CN108440175A - 一种猕猴桃叶面菌肥及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种猕猴桃叶面菌肥及其制备方法与应用，其以蜡状芽孢杆菌菌剂20‑40份、壳聚糖8‑12份、氨基酸8‑12份、微肥10‑20份、水20‑40份。应用于增加猕猴桃的产量、改善猕猴桃品质、提高猕猴桃贮藏性能、诱导增强猕猴桃抗病性、促进低龄和成林猕猴桃植株的生长等方面。具有效果显著、绿色无污染、肥料利用率高、防控病害、提高产量品质、成本低廉和易于推广等优点。

Description

一种猕猴桃叶面菌肥及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及猕猴桃栽培技术和施肥领域，具体涉及一种猕猴桃叶面菌肥及其制备方法与应用。

背景技术

猕猴桃(Actinidia)作为世界公认的新兴水果，其果实中含有多种氨基酸和维生素，还有丰富的矿物质等，具有很高的食用价值和药用价值，被誉为“水果之王”，具有广阔的发展前景。在中国，猕猴桃产业得到了迅速发展，栽培面积和产量均居世界第一，2017年猕猴桃产量到达300多万吨，且正在不断扩张。近年来，作为助力脱贫攻坚的主力致富产业，猕猴桃产业受到贵州省委省政府的高度重视，把其重点列为“裂变式”发展的扶贫产业。现已发展成贵州省特色精品水果之一和当地的支柱产业，全省现有种植面积近50多万亩。主要分布在贵阳市、六盘水市、黔东南州、遵义市等产业集中发展区。但随着产业的发展，管理技术水平落后、病虫害发生严重、产量品质低等问题突出呈现，进而建立优质、高效、生态、安全的猕猴桃配套栽培技术迫在眉睫。

叶面菌肥通过喷洒到植物叶面后能够通过植物叶片迅速被植物所吸收，避免了从土壤施肥时营养元素易被土壤固结、根部吸收缓慢等问题，具有吸收快、养分损失少等优点。目前，已有的叶面菌肥有很多种，在提高作物的产量上也都有一定的效果，但都不同程度的存在提高作物产量效果不够显著等缺陷且现有技术中还没有专门为猕猴桃设计的理想叶面菌肥。

发明内容

本发明目的针对现有技术的不足，旨在提供一种绿色无污染、效果显著、符合猕猴桃生长营养需求的猕猴桃叶面菌肥。

本发明的技术方案如下：

一种猕猴桃叶面菌肥，它由下列重量份的原料制成：它由下列重量百分比的组分组成：蜡状芽孢杆菌菌剂20-40份、壳聚糖8-12份、氨基酸8-12份、微肥10-20份、水20-40份。

优选的，它由下列重量份的原料制成：蜡状芽孢杆菌菌剂30份、壳聚糖10份、氨基酸10份、微肥15份、水40份。

优选的，蜡状芽孢杆菌菌剂中含有的菌种为蜡状芽孢杆菌LY05(CCTCC NO:M2015397)、蜡状芽孢杆菌LGY06(CCTCC NO:M 2015398)及蜡状芽孢杆菌WL08(CCTCCNO:M2015399)的一种或两种以上的组合。

其中，蜡状芽孢杆菌菌剂制备包括如下步骤：(1)将蜡状芽孢杆菌菌株LY05、LGY06或WL08斜面保存试管种子，分别接种至无机盐培养基中，振荡培养至对数生长期，获得菌液；(2)将获得的菌液以10％的体积百分比的接种量接种至含有无机盐培养基的种子发酵罐中，培养至对数生长期，获得种子液；(3)将获得的种子液按照10％的体积比的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃、150-200rpm下发酵培养2-3天，获得发酵液，发酵液的有效活菌数均≥50亿/mL，将发酵液直接稀释5-20倍即为单一菌株液体菌剂；(4)将蜡状芽孢杆菌菌株LY05、LGY06或WL08的单一菌株液体菌剂按一种或两种以上的组合混合制成最终的蜡状芽孢杆菌混合菌剂。

进一步的，所述壳聚糖为水溶性，脱乙酰度大于95％；所述氨基酸为脯氨酸、甘氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸中的任意五种及以上的组合；所述微肥为质量比为:3-6:2-5:1-2:1-2:1-2:1-2:0.5-1:0.5-1:0.5-1的钾肥+钙肥+硼肥+镁肥+铁肥+锌肥+硒肥+钼肥+锰肥的混合肥；所述水为无菌水。

本发明的猕猴桃叶面菌肥的制备方法，包括如下工艺步骤：

步骤1.按规定配比取权利要求4所述蜡状芽孢杆菌菌剂，备用；

步骤2.按规定配比取壳聚糖、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中；

步骤3.将步骤1得到的菌剂加入步骤2得到的溶液中，在温度25-30℃、pH6.0-6.8的条件下，于无菌搅拌机中充分混合均匀，袋装即得猕猴桃菌肥产品。

本发明的生物菌肥可以在如下(1)-(4)至少一种中得到应用：

(1)增加猕猴桃的产量；(2)改善猕猴桃品质，提高猕猴桃贮藏性能；(3)诱导增强猕猴桃抗病性，有效防控猕猴桃溃疡病、软腐病、褐斑病等病害；(4)促进低龄和成林猕猴桃植株的生长。

本发明与现有技术相比，本发明叶面菌肥采用蜡状芽孢杆菌菌剂、植物促生物质、大量元素和微量元素等组成，可有效提高猕猴桃经济效益、营养风味品质和贮藏性能，促进植株良好生长，且能有效诱导猕猴桃植株、果实抗病性增强和预防猕猴桃溃疡病、软腐病、褐斑病等重大病虫害的发生，具有效果显著、绿色无污染、肥料利用率高、防控病虫、提高产量品质、成本低廉和易于推广等优点。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的任何限制。

实施例1：

1.生物菌肥组成及制备：

生物菌肥A配方组成及制备，(1)组成：蜡状芽孢杆菌菌剂30份、壳聚糖10份、氨基酸10份、微肥15份、水40份。(2)制备：①按规定配比取蜡状芽孢杆菌菌剂，备用；②按规定配比取壳聚糖、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中；③将步骤①得到的菌剂加入步骤②得到的溶液中，在温度25-30℃、pH 6.0-6.8的条件下，于无菌搅拌机中充分混合均匀，袋装即得猕猴桃叶面菌肥A。

叶面肥B配方组成及制备，(1)组成：壳聚糖10份、氨基酸10份、微肥15份、水65份。(2)制备：①按规定配比取壳聚糖、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中，制得猕猴桃叶面肥B。

2.田间试验：

试验地概况：试验地位于贵州修文县谷堡乡红星村贵州顶好果业有限公司猕猴桃园(26°49′02.2″N，106°28′23.6″E),品种为“贵长”，平均海拔为1276m，亚热带季风性湿润气候，年平均气温为16℃，年降雨量达1293mm，水热同期。供试果园土壤类型为黄壤，试验前在果园内随机、多点混合采集深0-60cm的土样作为土壤背景值，其pH值为5.86，全氮含量为1.44g/kg，有机质含量为29.56g/kg，碱解氮含量为98.76mg/kg，有效磷含量为4.43mg/kg，有效钾含量为3.47mg/kg，有效铁含量为49.31mg/kg。

田间试验设计：试验采取随机区组设计，采用全株(包括叶面正反面、枝干、果实等)喷雾，设叶面菌肥100-200倍液、叶面肥100倍液、喷施清水为对照(CK)，共3个处理，每处理5棵树，重复4次，共12个小区，周围设保护行。施用时间为猕猴桃展叶期(4月12日)、座果期(5月12日)、营养物质积累期(8月12日)分别施用，施用量分别为30、45、60kg/亩。试验期间天气均以晴为主，间或多云，喷施后3-4天内无降雨过程。

3.分析项目及方法：

果实成熟后，按小区收获，测量每个小区单株产量，每个小区随机采集200个果实，带回实验室测定果实品质、单果重。果品品质测定方法：干物质用国标法法测定；维生素C含量用2,6-二氯靛酚法测定；可滴定酸(TA)含量用酸碱滴定法测定；可溶性固形物(SSC)含量用PAL-1型折光仪测定。贮藏时间采用所贮藏猕猴桃全部腐烂时间。

发病情况及生长调查：于果实开始软化是每2天调查果实发病情况，统计累计发病率；并调查猕猴桃植株溃疡病、褐斑病发病情况。发病率(％)＝100×(发病果数/调查总果数)或发病率(％)＝100×(发病株数/调查株数)。于施肥次年7-8月份观测猕猴桃植株生长状况，包括株高、叶片数、最大叶长、最大叶宽、嫁接口处茎围、芽间距等指标。

4.实施例效果：

从表1至表4可以看出，使用猕猴桃叶面菌肥均能有效地增加单株产量、平均单果重，显著提高果实干物质、维生素C和可溶性固形物(SSC)含量，降低可滴定酸(TA)含量，促进猕猴桃产量的形成和品质的改善；且能有效提高和维持果实硬度，降低果实失重率，提高了猕猴桃耐贮性；还能有效降低猕猴桃果实软腐病、溃疡病、褐斑病发病率；可有效促进低龄猕猴桃植株的生长，促进植株增高、叶片生长、茎增粗和芽的生长。

表1施用生物菌肥对贵长猕猴桃产量品质的影响

注：同列数据后标不同小写字母表示在P<0.05下差异达显著水平，不同大写字母表示在P<0.01下差异达极显著水平.下表同

表2猕猴桃叶面菌肥贮藏性能考察

表3施用叶面菌肥对贵长猕猴桃病害的发生情况

表4低龄猕猴桃园使用叶面菌肥植株生长状况

以上只是本发明的具体应用范例，本发明还有其他的实施方式，凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明所要求的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种猕猴桃叶面菌肥，其特征在于：它由下列重量份的原料制成：蜡状芽孢杆菌菌剂20-40份、壳聚糖8-12份、氨基酸8-12份、微肥10-20份、水20-40份。

2.根据权利要求1所述的猕猴桃叶面菌肥，其特征在于：它由下列重量份的原料制成：蜡状芽孢杆菌菌剂30份、壳聚糖10份、氨基酸10份、微肥15份、水35份。

3.根据权利要求1或2所述的猕猴桃叶面菌肥，其特征在于：所述蜡状芽孢杆菌菌剂中含有的菌种为蜡状芽孢杆菌LY05(CCTCC NO:M 2015397)、蜡状芽孢杆菌LGY06(CCTCC NO:M2015398)及蜡状芽孢杆菌WL08(CCTCCNO:M2015399)的一种或两种以上的组合。

4.根据权利要求3所述的猕猴桃叶面菌肥，其特征在于：所述蜡状芽孢杆菌菌剂制备包括如下步骤：(1)将蜡状芽孢杆菌菌株LY05、LGY06或WL08斜面保存试管种子，分别接种至无机盐培养基中，振荡培养至对数生长期，获得菌液；(2)将获得的菌液以10％的体积百分比的接种量接种至含有无机盐培养基的种子发酵罐中，培养至对数生长期，获得种子液；(3)将获得的种子液按照10％的体积比的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃、150-200rpm下发酵培养2-3天，获得发酵液，发酵液的有效活菌数均≥50亿/mL，将发酵液直接稀释5-20倍即为单一菌株液体菌剂；(4)将蜡状芽孢杆菌菌株LY05、LGY06或WL08的单一菌株液体菌剂按一种或两种以上的组合混合制成最终的蜡状芽孢杆菌混合菌剂。

5.根据权利要求1或2所述的猕猴桃叶面菌肥，其特征在于：所述壳聚糖为水溶性，脱乙酰度大于95％；所述氨基酸为脯氨酸、甘氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸中的任意五种及以上的组合；所述微肥为质量比为:3-6:2-5:1-2:1-2:1-2:1-2:0.5-1:0.5-1:0.5-1的钾肥+钙肥+硼肥+镁肥+铁肥+锌肥+硒肥+钼肥+锰肥的混合肥；所述水为无菌水。

6.一种如权利要求1或2所述的猕猴桃叶面菌肥的制备方法，其特征在于：包括如下工艺步骤：

步骤1.按规定配比取权利要求4所述蜡状芽孢杆菌菌剂，备用；

步骤2.按规定配比取壳聚糖、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中；

步骤3.将步骤1得到的菌剂加入步骤2得到的溶液中，在温度25-30℃、pH6.0～6.8的条件下，于无菌搅拌机中充分混合均匀，袋装即得猕猴桃菌肥产品。

7.一种如权利要求1或2所述的猕猴桃叶面菌肥的应用，其特征在于包括以下几个方面的应用：(1)增加猕猴桃的产量；(2)改善猕猴桃品质，提高猕猴桃贮藏性能；(3)诱导增强猕猴桃抗病性，有效防控包括猕猴桃溃疡病、软腐病、褐斑病在内的病害；(4)促进低龄和成林猕猴桃植株的生长。