CN108849939B - 盐酸左氧氟沙星在制备用于防治烟草青枯病的农药制剂中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了盐酸左氧氟沙星在制备用于防治烟草青枯病的农药制剂中的应用。盐酸左氧氟沙星可用于制备防治烟草青枯病的水分散粒剂，该水分散粒剂包括以下按质量百分比计的成份：盐酸左氧氟沙星70～72％，崩解剂2～6％、润湿剂2.5～7.5％、分散剂2.5～7.5％、粘结剂3～5％、填料2～20％。本发明中将盐酸左氧氟沙星原药、润湿剂、分散剂、崩解剂和填料混合均匀得到预混料；再将预混料粉碎，并加入粘结剂和水进行造粒，烘干，得到盐酸左氧氟沙星水分散粒剂。本发明制得的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂对烟草青枯病菌的杀菌作用迅速，可在烟草青枯病常发期喷施或发生初期喷施，以预防病害的发生和扩散，防治病害效果好。

Description

盐酸左氧氟沙星在制备用于防治烟草青枯病的农药制剂中的 应用

技术领域

本发明属于经济作物病害防治领域，特别涉及盐酸左氧氟沙星在制备用于防治烟草青枯病的农药制剂中的应用。

背景技术

烟草是我国重要的经济作物之一，在发展地方经济、增加国家财政积累方面的作用突出。在我国的河南、山东、云南、贵州等集中产烟区，种烟面积一般仅占耕地总面积的1/4，而烟草的经济收入则占整个农业收入的50％以上，被农民称为致富的“短、平、快”作物。

烟草青枯病是由茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种世界性重大病害，在我国南方烟区贵州、四川、河南、云南、山东、广西、湖南、广东、福建等地严重发生，属具有毁灭性的危险性病害之一，发病率高，近年来该病害有逐步北移的趋势，成为影响烟草产品质量的重要限制因素之一。

目前，化学药剂仍是防治烟草青枯病的重要手段之一。药剂主要有保护性铜制剂、抗生素类杀菌剂等。张耀文(2016)测定了乙蒜素、农用硫酸链霉素、代森锰锌、氢氧化铜等16种药剂对烟草青枯病菌的最低抑菌浓度，乙蒜素和农用硫酸链霉素对病原菌的抑制作用最强。陈尧(2008)等进行了10种药剂对烟草青枯病的防治药效比较试验，表明72％农用硫酸链霉素可溶性粉剂具有较好的防治效果。周开拓(2016)用3％中生菌素可湿性粉剂1000～1200倍液防治烟草青枯病，防效达63％以上,但是田间实际应用效果不稳定，效果较差。抗菌素类防治药剂以其易被植物吸收而发生抑菌作用，得到广泛应用，常用的有硫酸链霉素等，但烟草青枯病一般在酸性土壤中发生严重，酸性土壤可促使链霉素快速水解，导致防治效果不明显(叶建如，2013)。铜制剂中的铜离子对细菌有触杀作用，已广泛用于细菌性叶斑病的防治，且持效期较长，但其弱点是难以被植物吸收进入体内，持续防治变差。

因此，筛选高效快速抑制烟草青枯病的新型化学药剂是十分必要的，可为病害防治提供储备药剂，对病害防治有重要意义。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供盐酸左氧氟沙星在制备用于防治烟草青枯病的农药制剂中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种盐酸左氧氟沙星水分散粒剂。

本发明的再一目的在于提供所述盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的应用。盐酸左氧氟沙星水分散粒剂对烟草青枯病菌有较强的杀菌作用，可用于烟草青枯病的防治。

本发明的目的通过下述技术方案实现：盐酸左氧氟沙星在制备用于防治烟草青枯病的农药制剂中的应用。

一种盐酸左氧氟沙星水分散粒剂，包括以下按质量百分比计的成份：盐酸左氧氟沙星70～72％，崩解剂2～6％、润湿剂2.5～7.5％、分散剂2.5～7.5％、粘结剂3～5％、填料2～20％。

所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂，优选为包括以下按质量百分比计的成份：盐酸左氧氟沙星70～72％，崩解剂4～6％、润湿剂5～7.5％、分散剂5～7.5％、粘结剂3～5％、填料2～13％。

所述的崩解剂为硫酸铵、尿素、氯化钠和碳酸氢钠中的一种以上；优选为尿素。

所述的润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、烷基丁二酸酯磺酸钠、拉开粉和二丁基萘磺酸钠中的一种以上；优选为二丁基萘磺酸钠。

所述的分散剂为木质素磺酸钠、木质素磺酸钙、亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、离子形聚羧酸盐GY-D04和离子形聚羧酸盐SD-816中的一种以上；优选为亚甲基二萘磺酸钠(NNO)。

所述的粘结剂优选为可溶性淀粉。

所述的填料优选为滑石粉。

所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)混合：将盐酸左氧氟沙星原药、崩解剂、润湿剂、分散剂和填料混合均匀，得到预混料；

(2)造粒：将步骤(1)中得到的预混料粉碎，然后加入粘结剂和水进行造粒，烘干，过筛，得到盐酸左氧氟沙星水分散粒剂。

步骤(2)中所述的粉碎为利用气流粉碎机进行粉碎，其粉碎后的粒径800～1000目。

步骤(2)中所述的水的用量占预混料与粘结剂总质量的3％。

步骤(2)中所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的直径为0.8mm左右。

所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂在防治烟草青枯病中的应用。

所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂在防治烟草青枯病中的应用，将上述盐酸左氧氟沙星水分散粒剂加水稀释成浓度为200μg/ml～400μg/ml的药剂，在烟草青枯病多发期或发生初期喷淋在烟草叶片及根基部土壤中，以预防病害；或烟草青枯病发生初期喷淋，以预防病害的发生和扩散，防治病害效果好。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

1、本发明制备的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂在室内抑制烟草青枯病菌及盆栽防治病害试验中均对烟草青枯病菌及青枯病有显著的杀菌和防病效果，可为烟草青枯病的防治提供新的储备技术和储备药剂。

2、本发明测定了6种常用防治细菌病害的药剂对烟草青枯病菌的最小抑制浓度，盐酸左氧氟沙星最小抑制浓度为0.78μg/ml，远低于氧氯化铜的200.00μg/ml和青霉素钾的25.00μg/ml，可达到硫酸链霉素的抑菌效果。在盆栽试验中，盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的抑病及防病效果均较显著。另外，盐酸左氧氟沙星水分散粒剂对烟草青枯病菌的杀菌作用迅速，病害前期及初发时喷施，预防效果明显。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。本发明中涉及的原料及试剂均可从市面上购得。

实施例1：盐酸左氧氟沙星水分散粒剂制备中崩解剂的选择

供试崩解剂：硫酸铵、尿素、氯化钠、碳酸氢钠

称取70g盐酸左氧氟沙星原药(珠海嘉亿生物科技有限公司)，分别加入各供试崩解剂2g、4g、6g，再添加填料滑石粉，补充到95g，混合均匀后，经气流粉碎机粉碎达到粒径1000目，然后置于硫化床造粒机中，加入5g可溶性淀粉(天津市大茂化学试剂厂)和3g水，造粒、烘干、筛分得到直径0.8mm待测盐酸左氧氟沙星水分散粒剂样品。

在25℃下，向盛有90ml蒸馏水的100ml具塞量筒(筒高22.5cm，内径28mm)中加入样品颗粒0.5g后，塞住筒口，夹住量筒中部，以8r/min的速度沿中心旋转，直至样品在水中完全崩解，记录崩解时间。

表1盐酸左氧氟沙星水分散粒剂制备中不同崩解剂的效果

结果如表1所示：以尿素为崩解剂时，尿素与样品的质量比为2％、4％、6％时，其崩解时间均最短，明显优于同质量比的硫酸铵、氯化钠、碳酸氢钠。在质量比为4％、6％时，盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的崩解时间最短，因此，优选4％～6％(w/w)尿素为盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的崩解剂。

实施例2盐酸左氧氟沙星水分散粒剂制备中润湿剂的选择

供试润湿剂：十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、烷基丁二酸酯磺酸钠(江苏省海安石油化工厂)、拉开粉、二丁基萘磺酸钠。

称取72g盐酸左氧氟沙星原药，分别加入各供试润湿剂2.5g、5g、7.5g，加入4g尿素为崩解剂，用填料滑石粉，补充到96g，混合均匀后，经气流粉碎机粉碎达到粒径1000目，然后置于硫化床造粒机中，加入4g可溶性淀粉(天津市大茂化学试剂厂)和3g水，造粒、烘干、筛分，得到直径0.8mm待测盐酸左氧氟沙星水分散粒剂样品。

加500ml的342mg/L硬度水(称取CaCl₂0.304g和MgCl₂·6H₂O 0.139g于1000mL的容量瓶中，用蒸馏水溶解稀释至1000mL刻度线)于500ml刻度量筒中，称取1g待测样品，加入水中，静置观察记录99％样品沉入量筒底部的时间，判断其润湿性。

表2盐酸左氧氟沙星水分散粒剂制备中不同润湿剂的效果

结果如表2所示，以二丁基萘磺酸钠为湿润剂，二丁基萘磺酸钠与样品的质量比为5％时，盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的润湿时间最短为30s，质量比增加到7.5％时，湿润时间延长到32s。烷基丁二酸酯磺酸钠次之，与样品的质量比为5％时，湿润时间为34s。拉开粉为润湿剂时，水分散粒剂的润湿时间最长，与样品的质量比为5％时，湿润时间达49s；与样品的质量比为7.5％，湿润时间也长达45s。因此，优选5％～7.5％(w/w)二丁基萘磺酸钠为盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的润湿剂。

实施例3盐酸左氧氟沙星水分散粒剂制备中分散剂的选择

供试分散剂：木质素磺酸钠、木质素磺酸钙、亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、离子形聚羧酸盐GY-D04(北京广源益农化学有限公司)、离子形聚羧酸盐SD-816(北京广源益农化学有限公司)。

称取70g盐酸左氧氟沙星原药，加入4g尿素为崩解剂，5g二丁基萘磺酸钠为湿润剂，分别加入各供试分散剂2.5g、5g、7.5g，再添加填料滑石粉，补充到95g，混合均匀后，经气流粉碎机粉碎达到粒径1000目，然后置于硫化床造粒机中，加入5g可溶性淀粉(天津市大茂化学试剂厂)和3g水，造粒、烘干、筛分，得到直径0.8mm待测盐酸左氧氟沙星水分散粒剂样品。

在100ml具塞刻度量筒中加入98ml蒸馏水，称2g样品加入量筒内，将量筒上下颠倒10次，每次约2s，静置并记录30、60min时沉淀物体积。60min后颠倒10次，使完全再分散，静置24h，再颠倒量筒，记录使沉积物完全再分散面颠倒的次数。

表3盐酸左氧氟沙星水分散剂制备中不同分散剂的效果

结果如表3所示：以亚甲基二萘磺酸钠(NNO)为分散剂，亚甲基二萘磺酸钠与样品的质量比为2.5％、5％、7.5％时，盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的分散效果，优于同质量比的木质素磺酸钠、木质素磺酸钙、离子形聚羧酸盐(GY-D04)、离子形聚羧酸盐(SD-816)。在亚甲基二萘磺酸钠(NNO)与样品的质量比为5％、7.5％时，盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的分散效果最好，因此，优选5％～7.5％亚甲基二萘磺酸钠(NNO)为盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的分散剂。

实施例4：70％盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的制备

将盐酸左氧氟沙星原药70g，加入5g尿素，5g二丁基萘磺酸钠，6g亚甲基二萘磺酸钠(NNO)，再添加填料滑石粉，补充到95g，混合均匀后，经气流粉碎机粉碎达到粒径1000目，然后置于硫化床造粒机中，加入5g可溶性淀粉和3g水，造粒、烘干、筛分，得到直径0.8mm的70％盐酸左氧氟沙星水分散粒剂。

实施例5：71％盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的制备

将盐酸左氧氟沙星原药71g，加入4g尿素，6g二丁基萘磺酸钠，5g亚甲基二萘磺酸钠(NNO)，再添加填料滑石粉，补充到96g，混合均匀后，经气流粉碎机粉碎达到粒径800目，然后置于硫化床造粒机中，加入4g可溶性淀粉和3g水，造粒、烘干、筛分，得到直径0.8mm的71％盐酸左氧氟沙星水分散粒剂。

实施例6：72％盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的制备

将盐酸左氧氟沙星原药72g，加入6g尿素，6g二丁基萘磺酸钠，7.5g亚甲基二萘磺酸钠(NNO)，再添加填料滑石粉，补充到97g，混合均匀后，经气流粉碎机粉碎达到粒径1000目，然后置于硫化床造粒机中，加入3g可溶性淀粉和3g水，造粒、烘干、筛分，得到直径0.8mm的72％盐酸左氧氟沙星水分散粒剂。

实施例7：不同药剂对烟草青枯病菌的最小抑制浓度(MIC)

供试药剂：70％盐酸左氧氟沙星水分散粒剂(来自实施例4)；硫酸链霉素，72％可湿性粉剂(1600万单位)，购于成都普惠生物工程有限公司；青霉素钾，购于河北远征药业有限公司(400万单位)；春雷霉素，2％水剂，购于江门植保有限公司；中生菌素，3％可湿性粉剂，购于福建凯力生物制品有限公司；王铜(氧氯化铜)，30％悬浮剂，购于广东大丰植保科技有限公司。

烟草青枯病菌Ralstonia solanacearum(茄科雷尔氏菌，菌株来源于广东省农业科学院植物保护研究所)。

LB培养液的配制：胰蛋白胨(tryptone)10g、酵母提取物(yeast extract)5g、氯化钠(NaCl)10g、蒸馏水1000ml，搅拌均匀，用盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至7.0，121℃灭菌30min，取出，备用。

把烟草青枯病菌接种于LB培养液，在30℃、转速150r/min培养24h，为试验用病原菌液。取灭菌后玻璃试管(18mm×200mm)，在无菌条件下，分别加4.8ml LB培养液。将供试药剂用无菌水梯度稀释成系列浓度，每浓度药液取0.1ml加入玻璃试管，使试管培养液中杀菌剂有效成分浓度分别为400、200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0.78、0.39、0.2、0.1、0.05μg/ml，对照加入0.1ml无菌水。然后在试管中加入病原菌液0.1ml、每处理5次重复。30℃振荡培养24h～36h后，观察无细菌生长的最低浓度，即为药剂对烟草青枯病菌的MIC。

结果如表4所示，不同药剂对烟草青枯病菌的最小抑制浓度差异较大，盐酸左氧氟沙星和硫酸链霉素对病原菌的抑制能力较强，最小抑制浓度均为0.78μg/ml，中生菌素和春雷霉素对病原菌抑制能力稍次，最小抑制浓度分别为3.12μg/ml和12.50μg/ml。氧氯化铜的最小抑制浓度为200.00μg/ml。可见烟草青枯病菌对盐酸左氧氟沙星、硫酸链霉素敏感，对氧氯化铜不敏感。

表4不同药剂对烟草青枯病菌的生物活性

注：“－”表示病原菌不生长，“+”表示病原菌可以生长。

实施例8：70％盐酸左氧氟沙星水分散粒剂对烟草青枯病的盆栽防治效果

盆栽试验采用伤根接种烟草青枯病菌4天再施药防治的方法进行。选择生长期基本一致的烟草幼苗，每株幼苗4～5片叶。用灭菌的细长竹签在烟草幼苗根部土壤内随机深插10次，造成烟草幼苗根部损伤，往每株烟草根部土壤中倒入5ml浓度为10⁶CFU/ml～10⁷CFU/ml烟草青枯病菌悬浮液，置于28℃～32℃的温室大棚内保湿培养4d(天)。将70％盐酸左氧氟沙星水分散粒剂(来自实施例4)用无菌水配制成有效成份为100μg/ml、200μg/ml和400μg/ml三个浓度，用喷雾器喷淋在烟草叶片和烟草根部土壤，对照喷淋无菌水，继续置于28℃～32℃的温室大棚内培养，每处理30株烟草幼苗。喷药后观察记录病害发生情况，计算病情指数及防治效果；其中，计算公式如下：

烟草幼苗青枯病分级调查标准：0级：植株无症状；1级：只有1片叶变黄或枯萎；2级：2片叶变黄或枯萎；3级：多于2片叶变黄或枯萎；4级：全株变黄或枯萎。

病情指数＝[∑(病级数值×该病级植株数)×100]/(最高级数×调查植株数)。

防治效果＝(对照病情指数－处理病情指数)×100％/对照病情指数

盆栽防治效果见表5，盐酸左氧氟沙星有效成份为200μg/ml时，施药后4、8、12d的盆栽防治效果均在65％以上，分别为81.21％、77.22％和67.62％。有效成份为400μg/ml时，施药后4、8d防治效果均在80％以上，分别为90.25％和84.63％，处理时间延长到12d，其防治效果仍达到76.29％，可见盐酸左氧氟沙星制剂对烟草青枯病有持续的防治作用。

在伤根接种病原菌4d后，病菌已从根部伤口侵入烟草植株，处在烟草青枯病发病初期，此时喷啉盐酸左氧氟沙星水分散粒剂对病害的防效果较好。因此，建议在烟草青枯病易发期，喷施盐酸左氧氟沙星水分散粒剂，可预防病害的发生；在病害发生初期需及时喷施药剂，以防治病害，阻止病害扩散。另外烟草青枯病是土壤传播病害，病菌主要从烟草根部伤口侵入，因此建议在喷施药剂时，除喷洒叶片外，可用喷淋的方法重点喷施植株根部土壤，以有效控制病害。

表5盐酸左氧氟沙星水分散粒剂在伤根接种处理下对烟草青枯病的盆栽防治效果

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.盐酸左氧氟沙星在制备用于防治烟草青枯病的农药制剂中的应用，其特征在于：

所述的农药制剂为盐酸左氧氟沙星水分散粒剂，其包括以下按质量百分比计的成份：盐酸左氧氟沙星70～72％，崩解剂4～6％、润湿剂5～7.5％、分散剂5～7.5％、粘结剂3～5％、填料2～13％；

所述的崩解剂为硫酸铵、尿素、氯化钠和碳酸氢钠中的一种以上；

所述的润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、烷基丁二酸酯磺酸钠、拉开粉和二丁基萘磺酸钠中的一种以上；

所述的分散剂为木质素磺酸钠、木质素磺酸钙、亚甲基二萘磺酸钠、离子形聚羧酸盐GY-D04和离子形聚羧酸盐SD-816中的一种以上。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：

所述的崩解剂为尿素；

所述的润湿剂为二丁基萘磺酸钠；

所述的分散剂为亚甲基二萘磺酸钠。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：

所述的粘结剂为可溶性淀粉；

所述的填料为滑石粉。

4.一种盐酸左氧氟沙星水分散粒剂，其特征在于，包括以下按质量百分比计的成份：盐酸左氧氟沙星70～72％，崩解剂4～6％、润湿剂5～7.5％、分散剂5～7.5％、粘结剂3～5％、填料2～13％；

所述的崩解剂为硫酸铵、尿素、氯化钠和碳酸氢钠中的一种以上；

所述的润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、烷基丁二酸酯磺酸钠、拉开粉和二丁基萘磺酸钠中的一种以上；

所述的分散剂为木质素磺酸钠、木质素磺酸钙、亚甲基二萘磺酸钠、离子形聚羧酸盐GY-D04和离子形聚羧酸盐SD-816中的一种以上。

5.根据权利要求4所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂，其特征在于：

所述的崩解剂为尿素；

所述的润湿剂为二丁基萘磺酸钠；

所述的分散剂为亚甲基二萘磺酸钠。

6.根据权利要求4所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂，其特征在于：

所述的粘结剂为可溶性淀粉；

所述的填料为滑石粉。

7.权利要求4～6任一项所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)混合：将盐酸左氧氟沙星原药、崩解剂、润湿剂、分散剂和填料混合均匀，得到预混料；

(2)造粒：将步骤(1)中得到的预混料粉碎，然后加入粘结剂和水进行造粒，烘干，过筛，得到盐酸左氧氟沙星水分散粒剂。

8.根据权利要求7所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(2)中所述的水的用量占预混料与粘结剂总质量的3％。

9.权利要求4～6任一项所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂在防治烟草青枯病中的应用。

10.根据权利要求9所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂在防治烟草青枯病中的应用，其特征在于：为将权利要求4～6任一项所述的盐酸左氧氟沙星水分散粒剂加水稀释成浓度为200μg/ml～400μg/ml的药剂，在烟草青枯病多发期或发生初期喷淋在烟草叶片及根基部土壤中，以预防病害。