CN108904320A - 一种预防和改善妊娠纹的多肽组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种用于预防和改善妊娠纹的多肽组合物,该组合物包含促进胶原蛋白合成的多肽、促进表皮再生,补充粘连蛋白的多肽、促进弹性蛋白合成的多肽中的一种、两种或三种,降低炎症反应、紧致皮肤的多肽、延缓皮肤衰老、提高皮肤防御力的多肽中的一种或两种。本发明的多肽组合物对人体安全,无刺激及毒副作用,可以修复皮肤表皮层、基底膜、真皮层、抗炎、促进结缔组织生长、增加胶原蛋白及弹性蛋白生成,能够用于产前预防和产后修复妊娠纹。
Description
技术领域
本发明属于生物医学的多肽药物技术领域,提供了一种用于预防和改善妊娠纹的多肽组合物。
背景技术
妊娠纹(striae gravidarum)属于萎缩纹的一种,在怀孕过程中产生,主要表现为腹部、胸部、后腰部、臀部和大腿的萎缩性条索状皮肤改变。早期症状为出现宽窄不同、长短不一的暗红色或紫红色的条纹,然后色素脱失、萎缩,最后稳定后呈现出一种白色或银色的线性皮肤损害。妊娠纹的发生及其难以消除的症状对患者造成了很大的心理负担和精神压力,极大地影响了其生活质量。
目前,妊娠纹产生的原因及机制有待进一步的研究,比较公认的说法是,妊娠纹的产生是由于内分泌因素导致体内激素的变化和皮肤受到机械力牵拉的作用共同导致的结果。妊娠期间糖皮质激素水平增加,使得弹性蛋白变性、分解,并抑制成纤维细胞的功能,从而导致成纤维细胞合成弹性蛋白和胶原蛋白减少,影响了受损皮肤的修复。与此同时,孕期随着胎儿的增大,腹部明显隆起,腹部皮肤受到越来越大的牵拉力,导致弹性纤维和胶原纤维被破坏,真皮层结缔组织损伤,由此产生了妊娠纹,且更易发生于腹部。
妊娠纹的发生很普遍,半数以上的孕妇均会出现妊娠纹,而且年轻的孕妇发生妊娠纹的风险更高,严重变形的妊娠纹有可能终身不退。因此,妊娠纹受到国内外学者的广泛关注,其治疗方法也不断发展。目前常见的祛除妊娠纹的方法主要有:1、外用药物治疗。维A酸是常用的外用治疗药物之一,通过作用于成纤维细胞,刺激皮肤外基质蛋白的合成,从而形成新的结缔组织带,并可提高用药部位的张力强度。但维A酸较严重的不良反应限制了其应用,维A酸对皮肤具有较强的刺激,会引起皮肤出现红斑、脱屑,可能使皮损更明显,长期应用导致全身吸收可引起肝损害,而且其具有潜在的胚胎毒性和致畸性,孕妇在妊娠早期禁用。2、皮肤磨削法。通过对皮肤进行物理机械性磨削,刺激皮肤自我修复,形成新的胶原纤维,使真皮的胶原纤维和弹性纤维重新排布,并形成新的表皮,以此达到祛除妊娠纹的目的。但磨削皮肤会导致疼痛,容易发生感染,出现色素沉着,易留疤痕。3、激光疗法。利用光热作用理论,光进入皮肤层产生热效应及相关生物学效应,激发机体的自我修复机制,刺激胶原蛋白再生,以此达到治疗目的。激光疗法对激光操作技术要求高,治疗时间长,可能导致色素沉着。4、射频治疗。利用高频电流热效应促进真皮层产生胶原蛋白,促进皮肤的自我更新修复。该疗法需要专业人士操作进行,有出现灼伤的潜在危险。这些方法都存在着固有的缺陷,对人体有潜在的危害,对妊娠纹的治疗研究仍需进一步探索。
发明内容
本发明的目的在于提供一种预防和改善妊娠纹的多肽组合物,比分别仅仅使用单一多肽具有更加明显的效果,通过组合物多肽产生的协同增效作用,全方面预防和改善妊娠纹,同时对人体无刺激,安全无毒副作用。
为实现上述目的,根据皮肤生理生化机制及针对妊娠纹存在的弹性纤维、胶原纤维断裂,皮肤结缔组织破坏等问题,本发明人形成了一套预防及改善妊娠纹的方案,包含促进胶原蛋白合成的多肽及/或促进表皮再生,补充粘连蛋白的多肽及/或促进弹性蛋白合成的多肽,再添加降低炎症反应,紧致皮肤的多肽及/或延缓皮肤衰老,提高皮肤防御力的多肽。
其中,促进胶原蛋白合成的多肽可以是一种或是多种选自以下多肽:棕榈酰三肽-5、棕榈酰五肽-4;
促进表皮再生,补充粘连蛋白的多肽可以是一种或是多种选自以下多肽,包括但不限于六肽-9;
促进弹性蛋白合成的多肽可以是一种或是多种选自以下多肽,包括但不限于棕榈酰寡肽;
降低炎症反应,紧致皮肤的多肽可以是一种或是多种选自以下多肽,包括但不限于棕榈酰四肽-7;
延缓皮肤衰老,提高皮肤防御力的多肽可以是一种或是多种选自以下多肽,包括但不限于肌肽、脱羧肌肽、乙酰肌肽、棕榈酰肌肽;
以上各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%。
本发明所述多肽组合物进一步的优选方案可以是棕榈酰三肽-5和棕榈酰四肽-7组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%;
本发明所述多肽组合物进一步的优选方案可以是棕榈酰三肽-5、六肽-9和棕榈酰四肽-7组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%;
本发明所述多肽组合物进一步的优选方案可以是棕榈酰三肽-5、六肽-9、棕榈酰寡肽和棕榈酰四肽-7组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%;
本发明所述多肽组合物进一步的优选方案可以是棕榈酰三肽-5、六肽-9、棕榈酰寡肽、棕榈酰四肽-7和肌肽组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%;
本发明所述多肽组合物进一步的优选方案可以是棕榈酰三肽-5、棕榈酰五肽-4、六肽-9、棕榈酰寡肽、棕榈酰四肽-7和肌肽组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%;
本发明包括添加保湿剂,优选如甘油、芦荟胶、透明质酸等;多醇类防腐剂,优选辛甘醇;可以进一步添加维持皮肤油水平衡的脂类物质,优选神经酰胺3;或者包括抗菌类维持成分稳定的综合性试剂,优选1,2-己二醇;以上各组分的质量浓度为0.001%-5%(w/w)。
本发明包括pH调节剂,所述pH调节剂选自:三乙醇胺、碳酸氢钠、碳酸氢钾,优选三乙醇胺;组合物pH值范围为3.0~8.0,优选5.0-7.0。
本发明采用复合型多肽组合物主要是制备皮肤外用的护肤产品或医用产品,可以应用于预防和改善妊娠纹。
本发明的多肽组合物可以制成各种剂型,如开发产品剂型主要有精华液、乳剂、霜剂、凝胶、敷料等;产品可以为祛妊娠纹精华液、祛妊娠纹凝胶、医用敷料等。
本发明相对于现有技术所取得的有益效果包括:
本发明在临床试验上发现,一些促进胶原蛋白合成的多肽,如棕榈酰三肽-5,通过激活转化生长因子-β(TGF-β),刺激成纤维细胞分裂增殖,强力促进胶原蛋白的生成,补充细胞外基质蛋白,强化结缔组织,还能抑制基质金属蛋白酶的活性,防止胶原蛋白分解,从而让皮肤富有弹性;棕榈酰五肽-4,可以激发胶原蛋白、糖胺聚糖(GAGs)的合成,增加皮肤厚度。一些促进表皮再生,补充粘连蛋白的多肽,如六肽-9,可促进表皮细胞的分化成熟,促进皮肤再生,增加层粘连蛋白的合成,修补基底膜,增加胶原蛋白的合成,修复真皮层。一些促进弹性蛋白合成的多肽,如棕榈酰寡肽,可以促进皮肤弹性蛋白的合成,改善皮肤弹性,提升紧致度,增加皮肤柔软性。一些能够降低炎症反应,紧致皮肤的多肽,如棕榈酰四肽-7,通过调控白细胞介素-6(IL-6)的分泌,显著消除皮肤炎症,增加皮肤弹性、紧致度。一些延缓皮肤衰老,提高皮肤防御力的多肽,如肌肽,对人体有一系列奇特的保健作用,除了强大的清除自由基、抗氧化和螯合金属的作用,还能使衰老的成纤维细胞恢复活力,得以持续合成和分泌弹性蛋白、胶原蛋白,保护结缔组织,维持皮肤的密度和弹性,提高皮肤的防御力。本发明的试验数据显示,相比于单一多肽,这些多肽组合物能够更强力地促进弹性蛋白、胶原蛋白的合成,修复受损的皮肤结缔组织,更有效地预防和改善妊娠纹,表现出显著的协同作用。
具体实施方式
为了更好地理解本发明,下面结合实施例对发明作详细的说明,但并不只限于以下的实施例。
实施例1
处方(1公斤精华液)
配制方法:
将配方量的透明质酸钠加入到水中,搅拌使混合均匀,然后加热到80~85℃,保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下,加入甘油、芦荟胶、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、神经酰胺3、辛甘醇和1,2-己二醇,搅拌均匀。用15%三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。
实施例2
处方(1公斤精华液)
配制方法:
将配方量的透明质酸钠加入到水中,搅拌使混合均匀,然后加热到80~85℃,保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下,加入甘油、芦荟胶、棕榈酰三肽-5、六肽-9、棕榈酰四肽-7、神经酰胺3、辛甘醇和1,2-己二醇,搅拌均匀。用15%三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。
实施例3
处方(1公斤精华液)
配制方法:
将配方量的透明质酸钠加入到水中,搅拌使混合均匀,然后加热到80~85℃,保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下,加入甘油、芦荟胶、棕榈酰三肽-5、六肽-9、棕榈酰寡肽、棕榈酰四肽-7、神经酰胺3、辛甘醇和1,2-己二醇,搅拌均匀。用15%三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。
实施例4
处方(1公斤精华液)
配制方法:
将配方量的透明质酸钠加入到水中,搅拌使混合均匀,然后加热到80~85℃,保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下,加入甘油、芦荟胶、棕榈酰三肽-5、六肽-9、棕榈酰寡肽、棕榈酰四肽-7、肌肽、神经酰胺3、辛甘醇和1,2-己二醇,搅拌均匀。用15%三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。
实施例5
处方(1公斤精华液)
配制方法:
将配方量的透明质酸钠加入到水中,搅拌使混合均匀,然后加热到80~85℃,保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下,加入甘油、芦荟胶、棕榈酰三肽-5、棕榈酰五肽-4、六肽-9、棕榈酰寡肽、棕榈酰四肽-7、肌肽、神经酰胺3、辛甘醇和1,2-己二醇,搅拌均匀。用15%三乙醇胺调溶液的pH值至5.5左右。
实施例6人皮肤成纤维细胞增殖活性实验
6.1材料与仪器
人皮肤成纤维细胞、DMEM培养基、胎牛血清、二甲亚砜(DMSO)、噻唑蓝(MTT)、PBS缓冲液、单一多肽、各实施例多肽组合物、全自动酶标仪、紫外分光光度计
6.2分组
各组分别设置如下:以实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5的多肽组合物作为多肽组合物给药组,以各单一多肽作为单一多肽给药组,以相同体积的PBS缓冲液作为空白对照组,上述各组均设置8个平行组。
6.3培养方法
人皮肤成纤维细胞加入DMEM培养基(含5%胎牛血清),置于含5%CO2,湿度为95%,恒温37℃的二氧化碳培养箱中培养,培养48h后更换培养液,待细胞长满培养品,取出弃去培养液,加入消化液约3mL,以覆满瓶底为限,约2-3min后,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,加入DMEM培养基终止反应,并制备成单细胞悬液。5000个/mL浓度接种于96孔板,每孔加入100uL。置于含5%CO2,湿度为95%,恒温37℃的二氧化碳培养箱中培养,待细胞附着后,更换100uL培养液,同时分别添加多肽组合物、单一多肽各100uL,对照组加入相同体积PBS缓冲液。继续置于培养箱培养,检测48h后的OD值。
6.4测试结果
每孔加入MTT溶液10uL,震荡显色,继续培养4h,将96孔板的培养上清弃除,再加入DMSO 100uL,摇床上震荡10min,酶标仪570nm测定OD值。试验结果如下表1所示:
表1多肽组合物对人皮肤成纤维细胞增殖活性的影响
注:*表示多肽组合物组与空白对照组相比有统计学差异,p<0.05。**表示多肽组合物组与空白对照组相比差异显著,p<0.01。***表示多肽组合物组与空白对照组相比差异极其显著,p<0.001。#表示多肽组合物组与棕榈酰三肽-5组相比有统计学差异,p<0.05。##表示多肽组合物组与棕榈酰三肽-5组相比差异显著,p<0.01。###表示多肽组合物组与棕榈酰三肽-5组相比差异极其显著,p<0.001。
由结果可知,多肽能够促进成纤维细胞的增殖,成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分,可以合成和分泌弹性蛋白和胶原蛋白,促进弹性纤维和胶原纤维的生成。相对于单一多肽组,各实施例中的多肽组合物更能显著促进成纤维细胞的增殖,经过各作用机制不同的多肽有机组合之后,随着实施例中活性多肽种类增加(总体用量保持不变),各多肽组合物的效果逐渐增强,证明各多肽之间具有明显的协同作用。
实施例7促进胶原蛋白生成的试验
7.1动物试验
健康10周裸鼠,雄性,体重20g左右。
7.2试剂与仪器
皮肤羟脯氨酸测定试剂盒,实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5的多肽组合物,各单一多肽溶液,分光光度计。
7.3试验方法
在裸鼠右侧耳背涂抹实施例各多肽组合物、各单一多肽溶液,每日早晚各一次涂抹,用药1g。左侧不用药作为对照组。在清洁、通风、干燥、室温22±2℃条件下,相同饲料喂养。用药30天后各取5只,处死,取其药物作用部位及对侧相应部位皮肤。
用天平称45mg(湿重)组织放入洁净试管中,加入羟脯氨酸测定试剂盒中水解液1mL,混匀。加盖沸水浴水解20min,每隔10min混匀一次,以便让水解更加充分。取出试管,冷却后往各管加入试剂盒的指示剂1滴,摇匀。再加入试剂盒中甲液1mL调pH,摇匀。然后采用加样器吸取调pH的乙液,逐滴加入各试管中,直至看到各管中的指示剂变成黄绿色。加入蒸馏水至10mL后混匀。取3mL的水解液加入20-30mg活性炭后混匀,3500rpm离心10min,取上清1mL。
取干净试管加入5μg/mL标准应用液1mL作为标准管。往各管中加入试剂1后混匀,静置10min,再加入试剂2,混匀静置5min,加入试剂3,混匀60℃水浴15min,冷却后3500rpm离心10min,取上清于550nm波长下测定吸光度值。
7.4结果测定与分析
羟脯氨酸是胶原蛋白的一种特有氨基酸,常以羟脯氨酸的含量换算胶原蛋白的含量。采用分光光度法测定羟脯氨酸的含量,按胶原蛋白中14%的羟脯氨酸换算小鼠皮肤中的胶原蛋白含量,试验结果如表2所示。
表2多肽组合物对小鼠皮肤中胶原蛋白生成的影响
注:*表示多肽组合物组与空白组相比有统计学差异,p<0.05。**表示多肽组合物组与空白组相比差异显著,p<0.01。***表示多肽组合物组与空白对照组相比差异极其显著,p<0.001。#表示多肽组合物组与棕榈酰三肽-5组相比有统计学差异,p<0.05。##表示多肽组合物组与棕榈酰三肽-5组相比差异显著,p<0.01。###表示多肽组合物组与棕榈酰三肽-5组相比差异极其显著,p<0.001。
由表中数据可知,多肽能够促进胶原蛋白的生成。相对于单一多肽组,各实施例中的多肽组合物促进胶原蛋白合成的效果更优,而且试验数据表明,在保持活性多肽整体用量不变的前提下,经过各作用机制不同的多肽有机组合之后,随着实施例中活性多肽种类增加,各多肽组合物的效果逐渐增强,其中实施例5的多肽组合物促进皮肤的胶原蛋白生成的效果最佳,胶原蛋白含量的百分比增大最明显,证明各多肽具有显著的协同作用。
实施例8皮肤弹性测试
8.1受试者
120名30-50岁的健康女性,随机分为12组,平均每组10人。
8.2样品与分组
选择实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5的多肽组合物作为多肽组合物给药组,以各单一多肽作为单一多肽给药组,同时设置安慰剂组。
8.3测试仪器
德国Courage+Khazaka公司(德国CK公司)制造的皮肤弹性Cotometer MPA580主机,所使用的探头是Reviscometer RV600弹性纤维组织测试探头。
8.4试验操作
先测量脸部区域清洁后30min的空白R2、R5、R7值,
其中R2=Ua/Uf,R5=Ur/Ue,R7=Ur/Uf,
Ua:从取消负压到下一次连续测试皮肤表面再加压时皮肤的恢复值;
Uf:有负压时皮肤最大的拉伸量;
Ur:取消负压0.1s后,皮肤的恢复值和粘弹性部分值,或称塑性部分值;
Ue:恒定负压加到皮肤上后,0.1s时皮肤的拉伸量,定位弹性部分拉伸量;
然后将试样均匀涂布于面部,一天两次,早晚坚持使用,不得使用其他化妆品,连续使用4周,分别测试记录试验区域在给药前后的皮肤R2、R5、R7值。同一个受试者的测试由同一个测量人员完成。
8.5测试结果
通过比较给药前后的皮肤R2、R5、R7值变化来评估产品改善皮肤的弹性功效,R2、R5、R7值变化如下表3所示:
表3各组给药前后皮肤R2、R5、R7值的变化情况
注:R2、R5、R7值越接近1,皮肤弹性越好。
由表中数据可知,在活性成分浓度相同的情况下使用4周后,多肽组合物给药组测得的皮肤R2、R5、R7值比使用单一多肽测得的值更高,而且随着实施例中活性多肽种类增加,各多肽组合物的效果逐渐增强,其中实施例5的多肽组合物在测试前后R2、R5、R7值的变化率最大,表明其改善皮肤弹性的功效最好,各多肽表现出显著的协同作用。
实施例9修复妊娠纹功效测试
9.1受试者
90名25-40岁患有妊娠纹而其他身体指标健康的女性,随机分为3组,每组30人。
9.2样品与分组
选择实施例5的多肽组合物作为多肽组合物给药组,以棕榈酰三肽-5作为单一多肽给药组,同时设置安慰剂组。
9.3试验方法
以受试者腹部中线为分界,将其腹部分为左右两个区域,在每个区域选取纹路、颜色类似的一处妊娠纹,随机选取其中一侧作为给药部位,另一侧作为空白对照部位。在选定的妊娠纹部位用温水清洁干净,再将产品涂抹到该部位,一天两次,早晚使用。使用8周后评价各组修复妊娠纹的效果。
9.4评价指标
妊娠纹修复效果评价标准如下:
(1)显效:腹部妊娠纹消失或明显改善,范围缩小在60%(含)以上;
(2)有效:腹部妊娠纹改善,范围缩小在30%(含)以上;
(3)无效:腹部妊娠纹改善不明显,范围缩小没有达到上述要求或没有缩小。
总有效率=(显效例数+有效例数)/总试验例数×100%
9.5试验结果
治疗8周后,比较各组的总有效率情况,结果见表4。
表4各组受试者治疗8周后的妊娠纹修复情况
安慰剂组的总有效率为6.67%,棕榈酰三肽-5给药组的总有效率为53.33%,实施例5多肽组合物给药组的总有效率为80.00%。结果表明,相对于单一多肽组,在保持活性多肽浓度不变的前提下,经过各作用机制不同的多肽有机组合之后,实施例5的多肽组合物能够更加有效地改善妊娠纹,证明多肽组合物作用于不同的皮肤靶点,表现出显著的协同作用。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所做的进一步详细的说明,但是不表示本发明的具体实施是局限于这些说明。对于本发明所属领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或是替换,都应视为属于本发明的保护范围。
Claims (11)
1.一种预防和改善妊娠纹的多肽组合物,其特征在于,包含:
(1)促进胶原蛋白合成的多肽、促进表皮再生,补充粘连蛋白的多肽、促进弹性蛋白合成的多肽中的一种、两种或三种,所述促进胶原蛋白合成的多肽选自一种或多种以下多肽,包括但不限于棕榈酰三肽-5、棕榈酰五肽-4;所述促进表皮再生,补充粘连蛋白的多肽选自一种或多种以下多肽,包括但不限于六肽-9;所述促进弹性蛋白合成的多肽选自一种或多种以下多肽,包括但不限于棕榈酰寡肽;
(2)降低炎症反应、紧致皮肤的多肽、延缓皮肤衰老、提高皮肤防御力的多肽中的一种或两种,所述降低炎症反应,紧致皮肤的多肽选自一种或多种以下多肽,包括但不限于棕榈酰四肽-7;所述延缓皮肤衰老,提高皮肤防御力的多肽选自一种或多种以下多肽,包括但不限于肌肽、脱羧肌肽、乙酰肌肽、棕榈酰肌肽;
其中以上各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%。
2.按权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述多肽组合物可以是棕榈酰三肽-5和棕榈酰四肽-7组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%。
3.按权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述多肽组合物可以是棕榈酰三肽-5、六肽-9和棕榈酰四肽-7组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%。
4.按权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述多肽组合物可以是棕榈酰三肽-5、六肽-9、棕榈酰寡肽和棕榈酰四肽-7组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%。
5.按权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述多肽组合物可以是棕榈酰三肽-5、六肽-9、棕榈酰寡肽、棕榈酰四肽-7和肌肽组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%。
6.按权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述多肽组合物可以是棕榈酰三肽-5、棕榈酰五肽-4、六肽-9、棕榈酰寡肽、棕榈酰四肽-7和肌肽组合,各多肽成分质量浓度为0.0001%-5%。
7.按权利要求1-6任一权利要求所述的组合物,其特征在于,可以添加保湿剂,优选如甘油、芦荟胶、透明质酸等,质量浓度范围为0.001%-5%;多醇类防腐剂,优选辛甘醇,质量浓度范围为0.001%-5%。
8.按权利要求1-6任一权利要求所述的组合物,其特征在于,可以进一步添加维持皮肤油水平衡的脂类物质,优选神经酰胺3,质量浓度范围为0.001%-5%。
9.按权利要求1-6任一权利要求所述的组合物,其特征在于,包括抗菌类维持成分稳定的综合性试剂,优选1,2-己二醇,质量浓度范围为0.001%-5%。
10.按权利要求1-6任一权利要求所述的组合物,其特征在于,还包括pH调节剂,选自三乙醇胺、碳酸氢钠、碳酸氢钾,优选三乙醇胺;组合物pH值范围为3.0~8.0,优选5.0-7.0。
11.按权利要求1-6任一权利要求所述的组合物,其特征在于,所述组合物剂型包括但不限于精华液、乳剂、霜剂、凝胶、敷料。
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