CN109369659B

CN109369659B - 一种jak抑制剂的合成方法

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Publication number: CN109369659B
Application number: CN201811484426.3A
Authority: CN
Inventors: 李新生; 陈雪珂; 罗红敏
Original assignee: Zhejiang Normal University CJNU
Current assignee: Zhejiang Normal University CJNU
Priority date: 2018-12-06
Filing date: 2018-12-06
Publication date: 2020-10-27
Anticipated expiration: 2038-12-06
Also published as: CN109369659A

Abstract

本发明公开了一种JAK抑制剂的合成方法，包括：将中间体A‑8和中间体B‑3缩合得到中间体AB‑1，中间体AB‑1经过去保护后得到中间体AB‑2,AB‑2环合后得到中间体AB‑3，AB‑3去保护得到中间体AB‑4，AB‑4再次去保护中间体AB‑5，AB‑5经过缩合反应得到JAK抑制剂1。本发明的优点主要体现在：以手性催化的方法高产率和高手性纯度制备中间体A‑8、高产率得到中间体B‑3及JAK抑制剂1。几乎杜绝了无用对映体的产生，减少了环境的压力，同时反应产率高，操作简单，后处理简便。本发明的反应条件也能应用于大量制备，适合工业化生产，因而具有较高的实用价值和社会经济效益。

Description

一种JAK抑制剂的合成方法

技术领域

本发明涉及药物合成技术领域，涉及采用手性催化方法合成一种JAK抑制剂的方法。

背景技术

JAK(just another kinase或janus kinase)激酶，是一类非受体酪氨酸激酶家族，已发现四个成员，即JAK1、JAK2、JAK3和TYK1。JAK的底物为STAT，即信号转导子和转录激活子(signal transducer and activator of transcription，STAT)。STAT被JAK磷酸化后发生二聚，然后穿过核膜进入核内调节相关基因的表达，该信号通路称为JAK-STAT途径，因此JAK在免疫介导的疾病病理生理过程中发挥重要作用，可以用于治疗一些自身免疫性疾病如治疗特应性皮炎、风湿性关节炎，银屑病、溃疡性结肠炎等，2017年首个类风湿关节炎口服靶向药物JAK激酶抑制剂——托法替尼(尚杰)在国内上市，是第一个被批准用于治疗类风湿关节炎的JAK激酶抑制剂，其能够阻止细胞内可导致类风湿关节炎的炎症细胞因子的信号转导。本申请所合成的JAK抑制剂1(ABT-494)对JAK1的抑制效果较高，其IC₅₀值为43nM，目前在临床中(1、R Shreberk-Hassidim，Y Ramot，A Zlotogorski，Janus kinaseinhibitors in dermatology:A systematic review，Journal of the American Academyof Dermatology,2017,76(4):745-7532；2、http://www.medchemexpress.cn/upadacitinib.html)。

目前JAK抑制剂1的合成方法未见有文献报道，其最相关的类似物结构差别也较大，合成方法差别较大，(1、Louis A.Carpino，Hideko Imazumi,A.El-Faham,FernandoJ.Ferrer,etal.The Uronium/Guanidinium Peptide Coupling Reagents:Finally theTrue Uronium Salts Angew.Chem.Int.Ed.2002,41,(3)，441-445；2、Stacy Van Epps,Bryan Fiamengo,Jeremy Edmunds，Design and synthesis of tricyclic cores forkinase inhibition,Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters，2013 23 693–698)。

JAK抑制剂1是一个手性化合物，专利文献(WO 2015/061665 Al)报道了其消旋体的合成方法，该专利文献报道收率很低，且对映体的获得要通过手性制备柱拆分获得。另一专利文献(US 2013/0072470 Al)报道了其消旋体的合成方法，通过化学拆分的方法获得需要的对映体，但拆分效果极差，收率13％，对映体纯度也不高，只有96％ee值。国内未见有相关文献报道。

发明内容

本发明提供了一种JAK抑制剂的合成方法，目的在于针对现有技术的不足，提供一种JAK抑制剂1合成方法，有效减少杂质的产生，提高目标产物的收率及纯度。

本发明解决上述技术问题所提供的技术方案为：

一种JAK抑制剂的合成方法，包括：将中间体A-8和中间体B-3缩合得到中间体AB-1，中间体AB-1经过去保护后得到中间体AB-2,AB-2环合后得到中间体AB-3，AB-3去保护得到中间体AB-4，AB-4再次去保护中间体AB-5，AB-5经过缩合反应得到JAK抑制剂1(Upadacitinib又称：ABT-494)；

所述JAK抑制剂1及中间体AB-5，AB-4，AB-3，AB-2，AB-1，A-8，B-3，结构如下式所示：

反应过程如下：

1、JAK抑制剂1合成方法，包括以下步骤：

a)中间体AB-1由中间体A-8和中间体B-3在碱作用下缩合得到：中间体A-8溶于溶剂中和中间体B-3在碱的存在下发生烷基化反应得到中间体AB-1。

所述的溶剂包括二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲亚砜、四氢呋喃中的一种或多种；优选的溶剂包括二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺中的一种或多种；

反应体系所用的碱为氢化钠，叔丁醇锂，叔丁醇钠，叔丁醇钾，优选为氢化钠，叔丁醇钠；

所述中间体A-8、中间体B-3和碱的摩尔比为1～1.2:1：0.9～1；反应温度为-20～10℃，优选为-10～0℃；反应时间30分钟到2小时之间，优选为0.5～1h；

b)中间体AB-2由中间体AB-1脱去Boc保护基合成：中间体AB-1溶于溶剂中，加入酸脱去叔丁基保护剂得到中间体AB-2。

所述的溶剂包括乙腈、丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、乙酸甲酯、四氢呋喃、氯仿、二氯甲烷中的一种或多种，优选为乙腈和二氯甲烷；反应体系所用的酸为1-37％的盐酸、1-98％的硫酸，1-85％的磷酸、甲酸、三氟乙酸，优选为甲酸和三氟乙酸；

中间体AB-1和酸的摩尔比为1：1～10，优选为1：5；反应温度为0～50℃，优选为20～40℃；反应时间30分钟到4小时之间，优选为1～2.5h；

c)中间体AB-3由中间体AB-2在酸酐作用下环合得到：中间体AB-2溶于溶剂中，加入酸酐，在热作用下环合为中间体AB-3。

所述的溶剂为乙腈、丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、二氧六环、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、氯仿，优选为乙腈、甲基叔丁基醚和二氧六环中的一种或多种；反应体系所用的酸酐为三氟乙酸酐、苯磺酸酐、对甲苯磺酸酐中的一种或多种，优选为三氟乙酸酐；

所述中间体AB-2和酸酐的摩尔比为1：1～20，优选为1：1～5；反应温度为50～100℃，优选为70～80℃；反应时间30分钟到6小时之间，优选为2～4h；

d)中间体AB-4由中间体AB-3脱去Ts保护基合成：中间体AB-3溶于溶剂中，加入碱进行皂化反应，得到中间体AB-4。

所述的溶剂为水，甲醇、乙醇、乙腈、二氧六环、四氢呋喃中的一种或多种，优选的溶剂为水，甲醇、乙醇中的一种或多种；反应体系所用的碱为10～50％的NaOH溶液、10～50％的LiOH溶液、10～50％的KOH溶液中的一种或多种，优选为20％的NaOH或KOH溶液的；

所述中间体AB-3和碱的摩尔比为1：1～10，优选为1：1～5；反应温度为0～50℃，优选为20～40℃；反应时间30分钟到4小时之间，优选为1～2.5h；

e)中间体AB-5由中间体AB-4脱去Cbz保护基得到：中间体AB-4溶于含10～30％乙酸的甲醇、乙醇、异丙醇、二氧六环、四氢呋喃；加入催化剂，加压氢化反应得到中间体AB-5；所述的溶剂优选为甲醇或乙醇；应体系所用的催化剂为5～10％的Pd(OH)₂/C,5～10％的Pd/C，DABCO，优选为10％的Pd/C或者10％的Pd/C与DABCO的混合物，两者质量比为1:0.1～0.5；反应体系的氢气压力为1-30atm，优选为1-10atm；AB-4和催化剂的摩尔比为1：5～20％，优选为1：8～15％，进一步优选为1：9～10％；反应温度为0～50℃，优选为20～40℃；反应时间0.5小时到20小时之间，优选为12～16h；

f)JAK抑制剂1的由中间体AB-5在羰基二咪唑和三氟乙胺的作用下合成：羰基二咪唑溶于溶剂中，在一定温度下加入三氟甲基乙胺和碱反应0.5～2h后，加入溶于溶剂的中间体AB-5继续反应，得到目标产品JAK抑制剂1；

所述的溶剂为乙腈、丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、二氧六环、二氯甲烷、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、氯仿，甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或多种，优选为乙腈、四氢呋喃、二氯甲烷；反应体系所用的碱为吡啶、三乙胺、三丁胺、NaHCO₃，Na₂CO₃，KHCO₃，K₂CO₃中的一种或多种，优选为吡啶或三乙胺；

所述中间体AB-5、羰基二咪唑和三氟乙胺的摩尔比为1：1～3：1～3，优选为1：1～2：1～1.8；所述中间体AB-5、碱的比例为1：1～3；进一步优选为1：1～2；反应温度为0～50℃，优选为10～30℃；反应时间30分钟到10小时之间，优选为4～8h。

作为优选的方案，在制备AB-3时，所述中间体AB-3由中间体AB-1在酸酐作用下一步得到，反应温度为50～100℃。摩尔比例等可参考上述相关内容，比如采用一步法时，中间体AB-1与酸酐的摩尔比为1:1～5；进一步优选为1:1～3；反应溶剂可以为乙腈、丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、二氧六环、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、氯仿中的一种或多种，优选为乙腈、甲基叔丁基醚和二氧六环中的一种或多种；反应体系所用的酸酐为三氟乙酸酐、苯磺酸酐、对甲苯磺酸酐中的一种或多种，优选为三氟乙酸酐。反应温度优选为70～80℃。

一种中间体A-8合成方法的制备方法，包括：吡咯烷酮酯A-1与乙基溴化镁反应得到中间体A-2，A-2在酸性条件下脱水得到不饱和酯A-3，A-3经过皂化反应得到二氢吡咯酸A-4，A-4经过不对称氢化得到吡咯烷羧酸A-5，A-5经过取代反应得到酰氯A-6，A-6经过重氮甲基化反应得到重氮甲基酮A-7，A-7用氢溴酸分解得到溴代酮A-8；

所述中间体A-8，A-7，A-6，A-5，A-4，A-3，A-2，A-1，结构如下式所示：

2、JAK抑制剂中间体A-8合成方法，包括以下步骤：

a)中间体A-2由中间体A-1和乙基溴化镁反应得到：A-1溶于溶剂中，加入乙基溴化镁反应一定时间得到A-2；

所述的溶剂为二氧六环、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、乙二醇二甲醚中的一种或多种，优选为四氢呋喃和乙二醇二甲醚；A-1和乙基溴化镁的摩尔比为1：1～1.3，优选为1：1～1.1；反应温度为-10～10℃，优选为0～5℃；反应时间30分钟到2小时之间，优选为0.5～1h；

b)中间体A-3由中间体A-2在酸作用下脱水得到：A-2溶于溶剂中，加入一定量的酸催化脱水，反应一定时间得到A-3；

所述的溶剂为乙腈、丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、二氧六环、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、氯仿、甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或多种，优选为乙腈、四氢呋喃和乙二醇二甲醚；

所述的酸为1-37％的盐酸、1-98％的硫酸，1-85％的磷酸、甲酸、三氟乙酸，优选为50％的硫酸和85％的磷酸；

所述中间体A-2和酸的摩尔比为1：1～10，优选为1：3～8；反应温度为30～80℃，优选为50～70℃；反应时间30分钟到3小时之间，优选为1.5～2h；

c)中间体A-4由中间体A-3皂化得到：A-3溶于溶剂中，加入碱进行皂化反应，反应一定时间得到A-4；

反应中，所述的溶剂为水、二氧六环、四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或多种，优选为水、甲醇、乙醇；

反应体系所用的碱为10～50％的NaOH溶液、10～50％的LiOH溶液、10～50％的KOH溶液，优选为10-20％的NaOH和KOH溶液；

中间体A-3和碱的摩尔比为1：1～10，优选为1：3～7；反应温度为0～50℃，优选为25～40℃；反应时间30分钟到2小时之间，优选为1.5～2h；

d)中间体A-5由中间体A-4进行不对称氢化合成：A-4溶于溶剂中，加入碱和催化剂进行进行加压氢化反应，得到中间体A-5；

所述的溶剂为水、乙腈、二氧六环、四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或多种，优选为甲醇、乙醇、异丙醇；

反应体系所用的碱为三乙胺，三丁胺、NaHCO₃，Na₂CO₃，KHCO₃，K₂CO₃，Cs₂CO₃，优选为三乙胺，三丁胺、NaHCO₃，Cs₂CO₃；反应的催化剂为S-BINAP-Ru(OAc)₂、S-Segphos-Ru(OAc)₂、S-MeO-Biphep-Ru(OAc)₂络合物，优选为S-BINAP-Ru(OAc)₂和S-MeO-Biphep-Ru(OAc)₂；催化剂、A-4和碱的摩尔比为1：20～4000：22～4400，优选为1：100～4000：100～4400；反应温度为50～100℃，优选为50～80℃；反应体系的氢气压力为1-80atm，优选为30-50atm；反应时间0.5小时到20小时之间，优选为1-6h。

e)中间体A-6由中间体A-5的取代反应得到：A-5溶于溶剂中，加入酰氯反应一定时间得到A-6；

所述的溶剂为二氧六环、四氢呋喃、甲基叔丁基醚，氯仿、二氯甲烷，优选为二氯甲烷和四氢呋喃中的一种或多种；反应体系所用的酰氯为氯化亚砜或草酰氯；中间体A-5和酰氯的摩尔比为1：1～10，优选为1～4；反应温度为0～80℃，优选为40～60℃；反应时间30分钟到8小时之间,优选为2～4h。

f)中间体A-7由中间体A-6的重氮甲基化反应得到：A-6溶于溶剂中，加入一定量的三甲基硅基重氮甲烷溶液，反应一定时间得到A-7；

反应体系所用的溶剂为乙腈、二氧六环、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、氯仿、二氯甲烷，优选为乙腈和四氢呋喃中的一种或多种；反应体系所用的重氮化试剂为三甲基硅基重氮甲烷；中间体A-6和三甲基硅基重氮甲烷的摩尔比为1：1～3，优选为1～1.5；反应温度为0～40℃，优选为20～30℃；反应时间30分钟到6小时之间，优选为1～4h；

g)中间体A-8由中间体A-7在溴化氢的作用下分解得到：A-7溶于溶剂中，加入一定量的溴化试剂，反应一定时间得到A-8；

反应体系所述的溶剂为水、乙腈、二氧六环、四氢呋喃、丙酮中的一种或多种，优选为水、二氧六环、丙酮；反应体系所用的溴化试剂为30-48％溴化氢水溶液、20-33％溴化氢醋酸溶液、优选为40-48％溴化氢水溶液和25-30％溴化氢醋酸溶液；中间体A-7和溴化氢的摩尔比为1：1～8；反应温度为0～40℃，优选为15～30℃；反应时间30分钟到6小时之间,0.5～1.5h；

一种中间体B-3的合成方法，包括：溴代二氮杂吲哚B-1与对甲苯磺酰氯反应得到保护的溴代二氮杂吲哚B-2，B-2在催化剂催化下与氨基甲酸酯反应得到双保护的中间体B-3；

所述中间体B-3，B-2，B-1结构如下式所示：

3、JAK抑制剂中间体B-3合成方法，包括以下步骤：

a)：中间体B-2由中间体B-1经磺酰化反应得到碱悬浮于溶剂中，加入溶于溶剂中的中间体B-1，反应0.5～3h后，加入溶于溶剂中的磺酰氯，反应一定时间得到中间体B-2；

所述的磺酰氯为对甲苯磺酰氯、苯磺酰氯、甲磺酰氯，优选为对甲苯磺酰氯；所述的溶剂为二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲亚砜、二氧六环、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、乙二醇二甲醚，优选为二甲基甲酰胺、四氢呋喃和乙二醇二甲醚；反应体系所用的碱为氢化钠、叔丁醇锂、叔丁醇钠、叔丁醇钾、NaOH，KOH、CsOH，优选为叔丁醇钠、氢化钠和CsOH；中间体B-1、对甲苯磺酰氯和碱的摩尔比为1：1～1.3：1～1.3，优选为1：1～1.3：1～1.3；反应温度为-10～40℃，0～30℃；反应时间30分钟到12小时之间，优选为5～10h；

b)中间体B-3由中间体B-2在催化剂催化下，经氨基取代反应得到：中间体B-2和氨基甲酸酯溶于溶剂中，加入碱和一定量的催化剂进行取代反应，反应一定时间得到中间体B-3；

所述的溶剂为二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲亚砜、二氧六环、甲基叔丁基醚、乙二醇二甲醚中的一种或多种，优选为二甲基乙酰胺、二氧六环、乙二醇二甲醚；反应体系所用的碱为K₂CO₃，Cs₂CO₃，优选为Cs₂CO₃；反应的催化剂为Ph₃P-Pd(OAc)₂、Xanphos-Pd(OAc)₂络合物；反应所述的氨基甲酸酯为氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯、氨基甲酸异丁酯、氨基甲酸叔丁酯，优选为氨基甲酸叔丁酯和氨基甲酸乙酯；催化剂、B-2、氨基甲酸酯和碱的摩尔比为1：10～100：10～200：10～250；反应温度为80～120℃；反应时间2～24h，优选为12～16h。

本发明的优点主要体现在：以手性催化的方法高产率和高手性纯度制备中间体A-8、高产率得到中间体B-3及JAK抑制剂1。几乎杜绝了无用对映体的产生，减少了环境的压力，同时反应产率高，操作简单，后处理简便。本发明的反应条件也能应用于大量制备，适合工业化生产，因而具有较高的实用价值和社会经济效益。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做出进一步的具体说明，但本发明并不限于这些实施例。

实施例1：中间体A-2的合成

向反应器中加入10mmol A-1，20mL THF，将反应器冷却到0℃后，加入2mol/L的乙基溴化镁THF溶液5.5mL，搅拌30min后，慢慢加入饱和氯化铵溶液终止反应，反应混合物用乙酸乙酯萃取2次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，得到粗品，可直接用于下步反应。

实施例2：中间体A-3的合成

实施例1获得的A-2 10mmol溶于THF 20mL，加入50％硫酸溶液10mL，搅拌下升温到60℃，反应2h后，反应液用乙酸乙酯萃取2次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用石油醚乙酸乙酯(10:1)柱层析后得到产品1.2g，产率39％，HPLC纯度≥96％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.11-1.18(t,3H),1.31-1.33(t,3H),2.66-2.69(m,2H),4.21-4.25(m,2H),4.34-4.41(t,4H),5.19(s,2H)7.36-7.40(m,5H)。MS(ESI):304.66。

实施例3：中间体A-4的合成

中间体A-3 10mmol溶于甲醇15mL，加入20％NaOH溶液10mL，搅拌下室温反应2h后，反应液用20％盐酸酸化到强酸性，用乙酸乙酯萃取2次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，得到中间体A-4 2.7g，收率98％，HPLC纯度≥99％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.11-1.15(t,3H),2.68-2.72(m,2H),4.39-4.45(m,4H),5.19(s,2H)，7.39-7.41(m,5H)。MS(ESI):276.70。

实施例4：中间体A-5的合成

在氮气保护下将A-4 20mmol、去氧三乙胺22mmol和0.1mmolS-MeO-Biphep-Ru(OAc)₂络合物溶于去氧甲醇100mL,将反应瓶放入压力釜中，通入氢气，置换反应釜内的氮气三次后，把氢气压力上到40atm，升温到70℃，反应3h后，小心放出氢气，打开反应釜，取出反应瓶，反应液用NaOH碱化到碱性，用乙酸乙酯萃取2次，回收乙酸乙酯后剩余物弃去；水层用浓盐酸酸化到酸性，用乙酸乙酯萃取3次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用乙酸乙酯结晶得到4.6g产品，产率83％，HPLC纯度≥99％，，HPLC手性纯度≥99％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.99-1.03(t,3H),1.40-1.46(m,3H),2.98-3.02(m,1H),3.10-3.14(m,1H),3.57-3.67(m,2H),3.80-3.83(m,1H),5.13-5.33(m,2H)7.23-7.40(m,5H)。MS(ESI):278.72。

实施例5：中间体A-6的合成

在氮气保护下将A-5 10mmol溶于二氯甲烷20mL，加入草酰氯30mmol，50℃反应3h后，减压去除溶剂和过量的草酰氯，得粗品直接用于下步反应。

实施例6：中间体A-7的合成

在氮气保护下将上述A-6 10mmol溶于THF20mL，加入2M三甲基硅基重氮甲烷7.5mL，20℃反应2h后，减压去除溶剂和过量的三甲基硅基重氮甲烷，得粗品直接用于下步反应。

实施例7：中间体A-8的合成

在氮气保护下将上述A-7 10mmol溶于THF 20mL，加入40％氢溴酸8mL，20℃反应1h后，反应混合物用乙酸乙酯萃取2次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用石油醚乙酸乙酯柱层析(1:1)，得到2.2g，产率63％，HPLC纯度≥93％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.96-1.00(t,3H),1.38-1.56(m,3H),2.95-3.05(m,2H),3.10-3.17(m,1H),3.4-3.51(m,2H),3.78-3.80(m,1H),3.95(s,1H),5.13-5.33(m,2H)7.29-7.40(m,5H)。MS(ESI):355.56。

实施例8：中间体B-2的合成

在氮气保护下将含量60％的NaH 12mmol悬浮于DMF 30mL中，加入溶于10mL DMF的B-110mmol，反应1h后，加入溶于20mL DMF的对甲苯磺酰氯12mmol,30℃反应8h后，反应混合物用乙酸乙酯萃取2次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用石油醚乙酸乙酯柱层析(5:1)，得到产品3.0g，产率86％，HPLC纯度≥99％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ2.50(s,3H),7.00(s,1H),7.45(d,2H),7.99(d,2H),8.39(s,1H),8.60(s,1H)。MS(ESI)：353.34。

实施例9：中间体B-3的合成

在氮气保护下将10mmol B-2溶于30mL二氧六环中，加入Cs₂CO₃15mmol，加入催化剂Xanphos-Pd(OAc)₂络合物0.3mmol，氨基甲酸叔丁酯15mmol，100℃反应15h后，反应混合物用乙酸乙酯萃取2次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用石油醚乙酸乙酯结晶(5:1)，得到产品2.74g，产率71％，HPLC纯度≥99％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.48(s,9H),2.50(s,3H),6.86(s,1H),7.43(d,2H),7.99(d,2H),8.19(s,1H),8.78(s,1H),10.11(s,1H)。MS(ESI):389.62。

实施例10：中间体AB-1的合成

在氮气保护下，将10mmol B-3溶于20mLDMF，冷却到0℃，加入含量60％的NaH10mmol，反应30min后，把上述反应液加入到含有11mmol A-8的-10℃的DMF溶液中，继续反应1h后，加入醋酸到酸性。反应混合物用乙酸乙酯萃取3次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用石油醚乙酸乙酯柱层(5:1)，得到产品4.1g，产率62％，HPLC纯度≥95％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.97-0.99(m,3H),1.52(s,9H),1.60-1.62(m,3H),2.40(s,3H),3.33-3.38(m,2H),3.51-3.57(m,2H),3.59-3.62(m,1H),4.67-4.81(m,2H),5.09-5.18(m,2H),6.47-6.64(m,1H),7.30-7.36(m,7H),7.86-7.89(m,1H),7.90-8.03(m,2H),8.92(m,1H)。MS(ESI):662.94。

实施例11：中间体AB-2的合成

将10mmolAB-1溶于10mL二氯甲烷，加入三氟乙酸30mmol，反应2h后，减压去溶剂和过量的三氟乙酸后，得到粗品5.6g，产率99％，粗品直接用于下步反应。

实施例12：中间体AB-3的合成

将上述粗品AB-2溶于20mL乙腈，加入三氟乙酸酐20mmol，升温到75℃反应3h后，加入20mL水终止反应，反应混合物用乙酸乙酯萃取3次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用石油醚乙酸乙酯柱层(4:1)，得到产品5.1g，产率93％，HPLC纯度≥99％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.74-0.78(m,3H),0.94-0.96(m,2H),2.41(s,3H),3.40-3.45(m,2H),3.77-3.81(m,1H),3.80-3.81(m,2H),3.88-3.91(m,1H),4.09-4.10(m,1H),5.16-5.18(m,2H),6.87-6.89(s,1H),7.30-7.42(m,6H),7.57(s,1H),7.77(s,1H),8.12-8.1(m,2H),8.87(s,1H)。MS(ESI):544.76。

实施例13：由AB-1一步合成中间体AB-3

将10mmolAB-1溶于20mL乙腈，加入三氟乙酸酐30mmol，升温到75℃反应4h后，加入20mL水终止反应，反应混合物用乙酸乙酯萃取3次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用石油醚乙酸乙酯柱层(4:1)，得到产品4.7g，产率87％，HPLC纯度≥99％。

实施例14：中间体AB-4的合成

将10mmol AB-3溶于20mL THF，加入20％的NaOH水溶液5mL，30℃反应2h后，加入20mL水终止反应，反应混合物用乙酸乙酯萃取3次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用石油醚乙酸乙酯柱层(1:1)，得到产品3.6g，产率91％，HPLC纯度≥95％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.74-0.77(m,3H),0.96-0.97(m,1H),1.29-1.29(m,1H),2.38-2.39(m,1H),2.59-2.61(m,1H),3.43-3.54(m,1H),3.96-3.99(m,2H),4.24-4.25(m,1H),5.21-5.2(m,2H),616(s,1H),7.30-7.43(m,6H),7.59(m,1H),8.76(s,1H),11.5(s,1H)。MS(ESI):390.71。

实施例15：中间体AB-5的合成

将AB-4 10mmol溶于乙醇20mL(包含20％的乙酸)，加入含量10％的Pd/C1.0g和0.2g DABCO，将反应瓶放入压力釜中，通入氢气，置换反应釜内的氮气三次后，把氢气压力上到5atm，反应15h后，小心放出氢气，打开反应釜，取出反应瓶，过滤回收催化剂后，剩余反应混合物用1％氨水甲醇柱层，得到产品1.7g，产率67％，HPLC纯度≥98％。¹H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.56-0.61(m,3H),0.92-1.01(m,2H),2.80-2.83(m,1H),3.48-3.49(m,1H),3.50-3.52(m,1H),3.66-3.69(m,2H),3.90-3.92(m,1H),7.01(s,1H),7.70(s,1H),8.02(s,1H),8.75(s,1H)。MS(ESI):256.53。

实施例16：一锅法合成中间体AB-5的合成

将10mmolAB-3溶于20mLTHF，加入20％的NaOH水溶液5mL，30℃反应2h后，加入20mL水终止反应，反应混合物用乙酸乙酯萃取3次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，得到粗品。

将粗品溶于乙醇溶液20mL，加入含量10％的Pd/C 1.5g，将反应瓶放入压力釜中，通入氢气，置换反应釜内的氮气三次后，把氢气压力上到5atm，反应15h后，小心放出氢气，打开反应釜，取出反应瓶，过滤回收催化剂后，剩余反应混合物用1％氨水甲醇柱层，得到产品AB-5 1.4g，产率55％，HPLC纯度≥99％。

实施例17：JAK抑制剂1的合成

将羰基二咪唑和三乙胺各18mmol溶于二氯甲烷，加入三氟甲基乙胺15mmol，20℃反应0.5h后加入AB-5 10mmol，继续反应6h后，加入20mL水终止反应，反应混合物用乙酸乙酯萃取3次，合并的乙酸乙酯经过干燥，回收乙酸乙酯后，用甲醇二氯甲烷柱层(1～15:100)，得到产品2.7g，产率71％，HPLC纯度≥99％。¹H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.74-0.78(t,3H),0.88-0.89(m,1H),1.30-1.32(m,1H),2.70-2.73(m,1H),3.32-3.34(m,1H),3.38-3.39(m,1H),3.76-3.80(m,1H),3.90-3.95(m,4H),4.42-4.47(m,1H),7.42(s,1H),7.43(s,1H),8.55(s,1H)。MS(ESI):381.58。

Claims

1.一种JAK抑制剂的合成方法，其特征在于，包括：将中间体A-8和中间体B-3缩合得到中间体AB-1，中间体AB-1经过去保护后得到中间体AB-2，中间体AB-2环合后得到中间体AB-3，中间体AB-3去保护得到中间体AB-4，中间体AB-4再次去保护得到中间体AB-5，中间体AB-5经过缩合反应得到JAK抑制剂1；

所述JAK抑制剂1及中间体AB-5，中间体AB-4，中间体AB-3，中间体AB-2，中间体AB-1，中间体A-8，中间体B-3的结构如下式所示：

利用所述中间体AB-4制备化合物AB-5过程中：采用的催化剂为10％的Pd/C与DABCO的混合物，两者质量比为1:0.1～0.5；反应体系的氢气压力为1-10atm；AB-4和催化剂的摩尔比为1：9～10％；反应温度为20～40℃；

所述中间体A-8合成方法包括：吡咯烷酮酯A-1与乙基溴化镁反应得到中间体A-2，中间体A-2在酸性条件下脱水得到不饱和酯中间体A-3，中间体A-3经过皂化反应得到二氢吡咯酸中间体A-4，中间体A-4经过不对称氢化得到吡咯烷羧酸中间体A-5，中间体A-5经过取代反应得到酰氯中间体A-6，中间体A-6经过重氮甲基化反应得到重氮甲基酮中间体A-7，中间体A-7用氢溴酸分解得到溴代酮中间体A-8；

所述中间体A-8，中间体A-7，中间体A-6，中间体A-5，中间体A-4，中间体A-3，中间体A-2，中间体A-1，结构如下式所示：

所述不对称氢化中采用的不对成催化剂为S-MeO-Biphep-Ru(OAc)₂、反应温度为50～80℃；反应体系的氢气压力为30-50atm；

所述皂化反应中，中间体A-3和碱的摩尔比为1：3～7；反应温度为25～40℃；反应时间为1.5～2h。

2.根据权利要求1所述的JAK抑制剂的合成方法，其特征在于，所述中间体B-3合成方法包括：溴代二氮杂吲哚中间体B-1与对甲苯磺酰氯反应得到保护的溴代二氮杂吲哚中间体B-2，中间体B-2在催化剂催化下与氨基甲酸酯反应得到双保护的中间体B-3；

所述中间体B-3，中间体B-2，中间体B-1结构如下式所示：

3.根据权利要求1所述的JAK抑制剂的合成方法，其特征在于，所述中间体AB-3由中间体AB-1在酸酐作用下一步得到，反应温度为50～100℃；或者所述中间体AB-1在酸性条件下脱去Boc保护基得到中间体AB-2，中间体AB-2在酸酐作用下环合得到中间体AB-3，环合反应的反应温度为50～100℃。

4.根据权利要求1所述的JAK抑制剂的合成方法，其特征在于，所述重氮甲基化反应中所用的重氮化试剂为三甲基硅基重氮甲烷。

5.根据权利要求2所述的JAK抑制剂的合成方法，其特征在于，中间体B-2在催化剂催化下与氨基甲酸酯反应得到双保护的中间体B-3，所述催化剂包括Ph₃P-Pd(OAc)₂、Xanphos-Pd(OAc)₂络合物。

6.根据权利要求2所述的JAK抑制剂的合成方法，其特征在于，中间体B-2在催化剂催化下与氨基甲酸酯反应得到双保护的中间体B-3，所述氨基甲酸酯包括氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯、氨基甲酸异丁酯、氨基甲酸叔丁酯。

7.根据权利要求2、5或6所述的JAK抑制剂的合成方法，其特征在于，中间体B-2合成中间体B-3的反应温度为80～120℃。

8.根据权利要求1、2、5或6所述的JAK抑制剂的合成方法，其特征在于，所述中间体A-8、中间体B-3和碱的摩尔比为1～1.2:1：0.9～1；反应温度为-20～10℃。