CN109329500A - 一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶及其制备方法和应用,该速溶茶按质量分数计含有茶多酚30‑85%和茶多糖15‑70%组成,茶多糖可促进茶多酚在人体内的吸收并强化其生理活性,提高茶多酚的利用率,本发明中的茶多酚由茯砖茶叶分离纯化获得,以茯砖茶叶原料,经板框压滤高效去除杂质,提高提纯度;经大孔树脂层析除掉了茶多酚提取中产生的低活性酚酸类化合物,且去除了咖啡因等具有潜在副作用杂质,使本发明在适宜于普通人群的同时也适合于易失眠人群,本发明制备方法简便,成本低廉且附加值高,适于推广使用。
Description
【技术领域】
本发明属于茶制品和食品工程技术领域,具体涉及一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶及其制备方法和应用。
【背景技术】
茶叶最早起源于中国,在中国种茶、制茶、饮茶及茶文化已有上千年的历史。茶素有健身、预防疾病的功效,已成为当今世界最流行的药用饮料。
研究表明,茶叶中的很多活性成分具有生命保护的功能,而茶多酚和茶多糖是茶叶发挥生理功能的主要活性成分,茶多酚占茶叶重量的25~35%,占茶叶干重的15~30%,是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。主要为黄烷醇(儿茶素)类,其中儿茶素占60~80%。儿茶素类主要由儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素、没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯等六种单体组成。茶多酚是茶叶中一类多羟基类化合物,是一种天然高效抗氧化剂,具有降血糖、降血脂、抗自由基DNA损害、防止油脂过氧化、抗肿瘤、抗氧化以及抑菌等作用。但茶多酚中的主要活性成分没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和表儿茶素没食子酸酯(ECG)经口服食用后在体内的吸收利用率处于一个较低的水平,而茶多糖可促进儿茶素类物质的吸收并强化其生理活性,从而能够增强茶多酚降血糖的活性。茶多糖是一类具有生理活性的复合多糖,是一种酸性糖蛋白,并结合有大量的矿质元素,多糖主要由阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、葡萄糖、半乳糖等构成。而茶多糖具有降血糖、降血脂、调节免疫、抗凝血,抗血栓、抗氧化等功效。我国饮茶历史悠久,自古以来,茶叶就被誉为养生保健饮料,有关茶叶降血糖的研究已有30年的历史。相关研究证实了茶叶在预防和改善糖尿病及其并发症的主要成分是茶多酚和茶多糖。茶多糖一方面能促进体内胰岛素的释放,另一方面茶多糖能显著影响小肠内各种降解酶(淀粉酶、蔗糖酶、麦芽糖酶)的活性,从而通过促进体内糖的利用和降低淀粉、双糖的分解。
茯砖茶距今已有600多年的历史,其制作工艺复杂,属于再加工茶类中黑茶紧压茶的一种,茯砖茶再发酵过程中由于产生了大量的冠突散囊菌(俗称金花菌)而被人们熟知,是我国边疆少数民族日常生活中不可或缺的饮品;茯砖茶具有消食健胃,杀腥解腻,降脂减肥,降压降糖,生津御寒的功能;茯砖茶不但能补充膳食中较为缺乏的维生素、茶多酚、有机酸等生物活性物质,而且茯砖茶越泡越甜,主要因其内含有茶多糖有关。
但茯砖茶其本身含有的茶多酚与茶多糖处于较低水平,如直接引用人体吸收率较低,因此需要一种茶多酚和茶多糖含量较高的复合茶。
与此同时,现有的茶多酚或茶多糖制备方法中,难以去除茶中含有的咖啡因,且茶多糖的提取率较低;多糖是亲水性大分子,与小分子的分离纯化方法不同,并且同一种植物采取的提取方法不同,所获得的多糖不仅结构会存在差异,而且其生物活性也会发生变化,因此需要采用合适的方法对茯砖茶多酚和茶多糖进行分离纯化。
【发明内容】
本发明的目的在于克服上述现有技术的缺点,提供一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶及其制备方法和应用;本发明的复合茶由茯砖茶的茶多酚和茶多糖复配制得,能够显著的降低血糖。
为达到上述目的,本发明采用以下技术方案予以实现:
一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶,按质量百分比计,组成为:茯砖茶多酚30~85%,茯砖茶多糖15~70%;茯砖茶多酚和茯砖茶多糖均由茯砖茶叶分离纯化获得;所述复合速溶茶由茯砖茶多酚与茯砖茶多糖复配制成。
本发明的进一步改进在于,
优选的,按质量百分比计,组成为:45%~50%的茯砖茶多酚,余量为茯砖茶多糖。
优选的,按质量百分比计,茯砖茶多酚中儿茶素类的组成为:没食子酸20~30%、没食子儿茶素2~5%、表没食子儿茶素2~5%、儿茶酸1~3%、咖啡因1~3%、表没食子儿茶素没食子酸酯50~60%、表儿茶素2~3%、没食子儿茶素没食子酸酯1~3%、表儿茶素没食子酸酯1~2%。
优选的,按质量百分比计,茯砖茶多糖的组成为:甘露糖10~15%、鼠李糖0~3%、葡萄糖醛酸5~10%、半乳糖醛酸5~10%、葡萄糖25~30%、木糖2~5%、半乳糖35~40%、阿拉伯糖2~5%。
一种权利要求1所述复合速溶茶的制备方法,包括以下步骤:
(1)制备茯砖茶多酚
(1-1)茯砖茶叶粉碎后加入乙醇溶液中搅拌、浸提,得到混合物A;
(1-2)过滤混合物A,得到滤液B;
(1-3)重复步骤(1-2)若干次,合并滤液B后对滤液B进行灭菌,得到滤液C;
