CN109369242A - 一种蓝莓富硒液态菌肥及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种蓝莓富硒液态菌肥及其制备方法，其含纳米硒5‑15份、蜡状芽孢杆菌菌剂8‑15份、嗜麦芽寡养单胞菌菌剂8‑15份、壳聚糖4‑8份、EDTA 6‑10份、氨基酸8‑15份、微肥8‑15份、水45‑60份。可有效提高蓝莓果实硒含量，促进产量形成和品质改善。具有效果显著、绿色无污染、肥料利用率高、提高产量品质、成本低廉和易于推广等优点。

Description

一种蓝莓富硒液态菌肥及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及蓝莓栽培技术和施肥领域，具体涉及一种蓝莓富硒液态菌肥及其制备方法与应用。

背景技术

硒是人体必需的微量元素之一，硒参与形成谷胱甘肽过氧化物酶，具有抗癌、防癌、保护心脏和延缓衰老、抗氧化与消除自由基、提高人体免疫力等多种特殊保健功能。人摄入硒的途径主要靠含硒的食物来保证，中国营养学会特别推荐我国居民硒摄取量为50～200μg/天，而我国缺硒地区居民目前硒摄取量仅为40～50μg/天，所以人体补硒防病提高健康水平，最佳途径是科学食补富硒农副产品。

蓝莓，意为蓝色浆果，属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓。一种是低灌木，矮脚野生，颗粒小，含丰富花青素；第二种是人工培育蓝莓，能成长至240cm高，果实较大，果肉饱满，改善了野生蓝莓的食用口感，增强了人体对花青素的吸收。全世界分布的越橘属植物可达400余种。。

麻江蓝莓鲜果中花青苷色素含量高达300mg/100g,属高氨基酸、高锌、高钙、高铁、高铜、高维生素的营养保健果品,被誉为"水果皇后"、"美瞳之果"。但因果农施肥品种单一、方式不合理、管理技术水平落后，导致病虫害发生严重、产量品质低等问题突出呈现，进而建立优质、高效、生态、安全的蓝莓配套栽培技术迫在眉睫。富硒农产品的特殊功能及硒元素是人体必须的矿物质微量元素，发展富硒蓝莓对于蓝莓产业的可持续发展具有重要的现实意义和战略意义。目前市场上常见的富硒肥料主要是硒矿粉与传统化学肥料的混合，由于天然硒元素以无机化合物状态存在，不易于植物吸收转化，所以容易造成资源的浪费和环境污染。本发明旨在解决的现有技术问题而提供一种蓝莓富硒液态菌肥，该富硒液态菌肥是通过蜡状芽孢杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌的生命代谢活动，将纳米硒转化为有机硒，同时EDTA与有机硒、壳聚糖、氨基酸和微肥等营养物质的螯合，使得蓝莓叶片能更好的吸收积累硒元素。

发明内容

本发明目的针对现有技术的不足，旨在提供一种绿色无污染、效果显著、符合蓝莓生长营养需求的蓝莓富硒液态菌肥。

本发明的技术方案如下：

一种蓝莓富硒液态菌肥，它由下列重量份的原料制成：纳米硒5-15份、蜡状芽孢杆菌菌剂8-15份、嗜麦芽寡养单胞菌菌剂8-15份、壳聚糖4-8份、EDTA 6-10份、氨基酸8-15份、微肥8-15份、水45-60份。

优选的，它由下列重量份的原料制成：纳米硒10份、蜡状芽孢杆菌菌剂12 份、嗜麦芽寡养单胞菌菌剂12份、壳聚糖6份、EDTA 8份、氨基酸10份、微肥10份、水32份。

其中，所述蜡状芽孢杆菌菌剂中含有的菌种为蜡状芽孢杆菌LY05 (CCTCC NO:M2015397)、蜡状芽孢杆菌LGY06(CCTCC NO:M 2015398)及蜡状芽孢杆菌WL08(CCTCCNO:M2015399)的一种或两种以上的组合；所述嗜麦芽寡养单胞菌菌剂的菌种为嗜麦芽寡养单胞菌XQ08(CCTCC NO: M 2015726)。两种菌剂的制备均包括如下步骤：(1)将菌株斜面保存试管种子，分别接种至无机盐培养基中，振荡培养至对数生长期，获得菌液；(2)将获得的菌液以10％的体积百分比的接种量接种至含有无机盐培养基的种子发酵罐中，培养至对数生长期，获得种子液；(3)将获得的种子液按照10％的体积比的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃、150-200rpm下发酵培养2-3天，获得发酵液，发酵液的有效活菌数均≥100亿/mL，将发酵液分别直接稀释5-20倍即制得蜡状芽孢杆菌菌剂、嗜麦芽寡养单胞菌液体菌剂。

进一步的，所述壳聚糖为水溶性，脱乙酰度大于95％，分子量为10～50KDa；所述氨基酸为脯氨酸、甘氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸中的任意五种及以上的组合；所述EDTA为乙二胺四乙酸二钠；所述微肥为质量比为:3-6:2-5:1-2:1-2:1-2:0.5-1:0.5-1:0.5-1的钾肥+ 钙肥+硼肥+镁肥+铁肥+锌肥+钼肥+锰肥的混合肥；所述水为无菌水。

本发明的蓝莓富硒液态菌肥的制备方法，包括如下工艺步骤：

步骤1.按规定配比取制得的蜡状芽孢杆菌菌剂、嗜麦芽寡养单胞菌液体菌剂，备用；

步骤2.按规定配比取纳米硒、壳聚糖、EDTA、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中；

步骤3.将步骤1得到的菌剂加入步骤2得到的溶液中，在温度25-30℃、pH 6.0～6.8的条件下，于无菌搅拌机中充分混合均匀，袋装即得蓝莓富硒液态菌肥产品。

本发明与现有技术相比，本发明的富硒液态菌肥是通过蜡状芽孢杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌的生命代谢活动，将纳米硒转化为有机硒，同时EDTA与有机硒、壳聚糖、氨基酸和微肥等营养物质的螯合，使得蓝莓叶片能更好的吸收积累硒元素。具有效果显著、绿色无污染、肥料利用率高、成本低廉和易于推广等优点。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的任何限制。在本发明中涉及的数值或数值比例，如无特别说明，均表示质量数值或质量比例。

实施例1：

1.富硒液态菌肥组成及制备：

富硒液态菌肥配方组成及制备，(1)组成：纳米硒10份、蜡状芽孢杆菌菌剂12份、嗜麦芽寡养单胞菌菌剂12份、壳聚糖6份、EDTA 8份、氨基酸10 份、微肥10份、水32份。(2)制备：①按规定配比取蜡状芽孢杆菌菌剂和嗜麦芽寡养单胞菌液体菌剂，备用；②按规定配比取纳米硒、壳聚糖、EDTA、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中；③将步骤①得到的菌剂加入步骤②得到的溶液中，在温度25-30℃、pH 6.0-6.8的条件下，于无菌搅拌机中充分混合均匀，袋装即得蓝莓富硒液态菌肥。

2.田间试验：

试验地概况：试验地位于麻江县蓝莓园试验地内,品种为“丰香”，种植年限5 年。供试果园土壤类型为黄壤，试验前在果园内随机、多点混合采集深0-60cm 的土样作为土壤背景值，其pH值为6.87，全氮含量为1.85g/kg，有机质含量为28.45g/kg，有效磷含量为30.55mg/kg，速效钾含量为40.43mg/kg。

田间试验设计：试验采取随机区组设计，采用全株喷雾，设富硒液态菌肥 200倍液、喷施清水为对照(CK)，共2个处理，每处理5棵树，重复4次，共8 个小区，周围设保护行。施用时间为苗期和旺长期分别施用，施用量分别为30、 45kg/亩。试验期间天气均以晴为主，间或多云，喷施后3-4天内无降雨过程。

3.分析项目及方法：

果实成熟后，按小区收获，测量每个小区单株产量，每个小区随机采集200 个果实，带回实验室测定果实品质、单果重。果品品质测定方法：维生素C含量用2,6-二氯靛酚法测定；可滴定酸(TA)含量用酸碱滴定法测定；可溶性总糖含量用蒽酮比色法测定；花青素参照刘仁道方法测定。硒含量采用国标法 GB/5009.93—2010测定。

4.实施例效果：

从表1至表2可以看出，使用蓝莓富硒液态菌肥能有效地增加单株产量、平均单果重，显著提高果实维生素C、可溶性总糖、花青素含量，降低可滴定酸(TA) 含量，促进蓝莓产量的形成和品质的改善；且能有效蓝莓果实有机硒、无机硒和总硒含量，且能提高有机硒的占比，更有利于人们对硒的摄食。

表1施用叶面菌肥对蓝莓产量品质的影响

注：同列数据后标不同小写字母表示在P<0.05下差异达显著水平，不同大写字母表示在P<0.01下差异达极显著水平.下表同

表2富硒液态菌肥对蓝莓含硒量的影响

以上只是本发明的具体应用范例，本发明还有其他的实施方式，凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明所要求的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种蓝莓富硒液态菌肥，其特征在于：它由下列重量份的原料制成：纳米硒5-15份、蜡状芽孢杆菌菌剂8-15份、嗜麦芽寡养单胞菌菌剂8-15份、壳聚糖4-8份、EDTA6-10份、氨基酸8-15份、微肥8-15份、水45-60份。

2.根据权利要求1所述的蓝莓富硒液态菌肥，其特征在于：它由下列重量份的原料制成：纳米硒10份、蜡状芽孢杆菌菌剂12份、嗜麦芽寡养单胞菌菌剂12份、壳聚糖6份、EDTA 8份、氨基酸10份、微肥10份、水32份。

3.根据权利要求1或2所述的蓝莓富硒液态菌肥，其特征在于：所述蜡状芽孢杆菌菌剂中含有的菌种为蜡状芽孢杆菌LY05、蜡状芽孢杆菌LGY06及蜡状芽孢杆菌WL08的一种或两种以上的组合；所述嗜麦芽寡养单胞菌菌剂的菌种为嗜麦芽寡养单胞菌XQ08；两种菌剂的制备均包括如下步骤：(1)将菌株斜面保存试管种子，分别接种至无机盐培养基中，振荡培养至对数生长期，获得菌液；(2)将获得的菌液以10％的体积百分比的接种量接种至含有无机盐培养基的种子发酵罐中，培养至对数生长期，获得种子液；(3)将获得的种子液按照10％的体积比的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃、150-200rpm下发酵培养2-3天，获得发酵液，发酵液的有效活菌数均≥100亿/mL，将发酵液分别直接稀释5-20倍即制得蜡状芽孢杆菌菌剂、嗜麦芽寡养单胞菌液体菌剂。

4.根据权利要求1或2所述的蓝莓富硒液态菌肥，其特征在于：所述壳聚糖为水溶性，脱乙酰度大于95％，分子量为10～50KDa；所述氨基酸为脯氨酸、甘氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸中的任意五种及以上的组合；所述EDTA为乙二胺四乙酸二钠；所述微肥为质量比为:3-6:2-5:1-2:1-2:1-2:0.5-1:0.5-1:0.5-1的钾肥+钙肥+硼肥+镁肥+铁肥+锌肥+钼肥+锰肥的混合肥；所述水为无菌水。

5.一种如权利要求1或2所述的蓝莓富硒液态菌肥的制备方法，其特征在于：包括如下工艺步骤：

步骤1.取制得的蜡状芽孢杆菌菌剂、嗜麦芽寡养单胞菌液体菌剂，备用；

步骤2.取纳米硒、壳聚糖、EDTA、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中；

步骤3.将步骤1得到的菌剂加入步骤2得到的溶液中，在温度25-30℃、pH6.0～6.8的条件下，于无菌搅拌机中充分混合均匀，袋装即得蓝莓富硒液态菌肥产品。