CN108774619A - 无醇化核酸检测试剂管 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种无醇化核酸检测试剂管，包括主管(1)，主管(1)下端设有多个支管(2)；所述主管(1)内从上往下依次设有裂解区(3)、第一分隔塞(4)、清洗区(5)、第二分隔塞(6)，支管(2)内设有反应区(7)，且第二分隔塞(6)位于支管(2)和主管(1)的连接处，第一分隔塞(4)和第二分隔塞(6)上均设有液相或固相的疏水层(8)；所述主管(1)内壁上设有贯通至支管(2)的磁珠通道(9)；所述裂解区(3)内设有核酸提取液，清洗区(5)内设有无醇清洗液，反应区(7)内设有洗脱液。本发明不仅能够降低操作的难度，还能提高检测的精度和效率。
Description
技术领域
本发明涉及一种核酸检测管，特别是一种无醇化核酸检测试剂管。
背景技术
实验室核酸检测周期短，灵敏度特异性与培养法相当，目前通常采用核酸检测试剂管来对样本进行核酸检测，现有的核酸检测管通常使用固态的分隔层将裂解液、清洗液和反应液分隔，然后通过加热熔融分隔层，便于磁珠携带核酸穿过分隔层进行相应的操作，但由于核酸对于温度变化较为敏感，为了减少温度变化对核酸的影响，操作人员需要严格控制加热区域，这样就会增加操作难度。同时，由于现有的检测管易受较多因素的干扰(例如温度对于核酸的干扰)，导致现有的检测结果存在较大误差。而且，现有的清洗液中含有醇类物质，醇类物质不仅会对扩增反应起到抑制作用，还会不利于磁珠分散，同时由于醇类物质具有挥发性，不利于产品储存，从而影响检测精度。因此，现有的技术存在着操作难度大、检测精度较低和检测效率低下的问题。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种无醇化核酸检测试剂管。本发明不仅能够降低操作的难度，还能提高检测的精度和效率。
本发明的技术方案：无醇化核酸检测试剂管，包括主管，主管下端设有一个或多个支管；所述主管内从上往下依次设有裂解区、第一分隔塞、清洗区、第二分隔塞，支管内设有反应区，且第二分隔塞位于支管和主管的连接处，第一分隔塞和第二分隔塞上均设有液相或固相的疏水层；所述主管内壁上设有贯通至支管的磁珠通道；所述裂解区内设有核酸提取液，清洗区内设有无醇清洗液，反应区内设有洗脱液。
前述的无醇化核酸检测试剂管中，所述核酸提取液包括3～6mol/L的硫氰酸胍、10～35mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、30～60mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、1～5wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和0.1～1mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
前述的无醇化核酸检测试剂管中，所述无醇清洗液包括5～20mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，0.3～2mol/L的氯化钠。
前述的无醇化核酸检测试剂管中，所述洗脱液包括3～6mmol/L的硫酸镁、0.3～0.6mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
前述的无醇化核酸检测试剂管中，所述第一分隔塞包括塞体，塞体上端设有锥形面，锥形面上方设有凸块，塞体下端设有凸条。
前述的无醇化核酸检测试剂管中，所述塞体侧壁设有多个弧形凸面，相邻的弧形凸面之间设有通道。
前述的无醇化核酸检测试剂管中，所述第二分隔塞包括分隔板,分隔板下方设有多个与支管位置相对应的塞子本体；每个塞子本体内均设有开口朝下的试剂储存腔。
前述的无醇化核酸检测试剂管中，所述的试剂储存腔内设有用于保存生物试剂的载体。
前述的无醇化核酸检测试剂管中，所述的试剂储存腔内还设有疏水密封层。
前述的无醇化核酸检测试剂管中，所述清洗区和/或反应区内设有可被磁化的混匀装置。