(1-4)板框压滤滤液C后超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;
(1-5)将滤液D双效浓缩后冷冻干燥,制得多酚粗品;
(1-6)将步骤(1-5)中所得的多酚粗品溶解后,经大孔树脂层析后冷冻干燥制得高纯度茶多酚;
(2)制备茯砖茶多糖
(2-1)茯砖茶叶粉碎后过筛,将过筛后的茯砖茶叶与无水乙醇混合,将混合物水浴脱脂,将脱脂后的茯砖茶叶进行干燥处理,制得过程产物E;
(2-2)过滤过程产物E,将过滤后的过程产物E与蒸馏水混合后进行超声波辅助热水提取,提取温度为60~80℃,提取时间为90~120min,提取出上清液F;
(2-3)重复步骤(2-2)若干次,合并上清液F,减压浓缩上清液F,在浓缩液中加入乙醇后过夜,制得浓缩液G;
(2-4)离心处理浓缩液G,得到多糖沉淀;将多糖沉淀溶解在蒸馏水中,反复冻融后,将冻融后的混合溶液通过蒸馏水透析48~72h,每4~8h换水一次,得到透析后的溶液H;
(2-5)将溶液H冷冻后干燥收集,制得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚30~85%,茶多糖15~70%混合后溶于水中,将混合溶液过滤后,将滤液冷冻干燥,制得茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶。
优选的,粉碎后的茯砖茶叶与乙醇的料液比为1g:50mL;步骤(1-3)中,重复步骤(1-2)2~3次。
优选的,将多酚粗品溶解后,将所得溶液通过大孔树脂层析,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL,质量浓度为60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱;其中溶液与大孔树脂的质量比为1:1。
优选的,步骤(2-1)中茯砖茶叶与无水乙醇混合的比例为1g:(5~10)mL;水浴温度为60~90℃,水浴脱脂2次,每次水浴2~4h。
优选的,步骤(2-2)中,过程产物E与蒸馏水按照体积比1:25混合;步骤(2-3)中,重复步骤(2-2)2~3次,减压浓缩后的浓缩液G与浓缩前的上清液F体积比为1:5;浓缩液G与乙醇的体积比为1:50,过夜温度为4℃。
一种上述茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶在制备具有降血糖、抗氧化和调节肠道菌群平衡的功能性食品中的应用。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
本发明公开了一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶,该茶以茯砖茶多酚和茯砖茶多糖复配制得,该复合茶充分利用茯砖茶已有的茶多酚与茶多糖,通过分离纯化,提高复合茶内茶多酚与茶多糖的含量,进而增加了茶多糖对茶多酚的强化作用,作为一种天然存在的肠道益生元—茯砖茶多糖不仅能够抑制小肠内各种碳水化合物降解酶的活性而调节血糖的动态平衡(调节高血糖症状),还可促进茶多酚在人体内的吸收并强化其生理活性,提高茶多酚的生物利用率与生理功能,与现有技术相比具有更为广泛的适用人群及更加显著的降血糖效果;通过降血糖试验、抗氧化试验、肠道菌群评估试验发现,本产品与单纯茶多酚或茶多糖相比具有更高的降血糖、抗氧化、菌群平衡作用,且本发明中茶多糖可以提高机体对没食子酸酯类茶黄酮的生物利用率,从而使本发明比单纯茶多酚或茶多糖及二者简单混合物具有更高效的降血糖、抗氧化、菌群调节作用。
本发明还公开了一种茯砖茶多酚和多糖复合速溶茶的制备方法,其中茶多酚由茯砖茶叶分离纯化获得,以茯砖茶叶原料,经板框压滤高效去除杂质,提高提纯度;经大孔树脂层析除掉了茶多酚提取中产生的低活性酚酸类化合物,且去除了咖啡因等具有潜在副作用杂质,使本发明在适宜于普通人群的同时也适合于易失眠人群。
在本发明茯砖茶多糖提取分离和纯化方法采用超声波辅助水提醇法,提取茯砖茶粗多糖,提取率平均为3.25%,经苯酚-硫酸法测定茯砖茶粗多糖的总糖含量平均为73.54%。超声波辅助提取过程中由于不需要加热以及在提取过程中无化学反应,可以避免对茯砖茶多糖的不良影响,同时超声波辅助提取提高了多糖的提取率,节省了原材料,提高了经济效益;通过透析处理溶解有多糖的溶液,增加纯化步骤,提高产品的纯度。
本发明对加工后的产品使用冷冻干燥技术,使得产品品质得到大幅度提升,有效避免了茶多酚在进一步加工中的损失。此外,使用冷冻干燥技术还可提升最终产品的组织疏松程度,使产品呈现出蜂窝状结构,使得产品具有优秀的溶解性和溶解速度。
本发明为速溶性固体干燥粉末性食品,当用于降血糖、抗氧化和调节肠道菌群平衡的功能性食品中时,不但具有降血糖、抗氧化、菌群平衡的作用,而且具有耐贮藏、方便运输与携带、利于食用等特点。
【附图说明】
图1为本发明制得的茶多酚HPLC色谱图;
其中,(A)为标准样品HPLC色谱图;
(B)为本发明制得的茶多酚的HPLC色谱图;
(C)为本发明制得的茶多糖HPLC色谱图;
图2为本发明降血糖活性测定结果;
其中,(A)为OGTT实验;(B)为ITT实验;
图3为本发明抗氧化试验中总还原力测定结果图;
图4为本发明抗氧化实验中DPPH自由基清除作用的测定结果图;
图5为本发明对小鼠肠道双歧杆菌的影响结果图;
图6为本发明对小鼠肠道乳酸杆菌的影响结果图;
图7为本发明对小鼠肠道杆菌的影响结果图;
图8为本发明对小鼠肠道肠球菌的影响结果图;
