CN109164212A - 一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法 - Google Patents

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王尼慧
齐文全
张庆
王宁乐
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    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G31/00—Soilless cultivation, e.g. hydroponics

Abstract

本发明属于花卉育种和栽培技术领域，具体涉及一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法。本发明主要包括月季植株的培养，月季离体叶片的选取与高温处理，月季离体叶片的叶绿素荧光动力学参数Fv/Fm值测定，离体叶片热害分级标准的应用等。本发明的特征为，在特定高温和一定时间处理下，不同耐热月季种质间离体叶片的叶绿素荧光动力学参数Fv/Fm值存在明显差异，能鉴定出月季的耐热性种质和热敏性种质参数。本发明操作简单、快速、能有效鉴定月季种质资源耐热性的方法，特别适宜于植株数量少或珍稀月季种质耐热性的鉴定，能极大地加快月季耐热育种和选择进程。

Description

一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法
技术领域
本发明属于花卉育种和栽培技术领域，具体涉及一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法。本发明在不影响植株生长的前提下对其进行耐热性鉴定，便于热敏感株系保存，特别适宜于数量少或珍贵的月季种质资源的耐热性鉴定，是一种操作简单、快速、有效鉴定月季种质资源耐性的方法。
背景技术
月季(Rosa hybrida)是蔷薇科(Rosaceae)蔷薇属(Rosa)多年生常绿灌木，种类繁多、来源广泛，备受人们的喜爱。作为中国传统的十大名花之一，以其品种繁多、色彩绚丽、芳香浓郁、花期长等优势，被多个市选作为市花。月季原产北半球寒温带至亚热带，喜温暖，大多数月季品种最适温度白昼为15～26℃，夜晚为10～15℃。夏季温度持续30℃以上时，进入半休眠，能耐35℃高温[1]。随着温室效应逐渐加重，全球气温升高，尤其是长江流域夏季的温度高达38-40℃。夏季高温导致月季花芽停止分化而转化为营养生长，使不耐热品种夏季不开花，生长不良。此外，由于夏季高温高湿而导致月季病虫害加重，如黑斑病、白粉病尤其普遍，严重影响月季的生长发育[1，2]。显然高温已经严重制约了月季的推广和应用。因此，建立科学有效的月季种质耐热性的鉴定方法，开展耐热月季的筛选，充分挖掘耐热月季种质，对丰富园林植物的种类具有重要的现实意义。
目前，鉴定月季耐热性的常用方法为田间鉴定法[3]和人工模拟逆境形态和生理生化鉴定法[2,4]。田间鉴定受环境条件和栽培条件影响很大，结果重复性差，而且所需时间长，植株种植、管养、数据采集和分析的工作量大。人工模拟逆境形态和生理生化鉴定方法测量相关生理指标较繁琐，而且对热敏材料损伤较大，尤其是一些数量少或珍稀材料，很容易死亡。上述这些鉴定(测定)方法费时费力，效率低，特别是对于一些可供鉴定样品较少的月季种质，具有很大的局限性。
发明内容
本发明在于克服现有技术的缺陷，提供一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，该方法的步骤简单快捷、稳定可靠，鉴定结果与田间观察鉴定结果一致、重复性好，特别适用于数量少或珍稀月季材料，能够有效提高月季耐热性筛选效率，加速育种进程。
本发明的技术方案如下所述：
一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，所述的方法在于利用月季一年生枝条的叶片，测定叶绿素荧光动力学参数Fv/Fm值，来鉴定出月季的耐热性，包括如下步骤：
1)植株培养：以月季耐热品种“月月红”为耐热对照，以月季热敏品种“月月粉”为热敏对照品种，将耐热性未知的待检月季种质材料，分别种植在直径为180cm的双色盆中，基质成分为泥炭土：粗珍珠岩，泥炭土与粗珍珠岩的体积比为8：1。将双色盆置于培养箱或生长室进行培养，所需的条件为：光照为20000lx，白天温度控制为25℃，处理14h，夜间温度为控制为20℃，处理10h，保持相对湿度为75％。培养周期为2个月。
