CN109260159B - 一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109260159B
CN109260159B CN201811440226.8A CN201811440226A CN109260159B CN 109260159 B CN109260159 B CN 109260159B CN 201811440226 A CN201811440226 A CN 201811440226A CN 109260159 B CN109260159 B CN 109260159B
Authority
CN
China
Prior art keywords
idebenone
pharmaceutical composition
freeze
stabilizer
grinding
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811440226.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109260159A (zh
Inventor
付强
马敏超
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenyang Pharmaceutical University
Original Assignee
Shenyang Pharmaceutical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenyang Pharmaceutical University filed Critical Shenyang Pharmaceutical University
Priority to CN201811440226.8A priority Critical patent/CN109260159B/zh
Publication of CN109260159A publication Critical patent/CN109260159A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109260159B publication Critical patent/CN109260159B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明涉及一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法，具体涉及一种可改善认知行为的包含聚乙烯己内酰胺‑聚乙酸乙烯酯‑聚乙二醇接枝共聚物和艾地苯醌的药物组合物及其制备方法，属于药物制剂技术领域。所述的药物组合物包含艾地苯醌、稳定剂和冻干保护剂，其中，各组成成分在组合物中的百分组成如下：艾地苯醌占20‑50％，稳定剂占2‑10％，冻干保护剂占40‑60％，艾地苯醌与稳定剂的重量比为：15:1‑3:1。本发明使用冷冻干燥技术对制备出的药物组合物混悬液进行冷冻干燥获得粉末状药物组合物，所述药物组合物冻干粉末在纯水或等渗液体的稀释作用下，可迅速分散成纳米混悬状态。

Description

一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法，具体涉及一种可改善认知行为的包含聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物和艾地苯醌的药物组合物及其制备方法，属于药物制剂技术领域。
背景技术
艾地苯醌是辅酶Q10的短链衍生物，最初由日本武田公司开发用于治疗认知障碍疾病。艾地苯醌具有双重作用机制：(1)通过抑制脂质过氧化，保护线粒体免受活性氧的破坏，最终保护细胞膜；(2)通过参与线粒体呼吸链的电子传递，促进ATP的形成和脑代谢。基于上述药理作用，艾地苯醌在治疗多种线粒体和神经肌肉疾病方面具有广阔的前景，如阿尔茨海默病，弗里德赖希共济失调和Leber遗传性视神经病变等。
艾地苯醌具有良好的膜通透性，可通过血脑屏障到达线粒体。但是，艾地苯醌水溶性差，其水中溶解度仅约8mg/L；有活性的母体艾地苯醌口服后经过β氧化，快速被代谢为一系列无活性的代谢物。艾地苯醌在生理条件下溶解度差、溶出过程缓慢、首过效应强等性质均影响其药效活性的发挥。提高溶出速率是改善其生物利用度的有效手段。目前市售片剂采用增溶技术提高药物的吸收，但效果有限。由于艾地苯醌具有水溶性差、口服吸收差、个体差异大以及给药剂量大的问题，开发一种载药量高、溶出速率快、生物利用度高、对认知衰退或脑功能障碍改善明显的药物制剂对艾地苯醌的应用具有重要意义。
发明内容
为了克服现有技术的缺陷，本发明主要解决了三个主要问题：其一，提出一种粒径分布均匀且研磨有关物质百分比低的药物组合物以改善其水溶性、提高溶出速率、生物利用度、体内外抗氧化能力以及认知能力；其二，提出了一种操作简便易行的制备高载药量、有关物质少、吸收良好的所述药物组合物的方法，可以用于工业化生产；其三，提供所述药物组合物在制备用于改善认知能力的药物中的应用。
本发明解决的第一个技术问题是提供一种含有艾地苯醌的药物组合物，所述的药物组合物包含艾地苯醌、稳定剂和冻干保护剂，其中，各组成成分在组合物中的百分组成如下：艾地苯醌占20-50％，稳定剂占2-10％，冻干保护剂占40-60％，艾地苯醌与稳定剂的重量比为：15:1-3:1。