与现有技术相比，本发明通过利用设置在主管内的第一分隔塞、第二分隔塞以及液相的疏水层之间的相互配合来实现将主管内的裂解区、清洗区和反应区相分隔，并通过设置磁珠通道，使得纳米磁珠在外部磁性体带动下沿着磁珠通道穿过疏水层就可实现移动，整个纳米磁珠移动过程不需要对检测试剂管进行加热处理，这样不仅可以简化操作，降低操作的难度，而且还能够减少温度对于核酸的干扰，有效提高检测精度，降低误差；而且，将所有反应集中在一个检测试剂管内进行，可以有效避免产生污染和交叉污染，提高检测精度。同时，通过在清洗区填充由5～20mmol/L的三羟甲基氨基甲烷和0.3～2mol/L的氯化钠构成的无醇清洗液，从而可以有效的清洗纳米磁珠上的杂质，由于无醇清洗液不含醇类物质，从而可以有效避免因醇类物质进入反应区导致的对扩增反应抑制现象的发生，还有利于磁珠的分散，从而可以有效的提高检测的精度和核酸的利用率；由于清洗液不含醇类，使得清洗液可以不作为危险品运输，极大的方便运输，降低成本。裂解区中的核酸提取液由的硫氰酸胍、乙二胺四乙酸二钠、三羟甲基氨基甲烷、聚乙二醇辛基苯基醚和超顺磁性氧化硅纳米磁珠构成，较高浓度的硫氰酸胍在高温条件下能够保证完全裂解样本中的细胞并释放核酸的特性，超顺磁性氧化硅纳米磁珠会吸附核酸，从而能够最大限度的保证样本中的核酸能够进入下一反应环节，提高核酸的利用率。反应区中的洗脱液包括硫酸镁和甘氨酸三甲胺内盐，并具体限定相互的配比，从而使洗脱的模板全部进入反应液进行扩增，保证了系统的灵敏度，提高检测的精度。本发明通过将裂解液和清洗液放置在主管内，将反应液放置在支管内，核酸清洗完成后分别进入不同的支管内，从而能够保证进入不同支管内的核酸的情况相同，降低干扰，减少检测误差。综上所述，本发明具有能够降低操作难度和提高检测精度的特点。
另外，本发明通过在第二分隔塞内设置试剂储存腔，使得第二分隔塞作为一个介质来附着生物试剂，提供一个干燥环境用于保存生物试剂，从而能够有效减少生物试剂受到的污染，用液相的疏水层作为附着或者包裹来提供更好的保存，从而可以有效的提高检测精度，降低误差。
本发明通过在第二分隔塞内设置试剂储存腔，试剂储存腔内热熔物质内设有生物试剂，通过温控方式实现生物试剂的转移，实现核酸进行分步的洗脱和复溶，便于核酸洗脱的更彻底，从而可以有效的提高样本的利用率，改善核酸扩增反应的效果；通过将第一分隔塞外设置一个或多个环形槽，在环形槽内填充疏水物质，既能更好的固定第一分隔塞，又能起到良好的隔绝作用。
附图说明
图1是本发明的结构示意图；
图2是第一分隔塞的结构图；
图3是图2的剖视图；
图4是第二分隔塞的结构图；
图5是实施例1至4中第二分隔塞的剖视图；
图6是实施例5至8中第二分隔塞的剖视图；
图7是图1中的A-A向视图。
附图中的标记为：1-主管，2-支管，3-裂解区，4-第一分隔塞，5-清洗区，6-第二分隔塞，7-反应区，8-疏水层，9-磁珠通道，10-混匀装置，401-塞体，402-锥形面，403-凸块，404-凸条，405-通道，406-弧形凸面，407-环形槽，601-分隔板，602-塞子本体，603-凸起，604-试剂储存腔，605-载体，606-疏水密封层。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。
实施例1。无醇化核酸检测试剂管，构成如图1至图5以及图7所示，包括主管1，主管1下端设有一个或多个支管2；所述主管1内从上往下依次设有裂解区3、第一分隔塞4、清洗区5、第二分隔塞6，支管2内设有反应区7，且第二分隔塞6位于支管2和主管1的连接处，第一分隔塞4和第二分隔塞6上均设有液相或固相的疏水层8；所述主管1内壁上设有贯通至支管2的磁珠通道9；所述裂解区3内设有核酸提取液，清洗区5内设有无醇清洗液，反应区7内设有洗脱液。
液相的疏水层可以为硅油，固相的疏水层可以为热熔的石蜡。
所述核酸提取液包括3～6mol/L的硫氰酸胍、10～35mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、30～60mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、1～5wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和0.1～1mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
所述无醇清洗液包括5～20mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，0.3～2mol/L的氯化钠。
所述洗脱液包括3～6mmol/L的硫酸镁、0.3～0.6mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
所述第一分隔塞4包括塞体401，塞体401上端设有锥形面402，锥形面402上方设有凸块403，塞体401下端设有凸条404。
所述塞体401侧壁设有多个弧形凸面406，相邻的弧形凸面406之间设有通道405。
所述塞体401上设有一个或多个环形槽407。环形槽用于将塞体分隔成两层或多层。
所述第二分隔塞6包括分隔板601,分隔板601下方设有多个与支管2位置相对应的塞子本体602，分隔板601上端设有凸起603；每个塞子本体602内均设有开口朝下的试剂储存腔604。
所述的试剂储存腔604内设有用于保存生物试剂的载体605。
所述的试剂储存腔604内还设有疏水密封层606。
