CN109142197A - 高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法 - Google Patents
高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109142197A CN109142197A CN201811078847.6A CN201811078847A CN109142197A CN 109142197 A CN109142197 A CN 109142197A CN 201811078847 A CN201811078847 A CN 201811078847A CN 109142197 A CN109142197 A CN 109142197A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cell
- efficiently
- detection
- detection method
- mammary glandular
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 45
- 230000000762 glandular Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 title claims description 14
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 230000004044 response Effects 0.000 claims abstract description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 10
- 230000029087 digestion Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims abstract description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 126
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 13
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 12
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 11
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 claims description 8
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims description 8
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 claims description 5
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 claims description 5
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 claims description 5
- 230000005284 excitation Effects 0.000 claims description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 5
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 5
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 8
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 7
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 4
- 238000011897 real-time detection Methods 0.000 abstract description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 abstract 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract 1
- 102000003923 Protein Kinase C Human genes 0.000 description 5
- 108090000315 Protein Kinase C Proteins 0.000 description 5
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 5
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 4
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 3
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 230000033116 oxidation-reduction process Effects 0.000 description 2
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000010718 Oxidation Activity Effects 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000069 breast epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5091—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing the pathological state of an organism
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N2015/1006—Investigating individual particles for cytology
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高效准确检测乳腺细胞癌变的检测方法,包括步骤1,试验用细胞株进行消化吹打处理形成细胞悬液;步骤2,用血球计数板测定细胞悬液中的细胞密度;步骤3,用PBS缓冲液冲洗粘附在盖玻片上的细胞3次;步骤4,将细胞浴槽放入纳米光电生化检测仪记录细胞内DCF(特异性荧光染料)的荧光光子数响应。本发明实时检测揭示了在癌细胞中比正常细胞有明显更高的氧化响应,为在纳米级的环境中探测化学动力学以阐明关键生物过程提供了一个独特的应用方向。
Description
技术领域
本发明涉及一种乳腺细胞癌变的检测方法,属于生物活性细胞检测领域。
背景技术
复杂的细胞活动,如DNA修复,氧化活性,细胞程序性死亡和转录调控通常是由多个相互关联的错综复杂的信号通路控制。生物学的传统工作集中在信号转导通路的单一成分的研究。虽然这些研究都在发现各种信号成分上取得显著的进步,但是复杂的细胞过程和他们的调控的充分瓦解要求在时间和空间上多个相关参数同时进行检测。作为一个重要的细胞过程,氧化还原稳态的维持依赖于活性氧(ROS)的产生和消除系统的相互作用。这种系统的失调会导致氧化应激,造成生物学上的破坏,并且牵涉到各种病理情况,包括癌症,心血管疾病,炎症和退行性疾病。
《生物传感器与生物电子学》于2011年发表了一篇论文:双功能电光纳米探针实时检测单细胞中局部的生物化学过程(Biosensors and Bioelectronics 26(2011)4484–4490)。该文章提供了一种高效准确检测乳腺细胞癌变的检测方法,该方法通过添加刺激物能够实时地得到不同的单个活细胞内原位的DCF荧光光子数响应。但是该方法对H2O2的反应时间较长,能够检测的H2O2释放的总量较低,无法检测超低量的H2O2;但乳腺癌早期时H2O2的浓度极低,因此该方法不适用于早期乳腺癌的检测。另一方面早期癌症的检测或筛选对病人的早期治疗具有极为重要的意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,该方法通过添加刺激物能够实时地得到不同的单个活细胞内原位的DCF荧光光子数响应。
说明:人正常乳腺上皮细胞株:英文缩写-MCF10A;人乳腺癌细胞株:英文缩写-MCF7;人皮表生长因子受体-2:英文缩写-HER2,人皮表生长因子受体-2过表达的人乳腺癌细胞株:英文缩写-MCF7/HER2。
为解决上述技术问题,本发明所采用的技术方案如下:
一种高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,包括如下步骤:
步骤1,选择人乳腺上皮细胞株MCF10A、人乳腺癌细胞株MCF7、HER2过表达的MCF7细胞株(MCF7/HER2)作为试验用细胞株,并对试验用细胞株进行消化吹打处理形成细胞悬液;
步骤2,用血球计数板测定细胞悬液中的细胞密度,以细胞密度为1×104个细胞/cm2接种到细胞浴槽的盖玻片上用于细胞附着;
步骤3,细胞分别附着24h、24.5h、25h、25.5h后,用PBS缓冲液冲洗粘附在盖玻片上的细胞3次,在37℃用染料DCFH-DA染色细胞30分钟,孵育后,将染色的细胞用PBS缓冲液冲洗三次后向细胞浴槽中加入100μl的PBS缓冲液;
步骤4,将细胞浴槽放入纳米光电生化检测仪,调整纳米探头与细胞的相对位置,检测过程中添加刺激物PMA并同时记录细胞内DCF的荧光光子数响应。
其中,步骤1中,先将试验用细胞株用PBS缓冲液清洗,清洗后用0.25%的胰蛋白酶溶液消化细胞,细胞消化后用含血清(血清的质量百分浓度为10%)的新鲜培养基终止消化,将混悬液吸到离心管中,1000r/min离心5min,得到的沉淀物用含血清的培养基重悬吹匀即可。
其中,步骤2中,所述细胞浴槽的盖玻片为细胞可爬壁生长的盖玻片。
其中,步骤3中,所述染料DCFH-DA的浓度分别为20μM、25μM、30μM、35μM。
其中,步骤3中,所述染料DCFH-DA的激发波长为485nm,发射波长为530nm。
其中,步骤4中,所述纳米探头是尖端通光,尖端尺寸在100nm左右的镀膜纳米探头。
其中,步骤4中,所述纳米探头通过微操作系统进行控制移动。
