CN109089740A - 一种生产还原液体菌种的方法及装置 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种生产还原液体菌种的方法,该方法包括培养基制作、生产装置制作、灭菌、接种、恒温培养、还原液体菌种制作和装瓶包装几个步骤。本发明还公开了一种生产还原液体菌种的装置,包括装有无菌水的细口玻璃瓶、装有还原液体菌种培养基双层无底聚丙烯栽培袋和海绵双套环菌种盖。应用本发明的技术方案生产还原液体菌种,不使用发酵罐液体培养,成本低、技术简单、操作简便、无需专业技术人员、便于向无经验的小型农户推广。同时不使用发酵罐也简化了接种、固体菌种液化等操作,降低了接触杂菌的可能,污染率低,提高了菌种培养的成功率。
Description
技术领域
本发明涉及一种菌种的生产方法及装置,尤其涉及一种不使用发酵罐的食用菌还原液体菌种的生产方法及装置。
背景技术
还原型液体菌种是由日本起源生物技术株式会社于2003年开发的一种专利技术,其特点是把特殊加工的块状的菌丝打碎后,用无菌水稀释成的液体菌种后进行接种。目前还原型液体菌种的生产大都需要使用发酵罐,而发酵罐的设计必须能够提供适宜于菌丝体生长和产生产物的多种条件,从而促进菌丝体的新陈代谢,使它能在低消耗的条件下获得较多的产物。这其中就包括保持适宜的温度、能用冷却水带走发酵产生的热量、能使通入的无菌空气均匀的分布,能及时排放代谢产物和对发酵过程进行监测和调控等。采用发酵罐发酵,要掌握培养基装量、pH调整、温度、接种量、通气量、罐压、发酵周期和消泡剂的使用等,操作相对复杂、专业性强,同时成本也比较高,因此不适用于向小型农户推广。
发明内容
为了解决上述技术问题,本发明提供了一种以一种成功率高,操作简单且成本低廉的还原液体菌种生产方法,这种生产还原液体菌种的方法,其特殊之处在于,包含如下步骤:
(1)制备还原液体菌种培养基,培养基的组成为质量分数25%~30%的玉米粉,质量分数25%~30%的麸皮或木屑,余下为水;先将玉米粉与麸皮或木屑混合均匀,再加水混合;
(2)制作制备还原液体菌种生产装置,取细口玻璃瓶,向其中加入1.5kg~1.8kg无菌水,取双层无底聚丙烯栽培袋,将双层无底聚丙烯栽培袋的一端套在所述细口玻璃瓶的瓶口,用耐高温固定绳在瓶口下侧将双层无底聚丙烯栽培袋扎紧,然后再用耐高温固定绳将瓶口上方的双层无底聚丙烯栽培袋留有缝隙的扎上,留有的缝隙应保证双层无底聚丙烯栽培袋装入培养基后培养基不会掉出,同时确保气体和液体通过;将0.3kg~0.4kg还原液体菌种培养基通过双层无底聚丙烯栽培袋另一端的开口装入双层无底聚丙烯栽培袋,将海绵双套环菌种盖固定于双层无底聚丙烯栽培袋开口端;
(3)对还原液体菌种生产装置进行灭菌,在灭菌过程中,将双层无底聚丙烯栽培袋一端的海绵双套环菌种盖固定,保持其为垂直向上状态;
(4)灭菌结束后,将海绵双套环菌种盖的透气盖拆下,将所要生产的食用菌固体菌种或液体菌种接入双层无底聚丙烯栽培袋内的培养基中;接种完成后盖好透气盖,将还原液体菌种生产装置送至培养室,26℃恒温培养15天~20天;
(5)恒温培养结束后,双层无底聚丙烯栽培袋内长满菌种,用耐高温固定绳将海绵双套环菌种盖下方的双层无底聚丙烯栽培袋扎紧,压碎双层无底聚丙烯栽培袋中的菌种,将细口玻璃瓶瓶口上方的耐高温固定绳解开,将细口玻璃瓶内的无菌水倒入双层无底聚丙烯栽培袋中,将无菌水和菌种搅拌成还原液体菌种,把混合好的还原液体菌种倒入回细口玻璃瓶中;
(6)解开细口玻璃瓶瓶口下侧的耐高温固定绳,取下双层无底聚丙烯栽培袋;用灭菌的棉花或海绵擦去粘在瓶口的菌液和残渣;将灭菌的细口玻璃瓶盖盖上,还原液体菌种制作完成;
以上操作均需在接种箱或离子风机前操作,确保无菌。
进一步地,如步骤(4)中采用液体菌种接种,步骤(1)中所述培养基的组成为质量分数30%的玉米粉,质量分数30%的麸皮,余下为水。
进一步地,如步骤(4)中采用固体菌种接种,步骤(1)中所述培养基的组成为质量分数25%的玉米粉,质量分数25%的木屑,余下为水。
进一步地,在步骤(1)中所制备的培养基中加入质量分数0.1%的多菌灵杀菌剂。
进一步地,在步骤(2)中所述无菌水中加入质量分数0.1%的多菌灵杀菌剂。
进一步地,步骤(2)中所述双层无底聚丙烯的长度为45cm,宽度为23cm,单层厚度为0.005cm。
进一步地,步骤(2)中所述耐高温固定绳为尼龙塑料绳。
进一步地,步骤(3)中所述灭菌过程结束后,将双层无底聚丙烯栽培袋固定有海绵双套环菌种盖的一端吊起,使培养基中多余水分流回玻璃瓶中。
进一步地,在步骤(4)中所述固体菌种或液体菌种中加入菌丝复壮剂,并在恒温培养结束后,将菌丝压碎再培养3天~5天。
本发明提供了一种生产还原液体菌种的装置,包括装有无菌水的细口玻璃瓶、装有还原液体菌种培养基双层无底聚丙烯栽培袋和海绵双套环菌种盖,其特殊之处在于,双层无底聚丙烯栽培袋的一端套在所述细口玻璃瓶的瓶口,用耐高温固定绳在瓶口下侧将双层无底聚丙烯栽培袋扎紧,用耐高温固定绳将在瓶口上方的双层无底聚丙烯栽培袋留有缝隙地扎上,缝隙应保证双层无底聚丙烯栽培袋装入培养基后,培养基不会掉出,同时确保气体和液体通过,双层无底聚丙烯栽培袋的另一端与海绵双套环菌种盖相连。
本发明生产还原液体菌种采用的是固体培养的方式,使用简单的装置代替目前常用发酵罐进行培养。不使用发酵罐也就避免了调整pH值、温度、接种量、通气量、罐压、发酵周期和消泡剂的使用等复杂的操作,使技术变得简单易行。在降低成本的同时,简化操作、无需专业技术人员,因此更容易向无经验的小型农户推广。另一方面不使用发酵罐也简化了接种、固体菌种液化等操作,降低了接触杂菌的可能性,污染率低,大大提高了菌种培养的成功率,培养成功率可以达到98%以上。在透明的栽培袋中进行培养,也可以更直观的观察菌种的培养情况,不需要用检测装置进行复杂的检测,进一步简化了操作、降低生产成本。
附图说明
构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解,本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明,并不构成对本发明的不当限定。
图1为本发明一种生产还原液体菌种的方法流程图;
图2为本发明一种生产还原液体菌种的装置示意图。
图中:1、细口玻璃瓶,101、细口玻璃瓶瓶口,102、无菌水,2、双层无底聚丙烯栽培袋,201、培养基,3、海绵双套环菌种盖,301、透气盖,4、瓶口下侧耐高温固定绳,5、瓶口上方耐高温固定绳。
具体实施方式
为了加深对本发明的理解,下面将结合实施例和附图对本发明作进一步详述。
图1示出了生产还原液体菌种的方法流程图。如图所示生产还原液体菌种需经过以下步骤,培养基制作、生产装置制作、灭菌、接种、恒温培养、菌丝复壮、还原液体菌种制作、装瓶包装等步骤,以上步骤均需保证无菌操作。以下实施例均采用该方法进行还原液体菌种的生产。
图2示出了生产还原液体菌种的装置示意图,如图所示该装置包括装有无菌水102的细口玻璃瓶1、装有还原液体菌种培养基201双层无底聚丙烯栽培袋2和海绵双套环菌种盖3,双层无底聚丙烯栽培袋2的一端套在所述细口玻璃瓶1的瓶口101,用耐高温固定绳4在瓶口101下侧将双层无底聚丙烯栽培袋2扎紧,用耐高温固定绳5将在瓶口101上方的双层无底聚丙烯栽培袋2留有缝隙地扎上,缝隙应保证双层无底聚丙烯栽培袋2装入培养基201后,培养基201不会掉出,同时确保气体和液体通过,双层无底聚丙烯栽培袋2的另一端与海绵双套环菌种盖3相连。以下实施例中均采用该装置进行还原菌种的生产。
实施例1
平菇还原液体菌种的生产,步骤如下:
(1)制备还原液体菌种培养基,培养基的组成30%(质量分数)的玉米粉,30%(质量分数)的麸皮,余下为水;先将玉米粉与麸皮混合均匀,再加水混合,最后加入0.1%的多菌灵杀菌剂;
(2)制作制备还原液体菌种生产装置,取细口玻璃瓶1,向其中加入1.8kg无菌水102,无菌水102中加入质量分数为0.1%的多菌灵菌杀剂,取长度为45cm,宽度为23cm,单层厚度为0.005cm的双层无底聚丙烯栽培袋2,将双层无底聚丙烯栽培袋2的一端套在所述细口玻璃瓶1的瓶口101,用耐高温固定绳4在瓶口101下侧将双层无底聚丙烯栽培袋2扎紧,然后再用耐高温固定绳5将瓶口101上方的双层无底聚丙烯栽培袋2留有缝隙地扎上,缝隙应保证双层无底聚丙烯栽培袋2装入培养基201后培养基201不会掉出,同时确保气体和液体通过;将0.35kg还原液体菌种培养基201通过双层无底聚丙烯栽培袋2另一端的开口装入双层无底聚丙烯栽培袋2;将海绵双套环菌种盖3固定于双层无底聚丙烯栽培袋2开口端;
(3)对还原液体菌种生产装置进行灭菌,在灭菌过程中,需将双层无底聚丙烯栽培袋2一端的海绵双套环菌种盖3固定,保持其为垂直向上状态;灭菌过程结束后,将双层无底聚丙烯栽培袋2海绵双套环菌种盖3一端吊起,使培养基201中多余的水分流回玻璃瓶1中;
(4)灭菌结束后,将海绵双套环菌种盖3的透气盖301拆下,将平菇液体菌种接入双层无底聚丙烯栽培袋2内的培养基201中;接种完成后盖好透气盖3,将还原液体菌种生产装置送至培养室,26℃恒温培养20天;在恒温培养结束后,将菌丝压碎再培养4天;
(5)用耐高温固定绳扎紧海绵双套环菌种盖3下面的双层无底聚丙烯栽培袋2,压碎双层无底聚丙烯栽培袋2中的菌种,将细口玻璃瓶1瓶口上侧的耐高温固定绳5解开,将细口玻璃瓶1内的无菌水101倒入双层无底聚丙烯栽培袋2中,将无菌水101和菌种搅拌成还原液体菌种,把混合好的还原液体菌种倒入回细口玻璃瓶1中;
(6)解开细口玻璃瓶1瓶口下侧的耐高温固定绳4,取下双层无底聚丙烯栽培袋2;用灭菌的棉花或海绵擦去粘在瓶口102的菌液和残渣;将灭菌的细口玻璃瓶盖盖上,平菇还原液体菌种制作完成;
以上操作均需在接种箱或离子风机前操作,确保无菌。
实施例2
香菇还原液体菌种的生产,步骤如下:
(1)制备还原液体菌种培养基,培养基的组成25%(质量分数)的玉米粉,25%(质量分数)的木屑,余下为水;先将玉米粉与麸皮混合均匀,再加水混合,最后加入0.1%的多菌灵杀菌剂;
(2)制作制备还原液体菌种生产装置,取细口玻璃瓶1,向其中加入1.6kg无菌水102,无菌水102中加入质量分数为0.1%的多菌灵菌杀剂,取长度为45cm,宽度为23cm,单层厚度为0.005cm的双层无底聚丙烯栽培袋2,将双层无底聚丙烯栽培袋2的一端套在所述细口玻璃瓶1的瓶口101,用耐高温固定绳4在瓶口101下侧将双层无底聚丙烯栽培袋2扎紧,然后再用耐高温固定绳5将瓶口101上方的双层无底聚丙烯栽培袋2留有缝隙的扎上,缝隙应保证双层无底聚丙烯栽培袋2装入培养基201后培养基201不会掉出,同时确保气体和液体通过;将0.38kg还原液体菌种培养基201通过双层无底聚丙烯栽培袋2另一端的开口装入双层无底聚丙烯栽培袋2;将海绵双套环菌种盖3按固定于双层无底聚丙烯栽培袋2开口端;
(3)对还原液体菌种生产装置进行灭菌,在灭菌过程中,需将双层无底聚丙烯栽培袋2一端的海绵双套环菌种盖3固定,保持其为垂直向上状态;灭菌过程结束后,将栽培袋2海绵双套环菌种盖3一端吊起,使培养基201中多余水分流回玻璃瓶1中;
(4)灭菌结束后,将海绵双套环菌种盖3的透气盖301拆下,将香菇固体菌种接入双层无底聚丙烯栽培袋2内的培养基201中;接种完成后盖好透气盖3,将还原液体菌种生产装置送至培养室,26℃恒温培养18天;
(5)用耐高温固定绳扎紧海绵双套环菌种盖3下面的双层无底聚丙烯栽培袋2,压碎双层无底聚丙烯栽培袋2中的菌种,将细口玻璃瓶1瓶口上方的耐高温固定绳5解开,将细口玻璃瓶1内的无菌水101倒入双层无底聚丙烯栽培袋2中,将无菌水101和菌种搅拌成还原液体菌种,把混合好的还原液体菌种倒入回细口玻璃瓶1中;
(6)解开细口玻璃瓶1瓶口下侧的耐高温固定绳4,取下双层无底聚丙烯栽培袋2;用灭菌的棉花或海绵擦去粘在瓶口102的菌液和残渣;将灭菌的细口玻璃瓶盖盖上,香菇还原液体菌种制作完成;
以上操作均需在接种箱或离子风机前操作,确保无菌。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种生产还原液体菌种的方法,其特征在于,包含如下步骤:
(1)制备还原液体菌种培养基,培养基的组成为质量分数25%~30%的玉米粉,质量分数25%~30%的麸皮或木屑,余下为水;先将玉米粉与麸皮或木屑混合均匀,再加水混合;
(2)制作制备还原液体菌种生产装置,取细口玻璃瓶,向其中加入1.5kg~1.8kg无菌水,取双层无底聚丙烯栽培袋,将双层无底聚丙烯栽培袋的一端套在所述细口玻璃瓶的瓶口,用耐高温固定绳在瓶口下侧将双层无底聚丙烯栽培袋扎紧,然后再用耐高温固定绳将瓶口上方的双层无底聚丙烯栽培袋留有缝隙的扎上,留有的缝隙应保证双层无底聚丙烯栽培袋装入培养基后培养基不会掉出,同时确保气体和液体通过;将0.3kg~0.4kg还原液体菌种培养基通过双层无底聚丙烯栽培袋另一端的开口装入双层无底聚丙烯栽培袋,将海绵双套环菌种盖固定于双层无底聚丙烯栽培袋开口端;
(3)对还原液体菌种生产装置进行灭菌,在灭菌过程中,将双层无底聚丙烯栽培袋一端的海绵双套环菌种盖固定,保持其为垂直向上状态;
(4)灭菌结束后,将海绵双套环菌种盖的透气盖拆下,将所要生产的食用菌固体菌种或液体菌种接入双层无底聚丙烯栽培袋内的培养基中;接种完成后盖好透气盖,将还原液体菌种生产装置送至培养室,26℃恒温培养15天~20天;
(5)恒温培养结束后,双层无底聚丙烯栽培袋内长满菌种,用耐高温固定绳将海绵双套环菌种盖下方的双层无底聚丙烯栽培袋扎紧,压碎双层无底聚丙烯栽培袋中的菌种,将细口玻璃瓶瓶口上方的耐高温固定绳解开,将细口玻璃瓶内的无菌水倒入双层无底聚丙烯栽培袋中,将无菌水和菌种搅拌成还原液体菌种,把混合好的还原液体菌种倒入回细口玻璃瓶中;
(6)解开细口玻璃瓶瓶口下侧的耐高温固定绳,取下双层无底聚丙烯栽培袋;用灭菌的棉花或海绵擦去粘在瓶口的菌液和残渣;将灭菌的细口玻璃瓶盖盖上,还原液体菌种制作完成;
以上操作均需在接种箱或离子风机前操作,确保无菌。
2.根据权利要求1所述生产还原液体菌种的方法,其特征在于,如步骤(4)中采用液体菌种接种,步骤(1)中所述培养基的组成为质量分数30%的玉米粉,质量分数30%的麸皮,余下为水。
3.根据权利要求1所述生产还原液体菌种的方法,其特征在于,如步骤(4)中采用固体菌种接种,步骤(1)中所述培养基的组成为质量分数25%的玉米粉,质量分数25%的木屑,余下为水。
4.根据权利要求1所述生产还原液体菌种的方法,其特征在于,在步骤(1)中所制备的培养基中加入质量分数0.1%的多菌灵杀菌剂。
5.根据权利要求1所述生产还原液体菌种的方法,其特征在于,在步骤(2)中所述无菌水中加入质量分数0.1%的多菌灵杀菌剂。
6.根据权利要求1所述生产还原液体菌种的方法,其特征在于,步骤(2)中所述双层无底聚丙烯的长度为45cm,宽度为23cm,单层厚度为0.005cm。
7.根据权利要求1所述生产还原液体菌种的方法,其特征在于,步骤(2)中所述耐高温固定绳为尼龙塑料绳。
8.根据权利要求1所述生产还原液体菌种的方法,其特征在于,步骤(3)中所述灭菌过程结束后,将双层无底聚丙烯栽培袋固定有海绵双套环菌种盖的一端吊起,使培养基中多余水分流回玻璃瓶中。
9.根据权利要求1所述生产还原液体菌种的方法,其特征在于,在步骤(4)中所述固体菌种或液体菌种中加入菌丝复壮剂,并在恒温培养结束后,将菌丝压碎再培养3天~5天。
10.一种生产还原液体菌种的装置,其结构包括装有无菌水的细口玻璃瓶、装有还原液体菌种培养基双层无底聚丙烯栽培袋和海绵双套环菌种盖,其特征在于,双层无底聚丙烯栽培袋的一端套在所述细口玻璃瓶的瓶口,用耐高温固定绳在瓶口下侧将双层无底聚丙烯栽培袋扎紧,用耐高温固定绳将在瓶口上方的双层无底聚丙烯栽培袋留有缝隙地扎上,缝隙应保证双层无底聚丙烯栽培袋装入培养基后,培养基不会掉出,同时确保气体和液体通过,栽培袋的另一端与海绵双套环菌种盖相连。
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TA01 | Transfer of patent application right | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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