图9为本发明对小鼠产气荚膜梭菌的影响结果图。
【具体实施方式】
下面通过具体实施方式,对本发明做进一步详细描述。
本发明公开了一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶及其制备方法,所述茯砖茶为提纯后得到的茶多酚和茶多糖复配制成,该茯砖茶的制备过程包括以下步骤:
(1)制备茯砖茶多酚
(1-1)粉碎茯砖茶叶,按照料液比为1g:50mL加入到质量浓度为70~85%乙醇中,充分搅拌后浸提1.5h,得到混合物A;
(1-2)过滤步骤(1-1)得到的混合物A,取滤液得到滤液B;
(1-3)重复步骤(1-2)2~3次,合并滤液B后对滤液进行灭菌,得到滤液C;灭菌包括巴氏灭菌等灭菌方式。
(1-4)板框压滤滤液C进一步去除杂质,以提高提取纯度,然后超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;
(1-5)将滤液D双效浓缩后冷冻干燥,制得多酚粗品;
(1-6)将步骤(1-5)中所得多酚粗品用蒸馏水溶解后,将所得料液用大孔树脂层析,溶液与树脂的质量比1:1,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL 60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱。将洗脱液冷冻干燥制得高纯度茶多酚。
(2)制备茯砖茶多糖
(2-1)茯砖茶叶充分粉碎并过60目标准检验筛,并与无水乙醇以1g:(5~10)mL的料液比混合于索式提取装置中,在60~90℃下水浴脱脂2次,每次2~4h。脱脂后的原料残渣干燥以挥干乙醇,得到过程产物E备用;
(2-2)过滤过程产物E,将过滤后的产物与25倍体积的蒸馏水在烧瓶中混合均匀,置于超声波清洗机中,进行超声波辅助热水提取,提取出上清液F;(热水提取条件:提取温度60~80℃,提取时间90~120min,超声波功率700~900W);
(2-3)将上清液F的下层物质重复步骤(2-2)2~3次,合并上清液F后减压浓缩至混合前上清液F体积的1/5。边搅拌浓缩液边缓慢加入质量浓度为95%乙醇,加入乙醇的总量为浓缩液体积的50倍,加入完成后放置于4℃的环境中过夜,制得混合溶液G;
(2-4)将步骤(2-3)的混合溶液G离心获得多糖沉淀,离心速度为3500~7500rpm/min;然后用适当的蒸馏水将多糖沉淀溶解,反复冻融6~8次,并将溶液小心地转移到透析袋中,使用新鲜蒸馏水透析48~72h,4~8h换一次水,得到透析后的溶液H;
(2-5)将步骤(2-4)透析袋内的溶液H置于玻璃皿中,于-20℃环境下冷冻成固体后放入冷冻干燥机,冻干并收集,即得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚30~85%,茶多糖15~70%进行混合,加水复溶,待充分搅拌溶解后再次过滤去除不溶物,滤液进行冷冻干燥,制得茶多酚-茶多糖混合颗粒,即得复合速溶茶。
由以上方法制备出一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶,该茶按质量百分比计,组成为:茯砖茶多酚30~85%,茯砖茶多糖15~70%;优选的组成为:45%~50%的茯砖茶多酚,余量为茯砖茶多糖,该配比范围内复合速溶茶的降血糖效果、抗氧化功能、茶多糖促进茶多酚的生物利用率最佳。其中,茯砖茶多酚儿茶素类的组成按质量百分比计为:20~30%没食子酸、2~5%没食子儿茶素(GC)、2~5%表没食子儿茶素(EGC)、1~3%儿茶酸、1~3%咖啡因、50~60%表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、2~3%表儿茶素(EC)、1~3%没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、1~2%表儿茶素没食子酸酯(ECG)。茯砖茶多糖按质量百分比计的组成为:甘露糖10~15%、鼠李糖0~3%、葡萄糖醛酸5~10%、半乳糖醛酸5~10%、葡萄糖25~30%、木糖2~5%、半乳糖35~40%、阿拉伯糖2~5%。
本发明还提供了一种调节血糖的复合速溶茶作为功能性保健食品的用途,尤其是作为降血糖、抗氧化、调节肠道菌群平衡的功能性食品中的用途;在制备茶多酚和茶多糖为主要原料的产品中,茶多糖能够影响小肠内各种碳水化合物降解酶的活性且能够促进茶多酚在体内的高效吸收,具有较强的降血糖与抗氧化增强剂的用途。
本发明的一种降血糖复合速溶茶可作为保健食品直接服用,也可采用其他方法将其制备成胶囊剂、片剂或口服液剂等剂型的保健食品。
本发明胶囊剂的制备方法:将茶多酚与茶多糖的混合颗粒按常规制胶囊的方法制成胶囊,载体为常规药用胶囊载体,每粒胶囊0.15g~0.25g,每粒胶囊含有茶多糖与茶多酚复配颗粒100mg~160mg。该胶囊剂的用法用量为:每日3次,每次3~5粒。
片剂的制备方法:将茶多酚与茶多糖固体颗粒按常规制片剂的方法制成片剂,辅料为常规药学上可接受的辅料(如淀粉、硬脂酸镁、糊精等),每片0.25g~0.5g,每片含有茶多酚与茶多糖共100mg~160mg。该片剂的用法用量为:每日3次,每次3~5片。
口服液的制备方法:将茶多酚与茶多糖按比例混合后、经过蒸馏水复溶、高压均质、过滤,按常规制口服液的方法加药学上可接受的辅助性成分(如调味剂)制成口服液,每瓶10mL,每瓶含茶多酚与茶多糖100mg~160mg。该口服液的用法用量为:每日3次,每次1~2瓶。
为分析制得的复合茶组成含量,本发明采用HPLC技术分析每个实施例制备出的茶多酚和茶多糖组成,以0.1%甲酸和甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为280nm,柱温30℃。由图1可知,对于实施例1制得的复合茶,该方法提取的茶多酚主要组成:14.38±0.63mg/g没食子酸、18.81±0.92mg/g GC、21.88±0.76mg/g EGC、42.89±1.38mg/g EGCG。
实施例1制得的复合茶,经过HPLC-UV检测技术测定茯砖茶多糖组分的单糖组成,其洗脱曲线和相关数据分析结果分别如表1所示,从图2中可以看出10种单糖和茯砖茶多糖组分样品在40min内均可保持较好的基线分离。对比洗脱曲线中单糖标品的保留时间可以确定茯砖茶多糖中的单糖组成,根据各洗脱峰的峰面积可计算出每种单糖在样品中所占的摩尔百分比,其中甘露糖(14.71%)、鼠李糖(1.13%)、葡萄糖醛酸(9.87%)、半乳糖醛酸(5.49%)、葡萄糖(25.69%)、木糖(2.42%)、半乳糖(37.52%)、阿拉伯糖(3.17%)。
表1.茯砖茶多糖的单糖组成及相应摩尔百分比
—:未检出
本发明采用具有高质量品质的冷冻干燥技术对茶多酚和茶多糖按比例复配后的复合物进行干制得最终产品。
实施例1
(1)制备茯砖茶多酚
粉碎茯砖茶叶,茯砖茶叶经过60目标准检验筛后,按照料液比为1:50加入到质量浓度为80%乙醇中,充分搅拌后浸提1.5h;过滤浸提液,取滤液;重复提取2次,合并滤液,滤液加热至80℃巴氏灭菌;灭菌后的液体经板框压滤进一步去除杂质后经超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;收集的滤液经过双效浓缩后进行冷冻干燥制得茶多酚粗品;茶多酚粗品用蒸馏水溶解后,将所得溶液用与溶液质量比为1:1的大孔树脂层析,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL 60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱,将洗脱液冷冻干燥制得高纯度茶多酚。
(2)制备茯砖茶多糖
茯砖茶叶充分粉碎并过60目标准检验筛,并与无水乙醇以1:5的料液比混合于索氏提取装置中,在80℃下水浴脱脂2次,每次4h;脱脂后的原料残渣干燥以挥干乙醇,得到过程产物备用;将过滤后的产物与25倍体积的蒸馏水在烧瓶中混合均匀,置于超声波清洗机中,进行超声波辅助热水提取,提取出上清液F;(热水提取条件:提取温度80℃,提取时间120min,超声波功率900W);将上清液F的下层物质重复步骤溶解后,重复超声波辅助热水提取2次,合并上清液F,减压浓缩上清液F至混合前上清液F体积的1/5。边搅拌浓缩液边缓慢加入50倍体积的95%乙醇,加入完成后放置于4℃的环境中过夜,制得混合溶液G;以3500rpm/min离心分离混合溶液G离心获得多糖沉淀,然后用蒸馏水将多糖沉淀溶解,反复冻融8次,并将溶液小心地转移到透析袋中,使用新鲜蒸馏水透析72h(8h换一次水);将透析袋内的溶液置于玻璃皿中,于-20℃环境下冷冻成固体后放入冷冻干燥机,冻干并收集,即得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚45%,茶多糖55%进行混合,加水复溶,待充分搅拌溶解后再次过滤去除不溶物,滤液进行冷冻干燥,制得茶多酚-茶多糖混合颗粒,即得复合速溶茶。
该复合速溶茶中茶多酚由以下质量百分比的儿茶素类组成:25%没食子酸、4%GC、4%EGC、2%儿茶酸、2%咖啡因、55%EGCG、3%EC、3%GCG、2%ECG。
茯砖茶多糖由以下质量百分比的单糖组成:甘露糖14.71%、鼠李糖1.13%葡萄糖醛酸9.87%、半乳糖醛酸5.49%、葡萄糖25.69%、木糖2.42%、半乳糖37.52%、阿拉伯糖3.17%。
实施例2
(1)制备茯砖茶多酚
粉碎茯砖茶叶,茯砖茶叶经过60目标准检验筛后,按照料液比为1:50加入到质量浓度为82%乙醇中,充分搅拌后浸提1.5h;过滤浸提液,取滤液;重复提取2次,合并滤液,滤液加热至80℃巴氏灭菌;灭菌后的液体经板框压滤进一步去除杂质后经超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;收集的滤液经过双效浓缩后进行冷冻干燥制得茶多酚粗品;茶多酚粗品用蒸馏水溶解后,将所得溶液用与溶液质量比为1:1的大孔树脂层析,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL 60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱,将洗脱液冷冻干燥制得高纯度茶多酚。
(2)制备茯砖茶多糖
茯砖茶叶充分粉碎并过60目标准检验筛,并与无水乙醇以1:10的料液比混合于索氏提取装置中,在60℃下水浴脱脂2次,每次4h;脱脂后的原料残渣干燥以挥干乙醇,得到过程产物备用;将过滤后的产物与25倍体积的蒸馏水在烧瓶中混合均匀,置于超声波清洗机中,进行超声波辅助热水提取,提取出上清液F;(热水提取条件:提取温度60℃,提取时间90min,超声波功率700W);将上清液F的下层物质重复步骤溶解后,重复超声波辅助热水提取3次,合并上清液F,减压浓缩上清液F至混合前上清液F体积的1/5。边搅拌浓缩液边缓慢加入50倍体积的95%乙醇,加入完成后放置于4℃的环境中过夜,制得混合溶液G;以7500rpm/min离心分离混合溶液G离心获得多糖沉淀,然后用蒸馏水将多糖沉淀溶解,反复冻融6次,并将溶液小心地转移到透析袋中,使用新鲜蒸馏水透析48h(6h换一次水);将透析袋内的溶液置于玻璃皿中,于-20℃环境下冷冻成固体后放入冷冻干燥机,冻干并收集,即得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚85%,茶多糖15%进行混合,加水复溶,待充分搅拌溶解后再次过滤去除不溶物,滤液进行冷冻干燥,制得茶多酚-茶多糖混合颗粒,即得复合速溶茶。