所述载体605为磁性载体，生物试剂包裹保存于磁性载体。需要进行反应时，利用外部磁性体带动生物试剂依次穿过疏水密封层和液相的疏水层进入反应液，实现将生物试剂从试剂储存腔内转移至反应液中的目的。
所述清洗区5和/或反应区7内设有可被磁化的混匀装置10。
所述裂解区3内设有可被磁化的混匀装置10。
实施例2。无醇化核酸检测试剂管，构成如图1至图5以及图7所示，包括主管1，主管1下端设有一个或多个支管2；所述主管1内从上往下依次设有裂解区3、第一分隔塞4、清洗区5、第二分隔塞6，支管2内设有反应区7，且第二分隔塞6位于支管2和主管1的连接处，第一分隔塞4和第二分隔塞6上均设有液相或固相的疏水层8；所述主管1内壁上设有贯通至支管2的磁珠通道9；所述裂解区3内设有核酸提取液，清洗区5内设有无醇清洗液，反应区7内设有洗脱液。
液相的疏水层可以为硅油，固相的疏水层可以为热熔的石蜡。
所述核酸提取液包括3mol/L的硫氰酸胍、10mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、30mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、1wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和0.1mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
所述无醇清洗液包括5mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，0.3mol/L的氯化钠。
所述洗脱液包括3mmol/L的硫酸镁、0.3mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
所述第一分隔塞4包括塞体401，塞体401上端设有锥形面402，锥形面402上方设有凸块403，塞体401下端设有凸条404。
所述塞体401侧壁设有多个弧形凸面406，相邻的弧形凸面406之间设有通道405。
所述塞体401上设有一个或多个环形槽407。环形槽用于将塞体分隔成两层或多层。
所述第二分隔塞6包括分隔板601,分隔板601下方设有多个与支管2位置相对应的塞子本体602，分隔板601上端设有凸起603；每个塞子本体602内均设有开口朝下的试剂储存腔604。
所述的试剂储存腔604内设有用于保存生物试剂的载体605。
所述的试剂储存腔604内还设有疏水密封层606。
所述载体605为磁性载体，生物试剂包裹保存于磁性载体。需要进行反应时，利用外部磁性体带动生物试剂依次穿过疏水密封层和液相的疏水层进入反应液，实现将生物试剂从试剂储存腔内转移至反应液中的目的。
所述裂解区3内设有可被磁化的混匀装置10。
所述清洗区5和/或反应区7内设有可被磁化的混匀装置10。
实施例3。无醇化核酸检测试剂管，构成如图1至图5以及图7所示，包括主管1，主管1下端设有一个或多个支管2；所述主管1内从上往下依次设有裂解区3、第一分隔塞4、清洗区5、第二分隔塞6，支管2内设有反应区7，且第二分隔塞6位于支管2和主管1的连接处，第一分隔塞4和第二分隔塞6上均设有液相或固相的疏水层8；所述主管1内壁上设有贯通至支管2的磁珠通道9；所述裂解区3内设有核酸提取液，清洗区5内设有无醇清洗液，反应区7内设有洗脱液。
液相的疏水层可以为硅油，固相的疏水层可以为热熔的石蜡。
所述核酸提取液包括4.5mol/L的硫氰酸胍、25mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、45mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、3.5wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和0.5mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
所述无醇清洗液包括13mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，1.1mol/L的氯化钠。
所述洗脱液包括4.5mmol/L的硫酸镁、0.45mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
所述第一分隔塞4包括塞体401，塞体401上端设有锥形面402，锥形面402上方设有凸块403，塞体401下端设有凸条404。
所述塞体401上设有一个或多个环形槽407。环形槽用于将塞体分隔成两层或多层。
所述塞体401侧壁设有多个弧形凸面406，相邻的弧形凸面406之间设有通道405。
所述第二分隔塞6包括分隔板601,分隔板601下方设有多个与支管2位置相对应的塞子本体602，分隔板601上端设有凸起603；每个塞子本体602内均设有开口朝下的试剂储存腔604。
所述的试剂储存腔604内设有用于保存生物试剂的载体605。
所述的试剂储存腔604内还设有疏水密封层606。
所述载体605为磁性载体，生物试剂包裹保存于磁性载体。需要进行反应时，利用外部磁性体带动生物试剂依次穿过疏水密封层和液相的疏水层进入反应液，实现将生物试剂从试剂储存腔内转移至反应液中的目的。
所述裂解区3内设有可被磁化的混匀装置10。
所述清洗区5和/或反应区7内设有可被磁化的混匀装置10。
实施例4。无醇化核酸检测试剂管，构成如图1至图5以及图7所示，包括主管1，主管1下端设有一个或多个支管2；所述主管1内从上往下依次设有裂解区3、第一分隔塞4、清洗区5、第二分隔塞6，支管2内设有反应区7，且第二分隔塞6位于支管2和主管1的连接处，第一分隔塞4和第二分隔塞6上均设有液相或固相的疏水层8；所述主管1内壁上设有贯通至支管2的磁珠通道9；所述裂解区3内设有核酸提取液，清洗区5内设有无醇清洗液，反应区7内设有洗脱液。液相的疏水层可以为硅油，固相的疏水层可以为热熔的石蜡。
所述核酸提取液包括6mol/L的硫氰酸胍、35mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、60mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、5wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和1mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
所述无醇清洗液包括20mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，2mol/L的氯化钠。
所述洗脱液包括6mmol/L的硫酸镁、0.6mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
所述第一分隔塞4包括塞体401，塞体401上端设有锥形面402，锥形面402上方设有凸块403，塞体401下端设有凸条404。
所述塞体401侧壁设有多个弧形凸面406，相邻的弧形凸面406之间设有通道405。
所述塞体401上设有一个或多个环形槽407。环形槽用于将塞体分隔成两层或多层。
所述第二分隔塞6包括分隔板601,分隔板601下方设有多个与支管2位置相对应的塞子本体602，分隔板601上端设有凸起603；每个塞子本体602内均设有开口朝下的试剂储存腔604。
所述的试剂储存腔604内设有用于保存生物试剂的载体605。
所述的试剂储存腔604内还设有疏水密封层606。
所述载体605为磁性载体，生物试剂包裹保存于磁性载体。需要进行反应时，利用外部磁性体带动生物试剂依次穿过疏水密封层和液相的疏水层进入反应液，实现将生物试剂从试剂储存腔内转移至反应液中的目的。
所述清洗区5和/或反应区7内设有可被磁化的混匀装置10。
所述裂解区3内设有可被磁化的混匀装置10。
实施例5。无醇化核酸检测试剂管，构成如图1至图4以及图6至图7所示，包括主管1，主管1下端设有一个或多个支管2；所述主管1内从上往下依次设有裂解区3、第一分隔塞4、清洗区5、第二分隔塞6，支管2内设有反应区7，且第二分隔塞6位于支管2和主管1的连接处，第一分隔塞4和第二分隔塞6上均设有液相或固相的疏水层8；所述主管1内壁上设有贯通至支管2的磁珠通道9；所述裂解区3内设有核酸提取液，清洗区5内设有无醇清洗液，反应区7内设有洗脱液。液相的疏水层可以为硅油，固相的疏水层可以为热熔的石蜡。
所述核酸提取液包括3～6mol/L的硫氰酸胍、10～35mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、30～60mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、1～5wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和0.1～1mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
所述无醇清洗液包括5～20mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，0.3～2mol/L的氯化钠。
所述洗脱液包括3～6mmol/L的硫酸镁、0.3～0.6mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
所述第一分隔塞4包括塞体401，塞体401上端设有锥形面402，锥形面402上方设有凸块403，塞体401下端设有凸条404。
所述塞体401侧壁设有多个弧形凸面406，相邻的弧形凸面406之间设有通道405。
所述塞体401上设有一个或多个环形槽407。环形槽用于将塞体分隔成两层或多层。
所述第二分隔塞6包括分隔板601,分隔板601下方设有多个与支管2位置相对应的塞子本体602，分隔板601上端设有凸起603；每个塞子本体602内均设有开口朝下的试剂储存腔604。
所述的试剂储存腔604内设有用于保存生物试剂的载体605。
所述的试剂储存腔604内还设有疏水密封层606。所述疏水密封层606由热熔物质构成。
所述载体605为磁性载体或非磁性载体。要进行反应时，通过温控方式加热分隔塞，热熔层受热融化向外膨胀，热熔物质受热融化后使得储存腔内的生物试剂可移出，并在重力作用下穿过液相的疏水层，从而实现将生物试剂从试剂储存腔内转移至反应液中的目的。
所述裂解区3内设有可被磁化的混匀装置10。
所述清洗区5和/或反应区7内设有可被磁化的混匀装置10。
实施例6。无醇化核酸检测试剂管，构成如图1至图4以及图6至图7所示，包括主管1，主管1下端设有一个或多个支管2；所述主管1内从上往下依次设有裂解区3、第一分隔塞4、清洗区5、第二分隔塞6，支管2内设有反应区7，且第二分隔塞6位于支管2和主管1的连接处，第一分隔塞4和第二分隔塞6上均设有液相或固相的疏水层8；所述主管1内壁上设有贯通至支管2的磁珠通道9；所述裂解区3内设有核酸提取液，清洗区5内设有无醇清洗液，反应区7内设有洗脱液。液相的疏水层可以为硅油，固相的疏水层可以为热熔的石蜡。
所述核酸提取液包括3mol/L的硫氰酸胍、10mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、30mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、1wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和0.1mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
所述无醇清洗液包括5mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，0.3mol/L的氯化钠。
所述洗脱液包括3mmol/L的硫酸镁、0.3mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
所述第一分隔塞4包括塞体401，塞体401上端设有锥形面402，锥形面402上方设有凸块403，塞体401下端设有凸条404。
所述塞体401侧壁设有多个弧形凸面406，相邻的弧形凸面406之间设有通道405。
所述塞体401上设有一个或多个环形槽407。环形槽用于将塞体分隔成两层或多层。
所述第二分隔塞6包括分隔板601,分隔板601下方设有多个与支管2位置相对应的塞子本体602，分隔板601上端设有凸起603；每个塞子本体602内均设有开口朝下的试剂储存腔604。
所述的试剂储存腔604内设有用于保存生物试剂的载体605。
所述的试剂储存腔604内还设有疏水密封层606。所述疏水密封层606由热熔物质构成。
所述载体605为磁性载体或非磁性载体。要进行反应时，通过温控方式加热分隔塞，热熔层受热融化向外膨胀，热熔物质受热融化后使得储存腔内的生物试剂可移出，并在重力作用下穿过液相的疏水层，从而实现将生物试剂从试剂储存腔内转移至反应液中的目的。
所述裂解区3内设有可被磁化的混匀装置10。
所述清洗区5和/或反应区7内设有可被磁化的混匀装置10。
实施例7。无醇化核酸检测试剂管，构成如图1至图4以及图6至图7所示，包括主管1，主管1下端设有一个或多个支管2；所述主管1内从上往下依次设有裂解区3、第一分隔塞4、清洗区5、第二分隔塞6，支管2内设有反应区7，且第二分隔塞6位于支管2和主管1的连接处，第一分隔塞4和第二分隔塞6上均设有液相或固相的疏水层8；所述主管1内壁上设有贯通至支管2的磁珠通道9；所述裂解区3内设有核酸提取液，清洗区5内设有无醇清洗液，反应区7内设有洗脱液。液相的疏水层可以为硅油，固相的疏水层可以为热熔的石蜡。
所述核酸提取液包括4.5mol/L的硫氰酸胍、25mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、45mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、3wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和0.5mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
所述无醇清洗液包括15mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，1.2mol/L的氯化钠。
所述洗脱液包括4.5mmol/L的硫酸镁、0.45mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
所述第一分隔塞4包括塞体401，塞体401上端设有锥形面402，锥形面402上方设有凸块403，塞体401下端设有凸条404。
所述塞体401侧壁设有多个弧形凸面406，相邻的弧形凸面406之间设有通道405。
所述塞体401上设有一个或多个环形槽407。环形槽用于将塞体分隔成两层或多层。
所述第二分隔塞6包括分隔板601,分隔板601下方设有多个与支管2位置相对应的塞子本体602，分隔板601上端设有凸起603；每个塞子本体602内均设有开口朝下的试剂储存腔604。
所述的试剂储存腔604内设有用于保存生物试剂的载体605。
所述的试剂储存腔604内还设有疏水密封层606。所述疏水密封层606由热熔物质构成。
所述载体605为磁性载体或非磁性载体。要进行反应时，通过温控方式加热分隔塞，热熔层受热融化向外膨胀，热熔物质受热融化后使得储存腔内的生物试剂可移出，并在重力作用下穿过液相的疏水层，从而实现将生物试剂从试剂储存腔内转移至反应液中的目的。
所述裂解区3内设有可被磁化的混匀装置10。
所述清洗区5和/或反应区7内设有可被磁化的混匀装置10。
实施例8。无醇化核酸检测试剂管，构成如图1至图4以及图6至图7所示，包括主管1，主管1下端设有一个或多个支管2；所述主管1内从上往下依次设有裂解区3、第一分隔塞4、清洗区5、第二分隔塞6，支管2内设有反应区7，且第二分隔塞6位于支管2和主管1的连接处，第一分隔塞4和第二分隔塞6上均设有液相或固相的疏水层8；所述主管1内壁上设有贯通至支管2的磁珠通道9；所述裂解区3内设有核酸提取液，清洗区5内设有无醇清洗液，反应区7内设有洗脱液。液相的疏水层可以为硅油，固相的疏水层可以为热熔的石蜡。
所述核酸提取液包括6mol/L的硫氰酸胍、35mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、60mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、5wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和1mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
所述无醇清洗液包括20mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，2mol/L的氯化钠。
所述洗脱液包括6mmol/L的硫酸镁、0.6mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
所述第一分隔塞4包括塞体401，塞体401上端设有锥形面402，锥形面402上方设有凸块403，塞体401下端设有凸条404。
所述塞体401侧壁设有多个弧形凸面406，相邻的弧形凸面406之间设有通道405。
所述塞体401上设有一个或多个环形槽407。环形槽用于将塞体分隔成两层或多层。
所述第二分隔塞6包括分隔板601,分隔板601下方设有多个与支管2位置相对应的塞子本体602，分隔板601上端设有凸起603；每个塞子本体602内均设有开口朝下的试剂储存腔604。
所述的试剂储存腔604内设有用于保存生物试剂的载体605。
所述的试剂储存腔604内还设有疏水密封层606。所述疏水密封层606由热熔物质构成。
所述载体605为磁性载体或非磁性载体。要进行反应时，通过温控方式加热分隔塞，热熔层受热融化向外膨胀，热熔物质受热融化后使得储存腔内的生物试剂可移出，并在重力作用下穿过液相的疏水层，从而实现将生物试剂从试剂储存腔内转移至反应液中的目的。
所述裂解区3内设有可被磁化的混匀装置10。
所述清洗区5和/或反应区7内设有可被磁化的混匀装置10。
本发明通过第一分隔塞来取代传统的热熔性的固态分隔层，只需将分隔塞放入试剂管中即可，结构简单，安装方便，而且分隔密封效果良好。本发明通过在塞体上设置锥形面，使得纳米磁珠可以全部进入下一反应区中，不会发生残留，提高利用率；通过在锥形面上方设置凸块，有效避免锥形面与混匀装置之间的直接接触，从而起到保护分隔塞的目的，有效改善混匀效果；同时，通过锥形面和凸块的配合，在混匀装置进行混匀时，还能够对分隔塞上方的液体产生扰动，进一步改善混匀效果。同时，通过在塞体外侧壁设置一个或多个用于疏水物质的环形槽，使得塞体能够很好的吸附在试剂管内壁上。本发明通过在凸条上设置试剂储存腔，能够提供一个干燥环境用于保存生物试剂，从而可以有效减少生物试剂受到的污染，进而可以有效的提高检测精度，降低误差。
所述混匀装置包括磁化珠体。
磁性载体可以为包括铁珠、磁珠或钢珠等，非磁性载体可以为玻璃珠或胶珠等。
本发明检测试剂管的装配过程：先将反应液放入支管内，然后填充疏水层，再将第二分隔塞放入，将定位块与第二分隔塞的定位槽相配合，然后依次将清洗液、疏水层、第一分隔塞放入主管内，在第一分隔塞上方用石蜡密封，盖上盖子。
本发明的检测过程：将预处理后的样本和裂解液、内标放入检测管裂解区，然后经外部磁性体控制在核酸提取液中可被磁化的混匀装置对样品进行混匀，将样品进行裂解，使得超顺磁性氧化硅纳米磁珠吸附核酸，完成核酸的提取；随后，通过外部磁性体带动超顺磁性氧化硅纳米磁珠携带核酸沿着磁珠通道向下移动穿过疏水层至清洗液中进行清洗，随后，继续使用外部磁性体带动纳米磁珠携带核酸沿着磁珠通道向下移动穿过疏水层至反应液中进行反应，从而将核酸洗脱，通过磁控方式或温控方式将携带生物试剂的磁性载体从试剂储存腔内转移至反应液中，生物试剂在反应液中溶入和混匀，再与核酸发生扩增反应，最后外部设备通过光学检测实现对样品核酸的检测，从而实现在同一个检测试剂管内进行核酸提取、清洗、洗脱和扩增反应多个步骤。
Claims (10)
1.无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：包括主管(1)，主管(1)下端设有一个或多个支管(2)；所述主管(1)内从上往下依次设有裂解区(3)、第一分隔塞(4)、清洗区(5)、第二分隔塞(6)，支管(2)内设有反应区(7)，且第二分隔塞(6)位于支管(2)和主管(1)的连接处，第一分隔塞(4)和第二分隔塞(6)上均设有液相或固相的疏水层(8)；所述主管(1)内壁上设有贯通至支管(2)的磁珠通道(9)；所述裂解区(3)内设有核酸提取液，清洗区(5)内设有无醇清洗液，反应区(7)内设有洗脱液。
2.根据权利要求1所述的无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：所述核酸提取液包括3～6mol/L的硫氰酸胍、10～35mmol/L的乙二胺四乙酸二钠、30～60mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、1～5wt％的聚乙二醇辛基苯基醚和0.1～1mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
3.根据权利要求1所述的无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：所述无醇清洗液包括5～20mmol/L的三羟甲基氨基甲烷，0.3～2mol/L的氯化钠。
4.根据权利要求1所述的无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：所述洗脱液包括3～6mmol/L的硫酸镁、0.3～0.6mol/L的甘氨酸三甲胺内盐。
5.根据权利要求1所述的无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：所述第一分隔塞(4)包括塞体(401)，塞体(401)上端设有锥形面(402)，锥形面(402)上方设有凸块(403)，塞体(401)下端设有凸条(404)。
6.根据权利要求5所述的无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：所述塞体(401)侧壁设有多个弧形凸面(406)，相邻的弧形凸面(406)之间设有通道(405)。
7.根据权利要求1所述的无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：所述第二分隔塞(6)包括分隔板(601),分隔板(601)下方设有多个与支管(2)位置相对应的塞子本体(602)；每个塞子本体(602)内均设有开口朝下的试剂储存腔(604)。
8.根据权利要求7所述的无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：所述的试剂储存腔(604)内设有用于保存生物试剂的载体(605)。
9.根据权利要求7所述的无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：所述的试剂储存腔(604)内还设有疏水密封层(606)。
10.根据权利要求1所述的无醇化核酸检测试剂管，其特征在于：所述清洗区(5)和/或反应区(7)内设有可被磁化的混匀装置(10)。
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