申请的实验部分的一些实施例中，示出特别是在WO 2013/104861 A1中描述的组合物随时间呈现出不令人满意的稳定性。
因此，需要发现这样的溶液，其使得可溶解等电点(pI)为5.8至8.5 的基础胰岛素，同时在注射之后保持其基本特性，但也使得可满足基于胰岛素的药物产品的标准物理稳定性条件。
令人惊讶的是，申请人已发现，根据本发明的带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸使得可获得溶液形式的组合物，其不仅满足WO 2013/104861 A1中描述的要求，而且附加地能够赋予所述组合物以提高的物理稳定性，而不需要提高所用赋形剂的量。
此外，当将等电点为5.8至8.5的基础胰岛素在组合物中与餐时胰岛素和/或胃肠激素组合时，这些从未达到先验的性能得以维持。
因此，令人惊讶地，根据本发明的共聚氨基酸对甘精胰岛素的亲和力提高，因为其使得可在[Hy]/[基础胰岛素]比值低于现有技术下获得甘精胰岛素溶液的溶解和稳定化；此外，这些结果是在不改变和甚至提高甘精胰岛素的沉淀倾向下获得的，如实验部分所示出的。
此外，亲和力的这种提高使得可在长期治疗的情况下限制对所述赋形剂的暴露水平。
根据本发明的带有羧酸根电荷和疏水性基团Hy的共聚氨基酸表现出优异的抗水解性。这特别地可在加速条件下(例如通过在碱性pH(pH 12) 下的水解测试)显示。
此外，例如芬顿氧化(oxydation de fenton)类型的强制氧化测试显示，带有羧酸根电荷和疏水性基团Hy的共聚氨基酸表现出良好的抗氧化性。
因此，本发明涉及pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的物理稳定组合物，其至少包含：
a)等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素，以及
b)餐时胰岛素和/或胃肠激素，以及
c)带有羧酸根电荷和至少一个式I疏水性基团的共聚氨基酸。
在一个实施方案中，本发明涉及pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的组合物，其至少包含：
a)一种等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素，以及
b)餐时胰岛素，以及
c)带有羧酸根电荷和至少一个式I疏水性基团的共聚氨基酸。
在一个实施方案中，本发明涉及pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的组合物，其至少包含：
a)一种等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素，以及
b)胃肠激素，以及
c)带有羧酸根电荷和至少一个式I疏水性基团的共聚氨基酸。
在一个实施方案中，本发明涉及pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的组合物，其至少包含：
a)一种等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素，以及
b)餐时胰岛素和胃肠激素，以及
c)带有羧酸根电荷和至少一个式I疏水性基团的共聚氨基酸。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团Hy的所述共聚氨基酸由谷氨酸或天冬氨酸单元组成，并且所述疏水性基团Hy是下式I的基团：
其中：
-GpR是式II或II’基团：
-GpA是式III或III’基团：
-GpC是式IV基团：
-Hy包含多于30个碳原子，
-*表示通过酰胺官能团结合的不同基团的连接位点；
-a是等于0或1的整数；
-b是等于0或1的整数；
-p是等于1或2的整数，并且
○如果p等于1，则a等于0或1且GpA是式III’基团；并且
○如果p等于2，则a等于1且GpA是式III基团；
-c是等于0或1的整数，并且如果c等于0，则d等于1或2；
-d是等于0、1或2的整数；
-r是等于0或1的整数，并且
○如果r等于0，则式I疏水性基团通过疏水性基团的羰基与共聚氨基酸的N端位置的氮原子之间的共价键与共聚氨基酸结合，由此形成酰胺官能团，其来源于共聚氨基酸之前体的N 端位置的胺官能团与疏水性基团之前体所带有的酸官能团的反应；并且
○如果r等于1，则式I疏水性基团如下与共聚氨基酸结合：
■通过疏水性基团的氮原子与共聚氨基酸的羰基之间的共价键，由此形成酰胺官能团，其来源于疏水性基团之前体的胺官能团与共聚氨基酸之前体所带有的酸官能团的反应，或
■通过疏水性基团的羰基与共聚氨基酸的N端位置的氮原子之间的共价键，由此形成酰胺官能团，其来源于疏水性基团之前体的酸官能团与共聚氨基酸之前体在N端位置所带有的胺官能团的反应；
-R是选自以下的基团：
○直链或支链二价烷基，如果GpR是式II基团的话，其包含2 至12个碳原子，或者，如果GpR是式II’基团的话，其包含 1至11个碳原子；
○直链或支链二价烷基，如果GpR是式II基团的话，其包含2 至11个碳原子，或者，如果GpR是式II’基团的话，其包含 1至11个碳原子，所述烷基带有一个或更多个-CONH2官能团；以及
○包含4至14个碳原子和1至5个氧原子的未经取代的醚或聚醚基团；
-A是包含1至6个碳原子的直链或支链烷基；
-B是包含1至9个碳原子的直链或支链烷基，其任选地包含芳环；
-Cx是直链或支链的一价烷基，其中x表示碳原子数，并且：
○如果p等于1，则x为11至25(11≤x≤25)；
○如果p等于2，则x为9至15(9≤x≤15)，
-疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i 为0＜i≤0.5；
-当共聚氨基酸带有数个疏水性基团时，则它们是相同或不同的，
-谷氨酸或天冬氨酸单元的聚合度DP为5至250；
-游离酸官能团是选自Na+和K+的碱性阳离子的盐的形式。
根据本发明的组合物的pH为6.0至8.0，优选6.6至7.8，或更优选 6.8至7.6。
所述带有羧酸根电荷和疏水性基团Hy的共聚氨基酸在pH为6至8、温度为25℃和浓度低于60mg/mL下在水溶液中可溶。
“物理稳定组合物”应理解为是指满足欧洲、美国和国际药典中描述的目视检查的标准的组合物，即澄清且不含可见颗粒但也无色的组合物。
“可注射水溶液”应理解为意指溶剂为水的溶液，其满足EP和US 药典的条件。
“由谷氨酸或天冬氨酸单元组成的共聚氨基酸”应理解为意指通过肽键彼此结合的谷氨酸或天冬氨酸单元的非环状直链，所述链具有对应于一端的羧酸的C端部分和对应于该链的另一端的胺的N端部分。
“可溶的”应理解为意指能够使得在25℃下在蒸馏水中以小于60 mg/mL的浓度制备不含颗粒的澄清溶液。
“烷基”应理解为意指不包含杂原子的直链或支链碳链。
共聚氨基酸是谷氨酸和/或天冬氨酸单元的链中的统计学共聚氨基酸。
在所述式中，*表示所表示的不同元件的连接位点。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，Hy包含多于 30个碳原子。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，Hy包含30至 70个碳原子。
在一个实施方案中，当p＝1时，x为11至25(11≤x≤25)。特别地，当x为15至16(x＝15或16)时，则r＝1且R是醚或聚醚基团，并且当x大于17(x≥17)时，则r＝1且R是醚或聚醚基团。
在一个实施方案中，当p＝2时，x为9至15(9≤x≤15)。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团选自下式V所示的其中p＝1的式I疏水性基团：
GpR、GpA、GpC、r和a具有上文给出的定义。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中r等于1(r＝1)并且a等于0(a＝0)。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中r等于1(r＝1)并且a等于1(a＝1)。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2至12个碳原子的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2至6个碳原子的二价烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2至6个碳原子的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2至4个碳原子的二价烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2至4个碳原子的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2个碳原子的二价烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含6个碳原子的二价烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II’基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II’基团，其中R是包含1至11个碳原子的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II’基团，其中R是包含1至6个碳原子的二价烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是包含2至5个碳原子且带有一个或更多个酰胺官能团(-CONH2)的二价烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II’或II基团，其中R是包含2至5个碳原子且带有一个或更多个酰胺官能团(-CONH2)的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是选自下式所示基团的基团：
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于式V疏水性基团，其中 GpR是式II或II’基团，其中R是式X1基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于式V疏水性基团，其中 GpR是式II或II’基团，其中R是式X2基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，基团R通过酰胺官能团与共聚氨基酸结合，所述酰胺团由相对于酰胺官能团(-CONH2) 在δ或ε位置(或者在第4或5位)的碳带有。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是包含4至14个碳原子和1至5个氧原子的未经取代的直链醚或聚醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是包含4至6个碳原子的醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是由式X7的式表示的醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是聚醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是包含6至10个碳原子和2至3个氧原子的直链聚醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于式V疏水性基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是选自下式所示基团的聚醚基团：
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于式V疏水性基团，其中 GpR是式II或II’基团，其中R是式X3基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于式V疏水性基团，其中 GpR是式II或II’基团，其中R是式X4基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于式V疏水性基团，其中 GpR是式II或II’基团，其中R是式X5基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于式V疏水性基团，其中 GpR是式II或II’基团，其中R是式X6基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于式V疏水性基团，其中GpR是其中R是选自下式所示基团的聚醚基团的基团：
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于式V疏水性基团，其中 GpR是式II基团，其中R是式X5聚醚基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于式V疏水性基团，其中 GpR是式II基团，其中R是式X6聚醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中a等于0(a＝0)并且r等于0(r＝0)。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中a等于1(a＝1)并且式III’基团GpA选自下式所示基团：
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V 基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’基团GpA是式Y1基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V 基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’基团GpA是式Y2基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V 基团，其中a等于1(a＝1)并且式III’基团GpA是式Y3基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V 基团，其中a等于1(a＝1)并且式III’基团GpA是式Y4基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V 基团，其中a等于1(a＝1)并且式III’基团GpA是式Y5基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V 基团，其中a等于1(a＝1)并且式III’基团GpA是式Y6基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V 基团，其中a等于1(a＝1)并且式III’基团GpA是式Y7基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V 基团，其中a等于1(a＝1)并且式III’基团GpA是式Y8基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自下文中所示的式IVa、IVb或IVc 基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中基团GpC是式IVa。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中b等于0的式IVa、IVb或 IVc基团，其分别具有下文中所示的式IVd、IVe和IVf：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中基团GpC对应于其中b＝0的式IV或IVa，并且对应于式IVd。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中其中b＝1的式IV基团GpC选自其中B是选自下式所示基团的氨基酸残基的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式基团GpC对应于其中b＝1的式IV或IVa，选自其中B是选自下式所示基团的氨基酸残基的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自直链烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自支链烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含11至14个碳原子的基团的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自下式所示基团的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含15至16个碳原子的烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自下式所示基团的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自下式所示基团的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含17至25个碳原子的烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含17至18个碳原子的烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自下式所示烷基的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含19至25个碳原子的烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自下式所示烷基的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式V基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含18至19个碳原子的烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述式I疏水性基团选自下式VI所示的其中a＝1且p＝2的式I疏水性基团：
其中：
GpR、GpA、GpC、r和a具有上文给出的定义。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2至12个碳原子的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2至6个碳原子的二价烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2至6个碳原子的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II基团，其中R是至少一个包含2至4 个碳原子的烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2至4个碳原子的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II基团，其中R是包含2个碳原子的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II’基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II’基团，其中R是包含1至11个碳原子的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II’基团，其中R是包含1至6个碳原子的二价烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是包含2至5个碳原子且带有一个或更多个酰胺官能团(-CONH2)的二价烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是包含2至5个碳原子且带有一个或更多个酰胺官能团(-CONH2)的二价直链烷基。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是选自下式所示基团的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR基团中使所述GpR基团与共聚氨基酸结合参与形成酰胺官能团的胺官能团由相对于酰胺官能团(-CONH2)在δ或ε位置(或者在第4或5位)的碳带有。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是包含4至14个碳原子和1至5个氧原子的未经取代的直链醚或聚醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述醚基团R 是包含4至6个碳原子的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述醚基团是式X7
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是聚醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是包含6至10个碳原子和2至3个氧原子的直链聚醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是选自下式所示基团的直链聚醚基团：
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式 VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是式X3的直链聚醚基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式 VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是式X4的直链聚醚基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式 VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是式X5的直链聚醚基团。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，所述疏水性基团是式 VI基团，其中GpR是式II或II’基团，其中R是式X6的直链聚醚基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式III基团GpA选自下文中所示的式IIIa和IIIb基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式III基团GpA是下文中所示的式IIIb基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式III基团GpA是式IIIc基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自下文中所示的式IVa、IVb和IVc 基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中基团GpC是式IVa。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中b等于0的式IVa、IVb或 IVc基团，其分别对应于下文中所示的式IVd、IVe和IVf：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中基团GpC对应于其中b＝0的式IV或IVa，并且其对应于式IVd。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含9至15个碳原子的直链烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含9至15个碳原子的支链烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含9或10个碳原子的烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自下式所示基团的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含11至15个碳原子的烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含11至13个碳原子的烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自下式所示基团的基团：
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自包含14或15个碳原子的烷基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，所述疏水性基团是式VI基团，其中式IV基团GpC选自其中Cx选自下式所示基团的基团：
在式I、V和VI中，*表示疏水性基团与共聚氨基酸的连接位点。基团Hy通过酰胺官能团与共聚氨基酸连接。
在式II和II’中，*从左到右分别表示GpR与以下的连接位点：
-共聚氨基酸，以及
-如果a＝1，则为GpA；或者如果a＝0，则为GpC。
在式III和III’中，*从左到右分别表示GpA与以下的连接位点：
-如果r＝1，则为GpR；或者如果r＝0，则为共聚氨基酸，以及
-GpC。
在式IV中，*表示GpC与以下的连接位点：
-如果a＝1，则为GpA；如果r＝1且a＝0，则为GpR；或者如果r＝ 0且a＝0，则为共聚氨基酸。
不同基团GpR、GpA和GpC之间的所有连接都是酰胺官能团。
基团Hy、GpR、GpA、GpC和D各自独立地残基彼此相同或不同。
当共聚氨基酸包含一个天冬氨酸单元或数个天冬氨酸单元时，所述天冬氨酸单元可经历结构重排。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自下式VII的共聚氨基酸：
其中：
·D独立地表示-CH2-基团(天冬氨酸单元)或-CH2-CH2-基团(谷氨酸单元)，
·Hy是选自式I、V或VI疏水性基团的疏水性基团，其中r＝1，且GpR是式II基团，
·R1是选自式I、V或VI疏水性基团的疏水性基团，其中r＝0或r＝1且GpR是式II’基团；或者是选自H、C2至C10直链酰基、C4至C10 支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸的基团，
·R2是选自式I、V或VI疏水性基团的疏水性基团，其中r＝1且 GpR是式II基团；或者是-NR’R”基团，相同或不同的R’和R”选自H、 C2至C10直链或支链或环状烷基、苄基，并且所述烷基R’和R”一起任选地形成一个或更多个饱和的、不饱和的和/或芳香族的碳环和/或任选地包含选自O、N和S的杂原子；
·X表示选自碱性阳离子的阳离子实体；
·n+m表示共聚氨基酸的聚合度DP，即每个共聚氨基酸链的单体单元的平均数，并且5≤n+m≤250。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，当共聚氨基酸包含天冬氨酸单元时，则共聚氨基酸可另外包含式VIII和/或VIII’的单体单元：
“具有统计学接枝的共聚氨基酸”用于表示带有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸，式VIIa的共聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自下式VIIa的式VII共聚氨基酸，其中 R1＝R’1且R2＝R’2：
其中：
-m、n、X、D和Hy具有上文给出的定义，
-R’1是选自H、C2至C10直链酰基、C4至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸的基团，
-R’2是-NR’R”基团，相同或不同的R’和R”选自H、C2至C10直链或支链或环状烷基、苄基，并且所述烷基R’和R”一起任选地形成一个或更多个饱和的、不饱和的和/或芳香族的碳环和/或任选地包含选自O、 N和S的杂原子。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIa的共聚氨基酸，其中Hy是式V 基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIa的共聚氨基酸，其中Hy具有式 V且GpC是式IVd基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIa的共聚氨基酸，其中Hy是式V 且GpC是式IVd基团，其中x＝19。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIa的共聚氨基酸，其中Hy是式 VI基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIa的共聚氨基酸，其中Hy是式 VI基团，其中r＝1。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIa的共聚氨基酸，其中Hy是式 VI基团，其中r＝1，且对于GpC，b＝0。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIa的共聚氨基酸，其中Hy是式 VI且GpC是式IVd基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIa的共聚氨基酸，其中Hy是式 VI，且GpC是式IVd基团，且r＝1。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIa的共聚氨基酸，其中Hy是式 VI且GpC是式IVd基团，其中x为11至15。
“具有确定接枝的共聚氨基酸”表示带有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸，式VIIb的共聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自下式VIIb的式VII共聚氨基酸，其中n ＝0：
其中m、X、D、R1和R2具有上文给出的定义，并且至少R1或R2是式I、 V或VI疏水性基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自下式VIIb’的式VIIb共聚氨基酸，其中 R1＝R’1：
其中m、X、D、R1’和R2具有上文给出的定义，并且至少R2是式I、V或 VI疏水性基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自下式VIIb”的式VIIb共聚氨基酸，其中 R2＝R’2：
其中m、X、D、R1和R2’具有上文给出的含义，并且至少R1是式I、V或 VI疏水性基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb的式VII共聚氨基酸，其中n＝ 0且R1或R2是式I、V或VI疏水性基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb或VIIb”的共聚氨基酸，其中 R1是式I、V或VI疏水性基团，其中r＝0或r＝1且GpR为式II′。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb或VIIb”的共聚氨基酸，其中 R1是式VI疏水性基团且GpR是式II’。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb或VIIb”的共聚氨基酸，其中 R1是式VI疏水性基团，且GpR为式II′，且GpC为式IVa。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb或VIIb”的共聚氨基酸，其中 R1是式VI疏水性基团，且GpR为式II′，且GpC为式IVd。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb或VIIb’的共聚氨基酸，其中 R2是式I、V或VI疏水性基团，其中r＝1且GpR为式II。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式V 疏水性基团，其中r＝1且GpR为式II且a＝0。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式V 疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，且a＝0，且GpC为式IVa或IVc。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式V 疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，且a＝0，且GpC为式IVa。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb′的共聚氨基酸，其中R2是式V 疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，且a＝0，且GpC为式IVc。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式V 疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，且a＝0，且GpC为式IVd或IVf。在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式V疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，且a＝0，且GpC为式IVd。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式V 疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，且a＝0，且GpC为式IVf。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式 VI疏水性基团，其中r＝1且GpR为式II且a＝1。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式 VI疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，a＝1，且GpC为式IVa或IVd。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式 VI疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，a＝1，且GpC为式IVd。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式 VI疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，a＝1，且GpC为式IVd，其中 x＝11。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式 VI疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，a＝1，且GpC为式IVd，其中 x＝13。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb’的共聚氨基酸，其中R2是式 VI疏水性基团，其中r＝1，GpR为式II，a＝1，且GpC为式IVd，其中 x＝15。
在一个实施方案中，所述组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自下式XX的共聚氨基酸：
其中：
·D独立地表示-CH2-基团(天冬氨酸单元)或-CH2-CH2-基团(谷氨酸单元)，
·Hy是选自式I、V或VI疏水性基团的疏水性基团，其中r＝1，且GpR是式II基团，
·R1是选自式I、V或VI疏水性基团的疏水性基团，其中r＝0或 r＝1且GpR是式II’基团；或者是选自H、C2至C10直链酰基、C3至C10 支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸的基团，
·R2是选自式I、V或VI疏水性基团的疏水性基团，其中r＝1且 GpR是式II基团；或者是-NR’R”基团，相同或不同的R’和R”选自H、 C2至C10直链或支链或环状烷基、苄基，并且所述烷基R’和R”一起任选地形成一个或更多个饱和的、不饱和的和/或芳香族的碳环和/或任选地包含选自O、N和S的杂原子；
·R1或R2中的至少一个是如上限定的疏水性基团；
·X表示H或选自金属阳离子的阳离子实体；
n+m表示共聚氨基酸的聚合度DP，即每个共聚氨基酸链的单体单元的平均数，并且5≤n+m≤250。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，R1是选自C2至C10直链酰基、C4至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”基团和焦谷氨酸的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，R1是选自C2至C10直链酰基或C4至C10支链酰基的基团。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VII、VIIa或VIIb的共聚氨基酸，其中所述共聚氨基酸选自其中D基团是-CH2-基团(天冬氨酸单元)的共聚聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VII、VIIa或VIIb的共聚氨基酸，其中所述共聚氨基酸选自其中基团D是-CH2-CH2-基团(谷氨酸单元)的共聚氨基酸。
疏水性基团与基础胰岛素的比值定义为直至获得预期性能其各自摩尔浓度的比值：[Hy]/[基础胰岛素](mol/mol)，所述预期性能即基础胰岛素在pH 6.0至8.0下的溶解、基础胰岛素的沉淀和根据本发明的组合物的稳定性。
测量的疏水性基团与基础胰岛素之间的比值[Hy]/[基础胰岛素]的最小值是以下值，在该值下基础胰岛素溶解，因为溶解是获得的最小效果；这种溶解决定只有在基础胰岛素在6.0至8.0的pH下溶解时才可观察到的所有其他技术效果。
在根据本发明的组合物中，疏水性基团相对于基础胰岛素的比值 [Hy]/[基础胰岛素]可大于由溶解界限决定的最小值。
在一个实施方案中，疏水性基团相对于基础胰岛素的比值[Hy]/[基础胰岛素]≤2。
在一个实施方案中，疏水性基团相对于基础胰岛素的比值[Hy]/[基础胰岛素]≤1.75。
在一个实施方案中，疏水性基团相对于基础胰岛素的比值[Hy]/[基础胰岛素]≤1.5。
在一个实施方案中，疏水性基团相对于基础胰岛素的比值[Hy]/[基础胰岛素]≤1.25。
在一个实施方案中，疏水性基团相对于基础胰岛素的比值[Hy]/[基础胰岛素]≤1.00。
在一个实施方案中，疏水性基团相对于基础胰岛素的比值[Hy]/[基础胰岛素]≤0.75。
在一个实施方案中，疏水性基团相对于基础胰岛素的比值[Hy]/[基础胰岛素]≤0.5。
在一个实施方案中，疏水性基团相对于基础胰岛素的比值[Hy]/[基础胰岛素]≤0.25
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.007至0.3。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.01至0.3。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.02至0.2。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于式VI，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.007至0.15。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于式VI，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.01至0.1。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于式VI，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.02至0.08。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含9至10个碳原子的式VI，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.03至0.15。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含11至12个碳原子的式VI，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.015至0.1。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含11至12个碳原子的式VI，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.02至0.08。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含13至15个碳原子的式VI，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.01至0.1。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含13至15个碳原子的式VI，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.01至0.06。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于式V，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.007至0.3。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于式V，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.01至0.3。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于式V，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.015至0.2。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含11至14个碳原子的式V，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.1至0.2。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含15至16个碳原子的式V，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.04至0.15。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含17至18个碳原子的式V，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.02至0.06。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含19至25个碳原子的式V，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.01至0.06。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，疏水性基团对应于其中基团Cx包含19至25个碳原子的式V，并且疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0.01至0.05。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，n+m为10 至200。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，n+m为15 至150。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，n+m为15 至100。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，n+m为15 至80。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，n+m为15 至65。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，n+m为20 至60。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，n+m为20 至50。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于，n+m为20 至40。
在一个实施方案中，至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝0，p＝1，GpR对应于其中R是的式II，GpC对应于其中x＝15且 Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝0，p＝1，GpR对应于其中R是的式II，GpC对应于其中x＝19 且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝9且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝11且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝13且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是的式II，GpA对应于式IIIb，GpC 对应于其中x＝13且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIa的共聚氨基酸，其中DP＝22+/-5，i＝0.05+/-0.02，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝0，p＝1，GpR对应于其中R是的式II，GpC对应于其中x＝19且Cx是的式IVd。
聚合度DP和比值i的值通过将来源于共聚氨基酸之疏水性基团的信号的积分与来源于共聚氨基酸主链的信号的积分进行比较来通过D2O中1H NMR评估。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIa的共聚氨基酸，其中DP＝25+/-5，i＝0.07+/-0.02，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝0，p＝1，GpR对应于其中R是的式II，GpC对应于其中x＝15且Cx是的式 IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIa的共聚氨基酸，其中DP＝23+/-5，i＝0.05+/-0.02，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝0，p＝1，GpR对应于其中R是的式II，GpC对应于其中x＝19且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝25+/-5，0.033≤i≤0.05，并且式I 疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝0，p＝1，GpR对应于其中 R是的式II，GpC对应于其中x＝19且Cx是的式 IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIa的共聚氨基酸，其中DP＝22+/-5，i＝0.05+/-0.02，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝ 11且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIa的共聚氨基酸，其中DP＝35+/-5，i＝0.05+/-0.02，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝ 11且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIa的共聚氨基酸，其中DP＝65+/-5，i＝0.05+/-0.02，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝ 11且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIa的共聚氨基酸，其中DP＝22+/-5，i＝0.04+/-0.02，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝ 13且Cx是的式 IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIa的共聚氨基酸，其中DP＝22+/-5，i＝0.03+/-0.01，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝13且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIa的共聚氨基酸，其中DP＝22+/-5，i＝0.07+/-0.02，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR对应于其中R是的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝9且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝27+/-5，0.031≤i≤0.045，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR 对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中 x＝11且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝22+/-5，0.037≤i≤0.055，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR 对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中 x＝13且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝22+/-5，0.037≤i≤0.055，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR 对应于其中R是的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中x＝13且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝60+/-10，0.014≤i≤0.02，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR 对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IHb，GpC对应于其中 x＝13且Cx是的式IVd。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸是式 VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝40+/-5，0.022≤i≤0.029，并且至少一个式I疏水性基团选自以下式I基团，其中r＝1，a＝1，p＝2，GpR 对应于其中R是-CH2-CH2-的式II，GpA对应于式IIIb，GpC对应于其中 x＝13且Cx是的式IVd。
本发明还涉及带有羧酸根电荷和式I、V或VI疏水性基团的所述共聚氨基酸。
在一个实施方案中，本发明还涉及式I’、V’和VI’的所述疏水性基团的前体：
GpR、GpA、GpC、r、a、p具有上文给出的含义。
本发明还涉及用于制备稳定的可注射溶液的方法。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过聚合获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的开环聚合获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过综述文章Adv.Polym.Sci.2006，202，1-18(Deming，T.J.)所述的谷氨酸 N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸，所述谷氨酸N-羧酸酐衍生物选自聚谷氨酸甲酯N-羧酸酐(GluOMe-NCA)、聚谷氨酸苄酯 N-羧酸酐(GluOBz1-NCA)和聚谷氨酸叔丁酯N-羧酸酐(GluOtBu-NCA)。
在一个实施方案中，谷氨酸N-羧酸酐衍生物是聚-L-谷氨酸甲酯N- 羧酸酐(L-GluOMe-NCA)。
在一个实施方案中，谷氨酸N-羧酸酐衍生物是聚-L-谷氨酸苄酯N- 羧酸酐(L-GluOBz1-NCA)。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自如出版物Nature 1997，390，386-389(Deming，T.J.)中所述使用过渡金属的有机金属配合物作为引发剂通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自如专利FR2,801,226(Touraud，F.；等)以及该专利中引用的参考文献所述使用氨或伯胺作为引发剂通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自如出版物J.Am.Chem.Soc.2007，129，14114-14115(Lu H.；等)中所述使用六甲基二硅氮烷作为引发剂或如出版物J.Am.Chem.Soc.2008，130， 12562-12563(Lu H.；等)中所述使用甲硅烷基化胺作为引发剂通过谷氨酸 N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于用于合成通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸 (共聚氨基酸从其来源)的方法包括水解酯官能团的步骤。
在一个实施方案中，该水解酯官能团的步骤可由在酸性介质中水解或在碱性介质中水解组成，或者其可通过氢化进行。
在一个实施方案中，该水解酯官能团的步骤是在酸性介质中水解。
在一个实施方案中，该水解酯官能团的步骤通过氢化进行。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过较高分子量的聚氨基酸的解聚获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过较高分子量的聚氨基酸的酶促解聚获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过较高分子量的聚氨基酸的化学解聚获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过较高分子量的聚氨基酸的酶促和化学解聚获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过较高分子量的聚氨基酸的解聚获得的聚氨基酸，所述较高分子量的聚氨基酸选自聚谷氨酸钠和聚天冬氨酸钠。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过较高分子量的聚谷氨酸钠的解聚获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过较高分子量的聚天冬氨酸钠的解聚获得的聚氨基酸。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸通过使用本领域技术人员公知的形成酰胺键的方法将疏水性基团接枝到聚-L- 谷氨酸或聚-L-天冬氨酸上获得。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸通过使用用于肽合成的形成酰胺键的方法将疏水性基团接枝到聚-L-谷氨酸或聚-L-天冬氨酸上获得。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸通过如专利FR2,840,614(Chan，Y.P.；等)中所述将疏水性基团接枝到聚-L-谷氨酸或聚-L-天冬氨酸上获得。
下面，用于胰岛素的单位是药典推荐的单位；在下表中给出了mg/mL 的相关对应关系：
胰岛素 EP药典EP 8.0(2014) US药典-USP38(2015)
门冬胰岛素 1U＝0.0350mg门冬胰岛素 1USP＝0.0350mg门冬胰岛素
赖脯胰岛素 1U＝0.0347mg赖脯胰岛素 1USP＝0.0347mg赖脯胰岛素
人胰岛素 1IU＝0.0347mg人胰岛素 1USP＝0.0347mg人胰岛素
甘精胰岛素 1U＝0.0364mg甘精胰岛素 1USP＝0.0364mg甘精胰岛素
猪胰岛素 1IU＝0.0345mg猪胰岛素 1USP＝0.0345mg猪胰岛素
牛胰岛素 1IU＝0.0342mg牛胰岛素 1USP＝0.0342mg牛胰岛素
等电点为5.8至8.5的基础胰岛素应理解为意指在pH 7下不溶且在标准糖尿病模型中的作用持续时间为8至24小时或更长的胰岛素。
这些等电点为5.8至8.5的基础胰岛素是重组胰岛素，其一级结构主要通过引入碱性氨基酸(例如精氨酸或赖氨酸)进行修饰。它们例如描述于以下专利、专利申请或出版物中：WO 2003/053339、WO 2004/096854、 US 5,656,722和US 6,100,376，其内容通过引用并入本文。
在一个实施方案中，等电点为5.8至8.5的基础胰岛素是甘精胰岛素。甘精胰岛素由SANOFI以商品名(100U/mL)或(300 U/mL)销售。
在一个实施方案中，等电点为5.8至8.5的基础胰岛素是生物仿制药甘精胰岛素。
生物仿制药甘精胰岛素处于由ELI LILLY以商品名或销售的过程中。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40至500U/mL的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含100U/mL(或约3.6 mg/mL)的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含150U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含200U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含225U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含250U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含300U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含400U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含500U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素。
在一个实施方案中，等电点为5.8至8.5的基础胰岛素与共聚氨基酸之间的重量比或共聚氨基酸/基础胰岛素为0.2至8。
在一个实施方案中，重量比为0.2至6。
在一个实施方案中，重量比为0.2至5。
在一个实施方案中，重量比为0.2至4。
在一个实施方案中，重量比为0.2至3。
在一个实施方案中，重量比为0.2至2。
在一个实施方案中，重量比为0.2至1。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多60mg/mL。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多40mg/mL。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多20mg/mL。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多10mg/mL。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多5mg/mL。
在一个实施方案中，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多2.5mg/mL。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含餐时胰岛素。餐时胰岛素在pH 7下可溶。
餐时胰岛素应理解为意指所谓的速效或“普通”胰岛素。
所谓的速效餐时胰岛素是必须响应于进餐期间蛋白质和糖类摄入所诱导的需要的胰岛素；其必须在小于30分钟内起效。
在一个实施方案中，所谓的“普通”餐时胰岛素是人胰岛素。
在一个实施方案中，餐时胰岛素是欧洲药典和美国药典中所述的重组人胰岛素。
人胰岛素例如以商品名(ELI LILLY)和(NOVO NORDISK)销售。
所谓的非常速效(快速作用)餐时胰岛素是通过重组获得的胰岛素，其一级结构被修饰以缩短其作用时间。
在一个实施方案中，所谓的非常速效(快速作用)餐时胰岛素选自包含以下的组：赖脯胰岛素谷赖胰岛素和门冬胰岛素
在一个实施方案中，餐时胰岛素是赖脯胰岛素。
在一个实施方案中，餐时胰岛素是谷赖胰岛素。
在一个实施方案中，餐时胰岛素是门冬胰岛素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共60至800U/mL 的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共100至500U/mL 的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共800U/mL的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共700U/mL的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共600U/mL的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共500U/mL的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共400U/mL的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共300U/mL的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共266U/mL的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共200U/mL的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含总共100U/mL的胰岛素，其具有餐时胰岛素和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合。
对于如上所述包含60至800U/mL的制剂，等电点为5.8至8.5的基础胰岛素与餐时胰岛素之间的比例例如以百分比表示为25/75、30/70、 40/60、50/50、60/40、63/37、70/30、75/25、80/20、83/17、90/10。然而，可使用任何其他比例。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含胃肠激素。
“胃肠激素”应理解为意指选自以下的激素：GLP-1 RA(胰高血糖素样肽-1受体激动剂)和GIP(葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽)、胃泌酸调节素(胰高血糖素原衍生物)、肽YY、胰淀素、缩胆囊素、胰多肽(PP)、食欲刺激素和肠抑肽、其类似物或衍生物和/或其可药用盐。
在一个实施方案中，胃肠激素是选自以下的GLP-1 RA类似物或衍生物：艾塞那肽(exenatide)或(ASTRA-ZENECA)、利拉鲁肽 (liraglutide)或(NOVONORDISK)、利西拉肽(lixisenatide) 或(SANOFI)、阿必鲁肽(albiglutide)或(GSK)或者杜拉鲁肽(dulaglutide)或(ELI LILLY&CO)、其类似物或衍生物及其可药用盐。
在一个实施方案中，胃肠激素是普兰林肽(pramlintide)或 (ASTRA-ZENECA)。
在一个实施方案中，胃肠激素是艾塞那肽或其类似物或衍生物及其可药用盐。
在一个实施方案中，胃肠激素是利拉鲁肽或其类似物或衍生物及其可药用盐。
在一个实施方案中，胃肠激素是利西拉肽或其类似物或衍生物及其可药用盐。
在一个实施方案中，胃肠激素是阿必鲁肽或其类似物或衍生物及其可药用盐。
在一个实施方案中，胃肠激素是杜拉鲁肽或其类似物或衍生物及其可药用盐。
在一个实施方案中，胃肠激素是普兰林肽或其类似物或衍生物及其可药用盐。
当用于提及肽或蛋白质时，“类似物”应理解为意指其中一个或更多个组成氨基酸残基已被替换成其他氨基酸残基和/或其中已消除一个或更多个组成氨基酸残基和/或其中已添加一个或更多个组成性氨基酸残基的肽或蛋白质。目前定义的类似物之可接受同源性百分比为50％。
当用于提及肽或蛋白质时，“衍生物”应理解为意指已通过参考肽或蛋白质或类似物中不存在的取代基进行化学修饰的肽或蛋白质或类似物，即已通过产生共价键以引入取代基进行修饰的肽或蛋白质。
在一个实施方案中，取代基选自脂肪链。
在一个实施方案中，胃肠激素的浓度为0.01至100mg/mL。
在一个实施方案中，艾塞那肽、其类似物或衍生物及其可药用盐的浓度为0.04至0.5mg/mL。
在一个实施方案中，利拉鲁肽、其类似物或衍生物及其可药用盐的浓度为1至10mg/mL。
在一个实施方案中，利西拉肽、其类似物或衍生物及其可药用盐的浓度为0.01至1mg/mL。
在一个实施方案中，阿必鲁肽、其类似物或衍生物及其可药用盐的浓度为5至100mg/mL。
在一个实施方案中，杜拉鲁肽、其类似物或衍生物及其可药用盐的浓度为0.1至10mg/mL。
在一个实施方案中，普兰林肽、其类似物或衍生物及其可药用盐的浓度为0.1至5mg/mL。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物通过以10/90至90/10的体积比混合等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的商业溶液和GLP-1 RA、GLP-1 RA类似物或衍生物的商业溶液产生。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含每日剂量的基础胰岛素和每日剂量的胃肠激素。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL至500U/mL 的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.05至0.5mg/mL的艾塞那肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL至500U/mL 的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及1至10mg/mL的利拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL至500U/mL 的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.01至1mg/mL的利西拉肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL至500U/mL 的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及5至100mg/mL的阿必鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL至500U/mL 的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.1至10mg/mL的杜拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含500U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.04至0.5mg/mL的艾塞那肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含500U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及1至10mg/mL的利拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含500U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.01至1mg/mL的利西拉肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含500U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及5至100mg/mL的阿必鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含500U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.1至10mg/mL的杜拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含400U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.04至0.5mg/mL的艾塞那肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含400U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及1至10mg/mL的利拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含400U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.01至1mg/mL的利西拉肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含400U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及5至100mg/mL的阿必鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含400U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.1至10mg/mL的杜拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含300U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.04至0.5mg/mL的艾塞那肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含300U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及1至10mg/mL的利拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含300U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.01至1mg/mL的利西拉肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含300U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及5至100mg/mL的阿必鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含300U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.1至10mg/mL的杜拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含225U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.04至0.5mg/mL的艾塞那肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含225U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及1至10mg/mL的利拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含225U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.01至1mg/mL的利西拉肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含225U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及5至100mg/mL的阿必鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含225U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.1至10mg/mL的杜拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含200U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.04至0.5mg/mL的艾塞那肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含200U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及1至10mg/mL的利拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含200U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.01至1mg/mL的利西拉肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含200U/mL的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及5至100mg/mL的阿必鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含200U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.1至10mg/mL的杜拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含100U/mL(或约3.6 mg/mL)的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.04至0.5mg/mL的艾塞那肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含100U/mL(或约3.6 mg/mL)的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及1至10mg/mL的利拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含100U/mL(或约3.6 mg/mL)的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.01至1mg/mL的利西拉肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含100U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及5至100mg/mL的阿必鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含100U/mL的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.1至10mg/mL的杜拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.04至0.5mg/mL的艾塞那肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及1至10mg/mL的利拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.01至1mg/mL的利西拉肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及5至100mg/mL的阿必鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含40U/mL的等电点为 5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.1至10mg/mL的杜拉鲁肽。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含浓度为0至5000μM 的锌盐。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含浓度为0至4000μM 的锌盐。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含浓度为0至3000μM 的锌盐。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含浓度为0至2000μM 的锌盐。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含浓度为0至1000μM 的锌盐。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含浓度为50至600μM 的锌盐。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含浓度为100至500μM 的锌盐。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含浓度为200至500μM 的锌盐。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含缓冲剂。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含浓度为0至100mM的缓冲剂。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含浓度为15至50mM的缓冲剂。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含选自磷酸盐缓冲剂、三 (三羟甲基氨基甲烷)和柠檬酸钠的缓冲剂。