其中，所述稳定剂为表面活性剂或高分子聚合物，选自聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、泊洛沙姆(F127，F68)、脱氧胆酸钠(NaDC)、十二烷基硫酸钠(SDS)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的一种或多种。优选羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)，更优选聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)；冻干保护剂选自麦芽糖(maltose)、乳糖(lactose)、甘露醇(D-mannitol)、蔗糖(sucrose)、山梨醇(sorbitol)、环糊精(cyclodextrin)、右旋糖苷(dextran)以及聚乙二醇(PEG4000,PEG6000)中的一种或多种。
进一步地，本发明优选包含聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、艾地苯醌和冻干保护剂三种成分的药物组合物。
其中，艾地苯醌与聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)的重量比为：15:1-3:1，优选为8:1-4:1。
关于冻干保护剂，使用聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)制备的艾地苯醌混悬剂优选7-12％(w/v)的麦芽糖，更优选8％(w/v)的麦芽糖；使用羟丙基甲基纤维素(HPMC)优选8-12％(w/v)的蔗糖，更优选10％(w/v)的蔗糖。
本发明要解决的第二个技术问题是提供所述的药物组合物的制备方法。
本发明采用球磨法制备药物组合物。所述的球磨法制备过程如下：
1)将0.2-2％(w/v)的稳定剂分散于水中，在磁力搅拌下制备含有稳定剂的水分散介质，得溶液A；
2)将5-6％(w/v)的艾地苯醌粉末缓慢分散于上述均匀的水分散体系中，于磁力搅拌器上不断搅拌5-30min，分散均匀形成粗混悬液B；
3)在研磨罐中加入研磨珠；
4)将分散均匀的粗混悬液转移到研磨罐中，球磨机研磨，获得的药物组合物混悬液(IDBNR)的粒径在350-450nm；
5)冻干。
步骤3)中加入研磨珠的体积为研磨罐体积的1/3，尺寸为0.1-0.5mm，混悬液B与二氧化锆研磨珠的体积比为1:0.5-2。
步骤4)中，行星式球磨机的转速为25-35Hz，设定研磨循环参数，其中研磨时间为2-10min，冷却时间为1-5min，总研磨时间设置为96-112min。此研磨工艺参数的设定，在能耗低的前提下可获得粒径分布均匀、有关物质含量低的药物组合物。
当先以35Hz的功率研磨共40-72min，再以25-30Hz的功率研磨共56-64min后，其粒径最小，有关物质含量最低。
步骤5)中，将药液分装在10mL西林瓶中，预冻温度为-60℃--20℃下，预冻时间为4-16h，然后置于冷冻干燥设备中在-5-10℃温度下冻干18-24h。
本发明使用冷冻干燥技术对制备出的药物组合物混悬液进行冷冻干燥获得粉末状药物组合物，所述药物组合物冻干粉末在纯水或等渗液体的稀释作用下，可迅速分散成纳米混悬状态。该药物组合物再分散性好，电子显微镜下观测形态为棒状。
本发明所要解决的第三个问题是提供所述药物组合物在制备用于改善认知能力的药物中的应用。可以单独使用药物组合物混悬液或者冻干粉末，冻干粉末可在使用前加水稀释，待重新分散后使用。
所述的药物组合物也可采用传统工艺将粉末状药物组合物压片、灌装胶囊或制备成散剂颗粒剂等形式使用。
本发明所述的药物组合物是利用高分子、表面活性剂或聚合物材料的稳定作用将药物晶体分散于分散介质中，通过破碎或自组装制备的亚微米分散体系，将药物晶体尺寸控制至纳米级别(100-1000nm)以提高表面积、溶出速率以及生物利用度。
本发明开发出一种可有效提高药物口服吸收并有效改善认知能力的药物组合物，所述组合物载药量高、再分散性好、有关物质含量低、释放速率快、体内吸收稳定且良好，在体内充分发挥抗氧化活性显著改善认知能力，降低艾地苯醌的给药剂量，提高患者顺应性；由于制备工艺简单，处方组成安全可靠，具有产业化前景。
与现有技术相比，本发明所述的包含聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物和艾地苯醌的药物组合物有以下优点：1)与其他稳定剂的处方相比，本发明的以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物的再分散性好、有关物质含量低，体外溶出度、体内外抗氧化能力、小鼠认知能力以及大鼠体内生物利用度均有明显提高；2)本发明中以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物在仅给予一半剂量的情况下，可获得和原料药粗混悬液相同的改善认知功能的效果，可大大降低给药剂量提高顺应性；3)本发明的冻干组合物具有良好的贮存稳定性以及再分散特性，可以混悬液以及传统片剂、颗粒剂、胶囊等剂型给药，方便根据不同人群特点设计临床给药方案，4)本发明辅料无毒无污染，无有机溶剂添加，载药量高，操作简便，制剂稳定，便于实现工业化生产。
附图说明
图1为实施例1中药物组合物(IDBNR)辅料(1％，w/v)种类筛选的粒径分布图。
图2为本发明实施例1中药物组合物(IDBNR)四个优选处方扫描电子显微镜图；
A.IDBNR/Soluplus B.IDBNR/HPMC C.IDBNR/PVP K30D.IDBNR/F127。
图3为实施例1中药物组合物(IDBNR)四个优选处方(IDBNR/Soluplus，IDBNR/HPMC，IDBNR/PVP K30，IDBNR/F127)在0.05％吐温80水溶液体外溶出图。
图4为本发明实施例2中不同研磨时间粒径分布图。
图5为本发明实施例2的优选工艺制备的艾地苯醌药物组合物(IDBNR)扫描电子显微镜(A.IDBNR/Soluplus,B.IDBNR/HPMC)，透射电子显微镜(C.IDBNR/Soluplus,D.IDBNR/HPMC)图。
图6为实施例3中优选药物组合物冻干保护剂初筛粒径图(A.IDBNR/SoluplusB.IDBNR/HPMC)与优选药物组合物优选冻干保护剂浓度细筛粒径图(C.IDBNR/SoluplusD.IDBNR/HPMC)。
图7为实施例3中药物组合物(IDBNR)、原料药、物理混合物、稳定剂的DSC图；
A.IDBNR/Soluplus B.IDBNR/HPMC：a原料药，b稳定剂，c物理混合物，d药物组合物冻干粉。
图8为实施例3中药物组合物(IDBNR)、原料药、物理混合物、稳定剂的XRD图；
A.IDBNR/Soluplus B.IDBNR/HPMC：a原料药，b物理混合物，c稳定剂，d药物组合物冻干粉。
图9为实施例3中药物组合物(IDBNR)、原料药、物理混合物、稳定剂的FT-IR图；
A.IDBNR/Soluplus B.IDBNR/HPMC：a原料药，b物理混合物，c稳定剂，d药物组合物冻干粉。
图10为本发明实施例3中药物组合物(IDBNR/Soluplus，IDBNR/HPMC)、物理混合物(PM-IDB/Soluplus，PM-IDB/HPMC)以及原料药(Crude)体外溶出图；
A.pH 6.8磷酸盐缓冲液B.0.3％吐温80水溶液。
图11为实施例2中药物组合物(IDBNR/Soluplus，IDBNR/HPMC)、物理混合物(PM-IDB/Soluplus，PM-IDB/HPMC)以及溶液剂(Solution)的体外抗氧化能力AUCnet图。
图12为本发明实施例2中药物组合物(IDBNR/Soluplus,IDBNR/HPMC；艾地苯醌75mg/kg)、假手术组(Sham)、模型组(Model)及原料药(Crude；艾地苯醌150mg/kg)的Y迷宫自发交替反应得分图。
图13为本发明实施例2中药物组合物(IDBNR/Soluplus,IDBNR/HPMC；艾地苯醌75mg/kg)、假手术组(Sham)、模型组(Model)及原料药(Crude；艾地苯醌150mg/kg)的新物体识别偏好指数图。
图14为本发明实施例2中药物组合物(IDBNR/Soluplus,IDBNR/HPMC；艾地苯醌75mg/kg)、假手术组(Sham)、模型组(Model)及原料药(Crude；艾地苯醌150mg/kg)A.水迷宫训练潜伏时间图和B.训练目标象限停留时间图。
图15为实施例2中药物组合物(IDBNR/Soluplus,IDBNR/HPMC；艾地苯醌75mg/kg)、假手术组(Sham)、模型组(Model)及原料药(Crude；艾地苯醌150mg/kg)的脑皮质匀浆生化指标(A.CAT B.SOD C.GSH D.MDA)。
图16为本发明实施例2中药物组合物(IDBNR/Soluplus,IDBNR/HPMC)、物理混合物(PM-IDB/Soluplus,PM-IDB/HPMC)及原料药(API)(艾地苯醌100mg/kg)的大鼠体内平均血浆药-时曲线图。
具体实施方式
实施例1：艾地苯醌药物组合物混悬剂辅料种类以及用量筛选
首先，制备含有0.2-8.0％(w/v)的聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、泊洛沙姆(F127，F68)、脱氧胆酸钠(NaDC)、十二烷基硫酸钠(SDS)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等的水相，将5％(w/v)的艾地苯醌分散于上述水相20mL，于磁力搅拌上混合30min后将其转移至100mL球磨罐中，同时加入0.4mm二氧化锆球磨球50g，利用球磨机研磨104min。测定各处方的粒径(Z-average)与多分散系数(PDI)如表1所示，当辅料浓度为1％时使用各类辅料的粒径分布图如图1所示。表1数据结果表明，不同辅料的稳定作用能力不同，最终确定优选添加量为0.5-4％的聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVPK30)以及泊洛沙姆407(F127)的粒径较小，其余常用稳定剂制备的纳米结晶粒径较大且PDI较大，表明分布不均匀稳定剂稳定作用较差。
其次，为进一步优化处方，考察制备出的四种优选制剂的形态、溶出特性以及有关物质。据文献报道棒状结晶颗粒与其他形态的颗粒相比具有更高的生物粘附性与生物利用度，故本组合物优选棒状形态的处方。四个优选处方的扫描电子显微镜图如图2所示，其中以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)制备的制剂呈短棒状，而以聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)以及泊洛沙姆407(F127)为稳定剂的制剂呈不规则的块状，故更优选聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)这两种辅料。
对上述使用聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)以及泊洛沙姆407(F127)这四种辅料的优选处方的溶出特性进行考察，在0.05％吐温80的水溶液中的溶出曲线如图3所示，使用1.0％聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)以及4.0％泊洛沙姆407(F127)两种辅料的处方溶出速度较慢同时累计释放量较低，而使用聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)两种辅料的处方溶出速度快释放量高，说明这两种辅料的稳定作用强，可有效提高药物溶出效率。