2)取样：取刚开过花的月季一年生枝条，选择形态学即植株顶端往下数第3-5组复叶叶片为检材。置于自封袋中并洒少量水以保湿。迅速带回实验室，去除叶柄，将小叶叶片混合后每3片为一组，置于小自封袋中。在不对月季叶片造成机械损伤的前提下，挤出袋内空气。
3)高温处理：先将保存的月季叶片置于室温下暗适应30min，然后放入46℃水浴锅中水浴，水浴时间为50min，将月季的叶片始终保存在密封的小自封袋中。
4)数据测定：将月季叶片从自封袋中取出，如果叶片上有水珠，则用滤纸或纱布擦干；然后利用配置探头IMAG-MAX/L的调制荧光成像系统MAX-IMAGING-PAM(Walz，Germany)测定离体叶片的叶绿素荧光动力学参数Fv/Fm值。每个材料设置3个重复，每个重复处理3个样本，计算平均值，即为该材料的Fv/Fm值。
5)根据以下分级标准确定待测月季种质的耐热性：
Fv/Fm≥0.55为耐热材料；
Fv/Fm在0.35～0.55为较耐热材料；
Fv/Fm≤0.35为热敏材料。
本发明创建的利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的方法，主要通过采集植株少量的叶片，利用水浴进行高温处理，通过测定叶绿素荧光动力学参数Fv/Fm值来鉴定出月季种质的耐热性。本发明稳定可靠，鉴定结果与田间自然鉴定结果一致、重复性好，速度快，省时省力，对植株造成的创伤小，特别是检测数量少和珍稀的种质资源，不影响植株的后续分析，从而大大提高了月季耐热性育种的进程。
具体实施方式
实施例1：
本实施例利用待测月季一年生枝条的离体叶片作为检材，测定叶绿素荧光动力学参数Fv/Fm值来鉴定出月季的耐热性。具体步骤如下：
1)以月季耐热品种“月月红”为耐热对照，以月季热敏品种“月月粉”为热敏对照，待检测的种质包含6个商业品种“玛姬婶婶”、“梦幻华尔兹”、“丘比特”、“甜蜜马车”、“我的心”、“新朱墨双辉”，以及自育的4个品系“C57”、“CL83”、“CL88”和“H83”。(实施本发明，不限于上述材料)
2)将耐热性未知的待检月季种质材料、耐热对照“月月红”和和热敏对照“月月粉”的植株，分别种植在口径为180cm的双色盆中，基质成分为泥炭土：粗珍珠岩与泥炭土：粗珍珠岩体积比为8：1；将双色盆置于培养箱或生长室进行培养。所需的条件为：光照强度为20000lx，白天温度控制为25℃，处理14h；夜间温度控制为20℃，处理10h；相对湿度控制为75％。培养周期为2个月。
3)取刚开过花的一年生月季枝条，选择形态学即植株的顶端往下数第3-5组复叶叶片为检材；置于自封袋中并洒少量水以保湿；迅速带回实验室，去除叶柄，将小叶叶片混合后每3片为一组，置于小自封袋中。在不对叶片造成机械损伤的前提下，挤出袋内空气。
4)先将月季叶片置于室温下暗适应30min，然后放入46℃水浴锅中水浴，水浴50min，将处理后的月季叶片始终在密封的小自封袋中保存。
5)将月季叶片从自封袋中取出。如果叶片上有水珠，则用滤纸或纱布擦干，然后利用配置探头IMAG-MAX/L的调制荧光成像系统MAX-IMAGING-PAM(Walz，Germany)测定离体叶片的叶绿素荧光动力学参数Fv/Fm值。每个材料设置3个重复，每个重复为3个样本，计算平均值，即得到该材料的Fv/Fm值。
6)根据以下分级标准确定待测月季种质的耐热性：其中
Fv/Fm≥0.55为耐热材料；
Fv/Fm在0.35～0.55为较耐热材料；
Fv/Fm≤0.35为热敏材料。
不同月季种质的Fv/Fm值和耐热性等级见表1。
表1不同月季种质材料的Fv/Fm值和耐热性等级测定结果
表1备注：上述材料为常用栽培材料(实施本发明不限于上述材料)。
根据本实施例的方法，由检测结果(表1)可见“梦幻华尔兹”为耐热的月季材料。“新朱墨双辉”“CL83”“CL88”和“H83”为较耐热月季材料。“玛姬婶婶”、“丘比特”、“甜蜜马车”，“我的心”和“C57”为热敏材料。
主要参考文献
[1]胡永红等，高温对月季部分形态、生理指标的影响研究.种子，2008，27(7)：26-28，31；
[2]李健等,高温胁迫下10个月季品种的耐热性.中南林业科技大学学报，2010，30(12)：88-91；
[3]高洁等，上海耐热月季品种的田间筛选及其综合评价.生态学杂志，2012，31(7):1707－1713；
[4]罗丹等，月季部分形态生理指标对高温的反应研究.黑龙江农业科学,2013(8)：66-72。

