CN109105668A - 促生长罗非鱼饲料的制备方法 - Google Patents

促生长罗非鱼饲料的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了促生长罗非鱼饲料的制备方法，促生长罗非鱼饲料的制备方法，包括免疫增强剂制备、发酵料制备、饲料制备，其特征在于：所述免疫增强剂制备步骤为：取中草药制剂、果寡糖、甘露聚糖酶和用多孔淀粉包埋处理后的黄豆苷元，搅拌均匀，即得免疫增强剂；多孔淀粉的制备方法为：将玉米淀粉溶于苹果酸‑磷酸氢二钠缓冲溶液中，加入复合酶后酶解，酶解结束使酶失活，溶液经真空抽滤，淀粉洗涤后干燥，粉碎后过筛，即得到多孔淀粉。有益效果为：本发明制备方法简单可行，生产成本较低，饲料利用率高，制得的饲料可提高罗非鱼的食欲和摄食量，能够显著提高罗非鱼的机体免疫能力与营养水平、增强罗非鱼的抗病能力。

Description

促生长罗非鱼饲料的制备方法
技术领域
本发明涉及饲料技术领域，特别涉及促生长罗非鱼饲料的制备方法。
背景技术
罗非鱼原产于非洲东部，被人们俗称“非洲鲫鱼”。在动物分类上属于脊索动物门，脊椎动物亚门，鱼纲，鲈形目，鲡鱼科，罗非鱼属。其体形似鲫鱼，目前罗非鱼的品种至今已达到100多个，我国现在引进的主要品种有莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)、尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)及荷那龙罗非鱼(Oreochromis hornorum)等近10个品种，这些品种之间具有相似的生物学特征及生活习性。跟其他鱼类相比，罗非鱼具有食性杂，耐低氧、生长快、发病少、群体产量高、繁殖力和适应性强等重要特点。罗非鱼已经成为我国现代淡水养殖业的重要养殖品种，其养殖规模已经达到了产业化水平。然而，伴随着水产养殖业的大面积扩增与集约化养殖技术的应用，在养殖过程中也出现了大量问题，如水环境污染、生态安全等。最严重的还是病害问题突出，尤其是链球菌病，更是对全球罗非鱼产业造成严重的威胁，一旦感染造成大规模的死亡，并且传染性极高。生产上通常使用传统化学药物如抗生素来治疗链球菌病，抗生素等化学药品对很多细菌引起的疾病有良好的控制效果，但是在用抗生素治疗的过程中容易使用过量甚至是滥用，这会导致严重的后果。一方面会造成机体中病原体的抗药性显著增加，使机体自身的免疫功能下降；另一方面，大量抗生素的滥用又会带来药残，引起更严重的食品安全问题。因此，病害问题现如今已成为制约罗非鱼产业进一步发展、影响产品质量的主要因素之一。
目前，在饲料中添加免疫增强剂是最有效解决罗非鱼病害问题、促进其生长的有效手段之一。免疫增强剂指的是单独使用或是与抗原联合使用后，通过如增强机体巨噬细胞活性等调节方式，加强抗原物质的免疫原性及稳定性，促进抗体的合成与分泌，用以加强动物机体免疫系统的物质。其种类繁多，作用方式也多种多样。按其功能分类可分为两大类：一类是主要针对增强机体的非特异性免疫能力；另一类是通过增强由疫苗介导引起的特异性免疫。针对于水产动物而言，因其在抵抗异物入侵时主要发挥自身巨大的非特异性免疫系统，所以水产动物免疫增强剂主要应用的是前者，通过提高其非特异性免疫系统来增强水产动物清除外界病原体的能力。免疫增强剂虽然在水产业的起步较晚，但是发展迅速，增强剂种类及应用领域也越来越多。
发明内容
本发明的目的在于提供一种促生长罗非鱼饲料的制备方法，该制备方法简单可行，生产成本较低，饲料利用率高，制得的饲料可提高罗非鱼的食欲和摄食量，能够显著提高罗非鱼的机体免疫能力与营养水平、增强罗非鱼的抗病能力。
本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：
促生长罗非鱼饲料的制备方法，包括免疫增强剂制备、发酵料制备、饲料制备，其具体步骤为：
免疫增强剂制备：按重量份取中草药制剂30-60份、果寡糖2-10份、甘露聚糖酶1-2份、用多孔淀粉包埋处理后的的黄豆苷元10-30份，搅拌均匀，即得免疫增强剂，该免疫增强剂具有较好的分散性和流动性，使得饲料添加剂能够均匀分散于饲料中，可提高罗非鱼的食欲和摄食量，较小剂量即能够显著提高罗非鱼的机体免疫能力与营养水平、增强罗非鱼的抗病能力，提高饲料利用率，节约饲料资源，降低罗非鱼饲养成本，能代替抗生素，无毒副作用、无残留和无抗药性；
发酵料制备：按重量份取玉米10-30份、麸皮10-30份、玉米糖渣15-22份、豆粕5-15份、骨粉1-5份，混合均匀，经超微粉碎机粉碎至300目，然后均匀喷洒上混合菌种，再装入密封容器内，常温密封发酵，即得发酵料，该步骤采用简单的发酵工艺即可使得光合细菌、芽孢杆菌与超微粉实现完全发酵，从而发挥微生物活性，实现提高原料利用率和消化吸收率，保护罗非鱼肝脏，促进肠道细菌平衡等作用，且制得的饲料投入池塘后如果不能被罗非鱼摄食，吸附在饲料中的光合细菌和芽孢杆菌将会继续繁殖，将饲料有效分解，以减少对养殖水环境的污染；
饲料制备：将重量比为0.01-0.1:100的免疫增强剂份和发酵料混合均匀，经造粒机造粒，即得饲料。该饲料中各成分起到相互增益的作用，能够提高罗非鱼的免疫力和抗应激能力，提高对病害的抵抗力，促进罗非鱼生长，从而提高罗非鱼鱼苗全周期养殖的成活率，提高了罗非鱼养殖的效益，且该饲料用免疫增强剂代替抗生素，无毒副作用、无残留和无抗药性。
作为优选，免疫增强剂制备用多孔淀粉的制备方法为：按重量比为1:4-4.5将玉米淀粉溶于pH为4.8-5.5的苹果酸-磷酸氢二钠缓冲溶液中，加入复合酶后于45-55℃下酶解，反应5-7h后调节pH至2.8-3.3反应10-20min使酶失活，再中和溶液中的盐酸，反应完成后，溶液经真空抽滤，淀粉用去离子水洗涤2-3次后置于40-50℃下干燥，粉碎后过50-100目筛，即得到多孔淀粉。该制备方法先通过玉米淀粉颗粒本身的孔洞或者对易水解区域进行水解，进入淀粉颗粒内部，然后又从内部向外开始水解，减弱淀粉颗粒结构，最终使淀粉颗粒破碎，使得淀粉无定形区和半结晶区结构均发生改变，增加淀粉的位点，提高包埋率。
进一步优选，多孔淀粉的制备方法中苹果酸中D-苹果酸和L-苹果酸的比例为48-53:1。苹果酸中D-苹果酸和L-苹果酸的特殊比例可以破坏淀粉分子表面的水化膜，并打断淀粉分子中的1,4-糖苷键，破坏颗粒中的螺旋结构，从而使得它能有效促进淀粉的水解，使得淀粉形成蜂窝状的多孔结构，增加表面积大，且能对多孔淀粉进行化学改性，改变其吸附效果，对黄豆苷元产生更为有效的截留保护作用，提高包埋率，进而提高饲料添加剂的使用效果，延长饲料添加剂的药效。
作为优选，免疫增强剂制备用中草药制剂的制备方法为按固液比为1:10-15（g/mL）向中草药粗粉中加入57-68%的乙醇溶液，浸泡25-35min，再加入中草药粗粉重量的0.071-0.078%的柠烯，然后在转速为7000-10000r/min、磨齿间隙为20-50μm的条件下湿法超微粉碎10-20min，过滤，滤液喷雾干燥即得中草药制剂。该步骤能提高中草药的细胞破壁率，使得细胞内功能成分的溶出具有扩散阻力小、溶出路径短、溶出面积大的优点，使粉碎与提取一步完成，大大提高功能成分的提取率，同时免去加热，从而有效能避免功能成分的结构被破坏，提高功能成分的活性及药效，具有激活罗非鱼的免疫系统、增强机体免疫力、促进生长发育、降低血脂、保护肝脏、增强体质和抗应激能力等作用。
进一步优选，中草药制剂的制备方法中柠烯中左旋柠烯和右旋柠烯的比例为1:3.3-3.5。柠烯中左旋柠烯和右旋柠烯的特殊存在，使得到的中草药制剂有特殊的香味，能够满足罗非鱼的嗅觉刺激，可提高罗非鱼的食欲和摄食量，具有较好的诱食效果；还能提高中草药制剂的分散性和流动性，保证饲料添加剂能够均匀分散于饲料中，提高添加剂的利用率和效果。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）本发明饲料的制备方法简单可行，免疫增强剂的效果好，生产成本较低，制得的饲料能够提高罗非鱼的免疫力和抗应激能力，提高对病害的抵抗力，促进罗非鱼生长，提高了罗非鱼养殖的效益；2）该饲料用免疫增强剂具有较好的分散性和流动性，使得饲料添加剂能够均匀分散于饲料中，可提高罗非鱼的食欲和摄食量，较小剂量即能够显著提高罗非鱼的机体免疫能力与营养水平、增强罗非鱼的抗病能力，提高饲料利用率；3）本发明制备方法制得的中草药制剂有特殊的香味，可提高罗非鱼的食欲和摄食量，还能保证饲料添加剂能够均匀分散于饲料中，提高添加剂的利用率和效果；4）本发明制备方法对黄豆苷元进行包埋处理，不仅可以提高黄豆苷元在水体中的分散均匀性，提高添加剂的利用率和效果，而且可以对黄豆苷元有着良好地保护和缓释效果，延长饲料添加剂的药效。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
促生长罗非鱼饲料的制备方法，包括免疫增强剂制备、发酵料制备、饲料制备，其具体步骤为：
1）免疫增强剂制备：按重量份取中草药制剂30份、果寡糖10份、甘露聚糖酶1份、用多孔淀粉包埋处理后的的黄豆苷元30份，搅拌均匀，即得免疫增强剂，该免疫增强剂具有较好的分散性和流动性，使得饲料添加剂能够均匀分散于饲料中，可提高罗非鱼的食欲和摄食量，较小剂量即能够显著提高罗非鱼的机体免疫能力与营养水平、增强罗非鱼的抗病能力，提高饲料利用率，节约饲料资源，降低罗非鱼饲养成本，能代替抗生素，无毒副作用、无残留和无抗药性；
2）发酵料制备：按重量份取玉米10份、麸皮30份、玉米糖渣15份、豆粕15份、骨粉1份，混合均匀，经超微粉碎机粉碎至300目，然后均匀喷洒上混合菌种，再装入密封容器内，常温密封发酵，即得发酵料，该步骤采用简单的发酵工艺即可使得光合细菌、芽孢杆菌与超微粉实现完全发酵，从而发挥微生物活性，实现提高原料利用率和消化吸收率，保护罗非鱼肝脏，促进肠道细菌平衡等作用，且制得的饲料投入池塘后如果不能被罗非鱼摄食，吸附在饲料中的光合细菌和芽孢杆菌将会继续繁殖，将饲料有效分解，以减少对养殖水环境的污染；
3）饲料制备：将重量比为0.01:100的免疫增强剂份和发酵料混合均匀，经造粒机造粒，即得饲料，该饲料中各成分起到相互增益的作用，能够提高罗非鱼的免疫力和抗应激能力，提高对病害的抵抗力，促进罗非鱼生长，从而提高罗非鱼鱼苗全周期养殖的成活率，提高了罗非鱼养殖的效益，且该饲料用免疫增强剂代替抗生素，无毒副作用、无残留和无抗药性。
免疫增强剂制备用多孔淀粉的制备方法为：按重量比为1:4.5将玉米淀粉溶于pH为4.8的苹果酸-磷酸氢二钠缓冲溶液中，加入复合酶后于55℃下酶解，反应5h后调节pH至3.3反应10min使酶失活，再中和溶液中的盐酸，反应完成后，溶液经真空抽滤，淀粉用去离子水洗涤3次后置于40℃下干燥，粉碎后过100目筛，即得到多孔淀粉。该制备方法先通过玉米淀粉颗粒本身的孔洞或者对易水解区域进行水解，进入淀粉颗粒内部，然后又从内部向外开始水解，减弱淀粉颗粒结构，最终使淀粉颗粒破碎，使得淀粉无定形区和半结晶区结构均发生改变，增加淀粉的位点，提高包埋率。
上述多孔淀粉的制备方法中苹果酸中D-苹果酸和L-苹果酸的比例为48:1。苹果酸中D-苹果酸和L-苹果酸的特殊比例可以破坏淀粉分子表面的水化膜，并打断淀粉分子中的1,4-糖苷键，破坏颗粒中的螺旋结构，从而使得它能有效促进淀粉的水解，使得淀粉形成蜂窝状的多孔结构，增加表面积大，且能对多孔淀粉进行化学改性，改变其吸附效果，对黄豆苷元产生更为有效的截留保护作用，提高包埋率，进而提高饲料添加剂的使用效果，延长饲料添加剂的药效。
免疫增强剂制备用中草药制剂的制备方法为按固液比为1:15（g/mL）向中草药粗粉中加入57%的乙醇溶液，浸泡35min，再加入中草药粗粉重量的0.071%的柠烯，然后在转速为10000r/min、磨齿间隙为20μm的条件下湿法超微粉碎20min，过滤，滤液喷雾干燥即得中草药制剂。该步骤能提高中草药的细胞破壁率，使得细胞内功能成分的溶出具有扩散阻力小、溶出路径短、溶出面积大的优点，使粉碎与提取一步完成，大大提高功能成分的提取率，同时免去加热，从而有效能避免功能成分的结构被破坏，提高功能成分的活性及药效，具有激活罗非鱼的免疫系统、增强机体免疫力、促进生长发育、降低血脂、保护肝脏、增强体质和抗应激能力等作用。
上述中草药制剂的制备方法中柠烯中左旋柠烯和右旋柠烯的比例为1:3.3。柠烯中左旋柠烯和右旋柠烯的特殊存在，使得到的中草药制剂有特殊的香味，能够满足罗非鱼的嗅觉刺激，可提高罗非鱼的食欲和摄食量，具有较好的诱食效果；还能提高中草药制剂的分散性和流动性，保证饲料添加剂能够均匀分散于饲料中，提高添加剂的利用率和效果。
实施例2：
促生长罗非鱼饲料的制备方法，包括免疫增强剂制备、发酵料制备、饲料制备，其具体步骤为：
1）免疫增强剂制备：按重量份取中草药制剂45份、果寡糖8份、甘露聚糖酶1.5份、用多孔淀粉包埋处理后的的黄豆苷元20份，搅拌均匀，即得免疫增强剂；
2）发酵料制备：按重量份取玉米20份、麸皮20份、玉米糖渣20份、豆粕10份、骨粉3份，混合均匀，经超微粉碎机粉碎至300目，然后均匀喷洒上混合菌种，再装入密封容器内，常温密封发酵，即得发酵料；
3）饲料制备：将重量比为0.05:100的免疫增强剂份和发酵料混合均匀，经造粒机造粒，即得饲料。
免疫增强剂制备用多孔淀粉的制备方法为：按重量比为1:4.2将玉米淀粉溶于pH为5.0的苹果酸-磷酸氢二钠缓冲溶液中，加入复合酶后于50℃下酶解，反应6h后调节pH至3.0反应15min使酶失活，再中和溶液中的盐酸，反应完成后，溶液经真空抽滤，淀粉用去离子水洗涤2次后置于45℃下干燥，粉碎后过80目筛，即得到多孔淀粉。上述多孔淀粉的制备方法中苹果酸中D-苹果酸和L-苹果酸的比例为50:1。
免疫增强剂制备用中草药制剂的制备方法为按固液比为1:12（g/mL）向中草药粗粉中加入62%的乙醇溶液，浸泡30min，再加入中草药粗粉重量的0.075%的柠烯，然后在转速为8000r/min、磨齿间隙为35μm的条件下湿法超微粉碎15min，过滤，滤液喷雾干燥即得中草药制剂。上述中草药制剂的制备方法中柠烯中左旋柠烯和右旋柠烯的比例为1:3.4。
实施例3：
促生长罗非鱼饲料的制备方法，包括免疫增强剂制备、发酵料制备、饲料制备，其具体步骤为：
1）免疫增强剂制备：按重量份取中草药制剂60份、果寡糖2份、甘露聚糖酶2份、用多孔淀粉包埋处理后的的黄豆苷元10份，搅拌均匀，即得免疫增强剂；
2）发酵料制备：按重量份取玉米30份、麸皮10份、玉米糖渣22份、豆粕5份、骨粉5份，混合均匀，经超微粉碎机粉碎至300目，然后均匀喷洒上混合菌种，再装入密封容器内，常温密封发酵，即得发酵料；
3）饲料制备：将重量比为0.1:100的免疫增强剂份和发酵料混合均匀，经造粒机造粒，即得饲料。
免疫增强剂制备用多孔淀粉的制备方法为：按重量比为1:4将玉米淀粉溶于pH为5.5的苹果酸-磷酸氢二钠缓冲溶液中，加入复合酶后于45℃下酶解，反应7h后调节pH至2.8反应20min使酶失活，再中和溶液中的盐酸，反应完成后，溶液经真空抽滤，淀粉用去离子水洗涤2次后置于50℃下干燥，粉碎后过50目筛，即得到多孔淀粉。上述多孔淀粉的制备方法中苹果酸中D-苹果酸和L-苹果酸的比例为53:1。
免疫增强剂制备用中草药制剂的制备方法为按固液比为1:10（g/mL）向中草药粗粉中加入68%的乙醇溶液，浸泡25min，再加入中草药粗粉重量的0.078%的柠烯，然后在转速为7000r/min、磨齿间隙为50μm的条件下湿法超微粉碎10min，过滤，滤液喷雾干燥即得中草药制剂。上述中草药制剂的制备方法中柠烯中左旋柠烯和右旋柠烯的比例为1:3.5。
实施例4：
促生长罗非鱼饲料的制备方法，包括发酵料制备、饲料制备，其具体步骤为：按重量份取玉米20份、麸皮20份、玉米糖渣20份、豆粕10份、骨粉3份，混合均匀，经超微粉碎机粉碎至300目，然后均匀喷洒上混合菌种，再装入密封容器内，常温密封发酵，即得发酵料，发酵料经造粒机造粒，即得饲料。
实施例5：
喂养试验
养殖品种：1克左右的罗非鱼稚鱼2000条，随机分配为五组：网箱1、网箱2、网箱3、网箱4，各组总重相当，每组网箱总放养罗非鱼稚鱼500条；
养殖条件：环境因素、化学因素和生物因素基本相同的同一水域的网箱；
养殖管理：其它条件基本相同，所不同的只是网箱1每天投喂实施例1产品；网箱2每天投喂实施例2产品；网箱3每天投喂实施例3产品；网箱4每天投喂实施例4产品。
结果比较：养殖实验持续2个月，然后计算罗非鱼的成活条数、成活率和免疫保护率，免疫保护率=（1-实验组死亡率/对照组死亡率）×100%，实验结果如表1所示；
表1：饲料在养殖中的应用效果
类别 成活条数（条） 成活率（%） 免疫保护率（%）
网箱1 487 97.4 87
网箱2 490 98 90
网箱3 495 99 95
网箱4 400 80 0
由表1可知，网箱1、2、3罗非鱼的病害发生率显著下降，网箱1、2、3的成活率远远高于网箱4，表明本发明饲料能增强罗非鱼的免疫力和防病抗病能力，促进罗非鱼的生长。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.促生长罗非鱼饲料的制备方法，包括免疫增强剂制备、发酵料制备、饲料制备，其特征在于：所述免疫增强剂制备步骤为：取中草药制剂、果寡糖、甘露聚糖酶和用多孔淀粉包埋处理后的黄豆苷元，搅拌均匀，即得免疫增强剂；
所述多孔淀粉的制备方法为：将玉米淀粉溶于苹果酸-磷酸氢二钠缓冲溶液中，加入复合酶后酶解，酶解结束使酶失活，溶液经真空抽滤，淀粉洗涤后干燥，粉碎后过筛，即得到多孔淀粉。
2.根据权利要求1所述的促生长罗非鱼饲料的制备方法，其特征在于：所述免疫增强剂中原料的重量份为：中草药制剂30-60份、果寡糖2-10份、甘露聚糖酶1-2份、包埋处理后的黄豆苷元10-30份。
3.根据权利要求1所述的促生长罗非鱼饲料的制备方法，其特征在于：所述玉米淀粉和苹果酸-磷酸氢二钠缓冲溶液的重量比为1:4-4.5，所述苹果酸-磷酸氢二钠缓冲溶液的pH为4.8-5.5。
4.根据权利要求1所述的促生长罗非鱼饲料的制备方法，其特征在于：所述多孔淀粉的制备方法中苹果酸中D-苹果酸和L-苹果酸的比例为48-53:1。
5.根据权利要求1所述的促生长罗非鱼饲料的制备方法，其特征在于：所述复合酶为复合比为1:2.7-3.2的α-淀粉酶和葡萄糖糖化酶，加酶量为0.05-0.2×10-2mL/g，酶解温度为45-55℃，时间为5-7h。
6.根据权利要求1所述的促生长罗非鱼饲料的制备方法，其特征在于：所述中草药制剂的制备方法为：按固液比为1:10-15（g/mL）向中草药粗粉中加入57-68%的乙醇溶液，浸泡25-35min，再加入中草药粗粉重量的0.071-0.078%的柠烯，然后在转速为7000-10000r/min、磨齿间隙为20-50μm的条件下湿法超微粉碎10-20min，过滤，滤液喷雾干燥即得中草药制剂。
7.根据权利要求6所述的促生长罗非鱼饲料的制备方法，其特征在于：所述柠烯中左旋柠烯和右旋柠烯的比例为1:3.3-3.5。
8.根据权利要求1所述的促生长罗非鱼饲料的制备方法，其特征在于：所述发酵料制备为：按重量份取玉米10-30份、麸皮10-30份、玉米糖渣15-22份、豆粕5-15份、骨粉1-5份，混合均匀，经超微粉碎机粉碎至300目，然后均匀喷洒上混合菌种，再装入密封容器内，常温密封发酵，即得发酵料。
9.根据权利要求1所述的促生长罗非鱼饲料的制备方法，其特征在于：所述饲料制备为：将重量比为0.01-0.1:100的免疫增强剂份和发酵料混合均匀，经造粒机造粒，即得饲料。
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