该复合速溶茶中茶多酚由以下质量百分比的酚类组成:22%没食子酸、5%GC、3%EGC、3%儿茶酸、1%咖啡因、59%EGCG、2%EC、3%GCG、2%ECG。
茯砖茶多糖由以下质量百分比的单糖组成:甘露糖15%、鼠李糖1%、葡萄糖醛酸8%、半乳糖醛酸6%、葡萄糖26%、木糖3%、半乳糖38%、阿拉伯糖3%。
实施例3
(1)制备茯砖茶多酚
粉碎茯砖茶叶,茯砖茶叶经过60目标准检验筛后,按照料液比为1:50加入到质量浓度为85%乙醇中,充分搅拌后浸提1.5h;过滤浸提液,取滤液;重复提取3次,合并滤液,滤液加热至80℃巴氏灭菌;灭菌后的液体经板框压滤进一步去除杂质后经超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;收集的滤液经过双效浓缩后进行冷冻干燥制得茶多酚粗品;茶多酚粗品用蒸馏水溶解后,将所得溶液用与溶液质量比为1:1的大孔树脂层析,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL 60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱,将洗脱液冷冻干燥制得高纯度茶多酚。
(2)制备茯砖茶多糖
茯砖茶叶充分粉碎并过60目标准检验筛,并与无水乙醇以1:8的料液比混合于索氏提取装置中,在70℃下水浴脱脂2次,每次4h;脱脂后的原料残渣干燥以挥干乙醇,得到过程产物备用;将过滤后的产物与25倍体积的蒸馏水在烧瓶中混合均匀,置于超声波清洗机中,进行超声波辅助热水提取,提取出上清液F;(热水提取条件:提取温度70℃,提取时间100min,超声波功率800W);将上清液F的下层物质重复步骤溶解后,重复超声波辅助热水提取3次,合并上清液F,减压浓缩上清液F至混合前上清液F体积的1/5。边搅拌浓缩液边缓慢加入50倍体积的95%乙醇,加入完成后放置于4℃的环境中过夜,制得混合溶液G;以6500rpm/min离心分离混合溶液G离心获得多糖沉淀,然后用蒸馏水将多糖沉淀溶解,反复冻融6次,并将溶液小心地转移到透析袋中,使用新鲜蒸馏水透析60h(4h换一次水);将透析袋内的溶液置于玻璃皿中,于-20℃环境下冷冻成固体后放入冷冻干燥机,冻干并收集,即得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚70%,茶多糖30%进行混合,加水复溶,待充分搅拌溶解后再次过滤去除不溶物,滤液进行冷冻干燥,制得茶多酚-茶多糖混合颗粒,即得复合速溶茶。
该复合速溶茶中茶多酚由以下质量百分比的酚类组成:30%没食子酸、5%GC、5%EGC、1%儿茶酸、3%咖啡因、50%EGCG、3%EC、2%GCG、1%ECG。
茯砖茶多糖由以下质量百分比的单糖组成:甘露糖12%、鼠李糖3%、葡萄糖醛酸5%、半乳糖醛酸10%、葡萄糖30%、木糖2%、半乳糖36%、阿拉伯糖2%。
实施例4
(1)制备茯砖茶多酚
粉碎茯砖茶叶,茯砖茶叶经过60目标准检验筛后,按照料液比为1:50加入到质量浓度为70%乙醇中,充分搅拌后浸提1.5h;过滤浸提液,取滤液;重复提取3次,合并滤液,滤液加热至80℃巴氏灭菌;灭菌后的液体经板框压滤进一步去除杂质后经超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;收集的滤液经过双效浓缩后进行冷冻干燥制得茶多酚粗品;茶多酚粗品用蒸馏水溶解后,将所得溶液用与溶液质量比为1:1的大孔树脂层析,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL 60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱,将洗脱液冷冻干燥制得高纯度茶多酚。
(2)制备茯砖茶多糖
茯砖茶叶充分粉碎并过60目标准检验筛,并与无水乙醇以1:7的料液比混合于索氏提取装置中,在90℃下水浴脱脂2次,每次2h;脱脂后的原料残渣干燥以挥干乙醇,得到过程产物备用;将过滤后的产物与25倍体积的蒸馏水在烧瓶中混合均匀,置于超声波清洗机中,进行超声波辅助热水提取,提取出上清液F;(热水提取条件:提取温度80℃,提取时间110min,超声波功率900W);将上清液F的下层物质重复步骤溶解后,重复超声波辅助热水提取2次,合并上清液F,减压浓缩上清液F至混合前上清液F体积的1/5。边搅拌浓缩液边缓慢加入50倍体积的95%乙醇,加入完成后放置于4℃的环境中过夜,制得混合溶液G;以5000rpm/min离心分离混合溶液G离心获得多糖沉淀,然后用蒸馏水将多糖沉淀溶解,反复冻融8次,并将溶液小心地转移到透析袋中,使用新鲜蒸馏水透析60h(6h换一次水);将透析袋内的溶液置于玻璃皿中,于-20℃环境下冷冻成固体后放入冷冻干燥机,冻干并收集,即得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚50%,茶多糖50%进行混合,加水复溶,待充分搅拌溶解后再次过滤去除不溶物,滤液进行冷冻干燥,制得茶多酚-茶多糖混合颗粒,即得复合速溶茶。
该复合速溶茶中茶多酚由以下质量百分比的酚类组成:20%没食子酸、5%GC、5%EGC、3%儿茶酸、3%咖啡因、60%EGCG、2%EC、1%GCG、1%ECG。
茯砖茶多糖由以下质量百分比的单糖组成:甘露糖10%、鼠李糖0%、葡萄糖醛酸10%、半乳糖醛酸8%、葡萄糖27%、木糖5%、半乳糖35%、阿拉伯糖5%。
实施例5
(1)制备茯砖茶多酚
粉碎茯砖茶叶,茯砖茶叶经过60目标准检验筛后,按照料液比为1:50加入到质量浓度为77%乙醇中,充分搅拌后浸提1.5h;过滤浸提液,取滤液;重复提取2次,合并滤液,滤液加热至80℃巴氏灭菌;灭菌后的液体经板框压滤进一步去除杂质后经超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;收集的滤液经过双效浓缩后进行冷冻干燥制得茶多酚粗品;茶多酚粗品用蒸馏水溶解后,将所得溶液用与溶液质量比为1:1的大孔树脂层析,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL 60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱,将洗脱液冷冻干燥制得高纯度茶多酚。
(2)制备茯砖茶多糖
茯砖茶叶充分粉碎并过60目标准检验筛,并与无水乙醇以1:6的料液比混合于索氏提取装置中,在80℃下水浴脱脂2次,每次3h;脱脂后的原料残渣干燥以挥干乙醇,得到过程产物备用;将过滤后的产物与25倍体积的蒸馏水在烧瓶中混合均匀,置于超声波清洗机中,进行超声波辅助热水提取,提取出上清液F;(热水提取条件:提取温度70℃,提取时间110min,超声波功率800W);将上清液F的下层物质重复步骤溶解后,重复超声波辅助热水提取2次,合并上清液F,减压浓缩上清液F至混合前上清液F体积的1/5。边搅拌浓缩液边缓慢加入50倍体积的95%乙醇,加入完成后放置于4℃的环境中过夜,制得混合溶液G;以4000rpm/min离心分离混合溶液G离心获得多糖沉淀,然后用蒸馏水将多糖沉淀溶解,反复冻融7次,并将溶液小心地转移到透析袋中,使用新鲜蒸馏水透析48h(8h换一次水);将透析袋内的溶液置于玻璃皿中,于-20℃环境下冷冻成固体后放入冷冻干燥机,冻干并收集,即得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚31%,茶多糖69%进行混合,加水复溶,待充分搅拌溶解后再次过滤去除不溶物,滤液进行冷冻干燥,制得茶多酚-茶多糖混合颗粒,即得复合速溶茶。
该复合速溶茶中茶多酚由以下质量百分比的酚类组成:28%没食子酸、2%GC、2%EGC、3%儿茶酸、3%咖啡因、56%EGCG、3%EC、1%GCG、2%ECG。
茯砖茶多糖由以下质量百分比的单糖组成:甘露糖11%、鼠李糖2%、葡萄糖醛酸8%、半乳糖醛酸5%、葡萄糖25%、木糖5%、半乳糖40%、阿拉伯糖4%。
实施例6
(1)制备茯砖茶多酚
粉碎茯砖茶叶,茯砖茶叶经过60目标准检验筛后,按照料液比为1:50加入到质量浓度为84%乙醇中,充分搅拌后浸提1.5h;过滤浸提液,取滤液;重复提取2次,合并滤液,滤液加热至80℃巴氏灭菌;灭菌后的液体经板框压滤进一步去除杂质后经超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;收集的滤液经过双效浓缩后进行冷冻干燥制得茶多酚粗品;茶多酚粗品用蒸馏水溶解后,将所得溶液用与溶液质量比为1:1的大孔树脂层析,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL 60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱,将洗脱液冷冻干燥制得高纯度茶多酚。
(2)制备茯砖茶多糖
茯砖茶叶充分粉碎并过60目标准检验筛,并与无水乙醇以1:5的料液比混合于索氏提取装置中,在60℃下水浴脱脂2次,每次3h;脱脂后的原料残渣干燥以挥干乙醇,得到过程产物备用;将过滤后的产物与25倍体积的蒸馏水在烧瓶中混合均匀,置于超声波清洗机中,进行超声波辅助热水提取,提取出上清液F;(热水提取条件:提取温度60℃,提取时间100min,超声波功率700W);将上清液F的下层物质重复步骤溶解后,重复超声波辅助热水提取3次,合并上清液F,减压浓缩上清液F至混合前上清液F体积的1/5。边搅拌浓缩液边缓慢加入50倍体积的95%乙醇,加入完成后放置于4℃的环境中过夜,制得混合溶液G;以4500rpm/min离心分离混合溶液G离心获得多糖沉淀,然后用蒸馏水将多糖沉淀溶解,反复冻融7次,并将溶液小心地转移到透析袋中,使用新鲜蒸馏水透析72h(6h换一次水);将透析袋内的溶液置于玻璃皿中,于-20℃环境下冷冻成固体后放入冷冻干燥机,冻干并收集,即得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚88%,茶多糖12%进行混合,加水复溶,待充分搅拌溶解后再次过滤去除不溶物,滤液进行冷冻干燥,制得茶多酚-茶多糖混合颗粒,即得复合速溶茶。
该复合速溶茶中茶多酚由以下质量百分比的酚类组成:29%没食子酸、3%GC、3%EGC、1%儿茶酸、2%咖啡因、54%EGCG、3%EC、3%GCG、2%ECG。
茯砖茶多糖由以下质量百分比的单糖组成:甘露糖14%、鼠李糖3%、葡萄糖醛酸7%、半乳糖醛酸7%、葡萄糖28%、木糖3%、半乳糖36%、阿拉伯糖2%。
实施例7