Claims (5)

1.一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，其特征包括如下步骤：
1)植株培养：将月季材料定植在双色盆中，基质成分为泥炭土：粗珍珠岩，泥炭土与粗珍珠岩按体积比为8：1的比例配制，将定值的月季置于生长箱或生长室内培养2个月；
2)取样：取刚开过花的一年生月季枝条的叶片，置于自封袋中并洒少量水以保湿；迅速带到实验室，去除叶柄，将小叶叶片混合后每3片为一组，置于另外的小自封袋中，在不对叶片造成机械损伤的前提下，挤出袋内空气；
3)高温处理：先将叶片置于室温下暗适应30min，然后进行46℃水浴处理，使叶片始终在密封的小自封袋中；
4)数据测定：将叶片从自封袋中取出，如果叶片上有水珠，则用滤纸或纱布擦干；然后利用配置探头IMAG-MAX/L的调制荧光成像系统MAX-IMAGING-PAM测定离体叶片的叶绿素荧光动力学参数Fv/Fm值；每个材料设置3个重复，每个重复为3个样本，计算平均值，得到待测材料的Fv/Fm值；
5)根据以下分级标准确定待测月季种质的耐热性：
Fv/Fm≥0.55为耐热材料；
Fv/Fm在0.35～0.55为较耐热材料；
Fv/Fm≤0.35为热敏材料。
2.根据权利要求1所述的一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，其特征在于：步骤1)中的月季植株培养过程中，生长箱或生长室的光照强度为20000lx，白天温度控制为25℃，处理14h，夜间温度控制为20℃，处理10h，保持相对湿度为75％。
3.根据权利要求1所述的一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，其特征在于：步骤2)中的离体月季叶片的挑选过程中，选择植株顶端往下数第3-5组复叶叶片为样本。
4.根据权利要求1所述的一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，其特征在于：步骤3)中的离体月季叶片预处理过程中，水浴温度控制为46℃，处理时间控制为50min。
5.根据权利要求1所述的一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的方法，其特征在于：步骤5)中的月季叶片耐热性鉴定过程中，以耐热的月季品种为耐热对照，以热敏的月季品种为热敏对照进行匹配测定。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110907417A (zh) * 2019-11-18 2020-03-24 上海市农业科学院 一种用于快速评价矾根耐热性的方法
CN112577934A (zh) * 2020-12-08 2021-03-30 浙江省农业科学院 一种基于叶绿素荧光图像分析的灌浆期耐热油菜筛选方法
CN112611779A (zh) * 2020-11-09 2021-04-06 江苏农林职业技术学院 一种快速检定多花梾木适生温度范围的方法及其应用
CN116267454A (zh) * 2023-02-02 2023-06-23 安徽农业大学 一种筛选不结球白菜耐寒品种的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101422132A (zh) * 2008-12-01 2009-05-06 云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所 月季耐盐株系的离体快速筛选方法
CN103558141A (zh) * 2013-10-14 2014-02-05 西北农林科技大学 一种利用离体叶圆片鉴定辣椒耐热性的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101422132A (zh) * 2008-12-01 2009-05-06 云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所 月季耐盐株系的离体快速筛选方法
CN103558141A (zh) * 2013-10-14 2014-02-05 西北农林科技大学 一种利用离体叶圆片鉴定辣椒耐热性的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NADIA HAKAM等: "Assessing chilling tolerance in roses using chlorophyll fluorescence", 《HORT SCIENCE》 *
周忆堂等: "不同光照条件下长春花的光合作用和叶绿素荧光动力学特征", 《中国农业科学》 *
姜建福等: "196份葡萄属(Vitis L.)种质资源耐热性评价", 《植物遗传资源学报》 *
高洁等: "上海耐热月季品种的田间筛选及其综合评价", 《生态学杂志》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110907417A (zh) * 2019-11-18 2020-03-24 上海市农业科学院 一种用于快速评价矾根耐热性的方法
CN112611779A (zh) * 2020-11-09 2021-04-06 江苏农林职业技术学院 一种快速检定多花梾木适生温度范围的方法及其应用
CN112577934A (zh) * 2020-12-08 2021-03-30 浙江省农业科学院 一种基于叶绿素荧光图像分析的灌浆期耐热油菜筛选方法
CN116267454A (zh) * 2023-02-02 2023-06-23 安徽农业大学 一种筛选不结球白菜耐寒品种的方法
CN116267454B (zh) * 2023-02-02 2023-11-24 安徽农业大学 一种筛选不结球白菜耐寒品种的方法

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