在一个实施方案中，缓冲剂是磷酸钠。
在一个实施方案中，缓冲剂是三(三羟甲基氨基甲烷)。
在一个实施方案中，缓冲剂是柠檬酸钠。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含防腐剂。
在一个实施方案中，防腐剂选自单独或混合物形式的间甲酚和苯酚。
在一个实施方案中，防腐剂的浓度为10至50mM。
在一个实施方案中，防腐剂的浓度为10至40mM。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含表面活性剂。
在一个实施方案中，表面活性剂选自丙二醇和聚山梨酯。
根据本发明的组合物还可包含添加剂，例如张力剂。
在一个实施方案中，张力剂选自甘油、氯化钠、甘露糖醇和甘氨酸。
根据本发明的组合物还可包含符合药典并且与常规浓度下使用的胰岛素相容的所有赋形剂。
本发明还涉及根据本发明的药物制剂，其特征在于其通过干燥和/或冻干获得。
在局部和全身释放的情况下，考虑的施用方式是通过静脉内、皮下、皮内或肌肉内途径。
还考虑了透皮、经口、经鼻、经阴道、经眼、口含、经肺施用途径。
本发明还涉及pH为6.0至8.0的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素、以及餐时胰岛素。
本发明还涉及pH为6.0至8.0的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素、以及如上定义的胃肠激素。
本发明还涉及pH为6.0至8.0的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素、餐时胰岛素、以及如上定义的胃肠激素。
本发明还涉及pH为6.6至7.8的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素、以及餐时胰岛素。
本发明还涉及pH为6.6至7.8的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素、以及如上定义的胃肠激素。
本发明还涉及pH为6.6至7.8的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素、餐时胰岛素、以及如上定义的胃肠激素。
本发明还涉及pH为6.6至7.6的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素、以及餐时胰岛素。
本发明还涉及pH为6.6至7.6的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素、以及如上定义的胃肠激素。
本发明还涉及pH为6.6至7.6的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素、餐时胰岛素、以及如上定义的胃肠激素。
在一个实施方案中，单剂量制剂还包含如上定义的共聚氨基酸。
在一个实施方案中，制剂为可注射溶液的形式。
在一个实施方案中，等电点为5.8至8.5的基础胰岛素是甘精胰岛素。
在一个实施方案中，餐时胰岛素是人胰岛素。
在一个实施方案中，胰岛素如欧洲药典和美国药典中所述的重组人胰岛素。
在一个实施方案中，餐时胰岛素选自包含以下的组：赖脯胰岛素谷赖胰岛素和门冬胰岛素
在一个实施方案中，餐时胰岛素是赖脯胰岛素。
在一个实施方案中，餐时胰岛素是谷赖胰岛素。
在一个实施方案中，餐时胰岛素是门冬胰岛素。
在一个实施方案中，GLP-1 RA、GLP-1 RA类似物或衍生物选自包含以下的组：艾塞那肽利拉鲁肽利西拉肽阿必鲁肽杜拉鲁肽或一种其衍生物。
在一个实施方案中，胃肠激素是艾塞那肽。
在一个实施方案中，胃肠激素是利拉鲁肽。
在一个实施方案中，胃肠激素是利西拉肽。
在一个实施方案中，胃肠激素是阿必鲁肽。
在一个实施方案中，胃肠激素是杜拉鲁肽。
由于溶液外观的变化，可用肉眼观察到并简单地控制通过根据本发明具有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸对等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素在pH 6.0至8.0下的溶解。
由于溶液外观的变化，可用肉眼观察到并简单地控制通过根据本发明具有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸对等电点为5.8至 8.5的基础胰岛素在pH 6.6至7.8下的溶解。
此外并且同样重要的是，申请人能够证实，在根据本发明的具有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸的存在下，在pH 6.0至8.0下溶解的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素无论是单独使用还是与餐时胰岛素或胃肠激素组合都能维持其缓慢的胰岛素作用。
申请人还能够证实，在根据本发明的具有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸和等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的存在下，在pH 6.0至8.0下混合的餐时胰岛素维持其迅速的胰岛素作用。
根据本发明的组合物的制备具有以下优点：可通过以水溶液或冻干形式简单地混合等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的水溶液，以及根据本发明的具有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸来进行。如果需要，将制剂的pH调节至pH 6至8。
根据本发明的组合物的制备具有以下优点：可通过以水溶液或冻干形式简单地混合根据本发明的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的水溶液、餐时胰岛素的溶液、以及具有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸来进行。如果需要，将制剂的pH调节至pH6至8。
根据本发明的组合物的制备具有以下优点：可通过以水溶液或冻干形式简单地混合根据本发明的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的水溶液， GLP-1 RA、GLP-1 RA类似物或衍生物的溶液，以及具有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸来进行。如果需要，将制剂的pH调节至 pH 6至8。
根据本发明的组合物的制备具有以下优点：可通过以水溶液或冻干形式简单地混合根据本发明的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的水溶液，餐时胰岛素的溶液，GLP-1 RA、GLP-1 RA类似物或衍生物的溶液，以及具有羧酸根电荷和至少一个疏水性基团的共聚氨基酸来进行。如果需要，将制剂的pH调节至pH 6至8。
在一个实施方案中，在以水溶液或以冻干形式与餐时胰岛素混合之前，通过超滤浓缩基础胰岛素和共聚氨基酸的混合物。
如果需要，通过在混合物中添加这些赋形剂的浓缩溶液，用赋形剂(例如甘油、间甲酚、氯化锌和聚山梨酯)调节混合物的组成。如果需要，将制剂的pH调节至pH6至8。
图1：与施用实施例CB3j中描述的根据本发明的组合物(266U/mL， 0.8U/kg)(空心方块)相比，同时施用赖脯胰岛素(100U/mL， 0.20IU/kg)(实心圆)和甘精胰岛素(100U/mL，0.60U/kg)的基础胰岛素水平的偏差±平均值的标准偏差的平均值曲线；施用通过皮下注射对狗(n＝10)进行(横坐标：注射后时间，纵坐标：以pmol/L计的胰岛素的Δ浓度)。
图2：与施用实施例CB3j中描述的根据本发明的组合物(266U/mL， 0.8U/kg)(空心方块)相比，同时施用赖脯胰岛素(100U/mL， 0.20IU/kg)和甘精胰岛素(100U/mL，0.60U/kg)(实心圆)的血糖±平均值的标准偏差的平均值曲线；施用通过皮下注射对狗(n＝10) 进行(横坐标：注射后时间，纵坐标：以百分比计的葡萄糖水平)。
图3：与施用实施例CB3o中描述的根据本发明的组合物(空心方块) (266U/mL，0.8U/kg)相比，同时施用赖脯胰岛素(100U/mL， 0.20IU/kg)和甘精胰岛素(100U/mL，0.60U/kg)(实心圆)的基础胰岛素水平的偏差±平均值的标准偏差的平均值曲线；施用通过皮下注射对狗(n＝10)进行(横坐标：注射后时间，纵坐标：以pmol/L计的胰岛素的Δ浓度)。
图4：与施用实施例CB3o中描述的根据本发明的组合物(空心方块) (266U/mL，0.8U/kg)相比，同时施用赖脯胰岛素(100U/mL， 0.20IU/kg)和甘精胰岛素(100U/mL，0.60U/kg)(实心圆)的血糖±平均值的标准偏差的平均值曲线；施用通过皮下注射对狗(n＝10) 进行(横坐标：注射后时间，纵坐标：以百分比计的葡萄糖水平)。
图5：施用组合物CB2a(266U/mL，0.67U/kg胰岛素)(实心圆)和组合物CB2c(266U/mL，0.67U/kg胰岛素，0.125μg/kg艾塞那肽)(空心方块)之后基础胰岛素水平的偏差±平均值的标准偏差的平均值曲线；施用通过皮下注射对狗(n＝10)进行(横坐标：注射后时间，纵坐标：以pmol/L计的胰岛素的Δ浓度)。
图6：施用组合物CB2a(266U/mL，0.67U/kg胰岛素)(实心圆)和组合物CB2c(266U/mL，0.67U/kg胰岛素，0.125μg/kg艾塞那肽)(空心方块)之后以相对于基础水平的偏差百分比计的血糖±平均值的标准偏差的平均值曲线；施用通过皮下注射对狗(n＝10)进行(横坐标：注射后时间，纵坐标：以相对于基础水平的偏差百分比计的葡萄糖水平)。
图7：施用组合物CB2c(266U/mL，1U/kg胰岛素和0.19μg/kg艾塞那肽)(空心圆)以及分别且同时施用赖脯胰岛素(100U/mL， 0.25U/kg)、甘精胰岛素(100U/mL，0.75U/kg)和艾塞那肽(0.25mg/mL，0.19μg/kg)(实心圆)之后以相对于基础水平的偏差百分比计的血糖±平均值的标准偏差的平均值曲线；施用通过皮下注射对狗(n＝10)进行(横坐标：注射后时间，纵坐标：以相对于基础水平的偏差百分比计的葡萄糖水平)。
实施例
参考以下实施例，以非限制性方式更详细地描述本发明。
部分A
AA：疏水性分子的合成，其中p＝1
在接枝到共聚氨基酸上之前，基团在下表1a中通过相应的疏水性分子表示。
表1a：根据本发明合成的疏水性分子的列表和结构。
实施例AA4：分子AA4
分子A1：通过棕榈酰氯和L-脯氨酸之间的反应获得的产物。
在90分钟内将棕榈酰氯(23.0g，83.7mmol)在丙酮(167mL)中的溶液滴加至L-脯氨酸(10.6g，92.1mmol)在1N氢氧化钠水溶液(230 mL；230mmol)中的溶液。在室温下搅拌14小时后，将非均匀混合物冷却至0℃，然后通过烧结过滤器过滤以得到白色固体，将其用水(2×100 mL)洗涤，然后用二异丙醚(100mL)洗涤。将固体减压干燥。然后将固体在200mL水中回流溶解，然后添加8mL 37％盐酸溶液直至获得pH 为1。然后将乳白色反应介质冷却至0℃。将所得沉淀物通过烧结过滤器过滤，然后用水(5×50mL)洗涤直至获得中性pH的滤液，然后将其在 50℃下在真空烘箱中干燥过夜。将产物通过在二异丙醚中重结晶纯化。获得白色固体。
产率：22.7g(77％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(3H)；1.19-1.45(24H)；1.58-1.74(2H)；1.88-2.14(3H)；2.15-2.54 (3H)；3.47(1H)；3.58(1H)；4.41(0.1H)；4.61(0.9H)6.60-8.60(1H).
分子A2：通过分子A1和Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷胺之间的反应获得的产物。在室温下将N，N-二异丙基乙胺(DIPEA)(4.1g，31.8 mmol)、1-羟基苯并三唑(HOBt)(2.2g，16.4mmol)、然后N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺(EDC)(3.2g，16.6mmol)依次添加至分子 A1(4.5g，12.7mmol)在90mL氯仿中的溶液。在室温下搅拌15分钟后，添加Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷胺(4.5g，14.0mmol)在5mL 氯仿中的溶液。在室温下搅拌18小时后，添加0.1N HCl溶液(100mL)，然后添加饱和NaCl溶液(50mL)。分离各相，然后将有机相依次用0.1N HCl溶液/饱和NaCl(100mL/50mL)、饱和NaCl溶液(100mL)、饱和NaHCO3溶液(100mL)、然后饱和NaCl溶液(100mL)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩。通过快速色谱(甲醇，二氯甲烷) 纯化后获得黄色油状物。
产率：7.7g(92％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(3H)；1.22-1.37(24H)；1.44(9H)；1.59-1.67(2H)；1.67-2.00(6H)； 2.06-2.45(4H)；3.18-3.76(18H)；4.28(0.2H)；4.52(0.8H)；4.69-5.04(1H)；6.77(0.2H)；7.20(0.8H).
分子AA4
在0℃下，将二氧六环(29.5mL，118mmol)中的4M盐酸滴加至分子A2(7.7g，11.8mmol)在90mL二氯甲烷中的溶液。在室温下搅拌 3小时30分钟后，将溶液减压浓缩。将残余物通过快速色谱(甲醇，二氯甲烷)纯化以得到黄色油状物。与二异丙醚共蒸发并在50℃下真空干燥可获得作为盐酸盐形式的分子AA4。
产率：5.4g(76％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(3H)；1.08-1.40(24H)；1.49-1.65(2H)；1.76-2.39(10H)；3.07-3.28 (3H)；3.34-3.80(15H)；4.34(0.05H)；4.64(0.95H)；7.35(0.05H)；7.66-8.58(3.95H).
LC/MS(ESI)：556.7；(计算值([M+H]+)：556.5).
实施例AA7：分子AA7
分子A3：通过花生四烯酸与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。
在0℃下将二环己基碳二亚胺(DCC)(10.45g，50.6mmol)和N- 羟基琥珀酰亚胺(NHS)(5.83g，50.6mmol)依次添加至THF(500mL) 中的花生四烯酸溶液(15.51g，49.63mmol)。在室温下搅拌17小时后，将介质冷却至0℃持续20分钟，通过烧结过滤器过滤。将L-脯氨酸(6g，52.11mmol)、DIPEA(60.5mL)和水(50mL)添加至滤液。在室温下搅拌48小时后，将混合物用1N HCl水溶液处理至pH 1，并将所得固体通过烧结过滤器过滤，用水洗涤直至母液的pH为中性，然后真空下燥以得到淡黄色固体。通过硅胶色谱(环己烷，乙酸乙酯)纯化后，获得白色固体。
产率：10.96g(54％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(3H)；1.28(34H)；1.66(2H)；1.95-2.15(2H)；2.34(2H)；2.45(1H)； 3.47(1H)；3.56(1H)；4.60(1H).
LC/MS(ESI)：410.4；(计算值([M+H]+)：410.6).
分子A4：通过分子A3与Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷之间的反应获得的产物。
在室温下将DIPEA(9.32mL)和2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU)(9.45g，29.4mmol)添加至分子A3(10.96g，26.75mmol)在THF(135mL)中的溶液。搅拌30分钟后，添加Boc-1- 氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷(10.29g，32.11mmol)。在室温下搅拌18 小时后，减压蒸发溶剂，并将残余物用乙酸乙酯(400mL)稀释。有机相用饱和NaHCO3溶液、1N HCl水溶液、水、饱和NaCl水溶液洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱(环己烷，乙酸乙酯，甲醇)纯化以得到固化的无色油状物。获得固体。
产率：14.2g(75％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(3H)；1.24(32H)；1.43(9H)；1.57-2.00(8H)；2.10-2.45(4H)； 3.20-3.75(18H)；4.30(0.20H)；4.55(0.80H)；5.03(1H)；6.75(0.20H)；7.20(0.80H).
LC/MS(ESI)：712.8；(计算值([M+H]+)：713.1)
分子AA7
在0℃下将二氧六环(25mL)中的4N HCl添加至分子A4(14.25g，20.01mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液。在0℃下搅拌20小时并在 25℃下搅拌4小时后，将介质真空浓缩。将残余物在甲醇中溶解四次并减压蒸发以得到盐酸盐形式的分子AA7的白色固体。
产率：12.7g(98％)。
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(3H)；1.23(32H)；1.45(2H)；1.64(2H)；1.70-2.05(6H)；2.10-2.30 (2H)；2.82(2H)；3.08(2H)；3.30-3.60(14H)；4.15-4.30(1H)；7.73-8.13(4H).
LC/MS(ESI)：612.7；(计算值([M+H]+)：612.9).
AB：共聚氨基酸的合成
具有统计学接枝的共聚氨基酸(式VII或VIIa)
表1b：根据本发明合成的共聚氨基酸的列表
具有限定的接枝的共聚氨基酸(式VII或VIIb)
表1c：根据本发明合成的共聚氨基酸的列表。
实施例AB6：共聚氨基酸AB6-被分子AA7修饰的数均分子量(Mn)为 4000g/mol的聚-L-谷氨酸钠
共聚氨基酸AB6-1：相对数均分子量(Mn)为3500g/mol的聚-L-谷氨酸，源自通过己胺启动的γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐的聚合。
在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中，将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(89.9g，341mmol)在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(200mL)。然后将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至4℃，然后迅速引入己胺(2.05mL，15.5mmol)。将混合物在4℃至室温下搅拌2天。然后将反应混合物在65℃下加热2小时，冷却至室温，然后在搅拌下逐滴倾倒入二异丙醚(3L)中。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚(2×200mL) 洗涤，然后在30℃下真空下干燥以得到聚(γ-苄基-L-谷氨)酸(PBLG)。
在4℃下，将乙酸(240mL，1.37mol)中的33％氢溴酸(HBr)溶液滴加至PBLG(74.8g)在三氟乙酸(TFA，340mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚和水的1∶1 (v/v)混合物(4L)上。搅拌2小时后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚和水的1∶1(v/v)混合物(340mL) 洗涤，然后用水(340mL)洗涤。
然后通过添加10N氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将获得的固体溶解在水(1.5L)中。溶解后，通过添加水将理论浓度调节至20g/L理论值，直至获得2.1L的最终体积。
将溶液通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50μS/cm。然后浓缩共聚氨基酸溶液直至获得1.8L的最终体积。
然后将水溶液通过添加37％盐酸溶液酸化，直至pH达到2。搅拌4 小时后，过滤获得的沉淀物，用水(2×340mL)洗涤，然后在30℃下真空干燥以得到相对于聚氧乙烯(PEG)标准的数均分子量(Mn)为3500 g/mol的聚-L-谷氨酸。
共聚氨基酸AB6
将数均分子量(Mn)为3500g/mol的共聚氨基酸AB6-1(10.0g)在 30℃-40℃下溶解在DMF(420mL)中，然后保持在该温度下。平行地，将分子AA7的盐酸盐(1.47g，2.3mmol)混悬在DMF(12mL)中，并添加三乙胺(0.23g，2.3mmol)，然后在搅拌下将混合物稍微加热直至溶解完全。将NMM(7.6g，75mmol)、AA7溶液、然后2-羟基吡啶N-氧化物(HOPO，0.84g，7.5mmol)依次添加至共聚氨基酸的DMF溶液。然后将反应介质冷却至0℃，然后添加EDC(1.44g，7.5mmol)，并将介质经过2小时恢复至室温。将反应介质通过0.2mm编织过滤器过滤，并在搅拌下逐滴倾倒到3.5L含15重量％NaCl和HCl(pH 2)的水上。在添加结束时，用37％HCl溶液将pH重新调节至2，并使混悬液静置过夜。通过过滤收集沉淀物，然后用100mL水冲洗。通过在搅拌下缓慢添加1N NaOH水溶液直至pH为7，将获得的白色固体溶解在500mL水中，然后通过0.45μm过滤器过滤溶液。获得的澄清溶液通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50μS/cm。将溶液通过0.2 μm过滤器过滤并储存在2-8℃。
干提取物：21.6mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：20。
基于1H NMR：i＝0.025。
计算出的共聚氨基酸AB6的平均分子量为3369g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝4000g/mol。
实施例AB7：共聚氨基酸AB7-在其一端被分子AA7的乙酰基封端的数均分子量(Mn)为3300g/mol的聚-L-谷氨酸钠
共聚氨基酸AB7-1：相对数均分子量(Mn)为3600mol且DP为21 的聚-L-谷氨酸，源自通过己胺引发的γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐的聚合，并在其一端以乙酰基封端。
在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中，将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐 (Glu(OBn)-NCA，100.0g，380mmol)在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF中(225mL)。然后将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至4℃，然后迅速引入己胺(1.78g，17mmol)。将混合物在4℃至室温下搅拌2天，然后在二异丙醚(3.4L)中沉淀。通过过滤回收沉淀物，用二异丙醚(225mL)洗涤两次，然后干燥以得到白色固体，将其溶解在 450mL THF中。将DIPEA(31mL，176mmol)，然后乙酸酐(17mL， 176mmol)依次添加至该溶液中。在室温下搅拌一夜后，在搅拌下将溶液缓慢倾倒入二异丙醚(3L)中。搅拌1小时后，过滤沉淀物，用二异丙醚(250mL)洗涤两次，然后在30℃下真空干燥以得到在其一端以乙酰基封端的聚(γ-苄基-L-谷氨)酸。
在4℃下将乙酸(235mL)中的33％氢溴酸(HBr)溶液滴加至三氟乙酸(TFA，335mL)中的上述共聚氨基酸(72g)的溶液。将混合物在室温下搅拌3小时30分钟，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚和水的1∶1 (v/v)混合物(4L)上。搅拌2小时后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚和水的1∶1(v/v)混合物(340mL) 洗涤，然后用水(340mL)洗涤。
然后通过添加10N氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将获得的固体溶解在水(1.5L)中。溶解后，通过添加水将溶液稀释，直至获得2.1L的最终体积。将溶液通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50μS/cm。然后浓缩共聚氨基酸溶液直至获得1.8L的最终体积。
然后将水溶液通过添加37％盐酸溶液酸化，直至pH达到2。搅拌4 小时后，过滤获得的沉淀物，用水(330mL)洗涤，然后在30℃下真空干燥以得到相对于聚氧乙烯标准(PEG)的数均分子量(Mn)为3600g/mol 且平均聚合度为21的聚-L-谷氨酸。
共聚氨基酸AB7
通过将与用于制备共聚氨基酸AB6类似的方法应用于分子AA7的盐酸盐(1.43g，2.2mmol)和共聚氨基酸AB7-1(10.0g)，获得被分子AA7 修饰的聚-L-谷氨酸钠盐。
干提取物：24.3mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：21。
基于1H NMR：i＝0.03。
计算出的共聚氨基酸AB7的平均分子量为3677g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3300g/mol。
实施例AB8：共聚氨基酸AB8-被分子AA7修饰的数均分子量(Mn)为 3600g/mol的聚-L-谷氨酸钠。
共聚氨基酸AB8-1：数均分子量(Mn)为3800g/mol的聚-L-谷氨酸，源自通过氨引发的γ-甲基-L-谷氨酸N-羧酸酐的聚合。
通过将与专利申请FR-A-2 801 226中描述的类似的方法应用于γ-甲基-L-谷氨酸N-羧酸酐(25.0g，133.6mmol)和二氧六环中的0.5N氨溶液(12.1mL，6.05mmol)，获得聚-L-谷氨酸。
共聚氨基酸AB8
通过将与用于制备共聚氨基酸AB6类似的方法应用于分子AA7的盐酸盐(2.1g，3.24mmol)和共聚氨基酸AB8-1(14.3g)，获得被分子AA7 修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：25.2mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：24。
基于1H NMR：i＝0.03。
计算出的共聚氨基酸AB8的平均分子量为4099g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3600g/mol。
实施例AB10：共聚氨基酸AB10-被分子AA4修饰的数均分子量(Mn) 为2600g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸AB7类似的方法应用于分子AA4的盐酸盐和通过与用于制备共聚氨基酸AB6-1类似的方法获得的聚-L-谷氨酸，获得被分子AA4修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：18.3mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：25。
基于1H NMR：i＝0.08。
计算出的共聚氨基酸AB10的平均分子量为4870g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2600g/mol。
实施例AB21：共聚氨基酸AB21-被分子AA7修饰的数均分子量(Mn) 为3400g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸AB6类似的方法应用于分子AA7的盐酸盐(2.44g，2.4mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸AB6-1类似的方法获得的聚-L-谷氨酸(10g)，获得被分子AA7修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：22.7mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：22。
基于1H NMR：i＝0.056。
计算出的共聚氨基酸AB21的平均分子量为4090g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3400g/mol。
实施例AB17：共聚氨基酸AB17-在其一端被分子AA7修饰的数均分子量(Mn)为3500g/mol的聚-L-谷氨酸钠
将分子AA7的盐酸盐(2.80g，4.32mmol)、氯仿(5mL)、分子筛以及Amberlite IRN 150离子交换树脂(1.3g)依次引入到合适的容器中。在滚转机(rouleaux)上搅拌1小时后，过滤介质并用氯仿冲洗树脂。将混合物蒸发，然后与甲苯共蒸发。将残余物溶解在无水DMF (30mL)中以直接用于聚合反应。
将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(25.0g，94.9mmol)在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(140mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至4℃，然后迅速引入如上所述制备的分子AA7的溶液。将混合物在4℃至室温下搅拌2天，然后在 65℃下加热2小时。然后将反应混合物冷却至室温，然后在搅拌下逐滴倾倒入二异丙醚(1.7L)中。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚(140mL) 洗涤两次，然后在30℃下真空干燥以获得白色固体。将固体在TFA(160 mL)中稀释，并随后在0℃下滴加乙酸(62mL，354mmol)中的33％氢溴酸(HBr)溶液。将溶液在室温下搅拌2小时，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚/水的1∶1(v/v)混合物(1.9L)上。搅拌2小时后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，依次用二异丙醚和水的1∶1 (v/v)混合物(280mL)，然后用水(140mL)洗涤。通过添加10N氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将获得的固体溶解在水(530mL)中。溶解后，通过添加水将理论浓度调节至20g/L 理论值，直至获得800mL的最终体积。将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50μS/cm。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约30g/L理论值并将pH 调节至7.0。将水溶液通过0.2μm过滤并储存在4℃。
干提取物：25.2mg/g。
DP(基于1H NMR评估)＝26因此i＝0.038。