(1)制备茯砖茶多酚
粉碎茯砖茶叶,茯砖茶叶经过60目标准检验筛后,按照料液比为1:50加入到质量浓度为75%乙醇中,充分搅拌后浸提1.5h;过滤浸提液,取滤液;重复提取3次,合并滤液,滤液加热至80℃巴氏灭菌;灭菌后的液体经板框压滤进一步去除杂质后经超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;收集的滤液经过双效浓缩后进行冷冻干燥制得茶多酚粗品;茶多酚粗品用蒸馏水溶解后,将所得溶液用与溶液质量比为1:1的大孔树脂层析,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL 60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱,将洗脱液冷冻干燥制得高纯度茶多酚。
(2)制备茯砖茶多糖
茯砖茶叶充分粉碎并过60目标准检验筛,并与无水乙醇以1:9的料液比混合于索氏提取装置中,在70℃下水浴脱脂2次,每次2h;脱脂后的原料残渣干燥以挥干乙醇,得到过程产物备用;将过滤后的产物与25倍体积的蒸馏水在烧瓶中混合均匀,置于超声波清洗机中,进行超声波辅助热水提取,提取出上清液F;(热水提取条件:提取温度80℃,提取时间90min,超声波功率900W);将上清液F的下层物质重复步骤溶解后,重复超声波辅助热水提取2次,合并上清液F,减压浓缩上清液F至混合前上清液F体积的1/5。边搅拌浓缩液边缓慢加入50倍体积的95%乙醇,加入完成后放置于4℃的环境中过夜,制得混合溶液G;以5500rpm/min离心分离混合溶液G离心获得多糖沉淀,然后用蒸馏水将多糖沉淀溶解,反复冻融6次,并将溶液小心地转移到透析袋中,使用新鲜蒸馏水透析72h(4h换一次水);将透析袋内的溶液置于玻璃皿中,于-20℃环境下冷冻成固体后放入冷冻干燥机,冻干并收集,即得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚60%,茶多糖40%进行混合,加水复溶,待充分搅拌溶解后再次过滤去除不溶物,滤液进行冷冻干燥,制得茶多酚-茶多糖混合颗粒,即得复合速溶茶。
该复合速溶茶中茶多酚由以下质量百分比的酚类组成:27%没食子酸、4%GC、2%EGC、2%儿茶酸、1%咖啡因、58%EGCG、2%EC、3%GCG、1%ECG。
茯砖茶多糖由以下质量百分比的单糖组成:甘露糖15%、鼠李糖0%、葡萄糖醛酸6%、半乳糖醛酸9%、葡萄糖29%、木糖2%、半乳糖37%、阿拉伯糖2%。
为了验证本发明宣称的功能,利用本发明进行了调节肠道菌群和通便功能测定,对茶多糖促进茶多酚增效生物利用率、降血糖和抗氧化功能的功能进行了研究。
一、降血糖试验
48只SD大鼠以每组8只分为正常组、高脂组、高脂茶多酚干预组、高脂茶多糖干预组和高脂本产品组(实施例1制备的复合茶)8周高脂饮食喂养后,采用口服葡萄氧耐受试验(OGTT)和胰岛素耐受实验(ITT)来评价本产品的降血糖效果,如图2所示。在测试OGTT和ITT之前,被测大鼠禁食禁水一夜。测试当天,OGTT实验以葡萄糖(2g/kg体重)灌胃被测大鼠,并在0、30、60、90和120min时采集尾部血液,用血糖仪测试血糖水平,记录数据如图(A)所示。而ITT实验以胰岛素(0.75U/kg体重)腹腔注射到被测大鼠,并在0、30、60、900和120min时采集尾部血液,用血糖仪测试血糖水平,记录数据如图(B)所示。结果发现,OGTT结果显示高脂组血糖较正常组血糖有显著性的升高,正常组血糖在120min后基本恢复到空腹血糖的水平,但高脂组在120min时,还维持相对较高的的血糖水平,而本产品干预8周后的高脂喂养大鼠高血糖症得到了一定改善,并且本产品降血糖效果优于单独茶多酚或茶多糖组。而ITT结果我们发现,在注射胰岛素后,正常组、高脂组、茶多酚组、茶多糖组和本产品组血糖都有下降的趋势,在120min时渐渐回升。高脂组血糖下降幅度相较于其它组显著性减小,并且较本产品下降的幅度更小,说明本产品较单独干预组注射的胰岛素利用率升高,降血糖的功能得到进一步的改善。
二、抗氧化试验
利用总还原力和对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除作用实验来评价本发明的抗氧化能力,试验以蒸馏水作空白对照,测定结果如图3和图4所示。由图可知,茶多酚与茶多糖的组合方式(实施例1制备的复合茶)比茶多酚或茶多糖的还原力和自由基清除能力强,表明茶多酚与茶多糖组合物具有强的抗氧化功能,茶多糖能够促进没食子酸酯类茶黄酮的生物利用度。
三、肠道菌群评估试验
48只SD大鼠以每组10只随机分成控制组和不同剂量本发明处理组(低剂量组0.42g/kg·bw,中剂量组0.83g/kg·bw和高剂量组2.49g/kg·bw)。将本产品(实施例1制备的复合茶)按照制定浓度溶解于无菌水中,于每天上午9:00连续灌胃14天。控制组每天给予无菌水。大鼠灌喂体积为0.2mL/10g·bw。收集给药前后的24小时粪便于无菌管内。适当稀释后的粪便匀浆采用待测菌群适宜生长条件培育。由图5和图6可知茶多酚和茶多糖均可显著提升肠道双歧杆菌和乳酸杆菌的数量,并且本发明茶多酚与茶多糖联合使用效果更显著。且从图7、图8和图9可知,对大鼠给予茶多酚和茶多糖均可有效降低肠道杆菌、肠球菌和产气荚膜梭菌的数量。且本发明产品的茶多酚与茶多糖联合使用效果更显著。由以上结果可知,本发明可有效改进肠道菌群平衡。
四、茶多糖促进茶多酚生物利用率的研究
24只小鼠随机分为三组,一组给予茶多酚,一组给予茶多糖,第三组给予同等剂量的本发明(实施例1制备的复合茶)200mg/kg剂量。灌喂管理持续8周,后处死小鼠取血清,血清经酶水解和硅烷衍生化处理后进行GC-MS分析。如表3所示,本产品处理组血清中总酚含量显著高于单独使用茶多酚。ECG和EGCG浓度在本产品处理的小鼠血清中浓度也是显著高于其在仅使用茶多酚处理的小鼠,而咖啡酸、EC和EGC水平在两个处理组中没有显著差异,表明茶多糖主要促进没食子酸酯类儿茶素的吸收,从而可知本发明采用纯化后的茶多酚与茶多糖制作复合速溶茶是更科学的方法。
表3本产品对小鼠血清茶多酚含量的影响
#p<0.07和##p<0.02。
综合以上实验结果,本产品(茶多酚和茶多糖复合物)与单纯茶多酚或茶多糖相比具有更高的降血糖、抗氧化、菌群平衡、缓解便秘的作用。且本发明中茶多糖可以提高机体对没食子酸酯类茶黄酮的生物利用率,从而使本发明比单纯茶多酚或茶多糖及二者简单混合物具有更高效的降血糖、抗氧化、菌群调节作用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶,其特征在于,按质量百分比计,组成为:茯砖茶多酚30~85%,茯砖茶多糖15~70%;茯砖茶多酚和茯砖茶多糖均由茯砖茶叶分离纯化获得;所述复合速溶茶由茯砖茶多酚与茯砖茶多糖复配制成。
2.根据权利要求1所述的一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶,其特征在于,按质量百分比计,组成为:45%~50%的茯砖茶多酚,余量为茯砖茶多糖。
3.根据权利要求1或2所述的一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶,其特征在于,按质量百分比计,茯砖茶多酚中儿茶素类的组成为:没食子酸20~30%、没食子儿茶素2~5%、表没食子儿茶素2~5%、儿茶酸1~3%、咖啡因1~3%、表没食子儿茶素没食子酸酯50~60%、表儿茶素2~3%、没食子儿茶素没食子酸酯1~3%、表儿茶素没食子酸酯1~2%。
4.根据权利要求1或2所述的一种茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶,其特征在于,按质量百分比计,茯砖茶多糖的组成为:甘露糖10~15%、鼠李糖0~3%、葡萄糖醛酸5~10%、半乳糖醛酸5~10%、葡萄糖25~30%、木糖2~5%、半乳糖35~40%、阿拉伯糖2~5%。
5.一种权利要求1所述复合速溶茶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备茯砖茶多酚
(1-1)茯砖茶叶粉碎后加入乙醇溶液中搅拌、浸提,得到混合物A;
(1-2)过滤混合物A,得到滤液B;
(1-3)重复步骤(1-2)若干次,合并滤液B后对滤液B进行灭菌,得到滤液C;
(1-4)板框压滤滤液C后超滤去除Mw>10000Da的大分子,收集滤液,得到滤液D;
(1-5)将滤液D双效浓缩后冷冻干燥,制得多酚粗品;
(1-6)将步骤(1-5)中所得的多酚粗品溶解后,经大孔树脂层析后冷冻干燥制得高纯度茶多酚;
(2)制备茯砖茶多糖
(2-1)茯砖茶叶粉碎后过筛,将过筛后的茯砖茶叶与无水乙醇混合,将混合物水浴脱脂,将脱脂后的茯砖茶叶进行干燥处理,制得过程产物E;
(2-2)过滤过程产物E,将过滤后的过程产物E与蒸馏水混合后进行超声波辅助热水提取,提取温度为60~80℃,提取时间为90~120min,提取出上清液F;
(2-3)重复步骤(2-2)若干次,合并上清液F,减压浓缩上清液F,在浓缩液中加入乙醇后过夜,制得浓缩液G;
(2-4)离心处理浓缩液G,得到多糖沉淀;将多糖沉淀溶解在蒸馏水中,反复冻融后,将冻融后的混合溶液通过蒸馏水透析48~72h,每4~8h换水一次,得到透析后的溶液H;
(2-5)将溶液H冷冻后干燥收集,制得茯砖茶多糖;
(3)复配茯砖茶多酚和多糖
取步骤(1)制得的茯砖茶多酚与步骤(2)制得的茯砖茶多糖,以茶多酚30~85%,茶多糖15~70%混合后溶于水中,将混合溶液过滤后,将滤液冷冻干燥,制得茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶。
6.根据权利要求5所述的复合速溶茶的制备方法,其特征在于,步骤(1-1)中,粉碎后的茯砖茶叶与乙醇的料液比为1g:50mL;步骤(1-3)中,重复步骤(1-2)2~3次。
7.根据权利要求5所述的复合速溶茶的制备方法,其特征在于,步骤(1-6)中,将多酚粗品溶解后,将所得溶液通过大孔树脂层析,上样体积200mL,上样流速1mL·min-1进行动态吸附;吸附饱和平衡后,采用50mL,质量浓度为60%乙醇溶液,以1.5mL·min-1的流速进行动态洗脱;其中溶液与大孔树脂的质量比为1:1。
8.根据权利要求5所述的复合速溶茶的制备方法,其特征在于,步骤(2-1)中茯砖茶叶与无水乙醇混合的比例为1g:(5~10)mL;水浴温度为60~90℃,水浴脱脂2次,每次水浴2~4h。
9.根据权利要求5所述的复合速溶茶的制备方法,其特征在于,步骤(2-2)中,过程产物E与蒸馏水按照体积比1:25混合;步骤(2-3)中,重复步骤(2-2)2~3次,减压浓缩后的浓缩液G与浓缩前的上清液F体积比为1:5;浓缩液G与乙醇的体积比为1:50,过夜温度为4℃。
10.一种如权利要求1或2所述的茯砖茶多酚和多糖的复合速溶茶在制备具有降血糖、抗氧化和调节肠道菌群平衡的功能性食品中的应用。
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