其中,步骤4中,所述纳米探头与细胞的相对位置通过倒置荧光生物显微镜进行观察调整。
其中,步骤4中,所述检测荧光光子响应过程中添加刺激物PMA的浓度分别为10μM、15μM,20μM、25μM。
本发明的有益效果如下。
本发明实时检测揭示了在癌细胞中比正常细胞有明显更高的氧化响应,这表明细胞恶性肿瘤与氧化应激强度相关,而且较高的抗氧化水平是耐药性的原因,为在纳米级的环境中探测化学动力学以阐明关键生物过程提供了一个独特的应用方向,刺激物PMA是一种能激活蛋白激酶C(PKC)的甘油二酯类似物,应用于引发靶细胞中的氧化反应。
具体实施方式
实施例1
一种高效准确检测乳腺细胞癌变的检测方法,包括如下步骤:
步骤1,选择人乳腺上皮细胞株MCF10A作为试验用细胞株,在显微镜下观察其生长状态,去除原有培养基,用PBS缓冲液清洗细胞1-2次,向培养瓶中加入2ml 0.25%的胰蛋白酶溶液消化细胞,待细胞消化结束,加入2ml含血清的新鲜培养基终止消化,将混悬液吸到离心管中,1000r/min离心5min,得到的沉淀物用含血清的培养基重悬吹匀;
步骤2,用血球计数板测定细胞悬液中的细胞密度,以细胞密度为1×104个细胞/cm2接种到细胞浴槽的盖玻片上用于细胞附着,此盖玻片为细胞可爬壁生长的盖玻片;
步骤3,细胞附着24h后,用PBS缓冲液冲洗粘附在盖玻片上的细胞3次,在37℃用20μM的染料DCFH-DA染色细胞30分钟。孵育后,将染色的细胞用PBS缓冲液冲洗三次后向细胞浴槽中加入100μl的PBS缓冲液;
步骤4,将细胞浴槽放入纳米光电生化检测仪,在倒置荧光生物显微镜下,通过微操作系统调整尖端通光,尖端尺寸在100nm左右的镀膜纳米探头与细胞的相对位置,检测过程中添加10μM的刺激物PMA并同时记录细胞内DCF的荧光光子数响应。
染料DCFH-DA的激发波长为485nm,发射波长为530nm。刺激物PMA是一种能激活蛋白激酶C(PKC)的甘油二酯类似物,应用于引发靶细胞中的氧化反应。
通过DCF荧光光子数可以看出,在加入刺激物PMA之前正常细胞内维持良好的氧化状态,在加入刺激后正常细胞内的活性氧水平稍微增加并逐渐趋于平缓,说明正常细胞内有良好的氧化还原系统能及时的消除外界的氧化应激。
实施例2
一种高效准确检测乳腺细胞癌变的检测方法,包括如下步骤:
步骤1,选择人乳腺癌细胞株MCF7作为试验用细胞株,在显微镜下观察其生长状态,去除原有培养基,用PBS缓冲液清洗细胞1-2次,向培养瓶中加入2ml 0.25%的胰蛋白酶溶液消化细胞,待细胞消化结束,加入2ml含血清的新鲜培养基终止消化,将混悬液吸到离心管中,1000r/min离心5min,得到的沉淀物用含血清的培养基重悬吹匀;
步骤2,用血球计数板测定细胞悬液中的细胞密度,以细胞密度为1×104个细胞/cm2接种到细胞浴槽的盖玻片上用于细胞附着,此盖玻片为细胞可爬壁生长的盖玻片;
步骤3,细胞附着25h后,用PBS缓冲液冲洗粘附在盖玻片上的细胞3次,在37℃用20μM的染料DCFH-DA染色细胞30分钟,孵育后,将染色的细胞用PBS缓冲液冲洗三次后向细胞浴槽中加入100μl的PBS缓冲液;
步骤4,将细胞浴槽放入纳米光电生化检测仪,在倒置荧光生物显微镜下,通过微操作系统调整尖端通光,尖端尺寸在100nm左右的镀膜纳米探头与细胞的相对位置,检测过程中添加10μM的刺激物PMA并同时记录细胞内DCF的荧光光子数响应。
染料DCFH-DA的激发波长为485nm,发射波长为530nm。刺激物PMA是一种能激活蛋白激酶C(PKC)的甘油二酯类似物,应用于引发靶细胞中的氧化反应。
通过DCF荧光光子数可以看出,在加入刺激物PMA之前癌症细胞内维持良好的氧化状态,在加入刺激物后癌症细胞内的活性氧水平急剧增加并逐步递增,说明癌症细胞内的氧化还原系统处于不正常的状态,不能及时消除外界的氧化应激。
实施例3
一种高效准确检测乳腺细胞癌变的检测方法,包括如下步骤:
步骤1,选择HER2过表达的MCF7细胞株(MCF7/HER2)作为试验用细胞株,在显微镜下观察其生长状态,去除原有培养基,用PBS缓冲液清洗细胞1-2次,向培养瓶中加入2ml0.25%的胰蛋白酶溶液消化细胞,待细胞消化结束,加入2ml含血清的新鲜培养基终止消化,将混悬液吸到离心管中,1000r/min离心5min,得到的沉淀物用含血清的培养基重悬吹匀;
步骤2,用血球计数板测定细胞悬液中的细胞密度,以细胞密度为1×104个细胞/cm2接种到细胞浴槽的盖玻片上用于细胞附着,此盖玻片为细胞可爬壁生长的盖玻片;
步骤3,细胞附着25.5h后,用PBS缓冲液冲洗粘附在盖玻片上的细胞3次,在37℃用20μM的染料DCFH-DA染色细胞30分钟。孵育后,将染色的细胞用PBS缓冲液冲洗三次后向细胞浴槽中加入100μl的PBS缓冲液;
步骤4,将细胞浴槽放入纳米光电生化检测仪,在倒置荧光生物显微镜下,通过微操作系统调整尖端通光,尖端尺寸在100nm左右的镀膜纳米探头与细胞的相对位置,检测过程中添加10μM的刺激物PMA并同时记录细胞内DCF的荧光光子数响应。
染料DCFH-DA的激发波长为485nm,发射波长为530nm。刺激物PMA是一种能激活蛋白激酶C(PKC)的甘油二酯类似物,应用于引发靶细胞中的氧化反应。
本发明基于背景论文中所描述的工艺,对以下参数进行多次优化,得出如下组合,具体结果见表1-表3。
表格1:MCF10A
备注:第1行组合为背景技术论文中原来参数及结果,第2-4行为优化工艺参数及结果。
表格2:MCF7
备注:第1行组合为背景技术论文中原来参数及结果,第2-4行为优化工艺参数及结果。
表格3:MCF7/HER2
备注:第1行组合为背景技术论文中原来参数及结果,第2-4行为优化工艺参数及结果。
表4:本发明最佳优化工艺参数所得结果与背景技术论文参数所得结果比较。
备注:最佳优化工艺参数所得结果为表1-3中第4行数据;论文工艺参数所得结果为表1-3中第1行数据。
从以上结果(表1-3)可以看出,通过优化参数,释放时间大幅减少,峰值浓度大幅提高,能够检测到的H2O2释放总量也显著提高,具体比较数据见表4;因此本发明中优化后的工艺参数极大的提高了本检测方法的检测效率和准确率,同时也大幅提高了灵敏度。
Claims (9)
1.一种高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,其特征在于:包括如下步骤:
步骤1,选择人乳腺上皮细胞株(MCF10A)、人乳腺癌细胞株(MCF7)、HER2过表达的MCF7细胞株(MCF7/HER2)作为试验用细胞株,并对试验用细胞株进行消化吹打处理形成细胞悬液;
步骤2,用血球计数板测定细胞悬液中的细胞密度,以细胞密度为1×104个细胞/cm2接种到细胞浴槽的盖玻片上用于细胞附着;
步骤3,细胞分别附着24h、24.5h、25h、25.5h后,用PBS缓冲液冲洗粘附在盖玻片上的细胞3次,在37℃ 用染料DCFH-DA染色细胞30分钟,孵育后,将染色的细胞用PBS缓冲液冲洗三次后向细胞浴槽中加入100μl的PBS缓冲液;
步骤4,将细胞浴槽放入纳米光电生化检测仪,调整纳米探头与细胞的相对位置,检测过程中添加刺激物PMA并同时记录细胞内DCF的荧光光子数响应。
2.根据权利要求1所述的高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,其特征在于:步骤1中,先将试验用细胞株用PBS缓冲液清洗,清洗后用0.25%的胰蛋白酶溶液消化细胞,细胞消化后用含血清的培养基终止消化,将混悬液吸到离心管中,1000r/min离心5min,得到的沉淀物用含血清的培养基重悬吹匀即可。
3.根据权利要求1所述的高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,其特征在于:步骤2中,所述细胞浴槽的盖玻片为细胞可爬壁生长的盖玻片。
4.根据权利要求1所述的高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,其特征在于:步骤3中,所述染料DCFH-DA的浓度分别为20μM、25μM、30μM、 35μM。
5.根据权利要求1所述的高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,其特征在于:步骤3中,所述染料DCFH-DA的激发波长为485nm,发射波长为530nm。
6.根据权利要求1所述的高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,其特征在于:步骤4中,所述纳米探头是尖端通光,尖端尺寸在100nm左右的镀膜纳米探头。
7.根据权利要求1所述的高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,其特征在于:步骤4中,所述纳米探头通过微操作系统进行控制移动。
8.根据权利要求1所述的高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,其特征在于:步骤4中,所述纳米探头与细胞的相对位置通过倒置荧光生物显微镜进行观察调整。
9.根据权利要求1所述的高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法,其特征在于:步骤4中,所述检测荧光光子响应过程中添加刺激物PMA的浓度分别为10μM、 15μM, 20μM、25μM。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2018108260931 | 2018-07-25 | ||
CN201810826093 | 2018-07-25 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN109142197A true CN109142197A (zh) | 2019-01-04 |
Family
ID=64814281
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201811078847.6A Pending CN109142197A (zh) | 2018-07-25 | 2018-09-17 | 高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN109142197A (zh) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1993610A (zh) * | 2004-07-30 | 2007-07-04 | 奥里巴Abx股份有限公司 | 表征生物学流体的细胞组分的方法和装置 |
CN102472738A (zh) * | 2009-07-03 | 2012-05-23 | 希森美康株式会社 | 血液分析装置及血液分析方法 |
CN106801032A (zh) * | 2017-02-17 | 2017-06-06 | 庞然 | 人羊膜上皮干细胞库的构建方法 |
CN107084957A (zh) * | 2016-06-29 | 2017-08-22 | 南京大学 | 一种对细胞内活性氧含量进行检测的方法 |
-
2018
- 2018-09-17 CN CN201811078847.6A patent/CN109142197A/zh active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1993610A (zh) * | 2004-07-30 | 2007-07-04 | 奥里巴Abx股份有限公司 | 表征生物学流体的细胞组分的方法和装置 |
CN102472738A (zh) * | 2009-07-03 | 2012-05-23 | 希森美康株式会社 | 血液分析装置及血液分析方法 |
CN107084957A (zh) * | 2016-06-29 | 2017-08-22 | 南京大学 | 一种对细胞内活性氧含量进行检测的方法 |
CN106801032A (zh) * | 2017-02-17 | 2017-06-06 | 庞然 | 人羊膜上皮干细胞库的构建方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
XIN TING ZHENG等: "Bifunctional electro-optical nanoprobe to real-time detect local biochemical processes in single cells", 《BIOSENSORS AND BIOELECTRONICS》 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0138833B1 (en) | Cell viability assay methods and apparatus | |
Cheah et al. | Microfluidic perfusion system for maintaining viable heart tissue with real-time electrochemical monitoring of reactive oxygen species | |
CN108034636B (zh) | 人乳腺癌细胞系及应用 | |
CN107084957A (zh) | 一种对细胞内活性氧含量进行检测的方法 | |
CN107488722B (zh) | LncRNA在制备诊断肺腺癌的试剂中的用途 | |
CN106367468A (zh) | 一种检测胶基型烟草制品对人口腔细胞γH2AX水平影响的方法 | |
CN113447548A (zh) | 一种检测器官芯片生理病理参数的生物传感系统的构建方法 | |
CN112553142A (zh) | 一种鼻黏膜上皮细胞3d类器官及其培养方法和应用 | |
US20230136396A1 (en) | Tomato pathogenic fungus detecting apparatus and detecting method using same | |
CN102998291A (zh) | 基于量子点对细胞中重金属离子原位实时检测的方法 | |
CN108118031A (zh) | 一种肺癌耐药细胞系及其制备方法 | |
CN106970224A (zh) | 一种应用cd45免疫荧光联合cep探针鉴定循环肿瘤细胞的试剂盒及其应用 | |
JP2006509514A (ja) | 細菌を同定するための方法および装置 | |
CN110907416A (zh) | 一种基于空心纳米针管电穿孔系统的循环肿瘤细胞检测装置及其检测方法 | |
CN106940372A (zh) | 检测端粒酶的亚甲基蓝、上转换纳米粒修饰纤维化纸传感器及其制备方法 | |
CN109142197A (zh) | 高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法 | |
CN102260731A (zh) | 用于膀胱癌筛查的酶标液基细胞学染色试剂盒 | |
CN101481651B (zh) | 金属纳米材料毒性检测板及其检测方法 | |
CN108802148A (zh) | 一种基于纳米金修饰丝网印刷电极在线监测细胞内多巴胺的微流控纸芯片 | |
CN102928391B (zh) | 基于硅纳米线有序阵列的pH荧光传感器的制法 | |
JP3137396B2 (ja) | サンプリング装置 | |
CN109825495B (zh) | 一种高通量筛选红曲色素高产菌株的方法 | |
CN107227296A (zh) | 一种骨髓单核细胞分离、鉴定及诱导分化的方法 | |
JPWO2010087110A1 (ja) | 微生物自動分析装置および微生物自動分析方法 | |
CN104897750B (zh) | 循环肿瘤细胞检测探针及制备方法及应用诊断传感器 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190104 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |