CN109260304A - 一种预防非酒精性脂肪肝的中药复方制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有预防非酒精性脂肪肝功能的中药复方制剂,其组分和含量如下:党参50~80g,白术40~60g,车前子20~25g,藿香20~50g,茯苓40~50g,菟丝子20~35g,熟地5~10g,陈皮25~40g,半边莲10g,甘草20~25g。本发明还提供了该中药复方制剂的制备方法。本发明的中药组方对小鼠高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝起到预防的作用,灌服本发明中药组方的高脂饮食小鼠,脂肪肝病变明显减轻,该中药组方可通过降低血脂、减轻肝脏脂质沉积、抑制肝脏氧化应激、改善肝脏细胞损伤等方面对非酒精性脂肪肝进行有效预防。
Description
技术领域
本发明属于中药领域,具体涉及一种具有预防非酒精性脂肪肝功能的中药复方制剂,及其在制备预防非酒精性脂肪肝产品中的应用。
技术背景
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是指除酒精和其他明确的损肝因素所导致的肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征,从单纯的脂肪堆积(脂肪变性)到其他严重的肝脏疾病,NAFLD的发病机制尚不十分清楚,而大多数临床病例也表现为与多种因素有关,目前更容易被接受的理论是“二次打击”学说,动物患脂肪肝后往往会继发多种疾病,脂肪肝对家畜养殖行业有较大影响,对奶牛行业的影响尤为严重,有报道表明,奶牛围产期脂肪肝发病率超过30%,奶牛患脂肪肝后会食欲减退、体重下降,进而造成奶牛繁殖性能障碍及产奶量下降,直接造成经济损失。
目前常用于临床治疗脂肪肝的药物有很多,但都存在着一定的问题,如副作用大、价格高、疗效具有局限性等,由于中药在临床具有副作用小、成本较低、对机体刺激小等优点,在近年来被广泛研究,如中药五味子能够通过降低脂肪酸合成酶、SREBP-2等改善小鼠肝脏内脂质的过度沉积;中草药桑叶提取物可通过下调脂肪生成酶,同时上调脂肪分解标志物来预防非酒精性脂肪肝;也包括复方制剂如中药组方四逆散对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪肝具有很好的治疗作用,中药对非酒精性脂肪肝的治疗的作用相对于西药毒副反应较少,相比单一中药,中药复方则具有多组分、多效应的优势。
临床上对动物脂肪肝疾病的预防应大于治疗,然而,目前临床上对脂肪肝疾病的预防还不完善,还没有一种较好的脂肪肝预防药物,本发明正以此为出发点,发明了一种预防非酒精性脂肪肝的中药复方制剂。
发明内容
本发明的第一目的是提供一种预防非酒精性脂肪肝的中药复方制剂,解决目前临床治疗脂肪肝的药物副作用大、价格高、疗效具有局限性的问题。
本发明的第二目的是提供上述中药复方制剂的制备方法。
本发明的第三目的是提供上述中药复方制剂的应用。
本发明通过以下技术方案来实现:
一、一种预防非酒精性脂肪肝的中药复方制剂,其特征在于,是由以下成分及含量的中草药原料制成:党参50~80g,白术40~60g,车前子20~25g,藿香20~50g,茯苓40~50g,菟丝子20~35g,熟地5~10g,陈皮25~40g,半边莲10g,甘草20~25g。
具体地,本发明所述的中药复方制剂,其特征在于,是由以下成分及含量的中草药原料制成:党参60g,白术50g,车前子20g,藿香30g,茯苓40g,菟丝子30g,熟地10g,陈皮30g,半边莲10g,甘草20g。
具体地,本发明所述的中药复方制剂,其特征在于,是由以下成分及含量的中草药原料制成:党参64g,白术52g,车前子22g,藿香40g,茯苓46g,菟丝子33g,熟地10g,陈皮36g,半边莲10g,甘草24g。
二、一种预防非酒精性脂肪肝的中药复方制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将各组分药材原料按照上述重量份进行称重、混合;
(2)将称好的原料加入10倍量原料重量份的蒸馏水,浸泡过夜后,加热至微沸,保持微沸50min后过滤得中药液;
(3)将步骤(2)的剩余药渣加入8倍量药渣重量份的蒸馏水,加热至微沸,保持微沸30min后过滤得中药液;
(4)将上述两次药液合并,加热浓缩至生药浓度1g/mL,得到复方中药制剂。
三、本发明提供了所述中药复方制剂在制备预防非酒精性脂肪肝产品中的应用。
具体的,本发明提供了所述中药复方制剂在制备预防高血脂症的产品、降低低密度脂蛋白的产品、预防肝脏氧化应激的产品、降低谷草转氨酶的产品、降低谷丙转氨酶的产品或者降低碱性磷酸酶的产品中的用途。
采用上述技术方案的积极效果:本发明的中药组方对小鼠高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝起到预防的作用,灌服本发明中药组方的高脂饮食小鼠,脂肪肝病变具有明显减轻,该中药组方可通过降低血脂、减轻肝脏脂质沉积、抑制肝脏氧化应激、改善肝脏细胞损伤的方面对非酒精性脂肪肝进行有效预防;同时避免西药类预防非酒精性脂肪肝过程中毒副作用大,以及单一中药效果不理想的缺陷,并且本发明的预防非酒精性脂肪肝的中药复方制剂具有使用方便,成本低廉,副作用小,效果显著等优点。
附图说明
图1为各组小鼠肝脏HE染色结果;
图2为各组小鼠肝脏油红染色结果。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明,以下所述,仅是对本发明的较佳实施例而已,并非对本发明做其他形式的限制,任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为同等变化的等效实施例,凡是未脱离本发明方案内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化与改型,均落在本发明的保护范围内。
实施例1
一种中药复方制剂,由以下重量份数的中草药原料制成:党参60g,白术50g,车前子20g,藿香30g,茯苓40g,菟丝子30g,熟地10g,陈皮30g,半边莲10g,甘草20g。
上述中药复方制剂通过以下步骤制备:
(1)将各组分药材原料按照上述重量份进行称重、混合;(2)将称好的原料加入10倍量原料重量份的蒸馏水,浸泡过夜后,加热至微沸,保持微沸50min后过滤得中药液;(3)将步骤(2)的剩余药渣加入8倍量药渣重量份的蒸馏水,加热至微沸,保持微沸30min后过滤得中药液;(4)将上述两次药液合并,加热浓缩至生药浓度1g/mL,得到复方中药制剂。
实施例2
一种中药复方制剂,由以下重量份数的中草药原料制成:党参64g,白术52g,车前子22g,藿香40g,茯苓46g,菟丝子33g,熟地10g,陈皮36g,半边莲10g,甘草24g。
上述中药复方制剂通过以下步骤制备:
(1)将各组分药材原料按照上述重量份进行称重、混合;(2)将称好的原料加入10倍量原料重量份的蒸馏水,浸泡过夜后,加热至微沸,保持微沸50min后过滤得中药液;(3)将步骤(2)的剩余药渣加入8倍量药渣重量份的蒸馏水,加热至微沸,保持微沸30min后过滤得中药液;(4)将上述两次药液合并,加热浓缩至生药浓度1g/mL,得到复方中药制剂。
实施例3
一种中药复方制剂,由以下重量份数的中草药原料制成:党参80g,白术40g,车前子25g,藿香20g,茯苓50g,菟丝子20g,熟地5g,陈皮25g,半边莲10g,甘草25g。
上述中药复方制剂通过以下步骤制备:
(1)将各组分药材原料按照上述重量份进行称重、混合;(2)将称好的原料加入10倍量原料重量份的蒸馏水,浸泡过夜后,加热至微沸,保持微沸50min后过滤得中药液;(3)将步骤(2)的剩余药渣加入8倍量药渣重量份的蒸馏水,加热至微沸,保持微沸30min后过滤得中药液;(4)将上述两次药液合并,加热浓缩至生药浓度1g/mL,得到复方中药制剂。
实施例4
一种中药复方制剂,由以下重量份数的中草药原料制成:党参50g,白术60g,车前子23g,藿香50g,茯苓48g,菟丝子35g,熟地7g,陈皮40g,半边莲10g,甘草22g。
上述中药复方制剂通过以下步骤制备:
(1)将各组分药材原料按照上述重量份进行称重、混合;(2)将称好的原料加入10倍量原料重量份的蒸馏水,浸泡过夜后,加热至微沸,保持微沸50min后过滤得中药液;(3)将步骤(2)的剩余药渣加入8倍量药渣重量份的蒸馏水,加热至微沸,保持微沸30min后过滤得中药液;(4)将上述两次药液合并,加热浓缩至生药浓度1g/mL,得到复方中药制剂。
试验例1
为了进一步阐述本发明的特征及其效果,采用下述实验进行验证,详细说明如下:
本实验采用四个平行实验实施例,一个对照实验实施例,一个模型实施例:
1、实验动物
昆明小鼠,30只,雄性,体重:20±2g,清洁级,购自哈尔滨医科大学大庆分校,许可证号:SCXK(黑)2013-001。
2、实验方法
小鼠正常饲喂适应7天后,随机分为对照组、模型组与实验组,模型组与实验组小鼠在实验过程中饲喂高脂日粮,对照组小鼠饲喂普通日粮,4个实验组小鼠在造模同时灌服中药,实验组1、2、3、4的小鼠分别灌服实施例1、2、3、4的复方中药制剂,模型组与对照组小鼠每日灌服相同体积饮用水,实验开始后第4、6及8周,各组分别随机选择一只小鼠处死,观察动物造模情况。造模及预防过程持续8周,
3.样本采集及处理
实验结束后,各组小鼠摘眼球取血后脱颈处死并进行解剖,新鲜肝脏采集后取少量组织块,加入适量稀释液(PBS),用球磨仪制成组织匀浆,按照ELISA试剂盒说明书进行肝脏指标检测;取部分肝脏浸入4%多聚甲醛溶液进行固定,制备病理切片,其余肝脏组织放入-80℃留存备用。
4.血液生化指标检测
使用全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(TP)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、胆汁酸(TBA)的浓度,用ELISA方法使用酶标仪检测肝脏过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)及过氧物歧化酶(SOD)的浓度。
5.数据处理
结果采用SPSS 23软件进行统计分析,结果以平均值±标准差形式体现;组间采用方差分析进行显著性比较
表1小鼠血液指标
注:同行间标注“##”表示与对照组相比差异极显著(P<0.01),标注“*”表示与对照组相比差异显著(0.01<P<0.05);同行间标注“**”表示与模型组相比差异极显著(P<0.01),标注“*”表示与模型组相比差异显著(0.01<P<0.05);不标注表示差异不显著(P>0.05)。
中药对高脂日粮诱导的非酒精性脂肪肝小鼠血液指标影响见表1:
由表1可知,模型组小鼠血液中AST、TC、HDL、LDL水平相对于对照组小鼠差异极显著(P<0.01),TP、GLU水平相对于对照组差异显著(0.01<P<0.05),结合图1、图2中模型组及对照组小鼠肝脏染色结果综合分析,证明小鼠造模成功,符合本实验要求。实验组小鼠血液中ALT、AST、TP、LDL、HDL水平相对于模型组差异极显著(P<0.01)。
表2小鼠肝脏指标
注:同行间标注“##”表示与对照组相比差异极显著(P<0.01),标注“*”表示与对照组相比差异显著(0.01<P<0.05);同行间标注“**”表示与模型组相比差异极显著(P<0.01),标注“*”表示与模型组相比差异显著(0.01<P<0.05);不标注表示差异不显著(P>0.05)。
中药对高脂日粮诱导的非酒精性脂肪肝小鼠肝脏指标影响见表2:
由表2可知,实验组小鼠肝脏SOD活性相对于模型组小鼠肝脏SOD活性差异极显著(P<0.01),GSH水平相对于模型组小鼠差异显著(0.01<P<0.05)。
血清中TG、TC、HDL、LDL、ALT、AST等水平均与脂肪肝关系密切,TG是血液中血脂的重要组成部分,主要分布于脂肪组织和血清中,可由肝脏进行合成,肝脏受损、脂肪代谢异常等会导致其升高,TC是血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和,肝脏是其合成和存在的主要器官,当脂肪肝病发生时,肝脏排出胆汁的能力下降,因此肝脏合成胆固醇能力加强,从而导致血液中TC及TG水平上升;HDL是将肝外组织TC转运到肝脏的运载工具,HDL含量的升高,有利于将肝外组织TC转移至肝脏进行转化与分解,此外,HDL与血管内皮细胞及平滑肌细胞受体的结合可减少LDL在细胞中的堆积,当脂肪肝发生时,小鼠血清中HDL将逐渐降低,LDL逐渐升高,该实验中,与模型组相比实验组小鼠血液中LDL水平极显著下降,TC、TG均存在明显下降趋势,HDL水平极显著升高,表明该中药组方在降低肝脏脂质沉积方面效果显著。
当肝脏发生肝炎、肝硬化等对肝细胞损伤较大的疾病时,肝细胞会过度生成ALP,经淋巴与肝窦进入血液,造成血清ALP水平明显升高,ALT主要存在于肝细胞浆中,催化氨基酸基团从丙氨酸到酮戊二酸的转移过程,在肝细胞质中起到传输氨基酸作用,AST存在于肝细胞线粒体和胞浆中,二者被大多数学者所公认是反映肝细胞损害的最敏感指标之一,新型中药组方可极显著降低血清中ALT、AST水平,并且ALP水平存在明显的降低趋势,说明该组方可在脂肪肝发生过程中对由肝脏脂质沉积引起的肝细胞损伤具有一定的保护作用,从而改善肝脏功能。
氧化应激是启动及维持非酒精性脂肪肝的重要病理因素,过多抗氧化物的缺失会导致细胞损伤,GSH作为细胞内主要的生物抗氧剂和自由基清除剂,能够把肝脏内的毒害物质排出肝脏外,在维持肝脏正常的氧化状态和抗氧化防御机制中起着重要的作用;MDA含量的多少可间接反映自由基的产生情况和机体组织细胞的脂质过氧化程度,脂质过氧化反应越活跃,则生成的MDA就越多,因此,MDA常被作为脂质过氧化可靠的检测指标;除了上述几种抗氧化酶外,SOD和CAT也是维持机体氧化平衡非常重要的酶,并被认为是抵御活性氧的第一道防线,二者对维护肝细胞和线粒体结构的完整性以及正常功能起重要作用,在本实验中,中药预防组与模型组相比,与模型组小鼠相比,实验组小鼠肝脏中上述几种与肝脏氧化相关的指标均呈现显著差异(GSH)、极显著差异(SOD)或呈明显的变化趋势(GSH-Px、MDA、CAT),结果表明该组方在减轻肝脏氧化应激方面有一定的效果。
组织的病理学切片检查可以更加直观的显示组织的病理变化,对了解疾病的发病机理以及评价疗效均十分重要,而油红染色能够更加准确的提示细胞变性类别,本实验通过HE染色及油红染色对小鼠肝脏组织进行病理检查,结果表明模型组小鼠肝脏出现脂肪变性,并伴有肝细胞坏死,提示在非酒精性脂肪肝中还伴有肝细胞的其他损伤,实验组肝细胞脂肪变性较模型组具有明显的减轻,结果提示该中药组方能够减轻肝细胞脂肪沉积,促进肝细胞修复,从而减轻肝细胞变性程度。
从上述结果分析可看出:该中药组方主要通过降低血脂、减轻肝脏脂质沉积、抑制肝脏氧化应激、改善肝脏细胞损伤的方面对非酒精性脂肪肝进行预防,实验证明:该中药组方可针对非酒精性脂肪肝的多种发病机制进行预防,具有潜在的应用价值。
Claims (5)
1.一种预防非酒精性脂肪肝的中药复方制剂,其特征在于,是由以下成分及含量的中草药原料制成:党参50~80 g,白术 40~60 g,车前子 20~25 g,藿香 20~50 g,茯苓 40~50 g,菟丝子 20~35 g,熟地 5~10 g,陈皮 25~40 g,半边莲 10 g,甘草 20~25 g。
2. 根据权利要求1所述的中药复方制剂,其特征在于,是由以下成分及含量的中草药原料制成:党参 60 g,白术 50 g,车前子 20 g,藿香 30 g,茯苓 40 g,菟丝子 30 g,熟地10 g,陈皮 30 g,半边莲 10 g,甘草 20 g。
3.根据权利要求1所述的中药复方制剂,其特征在于,是由以下成分及含量的中草药原料制成:党参 64 g,白术 52 g,车前子 22 g,藿香 40 g,茯苓 46 g,菟丝子 33 g,熟地10 g,陈皮 36 g,半边莲 10 g,甘草 24 g。
4.一种根据权利要求1所述的预防非酒精性脂肪肝的中药复方制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将各组分药材原料按照上述重量份进行称重、混合;
(2)将称好的原料加入10倍量原料重量份的蒸馏水,浸泡过夜后,加热至微沸,保持微沸50 min后过滤得中药液;
(3)将步骤(2)的剩余药渣加入8倍量药渣重量份的蒸馏水,加热至微沸,保持微沸30min后过滤得中药液;
(4)将上述两次药液合并,加热浓缩至生药浓度1g/mL,得到复方中药制剂。
5.权利要求1-4中任一项所述的中药复方制剂在制备预防非酒精性脂肪肝产品中的应用。
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徐勇等: "疏肝健脾活血法治疗非酒精性脂肪肝病80例临床观察", 《中国医学创新》 * |
毛志远等: "四逆散合异功散治疗非酒精性脂肪肝30例", 《浙江中医杂志》 * |
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