CN108707012A - 一种烟草叶面菌肥及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种烟草叶面菌肥及其制备方法与应用，其以蜡状芽孢杆菌菌剂20‑40份、壳聚糖8‑12份、氨基酸8‑12份、微肥10‑20份、水20‑40份。应用于增加烟草的产量、改善烟草品质、诱导增强烟草抗病性、促进烟草植株的生长等方面。具有效果显著、绿色无污染、肥料利用率高、防控病害、提高产量品质、成本低廉和易于推广等优点。

Description

一种烟草叶面菌肥及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及烟草栽培技术和施肥领域，具体涉及一种烟草叶面菌肥及其制备方法与应用。

背景技术

农业生产中化肥的低利用率和其带来的高环境风险一直是困扰全球的重大问题，在烟叶生产中化学肥料使用亦造成了烟地生态环境严重恶化，烟叶品质难以保证。如何制备烟叶绿色生态的专用肥，优化烟草生长环境，提高烟草的产量与品质，对促进整个烟地生态系统的改良是茶产业可持续发展具有重要意义。烟草黑胫病和青枯病是制约烟草生产的两大重要土传病害，它们的发生往往造成烟草毁灭性危害。近年来，两者在贵州烟区主栽品种南江3号、K326、毕纳一号等烟草品种在上频繁发生，对贵州烟草产业的健康发展具有较大的潜在危害。当前，针对黑胫病和青枯病的防治主要采取化学防治、农业防治、生物防治等手段，但其难防难控的特点主导其规模发生后的无策。单纯施用有机肥生产的烟叶品质好，但产量不高。单纯施用无机肥生产的烟叶虽然产量大幅度提高，但品质有所下降。

叶面菌肥通过喷洒到植物叶面后能够通过植物叶片迅速被植物所吸收，避免了从土壤施肥时营养元素易被土壤固结、根部吸收缓慢等问题，具有吸收快、养分损失少等优点。目前，已有的叶面菌肥有很多种，在提高作物的产量上也都有一定的效果，但都不同程度的存在提高作物产量效果不够显著等缺陷且现有技术中还没有专门为烟草设计的理想叶面菌肥。

发明内容

本发明目的针对现有技术的不足，旨在提供一种绿色无污染、效果显著、符合烟草生长营养需求的烟草叶面菌肥。

本发明的技术方案如下：

一种烟草叶面菌肥，它由下列重量份的原料制成：它由下列重量百分比的组分组成：蜡状芽孢杆菌菌剂20-40份、壳聚糖8-12份、氨基酸8-12份、微肥10-20份、水20-40份。

优选的，它由下列重量份的原料制成：蜡状芽孢杆菌菌剂30份、壳聚糖10份、氨基酸10份、微肥15份、水35份。

优选的，蜡状芽孢杆菌菌剂中含有的菌种为蜡状芽孢杆菌LY05(CCTCC NO:M2015397)、蜡状芽孢杆菌LGY06(CCTCC NO:M 2015398)及蜡状芽孢杆菌WL08(CCTCCNO:M2015399)的一种或两种以上的组合。

其中，蜡状芽孢杆菌菌剂制备包括如下步骤：(1)将蜡状芽孢杆菌菌株LY05、LGY06或WL08斜面保存试管种子，分别接种至无机盐培养基中，振荡培养至对数生长期，获得菌液；(2)将获得的菌液以10％的体积百分比的接种量接种至含有无机盐培养基的种子发酵罐中，培养至对数生长期，获得种子液；(3)将获得的种子液按照10％的体积比的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃、150-200rpm下发酵培养2-3天，获得发酵液，发酵液的有效活菌数均≥50亿/mL，将发酵液直接稀释5-20倍即为单一菌株液体菌剂；(4)将蜡状芽孢杆菌菌株LY05、LGY06或WL08的单一菌株液体菌剂按一种或两种以上的组合混合制成最终的蜡状芽孢杆菌混合菌剂。

