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Abstract

本发明公开了一种含有佐剂组合的EV71疫苗，其主要成分为EV71病毒样颗粒(EV71‑VLP)、铝佐剂以及聚肌苷酸胞嘧啶核苷酸(poly I：C)。本发明EV71蛋白疫苗的免疫原性优于目前单独使用的单磷酸类脂A(MPLA)、单独使用的Al或者单独使用的poly I:C佐剂疫苗，本发明不仅能很好地诱导抗原特异性的体液免疫应答、而且可以诱导高水平的细胞免疫应答；该疫苗能有效预防由EV71病毒感染引起的相关疾病。

Description

一种含有佐剂组合的EV71疫苗
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及一种含有佐剂组合的EV71疫苗。
背景技术
根据已报道的有关EV71的分子流行病学研究结果表明，肠道病毒71型(EV71)是导致手足口病重症和死亡的主要病原，可导致80％的重症病率以及93％的死亡率。由于手足口病治疗还缺乏有效的特异性药物，疫苗接种便成为预防和控制此类疾病暴发和大面积流行最主要的手段。围绕手足口病开展的疫苗主要有全病毒灭活疫苗、EV71-VLP疫苗、载体疫苗和VP1重组蛋白疫苗等，其中全病毒灭活疫苗发展是最为迅速、进展最快的，目前市场上已有全病毒疫苗投入使用。
病毒样颗粒(VLP)是不含病毒核酸的空壳结构，许多病毒结构蛋白都具有自动组装VLP的能力，在形态结构上与天然的病毒颗粒相似，保留了较全面的抗原表位，具有很强的免疫原性和生物学活性，能够有效地诱导机体免疫系统产生免疫应答，发挥抗病毒保护作用；另外，由于VLP不含有病毒核酸，不会发生基因恢复性突变、重组或重排，安全性优于灭活和减毒病毒疫苗。但是目前研究表明，与EV71全病毒相比，EV71-VLP的免疫原性相对较弱，往往需要有效的佐剂辅助才能引起理想的免疫应答。
基于上述佐剂诱发的免疫应答效果欠佳的问题，开发一种新型疫苗成为迫切需求。
发明内容
本发明的首要目的在于提供一种含有佐剂组合的EV71疫苗。
本发明所采取的技术方案是：
一种EV71疫苗制剂，其特征在于，该制剂含有EV71-VLP、铝佐剂和聚肌苷酸-聚胞苷酸Poly I：C。
进一步的，EV71-VLP、铝佐剂和聚肌苷酸-聚胞苷酸Poly I：C用量比为1:(50～150):(20～80)。
上述任一项所述的EV71疫苗制剂在制备诱导IgG抗体的产品中的应用。
进一步的，所述的IgG抗体为IgG1和IgG2a的至少一种。
上述任一项所述的EV71疫苗制剂在制备诱导辅助性T细胞分泌的细胞因子产品中的应用。
进一步的，所述的辅助性T细胞为Th1型细胞和Th2型细胞。
进一步的，诱导Th1型细胞分泌的细胞因子为IL-2、IFN-γ和GM-CSF的至少一种。
进一步的，诱导Th2型细胞分泌的细胞因子为IL-4和GM-CSF的至少一种。
本发明的有益效果是：
本发明将EV71-VLP添加筛选出的适当的佐剂，制成了含Al和Poly I：C的新型EV71-VLP疫苗(EV71-VLP+Al+Poly I：C复合佐剂组)。该疫苗更有效地激活特异型IgG1和IgG2a抗体，以及四个细胞因子有效降低EV71引起的手足口病的发病率，尤其是减少手足口病的重症和死亡病例，对于我国儿童健康的保护具有重要意义。
附图说明
图1是不同佐剂组合疫苗诱导的体液免疫中和效价统计图。EV71-VLP+Al+Poly I：C复合佐剂组免疫小鼠，与EV71-VLP+Al、EV71-VLP+MPLA或者EV71-VLP+Poly I：C相比，可以诱导更高的中和效价，表现出更好的体液免疫效果。其中*表示P＜0.05，差异显著；**表示P＜0.01，差异极显著。
图2是不同佐剂组合疫苗的细胞免疫特异性抗体IgG1/IgG2a测定柱形图。各种佐剂组合免疫小鼠后分离血清，分别测定其血清中IgG1和IgG2a效价，EV71-VLP+Al诱导以IgG1为主；EV71-VLP+MPLA、EV71-VLP+Poly I：C、EV71-VLP+Al+Poly I：C复合佐剂组诱导的以IgG2a为主；且EV71-VLP+Al+Poly I：C复合佐剂组可以同时诱导更多的IgG1和IgG2a。
图3不同佐剂组合疫苗细胞因子IFN-γ的测定柱形图。
图4不同佐剂组合疫苗细胞因子IL-4的测定柱形图。
图5不同佐剂组合疫苗细胞因子GM-CSF的测定柱形图。
图6不同佐剂组合疫苗细胞因子IL-2的测定柱形图。
具体实施方式
一种EV71疫苗制剂，该制剂含有EV71-VLP、铝佐剂和聚肌苷酸-聚胞苷酸Poly I：C。
优选的，EV71-VLP、铝佐剂和聚肌苷酸-聚胞苷酸Poly I：C用量比为1:(50～150):(20～80)。
上述所述的EV71疫苗制剂在制备诱导IgG抗体的产品中的应用。
优选的，所述的IgG抗体为IgG1和IgG2a的至少一种。
上述任一项所述的EV71疫苗制剂在制备诱导辅助性T细胞分泌的细胞因子产品中的应用。
优选的，所述的辅助性T细胞为Th1型细胞和Th2型细胞。
优选的，诱导Th1型细胞分泌的细胞因子为IL-2、IFN-γ和GM-CSF的至少一种。
优选的，诱导Th2型细胞分泌的细胞因子为IL-4和GM-CSF的至少一种。
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1一种含有佐剂组合的EV71疫苗
本发明的疫苗制备方法
参考专利：ZL201310697541.X的制备方法制备EV71-VLP；
每剂疫苗中PolyI:C(聚肌苷酸-聚胞苷酸)的含量为50μg，EV71-VLP(EV71病毒样颗粒)的含量为1μg，氢氧化铝佐剂(其中铝元素重量为100μg)。EV71抗原为使用杆状病毒载体系统表达的EV71-VLP。
实施例2一种含有佐剂组合的EV71疫苗
本发明的疫苗制备方法
参考专利：ZL201310697541.X的制备方法制备EV71-VLP；
每剂疫苗中PolyI:C(聚肌苷酸-聚胞苷酸)的含量为20μg，EV71-VLP(EV71病毒样颗粒)的含量为1μg，氢氧化铝佐剂(其中铝元素重量为50μg)。EV71抗原为使用杆状病毒载体系统表达的EV71-VLP。
实施例3一种含有佐剂组合的EV71疫苗
本发明的疫苗制备方法
参考专利：ZL201310697541.X的制备方法制备EV71-VLP；
每剂疫苗中PolyI:C(聚肌苷酸-聚胞苷酸)的含量为80μg，EV71-VLP(EV71病毒样颗粒)的含量为1μg，氢氧化铝佐剂(其中铝元素重量为150μg)。EV71抗原为使用杆状病毒载体系统表达的EV71-VLP。
实施例4一种含有佐剂组合的EV71疫苗效果检测
1)主要材料
病毒：华南疫苗分离的病毒EV71-C2(参考专利：ZL201210127456.5)；
小鼠：48只SPF级雌性BALB/c小鼠(7日龄)，分为8组。
2)主要试剂
Aluminum hydroxide(ALHYOROGEL)：Brenntag；
poly I:C：invivoGen；
Mouse cytokine 8-plex panel细胞因子测定试剂盒：Bio-Rad；
脾细胞分离液Ficoll-paqueTMPREIUM：GE；
RPMI 1640培养液：Gibco；
Penicillin青霉素：Life；
FBS胎牛血清：Gibco；
刀豆蛋白ConA：Sigma。
3)48只7日龄雌性BALB/c小鼠，随机分成8个组，每组6只小鼠，小鼠体重相近。试验分组见表
组别 不同佐剂组合的疫苗
1 Al
2 1μg EV71-VLP+Al
3 MPLA(单磷酸类脂A)
4 1μg EV71-VLP MPLA
5 Poly I：C(聚肌苷酸-聚胞苷酸)
6 1μg EV71-VLP+Poly I：C
7 Al+Poly I：C
8 1μg EV71-VLP+Al+Poly I：C
分别对小鼠腹腔免疫接种上述不同佐剂组合的疫苗，第0天免疫1针、第21天免疫第2针。在第二次免疫后的第14天分离脾淋巴细胞和血清，分别进行以下实验：
一.免疫小鼠血清中和抗体滴度
方法：提前一天准备好96孔板Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)，待细胞铺满后备用。
取上述各组小鼠血清样品，放到56℃水浴锅中灭活30min，用2％的FBS培养基倍比稀释。将EV71-C2用2％的FBS培养基稀释到100CCID50/100μl，各取400μl稀释后的病毒液和上述各组血清样品，混合均匀，在37℃细胞培养箱放置2小时，吸去Vero细胞的培养上清液，取100μl混合液加入到铺满Vero细胞的96孔板中，6个复孔，放入37℃继续培养。每天观察细胞病变情况，当无血清病毒感染组出现明显的细胞病变效应(CPE)现象，病变表现为细胞皱缩、变圆脱落，停止观察，记录各个细胞孔的病变情况，并进行计算，获得中和效价结果。
结果：如图1所示，从中可以看出EV71-VLP+Al+Poly I：C复合佐剂疫苗组免疫小鼠后，经体外中和效价测定，其诱导的体液免疫中和效价为1:210左右，明显高于其他疫苗组，与EV71-VLP+Al、EV71-VLP MPLA、EV71-VLP+Poly I：C具有显著性差异(*表示P＜0.05，差异显著；**表示P＜0.01差异极显著)。
二.特异性IgG1/IgG2a效价测定
方法：用100μl、浓度为20μg/ml纯化的EV71-VLP包被Elisa板条过夜。然后用10％FBS进行封闭，梯度稀释上述各组血清样品，加入100μl稀释后的血清样品到包被的EV71-VLP板中，37℃孵育2小时后，洗涤5次后，加入特异性检测小鼠IgG1或者IgG2a的抗体，37℃孵育1小时后，加入反应底物显色10min后，加入终止液，测定A490值。以正常小鼠血清作为阴性对照，实验组/阴性对照≥2.1为阳性，该血清最高稀释度为其IgG1或者IgG2a效价。
结果：如图2所示，从中可以看出EV71-VLP+Al+Poly I：C复合佐剂组诱导IgG2a效价为1:220，IgG1效价为1:217，IgG2a和IgG1均高于EV71-VLP+Al、EV71-VLP MPLA、EV71-VLP+Poly I：C三个组别，且EV71-VLP+Al+Poly I：C复合佐剂组诱导的是以Th1型为主的IgG2a。
三.脾细胞分离、刺激和细胞因子测定
方法：摘除小鼠眼球取血；断颈处死小鼠，浸入75％乙醇中浸泡1-2min；在洁净工作台中无菌取出小鼠脾脏，在35mm培养皿中放入4ml的RPMI1640培养基，使用注射器活塞研磨脾脏至悬液。注意控制研磨力度，使尼龙网保持悬空，避免在皿底上直接研磨而造成大批细胞死亡；在新的15ml离心管中加入4ml脾细胞淋巴细胞分离液。将脾细胞悬液混匀后用吸管吸出5ml，沿倾斜的管壁缓缓加入于淋巴细胞分离液的上方；在18℃下，离心力为400g、离心时间为35min，离心机加减转速设为第三档。在生物安全柜中将中间淋巴细胞层(1-2ml)移入到新的15ml离心管中；向其中加入至少3倍体积的RPMI1640培养基，并轻轻地将细胞吹吸，使其悬浮；在18℃条件下，以离心力为100g离心10min；弃上清液，轻轻地将淋巴细胞吹吸，使其悬浮于2ml的RPMI1640培养基中；在18℃条件下，以离心力为100g离心10min；弃上清液，将淋巴细胞悬浮于RPMI1640培养基上并进行计数；
根据计数结果，48孔板每孔铺细胞数为2×106个，每个样品铺4个孔：其中一个孔添加5μg刀豆蛋白作为阳性对照，两个孔各加5μgEV71-VLP，第四个孔添加20μl RPMI1640培养基作为阴性对照；37℃、5％CO2培养48h。培养48h后，10000g离心5min收集上清。利用Mouse cytokine 8-plex panel细胞因子测定试剂盒对上清中的IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-12、GM-CSF、IFN-γ、TNF-α八个细胞因子进行测定。
结果：图3～图6分别为不同佐剂组合疫苗细胞因子IFN-γ、IL-4、GM-CSF、IL-2的测定柱形图。结果表明：与其他免疫组相比，本发明的EV71-VLP+Al+Poly I：C疫苗组诱导产生高水平IFN-γ，IL-2的同时，也刺激产生大量的IL-4，避免Th1型免疫反应的极化，维持Th1/Th2型免疫反应的平衡；激发特异性细胞和体液免疫反应，提高免疫应答水平，因此EV71-VLP+Al+Poly I：C复合佐剂疫苗组可激发小鼠产生有效的Th1和Th2型免疫应答。
以上所述为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种EV71疫苗制剂，其特征在于，该制剂含有EV71-VLP、铝佐剂和聚肌苷酸-聚胞苷酸Poly I：C。
2.根据权利要求1所述的EV71疫苗制剂，其特征在于，EV71-VLP、铝佐剂和聚肌苷酸-聚胞苷酸Poly I：C用量比为1:(50～150):(20～80)。
3.权利要求1～2任一项所述的EV71疫苗制剂在制备诱导IgG抗体的产品中的应用。
4.根据权利要求3的应用，其特征在于，所述的IgG抗体为IgG1和IgG2a的至少一种。
5.权利要求1～2任一项所述的EV71疫苗制剂在制备诱导辅助性T细胞分泌的细胞因子产品中的应用。
6.根据权利要求5的应用，其特征在于，所述的辅助性T细胞为Th1型细胞和Th2型细胞。
7.根据权利要求6的应用，其特征在于，诱导Th1型细胞分泌的细胞因子为IL-2、IFN-γ和GM-CSF的至少一种。
8.根据权利要求6的应用，其特征在于，诱导Th2型细胞分泌的细胞因子为IL-4和GM-CSF的至少一种。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116115748A (zh) * 2023-01-17 2023-05-16 大连理工大学 一种基于共价作用形成的Al-Poly(I:C)复合佐剂
CN117771361A (zh) * 2024-02-27 2024-03-29 天津中逸安健生物科技有限公司 一种聚肌苷酸-聚胞苷酸复合物的脂质纳米佐剂及其制备方法与应用
CN117771361B (zh) * 2024-02-27 2024-06-07 天津中逸安健生物科技有限公司 一种聚肌苷酸-聚胞苷酸复合物的脂质纳米佐剂及其制备方法与应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103740758A (zh) * 2013-12-18 2014-04-23 广东华南联合疫苗开发院有限公司 一种重组杆状病毒载体及病毒样颗粒及制备方法和用途
CN107557347A (zh) * 2016-06-30 2018-01-09 中国科学院上海巴斯德研究所 肠道病毒71型的新型病毒样颗粒、其制备方法及应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103740758A (zh) * 2013-12-18 2014-04-23 广东华南联合疫苗开发院有限公司 一种重组杆状病毒载体及病毒样颗粒及制备方法和用途
CN107557347A (zh) * 2016-06-30 2018-01-09 中国科学院上海巴斯德研究所 肠道病毒71型的新型病毒样颗粒、其制备方法及应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘鑫: "EV71型手足口病VLP疫苗的初步研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库医药卫生科技辑》 *
李昀颖: "肠病毒71型次单位疫苗的研发与免疫反应的研究", 《台湾大学硕士论文》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116115748A (zh) * 2023-01-17 2023-05-16 大连理工大学 一种基于共价作用形成的Al-Poly(I:C)复合佐剂
CN117771361A (zh) * 2024-02-27 2024-03-29 天津中逸安健生物科技有限公司 一种聚肌苷酸-聚胞苷酸复合物的脂质纳米佐剂及其制备方法与应用
CN117771361B (zh) * 2024-02-27 2024-06-07 天津中逸安健生物科技有限公司 一种聚肌苷酸-聚胞苷酸复合物的脂质纳米佐剂及其制备方法与应用

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