计算出的共聚氨基酸AB17的平均分子量为4500g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3500g/mol。
实施例AB18：共聚氨基酸AB18-在其一端被分子AA7修饰的数均分子量(Mn)为3700g/mol的聚-L-谷氨酸钠。
使用分子AA7的盐酸盐(2.80g，4.32mmol)作为引发剂，通过γ-甲基-谷氨酸N-羧酸酐(25.0g，133.6mmol)的聚合获得在其一端被分子 AA7修饰的聚-L-谷氨酸钠，根据专利申请FR-A-2 801 226中描述的方法使用37％盐酸溶液进行甲酯的脱保护。
干提取物：44.3mg/g。
DP(通过1H NMR评估)＝22因此i＝0.045。
计算出的共聚氨基酸AB18的平均分子量为3896g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3700g/mol。
部分B：疏水性基团
BB：疏水性分子的合成，其中p＝2
在接枝到共聚氨基酸上之前，基团在下表1c’中以相应的疏水性分子表示。
表1c’：根据本发明合成的疏水性分子的列表。
实施例BA1：分子BA1
分子B1：通过癸酸与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。
在0℃下将二环己基碳二亚胺(DCC)(16.29g，78.96mmol)和N- 羟基琥珀酰亚胺(NHS)(9.09g，78.96mmol)依次添加至THF(520mL) 中的癸酸溶液(14.28g，82.91mmol)中。在室温下搅拌60小时后，将混合物冷却至0℃持续20分钟，通过烧结过滤器过滤。将L-脯氨酸(10g， 86.86mmol)、二异丙基乙胺(DIPEA)(68.8mL)和水(60mL)添加至滤液。在室温下搅拌24小时后，将介质用水(300mL)稀释。水相用乙酸乙酯(2×250mL)洗涤，用1N HCl水溶液酸化至pH～1，然后用二氯甲烷(3×150mL)萃取。将合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，残余物通过硅胶色谱(环己烷，乙酸乙酯)纯化。
产率：14.6g(69％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.87(3H)；1.26(12H)；1.65(2H)；2.02(3H)；2.34(2H)；2.41(1H)；3.48 (1H)；3.56(1H)；4.58(1H).
LC/MS(ESI)：270.2；(计算值([M+H]+)：270.4).
分子B2：通过分子B1与L-赖氨酸之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B1类似的方法应用于分子B1(14.57g，54.07 mmol)和L-赖氨酸(4.15g，28.39mmol)，获得黄色油状物。
产率：16.4g(93％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(6H)；1.26(24H)；1.35-1.65(8H)；1.85-2.35(12H)；2.53(0.2H)；2.90 (0.8H)；3.45-3.75(5H)；4.50-4.70(3H)；7.82(1H).
LC/MS(ESI)：649.6；(计算值([M+H]+)：649.9).
分子B3：通过分子B2与Boc-乙二胺基之间的反应获得的产物。
在室温下将DIPEA(8.80mL)和2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU，8.52g，26.54mmol)添加至分子B2(16.4g， 25.27mmol)在THF(170mL)中的溶液中。搅拌30分钟后，添加Boc- 乙二胺(4.45g，27.8mmol)。在室温下搅拌2小时后，减压蒸发溶剂，并将残余物用乙酸乙酯(400mL)稀释。将有机相用水(250mL)、饱和 NaHCO3水溶液(250mL)、1N HCl水溶液(250mL)、饱和NaCl水溶液(250mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。过滤并真空浓缩后，将获得的残余物用硅胶色谱(乙酸乙酯，甲醇)纯化以得到无色油状物。
产率：12.8g(64％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.87(6H)；1.25-1.60(42H)；1.80-2.05(4H)；2.15-2.45(9H)；3.10-3.75 (10H)；4.30(1H)；4.50(2H)；5.50(0.6H)；5.89(0.2H)；6.15(0.2H)；7.03(1H)；7.47(1H).
LC/MS(ESI)：791.8；(计算值([M+H]+)：792.1).
分子BA1
在5℃下将4N HCl的二氧六环溶液(20.2mL)添加至分子B3(12.78 g，16.15mmol)在二氯甲烷(110mL)中的溶液中。在5℃下搅拌20小时后，将介质真空浓缩。将获得的残余物溶解在甲醇并真空蒸发，重复该操作4次以得到盐酸盐形式的分子BA1的白色固体。
产率：11.4g(97％)。
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.25-1.50(33H)；1.57(1H)；1.70-2.40(12H)；2.82(2H)；3.00 (2H)；3.25-3.70(6H)；4.05-4.50(3H)；7.75-8.45(6H).
LC/MS(ESI)：691.6；(计算值([M+H]+)：692.0).
实施例BA2：分子BA2
分子B4：通过月桂酸与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B1类似的方法应用于月桂酸(31.83g，157.9 mmol)和L-脯氨酸(20g，173.7mmol)，获得黄色油状物。
产率：34.3g(73％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.87(3H)；1.26(16H)；1.70(2H)；1.90-2.10(3H)；2.35(2H)；2.49(1H)； 3.48(1H)；3.56(1H)；4.60(1H).
LC/MS(ESI)：298.2；(计算值([M+H]+)：298.4).
分子B5：通过分子B4与L-赖氨酸之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B1类似的方法应用于分子B4(33.72g，113.36 mmol)和L-赖氨酸(8.70g，59.51mmol)，获得白色固体。
产率：26.2g(66％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(6H)；1.26(32H)；1.35-1.65(8H)；1.85-2.35(15H)；2.87(1H)； 3.40-3.75(5H)；4.50-4.75(3H)；7.87(1H).
LC/MS(ESI)：705.6；(计算值([M+H]+)：706.0).
分子B6：通过Boc-乙二胺与分子B5之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B3类似的方法应用于分子B5(25.74g，36.51 mmol)和Boc-乙二胺(6.43g，40.16mmol)，获得无色油状物。
产率：30.9g(定量)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(6H)；1.35-1.65(50H)；1.85-2.35(13H)；3.05-3.75(10H)；4.25-4.65 (3H)；5.50(0.4H)；5.88(0.2H)；6.16(0.2H)；7.08(1H)；7.26(1H)；7.49(0.2H).
LC/MS(ESI)：847.8；(计算值([M+H]+)：848.2).
分子BA2
通过将与用于制备分子BA1类似的方法应用于分子B6(30.9g，36.47 mmol)，将在真空浓缩后获得的残余物溶解在甲醇中并真空蒸发，该操作重复4次以在减压干燥后得到盐酸盐形式的分子BA2的白色固体。
产率：27.65g(97％)。
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.10-2.40(54H)；2.75-3.15(4H)；3.25-3.60(6H)；4.05-4.50 (3H)；7.50-8.50(6H).
LC/MS(ESI)：747.6；(计算值([M+H]+)：748.1).
实施例BA3：分子BA3
分子B7：通过豆蔻酸与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B1类似的方法应用于豆蔻酸(18.93g，82.91 mmol)和L-脯氨酸(10g，86.86mmol)，获得淡黄色油状物。
产率：20g(78％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(3H)；1.28(20H)；1.70(2H)；1.90-2.10(3H)；2.36(2H)；2.51(1H)； 3.47(1H)；3.56(1H)；4.61(1H).
LC/MS(ESI)：326.2；(计算值([M+H]+)：326.6).
分子B8：通过分子B7与L-赖氨酸之间的反应获得的产物
通过将与用于制备分子B1类似的方法应用于分子B7(20.02g，61.5 mmol)和L-赖氨酸(4.72g，32.29mmol)，获得白色固体。
产率：12.3g(53％)。
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.26(40H)；1.35-1.50(6H)；1.50-2.10(10H)；2.10-2.25(4H)； 3.01(2H)；3.31-3.55(4H)；4.10-4.40(3H)；7.68(0.6H)；7.97(1H)；8.27(0.4H)；12.50(1H).
LC/MS(ESI)：761.8；(计算值([M+H]+)：762.1).
分子B9：通过Boc-乙二胺与分子B8之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B3类似的方法应用于分子B8(12g，15.77 mmol)和Boc-乙二胺(3.03g，18.92mmol)，通过硅胶柱柱色谱(乙酸乙酯，甲醇)纯化后，获得无色油状物。
产率：12.5g(88％)。
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.20-1.55(55H)；1.50-2.25(14H)；2.95-3.10(6H)；3.31-3.55 (4H)；4.10-4.40(3H)；6.74(1H)；7.60-8.25(3H).
LC/MS(ESI)：904.1；(计算值([M+H]+)：904.3).
分子BA3
在将与用于制备分子分子BA1类似的方法应用于分子B9(12.5g， 13.84mmol)之后，将在真空浓缩后获得的残余物溶解在甲醇中并真空蒸发，该操作重复4次以在减压干燥后得到盐酸盐形式的分子BA3的白色固体。
产率：9.2g(79％)。
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.10-1.65(48H)；1.70-2.35(12H)；2.85(2H)；3.01(2H)； 3.25-3.65(6H)；4.10-4.50(3H)；7.70-8.40(6H).
LC/MS(ESI)：803.9；(计算值([M+H]+)：804.2).
实施例BA4：分子BA4
分子B10：通过分子B8与Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B3类似的方法应用于分子B8(29.80g，39.15 mmol)和Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷(15.05g，49.96mmol)，获得浓稠的无色油状物。
产率：25.3g(61％)。
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.25-2.35(75H)；2.85-3.20(6H)；3.25-3.65(16H)；4.10-4.45 (3H)；6.38(0.1H)；6.72(0.9H)；7.50-8.25(3H).
LC/MS(ESI)：1064.2；(计算值([M+H]+)：1064.5).
分子BA4
在将与用于制备分子BA1类似的方法应用于分子B10(25.3g，23.8 mmol)之后，将在真空浓缩后获得的残余物溶解在甲醇中并真空蒸发，重复该操作4次以在减压干燥后得到盐酸盐形式的分子BA4的白色固体。
产率：20.02g(84％)。
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.15-2.35(66H)；2.80-3.20(6H)；3.30-3.65(16H)；4.10-4.45 (3H)；7.55-8.60(6H).
LC/MS(ESI)：964.9；(计算值([M+H]+)：964.6).
分子B12：通过分子A1与L-赖氨酸之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B1类似的方法应用于分子A1(19.10g，54.02 mmol)和L-赖氨酸(4.15g，28.36mmol)，在将反应介质减压浓缩后获得油状残余物。将该残余物在水(150mL)中稀释，用乙酸乙酯(2×75mL) 洗涤，然后通过缓慢添加6N HCl将水相酸化至pH1。将产物用二氯甲烷萃取3次，有机相用Na2SO4干燥，然后过滤并减压浓缩以得到11.2g黄色油状残余物。平行地，将先前的乙酸乙酯有机相用2N HCl水溶液(2×75 mL)、饱和NaCl水溶液(75mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到10.2g黄色油状残余物。通过将这些残余物中的每一种在丙酮中重结晶，获得白色残余物。
产率：11.83克(54％)
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.87(6H)；1.06-2.44(70H)；2.78-2.96(1H)；3.35-3.75(5H)；4.28-4.43(0.1H)； 4.43-4.52(0.2H)；4.52-4.6l(1.8H)；4.61-4.75(0.9H)；7.74-8.02(2H).
LC/MS(ESI)：818.0；(计算值([M+H]+)：818.7).
分子B13：通过分子B12与Boc-乙二胺之间的偶联获得的产物。
在室温下，将DIPEA(3.42g，26.43mmol)添加至分子B12(18.00g， 22.02mmol)在THF(110mL)中的溶液。将反应介质冷却至0℃，然后依次添加HOBt(337mg，2.20mmol)、EDC(4.64g，24.23mmol)、以及随后Boc-乙二胺(4.23g，26.43mmol)。将反应混合物在在0℃下搅拌 1小时，然后在室温下搅拌24小时并减压浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯(250mL)和二氯甲烷(40mL)中，有机相用1N HCl水溶液(2×125 mL)、饱和NaCl水溶液(2×125mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。在乙腈中重结晶两次后获得白色固体。
产率：17.5g(83％)
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.15-2.29(79H)；2.92-3.12(6H)；3.30-3.59(4H)；4.06-4.13 (0.65H)；4.16-4.29(2H)；4.38-4.42(0.35H)；6.71-6.76(1H)；7.60-7.69(1.3H)；7.76-7.81(0.65H)；7.93-7.97 (0.35H)；8.00-8.04(0.35H)；8.10-8.17(0.35H).
LC/MS(ESI)：960.4；(计算值([M+H]+)：960.8).
分子BA5
通过将与用于制备分子BA1类似的方法应用于分子B13(24.4g，25.43 mmol)，将在真空浓缩后获得的残余物溶解在二氯甲烷(150mL)中，有机相用2M氢氧化钠水溶液(90mL)洗涤2次。添加乙腈(120mL)，通过减压浓缩除去二氯甲烷。然后将介质静置72小时，过滤并用乙腈冲洗，然后减压干燥后，获得白色固体。该操作重复4次。
产率：14.28g(65％)
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.06-2.32(70H)；2.53-2.63(2H)；2.89-3.61(10H)；4.04-4.43 (3H)；7.55-7.62(0.65H)；7.65-7.72(0.65H)；7.80(0.65H)；7.91(0.35H)；8.03(0.35H)；8.14-8.23(0.35H).
LC/MS(ESI)：860.0；(计算值([M+H]+)：860.8).
实施例BA6：分子BA6
分子B14：通过分子B7与2，3-二氨基丙酸之间的偶联获得的产物
通过将与用于制备分子B1类似的方法应用于分子B7(80.00g，245.78 mmol)和2，3-二氨基丙酸二盐酸盐(22.84g，129.04mmol)，在乙腈中重结晶后获得白色固体。
产率：69克(78％)
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.86(6H)；1.08-1.38(40H)；1.40-1.55(4H)；1.68-2.30(12H)；3.16-3.66 (6H)；4.20-4.39(3H)；7.67-8.31(2H)；12.70(1H).
LC/MS(ESI)：719.4；741.5；(计算值([M+H]+)：719.6；([M+Na]+)：741.6).
分子B15：通过B14与Boc-乙二胺之间的偶联获得的产物
通过将与用于制备分子B13类似的方法应用于分子B14(32.00g， 44.50mmol)在二氯甲烷中的溶液和Boc-乙二胺(8.56g，53.40mmol)，在通过硅胶色谱(乙酸乙酯，甲醇)纯化后获得无色油状物。
产率：24.5g(64％)
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.16-2.42(65H)；2.89-3.14(4H)；3.17-3.66(6H)；4.11-4.43 (3H)；6.77(1H)；7.38-8.23(3H).
LC/MS(ESI)：861.7；(计算值([M+H]+)：861.7).
分子BA6
通过将与用于制备分子BA5类似的方法应用于分子B15(24.50g， 28.45mmol)，在乙腈中重结晶后获得白色固体。
产率：19.7g(91％)
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.10-2.40(58H)；2.51-2.62(2H)；2.90-3.16(2H)；3.16-3.67 (6H)；4.04-4.47(3H)；7.33-8.27(3H).
LC/MS(ESI)：761.5；(计算值([M+H]+)：761.6).
实施例BA7：分子BA7
分子B16：通过N-(叔丁氧基羰基-1，6-二氨基己烷与分子B8之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B13类似的方法应用于分子B8(10g，13.14 mmol)和二氯甲烷中的N-(叔丁氧基羰基-1，6-二氨基己烷(3.41g，15.77 mmol)，在乙腈中重结晶后获得白色固体。
产率：10.7g(85％)
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(6H)；1.17-2.40(79H)；3.00-3.71(10H)；4.26-4.58(3H)；4.67(1H)； 6.74(1H)；7.34-7.49(2H).
LC/MS(ESI)：969.9；(计算值([M+H]+)：959.8).。
分子BA7
在将与用于制备分子BA1类似的方法应用于分子B16(10.5g，10.94 mmol)之后，将2N NaOH水溶液滴加至冷却至0℃的反应。水相用二氯甲烷萃取，然后有机相用5％NaCl水溶液洗涤3次。用Na2SO4干燥后，过滤有机相，真空浓缩，并将残余物在乙腈中重结晶。
产率：5.4g(58％)。
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.88(6H)；1.19-2.40(72H)；2.67(2H)；3.03-3.70(8H)；4.26-4.57(3H)； 6.71(1H)；7.39-7.49(2H).
LC/MS(ESI)：859.8；(计算值([M+H]+)：859.7).
BB：共聚氨基酸的合成
具有统计学接枝的共聚氨基酸(式VII或VIIa)
表1d：根据本发明合成的共聚氨基酸的列表
具有限定的接枝的共聚氨基酸(式VII或VIIb)
表1e：根据本发明合成的共聚氨基酸的列表。
实施例BB1：共聚氨基酸BB1-被分子BA2修饰的数均分子量(Mn)为 2400g/mol的聚-L-谷氨酸钠
共聚氨基酸BB1-1：相对数均分子量(Mn)为3860g/mol的聚-L-谷氨酸，源自由己胺引发的γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐的聚合。
在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中，将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐 (90.0g，342mmol)真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(465mL)。然后将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至4℃，然后迅速引入己胺(1.8mL，14mmol)。将混合物在4℃至室温下搅拌2天。然后将反应介质在65℃加热4小时，冷却至室温，然后在搅拌下逐滴倾倒入冷的二异丙醚(6L)中。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚(500mL，然后250mL)洗涤，然后在30℃下真空干燥以得到聚(γ-苄基-L-谷氨酸) (PBLG)。
在4℃下，将乙酸(135mL，0.77mol)中的33％氢溴酸(HBr)溶液滴加至PBLG(42.1g)在三氟乙酸(TFA，325mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚和水的1∶1 (v/v)混合物(1.6L)上。搅拌1小时30分钟后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚和水的1∶1(v/v)混合物(200 mL)洗涤。
然后通过添加10N氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将所获得的固体溶解在水(1L)中。溶解后，通过添加水将理论浓度调节至25g/L理论值，直至获得1.5L的最终体积。
将溶液通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50μS/cm。
然后将水溶液通过添加37％盐酸溶液酸化，直至pH达到2。搅拌4 小时后，过滤获得的沉淀物，然后在30℃下真空干燥以得到相对于聚氧乙烯(PEG)标准的数均分子量(Mn)为3860g/mol的聚-L-谷氨酸。
共聚氨基酸BB1
将共聚氨基酸BB1-1(10.0g)在30-40℃下溶解在DMF(700mL) 中，然后冷却至0℃。将分子BA2的盐酸盐(2.95g，3.8mmol)混悬于 DMF(45mL)中，并然后向该混悬液添加三乙胺(0.39g，3.8mmol)，然后在搅拌下将混合物稍微加热直至溶解完全。在0℃下将DMF(14mL)中的N-甲基吗啉(NMM，7.6g，75mmol)和氯甲酸乙酯(ECF，8.1g， 75mmol)添加至共聚氨基酸的溶液。在0℃下10分钟后，添加BA2溶液，并将介质在30℃下保持1小时。将反应介质逐滴倾倒到6L含15重量％氯化钠和HCl(pH 2)的水上，然后静置过夜。通过过滤收集沉淀物，用 pH2的氯化钠溶液(1L)洗涤，并真空干燥约1小时。将获得的白色固体溶解在水(600mL)中，并通过缓慢添加1N NaOH水溶液将pH调节至7。通过添加水将体积调节至700mL。在通过0.45μm过滤器过滤后，将获得的澄清溶液通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50μS/cm。放出后，将溶液通过0.2μm过滤器过滤并储存在2-8℃。
干提取物：19.7mg/g。
DP(基于1H NMR评估评估)：23。
基于1H NMR评估：i＝0.05。
计算出的共聚氨基酸BB1的平均分子量为4350g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2400g/mol。
实施例BB2：共聚氨基酸BB2-被分子BA2修饰的数均分子量(Mn)为 4900g/mol的聚-L-谷氨酸钠
将通过与用于制备共聚氨基酸BB1-1类似的方法获得的数均分子量 (Mn)为4100g/mol的聚-L-谷氨酸(5.0g)在30-40℃下溶解在DMF(205 mL)中，然后保持在该温度。平行地，将分子BA2的盐酸盐(1.44g， 1.84mmol)混悬在DMF(10mL)中，并添加三乙胺(0.19g，1.84mmol)，然后在搅拌下将混合物稍微加热直至溶解完全。将NMM(3.7g，36.7mmol)、分子BA2的溶液、然后2-羟基吡啶N-氧化物(HOPO，0.31g， 2.76mmol)依次添加至共聚氨基酸的DMF溶液中。然后将反应介质冷却至0℃，然后添加EDC(0.53g，2.76mmol)，并使介质的温度经过3小时的时间升至室温。在搅拌下将反应介质逐滴倾倒到1.55L含有15重量％ NaCl和HCl(pH 2)的水上。在添加结束时，用1N HCl溶液将pH重新调节至2，并使混悬液静置过夜。通过过滤收集沉淀物，然后用100mL 水冲洗。通过在搅拌下缓慢添加1N NaOH水溶液直至pH为7，将获得的白色固体溶解在200mL水中，然后通过0.45μm过滤器过滤溶液。获得的澄清溶液通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50μS/cm。获得的溶液通过0.2μm过滤器过滤并储存在2-8℃。
干提取物：16.3mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：21。
基于1H NMR：li＝0.047。
计算出的共聚氨基酸BB2的平均分子量为3932g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝4900g/mol。
实施例BB3：共聚氨基酸BB3-被分子BA2修饰的数均分子量(Mn)为 6400g/mol的聚-L-谷氨酸钠
共聚氨基酸BB3-1：数均分子量(Mn)为17500g/mol的聚-L-谷氨酸，源自由L-亮氨酸引发的γ-甲基-L-谷氨酸N-羧酸酐的聚合。
使用L-亮氨酸作为引发剂，通过γ-甲基-谷氨酸N-羧酸酐的聚合获得相对于聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)标准的数均重量(Mn)为17500g/mol 的聚-L-谷氨酸，根据专利申请FR-A-2 801 226中描述的方法使用37％盐酸溶液进行甲酯的脱保护。
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA2的盐酸盐(3.23g，4.1mmol)和共聚氨基酸BB3-1(11g)，获得被分子BA2 修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：27.5mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：34。
基于1H NMR：li＝0.049
计算出的共聚氨基酸BB3的平均分子量为6405g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝6400g/mol。
实施例BB4：共聚氨基酸BB4-被分子BA2修饰的数均分子量(Mn)为 10500g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA2的盐酸盐(5g，6.35mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB1-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝10800g/mol的聚-L-谷氨酸(21.7g)，获得被分子BA2修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：28.2mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：65。
基于1H NMR：i＝0.04。
计算出的共聚氨基酸BB4的平均分子量为11721g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝10500g/mol。
实施例BB5：共聚氨基酸BB5-在其一端以乙酰基封端并被分子BA2修饰的数均分子量(Mn)为3600g/mol的聚-L-谷氨酸钠
共聚氨基酸BB5-1：Mn为3700g/mol的聚-L-谷氨酸，源自由己胺引发的γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐的聚合，并且在其一端以乙酰基封端。
将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(100.0g，380mmol)在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(250mL)。然后将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至4℃，然后迅速引入己胺(2.3mL，17mmol)。将混合物在4℃至室温下搅拌2天，然后在二异丙醚(3.4L)中沉淀。通过过滤回收沉淀物，用二异丙醚(225mL)洗涤两次，然后干燥以获得白色固体，将其溶解在450mL THF中。依次向该溶液添加N，N-二异丙基乙胺(DIPEA，31mL，176mmol)、然后乙酸酐(17mL，176mmol)。在室温下搅拌过夜后，在搅拌下经过30分钟时间将溶液缓慢倒入二异丙醚(3L)中。搅拌1小时后，过滤沉淀物，用二异丙醚(200mL)洗涤两次，然后在30℃下真空干燥以获得在其一端以乙酰基封端的聚(γ-苄基-L-谷氨酸)。
在4℃下将乙酸(235mL，1.34mol)中的33％氢溴酸(HBr)溶液滴加至封端的共聚氨基酸(72g)在三氟乙酸(TFA，335mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌3小时30分钟，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚和水的1∶1(v/v)混合物(4L)上。搅拌2小时后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚和水的1∶1(v/v)混合物 (340mL)洗涤，然后用水(340mL)洗涤。然后通过添加10N氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将获得的固体溶解在水(1.5L)中。溶解后，通过添加水将理论浓度调节至20g/L理论值，直至获得2.1L的最终体积。将溶液通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于 50μS/cm。然后浓缩共聚氨基酸溶液直至获得1.8L的最终体积。然后将水溶液通过添加37％盐酸溶液酸化，直至pH达到2。搅拌4小时后，过滤获得的沉淀物，用水(330mL)洗涤，然后在30℃下真空干燥以得到相对于聚氧乙烯(PEG)标准的数均分子量(Mn)为3700g/g的聚-L-谷氨酸。
共聚氨基酸BB5
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA2的盐酸盐(6.92g，8.8mmol)和共聚氨基酸BB5-1(30.0g)，获得在其一端以乙酰基封端并被分子BA2修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：29.4mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：23。
基于1H NMR：i＝0.042。
计算出的共聚氨基酸BB5的平均分子量为4302g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3600g/mol。
实施例BB6：共聚氨基酸BB6-在其一端以乙酰基封端并被分子BA2修饰的数均分子量(Mn)为4100g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA2的盐酸盐(5.8g，7.4mmol)和用氨代替己胺获得的数据分子量Mn＝3800g/mol 的聚-L-谷氨酸(25g)，获得在其一端以乙酰基封端并被分子BA2修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：27.6mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：24。
基于1H NMR：i＝0.04。
计算出的共聚氨基酸BB6的平均分子量为4387g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝4100g/mol。
实施例BB7：共聚氨基酸BB7-被分子BA2修饰的数均分子量(Mn)为 4200g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA2的盐酸盐(7.07g，9.0mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB1-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝3600g/mol的聚-L-谷氨酸(30.0g)，获得被分子BA2修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：28.3mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：22。
基于1H NMR：i＝0.042。
计算出的共聚氨基酸BB7的平均分子量为4039g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝4200g/mol。
实施例BB8：共聚氨基酸BB8-被分子BA2修饰的数均分子量(Mn)为 5200g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA2的盐酸盐(0.85g，1.1mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB1-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝4100g/mol的聚-L-谷氨酸(5.0g)，获得被分子BA2修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：28.6mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：21。
基于1H NMR：i＝0.026。
计算出的共聚氨基酸BB8的平均分子量为3620g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝5200g/mol。
实施例BB9：共聚氨基酸BB9-被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为 4700g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA3的盐酸盐(3.05g，3.6mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB1-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝4100g/mol的聚-L-谷氨酸(10.0g)，获得被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：28.6mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：26。
基于1H NMR：i＝0.05。
计算出的共聚氨基酸BB9的平均分子量为4982g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝4700g/mol。
实施例BB10：共聚氨基酸BB10-被分子BA3修饰的数均分子量(Mn) 为4200g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA3的盐酸盐(1.90g，2.3mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB1-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝3500g/mol的聚-L-谷氨酸(10.0g)，获得被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：25.9mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：22。
基于1H NMR：i＝0.029。
计算出的共聚氨基酸BB10的平均分子量为3872g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝4200g/mol。
实施例BB11：共聚氨基酸BB11-在其一端以乙酰基封端并被分子BA4 修饰的数均分子量(Mn)为3900g/mol聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA4的盐酸盐(2.21g，2.2mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB5-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝3700g/mol的聚-L-谷氨酸(10g)，获得在其一端以乙酰基封端并被分子BA4修饰聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：28.1mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：22。
基于1H NMR：i＝0.032。
计算出的共聚氨基酸BB11的平均分子量为4118g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3900g/mol。
实施例BB12：共聚氨基酸BB12-在其一端以乙酰基封端并被分子BA3 修饰的数均分子量(Mn)为3900g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子BA3的盐酸盐(1.9g，2.3mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB5-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝3600g/mol的聚-L-谷氨酸(10g)，获得在其一端以乙酰基封端并被分子BA3修饰聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：26.7mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：23。
基于1H NMR：i＝0.03。
计算出的共聚氨基酸BB12的平均分子量为4145g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3900g/mol。
实施例BB13：共聚氨基酸BB13-被分子BA1修饰的数均分子量(Mn) 为2800g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB1类似的方法应用于分子BA1的盐酸盐(3.65g，5mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB1-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝3600g/mol的聚-L-谷氨酸(10g)，获得被分子 BA1修饰聚-L-谷氨酸钠。
提取物：25.6mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：25。
基于1H NMR：i＝0.08。
计算出的共聚氨基酸BB13的平均分子量为5253g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2800g/mol。
实施例BB14：共聚氨基酸BB14-在其一端被分子BA2修饰的数均分子量(Mn)为4020g/mol的聚-L-谷氨酸钠
将分子BA2的盐酸盐(2.12g，2.70mmol)、氯仿(40mL)、分子筛以及Amberlite IRN 150离子交换树脂(1.5g)依次引入到合适的容器中。在滚转机上搅拌1小时后，过滤介质并用氯仿冲洗残余物。将混合物蒸发，然后与甲苯共蒸发。将残余物溶解在无水DMF(20mL) 中以直接用于聚合反应。
将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(18g，68.42mmol)在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(100mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至4℃，然后迅速引入如上所述制备的分子BA2的溶液。将混合物在4℃至室温下搅拌2天，然后在 65℃下加热2小时。然后将反应混合物冷却至室温，然后在搅拌下逐滴倾倒入二异丙醚(1.2L)中。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚(100mL) 洗涤两次，然后在30℃下真空干燥以获得白色固体。将固体在TFA(105 mL)中稀释，并随后在0℃下滴加乙酸(38mL，220mmol)中的33％氢溴酸(HBr)溶液。将溶液在室温下搅拌2小时，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚/水的1∶1(v/v)混合物(600mL)上。搅拌2小时后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，依次用二异丙醚和水的 1∶1(v/v)混合物(200mL)，然后用水(100mL)洗涤。通过添加10N 氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将获得的固体溶解在水(450mL)中。将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50 μS/cm。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约30g/L理论值并将pH调节至7.0。将水溶液通过0.2μm过滤器过滤并在4℃下储存。
干提取物：22.3mg/g。
DP(通过1H NMR评估)＝29，因此i＝0.034。
计算出的共聚氨基酸BB14的平均分子量为5089g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝4020g/mol。
实施例BB15：共聚氨基酸BB15-在其一端被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为3610g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于分子BA3的盐酸盐(3.62g，4.32mmol)和25.0g(94.97mmol)的γ-苄基-L-谷氨酸 N-羧酸酐，获得在其一端被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：26.5mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝24，因此i＝0.042。
计算出的共聚氨基酸BB15的平均分子量为4390g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3610g/mol。
实施例BB16：共聚氨基酸BB16-在其一端被分子BA4修饰的数均分子量(Mn)为3300g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于分子BA4的盐酸盐(5.70g，5.70mmol)和29.99g(113.9mmol)的γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐，获得在其一端被分子BA4修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：32.3mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝23，因此i＝0.043。
计算出的共聚氨基酸BB16的平均分子量为4399g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3300g/mol。
实施例BB17：共聚氨基酸BB17-在其一端被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为10700g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于分子BA3的盐酸盐(2.51g，3mmol)和52.7g(200mmol)的γ-苄基-L-谷氨酸N- 羧酸酐，获得在其一端被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：24.5mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝65，因此i＝0.015。
计算出的共聚氨基酸BB17的平均分子量为10585g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝10700g/mol。
实施例BB18：共聚氨基酸BB18-在其一端被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为6600g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于分子BA3的盐酸盐(2.51g，3mmol)和31.6g(120mmol)的γ-苄基-L-谷氨酸N- 羧酸酐，获得在其一端被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：27.3mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝40，因此i＝0.025。
计算出的共聚氨基酸BB18的平均分子量为6889g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝6600g/mol。
实施例BB19：共聚氨基酸BB19-在其一端被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为3400g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于分子BA3的盐酸盐(36.26g，43.2mmol)和γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(250.0g，949.7 mmol)，获得在其一端被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：22.4mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝25，因此i＝0.04。
计算出的共聚氨基酸BB19的平均分子量为4540g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3400g/mol。
实施例BB20：共聚氨基酸BB20-在其一端被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为2500g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于游离胺形式的分子BA3(1.017g，12.7mmol)和γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(5.0g，19.0 mmol)，获得在其一端被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：11.2mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝17，因此i＝0.059。
计算出的共聚氨基酸BB20的平均分子量为3332g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2500g/mol。
实施例BB21：共聚氨基酸BB21-在其一端被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为1100g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于游离胺形式的分子BA3(3.814g，4.75mmol)和γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(10.0g， 38.0mmol)，获得在其一端被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：16.1mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝9，因此i＝0.11。
计算出的共聚氨基酸BB21的平均分子量为2123g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝1100g/mol。
实施例BB22：共聚氨基酸BB22-在其一端被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为2900g/mol的聚-D-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于游离胺形式的分子BA3(2.77g，3.45mmol)和γ-苄基-D-谷氨酸N-羧酸酐(20.0g，76.0 mmol)，获得在其一端被分子BA3修饰的聚-D-谷氨酸钠。
干提取物：15.2mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝21，因此i＝0.048。
计算出的共聚氨基酸BB22的平均分子量为3936g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2900g/mol。
实施例BB23：共聚氨基酸BB23-在其一端被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为2800g/mol的D-或L-谷氨酸钠单元的无规共聚物
将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(20.0g，76.00mmol)和γ-苄基-D-谷氨酸N-羧酸酐(20.0g，76.00mmol)在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(75mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至4℃，然后迅速引入游离胺形式的分子BA3 (5.55g，6.91mmol)在氯仿(14.5mL)中的溶液。将混合物在4℃至室温下搅拌18小时，然后在65℃下加热2小时。然后将反应混合物冷却至室温，然后在搅拌下逐滴倾倒入二异丙醚(1.2L)中。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚(80mL)洗涤三次，然后在30℃下真空干燥直至获得白色固体。将固体在TFA(152mL)中稀释，并随后在0℃下滴加乙酸(106mL，220mmol)中的33％氢溴酸(HBr)溶液。将溶液在室温下搅拌3小时，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚/水的1∶1(v/v)混合物(1.84 L)上。在滴液漏斗中分离水相，并通过添加10N NaOH水溶液将pH调节至7.2。添加水(250mL)后，将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于 50μS/cm。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约25g/L，通过0.2μm过滤器过滤并在4℃下储存。
干提取物：28.2mg/g。
DP(通过1H NMR评估)＝21，因此i＝0.048。
计算出的共聚氨基酸BB23的平均分子量为3936g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2800g/mol。
实施例BB24：共聚氨基酸BB24-在其一端被分子BA3修饰的数均分子量(Mn)为2800g/mol的聚-D-谷氨酸钠和聚-L-谷氨酸钠的嵌段共聚物
将γ-苄基-D-谷氨酸N-羧酸酐(13.5g，51.3mmol)在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(52mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至0℃，然后迅速引入游离胺形式的分子BA3(3.43g，4.27mmol)在氯仿(8.6mL)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌24小时，然后添加γ-叔丁基-L-谷氨酸N-羧酸酐(13.5g，58.9mmol)在DMF(15mL)中的溶液。然后将混合物在0℃至室温下搅拌21小时，然后在65℃下加热2小时。然后将反应混合物冷却至室温，然后在搅拌下逐滴倾倒入二异丙醚(0.8L)中。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚(53mL)洗涤三次，然后在30℃下真空干燥直至获得白色固体。将固体在TFA(96mL)中稀释，并随后在0℃下滴加乙酸(68mL， 388mmol)中的33％氢溴酸(HBr)溶液。将溶液在室温下搅拌2小时，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚/水的1∶1(v/v)混合物(1.2L)上。搅拌2小时后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，依次用二异丙醚和水的1∶1(v/v)混合物(100mL)、然后水(100mL)洗涤。通过添加10N氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将获得的固体溶解在水(900mL)中。将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50μS/cm。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约20g/L理论值并将 pH调节至7.0。将水溶液通过0.2μm过滤器过滤并在4℃下储存。
干提取物：23.9mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝25，因此i＝0.04
计算出的共聚氨基酸BB24的平均分子量为4541g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2800g/mol。
实施例BB25：共聚氨基酸BB25-在其一端被分子BA5修饰的数均分子量(Mn)为2800g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于游离胺形式的分子BA5(1.70g，1.98mmol)和γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(11.46g， 43.5mmol)，获得在其一端被分子BA5修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：19.8mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝23，因此i＝0.043
计算出的共聚氨基酸BB25的平均分子量为4295g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2800g/mol。
实施例BB26：共聚氨基酸BB26-在其一端被分子BA6修饰的数均分子量(Mn)为2900g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于游离胺形式的分子BA6(3.05g，4.01mmol)和γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(22.78g， 86.5mmol)，获得在其一端被分子BA6修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：16.9mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝21，因此i＝0.048
计算出的共聚氨基酸BB26的平均分子量为3894g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2900g/mol。
实施例BB27：共聚氨基酸BB27-在其一端被分子BA3修饰并且被BA3 修饰的数均分子量(Mn)为2300g/mol的聚-L-谷氨酸钠
共聚氨基酸BB27-1：在其一端被BA3分子修饰并且在另一端被氧脯氨酸封端的数均分子量(Mn)为3600g/mol的聚-L-谷氨酸
将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(122.58g，466mmol)在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(220mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至-10℃，然后迅速引入游离胺形式的分子BA3(17.08g，21.3mmol)在氯仿(40mL)中的溶液。将混合物在0℃至室温下搅拌2天，然后在65℃下加热4小时。然后将反应混合物冷却至25℃，然后添加氧脯氨酸(13.66g，105.8mmol)、HOBt (2.35g，15.3mmol)和EDC(20.28g，105.8mmol)。在25℃下搅拌24 小时后，将溶液真空浓缩以除去氯仿和50％的DMF。然后将反应介质在 55℃下加热，并在1小时内引入1150mL甲醇。然后将反应混合物冷却至0℃。18小时后，通过过滤回收白色沉淀物，用270mL二异丙醚洗涤三次，然后在30℃下真空干燥直至获得白色固体。将固体在TFA(390mL) 中稀释，并随后在0℃下滴加乙酸(271mL，1547mmol)中33％氢溴酸 (HBr)溶液。将溶液在室温下搅拌2小时，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚/水的1∶1(v/v)混合物(970mL)上。搅拌2小时后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，依次用二异丙醚(380mL)洗涤，然后用水(380mL)洗涤两次。通过添加10N氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将获得的固体溶解在水(3.6L) 中。将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液、0.1 N NaOH溶液、0.9％NaCl溶液、磷酸盐缓冲溶液(150mM)、0.9％NaCl 溶液、然后水超滤纯化，直到渗透物的电导率小于50μS/cm。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约30g/L理论值，通过0.2μm过滤器过滤，然后通过添加37％HCl溶液在搅拌下酸化至pH 2。然后通过过滤回收沉淀物，用水洗涤两次，然后在30℃下真空干燥直至获得白色固体。
共聚氨基酸BB27
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于游离胺形式的分子BA3(1.206g，1.50mmol)和共聚氨基酸BB27-1(5.5g，33.4mmol)，获得在其一端被分子BA3修饰并且被BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：19.0mg/g
DP(基于1H NMR评估)：22
基于1H NMR：i＝0.089
计算出的共聚氨基酸BB27的平均分子量为4826g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2300g/mol。
实施例BB42：共聚氨基酸BB42-在其一端被分子B8修饰的数均分子量 (Mn)为3200g/mol的聚-L-谷氨酸钠
将DCC(0.659g，3.19mmol)和NHS(0.365g，3.17mmol)添加至分子B8(2.366g，3.11mmol)在DMF(19.5mL)中的溶液。在室温下搅拌16小时后，将溶液过滤以直接用于下面的反应。
将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(18.0g，68.4mmol)在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(40mL)。然后将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至0℃，然后迅速引入己胺(0.411mL，3.11mmol)。在0℃下搅拌30小时后，添加上面制备的分子B8的溶液。将溶液在0℃至室温下搅拌72小时，然后在搅拌下逐滴倾倒入二异丙醚(0.9L)中。通过过滤回收沉淀物，用二异丙醚(5次，100 mL)洗涤，然后在30℃下真空干燥以得到白色固体。将固体在TFA(69mL) 中稀释，然后将溶液冷却至4℃。然后滴加乙酸(48mL，0.274mol)中的 33％HBr溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚和水的1∶1(v/v)混合物(0.8L)上。搅拌2小时后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚和水的1∶1(v/v) 混合物(70mL)，然后用水(70mL)洗涤。然后通过添加10N氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将获得的固体溶解在水(0.42L)中。溶解后，通过添加水将理论浓度调节至20g/L理论值，直至获得0.63L的最终体积。将溶液通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于 50μS/cm。获得的溶液通过0.2μm过滤器过滤并储存在2-8℃。
干提取物：22.2mg/g
DP(基于1H NMR评估)：22
基于1H NMR：i＝0.045
计算出的共聚氨基酸BB42的平均分子量为4160g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3200g/mol。
实施例BB43：共聚氨基酸BB43-在其一端被分子BA3修饰并且在另一端被分子B8修饰的数均分子量(Mn)为2000g/mol的聚-L-谷氨酸钠
将DCC(0.257g，1.24mmol)和NHS(0.143g，1.24mmol)添加至分子B8(0.946g，1.24mmol)在DMF(8mL)中的溶液。在室温下搅拌16小时后，将溶液过滤以直接用于下面的反应。
将γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐(6.0g，22.8mmol)在预先在烘箱中干燥的圆底烧瓶中在真空下放置30分钟，然后引入无水DMF(14mL)。然后将混合物在氩气下搅拌直至溶解完全，冷却至0℃，然后迅速引入游离胺形式的分子BA3(0.832g，1.04mmol)在氯仿(2.0mL)中的溶液。在0℃下搅拌18小时后，添加预先制备的分子B8的溶液。将溶液在0℃至室温下搅拌22小时，然后在搅拌下逐滴倾倒入二异丙醚(0.34L)中。通过过滤回收沉淀物，用二异丙醚(7次，15mL)洗涤，然后在30℃下真空干燥以获得白色固体。将固体在TFA(23mL)中稀释，然后将溶液冷却至4℃。然后滴加乙酸(15mL，85.7mmol)中的33％HBr溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，然后在搅拌下逐滴倾倒到二异丙醚和水的 1∶1(v/v)混合物(0.28L)上。搅拌2小时后，使非均匀混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀物，用二异丙醚和水的1∶1(v/v)的混合物(24mL) 洗涤两次，然后用水(24mL)洗涤两次。然后通过添加10N氢氧化钠水溶液，然后添加1N氢氧化钠水溶液将pH调节至12，将获得的固体溶解在水(0.16L)中。30分钟后，通过缓慢添加1N HCl水溶液将pH调节至7。将溶液通过0.45μm过滤器过滤，然后通过用0.9％NaCl溶液，然后用水超滤纯化，直至渗透物的电导率小于50μS/cm。获得的溶液通过0.2μm过滤器过滤并储存在2-8℃。
干提取物：18.9mg/g
DP(基于1H NMR评估)：22
基于1H NMR：i1＝0.09
计算出的共聚氨基酸BB43的平均分子量为4871g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2000g/mol。
实施例BB44：共聚氨基酸BB44-在其一端被分子BA7修饰的数均分子量(Mn)为3300g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB14类似的方法应用于游离胺形式的分子BA7(4.45g，5.18mmol)和30.0g(113.96mmol)的γ-苄基-L-谷氨酸N-羧酸酐，获得在其一端被分子BA7修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：29.0mg/g
DP(通过1H NMR评估)＝25，因此i＝0.04
计算出的共聚氨基酸BB44的平均分子量为4597g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3300g/mol。
部分CE：反例共聚氨基酸
CEA：反例疏水性分子的合成
表1f：反例疏水性分子
实施例CEA1：分子CEA1
分子CE1：通过月桂酸与L-赖氨酸之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B1类似的方法应用于月桂酸(19.58g，97.72 mmol)和L-赖氨酸(7.5g，51.3mmol)，获得米色固体。
产率：18.8g(75％)
1H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.12-1.78(42H)；1.96-2.16(4H)；2.92-3.07(2H)；4.06-4.20 (1H)；7.70(1H)；7.95(1H)；12.40(1H).
LC/MS(ESI)：511.5；(计算值([M+H]+)：511.8).
分子CE2：通过分子CE1与Boc-乙二胺之间的反应获得的产物。
通过将与用于制备分子B3类似的方法应用于分子CE1(18.70g，36.61 mmol)，将反应介质减压浓缩后获得的残余物在乙腈/THF混合物(1/1vol.) 中研磨，过滤并用乙腈洗涤。干燥后，获得浅黄色固体。
产率：13.7g(57％)
1H NMR(CDCl3，ppm)：0.87(6H)；1.09-1.89(51H)；2.08-2.31(4H)；3.13-3.48(6H)；4.35(1H)；5.20(1H)；5.85(1H)；6.46(1H)；6.94(1H).LC/MS(ESI)：653.5；(计算值([M+H]+)：654.0).
分子CEA1
在将与用于制备分子BA1类似的方法应用于分子CE2(22.2g，34 mmol)之后，将在真空浓缩后获得的残余物在热甲醇中重结晶。冷却至室温后，过滤固体，用冷甲醇洗涤，然后用丙酮洗涤，并真空干燥以得到浅黄色固体。
产率：16.3g(81％)。
1H NMR(MeOD，ppm)：0.90(6H)；1.20-1.85(42H)；2.15-2.30(4H)；3.06(2H)；3.19(2H)；3.40 (1H)；3.55(1H)；4.13(1H).
LC/MS(ESI)：553.5；(计算值([M+H]+)：553.9).
分子CEA2和分子CEA3
根据专利美国专利No.4,826,818(Kenji M.等)中描述的方案合成分子CEA2和CEA3。
部分CEB：反例共聚氨基酸的合成
表1g：反例共聚氨基酸
实施例CEB1：共聚氨基酸CEB1-被分子CEA1修饰的数均分子量为3800 g/mol的聚-L-谷氨酸钠
将通过与用于制备共聚氨基酸BB1-1类似的方法获得的数均分子量(Mn)为8500g/mol的聚-L-谷氨酸(2.0g)在30-40℃下溶解在DMF(27 mL)中，然后将溶液冷却至0℃。向该溶液添加EDC(0.59g，3.06mmol) 在DMF(6mL)中的溶液、HOBt(0.41g，3.06mmol)在DMF(1mL)中的溶液和DIPEA(1.76mL，18.3mmol)。然后添加分子CEA1(0.21g， 1.84mmol)在DMF(0.9mL)中的溶液，并将混合物在25℃下搅拌3小时。用滴加的11mL水稀释反应介质，然后通过用0.9％NaCl水溶液，然后用水透析纯化。获得的溶液通过0.2μm过滤器过滤并储存在2-8℃。
干提取物：16.3mg/g。
DP(基于1H NMR评估)：42。
基于1H NMR：i＝0.024。
计算出的共聚氨基酸CEB1的平均分子量为6924g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3800g/mol。
实施例CEB2：共聚氨基酸CEB2-在其一端以乙酰基封端并被亮氨酸胆固醇酯修饰的数均分子量为2575g/mol的聚-L-谷氨酸钠
根据专利美国专利No.4,826,818(Kenji，M.等)中描述的方法制备亮氨酸胆固醇酯的对甲苯磺酸盐。
通过将与用于制备共聚氨基酸BB13类似的方法应用于亮氨酸胆固醇酯的对甲苯磺酸盐(1.23g，1.8mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB5-1 类似的方法获得的数均分子量Mn＝3600g/mol的聚-L-谷氨酸(5g)，获得在其一端以乙酰基封端并被亮氨酸胆固醇酯修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：15.4mg/g。
DP(通过1H NMR评估)：22。
基于1H NMR：i＝0.05。
计算出的共聚氨基酸CEB2的平均分子量为3973g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝2575g/mol。
实施例CEB3：共聚氨基酸CEB3-在其一端以乙酰基封端并被天冬氨酸二月桂酯修饰的数均分子量为5820g/mol的聚-L-谷氨酸钠
根据专利美国专利No.4,826,818(Kenji，M.等)中描述的方法制备天冬氨酸二月桂酯的对甲苯磺酸盐。
通过将与用于制备共聚氨基酸BB13类似的方法应用于天冬氨酸二月桂酯的对甲苯磺酸盐(0.89g，1.9mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸 BB5-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝8500g/mol的聚-L-谷氨酸(5 g)，获得在其一端以乙酰基封端并被天冬氨酸二月桂酯修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：19.3mg/g。
DP(通过1H NMR评估)：43。
基于1H NMR：i＝0.05。
计算出的共聚氨基酸CEB3的平均分子量为7565g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝5820g/mol。
实施例CEB4：共聚氨基酸CEB4-被(±)-α-生育酚修饰的数均分子量为 5085g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与专利FR 2,840,614(Ping，C.U.等.)中描述的类似的方法应用于(±)-α-生育酚(0.5g，1.16mmol)和通过与专利FR2985429A1中描述的类似的方法获得的聚-L-谷氨酸(3g)，获得被(±)-α-生育酚修饰的聚-L- 谷氨酸钠。
干提取物：10.9mg/g。
DP(通过1H NMR评估)：20。
基于1H NMR：i＝0.05。
计算出的共聚氨基酸CEB4的平均分子量为3473g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝5085g/mol。
实施例CEBX4：共聚氨基酸CEBX4-在其一端以乙酰基封端并被分子 CEA1修饰的数均分子量(Mn)为3300g/mol的聚-L-谷氨酸钠
通过将与用于制备共聚氨基酸BB2类似的方法应用于分子CEA1的盐酸盐(0.918g，1.56mmol)和通过与用于制备共聚氨基酸BB5-1类似的方法获得的数均分子量Mn＝3700g/mol的聚-L-谷氨酸(5.0g)，获得在其一端以乙酰基封端并被分子CEA1修饰的聚-L-谷氨酸钠。
干提取物：17.4mg/g
DP(基于1H NMR评估)：22
基于1H NMR：i＝0.042。
计算出的共聚氨基酸CEBX4的平均分子量为3941g/mol。
HPLC-水性SEC(校准物PEG)：Mn＝3300g/mol。
部分C-甘精胰岛素、餐时胰岛素或GLP-1 RA组合物
实施例C1：100U/mL的速效胰岛素类似物溶液
该溶液是由ELI LILLY公司以名称销售的商业化赖脯胰岛素溶液。该产品是一种速效胰岛素类似物。中的赋形剂是间甲酚 (3.15mg/mL)、甘油(16mg/mL)、磷酸二钠(1.88mg/mL)、氧化锌(以获得0.0197mg锌离子/mL)、用于调节pH(pH7-7.8)的氢氧化钠和盐酸、以及水。
实施例C2：100U/mL的速效胰岛素类似物溶液
该溶液是由NOVO NORDISK公司在美国以名称和在欧洲以名称销售的商业化门冬胰岛素溶液。该产品是一种速效胰岛素类似物。的赋形剂是甘油(16mg)、苯酚(1.50mg/mL)、间甲酚(1.72mg/mL)、锌(19.6μg/mL)、二水合磷酸二钠(1.25mg/mL)、氯化钠(0.5mg/mL)、用于调节pH(pH 7.2-7.6)的氢氧化钠和盐酸、以及水。
实施例C3：100U/mL的速效胰岛素类似物溶液
该溶液是由SANOFI公司以名称销售的商业化谷赖胰岛素溶液。该产品是一种速效胰岛素类似物。的赋形剂为间甲酚(3.15 mg/mL)、氨丁三醇(6mg/mL)、氯化钠(5mg/mL)、聚山梨酯20(0.01 mg/mL)、用于调节pH(pH7.3)的氢氧化钠和盐酸、以及水。
实施例C4：100U/mL的缓慢作用胰岛素类似物溶液
该溶液是由SANOFI公司以名称销售的商业化甘精胰岛素溶液。该产品是一种缓慢作用胰岛素类似物。中的赋形剂为氯化锌(30 μg/mL)、间甲酚(2.7mg/mL)、甘油(85％)(20mg/mL)、用于调节pH (pH 4)的氢氧化钠和盐酸、以及水。
实施例C5：100IU/mL的人胰岛素溶液
该溶液是由NOVO NORDISK以名称销售的商业化人胰岛素溶液。的赋形剂是氯化锌、甘油、间甲酚、用于调节pH(pH 6.9-7.8)的氢氧化钠和盐酸、以及水。
实施例C6：100IU/mL的人胰岛素溶液(Umuline)
该溶液是由ELI LILLY以名称名称Umuline销售的商业化人胰岛素溶液。Umuline的赋形剂是甘油、间甲酚、用于调节pH(pH 7.0-7.8)氢氧化钠和盐酸、以及水。
实施例D1：3mg/mL的GLP-1 RA杜拉鲁肽溶液
该溶液是由ELI LILLY公司以名称销售的杜拉鲁肽(杜拉鲁肽)溶液。中的赋形剂是无水柠檬酸(0.14mg/mL)、甘露糖醇(46.4mg/mL)、聚山梨酯80(0.20mg/mL)、二水合柠檬酸三钠(2.74 mg/mL)、以及水。
实施例D2：0.25mg/mL的GLP-1 RA艾塞那肽溶液
该溶液是由ELI LILLY公司以名称销售的艾塞那肽溶液。中的赋形剂是间甲酚(20mM)、甘露糖醇、冰醋酸、三水合乙酸钠、以及水。
实施例D3：6mg/mL的GLP-1 RA利拉鲁肽溶液
该溶液是由NOVO NORDISK公司以名称销售的利拉鲁肽溶液。中的赋形剂是二水合磷酸二钠、丙二醇(1.42mg/mL)、苯酚 (5.5mg/mL)、以及水。
实施例D4：0.1mg/mL的GLP-1 RA利西拉肽溶液
该溶液是由SANOFI公司以名称销售的利西拉肽溶液。中的赋形剂是甘油、乙酸钠、甲硫氨酸、间甲酚(25mM)、用于调节pH盐酸和氢氧化钠、以及水。
实施例D5：60mg/mL的GLP-1 RA阿必鲁肽溶液
阿必鲁肽以待重构的固体形式存在，由GSK公司以名称销售。在注射装置中，通过旋转装置远端使笔致动来混合最初位于分开的隔室中的粉末和溶解所需体积的水，直到获得特征性的“咔哒”声(“click” noise)。在由产品的用户说明书中描述的混合步骤和静置时间组成的程序之后，该溶液准备好用于注射。中的赋形剂是甘露糖醇(153 mM)、聚山梨酯80(0.01％w/w)、磷酸钠(10mM)、二水合海藻糖(117 mM)。
I.确定用于溶解甘精胰岛素的最小比值
实施例G3：用于确定在pH 7下溶解50U/mL甘精胰岛素的最小浓度的方案。
以一定方式将间甲酚和甘油的浓溶液添加至pH 7的共聚氨基酸储备溶液，以获得浓度为C共氨基酸储液/赋形剂(mg/ml)的共聚氨基酸溶液。以一定方式调节添加的赋形剂的量，使得与pH 7.1的共聚氨基酸/50U/mL甘精胰岛素的组合物获得35mM的间甲酚浓度和184mM的甘油浓度。
在3mL小瓶中，以一定方式将0.5mL的浓度为100U/mL的商品名为的甘精胰岛素的商业溶液浓度添加至0.5mL体积的浓度为C共氨基酸储液/赋形剂(mg/ml)的共聚氨基酸溶液，使得获得pH 7.1的组合物C共聚氨基酸(mg/ml)/甘精胰岛素50U/mL。出现浑浊。通过添加浓NaOH将pH 调节至pH 7.1，并将溶液在静止条件下在40℃的烘箱中放置1夜。以一定方式对于不同浓度的C共氨基酸储液/赋形剂(mg/mL)进行该操作，以便以至多0.25 mg/mL的步长改变共聚氨基酸的浓度C共聚氨基酸(mg/mL)。在40℃下过夜后，目视检查样品，并使用zetasizer(Malvem)以173°的角度进行静态光散射测量。能够使甘精胰岛素溶解的共聚氨基酸的最低浓度定义为使 pH 7的共聚氨基酸/甘精胰岛素的混合物在视觉上清澈并且呈现小于3000 kcps/s的散射强度的最低浓度。
表2：用于溶解甘精胰岛素的最小比值。
II.溶解/沉淀
a)包含甘精胰岛素的组合物
制备方法CA1：根据使用液体形式(在溶液中)的甘精胰岛素和液体形式 (在溶液中)的共聚氨基酸的方法，制备pH 7.1的共聚氨基酸/50U/mL 甘精胰岛素的稀释组合物
以一定方式将间甲酚和甘油的浓溶液添加至pH 7.1的共聚氨基酸储备溶液，以便获得浓度为C共聚氨基酸储液/赋形剂(mg/mL)的共聚氨基酸溶液。所添加的赋形剂的量以一定方式调节，以便以pH 7.1的共聚氨基酸/50 U/mL甘精胰岛素的组合物获得35mM的间甲酚浓度和184mM的甘油浓度。
在无菌广口瓶中，以一定方式将体积V甘精胰岛素的浓度为100U/mL的根据商品名销售的市售甘精胰岛素溶液添加至体积V共聚氨基酸储液/赋形剂的浓度为C共聚氨基酸储液/赋形剂(mg/mL)的共聚氨基酸溶液中，以获得pH 7.1 下的共聚氨基酸C稀释的共聚氨基酸(mg/mL)/50U/mL甘精胰岛素的稀释组合物(mg/mL)。出现浑浊。通过添加浓NaOH使pH调节至pH 7.1，并将溶液在静态条件下在烘箱中40℃下放置2小时，直至溶解完全。将该视觉上澄清的溶液放置在+4℃。
制备方法CA2：根据用于浓缩稀释的组合物的方法，借助于共聚氨基酸制备pH 7.1的共聚氨基酸/甘精胰岛素的浓缩组合物。
通过由再生纤维素制成的3kDa膜(由Millipore公司销售的 Ultra-15)超滤来浓缩实施例CA1中所述的pH 7.1下的共聚氨基酸/50 U/mL甘精胰岛素的组合物。在该超滤步骤之后，渗余物是澄清的，并且通过反相色谱法(RP-HPLC)确定组合物中甘精胰岛素的浓度。然后通过在赋形剂间甲酚/甘油的溶液中稀释以一定方式将组合物中甘精胰岛素的浓度调节至期望值，以便获得35mM的间甲酚最终浓度和300mOsm/kg 的渗量。测量pH并通过添加浓NaOH和HCl将pH调节至7.1。该溶液在 pH 7.1下视觉上澄清，具有甘精胰岛素浓度C甘精胰岛素(U/mL)，且共聚氨基酸浓度C共聚氨基酸(mg/mL)＝C稀释的共聚氨基酸(mg/mL)×C甘精胰岛素(U/mL)/50(U/mL)。
根据该制备方法CA2，制备共聚氨基酸/甘精胰岛素的组合物，例如，其中甘精胰岛素浓度为200U/mL和400U/mL。
实施例CA3：制备pH 7.1的共聚氨基酸/200U/mL甘精胰岛素的组合物。
根据实施例CA2中所述的方法以一定方式制备共聚氨基酸/200U/mL 甘精胰岛素的组合物，以便获得甘精胰岛素浓度C甘精胰岛素＝200U/mL和共聚氨基酸浓度C共聚氨基酸(mg/mL)。这些组合物示于下表3中。
实施例CA4：在共聚氨基酸/200U/mL甘精胰岛素的组合物中沉淀甘精胰岛素
将1mL实施例CA3中制备的共聚氨基酸/甘精胰岛素溶液添加至2 mL含有20mg/mLBSA(牛血清白蛋白)的PBS溶液。PBS/BSA混合物模拟皮下环境的组成。出现沉淀物。
在4000rpm下进行离心以将沉淀物与上清液分离。接下来，通过 RP-HPLC在上清液中测定甘精胰岛素。结果是甘精胰岛素大部分以沉淀形式存在。
结果在表3中示出：
表3：用本发明的共聚氨基酸制备的共聚氨基酸/甘精胰岛素(200 U/mL)的组合物；甘精胰岛素的溶解/沉淀。
b)包含甘精胰岛素和赖脯胰岛素的组合物
制备方法CB1：制备共聚氨基酸/43(U/mL)甘精胰岛素/13.5(U/mL)赖脯胰岛素的稀释组合物
以一定方式将100U/mL的体积为V赖脯胰岛素的市售赖脯胰岛素溶液和水添加至实施例CA1中所述的体积为V共聚氨基酸/稀释的甘精胰岛素的pH 7.1的共聚氨基酸/50U/mL甘精胰岛素的稀释组合物中，以便获得共聚氨基酸/43(U/mL)甘精胰岛素/13.5(U/mL)赖脯胰岛素的组合物。制备方法CB2：制备pH 7.1的共聚氨基酸/甘精胰岛素/浓缩赖脯胰岛素的组合物
通过由再生纤维素制成的3kDa膜(由MILLIPORE公司销售的Ultra-15)超滤来浓缩实施例CB1中所述的共聚氨基酸/43(U/mL) 甘精胰岛素/13.5(U/mL)赖脯胰岛素的组合物。在该超滤步骤完成后，渗余物是澄清的，并且通过反相色谱法(RP-HPLC)确定组合物中甘精胰岛素的浓度。然后通过在赋形剂间甲酚/甘油的溶液中稀释以一定方式将组合物中甘精胰岛素和赖脯胰岛素的浓度调节至期望值，以便获得35mM 的间甲酚最终浓度和300mOsm/kg的渗量。测量pH并(如果必要的话) 通过添加浓NaOH和HCl将pH调节至7.1。该溶液在pH 7.1下视觉上澄清，具有甘精胰岛素浓度C甘精胰岛素(U/mL)，赖脯胰岛素浓度C赖脯胰岛素 (mg/mL)＝C甘精胰岛素×0.33，且共聚氨基酸浓度C共聚氨基酸(mg/mL)＝C稀释的共聚氨基酸(mg/mL)×C甘精胰岛素(U/mL)/50(U/mL)。
实施例CB3：制备pH 7.1的共聚氨基酸/200U/mL甘精胰岛素/66U/mL赖脯胰岛素的组合物
根据实施例CB2中所述的方法以一定方式制备共聚氨基酸/200U/mL 甘精胰岛素/66U/mL赖脯胰岛素的组合物，以便获得甘精胰岛素浓度C甘精胰岛素＝200U/mL，赖脯胰岛素浓度C赖脯胰岛素＝66U/mL，以及共聚氨基酸浓度C共聚氨基酸(mg/mL)。这些组合物示于表4a中。
实施例CB4：在共聚氨基酸/200/66U/mL甘精胰岛素/赖脯胰岛素的组合物中沉淀甘精胰岛素
将1mL实施例CB3中制备的共聚氨基酸/甘精胰岛素/赖脯胰岛素溶液添加至2mL含有20mg/mL BSA(牛血清白蛋白)的PBS溶液。PBS/BSA 混合物模拟皮下环境的组成。出现沉淀物。
在4000rpm下进行离心以将沉淀物与上清液分离。接下来，通过 RP-HPLC在上清液中测定甘精胰岛素。结果发现大部分甘精胰岛素处于沉淀形式。结果示于表4a和4b中：
表4a：用本发明的共聚氨基酸制备的共聚氨基酸/甘精胰岛素(200 U/mL)/赖脯胰岛素(66U/mL)的组合物；甘精胰岛素的溶解和沉淀。
实施例CB5：制备pH 7的共聚氨基酸/225U/mL甘精胰岛素/75IU/mL赖脯胰岛素的组合物。
根据实施例CB2中所述的方法以一定方式制备共聚氨基酸/225U/mL 甘精胰岛素/75IU/mL赖脯胰岛素的组合物，以便获得甘精胰岛素浓度C甘精胰岛素＝225U/mL，赖脯胰岛素浓度C赖脯胰岛素＝75IU/mL，以及共聚氨基酸浓度C共聚氨基酸(mg/mL)。这些组合物示于表4b中。
表4b：用共聚氨基酸BB14制备的共聚氨基酸/甘精胰岛素(225U/mL) /赖脯胰岛素(75IU/mL)的组合物。
实施例CB6：制备pH 7.1的共聚氨基酸/200U/mL甘精胰岛素/200IU/mL 赖脯胰岛素的组合物。
制备方法CB7：制备共聚氨基酸/33U/mL甘精胰岛素组合物/33U/mL赖脯胰岛素的稀释组合物
以一定方式将100U/mL的体积为V赖脯胰岛素的市售赖脯胰岛素溶液和水添加至实施例CA1中所述的体积为V共聚氨基酸/稀释的甘精胰岛素的pH 7.1的共聚氨基酸/50U/mL甘精胰岛素的稀释组合物中，以便获得共聚氨基酸/33(U/mL)甘精胰岛素/33(U/mL)赖脯胰岛素的组合物。制备方法CB8：制备pH 7.1的浓缩的共聚氨基酸/甘精胰岛素/赖脯胰岛素的浓缩组合物
通过由再生纤维素制成的3kDa膜(由MILLIPORE公司销售的Ultra-15)超滤来浓缩实施例CB7中所述的共聚氨基酸/33(U/mL) 甘精胰岛素/33(U/mL)赖脯胰岛素的组合物。在该超滤步骤完成后，渗余物是澄清的，并且通过反相色谱法(RP-HPLC)确定组合物中甘精胰岛素的浓度。然后通过在赋形剂间甲酚/甘油的溶液中稀释以一定方式将组合物中甘精胰岛素和赖脯胰岛素的浓度调节至期望值，以便获得35mM 的间甲酚最终浓度和300mOsm/kg的渗量。测量pH并(如果必要的话) 通过添加浓NaOH和HCl将pH调节至7.1。该溶液在pH 7.1下视觉上澄清，甘精胰岛素浓度为C甘精胰岛素(U/mL)，赖脯胰岛素浓度C赖脯胰岛素＝C甘精胰岛素，共聚氨基酸浓度C共聚氨基酸(mg/mL)＝C稀释的共聚氨基酸(mg/mL)×C甘精胰岛素(U/mL)/50(U/mL)。
c)包含甘精胰岛素和Umuline rapide人胰岛素的组合物
实施例CB9：制备pH 7.1的共聚氨基酸/200U/mL甘精胰岛素/66IU/mL 人胰岛素的组合物
制备方法CB10：制备共聚氨基酸/43(U/mL)甘精胰岛素/13.5(U/mL) 人胰岛素的稀释组合物
以一定方式将100U/mL的实施例C6的体积为V人胰岛素的市售人胰岛素溶液和水添加至实施例CA1中所述的体积为V共聚氨基酸/稀释的甘精胰岛素的pH 7.1 的共聚氨基酸/50(U/mL)甘精胰岛素的稀释组合物中，以便获得共聚氨基酸/43(U/mL)甘精胰岛素/13.5(U/mL)人胰岛素的组合物。
制备方法CB11：制备pH 7.1的共聚氨基酸/甘精胰岛素/人胰岛素的浓缩组合物
通过由再生纤维素制成的3kDa膜(由MILLIPORE公司销售的Ultra-15)超滤浓缩实施例CB10中所述的共聚氨基酸/43(U/mL) 甘精胰岛素/13.5(U/mL)人胰岛素的组合物。在该超滤步骤完成后，渗余物是澄清的，并且通过反相色谱法(RP-HPLC)确定组合物中甘精胰岛素的浓度。然后通过在赋形剂间甲酚/甘油的溶液中稀释以一定方式将组合物中甘精胰岛素和人胰岛素的浓度调节至期望值，以便获得35mM的间甲酚最终浓度和300mOsm/kg的渗量。测量pH并(如果必要的话)通过添加浓NaOH和HCl将pH调节至7.1。该溶液在pH 7.1下视觉上澄清，甘精胰岛素浓度为C甘精胰岛素(U/mL)，人胰岛素浓度为C人胰岛素＝C甘精胰岛素× 0.33，且共聚氨基酸浓度为C共聚氨基酸(mg/mL)＝C稀释的共聚氨基酸(mg/mL)× C甘精胰岛素(U/mL)/50(U/mL)。
实施例CB12：制备pH 7.1的共聚氨基酸/200U/mL甘精胰岛素/66U/mL 人胰岛素的组合物
根据实施例CB11中所述的方法以一定方式制备共聚氨基酸/200 U/mL甘精胰岛素/66U/mL人胰岛素的组合物，以便获得甘精胰岛素浓度 C甘精胰岛素＝200U/mL，人胰岛素浓度C人胰岛素＝66U/mL，以及共聚氨基酸浓度C共聚氨基酸(mg/mL)。该组合物示于下表4c中。
表4c：pH 7.1的共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)/人胰岛素(66 IU/mL)组合物。
d)包含甘精胰岛素和杜拉鲁肽的组合物
实施例DB1：制备pH 7.1的甘精胰岛素(50U/mL)/杜拉鲁肽(0.25mg/mL) 的组合物
将0.833mL水添加至0.167mL实施例D1的杜拉鲁肽溶液，并将pH 调节至4。然后将1mL实施例C4的甘精胰岛素溶液添加至该溶液中以获得2mL的组合物，其在混合物中pH为4。含有50U/mL甘精胰岛素和 0.25mg/mL杜拉鲁肽的组合物是澄清的，表明甘精胰岛素和杜拉鲁肽在这些制剂条件下(pH 4)具有良好的溶解性。然后用0.1N氢氧化钠溶液将 pH调节至7.1。然后组合物变浑浊，表明pH 7.1的甘精胰岛素/杜拉鲁肽组合物的溶解性差。
实施例DB2：制备pH 7.1的甘精胰岛素(50U/mL)/杜拉鲁肽(0.25mg/mL) 的组合物
将0.833mL水添加至0.167mL实施例D1的杜拉鲁肽溶液中。然后将1mL实施例C4的甘精胰岛素溶液添加至该溶液以获得2mL组合物，其在混合物中pH为5.2。含有50U/mL甘精胰岛素和0.25mg/mL杜拉鲁肽的组合物是浑浊的，表明pH 5.2的甘精胰岛素/杜拉鲁肽组合物的溶解性差。然后用0.1N氢氧化钠溶液将pH调节至7.1。该组合物仍然是浑浊的，表明pH7.1的甘精胰岛素/杜拉鲁肽组合物的溶解性差。
实施例DB3：制备pH 7.1的共聚氨基酸/甘精胰岛素/杜拉鲁肽的组合物
将2mL实施例D1的杜拉鲁肽溶液和1mL水添加至3mL根据实施例CA2的方案制备的共聚氨基酸/甘精胰岛素溶液，其中甘精胰岛素的浓度为400U/mL，以在获得6mL pH 7的组合物。用0.1N氢氧化钠溶液将 pH调节至7.1。含有7mg/mL共聚氨基酸AB6、200U/mL甘精胰岛素和1mg/mL杜拉鲁肽的组合物是澄清的，表明甘精胰岛素和杜拉鲁肽在pH 7.1的共聚氨基酸存在下的良好溶解性。将该澄清溶液放置在+4℃。
根据实施例DB3的方案，制备具有不同共聚氨基酸的组合物并示于下表5 中。
实施例DB4：沉淀pH 7.1的共聚氨基酸/甘精胰岛素/杜拉鲁肽的组合物
将0.045mL根据实施例DB3的方案制备的共聚氨基酸/甘精胰岛素/ 杜拉鲁肽的组合物添加至0.105mL含有20mg/mL BSA的PBS溶液中。 PBS/BSA混合物模拟皮下环境的组成。出现沉淀物。
在4000rpm下进行离心以将沉淀物与上清液分离。然后，通过 RP-HPLC在上清液中测定甘精胰岛素。发现甘精胰岛素大部分处于沉淀形式。结果在下表5中示出。
表5：共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)/杜拉鲁肽(1mg/mL)的组合物；甘精胰岛素的溶解和沉淀。
实施例DB5：制备pH 7.2的共聚氨基酸/甘精胰岛素/杜拉鲁肽的组合物
根据实施例DB3的方案，制备pH 7.2的具有不同共聚氨基酸的组合物，并示于下表6中。
表6：pH 7.2的共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)/杜拉鲁肽(1mg/mL) 的组合物。
实施例DB6：制备pH 7.2的共聚氨基酸/甘精胰岛素的组合物
根据实施例DB5的方案并以等同于D1的含有除了无水柠檬酸之外相同的赋形剂并且不含有杜拉鲁肽的溶液开始，制备pH 7.2的以下组合物并示于下表7中。
表7：pH 7.2的共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)的组合物。
e)制备共聚氨基酸/甘精胰岛素/赖脯胰岛素/艾塞那肽的组合物
根据实施例CB2和CB8中所述的方法制备共聚氨基酸/甘精胰岛素/ 赖脯胰岛素的组合物。将通过将艾塞那肽(Bachem)溶解在注射用水中制备的一定体积的10mg/mL艾塞那肽溶液添加至这些溶液。然后通过在赋形剂间甲酚/甘油或间甲酚/甘油/甲硫氨酸的溶液中稀释以一定方式将组合物中甘精胰岛素、赖脯胰岛素和艾塞那肽的浓度调节至期望值，以便获得35mM的间甲酚最终浓度和300mOsm/kg的渗量。测量pH并(如果需要的话)通过添加浓NaOH和HCl调节至pH 7.2。这些组合物示于表8中。
表8：共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)/赖脯胰岛素(67IU/mL或 200IU/mL)/有或没有艾塞那肽的组合物。
D部分-反例
制备方案
根据实施例CA2中所述的方法以一定方式制备反例共聚氨基酸/200 U/mL甘精胰岛素的组合物，以便获得甘精胰岛素浓度C甘精胰岛素＝200U/mL 和反例共聚氨基酸浓度C反例共聚氨基酸(mg/mL)。这些组合物示于下表9中。
表9：反例共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)的组合物。
根据实施例CB2中所述的方法以一定方式制备共聚氨基酸/200U/mL 甘精胰岛素/66U/mL赖脯胰岛素的组合物，以便获得甘精胰岛素浓度C甘精胰岛素＝200U/mL，赖脯胰岛浓度素C赖脯胰岛素＝66U/mL，以及反例共聚氨基酸浓度C反例共聚氨基酸(mg/mL)。这些组合物示于下表10中。
表10：共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)/赖脯胰岛素(66U/mL) 的反例组合物。
根据实施例CB12(制备pH 7.1的共聚氨基酸/200U/mL甘精胰岛素/66 U/mL人胰岛素组合物)，根据实施例CB11中所述的方法以一定方式制备共聚氨基酸/200U/mL甘精胰岛素/66U/mL人胰岛素组合物，以便获得甘精胰岛素浓度C甘精胰岛素＝200U/mL，人胰岛素浓度C人胰岛素＝66U/mL，以及共聚氨基酸浓度C共聚氨基酸(mg/mL)。该组合物示于下表11中。
表11：pH 7.1的反例共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)/人胰岛素(66 IU/mL)的组合物。
根据实施例DB5的方案，制备pH 7.2的具有不同的反例共聚氨基酸组合物，并示于下表12中。
表12：反例共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)/杜拉鲁肽(0.8或1 mg/mL)组合物
III.确定获得沉淀所需的白蛋白量
实施例G1：制备pH 7.1的稀释的共聚氨基酸/65U/mL甘精胰岛素组合物。
以一定方式将间甲酚和甘油的浓溶液添加至pH 7的共聚氨基酸储备溶液，以便获得浓度为C共聚氨基酸储液/赋形剂(mg/mL)的共聚氨基酸溶液。所添加的赋形剂的量以一定方式调节，以便以pH 7.1的共聚氨基酸/65U/mL 甘精胰岛素的组合物中获得35mM的间甲酚浓度和184mM的甘油浓度。
在无菌广口瓶中，以一定方式将体积V甘精胰岛素的浓度为100U/mL的以商品名销售的市售甘精胰岛素溶液添加至体积V共聚氨基酸储液/赋形剂的浓度C共聚氨基酸储液/赋形剂(mg/mL)的共聚氨基酸溶液，以便获得pH 7.1的稀释的共聚氨基酸组合物C稀释的共聚氨基酸(mg/mL)/65U/mL甘精胰岛素。出现浑浊。通过添加浓NaOH使pH调节至pH 7.1，并将溶液在静态条件下在烘箱中在40℃下放置2小时，直至溶解完全。将该视觉上澄清的溶液放置在+4℃。
实施例G2：通过改变白蛋白的浓度，沉淀pH 7.1的共聚氨基酸/65U/mL 甘精胰岛素组合物
以一定方式将含有0.3mL BSA(牛血清白蛋白)溶液的pH 7.4的PBS 缓冲液(磷酸盐缓冲盐水)和1mL稀释的共聚氨基酸/甘精胰岛素65U/mL 组合物(pH 7.1)分别引入到一次性UV比色皿中，以便在PBS缓冲液中获得含有50U/mL甘精胰岛素、白蛋白浓度CBSA(mg/mL)的混合物。制备数种的不同浓度含BSA的PBS缓冲液，以便通过PBS缓冲液使最终混合物中白蛋白的浓度从1至12.7mg/mL(1；2.9；3.9；6.8；9.7；12.7 mg/mL)改变以及改变生理盐浓度。
在PBS缓冲液中添加BSA溶液后，通过移液管的几次来回抽打使混合物迅速均质化。混合后1小时，用JASCO V-530UV-Vis分光光度计在 500nm处进行吸光度测量。
在500nm处的吸光度测量使得可评价来源于甘精胰岛素沉淀的混合物的浊度。浊度作为白蛋白浓度之函数而提高以达到反映甘精胰岛素完全沉淀的平台期。
允许定量沉淀的临界白蛋白浓度定义为在500nm处的吸光度值达到在平台期测量的吸光度的80％时的白蛋白浓度。
注意到，在本发明的组合物中，临界BSA量较低。
结果在下表13中报告：
表13：在1h时80％沉淀的临界白蛋白浓度(mg/mL)(50U/mL甘精胰岛素)。
IV.研究根据本发明组合物的稳定性
E部分：通过研究共聚氨基酸/200U/mL甘精胰岛素组合物和共聚氨基酸 /200U/mL甘精胰岛素/66U/mL赖脯胰岛素组合物，示出根据本发明组合物的物理稳定性。
实施例E1：在25℃下在动态条件下加速的稳定性。
将填充有1mL组合物共聚氨基酸/甘精胰岛素的3个3mL小瓶垂直放置在轨道搅拌器中。将搅拌器放置在25℃的烘箱中，并将小瓶以250rpm 进行搅拌。每天/每周目视检查小瓶，以检测可见颗粒的出现或浑浊。该检查根据欧洲药典(EP 2.9.20)的推荐进行：小瓶经受至少2000lux的照明，并在白色背景和黑色背景上进行观察。稳定天数对应于至少2个小瓶呈现可见颗粒或浑浊的持续时间。
这些结果与美国药典(USP<790>)一致。
加速稳定性的结果(用不同的组合物获得)示于下表14中。
表14：在25℃下在动态条件下(在250rpm的搅拌下)共聚氨基酸/ 甘精胰岛素(200U/mL)/赖脯胰岛素(66U/mL)的组合物以及反例的稳定性结果。(*当溶液的pH被调节至pH 7时出现沉淀物)。
组合物 共聚氨基酸 在25℃下在动态条件下的稳定性(以天计)
CB3 - *
CB3a AB6 13
CB3c AB21 14
CB3r AB17 8
CB3i AB18 8
CB3f BB3 15
CB3g BB5 ＞41
CB3j BB7 29
CB3m BB10 15
CB3n BB11 17
CB3o BB15 14
CB3p BB16 8
CB3s CEB2 5
CB3t CEB3 4
CB3u BB42 8
CB3v BB18 69
CB3w BB17 29
CB3x BB25 10
CB3y BB26 ＞46持续中
CB3z BB43 5-7
CB3ac BB20 32
CB3ad BB21 30
CB3ae CEBX3 2
CB3af CEBX4 2
用实施例CB12的表格的组合物获得的加速稳定性结果示于下表15 中。
表15：在25℃下在动态条件下(在250rpm的搅拌下)共聚氨基酸/ 甘精胰岛素(200U/mL)/人胰岛素(66U/mL)组合物以及反例的稳定性结果。
用实施例DB5的表格的组合物获得的加速稳定性结果示于下表16 中。
表16：在25℃下在动态条件下(在250rpm的搅拌下)共聚氨基酸/ 甘精胰岛素(200U/mL)/杜拉鲁肽(1mg/mL)的组合物的稳定性结果。
通过研究共聚氨基酸/甘精胰岛素/赖脯胰岛素/艾塞那肽的组合物示出根据本发明的组合物的物理稳定性
实施例E1’：在25℃下在动态条件下的加速稳定性。
将填充有1mL表8组合物的3个3mL小瓶垂直放置在轨道搅拌器中。将搅拌器放置在25℃的烘箱中，并在250rpm下对小瓶进行搅拌。每周目视检查小瓶，以检测可见颗粒的出现或浑浊。该检查根据欧洲药典(EP 2.9.20)的推荐进行：小瓶经受至少2000lux的照明，并在白色背景和黑色背景上进行观察。稳定周数对应于至少2个小瓶呈现可见颗粒或浑浊的持续时间。
这些结果与美国药典(USP<790>)一致。
用表8的组合物获得的加速稳定性结果示于下表17中。
表17：在25℃下在动态条件下(在250rpm的搅拌下)，具有或不具有艾塞那肽的共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)/赖脯胰岛素(67 IU/mL)的组合物的稳定性的结果。
组合物 共聚氨基酸 在25℃下在动态条件下的稳定性(以周计)
CB2a BB15 ＞9
CB2b BB15 ＞9
CB2c BB15 ＞9
实施例E2：在30℃下在静态条件下的加速稳定性
将填充有1mL组合物的5个3mL小瓶垂直放置在轨道搅拌器中并维持在30℃。每天目视检查小瓶，以检测可见颗粒的出现或浑浊。该检查根据欧洲药典(EP 2.9.20)的推荐进行：小瓶经受至少2000lux的照明，并在白色背景和黑色背景上进行观察。稳定周数对应于至少2个小瓶呈现可见颗粒或浑浊的持续时间。
这些结果与美国药典(USP<790>)一致。
加速稳定性结果(用不同组合物获得)示于下表18a和18b中。
表18a：在30℃下在静态条件下共聚氨基酸/甘精胰岛素(225U/mL)/ 赖脯胰岛素(75IU/mL)的组合物的稳定性结果。(*当溶液的pH调节至pH 7时出现沉淀物)。
组合物 共聚氨基酸 在30℃下在静态条件下的稳定性(以周计)
CB5 - *
CB5f BB14 ＞9
表18b：在30℃下在静态条件下共聚氨基酸/甘精胰岛素(200U/mL)/赖脯胰岛素(66IU/mL)的组合物的稳定性结果。(*当溶液的pH调节至pH 7时出现沉淀物)。
组合物 共聚氨基酸 在30℃下在静态条件下的稳定性(以周计)
CB3 - *
CB3j BB7 ＞12
CB3o BB15 ＞9
V.根据本发明的组合物的实施例
实施例H4：制备pH 7.1的共聚氨基酸、200U/mL甘精胰岛素和66U/mL 赖脯胰岛素的组合物
200U/mL甘精胰岛素、66U/mL赖脯胰岛素和共聚氨基酸的组合物的实例描述于实施例CB3中，并示于表4a中。
实施例H5：制备pH 7.1的共聚氨基酸、150U/mL甘精胰岛素和50U/mL 赖脯胰岛素的组合物
以与实施例H4类似的方式，制备150U/mL的甘精胰岛素、50U/mL 的赖脯胰岛素和共聚氨基酸的组合物。它们示于表19中：
表19：共聚氨基酸/甘精胰岛素(150U/mL)/赖脯胰岛素(50U/mL) 的组合物。
实施例H6：制备pH 7.1的共聚氨基酸、300U/mL甘精胰岛素和100U/mL 赖脯胰岛素的组合物
以与实施例H4类似的方式制备300U/mL甘精胰岛素、100U/mL赖脯胰岛素和共聚氨基酸的组合物。它们示于表20中。
表20：共聚氨基酸/甘精胰岛素(300U/mL)/赖脯胰岛素(100U/mL) 组合物。
实施例H7：制备pH 7.1的共聚氨基酸和1mg/mL杜拉鲁肽的组合物。
以类似于实施例DB3的方式制备200μg/mL甘精胰岛素、1mg/mL杜拉鲁肽和共聚氨基酸的组合物。它们示于表21中。
表21：pH 7.1的共聚氨基酸和1mg/mL杜拉鲁肽的组合物
实施例H8：制备pH 7.1的共聚氨基酸、150U/mL甘精胰岛素和0.75mg/mL 杜拉鲁肽的组合物
以类似于实施例H7的方式制备150U/mL甘精胰岛素、0.75mg/mL 杜拉鲁肽和共聚氨基酸的组合物。它们示于表22中。
表22：共聚氨基酸/甘精胰岛素(150U/mL)/杜拉鲁肽(0.75mg/mL) 组合物。
实施例H9：制备pH 7.1的共聚氨基酸、300U/mL甘精胰岛素和1.5mg/mL 杜拉鲁肽的组合物
以类似于实施例H7的方式制备300U/mL甘精胰岛素、1.5mg/mL杜拉鲁肽和共聚氨基酸的组合物。它们示于表23中。
表23：共聚氨基酸/甘精胰岛素(300U/mL)/杜拉鲁肽(1.5mg/mL) 的组合物。
F部分：狗中的药动学和药效学研究
实施例F1：共聚氨基酸BB7(7mg/mL)/甘精胰岛素(200U/mL)/赖脯胰岛素(66U/mL)的组合物在狗中的药动学和药效学研究
在狗中进行研究是出于评价胰岛素溶液组合物的药动学和药效学的目的。
将该组合物的药动学曲线和降血糖作用与以75％甘精胰岛素/25％赖脯胰岛素的比例同时但分别注射的甘精胰岛素(pH 4)(实施例C4)和餐时赖脯胰岛素 (实施例C1)的那些进行比较。
禁食约18小时的10只动物使用Junior Star笔以0.8U/kg的剂量在肩胛间区域上方的颈部接受注射。在胰岛素注射之前的一小时内，抽取2个血液样品以确定基础葡萄糖和胰岛素水平。然后在注射后20小时期间抽取血液样品。通过血糖仪确定血糖。通过ELISA测试确定胰岛素水平。
以相对于基础水平的偏差表示的胰岛素平均药动学曲线示于图1中。
以基础水平的百分比表示的葡萄糖的平均药效学曲线示于图2中。
用分别且同时施用赖脯胰岛素和甘精胰岛素获得的药动学结果与用实施例CB3j中所述的组合物获得的药动学结果的比较示于图1中。该曲线是双相的。第一相对应于在注射后非常迅速地(在注射之后30分钟内)出现的胰岛素峰。该峰延伸至施用之后约3小时。观察到第二相，其在施用之后约3小时开始并在曲线结束时结束并且对应于胰岛素的延长吸收，导致平坦曲线。该第二相是胰岛素曲线的基础部分，而第一相对应于其餐时部分。这两相是同时注射餐时胰岛素和基础胰岛素的特征，并且它们确实用实施例CB3j中示出的本发明组合物再现。
用分别且同时施用赖脯胰岛素和甘精胰岛素获得的药效学结果与用实施例CB3j中所述的组合物获得的那些的比较示于图2中。实施例CB3j中所述的组合物的降血糖活性是双相的。第一迅速相由血糖显著降低约60分钟所定义，这是赖脯胰岛素迅速作用的特征。用双注射也可见第一相，表明根据本发明的组合物不改变的迅速特性。大约60分钟后，血糖升高长至3小时，然后是第二较慢相，其特征在于注射后持续长达18至20小时的较不显著的降血糖活性。该基础第二相是甘精胰岛素的基础作用的特征，用双注射同样可见，表明用实施例CB3j中所述的根据本发明的组合物确实保持了该效果。实施例F2：共聚氨基酸BB15(6mg/mL)/甘精胰岛素(200U/mL)/赖脯胰岛素(66U/mL)组合物在狗中的药动学和药效学研究。
将该组合物的药动学曲线和降血糖作用与以75％甘精胰岛素赖脯胰岛素的比例同时但分别注射的甘精胰岛素(pH 4)(实施例C4)和餐时赖脯胰岛素 (实施例C1)的药动学曲线和降血糖作用进行比较。
禁食约18小时的10只动物使用Junior Star笔以0.8U/kg的剂量在肩胛间区域上方的颈部接受注射。在胰岛素注射之前的一小时内，抽取2个血液样品以确定基础葡萄糖和胰岛素水平。然后在注射后20小时期间抽取血液样品。通过血糖仪确定血糖。通过ELISA测试确定胰岛素水平。
以相对于基础水平的偏差表示的胰岛素平均药动学曲线示于图3中。
以基础水平的百分比表示的葡萄糖的平均药效学曲线示于图4中。
用同时施用赖脯胰岛素和甘精胰岛素获得的药动学结果与实施例CB3o中所述的组合物的比较示于图3中。该曲线是双相的。第一相对应于在注射后非常迅速地(在注射后30分钟内)出现的胰岛素峰。该峰延伸直至施用之后约3小时。观察到第二相，其在施用之后约3小时开始并在曲线结束时结束并且对应于胰岛素的延长吸收，导致平坦曲线。该第二相是胰岛素曲线的基础部分，而第一相对应于其餐时阶段。这两相是同时注射餐时胰岛素和基础胰岛素的特征，并且它们确实用实施例CB3o中示出的本发明组合物再现。
用分别且同时施用赖脯胰岛素和甘精胰岛素获得的药效学结果与用实施例CB3o中所述的组合物获得的那些的比较示于图4中。实施例CB3o中所述的组合物的降血糖活性是双相的。第一迅速相由血糖显著降低持续约60分钟所定义，这是赖脯胰岛素迅速作用的特征。用双甘精胰岛素/赖脯胰岛素注射也可见第一相，表明根据本发明的组合物不改变赖脯胰岛素的迅速特性。大约60分钟后，血糖升高长至3小时，然后是第二较慢相，其特征在于注射后持续长达18至20小时的较不显著的降血糖活性。该第二基础相是甘精胰岛素基础作用的特征，用双注射同样可见，表明用实施例 CB3o中所述的根据本发明的组合物确实保持了该效果。
实施例F3：共聚氨基酸BB15(5mg/mL)/甘精胰岛素(200U/mL)/赖脯胰岛素(66U/mL)/艾塞那肽组合物在狗中的药动学和药效学研究。
进行狗中的研究是出于评价胰岛素和施用共聚氨基酸和胰岛素的组合物(组合物CB2a)以及共聚氨基酸、胰岛素和艾塞那肽的组合物(组合物CB2c)后的药动学和药效学的目的。
将组合物CB2c的胰岛素的降血糖作用和药动学曲线与具有相同组成但不含艾塞那肽的组合物CB2a的那些进行比较。
禁食约18小时的10只动物在肩胛间区域上方的颈部以下剂量的接受注射：对于组合物CB2a，0.67U/kg胰岛素；对于组合物CB2c，0.67U/kg 胰岛素和0.125μg/kg艾塞那肽。在施用与进食间隔很宽的这些条件下，药效学作用可单独归因于胰岛素。在注射前的一小时内，抽取血液样品以确定基础胰岛素水平，并收集3个样品以确定基础葡萄糖水平。然后在施用之后23小时期间抽取血液样品以描述胰岛素的药动学。通过血糖仪确定血糖持续24小时。通过ELISA测试确定胰岛素水平。
以相对于基础水平的偏差表示的胰岛素平均药动学曲线示于图5中。
以基础水平的偏差百分比表示的葡萄糖平均药效学曲线在图6中表示。
在施用不含艾塞那肽的组合物(组合物CB2a)后获得的胰岛素药动学结果与包含艾塞那肽的组合物(组合物CB2c)的那些的比较示于图5 中。该曲线是双相的。第一相对应于注射后非常迅速地(在注射后30至 45分钟内)出现的胰岛素峰。该峰延伸直到施用之后约3小时。在施用之后约3小时观察第二相直至曲线结束并且对应于胰岛素的延长吸收，导致平坦曲线。该第二相是胰岛素曲线的基础部分，而第一部分对应于其餐时部分。这两相是分别且同时注射餐时胰岛素和基础胰岛素的特征。两种组合物的曲线相似，这表明艾塞那肽的存在不改变组合物CB2c的胰岛素的动力学。
通过施用组合物CB2a和组合物CB2c获得的药效学结果示于图6中。组合物的降血糖活性是双相的。第一迅速相由血糖显著降低约60分钟所定义，这是赖脯胰岛素迅速作用的特征。大约60分钟后，血糖升高长至 3小时，然后是第二较慢相，其特征在于较不显著的降血糖活性，其在注射之后持续长达18至24小时。该第二基础相是甘精胰岛素基础作用的特征。两种组合物(CB2a和CB2c)的曲线相似，表明艾塞那肽的存在不改变组合物CB2c的生物活性。
实施例F4：共聚氨基酸BB15(5mg/mL)/甘精胰岛素(200U/mL)/赖脯胰岛素(66U/mL)/艾塞那肽的组合物在狗中的药效学研究
在狗中进行研究是出于评价胰岛素和艾塞那肽的液体共制剂(组合物 CB2c)的药效学的目的。
将组合物CB2c的降血糖作用与在艾塞那肽的存在下分别且同时注射的甘精胰岛素(pH 4)、赖脯胰岛素的那些进行比较。
禁食3小时的10只动物以1U/kg胰岛素和0.19μg/kg艾塞那肽的剂量在肩胛间区域上方的颈部接受注射。在进食后立即施用的这些条件下，药效学作用可归因于胰岛素和艾塞那肽。在注射前的一小时内，收集3个血液样品以确定基础葡萄糖水平。然后在施用之后6小时期间收集血液样品。通过血糖仪确定血糖。
以相对于基础水平的偏差百分比表示的葡萄糖的平均药效学曲线如图7中所示。
在施用组合物CB2c后获得的药效学结果与在分别且同时施用赖脯胰岛素甘精胰岛素和艾塞那肽(称为三联注射剂)后获得的那些的比较示于图7中。组合物CB2c的降血糖活性是双相的。第一迅速相由血糖显著降低约60分钟所定义，这是艾塞那肽和赖脯胰岛素迅速作用的特征，正如人们在三联注射的曲线中可见的那样。大约60分钟后，血糖升高长至3小时，然后是第二较慢相，其特征在于直至注射之后6小时不太显著的低血糖活性。该第二基础相是甘精胰岛素基础作用的特征，并且类似地在三联注射和组合物 CB2c的曲线上观察到。这些结果表明艾塞那肽和胰岛素的作用确实在组合物CB2c中保持。

