CN109006466A - 一种提高旱柳人工控制杂交杂种获得率的方法 - Google Patents

Abstract

本公开涉及一种提高旱柳人工控制杂交杂种获得率的方法,包括：(1)母株选择；(2)雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的雄株做父本，雄花枝要求直径0.5‑0.8cm，长度50‑80cm，疏掉1/3弱小雄花芽；(3)雌花枝准备：雌花枝长0.7‑1.0m，直径1.0‑2.0cm；(4)花枝培养；(5)花粉收集；(6)授粉；(7)授粉后的管理；(8)杂种收集。本公开能够有效克服柳树枝条细弱的特点，通过疏花提高花粉质量，通过疏枝疏花保证杂种发育周期内的养分供应，促进杂种成熟，提高杂种成熟度和获得率，杂种获得率提高20％以上，发芽率提高30％以上，育种成功率高。

Description

一种提高旱柳人工控制杂交杂种获得率的方法

技术领域

本公开涉及树木杂交育种技术领域，具体为一种提高旱柳人工控制杂交杂种获得率的杂交育种方法。

背景技术

这里的陈述仅提供与本公开有关的背景信息，而不必然构成现有技术。

柳树种间和种内遗传变异较大，且杂交亲和力高，因此杂交育种是培育柳树新品种的主要手段。柳树杂交育种一般采用温室切枝水培杂交和室外大树杂交两种手段。温室切枝水培杂交的优点是容易进行温湿度控制，能够人工控制花期开放的早晚，便于父母本花期相遇，可以较早的开展杂交工作，并且操作容易，不容易受外界人为和天气因素的影响。缺点是大部分的柳树枝条细弱，枝条上的花序数量较多，枝条中的营养物质难以达到杂种发育成熟的要求，枝条容易抽干，造成杂种败育或者成熟度不高，降低杂种的获得量和发芽率，导致育种失败。

发明内容

本公开在于提供一种改进的旱柳温室切枝水培人工控制杂交方法，该方法能够充分利用旱柳雌雄花枝枝条中的营养物质，提高花粉质量，保证杂种发育周期内的养分供应，促进杂种成熟，提高杂种成熟度和获得率，杂种获得率提高20％以上，发芽率提高30％以上，育种成功率高。

本公开具体采用以下技术方案：

一种提高旱柳人工控制杂交杂种获得率的方法,包括以下步骤：

步骤一、母株选择：选择4-6年生旱柳孤立木或者片林中的林缘木做母本，母株要求生长健壮、无病虫害，形态发育自然良好；

步骤二、雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的雄株做父本，于12月30日后至第二年1月30日前将雄花枝剪下，雄花枝要求直径0.5-0.8cm，长度50-80cm，每一个雄花枝按照雄花芽的大小，从小到大疏掉1/3弱小雄花芽；

步骤三、雌花枝准备：于雄花枝截取后3-5天将选好的旱柳健壮雌花枝从母株上剪下，雌花枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm；若花枝上有侧枝，均匀疏掉2/3侧枝，每一个侧枝上疏掉枝条下部2/3的雌花芽；

步骤四、花枝培养：将雌雄花枝分别隔离，进行水培；

步骤五、花粉收集：待雄花序开放，花粉囊开裂后，收集花粉；

步骤六、授粉：待雌花枝的柱头有透明粘液分泌时，即可进行授粉；

步骤七、授粉后的管理：控制合适的室温和湿度；

步骤八、杂种收集：授粉后20-30天杂种成熟即可收集。

与本发明人知晓的相关技术相比，本公开中的一个技术方案具有如下有益效果：

本公开的技术方案能够有效克服柳树枝条细弱的特点，通过特定疏花方法提高花粉质量，通过特定疏枝疏花方法保证杂种发育周期内的养分供应，促进杂种成熟，提高杂种成熟度和获得率，杂种获得率提高20％以上，发芽率提高30％以上，育种成功率高。

本公开的杂交育种技术和需要的育苗设施简单，能够为育种者所掌握。

具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本公开提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本公开的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作和/或它们的组合。

术语解释：

孤立木：生长在空旷地上的单株树木。

片林：多个树木组成的成片林分。

林缘木：片林周围的树木。

正如背景技术所介绍的，发明人所知晓的旱柳人工控制杂交技术存在一定的不足，为了解决如上的技术问题，一种提高旱柳人工控制杂交杂种获得率的方法，包括以下步骤：

步骤一、母株选择：选择4-6年生旱柳孤立木或者片林中的林缘木做母本，母株要求生长健壮、无病虫害，形态发育自然良好；

步骤二、雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的雄株做父本，于12月30日后至第二年1月30日前将雄花枝剪下，雄花枝要求直径0.5-0.8cm，长度50-80cm，每一个雄花枝按照雄花芽的大小，从小到大疏掉1/3弱小雄花芽；

步骤三、雌花枝准备：于雄花枝截取后3-5天将选好的旱柳健壮雌花枝从母株上剪下，雌花枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm；

步骤四、花枝培养：将雌雄花枝分别隔离，进行水培；

步骤五、花粉收集：待雄花序开放，花粉囊开裂后，收集花粉；

步骤六、授粉：待雌花枝的柱头有透明粘液分泌时，即可进行授粉；

步骤七、授粉后的管理：控制合适的室温和湿度；

步骤八、杂种收集：授粉后20-30天杂种成熟即可收集。

在本公开的一个或一些实施方式中，选择4-6年生旱柳孤立木或者片林中的林缘木做母本的优势是：由于孤立木或者林缘木较之于林分中的其它树木能够更好的接收阳光和土壤养分，雌花不仅发育好，而且数量较多，能够提高杂种结实率和成熟度。

步骤二中，所述雄花枝上的雄花芽数量不定，视雄花枝的来源、花枝粗细和长短以及品种而定。在本公开的一个或一些实施方式中，所述雄花枝上具有10-15个雄花芽。

在本公开的一个或一些实施方式中，步骤二中，所述雄株为旱柳、爆竹柳或白柳等。

在本公开的一个或一些实施方式中，步骤二中，旱柳雄花芽大小一般为2.0╳0.8cm，低于0.8╳0.3cm的为弱小雄花芽。花芽的大小一般代表花芽的质量，花芽越大，花粉数量越多，花粉活力越大。

在本公开的一个或一些实施方式中，雌花枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm，太细的枝条雌花较弱，不利于杂交成功，太粗的枝条上没有雌花或者雌花较少。

将雌花枝晚于雄花枝3-5天进行水培，是防止雌花早于雄花开放，造成雌雄花期不遇，杂交失败。

步骤三中，所述雌花枝上的雌花芽数量不定，视雌花枝的来源、花枝粗细和长短以及品种而定。在本公开的一个或一些实施方式中，所述雌花枝上具有8-10个雌花芽。

在本公开的一个或一些实施方式中，步骤四中，水培时，在水中将花枝底部斜截。

在本公开的一个或一些实施方式中，步骤四中，水培过程中，控制温室气温20-25℃，相对湿度55～65％，进一步为60％。每隔2天换水一次，每两次换水截去花枝底部1-2cm，结合换水注意清理水桶或者水槽，保持干净卫生。

在本公开的一个或一些实施方式中，步骤五中，待雄花序开放，花粉囊开裂后，每天中午11：30～12：30(进一步为中午12点)进行花粉收集，直到每个花序的前2/3花序的花粉囊开裂完后停止收集。将收集的花粉按照树种编号，置于干燥器中进行干燥，并放入冰箱保存，保存温度1-5℃。

在本公开的一个或一些实施方式中，步骤六中，授粉选择在晴天进行，按杂交组合进行隔离授粉，用毛笔蘸干花粉涂抹于雌蕊珠头或者将花粉均匀散放于水中，利用喷壶喷洒于雌蕊珠头上。每天授粉1-2次，连续3-4天。

在本公开的一个或一些实施方式中，步骤七中，授粉后控制温室温度18-23℃，授粉后10-20天空气湿度不低于80％，后期(是指授粉20天以后)不低于60％。

在本公开的一个或一些实施方式中，步骤八中，授粉后20-30天杂种成熟，在果实由绿变黄时，在果序外套袋，防止果实成熟时带绒毛的种子飞散，待蒴果全部张开后取下装有种子的纸袋，按杂交组合分别放置。

在本公开的一个或一些实施方式中，步骤八之后还包括步骤九，杂种催芽：将收集的杂种去除附带的柳絮，取出种子，均匀放置于玻璃皿中的湿润纱布上，盖上上盖，置于温室中进行催芽，保持温室温度20-25℃。

本发明人在试验过程中发现，疏掉雄枝1/3弱小雄花芽能显著提高花粉质量，若是疏掉大于1/3雄花芽，容易把质量较好的雄花芽也去掉，同时需要较多的雄花枝一遍获得足够花粉数量进行授粉，增加劳动量。疏掉小于1/3雄花芽，获得的花粉质量不如去掉1/3弱小雄花芽，降低杂种成熟度和获得率。通过特定疏枝疏花方法保证杂种发育周期内的养分供应，促进杂种成熟，提高杂种成熟度和获得率，杂种获得率提高20％以上，发芽率提高30％以上，育种成功率高。

为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本公开的技术方案，以下将结合具体的实施例与实验例详细说明本公开的技术方案，但实验研究探索过程中并不仅仅限于以下实施例和实验例。

实施例1

步骤一、母株选择：选择6年生旱柳鲁柳6号做母本，母株生长健壮、无病虫害，形态发育自然良好。

步骤二、雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的旱柳鲁柳1号做父本，于12月25日将雄花枝剪下，共5个雄花枝，直径0.5-0.8cm，长度50-80cm，每一个雄花枝按照雄花芽的大小，从小到大疏掉1/3弱小雄花芽。旱柳雄花芽大小一般为2.0╳0.8cm，低于0.8╳0.3cm的为弱小雄花芽。

步骤三、雌花枝准备：于12月30日将选好的旱柳健壮雌花枝从母株上剪下，共10个雌花枝，枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm。均匀疏掉每个雌花枝上2/3侧枝，每一个侧枝上疏掉枝条下部2/3的雌花芽。

步骤四、花枝培养：将雌雄花枝分别隔离，置于温室水桶或者水槽中进行水培，在水中将花枝底部斜截。控制温室气温20-25℃，相对湿度60％左右。每隔2天换水一次，每两次换水截去花枝底部1-2cm，结合换水注意清理水桶或者水槽，保持干净卫生。

步骤五、花粉收集：待雄花序开放，花粉囊开裂后，每天中午12点左右进行花粉收集，直到每个花序的前2/3花序的花粉囊开裂完后停止收集。将收集的花粉按照树种编号，置于干燥器中进行干燥，并放入冰箱保存，保存温度1-5℃。

步骤六、授粉：待雌花枝的柱头有透明粘液分泌时，进行授粉。授粉在晴天进行，按杂交组合进行隔离授粉，用毛笔蘸干花粉涂抹于雌蕊珠头。每天授粉1次，连续4天。

步骤七、授粉后的管理：授粉后控制温室温度18-23℃，授粉后10-20天空气湿度不低于80％，后期不低于60％。

步骤八、杂种收集：授粉后20-30天杂种成熟，在果实由绿变黄时，在果序外套袋，防止果实成熟时带绒毛的种子飞散，待蒴果全部张开后取下装有种子的纸袋。

步骤九、杂种催芽：将收集的杂种去除附带的柳絮，取出种子，共获得杂种1256个，将杂种均匀放置于玻璃皿中的湿润纱布上，盖上上盖，置于温室中进行催芽，保持温室温度20-25℃。2天后长出子叶，3天后长出主根，发芽的种子数为981个，发芽率为78.1％。

实施例2

步骤一、母株选择：选择5年生旱柳鲁柳6号做母本，母株生长健壮、无病虫害，形态发育自然良好。

步骤二、雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的爆竹柳做父本，于12月25日将雄花枝剪下，共6个雄花枝，直径0.5-0.8cm，长度50-80cm，每一个雄花枝按照雄花芽的大小，从小到大疏掉1/3弱小雄花芽。旱柳雄花芽大小一般为2.0╳0.8cm，低于0.8╳0.3cm的为弱小雄花芽。

步骤三、雌花枝准备：于12月30日将选好的旱柳健壮雌花枝从母株上剪下，共10个雌花枝，枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm。均匀疏掉每个雌花枝上2/3侧枝，每一个侧枝上疏掉枝条下部2/3的雌花芽。

步骤四、花枝培养：将雌雄花枝分别隔离，置于温室水桶或者水槽中进行水培，在水中将花枝底部斜截。控制温室气温20-25℃，相对湿度60％左右。每隔2天换水一次，每两次换水截去花枝底部1-2cm，结合换水注意清理水桶或者水槽，保持干净卫生。

步骤五、花粉收集：待雄花序开放，花粉囊开裂后，每天中午12点左右进行花粉收集，直到每个花序的前2/3花序的花粉囊开裂完后停止收集。将收集的花粉按照树种编号，置于干燥器中进行干燥，并放入冰箱保存，保存温度1-5℃。

步骤六、授粉：待雌花枝的柱头有透明粘液分泌时，进行授粉。授粉在晴天进行，按杂交组合进行隔离授粉，用毛笔蘸干花粉涂抹于雌蕊珠头。每天授粉1次，连续4天。

步骤七、授粉后的管理：授粉后控制温室温度18-23℃，授粉后10-20天空气湿度不低于80％，后期不低于60％。

步骤八、杂种收集：授粉后20-30天杂种成熟，在果实由绿变黄时，在果序外套袋，防止果实成熟时带绒毛的种子飞散，待蒴果全部张开后取下装有种子的纸袋。

步骤九、杂种催芽：将收集的杂种去除附带的柳絮，取出种子，共获得杂种1132个，将杂种均匀放置于玻璃皿中的湿润纱布上，盖上上盖，置于温室中进行催芽，保持温室温度20-25℃。2天后长出子叶，3天后长出主根，发芽的种子数为786个，发芽率为69％。

实施例3

步骤一、母株选择：选择4年生旱柳鲁柳6号做母本，母株生长健壮、无病虫害，形态发育自然良好。

步骤二、雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的白柳做父本，于12月25日将雄花枝剪下，共7个雄花枝，直径0.5-0.8cm，长度50-80cm，每一个雄花枝按照雄花芽的大小，从小到大疏掉1/3弱小雄花芽。旱柳雄花芽大小一般为2.0╳0.8cm，低于0.8╳0.3cm的为弱小雄花芽。

步骤三、雌花枝准备：于12月30日将选好的旱柳健壮雌花枝从母株上剪下，共10个雌花枝，枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm。均匀疏掉每个雌花枝上2/3侧枝，每一个侧枝上疏掉枝条下部2/3的雌花芽。

步骤四、花枝培养：将雌雄花枝分别隔离，置于温室水桶或者水槽中进行水培，在水中将花枝底部斜截。控制温室气温20-25℃，相对湿度60％左右。每隔2天换水一次，每两次换水截去花枝底部1-2cm，结合换水注意清理水桶或者水槽，保持干净卫生。

步骤五、花粉收集：待雄花序开放，花粉囊开裂后，每天中午12点左右进行花粉收集，直到每个花序的前2/3花序的花粉囊开裂完后停止收集。将收集的花粉按照树种编号，置于干燥器中进行干燥，并放入冰箱保存，保存温度1-5℃。

步骤六、授粉：待雌花枝的柱头有透明粘液分泌时，进行授粉。授粉在晴天进行，按杂交组合进行隔离授粉，用毛笔蘸干花粉涂抹于雌蕊珠头。每天授粉1次，连续4天。

步骤七、授粉后的管理：授粉后控制温室温度18-23℃，授粉后10-20天空气湿度不低于80％，后期不低于60％。

步骤八、杂种收集：授粉后20-30天杂种成熟，在果实由绿变黄时，在果序外套袋，防止果实成熟时带绒毛的种子飞散，待蒴果全部张开后取下装有种子的纸袋。

步骤九、杂种催芽：将收集的杂种去除附带的柳絮，取出种子，共获得杂种864个，将杂种均匀放置于玻璃皿中的湿润纱布上，盖上上盖，置于温室中进行催芽，保持温室温度20-25℃。2天后长出子叶，3天后长出主根，发芽的种子数为535个，发芽率为61.9％。

实验例1

步骤一、母株选择：选择6年生旱柳鲁柳6号做母本，母株生长健壮、无病虫害，形态发育自然良好。

步骤二、雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的旱柳鲁柳1号做父本，于12月25日将雄花枝剪下，共5个雄花枝，直径0.5-0.8cm，长度50-80cm，不进行疏花。

步骤三、雌花枝准备：于12月30日将选好的旱柳健壮雌花枝从母株上剪下，共10个雌花枝，枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm。不进行疏枝疏花。

步骤四、花枝培养：将雌雄花枝分别隔离，置于温室水桶或者水槽中进行水培，在水中将花枝底部斜截。控制温室气温20-25℃，相对湿度60％左右。每隔2天换水一次，每两次换水截去花枝底部1-2cm，结合换水注意清理水桶或者水槽，保持干净卫生。

步骤五、花粉收集：待雄花序开放，花粉囊开裂后，每天中午12点左右进行花粉收集，直到每个花序的前2/3花序的花粉囊开裂完后停止收集。将收集的花粉按照树种编号，置于干燥器中进行干燥，并放入冰箱保存，保存温度1-5℃。

步骤六、授粉：待雌花枝的柱头有透明粘液分泌时，进行授粉。授粉在晴天进行，按杂交组合进行隔离授粉，用毛笔蘸干花粉涂抹于雌蕊珠头。每天授粉1次，连续4天。

步骤七、授粉后的管理：授粉后控制温室温度18-23℃，授粉后10-20天空气湿度不低于80％，后期不低于60％。

步骤八、杂种收集：授粉后20-30天杂种成熟，在果实由绿变黄时，在果序外套袋，防止果实成熟时带绒毛的种子飞散，待蒴果全部张开后取下装有种子的纸袋。

步骤九、杂种催芽：将收集的杂种去除附带的柳絮，取出种子，共获得杂种1106个，将杂种均匀放置于玻璃皿中的湿润纱布上，盖上上盖，置于温室中进行催芽，保持温室温度20-25℃。2天后长出子叶，3天后长出主根，发芽的种子数为421个，发芽率为38.1％。

实验例2

步骤一、母株选择：选择6年生旱柳鲁柳6号做母本，母株生长健壮、无病虫害，形态发育自然良好。

步骤二、雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的旱柳鲁柳1号做父本，于12月25日将雄花枝剪下，共5个雄花枝，直径0.5-0.8cm，长度50-80cm，每一个雄花枝按照雄花芽的大小，从小到大疏掉1/2弱小雄花芽。

步骤三、雌花枝准备：于12月30日将选好的旱柳健壮雌花枝从母株上剪下，共10个雌花枝，枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm。均匀疏掉每个雌花枝上1/3侧枝，每一个侧枝上疏掉枝条下部1/3的雌花芽。

步骤四、花枝培养：将雌雄花枝分别隔离，置于温室水桶或者水槽中进行水培，在水中将花枝底部斜截。控制温室气温20-25℃，相对湿度60％左右。每隔2天换水一次，每两次换水截去花枝底部1-2cm，结合换水注意清理水桶或者水槽，保持干净卫生。

步骤五、花粉收集：待雄花序开放，花粉囊开裂后，每天中午12点左右进行花粉收集，直到每个花序的前2/3花序的花粉囊开裂完后停止收集。将收集的花粉按照树种编号，置于干燥器中进行干燥，并放入冰箱保存，保存温度1-5℃。

步骤六、授粉：待雌花枝的柱头有透明粘液分泌时，进行授粉。授粉在晴天进行，按杂交组合进行隔离授粉，用毛笔蘸干花粉涂抹于雌蕊珠头。每天授粉1次，连续4天。

步骤七、授粉后的管理：授粉后控制温室温度18-23℃，授粉后10-20天空气湿度不低于80％，后期不低于60％。

步骤八、杂种收集：授粉后20-30天杂种成熟，在果实由绿变黄时，在果序外套袋，防止果实成熟时带绒毛的种子飞散，待蒴果全部张开后取下装有种子的纸袋。

步骤九、杂种催芽：将收集的杂种去除附带的柳絮，取出种子，共获得杂种825个，将杂种均匀放置于玻璃皿中的湿润纱布上，盖上上盖，置于温室中进行催芽，保持温室温度20-25℃。2天后长出子叶，3天后长出主根，发芽的种子数为393个，发芽率为47.6％。

实验例3

步骤一、母株选择：选择6年生旱柳鲁柳6号做母本，母株生长健壮、无病虫害，形态发育自然良好。

步骤二、雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的旱柳鲁柳1号做父本，于12月25日将雄花枝剪下，共5个雄花枝，直径0.5-0.8cm，长度50-80cm，每一个雄花枝按照雄花芽的大小，从小到大疏掉2/3弱小雄花芽。

步骤三、雌花枝准备：于12月30日将选好的旱柳健壮雌花枝从母株上剪下，共10个雌花枝，枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm。均匀疏掉每个雌花枝上1/2侧枝，每一个侧枝上疏掉枝条下部1/2的雌花芽。

步骤四、花枝培养：将雌雄花枝分别隔离，置于温室水桶或者水槽中进行水培，在水中将花枝底部斜截。控制温室气温20-25℃，相对湿度60％左右。每隔2天换水一次，每两次换水截去花枝底部1-2cm，结合换水注意清理水桶或者水槽，保持干净卫生。

步骤五、花粉收集：待雄花序开放，花粉囊开裂后，每天中午12点左右进行花粉收集，直到每个花序的前2/3花序的花粉囊开裂完后停止收集。将收集的花粉按照树种编号，置于干燥器中进行干燥，并放入冰箱保存，保存温度1-5℃。

步骤六、授粉：待雌花枝的柱头有透明粘液分泌时，进行授粉。授粉在晴天进行，按杂交组合进行隔离授粉，用毛笔蘸干花粉涂抹于雌蕊珠头。每天授粉1次，连续4天。

步骤七、授粉后的管理：授粉后控制温室温度18-23℃，授粉后10-20天空气湿度不低于80％，后期不低于60％。

步骤八、杂种收集：授粉后20-30天杂种成熟，在果实由绿变黄时，在果序外套袋，防止果实成熟时带绒毛的种子飞散，待蒴果全部张开后取下装有种子的纸袋。

步骤九、杂种催芽：将收集的杂种去除附带的柳絮，取出种子，共获得杂种519个，将杂种均匀放置于玻璃皿中的湿润纱布上，盖上上盖，置于温室中进行催芽，保持温室温度20-25℃。2天后长出子叶，3天后长出主根，发芽的种子数为269个，发芽率为51.8％。

上述实施例为本公开较佳的实施方式，但本公开的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本公开的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本公开的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种提高旱柳人工控制杂交杂种获得率的方法,其特征是，包括以下步骤：

步骤一、母株选择：选择4-6年生旱柳孤立木或者片林中的林缘木做母本，母株要求生长健壮、无病虫害，形态发育自然良好；

步骤二、雄花枝准备：选择与旱柳杂交亲和性好的雄株做父本，于12月30日后至第二年1月30日前将雄花枝剪下，雄花枝要求直径0.5-0.8cm，长度50-80cm，每一个雄花枝按照雄花芽的大小，从小到大疏掉1/3弱小雄花芽；

步骤三、雌花枝准备：于雄花枝截取后3-5天将选好的旱柳健壮雌花枝从母株上剪下，雌花枝长0.7-1.0m，直径1.0-2.0cm；若花枝上有侧枝，均匀疏掉2/3侧枝，每一个侧枝上疏掉枝条下部2/3的雌花芽；

步骤四、花枝培养：将雌雄花枝分别隔离，进行水培；

步骤五、花粉收集：待雄花序开放，花粉囊开裂后，收集花粉；

步骤六、授粉：待雌花枝的柱头有透明粘液分泌时，即可进行授粉；

步骤七、授粉后的管理：控制合适的室温和湿度；

步骤八、杂种收集：授粉后20-30天杂种成熟即可收集。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤二中，所述雄花枝上具有10-15个雄花芽。

3.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤二中，所述雄株为旱柳、爆竹柳或白柳。

4.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤三中，低于0.8╳0.3cm的为弱小雄花芽。

5.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤四中，水培时，在水中将花枝底部斜截。

6.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤四中，水培过程中，控制温室气温20-25℃，相对湿度55～65％，进一步为60％；每隔2天换水一次，每两次换水截去花枝底部1-2cm。

7.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤五中，待雄花序开放，花粉囊开裂后，每天中午11：30～12：30(进一步为中午12点)进行花粉收集，直到每个花序的前2/3花序的花粉囊开裂完后停止收集；将收集的花粉按照树种编号，置于干燥器中进行干燥，并放入冰箱保存，保存温度1-5℃。

8.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤六中，授粉选择在晴天进行，按杂交组合进行隔离授粉，用毛笔蘸干花粉涂抹于雌蕊珠头或者将花粉均匀散放于水中，利用喷壶喷洒于雌蕊珠头上；每天授粉1-2次，连续3-4天。

9.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤七中，授粉后控制温室温度18-23℃，授粉后10-20天空气湿度不低于80％，后期不低于60％。

10.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤八之后还包括步骤九，杂种催芽：将收集的杂种去除附带的柳絮，取出种子，均匀放置于玻璃皿中的湿润纱布上，盖上上盖，置于温室中进行催芽，保持温室温度20-25℃。