CN109220798A - 一种组合式植物组织培养生根阶段培养基 - Google Patents

一种组合式植物组织培养生根阶段培养基 Download PDF

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欧阳乐军
李莉梅
马铭赛
陈凯钊
戴发
张燕珊
胡健文
孙同川
黄嘉玲
布良灏
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    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001Culture apparatus for tissue culture

Abstract

本发明公开了一种组合式植物组织培养生根阶段培养基,以MS基本培养基为基本培养基,还包括以下组分:香蕉汁20‑35g/L,珍珠粉16‑21g/L,琼脂粉12‑19g/L,肌醇0.1‑0.24g/L,白糖20‑39g/L,芦荟提取物2‑3.6g/L、杀菌粉、激素、酒精和去离子水,酒精采用95%的酒精,MS基本培养基包括常量营养元素、微量营养元素和有机物,杀菌粉的配料包括以下各组分:金银花8‑11份,百部5‑8份,白藓皮8‑10份,苍术3‑6份,藿香6‑9份和蛇床子4‑8份;所述杀菌粉的细度为60‑90目,植物的生长可以获得平衡的营养条件,通过添加杀菌粉保证培养基长时间处于无菌环境内,利于植物生长,而且杀菌粉采用中草药成分,不仅对植物组织不会造成危害,杀菌效果好,而且对环境基本没有影响,制备方法简单,适合产业化生产。

Description

一种组合式植物组织培养生根阶段培养基
技术领域
本发明涉及一种培养基,具体是一种组合式植物组织培养生根阶段培养基。
背景技术
培养基,是指供给微生物、植物或动物生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基;根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基;根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等;根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌。培养基由于富含营养物质,易被污染或变质。配好后不宜久置,最好现配现用。
为了保证植物组织的茁壮生长需要使用到培养基,现代的培养基的组成陈分一般较为单一,在植物生长的过程中较难实现营养均衡,另外为了保证植物的生长效果,培养基一般会进行杀菌处理,为了保证植物组织长时间处于菌少或者无菌的环境,有的时候还需要添加杀菌剂,现代的杀菌剂一般都是化学成分组成的,不仅对环境有着危害,而且对植物组织的生长也有着一定的影响。
发明内容
本发明的目的在于提供一种组合式植物组织培养生根阶段培养基,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种组合式植物组织培养生根阶段培养基,以MS基本培养基为基本培养基,还包括以下组分:香蕉汁20-35g/L,珍珠粉16-21g/L,琼脂粉12-19g/L,肌醇0.1-0.24g/L,白糖20-39g/L,芦荟提取物2-3.6g/L、杀菌粉、激素、酒精和去离子水,酒精采用95%的酒精;
所述MS基本培养基包括常量营养元素、微量营养元素和有机物;
所述杀菌粉的配料包括以下各组分:金银花8-11份,百部5-8份,白藓皮8-10份,苍术3-6份,藿香6-9份和蛇床子4-8份;所述杀菌粉的细度为60-90目。
进一步的,所述常量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:硝酸钾500mg/L,硫酸铵280mg/L,七水硫酸镁200mg/L,无水磷酸二氢钾20mg/L,乙二胺四乙酸二钠5.5mg/L,七水硫酸亚铁mg/L。
进一步的,所述微量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:氯化钙10mg/L,硫酸锌8.5mg/L,硼酸5.2mg/L,钼酸钠1.2mg/L,硫酸铜0.5mg/L,氯化钴0.01mg/L。
进一步的,所述有机物各组分以及各组分的浓度分别为:环己硫醇50mg/L,烟酸1.0mg/L,盐酸吡哆醇1.0mg/L。
进一步的,所述激素包括6-BA、KT、CPPA、ABBU的其中一种,激素的重量为0.15-0.28g。
一种组合式植物组织培养生根阶段培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1、制备溶液:将激素溶解在95%的酒精内,然后加入去离子水制成溶液;
S2、MS基本培养基成分的混合:向S1步骤中制备的溶液内加入常量营养元素、微量营养元素和有机物,并且不断搅拌;
S3、加入辅料:向S2步骤中制备的MS基本培养基内加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物,在加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物的过程中匀速搅拌,并且加热到80℃,然后加入杀菌粉;
S4、调节PH:向S3制备的溶液内加入1mol/L的盐酸调节PH,调节的PH值在5.4-6.1之间;
S5、培养基制备:向S4制备的溶液内加入珍珠粉和琼脂粉,加入珍珠粉和琼脂粉的过程中匀速搅拌;
S6、杀菌:S5步骤制成的培养基放入到灭菌锅内,在130℃的温度线灭菌20-30min。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:MS培养基包括常量营养元素、微量营养元素和有机物,使得植物的生长可以获得平衡的营养条件,促进植物组织茁壮成长,通过添加杀菌粉保证培养基长时间处于无菌环境内,利于植物生长,而且杀菌粉采用中草药成分,不仅对植物组织不会造成危害,杀菌效果好,而且对环境基本没有影响,另外通过激素调控进一步有利于植物生长,制备方法简单,适合产业化生产。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
实施例一,一种组合式植物组织培养生根阶段培养基,以MS基本培养基为基本培养基,还包括以下组分:香蕉汁20g/L,珍珠粉16g/L,琼脂粉12g/L,肌醇0.1g/L,白糖20g/L,芦荟提取物2g/L、杀菌粉、激素、酒精和去离子水;
所述MS基本培养基包括常量营养元素、微量营养元素和有机物;所述常量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:硝酸钾500mg/L,硫酸铵280mg/L,七水硫酸镁200mg/L,无水磷酸二氢钾20mg/L,乙二胺四乙酸二钠5.5mg/L,七水硫酸亚铁mg/L;所述微量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:氯化钙10mg/L,硫酸锌8.5mg/L,硼酸5.2mg/L,钼酸钠1.2mg/L,硫酸铜0.5mg/L,氯化钴0.01mg/L;所述有机物各组分以及各组分的浓度分别为:环己硫醇50mg/L,烟酸1.0mg/L,盐酸吡哆醇1.0mg/L;
所述杀菌粉的配料包括以下各组分:金银花8份,百部5份,白藓皮8份,苍术3份,藿香6份和蛇床子4份;所述杀菌粉的细度为60目;
所述激素包括6-BA、KT、CPPA、ABBU的其中一种,激素的重量为0.15g;
所述酒精采用95%的酒精。
所述组合式植物组织培养生根阶段培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1、制备溶液:将激素溶解在95%的酒精内,然后加入去离子水制成溶液;
S2、MS基本培养基成分的混合:向S1步骤中制备的溶液内加入常量营养元素、微量营养元素和有机物,并且不断搅拌;
S3、加入辅料:向S2步骤中制备的MS基本培养基内加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物,在加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物的过程中匀速搅拌,并且加热到80℃,然后加入杀菌粉;
S4、调节PH:向S3制备的溶液内加入1mol/L的盐酸调节PH,调节的PH值在5.4-6.1之间;
S5、培养基制备:向S4制备的溶液内加入珍珠粉和琼脂粉,加入珍珠粉和琼脂粉的过程中匀速搅拌;
S6、杀菌:S5步骤制成的培养基放入到灭菌锅内,在130℃的温度线灭菌20-30min。
实施例二,一种组合式植物组织培养生根阶段培养基,以MS基本培养基为基本培养基,还包括以下组分:香蕉汁30g/L,珍珠粉18g/L,琼脂粉15g/L,肌醇0.16/L,白糖24g/L,芦荟提取物2.8g/L、杀菌粉、激素、酒精和去离子水;
所述MS基本培养基包括常量营养元素、微量营养元素和有机物;所述常量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:硝酸钾500mg/L,硫酸铵280mg/L,七水硫酸镁200mg/L,无水磷酸二氢钾20mg/L,乙二胺四乙酸二钠5.5mg/L,七水硫酸亚铁mg/L;所述微量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:氯化钙10mg/L,硫酸锌8.5mg/L,硼酸5.2mg/L,钼酸钠1.2mg/L,硫酸铜0.5mg/L,氯化钴0.01mg/L;所述有机物各组分以及各组分的浓度分别为:环己硫醇50mg/L,烟酸1.0mg/L,盐酸吡哆醇1.0mg/L;
所述杀菌粉的配料包括以下各组分:金银花10份,百部6份,白藓皮9份,苍术4份,藿香8份和蛇床子7份;所述杀菌粉的细度为80目;
所述激素包括6-BA、KT、CPPA、ABBU的其中一种,激素的重量为0.2g;
所述酒精采用95%的酒精。
所述组合式植物组织培养生根阶段培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1、制备溶液:将激素溶解在95%的酒精内,然后加入去离子水制成溶液;
S2、MS基本培养基成分的混合:向S1步骤中制备的溶液内加入常量营养元素、微量营养元素和有机物,并且不断搅拌;
S3、加入辅料:向S2步骤中制备的MS基本培养基内加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物,在加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物的过程中匀速搅拌,并且加热到80℃,然后加入杀菌粉;
S4、调节PH:向S3制备的溶液内加入1mol/L的盐酸调节PH,调节的PH值在5.4-6.1之间;
S5、培养基制备:向S4制备的溶液内加入珍珠粉和琼脂粉,加入珍珠粉和琼脂粉的过程中匀速搅拌;
S6、杀菌:S5步骤制成的培养基放入到灭菌锅内,在130℃的温度线灭菌20-30min。
实施例三,一种组合式植物组织培养生根阶段培养基,以MS基本培养基为基本培养基,还包括以下组分:香蕉汁35g/L,珍珠粉21g/L,琼脂粉19g/L,肌醇0.24/L,白糖29g/L,芦荟提取物3.6g/L、杀菌粉、激素、酒精和去离子水;
所述MS基本培养基包括常量营养元素、微量营养元素和有机物;所述常量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:硝酸钾500mg/L,硫酸铵280mg/L,七水硫酸镁200mg/L,无水磷酸二氢钾20mg/L,乙二胺四乙酸二钠5.5mg/L,七水硫酸亚铁mg/L;所述微量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:氯化钙10mg/L,硫酸锌8.5mg/L,硼酸5.2mg/L,钼酸钠1.2mg/L,硫酸铜0.5mg/L,氯化钴0.01mg/L;所述有机物各组分以及各组分的浓度分别为:环己硫醇50mg/L,烟酸1.0mg/L,盐酸吡哆醇1.0mg/L;
所述杀菌粉的配料包括以下各组分:金银花11份,百部8份,白藓皮10份,苍术6份,藿香9份和蛇床子8份;所述杀菌粉的细度为90目;
所述激素包括6-BA、KT、CPPA、ABBU的其中一种,激素的重量为0.28g;
所述酒精采用95%的酒精。
所述组合式植物组织培养生根阶段培养基的制备方法,包括以下步骤:
S1、制备溶液:将激素溶解在95%的酒精内,然后加入去离子水制成溶液;
S2、MS基本培养基成分的混合:向S1步骤中制备的溶液内加入常量营养元素、微量营养元素和有机物,并且不断搅拌;
S3、加入辅料:向S2步骤中制备的MS基本培养基内加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物,在加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物的过程中匀速搅拌,并且加热到80℃,然后加入杀菌粉;
S4、调节PH:向S3制备的溶液内加入1mol/L的盐酸调节PH,调节的PH值在5.4-6.1之间;
S5、培养基制备:向S4制备的溶液内加入珍珠粉和琼脂粉,加入珍珠粉和琼脂粉的过程中匀速搅拌;
S6、杀菌:S5步骤制成的培养基放入到灭菌锅内,在130℃的温度线灭菌20-30min。
本发明的工作原理是:
上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明,但是本专利并不限于上述实施方式,在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本专利宗旨的前提下做出各种变化。

Claims (6)

1.一种组合式植物组织培养生根阶段培养基,其特征在于,以MS基本培养基为基本培养基,还包括以下组分:香蕉汁20-35g/L,珍珠粉16-21g/L,琼脂粉12-19g/L,肌醇0.1-0.24g/L,白糖20-39g/L,芦荟提取物2-3.6g/L、杀菌粉、激素、酒精和去离子水,酒精采用95%的酒精;
所述MS基本培养基包括常量营养元素、微量营养元素和有机物;
所述杀菌粉的配料包括以下各组分:金银花8-11份,百部5-8份,白藓皮8-10份,苍术3-6份,藿香6-9份和蛇床子4-8份;所述杀菌粉的细度为60-90目。
2.根据权利要求1所述的组合式植物组织培养生根阶段培养基,其特征在于,所述常量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:硝酸钾500mg/L,硫酸铵280mg/L,七水硫酸镁200mg/L,无水磷酸二氢钾20mg/L,乙二胺四乙酸二钠5.5mg/L,七水硫酸亚铁mg/L。
3.根据权利要求1所述的组合式植物组织培养生根阶段培养基,其特征在于,所述微量营养元素包括以下各组分以及各组分的浓度分别为:氯化钙10mg/L,硫酸锌8.5mg/L,硼酸5.2mg/L,钼酸钠1.2mg/L,硫酸铜0.5mg/L,氯化钴0.01mg/L。
4.根据权利要求1所述的组合式植物组织培养生根阶段培养基,其特征在于,所述有机物各组分以及各组分的浓度分别为:环己硫醇50mg/L,烟酸1.0mg/L,盐酸吡哆醇1.0mg/L。
5.根据权利要求1所述的组合式植物组织培养生根阶段培养基,其特征在于,所述激素包括6-BA、KT、CPPA、ABBU的其中一种,激素的重量为0.15-0.28g。
6.根据权利要求1所述的组合式植物组织培养生根阶段培养基的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、制备溶液:将激素溶解在95%的酒精内,然后加入去离子水制成溶液;
S2、MS基本培养基成分的混合:向S1步骤中制备的溶液内加入常量营养元素、微量营养元素和有机物,并且不断搅拌;
S3、加入辅料:向S2步骤中制备的MS基本培养基内加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物,在加入香蕉汁、肌醇、白糖和芦荟提取物的过程中匀速搅拌,并且加热到80℃,然后加入杀菌粉;
S4、调节PH:向S3制备的溶液内加入1mol/L的盐酸调节PH,调节的PH值在5.4-6.1之间;
S5、培养基制备:向S4制备的溶液内加入珍珠粉和琼脂粉,加入珍珠粉和琼脂粉的过程中匀速搅拌;
S6、杀菌:S5步骤制成的培养基放入到灭菌锅内,在130℃的温度线灭菌20-30min。
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