Claims (36)

1.pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的组合物，其至少包含：
a)一种等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素，以及
b)餐时胰岛素和/或胃肠激素，以及
c)带有羧酸根电荷和疏水性基团Hy的共聚氨基酸，所述共聚氨基酸由谷氨酸或天冬氨酸单元组成，并且所述疏水性基团Hy是下式I的基团：
其中：
-GpR是式II或II’基团：
-GpA是式III或III’基团：
-GpC是式IV基团：
-Hy包含多于30个碳原子，
-*表示通过酰胺官能团结合的不同基团的连接位点；
-a是等于0或1的整数；
-b是等于0或1的整数；
-p是等于1或2的整数，并且
○如果p等于1，则a等于0或1且GpA是式III’基团；并且
○如果p等于2，则a等于1且GpA是式III基团；
-c是等于0或1的整数，并且如果c等于0，则d等于1或2；-d是等于0、1或2的整数；
-r是等于0或1的整数，并且
○如果r等于0，则式I疏水性基团通过所述疏水性基团的羰基与所述共聚氨基酸的N端位置的氮原子之间的共价键与所述共聚氨基酸结合，由此形成酰胺官能团；并且
○如果r等于1，则式I疏水性基团如下与所述共聚氨基酸结合：
■通过所述疏水性基团的氮原子与所述共聚氨基酸的羰基之间的共价键，由此形成酰胺官能团，或
■通过所述疏水性基团的羰基与所述共聚氨基酸的N端位置的氮原子之间的共价键，由此形成酰胺官能团；
-R是选自以下的基团：
○直链或支链二价烷基，如果GpR是式II基团的话，其包含2至12个碳原子，或者，如果GpR是式II’基团的话，其包含1至11个碳原子；
○直链或支链二价烷基，如果GpR是式II基团的话，其包含2至11个碳原子，或者，如果GpR是式II’基团的话，其包含1至11个碳原子，所述烷基带有一个或更多个-CONH2官能团；以及
○包含4至14个碳原子和1至5个氧原子的未经取代的醚或聚醚基团；
-A是包含1至6个碳原子的直链或支链烷基；
-B是包含1至9个碳原子的直链或支链烷基，其任选地包含芳环；
-Cx是直链或支链的一价烷基，其中x表示碳原子数，并且：
○如果p等于1，则x为11至25(11≤x≤25)；
○如果p等于2，则x为9至15(9≤x≤15)，
-疏水性基团的数目与谷氨酸或天冬氨酸单元的数目之间的比值i为0＜i≤0.5；
-当共聚氨基酸带有数个疏水性基团时，则它们是相同或不同的，
-谷氨酸或天冬氨酸单元的聚合度DP为5至250；
-游离酸官能团是选自Na+和K+的碱性阳离子的盐的形式。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述疏水性基团选自下式V所示的其中p＝1的式I疏水性基团：
GpR、GpA、GpC、r和a具有上文给出的定义。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述疏水性基团选自下式VI所示的其中a＝1且p＝2的式I疏水性基团：
其中：
GpR、GpA、GpC、r和a具有上文给出的定义。
4.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自下式VII的共聚氨基酸：
其中：
·D独立地表示-CH2-基团(天冬氨酸单元)或-CH2-CH2-基团(谷氨酸单元)，
·Hy是选自式I、V或VI疏水性基团的疏水性基团，其中r＝1，且GpR是式II基团，
·R1是选自式I、V或VI疏水性基团的疏水性基团，其中r＝0或r＝1且GpR是式II’基团；或者是选自H、C2至C10直链酰基、C4至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸的基团，
·R2是选自式I、V或VI疏水性基团的疏水性基团，其中r＝1且GpR是式II基团；或者是-NR’R”基团，相同或不同的R’和R”选自H、C2至C10直链或支链或环状烷基、苄基，并且所述烷基R’和R”一起任选地形成一个或更多个饱和的、不饱和的和/或芳香族的碳环和/或任选地包含选自O、N和S的杂原子；
·X表示选自碱性阳离子的阳离子实体；
·n+m表示所述共聚氨基酸的聚合度DP，即每个共聚氨基酸链的单体单元的平均数，并且5≤n+m≤250。
5.根据前一权利要求所述的组合物，其特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性电荷的共聚氨基酸选自下式VIIa的式VII共聚氨基酸，其中R1＝R’1且R2＝R’2：
其中：
-m、n、X、D和Hy具有上文给出的定义，
-R’1是选自H、C2至C10直链酰基、C4至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸的基团，
-R’2是-NR’R”基团，相同或不同的R’和R”选自H、C2至C10直链或支链或环状烷基、苄基，并且所述烷基R’和R”一起任选地形成一个或更多个饱和的、不饱和的和/或芳香族的碳环和/或任选地包含选自O、N和S的杂原子。
6.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自下式VIIb的式VII共聚氨基酸，其中n＝0：
其中m、X、D、R1和R2具有上文给出的定义，并且R1或R2中的至少一个是式I、V或VI疏水性基团。
7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb的式VII共聚氨基酸，其中n＝0并且R1或R2是式I、V或VI疏水性基团。
8.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VIIb共聚氨基酸，其中R2是式I、V或VI疏水性基团，其中r＝1且GpR是式II。
9.根据权利要求4至8中任一项所述的组合物，其特征在于，R1是选自以下的基团：C2至C10直链酰基、C4至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸。
10.根据前一权利要求所述的组合物，其特征在于，R1是选自C2至C10直链酰基或C4至C10支链酰基的基团。
11.根据权利要求4至10中任一项所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VII、VIIa或VIIb共聚氨基酸，其中所述共聚氨基酸选自其中基团D是-CH2-基团(天冬氨酸单元)的共聚氨基酸。
12.根据权利要求4至10中任一项所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸选自式VII、VIIa或VIIb共聚氨基酸，其中所述共聚氨基酸选自其中基团D是-CH2-CH2-基团(谷氨酸单元)的共聚氨基酸。
13.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，等电点为5.8至8.5的所述基础胰岛素是甘精胰岛素。
14.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，其包含40至500U/mL的等电点为5.8至8.5的基础胰岛素。
15.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多60mg/mL。
16.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多40mg/mL。
17.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多20mg/mL。
18.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的浓度为至多10mg/mL。
19.pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的组合物，其至少包含：
a)一种等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素，以及
b)餐时胰岛素，以及
c)带有羧酸根电荷和至少一个式I疏水性基团的共聚氨基酸。
20.根据前一权利要求所述的组合物，其特征在于，所述餐时胰岛素是人胰岛素。
21.根据权利要求19和20中任一项所述的组合物，其特征在于，对于餐时胰岛素与等电点为5.8至8.5的基础胰岛素的组合，所述组合物总共包含40至500U/mL的胰岛素。
22.根据权利要求19至21中任一项所述的组合物，其特征在于，所述等电点为5.8至8.5的基础胰岛素与所述餐时胰岛素之间的以百分比表示的比例为25/75、30/70、40/60、50/50、60/40、70/30、80/20或90/10。
23.pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的组合物，其至少包含：
a)一种等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素，以及
b)胃肠激素，以及
c)带有羧酸根电荷和至少一个式I疏水性基团的共聚氨基酸。
24.pH为6.0至8.0的可注射水溶液形式的组合物，其至少包含：
a)一种等电点(pI)为5.8至8.5的基础胰岛素，以及
b)餐时胰岛素和胃肠激素，以及
c)带有羧酸根电荷和至少一个式I疏水性基团的共聚氨基酸。
25.根据前一权利要求所述的组合物，其特征在于，所述胃肠激素选自艾塞那肽、利拉鲁肽、利西拉肽、阿必鲁肽和杜拉鲁肽、其类似物或衍生物，及其可药用盐。
26.根据权利要求23至24中任一项所述的组合物，其特征在于，所述胃肠激素是杜拉鲁肽、其类似物或衍生物，及其可药用盐。
27.根据权利要求23至24中任一项所述的组合物，其特征在于，所述胃肠激素是艾塞那肽、其类似物或衍生物，及其可药用盐。
28.根据权利要求23至24中任一项所述的组合物，其特征在于，所述胃肠激素是利拉鲁肽、其类似物或衍生物，及其可药用盐。
29.根据权利要求23至24中任一项所述的组合物，其特征在于，所述胃肠激素是利西拉肽、其类似物或衍生物，及其可药用盐。
30.根据权利要求23至28中任一项所述的组合物，其特征在于，胃肠激素的浓度在0.01至10mg/mL的区间内。
31.根据权利要求24或26所述的组合物，其特征在于，其包含40U/mL至500U/mL等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.05至0.5mg/mL的艾塞那肽。
32.根据权利要求24或27所述的组合物，其特征在于，其包含40U/mL至500U/mL等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及1至10mg/mL的利拉鲁肽。
33.根据权利要求24或28所述的组合物，其特征在于，其包含40U/mL至500U/mL等电点为5.8至8.5的基础胰岛素，以及0.01至1mg/mL的利西拉肽。
34.pH为7至7.8的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至8.5的基础胰岛素、以及餐时胰岛素。
35.pH为7至7.8的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至8.5的基础胰岛素、以及胃肠激素。
36.pH为7至7.8的单剂量制剂，其包含等电点为5.8至8.5的基础胰岛素、餐时胰岛素、以及胃肠激素。
CN201780035320.2A 2016-06-07 2017-06-07 包含带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的可注射溶液 Active CN109379888B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1655222A FR3052072A1 (fr) 2016-06-07 2016-06-07 Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
FR1655222 2016-06-07
PCT/EP2017/063886 WO2017211916A1 (fr) 2016-06-07 2017-06-07 Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5, une insuline prandiale et/ou une hormone gastrointestinale, et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109379888A true CN109379888A (zh) 2019-02-22
CN109379888B CN109379888B (zh) 2021-10-29

Family

ID=57348773

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201780035320.2A Active CN109379888B (zh) 2016-06-07 2017-06-07 包含带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的可注射溶液
CN201780047889.0A Active CN109640953B (zh) 2016-06-07 2017-06-07 包含带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的可注射溶液

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201780047889.0A Active CN109640953B (zh) 2016-06-07 2017-06-07 包含带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的可注射溶液

Country Status (12)

Country Link
US (2) US10383920B2 (zh)
EP (2) EP3463293B1 (zh)
JP (1) JP2019517555A (zh)
CN (2) CN109379888B (zh)
BR (2) BR112018075140A2 (zh)
EA (2) EA039333B1 (zh)
FR (1) FR3052072A1 (zh)
MX (2) MX2018015068A (zh)
PH (1) PH12018502558A1 (zh)
SA (2) SA518400588B1 (zh)
SG (2) SG11201810937WA (zh)
WO (2) WO2017211903A1 (zh)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3070264A1 (fr) * 2017-08-24 2019-03-01 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris de 5,8 a 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
FR3083089A1 (fr) * 2018-06-29 2020-01-03 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
CN111836616B (zh) 2017-12-07 2024-01-16 阿道恰公司 包含至少一种pi在5.8与8.5之间的基础胰岛素和带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸的ph 7为7的可注射溶液
CN111683674A (zh) 2017-12-07 2020-09-18 阿道恰公司 包含胰淀素、胰淀素激动剂受体或胰淀素类似物和共聚氨基酸的可注射水溶液形式的组合物
MX2020005913A (es) 2017-12-07 2020-10-19 Adocia Solución inyectable a ph 7 que comprende al menos una insulina basal que tiene un pi de entre 5.8 y 8.5 y un copoliaminoácido con cargas de carboxilato y radicales hidrofóbicos.
KR20200106891A (ko) 2017-12-07 2020-09-15 아도시아 pI가 5.8 내지 8.5인 적어도 1종의 기저 인슐린, 및 카복실산염 전하 및 소수성 라디칼을 보유하는 코-폴리아미노산을 포함하는 pH 7의 주사용 용액
US11173109B2 (en) 2017-12-07 2021-11-16 Adocia Compositions in the form of an injectable aqueous solution comprising amylin, an amylin receptor agonist or an amylin analog and a co-polyamino acid
US20190275108A1 (en) * 2017-12-07 2019-09-12 Adocia Compositions in the form of an injectable aqueous solution comprising amylin, an amylin receptor agonist or an amylin analogue and a co-polyamino acid
FR3083086A1 (fr) * 2018-06-29 2020-01-03 Adocia Compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable comprenant de l'amyline, un agoniste au recepteur de l'amyline ou un analogue d'amyline et un co-polyaminoacide
FR3067247A1 (fr) * 2018-06-07 2018-12-14 Adocia Compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide
WO2019243628A1 (fr) * 2018-06-22 2019-12-26 Adocia Composition injectable a ph 7 comprenant un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes et au moins une insuline basale presentant au moins un effet prandial et un effet basal
FR3084586B1 (fr) * 2018-08-03 2020-11-06 Adocia Compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable comprenant de l'amyline, un agoniste au recepteur de l'amyline ou un analogue d'amyline et un compose amphiphile porteur de radicaux hydrophobes
FR3084585B1 (fr) * 2018-08-03 2020-11-06 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un compose amphiphile porteur de radicaux hydrophobes
US20200179489A1 (en) * 2018-12-07 2020-06-11 Adocia Injectable solution at ph 7 comprising at least one basal insulin which pi is from 5.8 to 8.5 and a co-polyamino-acid bearing carboxylate charges and hydrophobic radicals and a limited amount of m-cresol
WO2020115334A1 (fr) * 2018-12-07 2020-06-11 Adocia Procede de preparation d'une composition stable sous forme d'une solution aqueuse injectable
WO2020245470A1 (fr) 2019-06-07 2020-12-10 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5, du liraglutide et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1925867A (zh) * 2003-11-21 2007-03-07 弗拉梅技术公司 持续释放的白细胞介素的药物配方及其治疗学应用
WO2008135562A1 (fr) * 2007-05-03 2008-11-13 Flamel Technologies Formulations pharmaceutiques auto-precipitantes pour la liberation modifiee de principe actif
CN104114155A (zh) * 2012-01-09 2014-10-22 阿道恰公司 Ph为7并且至少包含pi为5.8至8.5之基础胰岛素和经取代共聚(氨基酸)的可注射溶液

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4826818A (en) 1983-10-26 1989-05-02 Kanebo Ltd. Proteinaceous emulsifier, process for preparing same and emulsion type cosmetic compositions containing same
DE3837825A1 (de) 1988-11-08 1990-05-10 Hoechst Ag Neue insulinderivate, ihre verwendung und eine sie enthaltende pharmazeutische zubereitung
FR2801226B1 (fr) 1999-11-23 2002-01-25 Flamel Tech Sa Suspension colloidale de particules submicroniques de vectorisation de principes actifs et son mode de preparation
EP1545460A4 (en) 2001-12-20 2005-11-16 Lilly Co Eli INSULIN MOLECULE WITH TEMPORARY EFFECT
FR2840614B1 (fr) 2002-06-07 2004-08-27 Flamel Tech Sa Polyaminoacides fonctionnalises par de l'alpha-tocopherol et leurs applications notamment therapeutiques
EP1620465A2 (en) 2003-04-29 2006-02-01 Eli Lilly And Company Insulin analogs having protracted time action
AU2012293463B2 (en) * 2011-08-10 2016-08-04 Adocia Injectable solution of at least one type of basal insulin
FR2985429B1 (fr) 2012-01-09 2016-07-29 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un polyaminoacide substitue obtenu par un procede de polymerisation controle
FR3001896B1 (fr) 2013-02-12 2015-07-03 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le point isolectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et un polymere anionique hydrophobise
FR3001895B1 (fr) 2013-02-12 2015-07-03 Adocia Solution injectable a ph7 comprenant au moins une insuline basale dont le point isoelectrique est compris en 5,8 et 8,5 et un compose anionique porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1925867A (zh) * 2003-11-21 2007-03-07 弗拉梅技术公司 持续释放的白细胞介素的药物配方及其治疗学应用
WO2008135562A1 (fr) * 2007-05-03 2008-11-13 Flamel Technologies Formulations pharmaceutiques auto-precipitantes pour la liberation modifiee de principe actif
CN104114155A (zh) * 2012-01-09 2014-10-22 阿道恰公司 Ph为7并且至少包含pi为5.8至8.5之基础胰岛素和经取代共聚(氨基酸)的可注射溶液

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
金一 等: "蛋白质及多肽类药物长效化研究进展", 《中国血吸虫病防治杂志》 *

Also Published As

Publication number Publication date
BR112018075151A2 (pt) 2019-03-26
SA518400596B1 (ar) 2022-03-16
CN109640953B (zh) 2021-10-29
CN109640953A (zh) 2019-04-16
US20170348396A1 (en) 2017-12-07
EA039333B1 (ru) 2022-01-14
SA518400588B1 (ar) 2022-03-07
US10548952B2 (en) 2020-02-04
MX2018015067A (es) 2019-05-09
CN109379888B (zh) 2021-10-29
SG11201810935SA (en) 2019-01-30
EP3463292B1 (fr) 2020-08-05
PH12018502558A1 (en) 2019-10-14
FR3052072A1 (fr) 2017-12-08
WO2017211903A1 (fr) 2017-12-14
EA201892737A1 (ru) 2019-05-31
EA201892736A1 (ru) 2019-05-31
EA039363B1 (ru) 2022-01-18
BR112018075140A2 (pt) 2019-03-26
US10383920B2 (en) 2019-08-20
US20170348423A1 (en) 2017-12-07
WO2017211916A1 (fr) 2017-12-14
SG11201810937WA (en) 2019-01-30
EP3463292A1 (fr) 2019-04-10
JP2019517555A (ja) 2019-06-24
MX2018015068A (es) 2019-05-09
EP3463293B1 (fr) 2021-05-12
EP3463293A1 (fr) 2019-04-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109379888A (zh) 至少包含一种pI为5.8至8.5的基础胰岛素、餐时胰岛素和/或胃肠激素、以及带有羧酸根电荷和疏水性基团的共聚氨基酸的PH 7的可注射溶液
CN110366424A (zh) 包含胰淀素、胰淀素受体激动剂或胰淀素类似物和共聚氨基酸的可注射水溶液形式的组合物
CN104114155B (zh) Ph为7并且至少包含pi为5.8至8.5之基础胰岛素和经取代共聚(氨基酸)的可注射溶液
CN109562064A (zh) 包含人胰高血糖素和统计共聚氨基酸的可注射水溶液形式的组合物
JP4113778B2 (ja) 真性糖尿病の治療方法
Shah et al. Oral delivery of proteins: progress and prognostication
CN101027318A (zh) 胰岛素－低聚物共轭物，制剂及其用途
CN111836616B (zh) 包含至少一种pi在5.8与8.5之间的基础胰岛素和带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸的ph 7为7的可注射溶液
Park et al. Cationic and thermosensitive protamine conjugated gels for enhancing sustained human growth hormone delivery
CN111727049A (zh) Ph 7的包含至少一种pi在5.8与8.5之间的基础胰岛素和带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸的可注射溶液
Bernkop-Schnürch Mucoadhesive Polymers: Basics, Strategies, and Future Trends
US20190388515A1 (en) Injectable solution at ph 7 comprising at least one basal insulin the pi of which is from 5.8 to 8.5 and a co-polyamino acid bearing carboxylate charges and hydrophobic radicals
Vahdatpour et al. The systematic review of proteins digestion and new strategies for delivery of small peptides
US20190274953A1 (en) Ph 7 injectable solution comprising at least one basic insulin with a pi comprised from 5.8 to 8.5 and a co-polyaminoacide bearing carboxylate charges and hydrophobic radicals
FR3067247A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide
CN111698999A (zh) 包含至少一种pi在5.8与8.5之间的基础胰岛素和带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸的ph为7的可注射溶液
Tuesca Synthesis, characterization, and application of polyethylene glycol modified insulin for oral delivery using complexation hydrogels

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
EE01 Entry into force of recordation of patent licensing contract

Application publication date: 20190222

Assignee: Tonghua Dongbao Pharmaceutical Co., Ltd.

Assignor: Adocia

Contract record no.: 2019990000215

Denomination of invention: INJECTABLE SOLUTION AT PH 7, COMPRISING AT LEAST ONE BASAL INSULIN WHOSE PI IS BETWEEN 5.8 AND 8.5, A PRANDIAL INSULIN AND/OR A GASTROINTESTINAL HORMONE, AND A COPOLYAMINO ACID BEARING CARBOXYLATE CHARGES AND HYDROPHOBIC RADICALS

License type: Exclusive License

Record date: 20190704

EE01 Entry into force of recordation of patent licensing contract
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40003357

Country of ref document: HK

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant