CN108949564A - 一种多功能胚胎细胞分离培养筛 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种多功能胚胎细胞分离培养筛,包括筛板、下皿和上盖;所述筛板、下皿和上盖为回转体;所述筛板通过扣合方式设置在所述下皿上部,所述上盖通过扣合方式设置在所述筛板上部;本发明的有益效果在于,首先,该发明极大提高了在基因修饰动物模型制备、克隆动物、干细胞研究、试管婴儿ICSI(单精子胞浆注射)等技术流程中需要快速高通量分离胚胎细胞的工作效率;其次,该发明能够保证胚胎细胞的显微操作,保证了实验的成功率;最后,该发明既可以用于胚胎细胞与普通细胞(如滋养层细胞或精子细胞)的分离,也可以用于这些胚胎细胞的体外培养。
Description
技术领域
本发明涉及生物医学技术领域,尤其涉及一种多功能胚胎细胞分离培养筛。
背景技术
在基因修饰动物模型制备、克隆动物、干细胞研究、试管婴儿ICSI(单精子胞浆注射)等技术流程中,需要对操作样品的胚胎细胞进行预处理,如用透明质酸酶等处理卵泡组织,获得方便各种显微操作的正常胚胎细胞。这其中去除正常生长中包围在胚胎细胞外的颗粒细胞或附着在外的精子细胞,需要手工操作的方法,在这一堆混杂的细胞中,一个个用操作针取出处理好的胚胎细胞。这一过程需要小心并且既费时又费力,关键在于在体外操作时间长,胚胎细胞的活性会受到外界不可控制因素(如水电解质平衡紊乱)的各种不利影响,导致胚胎存活率降低,甚至造成整个实验失败。
发明内容
1.要解决的技术问题
为解决现有技术中存在的问题,本发明提供一种多功能胚胎细胞分离培养筛,用正常胚胎细胞普遍比较常规细胞(如颗粒细胞,精子等)大,设计了一个专用的细胞分离培养的筛板,其中筛板孔径正好介于胚胎细胞与常规细胞之间。这样在培养液中筛板带动这堆混杂细胞做冲洗运动时,胚胎细胞因为比较大,所以留在了筛板孔洞上,而常规细胞漏入筛板孔洞下,被冲洗液带走,从而达到去除常规不要的细胞,快速高通量纯化胚胎细胞的目地。
2.技术方案
为了实现上述目的,本发明的技术方案是:
一种多功能胚胎细胞分离培养筛,包括筛板、下皿和上盖;所述筛板、下皿和上盖为回转体;所述筛板通过扣合方式设置在所述下皿上部;所述筛板为下沉式结构,所述下皿为无顶盖壳体结构,且所述筛板底板位于在下皿内腔;所述上盖为无底板的壳体结构,且所述上盖通过扣合方式设置在所述筛板上部;所述筛板周壁沿径向向外延伸形成筛板延伸部,所述下皿周壁沿径向向外延伸形成下皿延伸部,所述上盖周壁沿径向向外延伸形成上盖延伸部;所述筛板延伸部、下皿延伸部和上盖延伸部周壁设置有十二棱形弧边;所述筛板底板设置有若干孔洞,且若干所述孔洞构成圆形矩阵。
上述的多功能胚胎细胞分离培养筛,其中,所述筛板底板和筛板周壁之间设置有倾斜部,且所述倾斜部与所述筛板底板之间的夹角为锐角,保证筛板底板接近下皿表面(在保证成功冲洗分离胚胎细胞的同时,省冲洗液)。
上述的多功能胚胎细胞分离培养筛,其中,所述筛板底板与下皿内腔底面的间距为3mm。
上述的多功能胚胎细胞分离培养筛,其中,所述上盖内设置有限位凸部,且与所述上盖周壁构成卡槽;所述筛板周壁插装在所述卡槽内,以连接所述筛板和上盖。
上述的多功能胚胎细胞分离培养筛,其中,所述的筛板、下皿和上盖边缘印制有辅助方向标记。
上述的多功能胚胎细胞分离培养筛,其中,所述下皿延伸部直径大于所述筛板延伸部直径,所述筛板延伸部直径大于所述上盖延伸部直径。
上述的多功能胚胎细胞分离培养筛,其中,所述筛板、下皿和上盖由生物纯级优质塑料制成。
上述的多功能胚胎细胞分离培养筛,其中,所述筛板底板厚度为100um。
上述的多功能胚胎细胞分离培养筛,其中,所述孔洞上部为向上喇叭状,且上部开口直径大于100um,下部为圆筒状且直径为30um。
上述的多功能胚胎细胞分离培养筛,其中,所述下皿底面直径为35mm。
3.有益效果
综上所述,本发明的有益效果在于:
(1)该发明极大提高了在基因修饰动物模型制备、克隆动物、干细胞研究、试管婴儿ICSI(单精子胞浆注射)等技术流程中需要快速高通量分离胚胎细胞的工作效率;
(2)该发明能够保证胚胎细胞的显微操作,保证了实验的成功率。
(3)该发明既可以用于胚胎细胞与普通细胞(如滋养层细胞或精子细胞)的分离,也可以用于这些胚胎细胞的体外培养。
附图说明
图1是本发明一种多功能胚胎细胞分离培养筛的结构示意图。
图2是本发明一种多功能胚胎细胞分离培养筛的剖视图。
图3是本发明一种多功能胚胎细胞分离培养筛筛板的结构示意图。
图4是本发明一种多功能胚胎细胞分离培养筛通孔的结构示意图。
图5是本发明一种多功能胚胎细胞分离培养筛通孔的侧视图。
具体实施方式
以下结合附图进一步说明本发明的实施例。
请参见附图1及附图5所示,一种多功能胚胎细胞分离培养筛,包括筛板1、下皿2和上盖3;所述筛板1、下皿2和上盖3为回转体;所述筛板1通过扣合方式设置在所述下皿2上部;所述筛板1为下沉式结构,所述下皿2为无顶盖壳体结构,且所述筛板底板101位于在下皿2内腔;所述上盖3为无底板的壳体结构,且所述上盖3通过扣合方式设置在所述筛板1上部;所述筛板1周壁沿径向向外延伸形成筛板延伸部102,所述下皿2周壁沿径向向外延伸形成下皿延伸部201,所述上盖3周壁沿径向向外延伸形成上盖延伸部301;所述筛板延伸部102、下皿延伸部201和上盖延伸部301周壁设置有十二棱形弧边4;所述筛板底板101设置有若干圆形孔洞5,且若干所述圆形孔洞5构成圆形矩阵100,并且所述圆形矩阵100具有140圈。
所述筛板底板101和筛板1周壁之间设置有倾斜部103,且所述倾斜部103与所述筛板底板101之间的夹角为锐角,通过所述倾斜部103,能够使所述筛板101内的胚胎细胞向所述筛板底板101集中,此外,能够保证筛板底板接近下皿表面(在保证成功冲洗分离胚胎细胞的同时,省冲洗液)。
所述筛板底板101与下皿2内腔底面的间距为3mm,使得所述筛板1内的细胞完全浸入所述下皿2内的胚胎冲洗液或培养液中。
所述上盖3内设置有限位凸部302,且与所述上盖3周壁构成卡槽303;所述筛板1周壁插装在所述卡槽303内,以连接所述筛板1和上盖3。
所述的筛板1、下皿2和上盖3边缘印制有辅助方向标记6,能够对所述筛板1、下皿2和上盖3的安装方位和胚胎细胞的方位进行确定。
所述下皿延伸部201直径大于所述筛板延伸部102直径,所述筛板延伸部102直径大于所述上盖延伸部301直径。
所述筛板1、下皿2和上盖3由生物纯级优质塑料制成,并通过无菌处过,无内毒素、无支原体,且经过小鼠胚胎毒性测试。
所述筛板底板101厚度为100um,方便对胚胎细胞的分离纯化进行光学观察。
所述孔洞5上部为向上喇叭状,且上部开口直径大于100um,下部为圆筒状且直径为30um,所述孔洞5下部的直径正好介于胚胎细胞(100um)与常规细胞(如颗粒细胞20um,精子4um)之间,方便胚胎细胞的分离纯化。
所述下皿2底面直径为35mm,正好与常规细胞培养的35mm培养皿大口径相匹配,使用时可以正好卡在35mm细胞培养皿口,大大方便了胚胎细胞的冲洗和培养。
使用方法:
首先,将适量的胚胎冲洗液或培养液置于所述下皿2中,再将混合有胚胎细胞,颗粒细胞,精子等杂乱细胞的培养液直接点入所述筛板1内,因为所述筛板1采用下沉式设计,正好卡在所述下皿2中,摇动所述下皿2可直接带动所述筛板1的运动,静置片刻后细胞下沉,比较小的细胞就可以经所述孔洞5落入所述下皿2中,较大的胚胎细胞就卡在所述孔洞5上,如果还有一些小细胞没有筛下去,被挡在上面,可以再次小心地摇动所述筛板1,再一次让胚胎细胞浮起,让没落下的小细胞得以再次经所述孔洞5落入所述下皿2中,以达到提高分离效率的目地。如果筛下的小细胞比较多(密度比较大),还有一些在所述筛板1上筛不下来,可以更换所述下皿2连同其中的冲洗液,再对所述下皿2进行摇动冲洗,达到精确分离大小细胞的目的。
分离过程中,为防止空气中的杂菌落入分离系统,或带细胞的冲洗液甩出筛选系统,可以盖上所述上盖3,所述筛板1周壁边缘正好卡在所述卡槽303内,所述限位凸部302正好对应地筛板环形边内部,这种设计即可以固定所述上盖3与筛板1的相对位置,也可以防止冲洗液或培养液从所述上盖3与筛板1之间的缝隙溢出,同时二者之间的缝隙能够方便5%的CO2气体自由进入培养筛内部。
在实际工作中,分离好的胚胎细胞往往不会立即取出进行下一步操作,需要几分钟到数小时,甚至几天的准备时间,这时候胚胎细胞的培养非常重要,而且与颗粒细胞的共培养有利于提高胚胎的存活率,这套系统可以直接全套放置在培养箱中,从胚胎细胞分离筛选系统直接转成胚胎细胞培养系统,即可以直接当普通细胞培养系统使用,简单方便实用。
以上所述仅为本发明的优选实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构变换,或直接或间接运用附属在其他相关产品的技术领域,均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (10)
1.一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:包括筛板(1)、下皿(2)和上盖(3);所述筛板(1)、下皿(2)和上盖(3)为回转体;所述筛板(1)通过扣合方式设置在所述下皿(2)上部;所述筛板(1)为下沉式结构,所述下皿(2)为无顶盖壳体结构,且所述筛板底板(101)位于在下皿(2)内腔;所述上盖(3)为无底板的壳体结构,且所述上盖(3)通过扣合方式设置在所述筛板(1)上部;所述筛板(1)周壁沿径向向外延伸形成筛板延伸部(102),所述下皿(2)周壁沿径向向外延伸形成下皿延伸部(201),所述上盖(3)周壁沿径向向外延伸形成上盖延伸部(301);所述筛板延伸部(102)、下皿延伸部(201)和上盖延伸部(301)周壁设置有十二棱形弧边(4);所述筛板底板(101)设置有若干孔洞(5),且若干所述孔洞(5)构成圆形矩阵(100)。
2.根据权利要求1所述的一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:所述筛板底板(101)和筛板(1)周壁之间设置有倾斜部(103),且所述倾斜部(103)与所述筛板底板(101)之间的夹角为锐角。
3.根据权利要求1所述的一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:所述筛板底板(101)与下皿(2)内腔底面的间距为3mm。
4.根据权利要求1所述的一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:所述上盖(3)内设置有限位凸部(302),且与所述上盖(3)周壁构成卡槽(303);所述筛板(1)周壁插装在所述卡槽(303)内,以连接所述筛板(1)和上盖(3)。
5.根据权利要求1所述的一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:所述的筛板(1)、下皿(2)和上盖(3)边缘印制有辅助方向标记(6)。
6.根据权利要求1所述的一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:所述下皿延伸部(201)直径大于所述筛板延伸部(102)直径,所述筛板延伸部(102)直径大于所述上盖延伸部(301)直径。
7.根据权利要求1所述的一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:所述筛板(1)、下皿(2)和上盖(3)由生物纯级优质塑料制成。
8.根据权利要求1所述的一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:所述筛板底板(101)厚度为100um。
9.根据权利要求1所述的一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:所述孔洞(5)上部为向上喇叭状,且上部开口直径大于100um,下部为圆筒状且直径为30um。
10.根据权利要求1所述的一种多功能胚胎细胞分离培养筛,其特征在于:所述下皿(2)底面直径为35mm。
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