进一步的，所述壳聚糖为水溶性，脱乙酰度大于95％；所述氨基酸为脯氨酸、甘氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸中的任意五种及以上的组合；所述微肥为质量比为:3-6:2-5:1-2:1-2:1-2:1-2:0.5-1:0.5-1:0.5-1的钾肥+钙肥+硼肥+镁肥+铁肥+锌肥+硒肥+钼肥+锰肥的混合肥；所述水为无菌水。

本发明的烟草叶面菌肥的制备方法，包括如下工艺步骤：

步骤1.按规定配比取权利要求4所述蜡状芽孢杆菌菌剂，备用；

步骤2.按规定配比取壳聚糖、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中；

步骤3.将步骤1得到的菌剂加入步骤2得到的溶液中，在温度25-30℃、pH6.0-6.8的条件下，于无菌搅拌机中充分混合均匀，袋装即得烟草菌肥产品。

本发明的生物菌肥可以在如下(1)-(4)至少一种中得到应用：

(1)增加烟草的产量；(2)改善烟叶品质；(3)诱导增强烟草抗病性，有效防控烟草白粉病、黑胫病、青枯病、赤星病等病害；(4)促进烟草植株的生长。

本发明与现有技术相比，本发明叶面菌肥采用蜡状芽孢杆菌菌剂、植物促生物质、大量元素和微量元素等组成，可有效提高烟草经济效益、营养风味品质，促进植株良好生长，且能有效诱导烟草植株、果实抗病性增强，具有效果显著、绿色无污染、肥料利用率高、防控病害、提高产量品质、成本低廉和易于推广等优点。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的任何限制。

实施例1：

1.生物菌肥组成及制备：

生物菌肥A配方组成及制备，(1)组成：蜡状芽孢杆菌菌剂30份、壳聚糖10份、氨基酸10份、微肥15份、水35份。(2)制备：①按规定配比取蜡状芽孢杆菌菌剂，备用；②按规定配比取壳聚糖、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中；③将步骤①得到的菌剂加入步骤②得到的溶液中，在温度25-30℃、pH 6.0～6.8的条件下，于无菌搅拌机中充分混合均匀，袋装即得烟草叶面菌肥A。

叶面肥B配方组成及制备，(1)组成：壳聚糖10份、氨基酸10份、微肥15份、水65份。(2)制备：①按规定配比取壳聚糖、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中，制得烟草叶面肥B。

2.田间试验：

试验地概况：试验于铜仁地区思南县许家坝坑水村进行，试验地肥力中等，烟地平整，土质黄壤，前茬油菜，有灌溉条件，光照条件较好。试验地全氮0.343g/kg，碱解氮31.521mg/kg，全磷0.543g/kg，有效磷13.286mg/kg，全钾1.886g/kg，有效钾138.853mg/kg，有机质30.475g/kg，pH 6.12。试验地为多年青枯病、黑胫病发病严重地块。供试品种：南江3号。

田间试验设计：试验采取随机区组设计，采用全株(包括叶面正反面)喷雾，设叶面菌肥100-200倍液、叶面肥100倍液、喷施清水为对照(CK)，共3个处理，重复4次，共12个小区，周围设保护行。施用时间为烟草苗期、团棵期、旺长期分别施用，施用量分别为30、45、60kg/亩。试验期间天气均以晴为主，间或多云，喷施后3-4天内无降雨过程。

3.分析项目及方法：

(1)病害发病情况调查

从施肥后30天开始，每30天调查一次白粉病、黑胫病、青枯病、赤星病的发生情况，连续调查3次。并计算累计发病率。计算方法如下：

(2)烟叶产量品质的测定方法

以小区为单位，单独采收烘烤并分别计算上部叶产量、中部叶产量、下部叶产量和总产量，最终折算亩产量。且各实施列取定点挂牌烟株第12、13叶作为混合样，按《烟草化学品质分析》测定烟叶烟碱、蛋白质、总糖、还原糖、氯、总氮、总磷和总钾的含量。

4.实施例效果：

从表1至表4可以看出，使用烟草专用生物菌肥均能有效地增加烟叶产量，极显著改善烟草品质，进而促进烟草产量的形成和品质的改善；且能有效降低烟草黑胫病、青枯病、赤星病等病虫害的发生。

表1施用叶面菌肥对烟草产量的影响

注：同列数据后标不同小写字母表示在P<0.05下差异达显著水平，不同大写字母表示在P<0.01下差异达极显著水平.下表同

表2施用叶面菌肥对烟草品质的影响

表3施用叶面菌肥对烟草病虫害的发生情况

以上只是本发明的具体应用范例，本发明还有其他的实施方式，凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明所要求的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种烟草叶面菌肥，其特征在于：它由下列重量份的原料制成：蜡状芽孢杆菌菌剂20-40份、壳聚糖8-12份、氨基酸8-12份、微肥10-20份、水20-40份。

2.根据权利要求1所述的烟草叶面菌肥，其特征在于：它由下列重量份的原料制成：蜡状芽孢杆菌菌剂30份、壳聚糖10份、氨基酸10份、微肥15份、水35份。

3.根据权利要求1或2所述的烟草叶面菌肥，其特征在于：所述蜡状芽孢杆菌菌剂中含有的菌种为蜡状芽孢杆菌LY05(CCTCC NO:M 2015397)、蜡状芽孢杆菌LGY06(CCTCC NO:M2015398)及蜡状芽孢杆菌WL08(CCTCCNO:M2015399)的一种或两种以上的组合。

4.根据权利要求3所述的烟草叶面菌肥，其特征在于：所述蜡状芽孢杆菌菌剂制备包括如下步骤：(1)将蜡状芽孢杆菌菌株LY05、LGY06或WL08斜面保存试管种子，分别接种至无机盐培养基中，振荡培养至对数生长期，获得菌液；(2)将获得的菌液以10％的体积百分比的接种量接种至含有无机盐培养基的种子发酵罐中，培养至对数生长期，获得种子液；(3)将获得的种子液按照10％的体积比的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃、150-200rpm下发酵培养2-3天，获得发酵液，发酵液的有效活菌数均≥50亿/mL，将发酵液直接稀释5-20倍即为单一菌株液体菌剂；(4)将蜡状芽孢杆菌菌株LY05、LGY06或WL08的单一菌株液体菌剂按一种或两种以上的组合混合制成最终的蜡状芽孢杆菌混合菌剂。

5.根据权利要求1或2所述的烟草叶面菌肥，其特征在于：所述壳聚糖为水溶性，脱乙酰度大于95％；所述氨基酸为脯氨酸、甘氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸中的任意五种及以上的组合；所述微肥为质量比为:3-6:2-5:1-2:1-2:1-2:1-2:0.5-1:0.5-1:0.5-1的钾肥+钙肥+硼肥+镁肥+铁肥+锌肥+硒肥+钼肥+锰肥的混合肥；所述水为无菌水。

6.一种如权利要求1或2所述的烟草叶面菌肥的制备方法，其特征在于：包括如下工艺步骤：

步骤1.按规定配比取权利要求4所述蜡状芽孢杆菌菌剂，备用；

步骤2.按规定配比取壳聚糖、氨基酸和微肥充分搅拌溶于所需配比的无菌水中；

步骤3.将步骤1得到的菌剂加入步骤2得到的溶液中，在温度25-30℃、pH 6.0～6.8的条件下，于无菌搅拌机中充分混合均匀，袋装即得烟草菌肥产品。

7.一种如权利要求1或2所述的烟草叶面菌肥的应用，其特征在于包括以下几个方面的应用：(1)增加烟草的产量；(2)改善烟叶品质；(3)诱导增强烟草抗病性，有效防控包括烟草白粉病、黑胫病、青枯病、赤星病在内的病害；(4)促进烟草植株的生长。