最后，由于球磨制备过程中产生较大量的热，同时本组合物的主药艾地苯醌熔点低易融化，为防止药物在制备过程中的降解，对制备的四个处方中的有关物质进行评价。根据药品标准中规定有关物质方法测定，使用聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)以及泊洛沙姆407(F127)三种辅料的各杂峰面积的和未大于主峰面积的4/5，而使用聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)为稳定剂的处方的各杂峰面积的和约为主峰面积的6/5，说明在研磨过程中药物稳定性差，后期的考察优选聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)以及泊洛沙姆407(F127)三种辅料。
综合粒径、形态、溶出特性以及有关物质的考察，由于聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)两种辅料的粒径分布较集中且粒径较小，形态呈棒状，溶出速率以及累计释放量改善明显，同时其载药量高药物稳定性好，因此在提高口服生物利用度以及改善顺应性方面具有更大潜力。
表1辅料种类和用量对艾地苯醌药物组合物粒径的影响
Figure BDA0001884507650000051
Figure BDA0001884507650000061
实施例2：艾地苯醌药物组合物混悬剂的制备工艺筛选
针对筛选出来的两种优选处方，对研磨工艺进行优化。由于研磨的功率和研磨时间对样品研磨的效率有较大影响，研磨时间过长会影响有关物质的含量以及颗粒的分散状态，且本发明中选用的艾地苯醌熔点较低，制备方法产热较多，为保证制备出的药物组合物稳定性良好，对研磨工艺进行优化以提高研磨效率。
首先对研磨总时长进行筛选，研磨功率固定于35Hz条件下，在不同研磨时间考察其粒径分布情况，结果如图4所示，在研磨至40min后粒径变化速度变慢，两种处方在研磨至104min后其粒径基本维持不变，且PDI随着研磨时间增加而升高，导致粒径分布不均匀，故研磨工艺优化时间控制在96-112min为宜。
行星式球磨机的功率为25-40Hz，总研磨时间设置为96-160min。对总研磨时间以及研磨功率进行筛选。具体筛选工艺参数设置如下：
工艺1：35Hz研磨20个循环共136min。
工艺2：35Hz研磨8个循环共40min，再以25Hz的功率研磨8个循环共64min。
工艺3：40Hz研磨8个循环共40min，再以30Hz的功率研磨8个循环共64min。
工艺4：35Hz研磨8个循环共40min，再以30Hz的功率研磨8个循环共64min。
工艺5：35Hz研磨12个循环共60min，再以25Hz的功率研磨12个循环共96min。
药物组合物粒径分布以及有关物质含量如表2和表3所示，数据显示筛选的五种工艺的粒径均在350-450nm的范围内，且有关物质均符合小于0.8％的标准。其中，工艺1中应用单一的研磨强度无法将粒子研磨均匀，其PDI相对较大，大功率的研磨主要是实现将粗混悬液中大粒子破碎，无法将大粒子匀化为分布均匀的纳米粒子，从图4可以看出，以35Hz的功率研磨40-72min粒径基本不变，因此后续的工艺筛选中大功率的研磨时间控制在40-72min内；为提高研磨效率，采用联合低功率研磨手段提高粒径分布均一性，其中，工艺2与工艺4的高功率强度与研磨时间相同，低功率强度的选择不同，结果显示，低功率选用25Hz的工艺2较30Hz的工艺4相比，粒径分布更均匀且有关物质百分比较低，工艺2显示出更优的研磨效率，而处方4较其余工艺相比，有关物质的含量低且粒径分布集中，因此处方4可作为备选制备工艺；为考察提高研磨强度是否可以进一步提高研磨效率，工艺3较工艺2相比，粒径有轻微增长，有关物质百分比如表3所示明显提高至0.35％，因此提高研磨功率并未能够有效降低粒径以及有关物质的含量；为考察整体研磨时间对粒径分布以及有关物质的影响，工艺5延长了研磨时间，与工艺2相比粒径分布相差不大，但工艺5有关物质的量显著增加，故应缩短研磨时间以获得稳定性好的药物组合物。
综合研磨工艺筛选的粒径以及有关物质含量数据，单纯使用同一功率无法保证粒径的均一性，单纯提高研磨强度或延长研磨时间，数据显示粒径虽有降低，但有关物质的百分比也会增加，导致药物组合物的稳定性降低。综合上述实验结果考虑，由于本实验中工艺2和工艺4所使用的功率较低，总研磨时间较短，可在保持制剂优势的同时最大限度的降低能耗，其中工艺2制备出的制剂粒径尺寸更小，PDI显示体系粒径分布集中，有关物质含量更少，故选用工艺2和工艺4为本发明的药物组合物的制备工艺，其中更优选工艺2。因此，本药物组合物的优选制备工艺为先使用35Hz的功率研磨40-72min，再应用25-30Hz的功率研磨56-64min即得，其中更优选先使用35Hz研磨40-48min，再使用25Hz研磨56-64min。
表2研磨工艺对艾地苯醌药物组合物粒径的影响
Figure BDA0001884507650000081
表3研磨工艺对艾地苯醌药物组合物有关物质总含量的影响
Figure BDA0001884507650000082
综上，药物组合物的最优制备方法如下：首先制备含有1.0％(w/v)的聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)或0.5％(w/v)的羟丙基甲基纤维素(HPMC)的水相，将5-6％(w/v)的艾地苯醌混悬于上述水相20mL，于磁力搅拌上混合30min后将其转移至100mL球磨罐中，同时加入0.4mm二氧化锆球磨球50g，参数设定为35Hz研磨40min，25Hz研磨64min，利用行星式球磨机研磨即得药物组合物IDBNR/Soluplus或IDBNR/HPMC。其中IDBNR/Soluplus测得其粒径为360.0nm，PDI为0.187；IDBNR/HPMC测得其粒径为368.5nm，PDI为0.151。扫描电镜与透射电镜观察(IDBNR/Soluplus见图5A和C，IDBNR/HPMC见图5B和D)，结果显示药物粒子呈短棒状，粒径大小与测量结果吻合。
实施例3：一种艾地苯醌药物组合物冻干粉的制备与晶型表征
为考察药物组合物中的药物存在状态，使用冷冻干燥法使制备出的液态制剂固化。为维持该制剂的优势特性，需在冻干前加入冻干保护剂维持制剂的纳米结构完整，再分散后粒径分布仍可保持，故对冻干保护剂的种类进行筛选。
首先，进行冻干保护剂种类以及浓度的初步筛选，在研磨后的药物组合物混悬液中加入2％-10％(w/v)的冻干保护剂，冻干保护剂选自麦芽糖(maltose)、乳糖(lactose)、甘露醇(D-mannitol)、蔗糖(sucrose)、山梨醇(sorbitol)、环糊精(cyclodextrin)、右旋糖苷(dextran)以及聚乙二醇(PEG 4000,PEG6000)。将冻干后的制剂再分散后考察其粒径分布，结果如图6A与B所示，使用聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)制备的艾地苯醌混悬剂优选8-10％的麦芽糖；使用羟丙基甲基纤维素(HPMC)优选8-10％的蔗糖。针对稳定作用较好的麦芽糖及蔗糖的用量进行进一步小浓度范围的筛选，图6C与D中结果显示，使用聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)制备的艾地苯醌混悬剂优选7-12％(w/v)的麦芽糖，更优选8％(w/v)的麦芽糖；使用羟丙基甲基纤维素(HPMC)优选8-12％(w/v)的蔗糖，更优选10％(w/v)的蔗糖。
冻干药物组合物的制备方法如下：在使用聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)制备好的艾地苯醌混悬剂中加入8％(w/v)的麦芽糖，使用羟丙基甲基纤维素(HPMC)制备好的艾地苯醌混悬剂中加入10％(w/v)的蔗糖：冷冻干燥条件为-60℃--20℃下，预冻4-16h，然后置于冷冻干燥设备中在温度为-5-10℃条件下冻干18-24h。即得固化的艾地苯醌药物组合物(IDBNR)。
对固化后的药物组合物的晶型与作用力进行表征。差示扫描量热分析(图7)以及X-射线衍射结果(图8)显示，所制备的药物组合物的晶型并未发生转变；傅里叶红外光谱(见图9)显示了制剂中艾地苯醌的分子状态没有发生改变，制剂中无氢键相互作用力生成的。
实施例4：体外溶出实验
采用溶出法考察实施例2的最优方案制备的药物组合物加入实施例3的冻干保护剂制备的冻干组合物的体外溶出特征。以1000mL的pH 6.8的磷酸盐缓冲液与0.3％吐温80水溶液为溶出介质，转速为每分钟75转，水温为37℃，将上述制备的相当于艾地苯醌30mg的艾地苯醌药物组合物(IDBNR/Soluplus，IDBNR/HPMC)、物理混合物(PM-IDB/Soluplus，PM-IDB/HPMC)以及原料药(Crude)分散于介质中依法操作，于5min、10min、15min、20min、30min、45min和1h取样5mL并补充5mL新鲜介质，经0.45μm微孔滤膜滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液，测定浓度。按溶出度测定法操作，用高效液相色谱法测定实施3中所制备的艾地苯醌纳米混悬冷冻干燥粉末、原料药以及物理混合物的体外溶出度，溶出度曲线见图10。由图可见，与原料药和物理混合物相比，所制备的药物组合物冷冻干燥粉末溶出度均有明显提高，以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物的效果更为明显和稳定。
实施例5：体外抗氧化活性实验
通过ORAC抗氧化测定评估艾地苯醌药物组合物制剂的抗氧化活性。使用酶标仪(Thermo Scientific Varioskan Flash，USA)进行测量。使用荧光素钠(FL，8.4×10-11mol/mL)作为荧光探针，其结构可被过氧自由基产生剂AAPH(12.8×10-6mol/mL)破坏，艾地苯醌通过与AAPH作用以保护荧光探针不被破坏。通过比较分别给予药物组合物(IDBNR/Soluplus,IDBNR/HPMC)、物理混合物(PM-IDB/Soluplus,PM-IDB/HPMC)以及溶液剂(Solution)的体系荧光探针强度变化情况，评估艾地苯醌药物组合物抗氧化能力的强弱。激发波长和发射波长分别设定在485nm和538nm。使用磷酸盐缓冲液(pH 7.4)稀释所有样品。该实验在37℃下用磷酸盐缓冲液(pH 7.4)作为空白。首先，将150μL的FL溶液添加到96孔板的每个孔中，然后加入25μL纳米混悬液、粗混悬液以及溶液剂，标准Trolox溶液(3.125,6.25,12.5 25,50和100μM/L)和空白溶液。最后，应用酶标仪自动加入25μL的AAPH，并且自添加AAPH起每隔2分钟记录荧光，直到荧光接近原始强度的5％结束。最后，通过使用Origin 7计算荧光衰减曲线下的面积。每个样品一式三份计算AUCnet。由于溶液剂的药物溶解分散状态较好，而物理混合物的分散状态较差，将这两组分别设定为对照，综合比对考察药物组合物的抗氧化能力。结果如图11所示，药物组合物组较物理混合物的AUCnet明显提高，与溶液剂的相差无几，以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物和羟丙基甲基纤维素为稳定剂的药物组合物较相应物理混合物组分别提高了约3倍和2倍，说明以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物可更有效地快速溶出以提高其抗氧化效率，极大程度上提高药物的释放效率。
实施例6：体内行为学实验
由于体外实验证明制备出的药物组合物可显著提高艾地苯醌的溶出速率和抗氧化能力，为验证药物组合物的上述优势特性是否可以在体内得以维持，本实验中将药物组合物组的剂量设置为粗混悬液组的一半，考察药物组合物体内抗氧化能力以及降低给药剂量改善顺应性的潜力。
取55只ICR小鼠分为5组(n＝11)，分别是假手术组(Sham)、模型组(Model)、药物组合物组(IDBNR/Soluplus,IDBNR/HPMC；艾地苯醌75mg/kg)、及原料药组(Crude；艾地苯醌150mg/kg)。除假手术组外均给予I.C.V注射Aβ1-42造模，肌肉注射青霉素恢复24小时后开始给药，其中假手术组和模型组给予等体积的生理盐水。在注射Aβ1-42后8天开始行为学测试：Y迷宫实验(1天)，新物体识别实验(NOR，3天)，Morris水任务(4天)。
Y迷宫通过记录小鼠在进入Y迷宫三个臂的顺序以及次数，计算自发交替反应得分，评价工作记忆恢复程度。实验结果如图12所示，药物组合物组显示出与假手术组与粗混悬液组相似的药效活性，其中IDBNR/Soluplus组效果更优；新物体识别实验第一天与第二天将小鼠放于测试场地熟悉环境，第三天进行测试，通过记录小鼠对两个不同物体的探索时间计算优先指数，评价长期记忆的损伤，实验结果如图13所示，IDBNR/Soluplus组相对于粗混悬液来说具有更强的长期记忆修复能力，以羟丙基甲基纤维素为稳定剂的药物组合物与模型组相比虽有微弱提升，但与假手术组仍有较大差距，以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂药物组合物组较粗混悬液相比具有更强的辨别能力；水迷宫实验的前3天在水箱中放入平台，让小鼠于平台上静止10s以学习记忆平台位置，最后一天撤去平台，通过记录小鼠在水中目标象限找寻平台的时间考察学习记忆的损伤。实验结果如图14所示，药物组合物组的小鼠在目标象限时间与模型组相比均显著提高，其中以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物的认知行为提高更为明显及稳定，与粗混悬液组相差无几。从行为学实验数据看出，以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物较羟丙基甲基纤维素为稳定剂的药物组合物来说，具有更强、更稳定的提高认知能力的潜力，药物组合物组仅使用粗混悬液组一半的剂量即可获得与粗混悬液组相似甚至更优的药效，说明可显著降低给药剂量，具有提高口服生物利用度的潜力。
将各组小鼠的脑组织剖出，利用试剂盒(南京建成生物公司)测定大脑皮质中CAT、SOD、GSH以及MDA的含量。结果如图15A和B，CAT与SOD两种抗氧化酶的活性在模型组中都显著降低，说明侧脑室注射淀粉样蛋白导致小鼠脑中氧化压力升高，此外，两种药物组合物组与原料药组均有明显提升，说明药物组合物具有恢复氧化还原平衡即改善脑内氧化压力的能力；图15中C图显示以内源性还原性物质GSH，以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物具有明显优势，说明较羟丙基甲基纤维素为稳定剂的药物组合物来说，其对抗氧化压力的能力更强；D图中MDA为脂质过氧化代谢中的副产物，相对于模型组来说，以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物与原料药组具有明显抑制其产生的作用，发挥较优的抗氧化活性，而以羟丙基甲基纤维素为稳定剂的药物组合物MDA水平升高，其对抗脂质过氧化的能力较差。
综合行为学实验数据结果以及大脑皮质生化指标的检测数据来看，与羟丙基甲基纤维素为稳定剂的组合物相比，以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物可实现更好的吸收，在脑中可更有效发挥其抗氧化活性和改善认知的能力，因此具有降低给药剂量改善顺应性的潜力。
实施例7：SD大鼠体内药动学实验
取25只健康、雄性SD大鼠(220-250g)，随机分为5组(n＝5)，给药前禁食12h，自由饮水。五组分别口服灌胃给予艾地苯醌药物组合物(IDBNR/Soluplus,IDBNR/HPMC)、物理混合物(PM-IDB/Soluplus,PM-IDB/HPMC)及原料药(API)，给药剂量均为100mg/kg，并于5min、15min、30min、45min、1h、2h、4h、6h、8h、12h和24h眼眶取血0.3mL，置于肝素化的离心管中，10000rpm离心10min，取上清-20℃保存备用。通过液相色谱-质谱联用仪测定药物浓度，绘制药物血浆浓度-时间曲线(图16)。以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物和羟丙基甲基纤维素为稳定剂的药物组合AUC(0-24小时)分别是对应物理混合物的2.5倍和1.7倍。以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物为稳定剂的药物组合物提高大鼠体内口服吸收利用度的能力更强。

Claims (7)

1.一种含有艾地苯醌的药物组合物，其特征在于:包含艾地苯醌、稳定剂和冻干保护剂，各组成成分在组合物中的百分组成如下:艾地苯醌占20-50%，稳定剂占2-10%，冻干保护剂占40-60%，所述稳定剂为羟丙基甲基纤维素或聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物，所述稳定剂的重量体积浓度为0.5-4%，艾地苯醌与稳定剂的重量比为：15:1-3:1，所述稳定剂为羟丙基甲基纤维素时，冻干保护剂为8-10%的蔗糖；所述稳定剂为聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物时，冻干保护剂为8-10%的麦芽糖；所述的含有艾地苯醌的药物组合物通过行星式球磨机研磨制备，先使用35 Hz的功率研磨40-72min，再应用25-30 Hz的功率研磨56-64 min即得。
2.一种如权利要求1所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，步骤如下:
(1)将稳定剂溶解分散于水中，在磁力搅拌下制备含有稳定剂的水分散介质，得溶液A;
(2)将艾地苯醌经磁力搅拌分散于步骤(1)得到的水相分散介质中，得粗混悬液B;
(3)将粗混悬液B加入到含有二氧化锆研磨珠的研磨罐中;
(4)将研磨罐放入行星式球磨机中研磨，即得到药物组合物纳米混悬液;
(5)向上述药物组合物纳米混悬液中加入冻干保护剂，冻干即得粉末状药物组合物。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的稳定剂的重量体积浓度为0.2-2%(w/v)，步骤(2)中所述的艾地苯醒的重量体积浓度为5-6% (w/v)。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，混悬液B与二氧化锆研磨珠的体积比为1:0.5-2。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)的冷冻干燥条件为-60℃- -20℃下，预冻4-16h，然后置于冷冻干燥设备中在冻干18-24h。
6.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物与药学上可接受的载体制备成口服混悬液、吸入粉雾剂、片剂、胶囊剂、散剂或颗粒剂。
7.权利要求1或6所述的药物组合物在制备修复或改善认知能力的药物中的应用。
CN201811440226.8A 2018-11-29 2018-11-29 一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法 Active CN109260159B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811440226.8A CN109260159B (zh) 2018-11-29 2018-11-29 一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811440226.8A CN109260159B (zh) 2018-11-29 2018-11-29 一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109260159A CN109260159A (zh) 2019-01-25
CN109260159B true CN109260159B (zh) 2021-07-23

Family

ID=65185895

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811440226.8A Active CN109260159B (zh) 2018-11-29 2018-11-29 一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109260159B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110643582B (zh) * 2019-09-29 2021-07-27 浙江工业大学 一种从沙棘鲜果中提取sod的方法
CN111494225A (zh) * 2020-03-04 2020-08-07 广州鸿懿实业发展有限公司 艾地苯醌冻干粉及其制备方法
CN112707806B (zh) * 2020-08-13 2022-06-17 中国药科大学 一种EphB2小分子抑制剂及其用途
CN112870173A (zh) * 2021-02-04 2021-06-01 南京天纵易康生物科技股份有限公司 一种冻干闪释片及其制备方法
CN113332255A (zh) * 2021-06-07 2021-09-03 苏州熙华新药开发有限公司 一种艾地苯醌粘膜给药片剂及制备方法
CN115350167A (zh) * 2022-09-29 2022-11-18 陕西中鸿科瑞再生医学研究院有限公司 艾地苯醌在制备降尿酸药物中的应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101391182A (zh) * 2008-10-24 2009-03-25 苏州纳康生物科技有限公司 无水纳米分散液及其制备方法和用途
CN103917485A (zh) * 2011-09-21 2014-07-09 株式会社Bio-Synectics 纳米颗粒制备方法
CN105878194A (zh) * 2016-06-07 2016-08-24 沈阳药科大学 一种格列本脲纳米结晶制剂及其制备方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0216700D0 (en) * 2002-07-18 2002-08-28 Astrazeneca Ab Process

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101391182A (zh) * 2008-10-24 2009-03-25 苏州纳康生物科技有限公司 无水纳米分散液及其制备方法和用途
CN103917485A (zh) * 2011-09-21 2014-07-09 株式会社Bio-Synectics 纳米颗粒制备方法
CN105878194A (zh) * 2016-06-07 2016-08-24 沈阳药科大学 一种格列本脲纳米结晶制剂及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
微/纳米结晶制剂的口服生物利用度研究;付强;《2018年中国药学大学资料汇编》;20180918;第199-200页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109260159A (zh) 2019-01-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109260159B (zh) 一种含有艾地苯醌的药物组合物及其制备方法
US9724325B2 (en) Nanoparticle isoflavone compositions and methods of making and using the same
Vogt et al. Dissolution improvement of four poorly water soluble drugs by cogrinding with commonly used excipients
KR100542816B1 (ko) 수불용성 물질의 미립자를 포함하는 조성물 및 이것의 제조 방법
EP2335686A1 (en) An aqueous intravenous nanosuspension with reduced adverse effects
CZ330499A3 (cs) Farmaceutické prostředky s vodou nerozpustným komplexem
WO2014108076A1 (zh) 难溶性药物凝胶组合物及其制备方法
US20200360268A1 (en) Injectable pharmaceutical composition containing meloxicam, and preparation method therefor
BRPI1014275B1 (pt) Composição que compreende partículas de indometacina dispersas em pelo menos dois materiais de moagem parcialmente moídos
KR20120030561A (ko) 아세나핀을 함유하는 주사가능한 제제 및 그를 사용한 치료 방법
ES2782106T3 (es) Formulaciones mejoradas de levosimendán para administración intravenosa como infusión o inyección y como concentrado de infusión
WO2020034989A1 (zh) 一种可注射的药物组合物及其制备方法
WO2017155020A1 (ja) 微細粒子含有組成物およびその製法
Londhe et al. Zaltoprofen loaded solid lipid nanoparticles for topical delivery: formulation design
Wang et al. Ginkgolides-loaded soybean phospholipid-stabilized nanosuspension with improved storage stability and in vivo bioavailability
BRPI0614267A2 (pt) composição de nanopartìculas de 7-t-butóxiiminometilcamptotecina, seu método de produção e uso das referidas nanopartìculas
JP5759464B2 (ja) オキサリプラチンのナノ粒子及びその製造方法
BR112020004197A2 (pt) preparação sólida compreendendo dutasterida e método para preparar a mesma
CN111991355A (zh) 含纳米级大麻二酚的固体纳米粉组合物、制备方法及用途
WO2012026896A1 (en) Surface modified micronized tacrolimus crystalline particles and pharmaceutical compositions thereof
Kunasekaran et al. Kinetic modeling of Rasagiline mesylate from nanoscale solid lipid particles
CN102772365B (zh) 4-(4-(3-三氟甲基)苯甲酰胺基苯氧基)-2-(甲基氨甲酰基)吡啶纳米混悬剂及其制法和应用
Shinkar et al. Formulation, evaluation, and optimization of glimepiride nanosuspension by using antisolvent evaporation technique
CN109419771B (zh) 十一酸睾酮缓释药物组合物、其制备方法及用途
Ahalwat et al. Fabrication of Lipid Combination for Bioavailability Enhancement of Isoniazid

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant