CN108640928B

CN108640928B - 作为egfr抑制剂的喹唑啉类化合物

Info

Publication number: CN108640928B
Application number: CN201810644838.2A
Authority: CN
Inventors: 刘希乐; 丁照中; 陈曙辉; 吴凌云; 胡利红; 万海文; 张路
Original assignee: NANJING MINGDE NEW DRUG RESEARCH AND DEVELOPMENT Co Ltd
Current assignee: Hangzhou wutong Tree Pharmaceutical Co.,Ltd.
Priority date: 2016-12-30
Filing date: 2018-06-21
Publication date: 2019-05-03
Anticipated expiration: 2038-06-21
Also published as: US20200190107A1; EP3567030A4; EP3567030B1; CN108640928A; WO2018121758A1; EP3567030A1; JP2020511524A; JP7053665B2; CN108659005B; US11040984B2; CN108659005A

Abstract

本发明公开了一类新的喹唑啉类化合物，具体公开了式(XV)所示化合物及其药学上可接受的盐。

Description

作为EGFR抑制剂的喹唑啉类化合物

技术领域

本发明涉及一种喹唑啉类化合物作为EGFR抑制剂，用于脑转移癌症的治疗。具体地讲，本发明涉及作为治疗脑转移EGFR突变抑制剂的式(XV)化合物或其药学上可接受的盐。

背景技术

肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第一位。非小细胞肺癌约占所有肺癌的80％，约75％的患者发现时已处于中晚期，5年生存率很低。表皮生长因子受体(EGFR) 的酪氨酸激酶结构域中的遗传畸变已经被鉴定为NSCLC进展的关键驱动因子之一。

EGFR(epidermal growth factor receptor，简称为EGFR、ErbB-1或HER1)是表皮生长因子受体(HER)家族成员之一。该家族包括HER1(erbB1，EGFR)、HER2(erbB2，NEU)、HER3(erbB3)及HER4(erbB4)。EGFR 是一种糖蛋白，是表皮生长因子(EGF)细胞增殖和信号传导的受体，属于酪氨酸激酶型受体，细胞膜贯通，位于细胞膜表面。在配体与表皮生长因子受体(EGFR)结合后，受体发生了二聚作用，二聚作用既包括两个同种受体分子的结合(同源性二聚作用)，也包括人类EGF相关性受体(HER)酪氨酸激酶家族中的不同成员的结合(异源性二聚作用)。EGFR二聚后可以激活它位于细胞内的激酶通路，包括Y992,Y1045,Y1068,Y1148和Y1173等激活位点。这个自磷酸化可以引导下游的磷酸化，包括MAPK，Akt和JNK通路,诱导细胞增殖。

EGFR与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有关。研究表明在许多实体肿瘤中存在EGFR的高表达或异常表达。EGFR的过表达或突变激活涉及许多人类恶性肿瘤的发展和进展，目前已经开发了许多小分子酪氨酸激酶抑制剂(TKI)以靶向EGFR的ATP结合区。这些抑制剂中部分已被批准用于临床应用。然而，EGFR-TKI耐药可能最终在不同的治疗时期后发展，并且约三分之一的患者在获得EGFR-TKI耐药性后发展CNS转移。

脑转移已经成为肺癌病程中的主要死亡原因，有报道肺癌脑转移的发生率高达30％～50％。肺癌发生脑转移后，提示病变进入晚期，不经治疗的脑转移患者平均生存期仅1～2个月。肺癌脑转移治疗主要方法是手术、放疗、药物治疗(包括靶向药物和化疗)。对于有脑转移症状的患者，选择性使用放射治疗和手术仍然是治疗的主要但提供有限的好处。手术主要用于单个肿瘤或危重时抢救治疗。放疗和药物治疗是主要方法。全脑放疗现已成为脑转移瘤的标准治疗方案，尤其适合于多发性脑转移瘤及年龄大、全身情况差的患者。放射治疗可以帮助患者起到缓解症状的作用，总的缓解率为88％。全脑放疗可有效地改善患者的神经症状和功能，提高生存质量及中位生存期3～6个月。但由于有血脑屏障(BBB)的存在，很多药物不能达到有效治疗浓度，所以这些药物不能满足市场需求。

血脑屏障(BBB)位于脑和脑组织的毛细血管之间的界面，具有非常复杂的多细胞组织，包括排列血管的脑内皮细胞并形成脑毛细血管内皮以及周围细胞，包括周细胞，星形胶质细胞和神经元。BBB为CNS 内的细胞提供了完全自主的环境，使得能够选择性地获得所需的营养物质和激素，同时去除废物并减少对潜在有害的外源物质的暴露。大多数CNS药物是通过跨细胞被动扩散途径穿过BBB的小分子。为了在 CNS和外周环境中实现功效，有必要设计具有足够能力穿过BBB以达到在脑部具有有效治疗浓度的EGFR 抑制剂。

阿斯利康针对脑转移研发的新一代EGFR抑制剂AZD3759，具有良好的治疗脑转移的类药性质，体内外各项PK参数均显示有很好的脑部渗透性；并且Phase I显示了临床响应率高，对颅外、颅内患者药效均比较明显；

厄洛替尼，用于经FDA批准的试剂盒检测证实其肿瘤中存在特定的表皮生长因子受体(EGFR)激活性突变(activatingmutations)的转移性非小细胞肺癌(NSCLC)患者的初始(一线)治疗。该药同时也已获批用于接受过至少一次化疗方案(二线或三线治疗)后肿瘤已扩散或生长的晚期NSCLC患者的治疗。

发明内容

本发明提供式(XV)所示化合物或其药学上可接受的盐，

其中，

R₃选自H或C_1-3烷氧基，所述C_1-3烷氧基任选被1、2或3个R取代；

R_4a、R_4b、R_4c、R_4d和R_4e分别独立地选自H、F、Cl、Br、C_1-3烷基或乙炔基，所述C_1-3烷基任选被1、2 或3个R取代；

R_5a选自H、C_1-5烷基或C_3-6环烷基，所述C_1-5烷基或C_3-6环烷基任选被1、2或3个R取代；

R_5b选自H或C_1-5烷基，所述C_1-5烷基任选被1、2或3个R取代；和

R分别独立地选自F、Cl、Br、OH或NH₂。

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H或OCH₃，所述OCH₃任选被1、2或3个R取代。

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H、OCH₃或OCHF₂。

在本发明的一些方案中，上述R_4a、R_4b、R_4c、R_4d和R_4e分别独立地选自H、F、Cl、Br、CH₃或乙炔基。

在本发明的一些方案中，上述R_5a选自H、CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂CH₃、所述CH₃、 CH₂CH₃、CH₂CH₂CH₃、任选被1、2或3个R取代。

在本发明的一些方案中，上述R_5a选自H、CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂F、CH₂CH₂CH₃、

在本发明的一些方案中，上述R_5b选自H或CH₃，所述CH₃任选被1、2或3个R取代。

在本发明的一些方案中，上述R_5b选自H或CH₃。

在本发明的一些方案中，上述结构单元选自

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H或OCH₃，所述OCH₃任选被1、2或3个R取代，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H、OCH₃或OCHF₂，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_4a、R_4b、R_4c、R_4d和R_4e分别独立地选自H、F、Cl、Br、CH₃或乙炔基，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_5a选自H、CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂CH₃、所述CH₃、 CH₂CH₃、CH₂CH₂CH₃、任选被1、2或3个R取代，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_5a选自H、CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂F、CH₂CH₂CH₃、其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_5b选自H或CH₃，所述CH₃任选被1、2或3个R取代，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_5b选自H或CH₃，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述结构单元选自其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述盐选自马来酸盐、甲酸盐和盐酸盐。

本发明的一个马来酸盐结构如下：

本发明提供式(XVI)所示化合物、其异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

R₃选自H、C_1-3烷基或C_1-3烷氧基，所述C_1-3烷基或C_1-3烷氧基任选被1、2或3个R取代；

R_4a、R_4b、R_4c、R_4d和R_4e分别独立地选自H、F、Cl、Br或C_1-3烷氧基，所述C_1-3烷氧基任选被1、2或3 个R取代；

R_5a选自H或C_1-5烷基，所述C_1-5烷基任选被1、2或3个R取代；

R_5b选自H或C_1-5烷基，所述C_1-5烷基任选被1、2或3个R取代；

R分别独立地选自F、Cl、Br、OH或NH₂。

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H、CH₃或OCH₃，所述CH₃或OCH₃任选被1、2或3个R取代。

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H、CH₃或OCH₃。

在本发明的一些方案中，上述R_4a、R_4b、R_4c、R_4d和R_4e分别独立地选自H、F、Cl、Br或OCH₃。

在本发明的一些方案中，上述R_5a选自CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂CH₃或所述CH₃、CH₂CH₃、 CH₂CH₂CH₃或任选被1、2或3个R取代。

在本发明的一些方案中，上述R_5a选自CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂F、CH₂CH₂CH₃或

在本发明的一些方案中，上述R_5b选自H、CH₃或CH₂CH₃，所述CH₃或CH₂CH₃任选被1、2或3个 R取代。

在本发明的一些方案中，上述R_5b选自H、CH₃或CH₂CH₃。

在本发明的一些方案中，上述结构单元选自

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H、CH₃或OCH₃，所述CH₃或OCH₃任选被1、2或3个R取代，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H、CH₃或OCH₃，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_4a、R_4b、R_4c、R_4d和R_4e分别独立地选自H、F、Cl、Br或OCH₃，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_5a选自CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂CH₃或所述CH₃、CH₂CH₃、 CH₂CH₂CH₃或任选被1、2或3个R取代，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_5a选自CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂F、CH₂CH₂CH₃或其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_5b选自H、CH₃或CH₂CH₃，所述CH₃或CH₂CH₃任选被1、2或3个R取代，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R_5b选自H、CH₃或CH₂CH₃，其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述R_4a、R_4b、R_4c、R_4d和R_4e分别独立地选自H、F、Cl、Br或CH₃O，其他变量如上述所定义。

本发明提供了式(I-1)化合物及其药学上可接受的盐，

其中，

R₁和R₂分别独立地选自H、卤素、OH、CN、NH₂，或选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-5烷基、C_1-5杂烷基；

或者，R₁与R₂连接在一起，形成一个被2个R₅取代的4～6元环；

L₁选自：单键、-(C(R)₂)_m-、-O(C(R)₂)_m-、-S(C(R)₂)_m-；

m分别独立地选自：0、1或2；

R₅分别独立地选自H、卤素、OH、CN、NH₂，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-5烷基、C_1-5杂烷基、C_3-6环烷基、3～6元杂环烷基；

R₃选自H，或选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基、C_1-3杂烷基；

L₂选自：单键、-O-、-NH-；

环A选自：苯基、5～10元杂芳基；

R₄分别独立地选自：H、卤素、C_1-3烷基、C_1-3杂烷基、C_1-3炔基；

R分别独立地选自H、OH、CN、NH₂、卤素，或者选自任选被1、2或3个R’取代的：C_1-3烷基、C_1-3杂烷基；

所述C_1-5杂烷基、C_1-3杂烷基、3～6元杂环烷基、5～9元杂芳基之“杂”选自：-O-、＝O、N、-NH-、-S-、

＝S、-S(＝O)-、-S(＝O)₂-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NH-、-S(＝O)NH-；

R’选自F、Cl、Br、I、OH、CN、NH₂；

以上任何一种情况下，杂原子或杂原子团的数目分别独立地选自1、2或3。

本发明的一些方案中，上述R选自：H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、CH₃O、CF₃、CHF₂、CH₂F。

本发明的一些方案中，上述R₁和R₂分别独立地选自H、卤素、OH、CN、NH₂，或选自任选被1、2 或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃O、CH₃NH、(CH₃)₂N、(CH₃)₂NCH₂、CH₃OCH₂。

本发明的一些方案中，上述R₁和R₂分别独立地选自H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、 CH₃O、CH₃NH、(CH₃)₂N、(CH₃)₂NCH₂、CH₃OCH₂。

本发明的一些方案中，上述L₁选自：单键、-CH₂-、-(CH₂)₂-、-O-、-CH₂O-、-(CH₂)₂O-。

本发明的一些方案中，上述结构单元选自：

本发明的一些方案中，上述R₅分别独立地选自H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂，或选自任选被1、2 或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CH₃OCH₂、N(CH₃)₂、NH(CH₃)、

本发明的一些方案中，上述R₅分别独立地选自：F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、CH₂CH₂F、 CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CH₃OCH₂、N(CH₃)₂、

本发明的一些方案中，上述结构单元选自：

本发明的一些方案中，上述R₃选自H，或选自任选被1、2或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、 CH₃O、CH₃OCH₂。

本发明的一些方案中，上述R₃选自：H、CH₃、CH₃O。

本发明的一些方案中，上述R₄分别独立地选自：H、F、Cl、Br、I、CH₃、CH₃O、CH≡C-。

本发明的一些方案中，上述环A选自：苯基、噻吩基、吡咯基、呋喃基、吡啶基、吲哚基、苯并咪唑基。

本发明的一些方案中，上述选自：

本发明的一些方案中，上述R选自：H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、CH₃O、CF₃、CHF₂、CH₂F，其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述R₁和R₂分别独立地选自H、卤素、OH、CN、NH₂，或选自任选被1、2 或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃O、CH₃NH、(CH₃)₂N、(CH₃)₂NCH₂、CH₃OCH₂，其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述R₁和R₂分别独立地选自H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、CH₃O、CH₃NH、(CH₃)₂N、(CH₃)₂NCH₂、CH₃OCH₂，其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述L₁选自：单键、-CH₂-、-(CH₂)₂-、-O-、-CH₂O-、-(CH₂)₂O-，其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元选自：其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述R₅分别独立地选自H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂，或选自任选被1、2 或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CH₃OCH₂、N(CH₃)₂、NH(CH₃)、其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述R₅分别独立地选自：F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、CH₂CH₂F、 CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CH₃OCH₂、N(CH₃)₂、其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述R₃选自H，或选自任选被1、2或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、 CH₃O、CH₃OCH₂，其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述R₃选自：H、CH₃、CH₃O，其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述R₄分别独立地选自：H、F、Cl、Br、I、CH₃、CH₃O、CH≡C-，其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述环A选自：苯基、噻吩基、吡咯基、呋喃基、吡啶基、吲哚基、苯并咪唑基，其他变量如上述所定义。

本发明的一些方案中，上述选自：其他变量如上述所定义。

本发明提供式(I-2)化合物及其药学上可接受的盐，

其中，

L₁选自：单键、-(C(R)₂)_m-、-O(C(R)₂)_m-、-S(C(R)₂)_m-；

m分别独立地选自：0、1或2；

L₂选自：单键、-O-、-NH-；

L₃选自：-C(R)₂-；

环A选自：苯基、5～10元杂芳基；

R₄分别独立地选自：H、卤素、C_1-3烷基、C_1-3杂烷基、C_2-3炔基；

＝S、-S(＝O)-、-S(＝O)₂-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NH-、-S(＝O)NH-；

R’选自：F、Cl、Br、I、OH、CN、NH₂；

在本发明的一些方案中，上述R选自：H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、CH₃O、CF₃、CHF₂、CH₂F。

在本发明的一些方案中，上述R₁和R₂分别独立地选自H、卤素、OH、CN、NH₂，或选自任选被1、 2或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃O、CH₃NH、(CH₃)₂N、(CH₃)₂NCH₂、CH₃OCH₂。

在本发明的一些方案中，上述R₁和R₂分别独立地选自H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、 CH₃O、CH₃NH、(CH₃)₂N、(CH₃)₂NCH₂、CH₃OCH₂。

在本发明的一些方案中，上述L₁选自：单键、-O-、-S-、-C(R)₂-、-(C(R)₂)₂-、-OC(R)₂-和-O(C(R)₂)₂-。在本发明的一些方案中，上述L₁选自单键、-O-、-S-、-CH₂-、-(CH₂)₂-、-CH₂O-和-(CH₂)₂O-。

在本发明的一些方案中，上述结构单元选自：在本发明的一些方案中，上述结构单元选自：

在本发明的一些方案中，上述结构单元选自：

在本发明的一些方案中，上述结构单元选自

在本发明的一些方案中，上述R₅分别独立地选自H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂，或选自任选被1、 2或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CH₃OCH₂、N(CH₃)₂、NH(CH₃)、

在本发明的一些方案中，上述R₅分别独立地选自：F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、CH₂CH₂F、 CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CH₃OCH₂、N(CH₃)₂、

在本发明的一些方案中，上述结构单元选自

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H、CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O和CH₃OCH₂，或选自任选被1、2或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O和CH₃OCH₂。

在本发明的一些方案中，上述R₃选自：H、CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CHF₂O、CH₃OCH₂。

在本发明的一些方案中，上述R₄分别独立地选自：H、F、Cl、Br、I、CH₃、CH₃O和CH≡C-。

在本发明的一些方案中，上述环A选自苯基、噻吩基、吡咯基、呋喃基、吡啶基、吲哚基和苯并咪唑基。

在本发明的一些方案中，上述选自

在本发明的一些方案中，上述R选自：H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、CH₃O、CF₃、CHF₂、CH₂F，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R₁和R₂分别独立地选自H、卤素、OH、CN、NH₂，或选自任选被1、 2或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃O、CH₃NH、(CH₃)₂N、(CH₃)₂NCH₂、CH₃OCH₂，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R₁和R₂分别独立地选自H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、 CH₃O、CH₃NH、(CH₃)₂N、(CH₃)₂NCH₂、CH₃OCH₂，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述L₁选自：单键、-O-、-S-、-C(R)₂-、-(C(R)₂)₂-、-OC(R)₂-和-O(C(R)₂)₂-，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述L₁选自单键、-O-、-S-、-CH₂-、-(CH₂)₂-、-CH₂O-和-(CH₂)₂O-，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述结构单元选自：其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R₅分别独立地选自H、F、Cl、Br、OH、CN、NH₂，或选自任选被1、 2或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CH₃OCH₂、N(CH₃)₂、NH(CH₃)、其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R₅分别独立地选自：F、Cl、Br、OH、CN、NH₂、CH₃、CH₃CH₂、CH₂CH₂F、 CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CH₃OCH₂、N(CH₃)₂、其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R₃选自H、CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O和CH₃OCH₂，或选自任选被1、2或3个R取代的：CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O和CH₃OCH₂，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R₃选自：H、CH₃、CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、CH₃O、CHF₂O、CH₃OCH₂，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述R₄分别独立地选自：H、F、Cl、Br、I、CH₃、CH₃O和CH≡C-，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述环A选自苯基、噻吩基、吡咯基、呋喃基、吡啶基、吲哚基和苯并咪唑基，其他变量如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述选自其他变量如上述所定义。

本发明还有一些方案是由上述各变量任意组合而来。

在本发明的一些方案中，上述化合物选自：其中，R₁、R₂、R₃、R₄如上述所定义。

在本发明的一些方案中，上述化合物选自：

其中，R、R₃、R₄、R₅如上述所定义。

本发明提供了下式化合物：

在本发明的一些方案中，上述化合物选自

本发明还提供了一种药物组合物，其含有治疗有效量的上述化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或上述药物组合物在制备治疗癌症药物中的应用。

本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗脑转移肺癌药物中的应用。

技术效果

本发明涉及一系列新型喹唑啉类化合物作为EGFR突变抑制剂，用于脑转移癌症的治疗。本发明的新颖喹唑啉类化合物对EGFR突变具有较高的酶和细胞株活性；同时，化合物类药性质良好，具有较高的通透性，并且体外代谢稳定性良好。因此，该类化合物对EGFR突变脑转移癌症可能会提供更加有效的治疗。

定义和说明

除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机氨或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸，碳酸氢根，磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等；以及有机酸盐，所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸；还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐，以及如葡糖醛酸等有机酸的盐(参见Berge et al.,"PharmaceuticalSalts",Journal of Pharmaceutical Science 66:1-19(1977))。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。

优选地，以常规方式使盐与碱或酸接触，再分离母体化合物，由此再生化合物的中性形式。化合物的母体形式与其各种盐的形式的不同之处在于某些物理性质，例如在极性溶剂中的溶解度不同。

本文所用的“药学上可接受的盐”属于本发明化合物的衍生物，其中，通过与酸成盐或与碱成盐的方式修饰所述母体化合物。药学上可接受的盐的实例包括但不限于：碱基比如胺的无机酸或有机酸盐、酸根比如羧酸的碱金属或有机盐等等。药学上可接受的盐包括常规的无毒性的盐或母体化合物的季铵盐，例如无毒的无机酸或有机酸所形成的盐。常规的无毒性的盐包括但不限于那些衍生自无机酸和有机酸的盐，所述的无机酸或有机酸选自2-乙酰氧基苯甲酸、2-羟基乙磺酸、乙酸、抗坏血酸、苯磺酸、苯甲酸、碳酸氢根、碳酸、柠檬酸、依地酸、乙烷二磺酸、乙烷磺酸、富马酸、葡庚糖、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、氢溴酸、盐酸、氢碘酸盐、羟基、羟萘、羟乙磺酸、乳酸、乳糖、十二烷基磺酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲烷磺酸、硝酸、草酸、双羟萘酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、多聚半乳糖醛、丙酸、水杨酸、硬脂酸、亚乙酸、琥珀酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、硫酸、单宁、酒石酸和对甲苯磺酸。

本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。一般地，优选醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈等非水介质。

除了盐的形式，本发明所提供的化合物还存在前药形式。本文所描述的化合物的前药容易地在生理条件下发生化学变化从而转化成本发明的化合物。此外，前体药物可以在体内环境中通过化学或生化方法被转换到本发明的化合物。

本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式或者溶剂化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶剂化形式与非溶剂化的形式相当，都包含在本发明的范围之内。

本发明的某些化合物可以具有不对称碳原子(光学中心)或双键。外消旋体、非对映异构体、几何异构体和单个的异构体都包括在本发明的范围之内。

除非另有说明，用楔形键和虚线键表示一个立体中心的绝对构型，用波浪线表示楔形键或虚线键(或)，用表示立体中心的相对构型。当本文所述化合物含有烯属双键或其它几何不对称中心，除非另有规定，它们包括E、Z几何异构体。同样地，所有的互变异构形式均包括在本发明的范围之内。

本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。

可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合 (例如由胺生成氨基甲酸盐)。

本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氚(³H)，碘-125(¹²⁵I)或C-14(¹⁴C)。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。

术语“药学上可接受的载体”是指能够递送本发明有效量活性物质、不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或者患者无毒副作用的任何制剂或载体介质代表性的载体包括水、油、蔬菜和矿物质、膏基、洗剂基质、软膏基质等。这些基质包括悬浮剂、增粘剂、透皮促进剂等。它们的制剂为化妆品领域或局部药物领域的技术人员所周知。关于载体的其他信息，可以参考Remington:The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed.,Lippincott,Williams&Wilkins(2005)，该文献的内容通过引用的方式并入本文。

术语“赋形剂”通常是指配制有效的药物组合物所需要载体、稀释剂和/或介质。

针对药物或药理学活性剂而言，术语“有效量”或“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。对于本发明中的口服剂型，组合物中一种活性物质的“有效量”是指与该组合物中另一种活性物质联用时为了达到预期效果所需要的用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。

术语“活性成分”、“治疗剂”，“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。

“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。

术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为酮基(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。酮取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。

当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0-2个R所取代，则所述基团可以任选地至多被两个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。

当一个连接基团的数量为0时，比如-(CRR)₀-，表示该连接基团为单键。

当其中一个变量选自单键时，表示其连接的两个基团直接相连，比如A-L-Z中L代表单键时表示该结构实际上是A-Z。

当一个取代基为空缺时，表示该取代基是不存在的，比如A-X中X为空缺时表示该结构实际上是A。当一个取代基的键可以交叉连接到一个环上的两个原子时，这种取代基可以与这个环上的任意原子相键合。当所列举的取代基中没有指明其通过哪一个原子连接到化学结构通式中包括但未具体提及的化合物时，这种取代基可以通过其任何原子相键合。取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。例如，结构单元表示其可在环己基或者环己二烯上的任意一个位置发生取代。

除非另有规定，术语“杂”表示杂原子或杂原子团(即含有杂原子的原子团)，包括碳(C)和氢(H)以外的原子以及含有这些杂原子的原子团，例如包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、硅(Si)、锗(Ge)、铝(Al)、硼(B)、-O-、- S-、＝O、＝S、-C(＝O)O-、-C(＝O)-、-C(＝S)-、-S(＝O)、-S(＝O)₂-，以及任选被取代的-C(＝O)N(H)-、-N(H)-、 -C(＝NH)-、-S(＝O)₂N(H)-或-S(＝O)N(H)-。

除非另有规定，“环”表示被取代或未被取代的环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、环炔基、杂环炔基、芳基或杂芳基。所谓的环包括单环、联环、螺环、并环或桥环。环上原子的数目通常被定义为环的元数，例如，“5～7元环”是指环绕排列5～7个原子。除非另有规定，该环任选地包含1～3个杂原子。因此，“5～7元环”包括例如苯基、吡啶和哌啶基；另一方面，术语“5～7元杂环烷基环”包括吡啶基和哌啶基，但不包括苯基。术语“环”还包括含有至少一个环的环系，其中的每一个“环”均独立地符合上述定义。

除非另有规定，术语“杂环”或“杂环基”意指稳定的含杂原子或杂原子团的单环、双环或三环，它们可以是饱和的、部分不饱和的或不饱和的(芳族的)，它们包含碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和 S的环杂原子，其中上述任意杂环可以稠合到一个苯环上形成双环。氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和 S(O)p，p是1或2)。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已经定义过的其他取代基)。该杂环可以附着到任何杂原子或碳原子的侧基上从而形成稳定的结构。如果产生的化合物是稳定的，本文所述的杂环可以发生碳位或氮位上的取代。杂环中的氮原子任选地被季铵化。一个优选方案是，当杂环中S及O原子的总数超过1时，这些杂原子彼此不相邻。另一个优选方案是，杂环中S及O原子的总数不超过1。如本文所用，术语“芳族杂环基团”或“杂芳基”意指稳定的5、6、7元单环或双环或7、 8、9或10元双环杂环基的芳香环，它包含碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的环杂原子。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已经定义过的其他取代基)。氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)p，p是1或2)。值得注意的是，芳香杂环上S和O原子的总数不超过 1。桥环也包含在杂环的定义中。当一个或多个原子(即C、O、N或S)连接两个不相邻的碳原子或氮原子时形成桥环。优选的桥环包括但不限于：一个碳原子、两个碳原子、一个氮原子、两个氮原子和一个碳-氮基。值得注意的是，一个桥总是将单环转换成三环。桥环中，环上的取代基也可以出现在桥上。

杂环化合物的实例包括但不限于：吖啶基、吖辛因基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并巯基呋喃基、苯并巯基苯基、苯并恶唑基、苯并恶唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异恶唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、苯并二氢吡喃基、色烯、噌啉基十氢喹啉基、 2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2,3-b]四氢呋喃基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、 1H-吲唑基、吲哚烯基、二氢吲哚基、中氮茚基、吲哚基、3H-吲哚基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异二氢吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异恶唑基、亚甲二氧基苯基、吗啉基、萘啶基，八氢异喹啉基、恶二唑基、 1,2,3-恶二唑基、1,2,4-恶二唑基、1,2,5-恶二唑基、1,3,4-恶二唑基、恶唑烷基、恶唑基、羟吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪、吩噻嗪、苯并黄嘌呤基、酚恶嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4- 哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并恶唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、 4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基，6H-1,2,5-噻二嗪基、 1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、异噻唑基噻吩基、噻吩并恶唑基、噻吩并噻唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、 1,3,4-三唑基和呫吨基。还包括稠环和螺环化合物。

除非另有规定，术语“烃基”或者其下位概念(比如烷基、烯基、炔基、芳基等等)本身或者作为另一取代基的一部分表示直链的、支链的或环状的烃原子团或其组合，可以是完全饱和的(如烷基)、单元或多元不饱和的(如烯基、炔基、芳基)，可以是单取代或多取代的，可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价 (如次甲基)，可以包括二价或多价原子团，具有指定数量的碳原子(如C₁-C₁₂表示1至12个碳，C_1-12选自 C₁、C₂、C₃、C₄、C₅、C₆、C₇、C₈、C₉、C₁₀、C₁₁和C₁₂；C_3-12选自C₃、C₄、C₅、C₆、C₇、C₈、C₉、C₁₀、 C₁₁和C₁₂。)。“烃基”包括但不限于脂肪烃基和芳香烃基，所述脂肪烃基包括链状和环状，具体包括但不限于烷基、烯基、炔基，所述芳香烃基包括但不限于6-12元的芳香烃基，例如苯、萘等。在一些实施例中，术语“烃基”表示直链的或支链的原子团或它们的组合，可以是完全饱和的、单元或多元不饱和的，可以包括二价和多价原子团。饱和烃原子团的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、异丁基、环己基、(环己基)甲基、环丙基甲基，以及正戊基、正己基、正庚基、正辛基等原子团的同系物或异构体。不饱和烃基具有一个或多个双键或三键，其实例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、丁烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2，4-戊二烯基、3-(1，4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基，3-丁炔基，以及更高级的同系物和异构体。

除非另有规定，术语“杂烃基”或者其下位概念(比如杂烷基、杂烯基、杂炔基、杂芳基等等)本身或者与另一术语联合表示稳定的直链的、支链的或环状的烃原子团或其组合，有一定数目的碳原子和至少一个杂原子组成。在一些实施例中，术语“杂烷基”本身或者与另一术语联合表示稳定的直链的、支链的烃原子团或其组合物，有一定数目的碳原子和至少一个杂原子组成。在一个典型实施例中，杂原子选自B、O、N和 S，其中氮和硫原子任选地被氧化，氮杂原子任选地被季铵化。杂原子或杂原子团可以位于杂烃基的任何内部位置，包括该烃基附着于分子其余部分的位置，但术语“烷氧基”、“烷氨基”和“烷硫基”(或硫代烷氧基)属于惯用表达，是指分别通过一个氧原子、氨基或硫原子连接到分子的其余部分的那些烷基基团。实例包括但不限于-CH₂-CH₂-O-CH₃、-CH₂-CH₂-NH-CH₃、-CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃、-CH₂-S-CH₂-CH₃、-CH₂-CH₂、-S(O)- CH₃、-CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃、-CH＝CH-O-CH₃、-CH₂-CH＝N-OCH₃和–CH＝CH-N(CH₃)-CH₃。至多两个杂原子可以是连续的，例如-CH₂-NH-OCH₃。

除非另有规定，术语“环烃基”、“杂环烃基”或者其下位概念(比如芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、环炔基、杂环炔基等等)本身或与其他术语联合分别表示环化的“烃基”、“杂烃基”。此外，就杂烃基或杂环烃基(比如杂烷基、杂环烷基)而言，杂原子可以占据该杂环附着于分子其余部分的位置。环烃基的实例包括但不限于环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。杂环基的非限制性实例包括1-(1,2,5,6-四氢吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基，3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃吲哚-3-基、四氢噻吩-2-基、四氢噻吩-3-基，1-哌嗪基和2-哌嗪基。

除非另有规定，术语“烷基”用于表示直链或支链的饱和烃基,可以是单取代(如-CH₂F)或多取代的(如- CF₃)，可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价(如次甲基)。烷基的例子包括甲基(Me)，乙基(Et)，丙基(如，n-丙基和异丙基)，丁基(如，n-丁基，异丁基，s-丁基，t-丁基)，戊基(如，n-戊基，异戊基，新戊基)等。

除非另有规定，“烯基”指在链的任何位点上具有一个或多个碳碳双键的烷基,可以是单取代或多取代的，可以是一价、二价或者多价。烯基的例子包括乙烯基，丙烯基，丁烯基，戊烯基，己烯基，丁间二烯基，戊间二烯基，己间二烯基等。

除非另有规定，“炔基”指在链的任何位点上具有一个或多个碳碳三键的烷基，可以是单取代或多取代的，可以是一价、二价或者多价。炔基的例子包括乙炔基，丙炔基，丁炔基，戊炔基等。

除非另有规定，环烷基包括任何稳定的环状或多环烃基，任何碳原子都是饱和的，可以是单取代或多取代的，可以是一价、二价或者多价。这些环烷基的实例包括，但不限于，环丙基、降冰片烷基、[2.2.2]二环辛烷、[4.4.0]二环癸烷等。

除非另有规定，环烯基包括任何稳定的环状或多环烃基，该烃基在环的任何位点含有一个或多个不饱和的碳-碳双键，可以是单取代或多取代的，可以是一价、二价或者多价。这些环烯基的实例包括，但不限于，环戊烯基、环己烯基等。

除非另有规定，环炔基包括任何稳定的环状或多环烃基，该烃基在环的任何位点含有一个或多个碳-碳三键，可以是单取代或多取代的，可以是一价、二价或者多价。

除非另有规定，术语“卤代素”或“卤素”本身或作为另一取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子。此外，术语“卤代烷基”意在包括单卤代烷基和多卤代烷基。例如，术语“卤代(C₁-C₄)烷基”意在包括但不仅限于三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯丁基和3-溴丙基等等。除非另有规定，卤代烷基的实例包括但不仅限于：三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基，和五氯乙基。

“烷氧基”代表通过氧桥连接的具有特定数目碳原子的上述烷基，除非另有规定，C_1-6烷氧基包括C₁、 C₂、C₃、C₄、C₅和C₆的烷氧基。烷氧基的例子包括但不限于：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基和S-戊氧基。

除非另有规定，术语“芳基”表示多不饱和的芳族烃取代基，可以是单取代或多取代的，可以是一价、二价或者多价，它可以是单环或多环(比如1至3个环；其中至少一个环是芳族的)，它们稠合在一起或共价连接。术语“杂芳基”是指含有一至四个杂原子的芳基(或环)。在一个示范性实例中，杂原子选自B、N、 O和S，其中氮和硫原子任选地被氧化，氮原子任选地被季铵化。杂芳基可通过杂原子连接到分子的其余部分。芳基或杂芳基的非限制性实施例包括苯基、萘基、联苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡嗪基、恶唑基、苯基-恶唑基、异恶唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、苯并噻唑基、嘌呤基、苯并咪唑基、吲哚基、异喹啉基、喹喔啉基、喹啉基、1-萘基、2-萘基、4-联苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-恶唑基、4-恶唑基、2-苯基-4-恶唑基、5-恶唑基、3-异恶唑基、4-异恶唑基、5-异恶唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。上述任意一个芳基和杂芳基环系的取代基选自下文所述的可接受的取代基。

除非另有规定，芳基在与其他术语联合使用时(例如芳氧基、芳硫基、芳烷基)包括如上定义的芳基和杂芳基环。因此，术语“芳烷基”意在包括芳基附着于烷基的那些原子团(例如苄基、苯乙基、吡啶基甲基等)，包括其中碳原子(如亚甲基)已经被例如氧原子代替的那些烷基，例如苯氧基甲基、2-吡啶氧甲基3-(1-萘氧基)丙基等。

术语“离去基团”是指可以被另一种官能团或原子通过取代反应(例如亲和取代反应)所取代的官能团或原子。例如，代表性的离去基团包括三氟甲磺酸酯；氯、溴、碘；磺酸酯基，如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、对溴苯磺酸酯、对甲苯磺酸酯等；酰氧基，如乙酰氧基、三氟乙酰氧基等等。

术语“保护基”包括但不限于“氨基保护基”、“羟基保护基”或“巯基保护基”。术语“氨基保护基”是指适合用于阻止氨基氮位上副反应的保护基团。代表性的氨基保护基包括但不限于：甲酰基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基、三氯乙酰基或三氟乙酰基)；烷氧基羰基，如叔丁氧基羰基(Boc)；芳基甲氧羰基，如苄氧羰基(Cbz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)；芳基甲基，如苄基(Bn)、三苯甲基(Tr)、1,1-二-(4'-甲氧基苯基)甲基；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。术语“羟基保护基”是指适合用于阻止羟基副反应的保护基。代表性羟基保护基包括但不限于：烷基，如甲基、乙基和叔丁基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基)；芳基甲基，如苄基(Bn)，对甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基， DPM)；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。

本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。

本发明所使用的溶剂可经市售获得。本发明采用下述缩略词：aq代表水；HATU代表O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸盐；EDC代表N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐；m-CPBA代表3-氯过氧苯甲酸；当量代表当量、等量；CDI代表羰基二咪唑；DCM代表二氯甲烷； PE代表石油醚；DIAD代表偶氮二羧酸二异丙酯；DMF代表N，N-二甲基甲酰胺；DMSO代表二甲亚砜； EtOAc代表乙酸乙酯；EtOH代表乙醇；MeOH代表甲醇；CBz代表苄氧羰基，是一种胺保护基团；BOC 代表叔丁基羰基是一种胺保护基团；HOAc代表乙酸；NaCNBH₃代表氰基硼氢化钠；r.t.代表室温；O/N 代表过夜；THF代表四氢呋喃；Boc₂O代表二-叔丁基二碳酸酯；TFA代表三氟乙酸；DIPEA代表二异丙基乙基胺；SOCl₂代表氯化亚砜；CS₂代表二硫化碳；TsOH代表对甲苯磺酸；NFSI代表N-氟-N-(苯磺酰基)苯磺酰胺；NCS代表1-氯吡咯烷-2,5-二酮；n-Bu₄NF代表氟化四丁基铵；iPrOH代表2-丙醇；mp代表熔点；LDA代表二异丙基胺基锂；AcCl代表乙酰氯。

本发明所述EGFR WT是指EGFR野生型；EGFR[d746-750]/[Δ19del]是指EGFR外显子19缺失；DTT 是指二硫苏糖醇；HTRF KinEASE TK Kit是指均相时间分辨荧光激酶试剂盒；Orthovanadate是指原钒酸盐；BSA是指牛血清白蛋白；NADPH是指还原型辅酶Ⅱ；HEPES是指羟乙基哌嗪乙硫磺酸；DPBS是指磷酸盐缓冲液；Cell-Titer Glo reagent是指细胞增殖检测试剂。

本发明实验例供试品中，某化合物的甲酸盐系该化合物经色谱法在甲酸体系(A相：H₂O+0.225％甲酸，B相：乙腈)下分离纯化得到，某化合物盐酸盐系该化合物经色谱法在盐酸体系(A相：H₂O+0.05％盐酸，B相：乙腈)下分离纯化得到，某些化合物自由碱经过薄层色谱或柱层析分离。例如，化合物30的甲酸盐系该化合物经高效液相色谱在甲酸体系下分离纯化得到，化合物30的盐酸盐系该化合物经高效液相色谱在盐酸体系下分离纯化得到。

化合物经手工或者软件命名，市售化合物采用供应商目录名称。

附图说明

图1为PC-9原位脑转移模型在给予化合物后的生物荧光曲线。

图2为式(I-1)所示化合物制备路线。

具体实施方式

为了更详细地说明本发明，给出下列实例，但本发明的范围并非限定于此。

式(I-1)所示化合物制备路线见图2。

实施例1

化合物1A

将2-氨基-4-甲氧基苯甲酸(5.00克，29.91毫摩尔)溶解在乙酸(10毫升)和乙腈(100毫升)中，在0℃及氮气氛围保护下，将液溴(4.78克，29.91毫摩尔)缓慢滴加到反应液中，反应液在20℃搅拌1小时。TLC显示反应完成。反应液浓缩后，依次用水(100毫升)和石油醚(100毫升)打浆。真空干燥得到化合物1A。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)＝7.76(s,1H),6.41(s,1H),3.79(s,3H)。

化合物1B

将化合物1A(5.9克，18.94毫摩尔)和醋酸甲脒(3.55克，34.10毫摩尔)溶解在乙二醇单甲醚(10毫升) 中，反应液在120℃及氮气氛围保护下搅拌3小时。TLC显示反应完成。反应液冷却至室温，析出固体，过滤，滤饼分别用乙酸乙酯(10毫升×2)、石油醚(20毫升×3)和水(50毫升×2)洗涤，干燥后得到化合物1B。LCMS(ESI):m/z:254.9[M+1]。

化合物1C

将化合物1B(500毫克，1.83毫摩尔)溶解在氯化亚砜(6毫升)中，向反应液中加入DMF(1.34克，18.27 毫摩尔,1.41毫升)，反应液在90℃及氮气氛围保护下搅拌12小时。LCMS检测到目标化合物并且TLC显示反应完成。反应液浓缩后用柱色谱(硅胶,乙酸乙酯:石油醚＝0:1，1:3)分离纯化，得到化合物1C。LCMS (ESI):m/z:273.0[M+1]。

化合物1D

将化合物1C(2.47克，9.03毫摩尔)和3-氯-2-氟苯胺(1.31克，9.03毫摩尔)溶解在异丙醇(30毫升)中，反应液在60℃及氮气氛围保护下搅拌2小时。液相质谱检测到目标化合物并且TLC显示反应完成。反应液冷却至室温，向反应液中加入石油醚(40毫升)并搅拌半小时，过滤得到固体并用石油醚(30毫升)洗涤，将得到的固体缓慢加入到碳酸氢钠溶液(40毫升)中搅拌半小时，过滤得到固体，用水(20毫升)和石油醚(30 毫升)洗涤，固体真空干燥后得到标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)＝8.78(s,1H),8.43(s,1H),7.46 (td,J＝7.4,19.7Hz,2H),7.29-7.22(m,2H),4.01(s,3H)。LCMS(ESI):m/z:382.1[M+1]。

化合物1E

将4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.00克，14.27毫摩尔)溶于四氢呋喃(30.00毫升)中，在-78℃及氮气氛围保护下，将六甲基二硅基氨基锂(1M,28.54毫升)缓慢滴入到反应液中，反应液在-78℃下搅拌1小时，然后向反应液中缓慢滴入氯甲酸乙酯(3.10克，28.54毫摩尔)，-78℃下搅拌1小时。TLC显示反应完成。用饱和碳酸氢钠溶液(15毫升)淬灭反应液，用乙酸乙酯(20毫升×2)萃取，合并有机相，用饱和氯化铵溶液(50毫升)洗涤后，无水硫酸钠(10克)干燥，过滤浓缩得到化合物1E。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝4.23(q,J＝7.1 Hz,2H),4.00-3.92(m,2H),2.95(br s,2H),2.07(br d,J＝13.3Hz,2H),1.89-1.76(m,2H),1.40(s,9H),1.24(t, J＝7.1Hz,3H)。

化合物1F

将化合物1E(2.30克，8.15毫摩尔)溶于甲醇(15.00毫升)中，在0℃下向反应液中加入硼氢化钠(369.82 毫克，9.78毫摩尔)，在0-20℃及氮气氛围保护下搅拌1小时。TLC显示反应完成。反应液浓缩后，加入饱和碳酸氢钠溶液(20毫升)淬灭反应液，用乙酸乙酯(20毫升×2)萃取，合并有机相浓缩后，粗品用柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝50:1到5:1)分离纯化，得到化合物1F。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝4.28-4.06(m,2H), 3.67(s,2H),3.04(brt,J＝12.0Hz,2H),1.96(br dd,J＝1.9,13.4Hz,2H),1.51-1.43(m,11H)。

化合物1G

将化合物1F(500.00毫克，2.08毫摩尔)溶于甲醇(20毫升)中，在氮气氛围保护下向反应液中加入雷尼镍(0.2克)，反应体系用氢气置换三次，在氢气(50Psi)氛围下及30℃下搅拌2小时。TLC显示反应完成。反应液过滤、浓缩后得到化合物1G。¹HNMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝3.71(s,2H),3.57(br d,J＝13.3Hz,2H),3.23 (ddd,J＝3.5,9.7,13.5Hz,2H),2.84(s,2H),1.59-1.51(m,2H),1.46(s,11H),1.33(ddd,J＝4.2,9.5,13.6Hz,3H)。

化合物1H

将化合物1G(1.05克，4.30毫摩尔)和三乙胺(1.09克，10.74毫摩尔)溶于二氯甲烷(20毫升)中，在-40℃下向反应液中通入二氧化碳15分钟，然后在-40℃下向反应液中缓慢滴入AcCl(212.64毫克，4.30毫摩尔)并搅拌15分钟，20℃下继续搅拌39.5小时。TLC显示反应完成。将反应液浓缩，粗品用柱色谱(二氯甲烷：甲醇＝100:1到20:1)分离纯化，得到化合物1H。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)＝5.99(br.s.,1H),4.07(s,2H), 3.54-3.48(m,2H),3.39-3.32(m,2H),3.20(s,2H),1.56(t,J＝5.8Hz,4H),1.47(s,9H)。

化合物1I

将化合物1D(100.0毫克，261.36微摩尔)和化合物1H(77.72毫克，287.50微摩尔)加入到1,4-二氧六环(2毫升)中，然后向反应液中分别加入碳酸铯(170.31毫克，522.73微摩尔)，碘化亚铜(29.87毫克，156.82微摩尔) 和N,N’-二甲基-1,2-乙二胺(13.82毫克，156.82微摩尔)，120℃及氮气氛围保护下搅拌24小时。液相质谱检测到目标化合物。将反应液加入二氯甲烷：甲醇＝10:1(22毫升)打浆，过滤，滤液浓缩后粗品采用制备薄层色谱(二氯甲烷：甲醇＝20:1)分离纯化，得到化合物1I。LCMS(ESI):m/z:572.2[M+1]。

化合物1J

将化合物1I(96.00毫克，131.91微摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)中，向反应液中加入三氟乙酸(1.2克，10.55 毫摩尔)，20℃及氮气氛围保护下搅拌1小时。液相质谱检测到目标化合物。将反应液减压浓缩后得到化合物1J。粗品直接用于下一步。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.83(s,1H),8.67(s,1H),7.65-7.51(m,3H), 7.35(br t,J＝8.1Hz,1H),4.46(brs,2H),4.23(s,4H),4.17(s,3H),3.76(br d,J＝5.3Hz,2H),2.05(br d,J＝13.2 Hz,2H),1.87(br t,J＝5.8Hz,7H)。LCMS(ESI):m/z:472.1[M+1]。

化合物1

将化合物1J(77.29毫克，131.91微摩尔，三氟乙酸盐)溶于甲醇(2.00毫升)中，向反应液中加入碳酸钠 (13.98毫克，131.91微摩尔)，40℃下搅拌0.5小时，随后加入多聚甲醛(47.53毫克，527.64微摩尔)继续搅拌0.5 小时，加入醋酸硼氢化钠(33.16毫克，527.64微摩尔)并在40℃下继续搅拌1小时。液相质谱检测到目标化合物。将反应液用DCM:MeOH＝10:1(22毫升)打浆，过滤，滤液浓缩后通过高效液相色谱分离纯化(流动相为甲酸体系)，最后得到化合物1的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.46(s,1H),8.32(s,1H), 7.58(br t,J＝7.0Hz,1H),7.41(t,J＝6.7Hz,1H),7.33(s,1H),7.24(t,J＝8.0Hz,1H),4.37(brd,J＝12.7Hz,2H), 4.04(s,3H),3.66(br d,J＝15.8Hz,2H),3.28-3.19(m,2H),3.11(brs,2H),2.78(s,3H),1.94(br d,J＝6.0Hz, 4H)。LCMS(ESI):m/z:485.9[M+1]。

实施例2

化合物2A

在-78℃及氮气氛围保护下，将六甲基二硅基氨基锂(1M,60.23毫升)加入到四氢呋喃(60毫升)中，在搅拌下缓慢滴入乙酸乙酯(5.84克，66.25毫摩尔)，将溶解于四氢呋喃(40毫升)的4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯 (10.00克，50.19毫摩尔)滴加到反应液中，并缓慢升温至0℃，搅拌10小时。TLC显示反应完成。将反应液浓缩至60毫升左右，向反应液中加入饱和氯化铵溶液(80毫升)，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相用饱和氯化铵溶液(60毫升)洗涤后，用无水硫酸钠(5g)干燥，浓缩得到化合物2A。¹HNMR (400MHz,氘代氯仿)d＝4.22-4.13(m,2H),3.81(br.s.,1H),3.71(t,J＝6.1Hz,2H),3.19(br.s.,2H),2.45(s,2H),1.70-1.61(m,2H),1.51(br.s.,2H),1.44(s,9H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。

化合物2B

在25℃下，将化合物2A(5.00克，17.40毫摩尔)溶解在甲醇(15.00毫升)中，搅拌下加入氢氧化钠溶液 (4M,17.40毫升)，反应3小时。TLC显示大部分原料消耗完。将反应液浓缩，用乙酸乙酯(20毫升×2)萃取，水相用盐酸溶液(6N,20毫升)调节pH＝6，水相用乙酸乙酯(20毫升×3)萃取，合并有机相用饱和氯化钠溶液(25毫升)洗涤，无水硫酸钠(2g)干燥，浓缩得到化合物2B。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)＝3.95 -3.69(m,2H),3.20(br.s.,2H),2.52(s,2H),1.72(d,J＝12.8Hz,2H),1.60-1.49(m,2H),1.48-1.38(m,9H)。

化合物2C

将化合物2B(2克，7.71毫摩尔)和叠氮磷酸二苯酯(2.76克，10.02毫摩尔)溶解在甲苯(30毫升)中，在氮气氛围保护下，加入三乙胺(10.95克，108.25毫摩尔)，反应液在105℃下搅拌12小时。TLC显示反应完成。加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)淬灭反应液，用乙酸乙酯(20毫升×2)萃取，合并有机相用饱和氯化钠溶液(30毫升×3)洗涤，无水硫酸钠(2g)干燥，浓缩滤液，粗品加入乙酸乙酯(10毫升)溶清，然后缓慢加入石油醚(30毫升)，析出固体并过滤，滤饼用石油醚(30毫升)洗涤，真空干燥得到化合物2C。¹H NMR (400MHz,氘代氯仿)＝5.74(br.s.,1H),3.82(br.s.,2H),3.34-3.16(m,4H),1.93(d,J＝13.3Hz,2H),1.71-1.61 (m,2H),1.46(s,9H)。

化合物2D

将N4-(3-氯-4-氟-苯基)-7-甲氧基-喹唑啉-4,6-二胺(100.00毫克，304.33微摩尔)和亚硝酸异戊酯(71.31毫克， 608.67微摩尔)溶于乙腈(3.00毫升)中，然后向反应液中加入溴化铜(135.95毫克，608.67微摩尔)，反应液在65℃及氮气氛围保护下搅拌10小时。液相质谱检测到目标化合物。将反应液用DCM:MeOH＝10:1 (22毫升)溶液打浆，过滤，滤液浓缩后爬板(DCM:MeOH＝12:1)分离纯化，最后得到化合物2D。¹H NMR (400MHz,氘代甲醇)＝8.71(s,1H),8.53(br.s.,1H),8.05(d,J＝4.5Hz,1H),7.75-7.64(m,1H),7.32-7.19(m,2H),4.05(s,3H)。LCMS(ESI):m/z:382.1[M+1]。

化合物2E

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺，得到化合物2E。LCMS(ESI):m/z:558.2[M+1].

化合物2F

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2-氧代-1- 氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯，得到化合物2F。粗品直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z:458.2 [M+1]。

化合物2

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂-3,8- 二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系,得到化合物2的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)＝8.61- 8.55(m,1H),8.45(s,1H),8.04(dd,J＝2.2,6.5Hz,1H),7.79-7.56(m,1H),7.45-7.02(m,2H),4.06(s,3H),3.96 (s,2H),3.26(d,J＝11.0Hz,4H),2.83(s,3H),2.46-2.17(m,4H)。LCMS(ESI):m/z:472.2[M+1]。

实施例3

化合物3A

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，得到化合物3A。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)＝8.72(br.s.,1H),8.44(br.s.,1H),7.58(br.s.,1H),7.47(br.s.,2H), 7.31(s,2H),3.98(s,3H),3.82(s,2H),3.63-3.50(m,4H),1.87-1.69(m,4H),1.41(s,9H)。LCMS(ESI):m/z: 558.2[M+1]。

化合物3B

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2-氧代-1- 氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯，得到化合物3B。粗品直接用于下一步。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)＝8.77(s,1H),8.71(s,1H),7.58-7.50(m,2H),7.46(s,1H),7.30(dt,J＝1.2,8.1Hz,1H),4.15(s,3H), 4.01(s,2H),3.43-3.36(m,4H),2.29-2.15(m,4H)。LCMS(ESI):m/z:458.3[M+1]。

化合物3

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物3的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)＝8.46(br. s.,1H),8.41(s,1H),7.61-7.53(m,1H),7.46-7.37(m,1H),7.32(s,1H),7.23(dt,J＝1.2,8.1Hz,1H),4.06(s, 3H),3.94(s,2H),3.35-3.32(m,2H),3.25-3.17(m,2H),2.80(s,3H),2.38-2.30(m,2H),2.26-2.16(m,2H)。 LCMS(ESI):m/z:472.1[M+1]。

实施例4

化合物4A

根据化合物1D的方法制备，将3-氯-2-氟苯胺替换为3-氯-2-甲氧基苯胺，得到化合物4A。¹H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ＝9.76(s,1H),8.89(s,1H),8.44(s,1H),7.48(dd,J＝1.4,8.0Hz,1H),7.41(dd,J＝1.5,8.2Hz,1H), 7.31(s,1H),7.23-7.14(m,1H),4.02(s,3H),3.67(s,3H)。LCMS(ESI):m/z:394.0[M+1]。

化合物4B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-N-(3-氯-2-甲氧基苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺，得到化合物4B。¹HNMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.44(br.s.,2H),7.70(d,J＝7.0Hz,1H),7.34(dd,J＝1.4,8.0Hz,2H),7.17(t,J＝8.1Hz,1H),4.59(s,2H),4.05 (s,3H),3.89(s,2H),3.88-3.82(m,2H),3.79(s,3H),2.08(d,J＝13.7Hz,2H),1.95-1.87(m,2H),1.49(s,9H)。 LCMS(ESI):m/z:570.4[M+1]。

化合物4C

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((3-氯-2-甲氧基苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯，得到化合物4C。粗品直接用于下一步。¹H NMR(400MHz, 氘代甲醇)＝8.73(s,1H),8.67(s,1H),7.50(ddd,J＝1.5,6.8,8.2Hz,2H),7.40(s,1H),7.24(t,J＝8.1Hz,1H),4.15 (s,3H),4.00(s,2H),3.80(s,3H),3.49-3.38(m,4H),2.42-2.33(m,2H),2.25-2.17(m,2H).LCMS(ESI):m/z:470.1[M+1]。

化合物4

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-2-甲氧基苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂 -3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物4的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝ 8.46(br s,2H),7.72(d,J＝7.9Hz,1H),7.42-7.28(m,2H),7.21-7.14(m,1H),4.06(s,3H),3.94(s,2H),3.79(s, 3H),3.26-3.07(m,4H),2.73(s,3H),2.38-2.26(m,2H),2.24-2.10(m,2H)。LCMS(ESI):m/z:484.1[M+1]。

实施例5

化合物5

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，将多聚甲醛替换为丙酮，流动相为甲酸体系，得到化合物5的甲酸盐。¹H NMR(400MHz, 氘代甲醇)δ＝8.45(s,1H),8.41(s,1H),7.62-7.54(m,1H),7.40(dt,J＝1.4,7.4Hz,1H),7.32(s,1H),7.22(dt, J＝1.4,8.1Hz,1H),4.06(s,3H),3.95(s,2H),3.59-3.51(m,1H),3.50-3.40(m,2H),3.40-3.32(m,2H),2.48- 2.36(m,2H),2.34-2.22(m,2H),1.39(d,J＝6.5Hz,6H)。LCMS(ESI):m/z:500.1[M+1]。

实施例6

化合物6A

根据化合物1D的方法制备，将3-氯-2-氟苯胺替换为3,4-二氯-2-氟苯胺，得到化合物6A。¹H NMR(400MHz, 氘代甲醇)δ＝8.65(s,1H),8.46(s,1H),7.59(t,J＝8.2Hz,1H),7.44(dd,J＝1.7,8.8Hz,1H),7.26(s,1H),4.06(s, 3H)。LCMS(ESI):m/z:415.9[M+1]。

化合物6B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-N-(3,4-二氯-2-氟苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺，得到化合物6B。LCMS(ESI):m/z:592.0[M+1]。

化合物6C

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2-氧代 -1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯，得到化合物6C。粗品直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z: 492.0[M+1]。

化合物6

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂- 3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物6的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝ 8.47(s,1H),8.39(s,1H),7.61(br t,J＝8.3Hz,1H),7.44(dd,J＝1.9,8.8Hz,1H),7.33(s,1H),4.06(s,3H),3.93(s, 2H),3.28-3.10(m,4H),2.75(s,3H),2.34-2.14(m,4H)。LCMS(ESI):m/z:506.1[M+1]。

实施例7

化合物7A

将4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.00克，50.19毫摩尔)与乙基2-二乙氧基磷酰基乙酸酯(11.25克，50.19 毫摩尔)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(50.00毫升)中，然后再加入碳酸钾(13.87克，100.38毫摩尔)，反应液在80℃及氮气氛围保护下搅拌2小时。TLC显示反应完成。向反应液中加入水(600毫升)，用乙酸乙酯 (100毫升×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100毫升×2)洗涤后，无水硫酸钠(15g)干燥，过滤，滤液浓缩后用柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝20:1，10:1)分离纯化，得到化合物7A。¹HNMR(400MHz,氘代氯仿)δppm 5.71(s,1H),4.16(q,J＝7.15Hz,2H),3.49(dt,J＝11.14,5.79Hz,4H),2.94(t,J＝5.58Hz,2H),2.28(t, J＝5.65Hz,2H),1.47(s,9H),1.28(t,J＝7.09Hz,3H)。

化合物7B

50毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(256.57毫克，1.86毫摩尔)和二甲基亚砜(6毫升)，将该反应液搅拌并升温到80℃。然后再加入化合物7A(1.00克，3.71毫摩尔)，缓慢加入硝基甲烷(1.13克，18.56毫摩尔,1.00毫升)。反应液在80℃及氮气氛围保护下搅拌2小时。TLC显示反应完成。待反应液冷却到室温后，加入100毫升水中，用乙酸乙酯(30毫升×2)萃取。合并有机相，用饱和氯化钠溶液(30毫升× 2)洗涤后，无水硫酸钠(5.0g)干燥，过滤，滤液浓缩得到化合物7B。

化合物7C

将化合物4-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-4-(硝基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.10克，3.15毫摩尔)溶解于甲醇(10.00毫升)中。N2氛围下加入雷尼镍(1.00克)，抽真空除氧后再用氢气置换重复3次。反应液在氢气(压力50psi)和40℃下搅拌24小时。TLC显示反应完成。反应液用硅藻土过滤，滤液浓缩后粗品用柱色谱(硅胶,DCM:MeOH＝10:1)分离纯化，得到化合物7C。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm 5.78(br s,1H),3.49–3.6(m,2H),3.26-3.38(m,2H),3.21(s,2H),2.24(s,2H),1.58-1.65(m,4H),1.46(s,9H)

化合物7D

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为3-氧代-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D替换为6-溴-N-(3,4-二氯-2-氟苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺，得到化合物7D。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm 8.63(br s,1H),8.18(br s,1H),8.10(br s,1H),7.94(brs,1H),7.15(br s,1H),3.88(s,3H),3.71(s,2H),3.50 (br s,4H),2.54(s,2H),1.49(s,9H),1.42-1.47(m,4H)。LCMS(ESI):m/z:590.1[M+1]。

化合物7E

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为2-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-3-氧代 -2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，得到化合物7E。粗品直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z:490.1[M+1]。

化合物7

根据化合物1的方法制备，将1J替换为2-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物7的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δppm 8.46(br s,3H),8.30(s,1H),7.61(br t,J＝8.16Hz,1H),7.45(dd,J＝8.85,1.82Hz,1H),7.33(s,1H),4.03(s, 3H),3.80(s,2H),3.15-3.29(m,3H),2.84(s,3H),2.57-2.69(m,2H),2.08(br s,4H)LCMS(ESI):m/z:504.0 [M+1]。

实施例8

化合物8A

将哌啶-4-甲酸乙酯(5.00g,31.80毫摩尔)和二异丙基乙胺(8.22克，63.60毫摩尔)溶于四氢呋喃(50.00 毫升)中，向其中加入Boc₂O(6.94克，31.80毫摩尔)，30℃及氮气氛围保护下搅拌5小时。TLC显示反应完成。将反应液浓缩后，加入二氯甲烷(30毫升)并用碳酸钾溶液(15毫升)洗涤两次。有机相用无水硫酸钠(1g)干燥，滤液浓缩后通过柱色谱(DCM:MeOH＝20:1to 10:1)分离得到化合物8A。¹H NMR(400MHz, 氘代氯仿)＝4.14(q,J＝7.1Hz,2H),4.02(d,J＝8.9Hz,2H),2.83(t,J＝11.7Hz,2H),2.47-2.39(m,1H),1.87(d, J＝10.9Hz,2H),1.69-1.59(m,2H),1.46(s,9H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H)。

化合物8B

将1-叔丁基-4-乙基哌啶-1,4-二羧酸酯(4.00克，15.54毫摩尔)溶于四氢呋喃(20毫升)中，然后在氮气氛围保护下及-65℃向其中加入二异丙基氨基锂(2M,10.88毫升)，反应液在-65℃搅拌1.5h。然后向反应液中加入经过四氢呋喃(5毫升)稀释的溴乙腈(2.80克，23.32毫摩尔)，反应液在-65℃搅拌1.5小时。然后反应液在20℃搅拌12h。TLC显示有新产物出现但原料并未完全消耗。向反应液中加入氯化铵溶液(50毫升)并用乙酸乙酯(50毫升)萃取四次。合并有机相用无水硫酸钠(3g)干燥，浓缩后通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝10:1到3:1)得到化合物8B。¹HNMR(400MHz,氘代氯仿)＝4.26(d,J＝7.1Hz,2H),3.83(d,J ＝10.8Hz,2H),3.08(br.s.,2H),2.60(s,2H),2.23-2.11(m,2H),1.60-1.52(m,2H),1.46(s,9H),1.32(t,J＝7.2 Hz,3H).

化合物8C

将4-(氰基甲基)哌啶-1,4-二甲酸-1-叔丁基-4-乙酯(1.80克，6.07毫摩尔)和氨水(2.00毫升)溶于甲醇 (40.00毫升)中，氮气氛围下向其中加入雷尼镍(1.80克)。将反应体系抽真空置换氮气三次并置换氢气三次。反应液在氢气(50Psi)及60℃下搅拌15小时。TLC显示原料完全消耗。将反应液加入甲醇(20毫升)过滤，滤液浓缩后，向其中加入水(20毫升)，并用乙酸乙酯(25毫升)萃取三次。合并有机相，无水硫酸钠(1g) 干燥，过滤，滤液浓缩后得到化合物8C。¹HNMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝6.01(br s,1H),3.99(br s,2H), 3.35(t,J＝6.8Hz,2H),2.99(br t,J＝11.3Hz,2H),2.13-2.01(m,2H),1.91-1.79(m,2H),1.46(s,11H)。

化合物8D

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为1-氧代-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D替换为 6-溴-N-(3,4-二氯-2-氟苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺，得到化合物8D。粗产品直接用于下一步。LCMS(ESI): m/z:590.1[M+1]。

化合物8E

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为2-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧代 -2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，得到化合物8E。粗品直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z:490.0[M+1]。

化合物8

根据化合物1的方法制备，将1J替换为2-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物8的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.47 (br s,1H),8.30(s,1H),7.61(br t,J＝8.0Hz,1H),7.45(dd,J＝1.9,8.8Hz,1H),7.33(s,1H),4.02(s,3H),3.87(t, J＝6.9Hz,2H),3.53(brdd,J＝4.3,11.6Hz,2H),3.23-3.10(m,2H),2.86(s,3H),2.34-2.17(m,4H),1.97(br d, J＝15.1Hz,2H)。LCMS(ESI):m/z:504.1[M+1]。

实施例9

化合物9A

根据化合物1D的方法制备，将3-氯-2-氟苯胺替换为4-溴-2-氟苯胺，得到化合物9A。¹HNMR(400MHz, 氘代甲醇)δ＝8.62(s,1H),8.43(s,1H),7.59(t,J＝8.3Hz,1H),7.51-7.38(m,2H),7.22(s,1H),4.05(s,3H)。 LCMS(ESI):m/z:425.9[M+1]。

化合物9B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将6- 溴-N-(3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺替换为6-溴-N-(4-溴-2-氟苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺，得到化合物9B。LCMS(ESI):m/z:602.1[M+1]。

化合物9C

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((4-溴-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2-氧代-1- 氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯，得到化合物9C。粗品直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z: 502.1[M+1]。

化合物9

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((4-溴-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂-3,8- 二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物9的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.45 (s,1H),8.39(s,1H),7.61(t,J＝8.3Hz,1H),7.50-7.41(m,2H),7.32(s,1H),4.06(s,3H),3.93(s,2H),3.20(br s, 2H),3.14-3.07(m,2H),2.73(s,3H),2.35-2.26(m,2H),2.22-2.11(m,2H)。LCMS(ESI):m/z:516.0[M+1]。

实施例10

化合物10A

根据化合物1D的方法制备，将3-氯-2-氟苯胺替换为3-氯-2,4-二氟苯胺，得到化合物10A。¹H NMR (400MHz,氘代甲醇)δ＝8.63(s,1H),8.43(s,1H),7.54(dt,J＝5.6,8.6Hz,1H),7.25(s,1H),7.20(dt,J＝2.0,8.8 Hz,1H),4.06(s,3H)。LCMS(ESI):m/z:399.9[M+1]。

化合物10B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为3-氧代-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D替换为 6-溴-N-(3-氯-2，4-二氟苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺，得到化合物10B。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.43 (br s,1H),8.38(s,1H),7.59-7.49(m,1H),7.31(s,1H),7.25-7.16(m,1H),4.06(s,3H),3.88(s,2H),2.07(br d, J＝13.6Hz,2H),1.97-1.85(m,4H),1.81-1.67(m,2H),1.48(s,9H).

化合物10C

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为2-(4-((3-氯-2，4-二氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-3-氧代2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯，得到化合物10C。粗品直接用于下一步。¹HNMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.79(br s,1H),8.64(s,1H),7.62-7.52(m,1H),7.43(s,1H),7.29(dt,J＝1.9,8.8Hz,1H),4.15(s,3H), 4.00(s,2H),2.37(br d,J＝14.1Hz,2H),2.28-2.15(m,4H),2.05-1.96(m,2H)。LCMS(ESI):m/z:475.9[M+1]。

化合物10

根据化合物1的方法制备，将1J替换为2-(4-((3-氯-2，4-二氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-3-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物10的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.46 (br s,1H),8.40(s,1H),7.54(dt,J＝5.7,8.6Hz,1H),7.33(br s,1H),7.20(dt,J＝1.9,8.8Hz,1H),4.06(s,3H),3.93 (s,2H),3.26(br s,2H),3.20-3.12(m,2H),2.76(s,3H),2.37-2.27(m,2H),2.26-2.15(m,2H)。LCMS(ESI): m/z:490.0[M+1]。

实施例11

化合物11A

将乙腈(2.06克，50.18毫摩尔)加入到四氢呋喃(30.00毫升)中，在-78℃及氮气氛围保护下，向其中滴加正丁基锂(2.5M,20.07毫升)，反应液在-78℃下搅拌1小时。然后在-78-25℃及氮气氛围保护下向反应液中加入4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.00克，25.09微摩尔)，-78-25℃下搅拌9小时。TLC显示有新产物出现但是原料未完全消耗完。将反应液浓缩后加入乙酸乙酯(10毫升)和水(20毫升)，用乙酸乙酯(20毫升) 萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠(5g)干燥，过滤，滤液浓缩后通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝5:1to 2:1)分离得到化合物11A。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝3.91(br s,2H),3.15(br t,J＝11.6Hz,2H),2.54 (s,2H),1.77-1.70(m,2H),1.67-1.60(m,2H),1.46(s,9H)。

化合物11B

将4-(氰基甲基)-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(800.00毫克，3.33毫摩尔)溶于甲醇(20毫升)中，加入Boc₂O (2.91克，13.32毫摩尔)和雷尼镍(0.1克)，将反应体系抽真空置换氮气三次后再置换氢气三次。反应液在 H₂(50psi)及40℃下搅拌10小时。TLC显示原料完全消耗。将反应液用甲醇(20毫升)稀释，过滤，滤液浓缩后粗品通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝5:1to 2:1)分离得到化合物11B。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝4.92(br s,1H),3.79(br s,2H),3.30(q,J＝6.4Hz,2H),3.18(br t,J＝11.4Hz,2H),1.65-1.57(m,4H),1.52(br dd,J＝4.4,11.4Hz,2H),1.44(s,9H)。

化合物11C

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-甲酸叔丁酯，得到化合物11C。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.46(br s,1H),8.36(brs,1H),7.59(br s,1H),7.40(br t,J＝7.2 Hz,1H),7.31(br s,1H),7.22(br t,J＝7.8Hz,1H),4.03(s,3H),3.95(br d,J＝13.3Hz,2H),3.88-3.82(m,2H), 3.77-3.70(m,2H),1.89-1.82(m,4H),1.68-1.61(m,2H),1.46(s,9H)。LCMS(ESI):m/z:572.1[M+1]。

化合物11D

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2-氧代-1氧杂-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-甲酸叔丁酯，得到化合物11D。粗品直接用于下一步。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.78(br s,1H),8.70(br s,1H),7.51(br t,J＝7.0Hz,3H),7.32-7.23(m,1H),4.10(s,3H),3.78(br t, J＝5.6Hz,2H),3.44(brs,2H),2.29(br d,J＝7.5Hz,2H),2.18-2.08(m,4H),1.95(br t,J＝6.1Hz,2H)。LCMS(ESI):m/z:472.1[M+1]

化合物11

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1氧杂-3,9- 二氮杂螺[5.5]十一烷-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物11的甲酸盐。¹HNMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.46(s,1H),8.36(s,1H),7.64-7.54(m,1H),7.41(ddd,J＝1.6,6.7,8.2Hz,1H),7.33(s,1H),7.27-7.19(m, 1H),4.03(s,3H),3.76(br s,2H),3.40(br s,2H),3.30-3.17(m,2H),2.86(s,3H),2.26(br s,4H),2.19-2.06(m, 2H)。LCMS(ESI):m/z:486.1[M+1]。

实施例12

化合物12A

根据化合物1B的方法制备，将1A替换为2-氨基-5-溴-苯甲酸，得到化合物12A。¹HNMR(400MHz, DMSO-d6)δ＝8.19(d,J＝2.3Hz,1H),8.15-8.11(s,1H),7.95(dd,J＝2.4,8.7Hz,1H),7.62(d,J＝8.7Hz,1H).

化合物12B

根据化合物1C的方法制备，将1B替换为6-溴-喹唑啉-4-醇，得到化合物12B。粗品直接用于下一步。 LCMS(ESI):m/z:242.9[M+1]。

化合物12C

根据化合物1D的方法制备，将1C替换为6-溴-4-氯喹唑啉，得到化合物12C。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.62(d,J＝2.0Hz,1H),8.51(s,1H),8.00(dd,J＝2.1,8.9Hz,1H),7.74(d,J＝8.9Hz,1H),7.62-7.52 (m,1H),7.47-7.39(m,1H),7.28-7.21(m,1H)。LCMS(ESI):m/z:351.9[M+1]。

化合物12D

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-N-(3-氯-2-氟苯基)喹唑啉-4-胺，得到化合物12D.¹HNMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.50-8.34 (m,2H),8.14(d,J＝1.8Hz,1H),7.79(br d,J＝9.2Hz,1H),7.59(br s,1H),7.40(br t,J＝7.2Hz,1H),7.28-7.19(m, 1H),4.04(s,2H),3.83-3.73(m,4H),1.92-1.86(m,4H),1.48(s,9H)。LCMS(ESI):m/z:528.1[M+1]。

化合物12E

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-喹唑啉-6-基)-2-氧代-1氧杂-3,8- 二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，得到化合物12E。粗品直接用于下一步。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇) δ＝8.81(s,1H),8.76(dd,J＝2.4,9.3Hz,1H),8.50(d,J＝2.3Hz,1H),7.99(d,J＝9.3Hz,1H),7.58(dddd,J＝1.6, 6.7,8.1,16.0Hz,2H),7.35(dt,J＝1.4,8.1Hz,1H),4.19(s,2H),3.42-3.37(m,4H),2.28-2.19(m,4H)。LCMS (ESI):m/z:428.1[M+1]。

化合物12

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-喹唑啉-6-基)-1氧杂-3,8-二氮杂螺 [4.5]癸烷-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物12的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.43(s, 1H),8.41(br d,J＝2.3Hz,1H),8.18(d,J＝2.2Hz,1H),7.83(d,J＝9.2Hz,1H),7.62-7.53(m,1H),7.47-7.37(m, 1H),7.24(dt,J＝1.2,8.1Hz,1H),4.12(s,2H),3.40(br d,J＝12.0Hz,2H),3.30-3.18(m,2H),2.85(s,3H),2.37-2.17(m,4H)。LCMS(ESI):m/z:442.1[M+1]。

实施例13

化合物13A

在20℃下，将3-氧代氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(9.00g,52.57毫摩尔)溶于乙醇(30.00毫升)，向该混合物中加入硝基甲烷(33.90克，555.37毫摩尔)和三乙胺(730.00毫克，7.21毫摩尔)。反应液在20℃下搅拌 16小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)显示反应完成。反应液浓缩得到化合物13A。¹HNMR(400MHz, DMSO-d6)δ＝6.44(s,1H),4.86(s,2H),4.04(br d,J＝8.9Hz,2H),3.74(br d,J＝9.2Hz,2H),1.38(s,9H)。

化合物13B

在20℃下，将3-羟基-3-(硝基甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(6.00克，25.84毫摩尔)溶于甲醇(60.00 毫升)，在氮气保护下向该混合物中加入湿钯碳(10％,0.6克)，反应液抽真空、通氢气反复置换四次设置氢气压力为50Psi。20℃搅拌16个小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝):1)显示反应完成。反应液过滤，滤液浓缩得到化合物13B。¹HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝5.55(br s,1H),3.87(br d,J＝7.9Hz,1H),3.73(br d,J＝7.8 Hz,1H),3.63-3.51(m,2H),2.90(s,1H),2.59(s,1H),1.36(s,9H).

化合物13C

在20℃下，将3-(氨基甲基)-3-羟基-氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(2.00克，9.89毫摩尔)溶于二氯甲烷 (40.00毫升)，向该混合物中加入三乙胺(3.00克，29.67毫摩尔)和三光气(3.23克，10.88毫摩尔)，搅拌 3小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示反应完成。向上述反应液中加入饱和氯化铵溶液(60毫升)淬灭。有机相用水(2*60毫升)洗涤，合并的水相用二氯甲烷(3*30毫升)萃取。合并的有机相用无水硫酸钠(20克) 干燥，过滤，滤液浓缩。粗品通过柱色谱分离(硅胶,二氯甲烷/甲醇＝100/1到50/1)纯化得到化合物13C.¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝4.38-4.22(m,2H),4.11-3.98(m,2H),3.84-3.58(m,2H),1.68(br s,1H),1.47 (s,9H).

化合物13D

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为6-氧代-5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，得到化合物13D。LCMS(ESI):m/z:530.0[M+1]。

化合物13E

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为7-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-6-氧代-5氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸叔丁酯，得到化合物13E。粗品没有纯化直接用于下一步。

化合物13

根据化合物1的方法制备，将1J替换为7-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-5氧杂-2,7- 二氮杂螺[3.4]辛烷-6-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物13的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.91(br s,1H),8.47(s,2H),8.21(s,1H),7.49(brt,J＝7.2Hz,2H),7.34(s,1H),7.31-7.23(m,1H),4.19(s,2H), 3.99(s,3H),3.55-3.54(m,2H),3.40(br d,J＝8.8Hz,2H),2.31(s,3H).LCMS(ESI)(5-95CD):m/z:444.0[M+1]。将上述高效液相色谱分离纯化的流动相替换为盐酸体系，则得到化合物13的盐酸盐。¹HNMR(400MHz, 氘代甲醇)δ＝8.79(s,1H),8.72(s,1H),7.61-7.54(m,2H),7.42(s,1H),7.35-7.33(m,1H),4.65-4.58(m,2H), 4.48(s,2H),4.20(s,3H),3.14-3.09(m,3H)

化合物13(自由碱)的制备

室温下，将13E的三氟醋酸盐(65.18克，99.07毫摩尔)加入乙醇(330毫升)中，加入甲醛水溶液(79.32克，72.8毫升，37％含量)，室温搅拌0.5小时，再将醋酸硼氢化钠(41.99克，198.1毫摩尔) 分批加入至上述溶液中，继续搅拌1小时后向反应液中加入200毫升氨水，溶液中析出大量类白色固体，过滤，滤饼用纯化水洗涤(1.2升)，滤饼真空干燥箱40度烘干，得到化合物13的自由碱。¹HNMR (400MHz,DMSO-d6)δ＝9.89(s,1H),8.49(s,2H),7.52–7.49(m,2H),7.36(s,1H),7.31-7.27(m,1H),4.20 (s,2H),4.00(s,3H),3.54(br s,2H),3.41(br s,2H),2.32(s,3H).LCMS(ESI)(5-95AB):m/z:444.0[M+1]

化合物13的马来酸盐制备

将化合物13(0.5克，1.13毫摩尔)(自由碱)加入5毫升纯化水中，升温至30℃，搅拌10分钟，将马来酸(261.6毫克，2.26毫摩尔)溶于5毫升纯化水并加入至上述溶液中，溶液澄清，保温搅拌20分钟后，冻干，最后得到化合物13的马来酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.55(s,1H),8.43(s,1H),7.57 (dt,J＝1.6,7.5Hz,1H),7.46-7.44(m,1H),7.35(s,1H),7.26(dt,J＝1.5,8.1Hz,1H),6.27(s,4H),4.73-4.58(m, 4H),4.37(s,2H),4.09(s,3H),3.07(s,3H)。

实施例14

化合物14A

根据化合物13A的方法制备，将3-氧代氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯替换为四氢吡喃-4-酮，得到化合物 14A。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm 4.45(s,2H),3.82(t,J＝2.6Hz,2H),3.80(d,J＝2.6Hz,2H),2.76- 3.20(m,1H),1.71-1.82(m,2H),1.59-1.67(m,2H)。

化合物14B

根据化合物13B的方法制备，将13A替换为4-(硝基甲基)四氢-2H-吡喃-4-醇，得到化合物14B。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm 3.75-3.82(m,4H),3.48(s,1H),3.00(s,1H),2.63(s,2H),1.53-1.60(m, 2H),1.45-1.51(m,2H).

化合物14C

根据化合物13C的方法制备，将13B替换为4-(氨基甲基)四氢-2H-吡喃-4-醇，得到化合物14C。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm 3.71-3.94(m,7H),1.83-2.04(m,3H),1.83-2.04(m,1H)。

化合物14

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸-2-酮，得到化合物14。¹HNMR (400MHz,氘代氯仿)δppm 8.72(s,1H),8.24-8.34(m,1H),8.06(s,1H),7.62(br s,1H),7.30(s,1H),7.10 -7.22(m,2H),4.00(s,3H),3.95(br d,J＝9.9Hz,2H),3.83-3.90(m,4H),2.13(br d,J＝13.8Hz,2H),1.95- 2.02(m,2H).LCMS(ESI):m/z:459.0[M+1].

实施例15

化合物15A

根据化合物13A的方法制备，将3-氧代氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯替换为氧杂环丁烷-3-酮，得到标题化合物15A。¹HNMR(400MHz,氘代氯仿)δppm 4.84(s,2H),4.73(d,J＝7.7Hz,2H),4.62(d,J＝8.1Hz,2 H)。

化合物15B

根据化合物13B的方法制备，将13A替换为3-(硝甲基)氧杂环丁烷-3-醇，得到化合物15B。¹H NMR (400MHz,氘代氯仿)δppm 4.65(d,J＝7.0Hz,2H),4.43(d,J＝7.3Hz,2H),3.09(s,2H)。

化合物15C

根据化合物13C的方法制备，将13B替换为3-(氨甲基)氧杂环丁烷-3-醇，得到化合物15C。¹H NMR (400MHz,氘代氯仿)δppm 4.99(d,J＝8.9Hz,2H),4.59(d,J＝8.1Hz,2H),4.29(s,2H)

化合物15

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2,5-二氧杂-7-氮杂螺[3.4]辛-6-酮，得到化合物15。¹H NMR (400MHz,氘代氯仿)δppm 8.74(s,1H),8.33-8.41(m,1H),8.01(s,1H),7.56(br s,1H),7.35(s,1H),7.13 -7.22(m,2H),5.15(d,J＝8.4Hz,2H),4.80(d,J＝8.3Hz,2H),4.37(s,2H),4.03(s,3H).LCMS(ESI):m/z: 431.0[M+1].

实施例16

化合物16A

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-7-甲氧基喹唑啉-4-醇，得到化合物16A。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm 8.23(s,1H),8.05 (s,1H),7.22(s,1H),3.99(s,3H),3.78-3.91(m,2H),3.73(s,2H),3.33-3.41(m,2H),2.08(br d,J＝13.43Hz, 2H),1.74-1.85(m,2H),1.48(s,9H).LCMS(ESI):m/z:431.3[M+1]。

化合物16B

将3-(4-羟基-7-甲氧基-喹唑啉-6-基)-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(500.00毫克， 847.95微摩尔)溶于乙腈(10毫升)，加入BOP(450.04毫克，1.02毫摩尔)和DBU(180.73毫克，1.19毫摩尔)，反应液26℃反应1小时。LCMS显示原料完全转化为中间态。然后依次加入DBU(180.73毫克， 1.19毫摩尔)和间氯苯酚(163.52毫克，1.27毫摩尔)，继续搅拌1h.LCMS显示中间体完全消耗。将反应液过滤，滤液浓缩后粗品通过柱色谱(硅胶,石油醚/乙酸乙酯＝1:1)分离纯化，最后得到化合物16B。¹H NMR (400MHz,氘代氯仿)δppm 8.71(s,1H),8.32-8.39(m,1H),7.38-7.48(m,2H),7.28-7.33(m,2H),7.16(ddd,J＝8.16,2.20,0.94Hz,1H),4.06(s,3H),3.81(s,2H),3.24-3.48(m,4H),2.08-2.17(m,2H),1.78-1.86 (m,2H),1.49(s,9H).LCMS(ESI):m/z:541.0[M+1]。

化合物16C

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-(3-氯苯氧基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2-氧代-1-氧杂-3,8- 二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，得到化合物16C。粗品直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z:441.3[M+1]。化合物16

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-(3-氯苯氧基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺 [4.5]癸烷-2-酮，得到化合物16。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm 8.71(s,1H),8.35(s,1H),7.39-7.46 (m,2H),7.28-7.33(m,2H),7.17(dd,J＝8.03,1.25Hz,1H),4.06(s,3H),3.81(s,2H),2.61(br s,4H),2.36(s, 3H),2.17(br d,J＝13.43Hz,2H),1.87-2.01(m,2H).LCMS(ESI):m/z:455.1[M+1]。

实施例17

化合物17A

将3-氧代哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁基4-乙基酯(4.50克，16.59毫摩尔)溶于乙醇(30毫升)中，然后在氮气氛围下缓慢加入硼氢化钠(313.73毫克，8.30毫摩尔)，反应液在30℃下搅拌1小时。TLC显示原料完全消耗。反应液浓缩后向其中加入乙酸乙酯(20毫升)和水(20毫升)，水相用乙酸乙酯(20毫升)萃取三次，合并有机相，有机相用食盐水(40毫升)洗涤一次，无水硫酸钠(1g)干燥，过滤，滤液浓缩后通过柱色谱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1到3:1)得到化合物17A。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝4.26-3.99 (m,5H),2.97(br s,1H),2.90-2.78(m,1H),2.60-2.48(m,1H),2.11-2.03(m,1H),1.79-1.67(m,1H),1.46(s,9H),1.32-1.25(m,3H)。

化合物17B

将3-羟基哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁基4-乙基酯(3.3克，12.07毫摩尔)溶于甲醇(20毫升)中，向其中加入氢氧化钠溶液(4M,12.07毫升)，反应液在30℃下搅拌1小时。TLC显示原料完全消耗。反应液浓缩后向其中加入水(20毫升)，水相用乙酸乙酯(20毫升)洗涤三次，将得到的水相用盐酸(2M,5毫升)调节至酸性，再用乙酸乙酯(25毫升)萃取三次，合并的有机相用食盐水(40毫升)洗涤三次，无水硫酸钠(1g)干燥，过滤，滤液浓缩后得到化合物17B。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝4.40-3.96(m,3H),3.12-2.37(m,3H),2.09 -1.97(m,3H),1.83-1.56(m,1H),1.48-1.44(s,9H)。

化合物17C

根据化合物2C的方法制备，将2B替换为1-叔丁氧基羰基-3-羟基-哌啶-4-羧酸，得到化合物17C。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝5.71(br s,1H),4.16-4.05(m,1H),3.96(dd,J＝4.1,14.9Hz,1H),3.44(br d, J＝11.5Hz,2H),3.35-3.13(m,1H),2.82-2.75(m,1H),1.99-1.82(m,2H),1.47(s,9H)。

化合物17D

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代六氢恶唑并[5,4-c]吡啶-5(2H)-甲酸叔丁酯，得到化合物17D。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.45(br s,1H),8.37(s,1H),7.61-7.50(m,1H),7.41(br t,J＝7.2Hz, 1H),7.32(s,1H),7.27-7.20(m,1H),4.05(s,3H),4.01-3.81(m,2H),3.63(s,2H),3.55-3.42(m,2H),2.00- 1.91(m,1H),1.81-1.73(m,1H),1.45(s,9H)。LCMS(ESI):m/z:544.3[M+1]。

化合物17E

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为1-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2-氧代六氢恶唑并[5,4-c]吡啶-5(2H)-羧酸叔丁酯，得到化合物17E。粗品直接用于下一步。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.78(s,1H),8.74(s,1H),7.57-7.46(m,3H),7.33-7.25(m,1H),4.14(s,3H),3.77-3.43(m,6H),2.23- 2.13(m,1H),1.91-1.70(m,1H)。LCMS(ESI):m/z:444.2[M+1]。

化合物17

根据化合物1的方法制备，将1J替换为1-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-六氢恶唑并 [5,4-c]吡啶-2(1H)-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物17的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.46 (s,1H),8.40(s,1H),8.21(br s,1H),7.60-7.50(m,1H),7.48-7.37(m,1H),7.33(s,1H),7.27-7.15(m,1H), 5.11-4.94(m,1H),4.65-4.51(m,1H),4.05(s,3H),3.28-3.16(m,1H),3.09(dd,J＝5.6,13.1Hz,1H),2.91- 2.78(m,1H),2.76-2.65(m,1H),2.59(s,3H),2.06(tdd,J＝4.6,9.5,14.5Hz,1H),1.95-1.80(m,1H)。LCMS (ESI):m/z:458.1[M+1]。

实施例18

化合物18A

向(2S)-3-氨基丙烷-1,2-二醇(3.00g，32.93毫摩尔，2.54毫升，1.00当量)的水(35.00毫升)溶液中加入三光气(9.77g，32.93毫摩尔，1.00当量)，碳酸氢钠(12.25g，145.88毫摩尔，5.67毫升，4.43当量)。反应液 25℃下搅拌16小时.TLC(DCM:MeOH＝5:1)显示反应完成。将反应液用DCM(25毫升×2)萃取。水相用 HCl中和至PH＝7，然后减压浓缩得固体粗品，加入无水乙醇打浆，过滤，滤液浓缩得到化合物18A.¹HNMR (400MHz,DMSO-d6)δppm 7.41(br s,1H),5.12(br s,1H),4.60-4.44(m,1H),3.63-3.50(m,1H),3.49-3.46 (m,1H),3.45-3.41(m,1H),3.29-3.20(m,1H).

化合物18B

在0℃和氮气保护下向(5S)-5-(羟甲基)恶唑烷-2-酮(3.80g，32.45毫摩尔，1.00当量)和吡啶(37.24g， 470.85毫摩尔，38.00毫升，14.51当量)的二氯甲烷(60.00毫升)的溶液中逐滴加入甲烷磺酰氯(4.20g，36.67 毫摩尔，2.84毫升，1.13当量)。反应液在0℃和氮气氛围下搅拌3小时。TLC(DCM：MeOH＝10：1)显示反应完成。将反应液浓缩，粗品通过柱色谱分离纯化(DCM/MeOH＝200/1至100：1)，得到化合物18B。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm7.65(br s,1H),3.94-3.76(m,1H),4.43-4.37(m,1H),4.35-4.28(m, 1H),3.58(t,J＝9.2Hz,1H),3.24(s,3H)。

化合物18C

向((5S)-2-氧代恶唑烷-5-基)甲基磺酸酯(450.00毫克，2.31毫摩尔，1.00当量)的乙醇(5.00毫升)溶液中加入N-甲基甲胺(2M，四氢呋喃溶液，30.00毫升)，反应液在120℃的闷罐中搅拌20小时。TLC(DCM:MeOH ＝10:1)检测原料反应完全。将反应液浓缩。粗品加入乙酸乙酯(30毫升)溶解，饱和碳酸氢钠溶液(30毫升×1)洗涤，有机相用无水硫酸钠(10g)干燥，过滤，滤液浓缩得到化合物18C。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6) δppm 6.42-6.25(m,0.4H),4.07-3.92(m,0.3H),3.66-3.57(m,0.4H),3.48-3.34(m,0.7H),3.20-3.07(m,0.6H),3.02-2.86(m,1H),2.78(s,3H),2.33-2.25(m,1H),2.20(s,3H),2.18-2.12(m,1H)

化合物18

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为(5S)-5-[(二甲基氨基)甲基]恶唑烷-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物18的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δppm 8.47(s,1H),8.40(s,1H),7.60(dd,J＝6.8 6.8 Hz,1H),7.48-7.36(m,1H),7.31(s,1H),7.28-7.19(m,1H),5.16-5.02(m,1H),4.28-4.19(m,1H),4.07(s, 3H),3.86-3.77(m,1H),3.19-3.06(m,1H),3.02-2.90(m,1H),2.60(s,6H)LCMS(ESI):m/z:446.1[M+1].

实施例19

化合物19A

根据化合物16B的方法制备，将16A替换为6-溴-7-甲氧基喹唑啉-4-醇，将4-氯苯酚替换为4-氯-1H- 吲哚，得到化合物19A。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝9.19(s,1H),8.33(s,1H),7.73(d,J＝8.2Hz,1H), 7.68(d,J＝3.5Hz,1H),7.49(s,1H),7.33-7.24(m,2H),7.01(d,J＝3.5Hz,1H),4.14(s,3H).LCMS(ESI):m/z: 390.1[M+1].

化合物19B

在25℃和氮气保护下，将反式环己二胺(11.75毫克，102.92微摩尔,，12.64微升)、碘化亚铜(49.00毫克，257.30微摩尔)以及碳酸钾(213.37毫克，1.54毫摩尔)加入到19A(200.00毫克,，514.60微摩尔)和化合物2C(131.89毫克，514.60微摩尔)的1，4-二氧六环(2.00毫升)溶液中。反应液在120℃下搅拌18小时。 LCMS监测反应有产物生成。将反应液过滤，二氯甲烷(40毫升×2)洗涤滤饼。将滤液浓缩得到粗品。用制备薄层色谱板(二氯甲烷：甲醇＝20:1)分离纯化。得到的化合物19B。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝ 9.16(s,1H),8.15(s,1H),7.82(d,J＝7.8Hz,1H),7.74(d,J＝3.5Hz,1H),7.53(s,1H),7.29-7.23(m,2H),6.98(d, J＝3.5Hz,1H),4.10(s,3H),3.97-3.83(m,2H),3.76(s,2H),3.42-3.25(m,2H),2.10-1.99(m,2H),1.76(br s, 2H),1.48(s,9H).LCMS(ESI):m/z:564.4[M+1]。

化合物19C

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-(4-氯-1H-吲哚-1基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，得到化合物19C。粗品直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z:464.0 [M+1]。

化合物19

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-(4-氯-1H-吲哚-1基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物19的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝9.15 (s,1H),8.20(s,1H),7.90(d,J＝3.4Hz,1H),7.85-7.79(m,1H),7.64(s,1H),7.30-7.23(m,2H),6.97(d,J＝3.4 Hz,1H),4.17(s,3H),3.93(s,2H),3.20(br d,J＝6.5Hz,2H),3.11(br s,2H),2.74(br s,3H),2.34-2.25(m,2H), 2.21-2.04(m,2H).LCMS(ESI):m/z:478.1[M+1]。

实施例20

化合物20A

将1-苄基-3-甲基-哌啶-4-酮(4.50克，22.14毫摩尔)和Boc₂O(6.28克，28.78毫摩尔)加入乙醇(20.00毫升)中，然后在氮气氛围下加入Pd-C(10％,1g)。将反应体系抽真空置换氮气及置换氢气各三次，反应液在氢气(50psi)及30℃下搅拌5小时。TLC显示原料完全消耗。将反应液用DCM:MeOH＝10:1(22毫升)稀释过滤，滤液浓缩后粗品通过柱色谱分离(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)得到化合物20A。¹H NMR (400MHz,氘代氯仿)δ＝4.48-4.14(m,2H),3.35-3.17(m,1H),2.85(br s,1H),2.59-2.35(m,3H),1.51-1.47 (m,9H),1.05(d,J＝6.8Hz,3H)。

化合物20B

根据化合物2A的方法制备，将4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯替换为3-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯，得到化合物20B。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝4.20-4.17(m,2H),3.45(s,2H),2.77-2.55(m,2H),2.52 -2.37(m,2H),2.34-1.79(m,3H),1.45(s,9H),1.29-1.27(m,3H),0.95-0.88(m,3H)。

化合物20C

根据化合物2B的方法制备，将2A替换为4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯，得到化合物20C。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝3.98-3.63(m,1H),3.43-3.03(m,1H),2.91-2.52(m, 2H),2.39-2.23(m,1H),2.11(s,2H),1.89-1.69(m,1H),1.86-1.57(m,1H),1.45(s,9H),0.99-0.88(m,3H)。

化合物20D

根据化合物2C的方法制备，将2B替换为2-(1-(叔丁氧基羰基)-4-羟基-3-甲基哌啶-4-基)乙酸，得到化合物20D。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝5.74(br s,1H),3.53-3.44(m,1H),3.33-3.18(m,2H),2.87- 2.77(m,1H),2.09-1.79(m,2H),1.75-1.63(m,2H),1.46(s,9H),1.13(t,J＝7.2Hz,1H),1.01-0.93(m,3H)。

化合物20E

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为6-甲基-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，得到化合物20E。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.52-8.31(m,2H),7.52(br t,J＝6.7Hz,1H),7.43-7.36 (m,1H),7.28(s,1H),7.24-7.16(m,1H),4.04(s,3H),3.52-3.49(m,1H),3.28-3.21(m,3H),1.97-1.90(m, 2H),1.77-1.69(m,2H),1.46(s,9H),1.13(d,J＝5.7Hz,1H),0.97-0.95(m,3H)。LCMS(ESI):m/z:572.2 [M+1]。

化合物20F

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-6-甲基-2- 氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸酯，得到化合物20F。粗品直接用于下一步。¹H NMR(400MHz, 氘代甲醇)δ＝8.78(s,1H),8.66(s,1H),7.63-7.48(m,2H),7.44(s,1H),7.31(dt,J＝1.4,8.1Hz,1H),4.15(s, 3H),3.28-2.87(m,4H),2.46-2.16(m,4H),1.21(d,J＝2.3Hz,1H),1.13-1.01(m,3H)。LCMS(ESI):m/z: 472.1[M+1]。

化合物20

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-6-甲基-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物20的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇) δ＝8.45(s,1H),8.41(s,1H),7.60-7.49(m,1H),7.41(dt,J＝1.5,7.4Hz,1H),7.32(s,1H),7.22(dt,J＝1.3,8.1Hz, 1H),4.11-4.07(m,1H),4.06(s,3H),3.85-3.77(m,1H),3.41-3.32(m,1H),3.28-3.02(m,2H),2.83(br t, J＝12.3Hz,1H),2.77(s,2H),2.61(s,1H),2.42-2.13(m,3H),1.24-1.15(m,3H)。LCMS(ESI):m/z:486.1 [M+1]。

实施例21

化合物21A

在-70℃氮气保护下，向4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(25.00g，125.47毫摩尔，1.00当量)的四氢呋喃(200.00 毫升)溶液中滴加二异丙基氨基锂(2M，158.09毫升，2.52当量)。30分钟后，向上述溶液中加入碘乙烷 (78.27g，501.88毫摩尔，40.14毫升，4.00当量)，反应液升温至室温(30℃)，继续搅拌16小时。TLC显示原料反应完全。反应液用饱和氯化铵溶液(100毫升)淬灭，加入乙酸乙酯(100毫升)和水(200毫升)萃取。水相用乙酸乙酯(100毫升×1)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(100毫升×2)洗涤，无水硫酸钠(50g)干燥，过滤，滤液浓缩，得到浅黄色油状物。粗品通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚：乙酸乙酯＝20:1)得到化合物21A。LCMS(ESI):m/z:128.1[M+1-100]。

化合物21B

根据化合物2A的方法制备，将4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯替换为3-乙基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯，得到化合物21B。LCMS(ESI):m/z:216.1[M+1-100]。

化合物21C

根据化合物2B的方法制备，将2A替换为4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-羟基-3-乙基哌啶-1-甲酸叔丁酯，得到化合物21C。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝3.90-2.94(m,3H),2.89-2.50(m,1H),2.46-2.11(m, 1H),2.19(d,J＝15.6Hz,1H),1.95(s,2H),1.68-1.49(m,1H),1.46-1.36(m,1H),1.30(s,9H),1.19-0.97(m, 2H),0.85-0.76(m,2H)

化合物21D

根据化合物2C的方法制备，将2B替换为2-(1-(叔丁氧基羰基)-4-羟基-3-乙基哌啶-4-基)乙酸，得到化合物21D。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝5.79(br s,1H),3.96-3.76(m,1H),3.56-3.18(m,4H),2.03- 1.85(m,1H),1.75-1.60(m,3H),1.46(s,9H),1.34-1.10(m,2H),1.07-0.95(m,3H)。

化合物21E

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为6-乙基-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，得到化合物21E。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.61-8.25(m,2H),7.55(br s,1H),7.41(br t,J＝7.3Hz, 1H),7.32(br s,1H),7.27-7.19(m,1H),4.06(s,3H),3.81-3.75(m,2H),3.53(br d,J＝9.3Hz,2H),1.97-1.86 (m,3H),1.75-1.64(m,4H),1.48(s,9H),1.03-1.01(m,3H)。LCMS(ESI):m/z:586.3[M+1]。

化合物21F

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-6-乙基-2- 氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯，得到化合物21F。粗品直接用于下一步。¹H NMR (400MHz,氘代甲醇)δ＝8.78(s,1H),8.71-8.61(m,1H),7.61-7.48(m,2H),7.43(s,1H),7.36-7.27(m,1H), 4.15(s,3H),3.85-3.37(m,5H),3.24-2.86(m,2H),2.47-2.08(m,4H),1.14-1.04(m,3H)。LCMS(ESI):m/z: 486.1[M+1]。

化合物21

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-6-乙基-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物21的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇) δ＝8.48-8.37(m,3H),7.59-7.49(m,1H),7.39(brt,J＝7.4Hz,1H),7.32-7.26(m,1H),7.24-7.16(m,1H), 4.15-4.08(m,1H),4.07-4.00(m,3H),3.90-3.76(m,1H),3.62-3.40(m,2H),3.23(br t,J＝11.8Hz,1H),2.95 (br t,J＝12.4Hz,1H),2.79-2.89(m,3H),2.49-2.00(m,4H),1.48-1.30(m,1H),1.10(br t,J＝7.4Hz,3H)。 LCMS(ESI):m/z:500.1[M+1]。

实施例22

化合物22A

根据化合物1B的方法制备，将1A替换为2-氨基-5-溴-4-甲基苯甲酸，得到化合物22A。¹H NMR (400MHz,DMSO-d6)δ＝8.21-8.19(m,1H),8.10(s,1H),7.68(s,1H),2.48(s,3H),2.18(s,1H),1.75(s,1H)。 LCMS(ESI):m/z:238.9[M+1]。

化合物22B

根据化合物1C的方法制备，将1B替换为6-溴-7-甲基喹唑啉-4-醇，得到化合物22B。¹H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ＝8.30(s,1H),8.22(s,1H),7.70(s,1H),3.28(s,1H),3.20-3.16(m,1H),2.93(s,1H),2.34-2.25 (m,2H)。LCMS(ESI)(5-95CD):m/z:258.8[M+1]。

化合物22C

根据化合物1D的方法制备，将1C替换为6-溴-4-氯-7-甲基喹唑啉，得到化合物22C。¹H NMR(400MHz, 氘代氯仿)δ＝8.79(s,1H),8.53-8.47(m,1H),8.11(s,1H),7.82(s,1H),7.55(br s,1H),7.20-7.16(m,2H),2.61 (s,3H)。LCMS(ESI):m/z:367.8[M+1]。

化合物22D

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-N-(3-氯-2-氟苯基)-7-甲基喹唑啉-4-胺，得到化合物22D。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.76 (s,1H),8.45-8.36(m,1H),7.87(s,1H),7.76(s,1H),7.58(br s,1H),7.20-7.16(m,2H),3.94(br s,2H),3.76(s, 2H),3.49(d,J＝4.4Hz,1H),3.45-3.33(m,2H),2.46(s,3H),2.15(br d,J＝13.8Hz,2H),1.91-1.80(m,2H),1.49(s,9H),1.46(s,1H)。LCMS(ESI):m/z:542.0[M+1]。

化合物22E

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲基喹唑啉-6-基)-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯，得到化合物22E。粗品直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z:442.1 [M+1]。

化合物22

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲基喹唑啉-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物22的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.98 (br s,1H),8.53-8.48(m,1H),8.46(br s,1H),8.20(s,1H),7.74(br s,1H),7.50(br s,2H),7.32-7.26(m,1H), 3.88(s,2H),2.52(br d,J＝1.8Hz,4H),2.43(s,3H),2.26(s,3H),2.06-1.90(m,4H)。LCMS(ESI)(5-95CD): m/z:456.1[M+1]。

实施例23

化合物23A

在25℃下将金属钠(117.71毫克，5.12毫摩尔，)加入到甲醇(20.00毫升)中并搅拌10分钟，待固体全部溶解后，向混合物中加入(((5S)-2-氧代恶唑烷-2-基)吡啶-5-基)甲基磺酸酯(500.00毫克，2.56毫摩尔)，升温至65℃下搅拌16小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示反应完成。将反应液浓缩，向粗品中加入水(20毫升)，用二氯甲烷(20毫升×2)萃取，保留水相。水相用1N HCl调节pH＝6，用二氯甲烷(20毫升×3)萃取。将合并的有机相用水(30毫升×1)洗涤，无水硫酸钠(5g)干燥，过滤，滤液浓缩得到化合物23A。¹H NMR (400MHz,DMSO-d6)δppm 7.48(s,1H),7.60-7.45(m,1H),3.53-3.51(m,1H),3.49-3.44(m,2H),3.34(s,1H),3.30(s,3H),3.20(s,1H).

化合物23

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为(S)-5-(甲氧基甲基)恶唑烷-2-酮，得到化合物23。¹H NMR (400MHz,氘代甲醇)δppm 8.52-8.42(m,1H),8.38(s,1H),7.62-7.51(m,1H),7.47-7.37(m,1H),7.31(s, 1H),7.25-7.20(m,1H),5.00-4.94(m,1H),4.25-4.14(m,1H),4.06(s,3H),3.95-3.87(m,1H),3.79-3.64(m, 2H),3.50(s,3H)。LCMS(ESI):m/z:433.0[M+1].

实施例24

化合物24A

根据化合物1D的方法制备，将3-氯-2-氟苯胺替换为3-氯-2，6-二氟苯胺，得到化合物24A。LCMS (ESI):m/z:401.9[M+1]。

化合物24B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-N-(3-氯-2,6-二氟苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺，得到化合物24B。LCMS(ESI):m/z:576.3[M+1]。

化合物24C

将化合物24B(50毫克，49.91微摩尔)加入到盐酸乙酸乙酯溶液(10毫升，4M)中，20℃下搅拌1小时。LCMS检测反应完全。将反应液浓缩，向粗品中加入5毫升水，用0.5摩尔每升的碳酸钠水溶液调节pH至 8，水相用二氯甲烷(5毫升×2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠(0.5克)干燥，过滤，滤液浓缩。用制备硅胶色谱板纯化得到化合物24C。

化合物24

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-2，6-二氟苯基)氨基)-7-甲基喹唑啉-6-基)-1-氧杂- 3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物24的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇) δppm 8.46(br s,3H),8.43(s,2H),7.47-7.61(m,1H),7.37(s,1H),7.18(td,J＝9.1,1.9Hz,1H),4.09(s,3H), 3.95(s,2H),2.93-3.28(m,4H),2.71(br s,3H),2.25-2.40(m,2H),2.19(br d,J＝10.0Hz,2H).LCMS (ESI):m/z:490.3[M+1]。

实施例25

化合物25

根据化合物1的方法制备，将1J替换为7-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-5-氧杂-2,7- 二氮杂螺[3.4]辛-6-酮，将多聚甲醛替换为乙醛，流动相为甲酸体系，得到化合物25的甲酸盐。¹H NMR (400MHz,氘代甲醇)δ＝8.47(s,1H),8.39(s,1H),8.58-8.24(m,1H),7.65-7.55(m,1H),7.47-7.39(m,1H), 7.34(s,1H),7.30-7.20(m,1H),4.33(s,2H),4.19-4.09(m,4H),3.02(q,J＝7.2Hz,2H),1.18(t,J＝7.2Hz,3H)。 LCMS(ESI):m/z:458.1[M+1]。

实施例26

化合物26

根据化合物1的方法制备，将1J替换为7-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-5-氧杂-2,7- 二氮杂螺[3.4]辛-6-酮，将多聚甲醛替换为丙酮，得到化合物26。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.47(s, 1H),8.39(s,1H),7.65-7.54(m,1H),7.47-7.38(m,1H),7.33(s,1H),7.28-7.19(m,1H),4.30(s,2H),4.07(s, 3H),3.95-3.84(m,4H),2.89-2.76(m,1H),1.12(d,J＝6.4Hz,6H)。LCMS(ESI):m/z:472.0[M+1]。将上述化合物通过流动相为甲酸体系的高效液相色谱分离纯化，可得到化合物26的甲酸盐。

实施例27

化合物27A

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为6-氧代-5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-7-甲氧基喹唑啉-4-醇，得到化合物27A。LCMS(ESI):m/z:403.1[M+1]。

化合物27B

根据化合物16B的方法制备，将16A替换为7-(4-羟基-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-6-氧代-5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，得到化合物27B。LCMS(ESI):m/z:513.2[M+1]。

化合物27C

根据化合物24C的方法制备，将24B替换为7-(4-(3-氯苯氧基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-6-氧代-5-氧杂- 2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，得到化合物27C。粗品直接用于下一步。

化合物27

根据化合物1的方法制备，将1J替换为7-(4-(3-氯苯氧基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-5-氧杂-2,7-二氮杂螺 [3.4]辛-6-酮，得到化合物27。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.63(s,1H),8.40(s,1H),7.51-7.42(m,2H), 7.41-7.31(m,2H),7.28-7.18(m,1H),4.26(s,2H),4.08(s,3H),3.68-3.59(m,4H),2.44(s,3H),LCMS(ESI): m/z:427.1[M+1]。

实施例28

化合物28A

将6-溴-4-氯-7-甲氧基-喹唑啉(100.00毫克，345.54微摩尔)和无水三氯化铝(150.00毫克，1.12毫摩尔， 61.48μL，3.26当量)在乙二醇二甲醚(1.50毫升)中的混合物升温至80℃后，向反应液中缓慢滴加1-甲基吲哚(100.00毫克，762.37微摩尔)的乙二醇二甲醚(500.00uL)溶液，并在80℃下搅拌2小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)显示反应完成。LCMS显示有产物生成。将反应液冷却至20℃，加入水(10毫升)，形成悬浮液。过滤，滤饼用水(5毫升×1)洗涤后干燥。粗品通过柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯＝10：1至1：1 至DCM：MeOH＝50：1)。得到化合物28A。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝9.15(s,1H),8.51(s,1H), 8.04(d,J＝8.0Hz,1H),7.62(s,1H),7.40-7.21(m,4H),4.02(s,3H),3.89(s,3H)。LCMS(ESI):m/z:367.9[M+1]。

化合物28B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为6-氧代-5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-7-甲氧基-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)喹唑啉，得到化合物28B。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝9.16(s,1H),8.36(s,1H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),7.72(s,1H),7.40-7.23(m,4H),4.38-4.28(m,2H),4.17(s, 2H),4.06-3.98(m,5H),3.88(s,3H),1.39(s,9H)。LCMS(ESI):m/z:516.1[M+1]。

化合物28C

根据化合物24C的方法制备，将24B替换为7-(7-甲氧基-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)喹唑啉-6-基)-6-氧代 -5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，得到化合物28C。粗品直接用于下一步。

化合物28

根据化合物1的方法制备，将1J替换为7-(7-甲氧基-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)喹唑啉-6-基)-5-氧杂-2,7- 二氮杂螺[3.4]辛-6-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物28的甲酸盐.¹HNMR(400MHz,氘代甲醇)δppm 9.09(s,1H),8.60-8.40(m,2H),8.20(d,J＝8.0Hz,1H),7.98(s,1H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.47(s,1H),7.40 -7.30(m,1H),7.30-7.20(m,1H),4.30(s,2H),4.13(s,3H),3.99(s,3H),3.89(s,4H),2.61(s,3H).LCMS (ESI):m/z:430.1[M+1]。

实施例29

化合物29

将13E和1-氟-2-碘-乙烷加入甲醇(1.0毫升)中，加入三乙胺(100.00毫克，988.24微摩尔)后升温至70℃搅拌4小时，LCMS检测反应完全，将反应液冷却至15度后用甲醇(4毫升)稀释后过滤。滤液用高效液相色谱纯化，将所得产品溶在甲醇(5毫升)和水(30毫升)中，加入2M盐酸(1毫升)后冻干得到化合物29 的盐酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.76-8.55(m,2H),7.62-7.46(m,2H),7.42-7.36(m,1H),7.34 -7.26(m,1H),4.86-4.83(m,1H),4.82-4.64(m,5H),4.47(s,2H),4.13(s,3H),3.81-3.68(m,2H)。LCMS (ESI):m/z:476.0[M+1]。

实施例30

化合物30

将13E(90.00毫克，209.39微摩尔)和1-碘丙烷(355.94毫克，2.09毫摩尔)溶于甲醇(4.00毫升)中，向上述溶液中加入三乙胺(423.76毫克，4.19毫摩尔)。反应液在氮气保护下，升温至70-80℃搅拌16小时。液相质谱检测到目标化合物。将反应液用DCM:MeOH＝10:1(22毫升)稀释过滤，滤液浓缩后粗品通过高效液相色谱分离纯化，流动相为甲酸体系，得到化合物30的甲酸盐。¹HNMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝ 8.76(s,1H),8.66(s,1H),7.62-7.47(m,2H),7.39(s,1H),7.35-7.28(m,1H),4.81-4.57(m,6H),4.44(br s, 2H),4.16(s,3H),1.68(br s,2H),1.05(t,J＝7.3Hz,3H)。LCMS(ESI):m/z:472.1[M+1]。

将上述高效液相色谱分离纯化的流动相替换为盐酸体系，得到化合物30的盐酸盐。¹H NMR(400MHz, 氘代甲醇)δ＝8.76(s,1H),8.66(s,1H),7.62-7.47(m,2H),7.39(s,1H),7.35-7.28(m,1H),4.81-4.57(m,6H), 4.44(br s,2H),4.16(s,3H),1.68(br s,2H),1.05(t,J＝7.3Hz,3H)。LCMS(ESI)(5-95AB):m/z:472.1[M+1]。化合物30(自由碱)的制备

室温下，将13E的三氟醋酸盐(1.0克，1.52毫摩尔)加入乙醇(10毫升)中，加入丙醛(882.8毫克，15.2毫摩尔，1.1毫升)，室温搅拌0.5小时，再将醋酸硼氢化钠(644.3毫克，3.04毫摩尔)分批加入至上述溶液中，20-30度继续搅拌1小时。TLC监测反应结束，向反应液中加入5毫升氨水，加入二氯甲烷(60毫升)萃取，有机相用食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，粗品用薄层色谱板分离 (二氯甲烷：甲醇＝10：1)，得到化合物30的自由碱。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.46(s,1H),8.37 (s,1H),7.58(t,J＝6.9Hz,1H),7.50-7.38(m,1H),7.32(s,1H),7.23(dt,J＝1.3,8.1Hz,1H),4.27(s,2H),4.06(s, 3H),3.67-3.56(m,4H),2.62-2.49(m,2H),1.54-1.38(m,2H),0.95(t,J＝7.5Hz,3H).LCMS(ESI):m/z:472.2 [M+1]

实施例31

化合物31

将13E(90.00毫克，209.39微摩尔)和(1-乙氧基环丙氧基)-三甲基-硅烷(145.99毫克，837.54微摩尔)溶于甲醇(2.00毫升)和四氢呋喃(2.00毫升)的混合溶剂中，加入乙酸(50.29毫克，837.54微摩尔)和氰基硼氢化钠(52.63毫克，837.54)摩尔)。反应液在氮气保护下升温至70-80℃搅拌16小时。液相质谱检测到目标化合物。将反应液用DCM:MeOH＝10:1(22毫升)混合溶剂稀释并过滤，滤液浓缩后通过高效液相色谱分离纯化，流动相为盐酸体系，得到化合物31的盐酸盐.¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.76(s,1H),8.66 (s,1H),7.63-7.48(m,2H),7.39(s,1H),7.36-7.27(m,1H),4.80-4.71(m,4H),4.46(s,2H),4.16(s,3H),3.24 -3.18(m,1H),1.09-0.89(m,4H)。LCMS(ESI):m/z:470.1[M+1]。

实施例32

化合物32

根据化合物29的方法制备，将13E替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂- 3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，流动相为盐酸体系，得到化合物32的盐酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇) δppm 8.85-8.71(m,2H),7.71-7.53(m,2H),7.43(s,1H),7.29-7.18(m,1H),5.00(s,2H),4.16(s,3H), 4.03(s,2H),3.74-3.56(m,4H),3.53-3.41(m,2H).2.65-2.30(m,4H)LCMS(ESI):m/z:504.2[M+1]。

实施例33

化合物33A

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为6-氧代-5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-N-(3-氯-2-氟苯基)喹唑啉-4-胺，得到化合物33A。¹HNMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.78(s,1H), 8.42-8.33(m,1H),8.26(s,1H),8.01-7.96(m,1H),7.93-7.87(m,1H),7.23-7.16(m,2H),4.48-4.42(m,2H), 4.38(s,2H),4.22-4.15(m,2H),1.50(s,9H)。LCMS(ESI):m/z:500.1[M+1]。

化合物33B

根据化合物24C的方法制备，将24B替换为7-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)喹唑啉-6-基)-6-氧代-5-氧杂- 2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，得到化合物33B.粗品直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z:400.0 [M+1]。

化合物33

根据化合物1的方法制备，将1J替换为7-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)喹唑啉-6-基)-5-氧杂-2,7-二氮杂螺 [3.4]辛-6-酮，将多聚甲醛替换为丙酮，流动相为盐酸体系，得到化合物33的盐酸盐。¹H NMR(400MHz, 氘代甲醇)δ＝8.95-8.77(m,2H),8.54(br s,1H),8.05-7.95(m,1H),7.63-7.53(m,2H),7.38-7.28(m,1H), 4.77-4.55(m,6H),3.70-3.60(m,1H),1.43-1.25(m,6H)。LCMS(ESI):m/z:442.0[M+1]。

实施例34

化合物34

根据化合物1的方法制备，将1J替换为3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-1-氧杂-3,8- 二氮杂螺[4.5]癸-2-酮，将多聚甲醛替代为丙醛，流动相为甲酸体系，得到化合物34的甲酸盐.¹H NMR (400MHz,氘代甲醇)δ＝8.45(s,1H),8.41(s,1H),8.39(br s,1H),7.63-7.54(m,1H),7.44-7.36(m,1H),7.30 (s,1H),7.25-7.15(m,1H),4.05(s,3H),3.94(s,2H),3.54-3.43(m,2H),3.30-3.23(m,2H),3.11-3.01(m,2H), 2.43-2.18(m,4H),1.88-1.72(m,2H),1.03(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ESI):m/z:500.2[M+1]。

实施例35

化合物35A

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为6-氧代-5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，将1D 替换为6-溴-N-(3,4-二氯-2-氟苯基)-7-甲氧基喹唑啉-4-胺，得到化合物35A。LCMS(ESI):m/z:564.1[M+1]。

化合物35B

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为7-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-6-氧代 -5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，得到化合物35B.LCMS(ESI):m/z:464.1[M+1]。

化合物35

根据化合物1的方法制备，将1J替换为7-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-5-氧杂 -2,7-二氮杂螺[3.4]辛-6-酮，流动相为甲酸体系，得到化合物35的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇) δ＝8.46(s,1H),8.35(s,1H),8.31(br s,1H),7.61(dd,J＝8.0 8.0Hz,1H),7.43(dd,J＝2.0,8.8Hz,1H),7.31(s, 1H),4.32(s,2H),4.18-4.13(m,2H),4.05(s,3H),2.99-2.88(m,2H),1.59-1.51(m,2H),1.04-0.96(m,5H). LCMS(ESI):m/z:506.1[M+1]。

实施例36

化合物36A

根据化合物1C的方法制备，将1B替换为7-(4-羟基-7-甲氧基-喹唑啉-6-基)-6-氧代-5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-羧酸叔丁酯，得到化合物36A。粗品直接用于下一步。

化合物36B

根据化合物1D的方法制备，将1C替换为7-(4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-基)-5-氧杂-2,7-二氮杂螺[3.4]辛- 6-酮，将3-氯-2-氟苯胺替换为2-氟-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯胺，得到化合物36B.LCMS(ESI):m/z: 492.1[M+1]。

化合物36

向化合物36B(40.00毫克，81.37微摩尔，1.00当量)的甲醇(2.00毫升)溶液中加入丙醛(20.00毫克， 344.20微摩尔，4.23当量)，升温至40℃并搅拌0.5小时，然后加入醋酸硼氢化钠(20.00毫克，318.16微摩尔，3.91当量)，继续搅拌1小时，反应液中加入碳酸钾(45.00毫克，325.48微摩尔)后冷却至室温搅拌0.5 小时，LCMS检测到产物生成。将反应液用2N盐酸调节pH＝6后浓缩，残余物用甲醇(2毫升)稀释后用高效液相色谱分离纯化，流动相为甲酸体系，得到化合物36的甲酸盐。¹HNMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝ 8.79(s,1H),8.72(s,1H),7.68-7.53(m,1H),7.68-7.53(m,1H),7.41(s,1H),7.36-7.27(m,1H),4.83-4.73(m,2H),4.70-4.58(m,2H),4.56-4.41(m,2H),4.20(s,3H),3.93(s,1H),3.42-3.34(m,2H),1.80-1.61(m, 2H),1.11-1.02(m,3H)。LCMS(ESI):m/z:462.1[M+1]。

实施例37和38

化合物37A

向化合物(3R，4S)-3-(苄氧基羰基氨基)-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200毫克，594.56微摩尔,1.00 当量)的四氢呋喃溶液中加入叔丁醇钾(80.06毫克，713.47微摩尔,1.20当量)，20℃下搅拌2小时， TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)检测显示反应完全。将反应液浓缩，粗品用柱色谱分离(洗脱剂：石油醚：乙酸乙酯＝2：1至1:100)，得到化合物37A。

化合物37B

将化合物1D(200.0毫克，522.72微摩尔)和化合物37A(119.31毫克，522.72微摩尔)溶于1,4-二氧六环(3 毫升)中，然后向反应液中分别加入碳酸铯(510.94毫克，1.57毫摩尔)，碘化亚铜(298.66毫克，1.57毫摩尔)和N,N’-二甲基-1,2-乙二胺(138.2毫克，1.57毫摩尔)，反应液在120℃及氮气氛围保护下搅拌12小时。 TLC(乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:1)显示原料未完全消耗。将反应液浓缩后粗品用薄层色谱(展开剂：乙酸乙酯)制备分离纯化，得到化合物37B。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.75(s,1H),8.33(br s,1H),8.04 (br s,1H),7.82(br d,J＝9.3Hz,1H),7.36(s,1H),7.23-7.11(m,2H),5.25(t,J＝6.1Hz,1H),4.85(br s,1H),4.16 (br d,J＝12.7Hz,1H),4.02(s,3H),3.58-3.29(m,2H),3.18-2.96(m,1H),1.47(s,9H)

化合物37C

根据化合物1J的方法制备，将1I替换为(3aR，6aS)-3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)- 2-氧代四氢-2H-吡咯并[3,4-d]恶唑-5(3H)-羧酸叔丁酯，得到化合物37C,不需要纯化，粗品直接用于下一步。

化合物37D

根据化合物1的制备方法，将1J替换为(3AR，6AS)-3-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基喹啉-6-基)六氢-2H-吡咯并[3,4-d]恶唑-2-酮，得到化合物37D。SFC显示有2个峰，为混合物。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.47(br s,1H),8.33(s,1H),7.56(t,J＝7.4Hz,1H),7.45-7.38(m,1H),7.33(s,1H),7.27-7.19(m, 1H),5.31(dd,J＝4.5,8.0Hz,1H),4.97(dd,J＝5.0,8.0Hz,1H),4.07(s,3H),3.43(d,J＝11.8Hz,1H),3.12(d, J＝11.3Hz,1H),2.51(dd,J＝4.6,11.9Hz,1H),2.47(s,3H),2.23(dd,J＝5.0,11.3Hz,1H)。LCMS(ESI): m/z:444.3[M+1]

化合物37和38

称取化合物37D(21毫克)用SFC分离，条件：大赛璐手性色谱柱(250毫米*30毫米,5微米)，流动相：0.1％氨水的甲醇溶液，得到化合物37(ee值：100％，保留时间(min)：1.142)和化合物38(ee值： 95.98％，保留时间(min)：1.209)。

化合物37：¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.45(s,1H),8.30(s,1H),7.59-7.49(m,1H),7.46-7.39(m, 1H),7.33(s,1H),7.24(dt,J＝1.5,8.1Hz,1H),5.28(dd,J＝4.5,7.9Hz,1H),4.96(br d,J＝4.9Hz,1H),4.07(s,3H), 3.37(br d,J＝11.7Hz,1H),3.04(brd,J＝10.3Hz,1H),2.44-2.39(m,4H),2.18-2.09(m,1H)

LCMS(ESI):m/z:444.3[M+1]

化合物38：¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.45(s,1H),8.30(s,1H),7.55(br t,J＝7.0Hz,1H),7.43(t, J＝6.7Hz,1H),7.33(s,1H),7.24(dt,J＝1.1,8.1Hz,1H),5.28(dd,J＝4.5,7.9Hz,1H),4.99-4.94(m,1H),4.07 (s,3H),3.36(d,J＝12.0Hz,1H),3.03(d,J＝11.0Hz,1H),2.44-2.38(m,4H),2.12(dd,J＝5.0,11.1Hz,1H)

LCMS(ESI):m/z:444.3[M+1]

实施例39和40

化合物39A

根据化合物13A的方法制备，将硝基甲烷替换为1-硝基乙烷，得到化合物39A.¹HNMR(400MHz, 氘代氯仿)δ＝4.82(q,J＝7.0Hz,1H),4.03-3.95(m,2H),3.95-3.86(m,2H),1.67(d,J＝7.0Hz,3H),1.47(s, 9H).

化合物39B

根据化合物13B的方法制备，将13A替换为3-羟基-3-(1-硝基乙基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯，得到化合物 39B.¹HNMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝3.97-3.83(m,4H),3.35-3.28(m,1H),1.46(s,9H),1.10(d,J＝6.8Hz, 3H).

化合物39C

根据化合物13C的方法制备，将13B替换为39B，得到化合物39C.

化合物39D

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为39C，得到化合物39D.LCMS(ESI):m/z:444.1[M+1-Boc]

化合物39E

根据化合物1J的方法制备，将化合物1I替换为39D，得到化合物39E.

化合物39F

根据化合物1的方法制备，将化合物1J替换为39E，得到化合物39F.SFC显示有2个峰，为混合物。

化合物39和40

称取化合物39F(75毫克)用SFC分离，条件：大赛璐手性色谱柱(250毫米*30毫米,10微米)，流动相：0.1％氨水的乙醇溶液，得到化合物39(ee值：100％，保留时间(min):0.826)和化合物40(ee值： 100％，保留时间(min)：1.098)。

化合物39：¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.42-8.31(m,1H),8.23(s,1H),7.45(brt,J＝7.0Hz,1H), 7.36-7.26(m,1H),7.22(s,1H),7.16-7.06(m,1H),4.42-4.37(m,1H),3.94(s,3H),3.70(d,J＝9.3Hz,1H), 3.57-3.46(m,2H),3.41-3.31(m,1H),2.36(s,3H),1.28-1.15(m,3H).

化合物40：¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.42-8.31(m,1H),8.23(s,1H),7.45(brt,J＝7.0Hz, 1H),7.36-7.26(m,1H),7.22(s,1H),7.16-7.06(m,1H),4.40(q,J＝6.4Hz,1H),3.94(s,3H),3.70(d,J＝9.3Hz, 1H),3.54-3.40(m,2H),3.41-3.31(m,1H),2.36(s,3H),1.28-1.15(m,3H)

实施例41和42

化合物41A

向化合物2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸(60克，317.11毫摩尔,1.00当量)的四氢呋喃溶液(400毫升)中，0℃下加入N,N-二异丙基乙胺(69.67克，539.09毫摩尔,1.70当量)和氯甲酸异丁酯(64.97克，475.67毫摩尔, 1.5当量)并搅拌4小时，随后加入重氮甲基(三甲基)硅烷(2摩尔,317.11毫升,2当量)，0℃下搅拌2小时，升温至25℃继续搅拌6小时。反应液浓缩，残余物用柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯＝100:1至 20:1)，得到化合物41A。

化合物41B

向化合物41A(20克，93.79毫摩尔,1.00当量)的二氯甲烷溶液(200毫升)中，加入醋酸铑(525.32毫克， 1.88毫摩尔,0.02当量)和三乙胺(189.82毫克，1.88毫摩尔,0.02当量)，反应液0℃下搅拌1小时。反应液浓缩得到绿色油状物，残余物用柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯＝50:1至20:1)，得到化合物41B。

化合物41C

向化合物41B(10克，53.99毫摩尔,1.00当量)的乙醇溶液(100毫升)中，加入硝基甲烷(16.48克，269.95 毫摩尔,5.00当量)和三乙胺(273.16毫克，2.70毫摩尔,0.05当量)，反应液25℃下搅拌12小时。反应液浓缩得到油状物，粗品用柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯＝30:1至20:1)，得到化合物41C。

化合物41D

根据化合物13B的方法制备，将13A替换为41C，得到化合物41D..¹HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝ 3.90-3.69(m,1H),3.66-3.37(m,2H),3.35-3.13(m,2H),1.20-1.10(m,9H),1.01-0.92(m,3H).

化合物41E

根据化合物13C的方法制备，将13B替换为41D，得到化合物41E.¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝4.05 -3.96(m,1H),3.47-3.30(m,4H),3.47-3.30(m,1H),1.38(s,9H),1.37(brs,2H).

化合物41F

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为41E，得到化合物41F.¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.60(s, 1H),8.12-7.99(m,2H),7.80(br s,1H),7.24-7.16(m,2H),7.14-7.01(m,1H),4.38-4.29(m,1H),4.25(d, J＝10.3Hz,1H),4.02(s,3H),,1.49(d,J＝6.6Hz,3H),1.41(s,9H).

化合物41G

根据化合物1J的方法制备，将化合物1I替换为41F，得到化合物41G..

化合物41H

根据化合物1的方法制备，将化合物1J替换为41G，得到化合物41H.SFC显示有2个峰，为混合物。

化合物41和42

称取化合物41H用SFC分离，条件：大赛璐手性色谱柱(250毫米*30毫米,10微米)，流动相：0.1％氨水的乙醇溶液，得到化合物41(ee值：100％,保留时间(min)：2.368)和化合物42(ee值： 95.528％，保留时间(min)：2.529)。

化合物41：¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.59(s,1H),8.07(s,1H),8.01-7.99(m,1H),7.45(br t, 1H),7.14-7.03(m,3H),3.98(s,2H),3.86-3.85(m,4H),3.18-3.13(m,1H),3.04-3.01(m,1H),2.32(s,3H),1.21 -1.18(m,3H)

化合物42：¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.59(s,1H),8.13(s,1H),7.89-7.86(m,1H),7.45(br t, 1H),7.09-7.00(m,3H),4.01(s,2H),3.98-3.33(m,4H),3.18-3.16(m,1H),3.05-3.03(m,1H),2.32(s,3H),1.19 -1.16(m,3H)

实施例43

化合物43A

根据化合物1I的方法制备，将1D替换为6A，得到化合物43A.¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ8.74- 8.62(m,1H),8.20-8.13(m,1H),8.11(s,1H),7.75(br s,1H),7.32-7.27(m,2H),4.48-4.41(m,2H),4.26(s, 2H),4.17(d,J＝10.0Hz,2H),3.97(s,3H),1.49(s,9H)

化合物43B

根据化合物1J的方法制备，将化合物1I替换为43A，得到化合物43B..

化合物43

根据化合物1的方法制备，将化合物1J替换为43B，流动相为甲酸体系，得到化合物43的甲酸盐.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.97(br s,1H),8.48(br d,J＝14.8Hz,1H),8.13(s,1H),7.66-7.49(m,2H), 7.37(s,1H),4.21(s,2H),4.00(s,3H),3.87-3.60(m,4H),2.52(s,3H).

实施例44

化合物44A

根据化合物1I的方法制备，将1D替换为9A，得到化合物44A.¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.76- 8.68(m,1H),8.23(t,J＝8.5Hz,1H),8.09(s,1H),7.38-7.36(m,1H),7.38-7.35(m,1H),7.35-7.33(m,1H), 7.32-7.30(m,1H),4.44(d,J＝10.3Hz,2H),4.27(s,2H),4.18(d,J＝10.2Hz,2H),4.01(s,3H),1.49(s,9H)。

化合物44B

根据化合物1J的方法制备，将化合物1I替换为44A，得到化合物44B.LCMS(ESI):m/z:473.9[M+1]。

化合物44

根据化合物1的方法制备，将化合物1J替换为44B，流动相为甲酸体系，得到化合物44的甲酸盐。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.46(s,1H),8.43-8.28(m,2H),7.62(t,J＝8.4Hz,1H),7.49(d,J＝9.8Hz,1H), 7.43(d,J＝8.7Hz,1H),7.32(s,1H),4.32(s,2H),4.20-4.11(m,4H),4.09-3.96(m,3H),2.77(s,3H)。LCMS (ESI):m/z:487.9[M+1]

实施例45

化合物45A

向化合物1D(2克，5.23毫摩尔,1.00当量)中加入吡啶盐酸盐(3.02克，26.14毫摩尔,5.00当量)，升温至 170℃并搅拌2小时，反应液浓缩，加入饱和碳酸氢钠溶液调节溶液PH＝9，残余物用(DCM:MeOH＝10: 1)混合溶剂20毫升萃取，有机相分离，无水硫酸钠(1克)干燥，过滤，滤液浓缩，得到化合物45A。粗品无需纯化直接进行下一步反应。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.86(s,1H),8.75(s,1H),8.41(s,1H), 7.50(q,J＝6.9Hz,2H),7.33-7.25(m,1H),7.20(s,1H).

化合物45B

向化合物45A(1.4克，3.80毫摩尔,1.00当量)的乙腈(5毫升)和水(5毫升)的混合溶剂中加入氢氧化钾(4.26克，75.97毫摩尔,20.0当量)和溴代二氟甲基膦酸二乙酯(2.03克，7.60毫摩尔,2.0当量)，20℃下搅拌12小时，液相质谱显示反应完全。将反应液浓缩，得到化合物45B，粗品无需纯化直接进行下一步反应。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.82(s,1H),8.53(s,1H),7.61-7.55(m,2H),7.50-7.36(m,2H), 7.30-7.20(m,2H).

化合物45C

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为13C，将1D替换为45B，得到化合物45C.¹HNMR(400MHz, 氘代甲醇)δ＝8.63-8.48(m,2H),7.68-7.55(m,2H),7.49-7.43(m,1H),7.38(s,1H),7.26(t,J＝8.1Hz,1H), 7.20(s,1H),7.02(s,1H),4.35-4.19(m,4H),1.50(s,9H),1.47(s,2H).

化合物45D

根据化合物1J的方法制备，将化合物1I替换为45C，得到化合物45D

化合物45

根据化合物1的方法制备，将化合物1J替换为45D，得到化合物45。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝ 8.53(s,2H),7.67-7.55(m,2H),7.45(br t,J＝7.5Hz,1H),7.28-7.02(m,2H),4.32(s,2H),3.73-3.61(m,4H), 2.48(s,3H).

实施例46

化合物46A

根据化合物1D的方法制备，将3-氯-2-氟苯胺替换为4-氯-2-氟苯胺，得到化合46A.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.15(s,1H),8.71(s,1H),7.58(dt,J＝6.1,8.8Hz,1H),7.49-7.41(m,2H), 7.25-7.16(m,1H),4.05(s,3H)

化合物46B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为13C，将1D替换为46A，得到化合物46B.

¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.70(s,1H),8.30-8.21(m,1H),8.09(s,1H),7.30(s,1H),7.23-7.21(m, 1H),7.21-7.18(m,1H),4.45(d,J＝10.5Hz,2H),4.27(s,2H),4.18(d,J＝10.3Hz,2H),4.00(s,3H),,1.50(s, 9H)。LCMS(ESI):m/z:530.0[M+1]

化合物46C

根据化合物1J的方法制备，将化合物1I替换为46B，得到化合物46C.

LCMS(ESI):m/z:430.0[M+1]

化合物46

根据化合物1的方法制备，将化合物1J替换为46C，流动相为甲酸体系，得到化合物46的甲酸盐.

¹HNMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.46(s,1H),8.37(s,1H),7.67(t,J＝8.4Hz,1H),7.39-7.25(m,3H),4.30(s, 2H),4.09-4.02(m,4H)，4.07(s,3H),,2.71(s,3H)。LCMS(ESI):m/z:444.0[M+1]。

实施例47

化合物47A

根据化合物1D的方法制备，将3-氯-2-氟苯胺替换为2-氟-4-甲基苯胺，得到化合47A

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.08(s,1H),8.71(s,1H),7.45-7.37(m,2H),7.21(d,J＝11.4Hz,1

H),7.12(d,J＝8.3Hz,1H),4.06(s,3H),2.38(s,3H)

化合物47B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为13C，将1D替换为47A，得到化合物47B.

¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.73(s,1H),8.19(t,J＝8.3Hz,1H),7.99(s,1H),7.37(s,1H),7.06-7.01 (t,2H),4.45(d,J＝10.3Hz,2H),4.27(s,2H),4.17(d,J＝10.0Hz,2H),4.04(s,3H),2.39(s,3H),1.50(s,9H)。

LCMS(ESI):m/z:510.1[M+1]。

化合物47C

根据化合物1J的方法制备，将化合物1I替换为47B，得到化合物47C..

LCMS(ESI):m/z:410.3[M+1]

化合物47

根据化合物1的方法制备，将化合物1J替换为47C，流动相为甲酸体系，得到化合物47的甲酸盐.¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.41(s,1H),8.37(s,1H),7.47(t,J＝8.2Hz,1H),7.32(s,1H),7.12-7.04(m, 2H),4.28(s,2H),4.07(s,3H),3.92-3.79(m,4H),2.62-2.55(m,3H),2.42(s,3H)。LCMS(ESI):m/z:424.1 [M+1]。

实施例48

化合物48A

根据化合物1D的方法制备，将3-氯-2-氟苯胺替换为2-氟-3-甲基苯胺，得到化合物48A

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝11.77(br s,1H),9.29(s,1H),8.87(s,1H),7.53(s,1H),7.41-7.28(m,2H), 7.28-7.15(m,1H),4.07(s,3H),2.31(s,3H)

化合物48B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为13C，将1D替换为48A，得到化合物48B.

¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.63(s,1H),8.10(t,J＝7.5Hz,1H),7.94(s,1H),7.53-7.43(m,1H),7.21(s, 1H),7.02(t,J＝7.9Hz,1H),6.94-6.86(m,1H),4.36(d,J＝10.9Hz,2H),4.17(s,2H),4.11-4.06(m,2H),3.90 (s,3H),2.26(d,J＝2.0Hz,3H),1.41(s,9H)。LCMS(ESI):m/z:510.1[M+1]。

化合物48C

根据化合物1J的方法制备，将化合物1I替换为48B，得到化合物48C..

LCMS(ESI):m/z:410.1[M+1]

化合物48

根据化合物1的方法制备，将化合物1J替换为48C，流动相为甲酸体系，得到化合物48的甲酸盐.

¹HNMR(400MHz,氘代甲醇)δ＝8.42(s,1H),8.38(s,1H),8.33(br s,1H),7.47-7.40(m,1H),7.30(s,1H), 7.23-7.17(m,1H),7.16-7.10(m,1H),4.39-4.28(m,2H),4.25-4.13(m,4H),4.06(s,3H),2.79(s,3H),2.34 (d,J＝1.7Hz,3H).LCMS(ESI):m/z:424.2[M+1]

实施例49

化合物49A

根据化合物1D的方法制备，将3-氯-2-氟苯胺替换为2,4-二氟-3-甲基苯胺，得到化合物49A.

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.03(s,1H),8.61(s,1H),7.62-7.54(m,1H),7.48-7.38(m,2H),4.04(s, 3H)

化合物49B

根据化合物1I的方法制备，将1H替换为13C，将1D替换为49A，得到化合物49B.

¹HNMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝8.63(s,1H),8.20(s,1H),7.95-7.66(m,2H),7.21(s,1H),4.44(d,J＝10.3

Hz,2H),4.26(s,2H),4.18(d,J＝10.4Hz,2H),3.95(s,3H),1.50(s,9H)。LCMS(ESI):m/z:548.0[M+1]。

化合物49C

根据化合物1J的方法制备，将化合物1I替换为49B，得到化合物49C.

LCMS(ESI):m/z:448.1[M+1]

化合物49

根据化合物1的方法制备，将化合物1J替换为49C，得到化合物49.¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ＝ 8.64(s,1H),8.17(s,1H),7.87(dt,J＝5.6,8.8Hz,1H),7.80(br s,1H),7.22(s,1H),7.05-6.97(m,1H),4.30(s, 2H),3.96(s,3H),3.69(d,J＝9.2Hz,2H),3.51(d,J＝9.2Hz,2H),2.48(s,3H)。LCMS(ESI):m/z:462.2[M+1]

实验例1化合物体外渗透性及肝微粒体代谢稳定性

肝微粒体稳定性实验

本研究应用小鼠、SD大鼠、比格犬和人肝微粒体为材料，研究受试化合物在上述五个种属肝微粒体中的代谢稳定性。采用睾酮(testosterone)、双氯芬酸(diclofenac)和丙胺苯丙酮(propafenone)用作对照化合物。

受试化合物实验条件如下：

-测试浓度：1μM(DMSO≤0.5％)；

-孵育时间：0、5、10、20、30、60min；

-缓冲液：100mm磷酸盐缓冲液，pH7.4；

-微粒体蛋白浓度：0.5mg/ml；

-辅因子：NADPH和MgCl₂

-孵育条件：37℃

准备8块96孔孵育板，分别命名为T0、T5、T10、T20、T30、T60、Blank60和NCF60。前6块孵育板对应的反应时间点分别为0、5、10、20、30和60分钟。Blank 60板中不加入供试品或对照化合物并在孵育60分钟后取样。NCF60板中用磷酸钾盐缓冲液代替NADPH再生体系溶液进行孵育60分钟。

在T0、T5、T10、T20、T30、T60和NCF60板上分别加入10μL供试品或对照化合物工作液和90μL 微粒体工作液(肝微粒体蛋白浓度为0.5mg/mL)，在Blank60板中只添加微粒体工作液，然后将上述孵育板放置于37℃水浴锅中预孵育大约10分钟。

预孵育结束后，除NCF60板和T0板外，每个样品孔内添加10μL NADPH再生体系工作液以启动反应，在NCF60板上每孔添10μL磷酸钾盐缓冲液。

孵育适当时间(如5、10、20、30和60分钟)后，分别在每个样品孔中加入300μL含终止液(含100ng/mL Tolbutamide和100ng/mL Labetalole的乙腈溶液)以终止反应。

T0板的制备：在T0板中先加入300μL终止液(含100ng/mL Tolbutamide和100ng/mLLabetalole的乙腈溶液)然后再加入10μL NADPH再生体系工作液。

所有样品板摇匀并在4000×g离心20分钟，对供试品，每孔取100μL上清液稀释到300μL纯水中用于LC/MS/MS分析。

数据处理用到的公式如下：

％剩余量＝(任一时间点对照品与内标的峰面积比值/0分钟时对照品与内标的峰面积比值)×100％

孵育60分钟后化合物的剩余百分比，见表1。

MDR1-MDCK细胞双向渗透性评估实验

将高表达人P-糖蛋白(P-glycoprotein)的MDR1-MDCK细胞种植在96孔Insert细胞板，培养4-7天后形成汇聚的单层细胞；利用评估非诺特罗(Fenoterol，低渗透性标记物)与普萘洛尔(Propranolol，高渗透性标记物)的单向(A→B)渗透性，以及地高辛(Digoxin，一种P-糖蛋白底物)的双向渗透性来验证单层细胞的质量。这三个对照化合物做两个复孔。

待测化合物转运实验的标准条件如下：

-测试浓度：2μM(DMSO≤1％)；

-平行复孔：n＝2；

-方向：双向转运，包括A→B和B→A两个方向；

-孵育时间：单个时间点，2.5小时；

-转运缓冲液：含10mM HEPES的HBSS，pH7.4；

-孵育条件：37℃，5％CO₂，相对饱和湿度。

孵育结束后，取给药孔(donor wells)和接收孔(receiver wells)内的样品溶液立即与含有内标的冷乙腈溶液混合。采用LC/MS/MS方法分析待测化合物在所有样品(包括起始给药液，给药孔上清液，接收液)中的浓度。待测化合物的浓度用其峰面积与内标峰面积之比来表示。渗透性测试结果如表1。

实验结论：

从表1可以看出各化合物在不同种属肝微粒中，60分钟剩余百分比较高，具有良好的代谢稳定性。从体外MDR1-MDCKⅡ渗透性性上来看，部分化合物具有较高的通透性，A到B速率较快，细胞穿透能力较强，并且外排比较小，不是p-GP的底物，有利于药物渗透到脑部组织，具有良好的脑转移肿瘤的治疗潜力。

表1化合物体外渗透性及肝微粒体代谢稳定性

注：“-”代表尚未取得测试结果。

实验例2生化实验

实验目的：检测化合物对EGFR WT,EGFR[L858R]和EGFR[d746-750]酶活性的抑制效应

实验材料：

EGFR WT(Invitrogen,Cat.No.PR7295B),EGFR[L858R](Invitrogen,Cat.No.PR7447A),EGFR[d746-750] (Invitrogen,Cat.No.PV6179),ATP(Sigma,Cat.No.A7699-1G),DMSO(Sigma,Cat.No.D2650),DTT(Sigma, Cat.No.43815),384孔板_化合物稀释板(Greiner,Cat.No.781280),384孔板_测试板(Perkin Elmer,Cat.No.6007299),HTRF KinEASE TK Kit(Cisbio,Cat.No.62TK0PEB),氯化镁(Sigma,Cat.No.M1028), Orthovanadate(Sigma,Cat.No.S6508),BSA(Sigma,Cat.No.A7030),HEPES(Life technology,Cat.No.11344- 041)

实验方法：

化合物最终测试浓度：

受试化合物最终测试浓度从10μM到0.17nM，3倍梯度稀释，11个浓度。

激酶检测：

缓冲液的配制，缓冲液包括50mM HEPES(pH 7.5)，0.01％BSA，5mM氯化镁，0.1mMOrthovanadate。配制缓冲液后，将酶和底物与预先稀释配制的不同浓度化合物混合，室温放置15分钟。加入ATP启动反应，室温孵育60分钟(其中设置阴阳性对照)。10μL的反应体系包括2.5μL的化合物，5μL酶和底物的混合物和2.5μL的ATP。反应完毕加入抗体检测，室温孵育60分钟后Evnvision(读板仪器)检测，采集数据。根据XLfit5软件(数据分析软件)进行数据分析及拟图。

实验结果：见表2。

实验例3细胞实验

实验材料：

RPMI1640培养基，FBS胎牛血清，胰蛋白酶-EDTA，均购自Giboco。DPBS购自Corning，青霉素/ 链霉素溶液购自Hyclone，Cell-Titer Glo reagent购自Promega(1kit，货号G7571)。PC-9由WuXi自己构建。读板仪器：Envision(PerkinElmer)。

实验方法：

384孔板1，2，24列加45μL培养基，细胞悬液用Multi-drop分液，每孔45μL(1000个细胞)，放入培养箱中过夜培养。将化合物按Echo分液要求加入到source板中，将source板中化合物加入inter板稀释至中间浓度，再将source板及inter板中的化合物加入细胞板中，细胞继续在培养箱中培养72小时。72小时后，将Cell-Titer Glo reagent和细胞取出放置室温平衡30min，用Multi-drop分液25μL Cell-Titer Glo reagent至384孔板细胞中，中速震荡3min，1000rpm离心2min，静置10min。Envision读板(Luminescence)。

本发明化合物的野生型EGFR酶IC₅₀，外显子19缺失EGFR酶IC₅₀，EGFR L858R酶IC₅₀，PC-9细胞的抗增殖活性IC₅₀，HCC827细胞的抗增殖活性IC₅₀以及A431细胞的抗增殖活性IC₅₀的数据见表2。实验结论：

由于EGFR的自磷酸化即二聚化后可以激活它位于细胞内的激酶通路，这个自磷酸化可以引导下游的磷酸化，诱导细胞增殖。而许多肿瘤在EGFR中存在高表达或异常表达，在恶性肿瘤的演进中起着非常重要的作用。PC-9(Δ19del)细胞活性抑制能最直观的表现化合物对19号外显子缺失的细胞模型的抗增值作用，从而针对性的对化合物进行体外筛选。从表中可以看出，本发明化合物对PC-9(Δ19del)细胞具有非常好的抗增值活性。

表2化合物的酶活性及对细胞的抗增殖活性数据

注：“-”代表未测试。

实验例4 PC-9-Luc原位脑转移模型的体内药效学研究

细胞培养：肺癌PC-9-Luc细胞体外单层培养，培养条件为RPMI-1640(培养基)中加10％胎牛血清，100 U/毫升青霉素和100μg/毫升链霉素，37℃、5％CO₂孵箱培养。一周两次用胰酶-EDTA进行常规消化处理传代。当细胞饱和度为80％-90％，数量到达要求时，收取细胞，计数，接种。

动物：BALB/c nude裸小鼠，雌性，6-8周龄，体重18-22克。由上海西普尔-必凯实验动物有限公司或其它有资质的供应商提供。

肿瘤接种：使用戊巴比妥钠麻醉雌性BALB/c裸鼠，于术前30分钟和术后6小时，皮下注射丁丙诺啡，用无菌解剖刀切开矢状切口，暴露头骨并用棉签清洁。注射细胞前，用尖针头在前卤右侧及冠状缝前侧处对头骨进行穿孔。缓慢注射细胞悬液.注射结束后，用双氧水清洁颅骨并用干棉签擦拭，用镊子复位头皮，缝合切口，术后需继续观察动物至完全苏醒。

生物发光测量：

原位接种后的小鼠按照体重经腹腔注射发光素,用氧气和异氟烷的混合气体对小鼠进行预麻醉。在小鼠被深度麻醉后，将其移至IVIS(Lumina II)的成像室内开始进行生物发光检测。检测并记录动物体内(原位瘤和转移瘤)所有生物发光信号和产生的图像信息。

在采用荧光标记的PC-9-Luc细胞建立的小鼠原位脑转移模型中，通过检测生物荧光强度的方法，来反映小鼠肿瘤的生长情况，生物荧光数值越高表示小鼠肿瘤体积越大。

分组与实验开始：

接种后第6天准备分组。分组前对所有动物进行生物发光检测，以信号强度与体重为参数进行随机分组并开始给药。给药后每周进行二次小鼠生物发光信号强度检测共进行3周。

实验指标：

实验指标是肿瘤生长能否被延迟或抑制。肿瘤接种后每周检测2次动物的生物发光信号，共计3周。每周测量两次体重。

实验结果：见图1和表3。

表3肿瘤生长抑制数据^a

注：a.平均值±标准误差，n＝6.

b.空白组，自第14天动物出现死亡后，不作统计.

实验结论：

从图1以及表3中生物荧光强度数据可以看出，本发明化合物在该模型中，抗肿瘤药效显著，优于 AZD3759及厄洛替尼，显示了良好的抗肿瘤效果，具有潜在的治疗脑转移肿瘤的效果。

实验例5化合物在人肺癌细胞PC-9皮下移植肿瘤模型的生长抑制作用

实验目的：

本试验使用人肺癌细胞PC-9皮下异种移植肿瘤Balb/c nude裸小鼠模型评价化合物的抗肿瘤作用。

实验材料：

裸小鼠(BALB/c Nude)、(MOH&CIQ)PC-9细胞株

实验方法：

1.细胞培养：肺癌PC-9细胞体外单层培养，培养条件为RPMI-1640(细胞培养液)中加10％胎牛血清， 100U/毫升青霉素和100μg/毫升链霉素，37℃、5％CO₂孵箱培养。一周两次用胰酶-EDTA进行常规消化处理传代。当细胞饱和度为80％-90％，数量到达要求时，收取细胞，计数。密度为5×10⁶个细胞。

2.细胞接种：将0.2毫升(含5×10⁶个)PC-9细胞悬液(PBS:Matrigel＝1:1)皮下接种于每只小鼠的右后背，共接种64只小鼠。在接种后第7天，测量肿瘤平均体积达到169mm³时，依据肿瘤体积和动物体重采用随机分层分组方法开始分组给药。PBS为磷酸缓冲液，Matrigel是基质胶。

3.给药：剂量为0-4天:10毫克/kg、5-20天:5毫克/kg；口服给药；给药频次：一天一次×3周。

肿瘤测量和实验指标

每周两次用游标卡尺测量肿瘤直径。肿瘤体积的计算公式为：V＝0.5a×b²，a和b分别表示肿瘤的长径和短径。

化合物的抑瘤疗效用TGI(％)或相对肿瘤增殖率T/C(％)评价。

相对肿瘤增殖率T/C(％)＝TRTV/CRTV×100％(TRTV：治疗组平均RTV；CRTV：溶剂对照组平均 RTV)。

根据肿瘤测量的结果计算出相对肿瘤体积(relative tumor volume，RTV)，计算公式为RTV＝V_t/V₀，其中V₀是分组给药时(即D₀)测量所得肿瘤体积，V_t为对应小鼠某一次测量时的肿瘤体积，TRTV与CRTV 取同一天数据。

TGI(％)，反映肿瘤生长抑制率。TGI(％)＝[(1-(某处理组给药结束时平均瘤体积－该处理组开始给药时平均瘤体积))/(溶剂对照组治疗结束时平均瘤体积－溶剂对照组开始治疗时平均瘤体积)]×100％。

在实验结束后将检测肿瘤重量，并计算T/C(％)，T和C分别表示给药组和溶剂对照组的瘤重。

实验结果：见表4。

实验结论：

在小鼠皮下移植瘤PC-9模型中，本发明化合物对肿瘤生长具有有显著抑制作用，并且具有缩小肿瘤的效果，显示了良好的抗肿瘤药效。

表4化合物对人肺癌细胞PC-9皮下异种移植瘤模型的抑瘤效果

注：a.平均值±标准误差，n＝6。

实验例6大鼠、猴单次静脉与口服给药的药代动力学研究

实验目的：

本实验旨在研究供试化合物单次静脉及单次口服给药后，化合物在不同种属体内的药代动力学(PK) 情况。

样品收集与制备：

静脉注射或口服给药后，采集动物血液样本，记录实际采血时间。血样采集以后，立即转移至贴有标签的含K2-EDTA的离心管中，随后离心处理后取血浆。将血浆转移至预冷的离心管，在干冰中速冻，并储存在-70±10℃超低温冰箱中，直到进行LC-MS/MS分析。

药代动力学数据分析：

使用药动学软件，以非房室模型对化合物的血浆药物浓度数据进行处理。达峰浓度(C_max)和达峰时间 (T_max)以及可定量末时间，从血药浓度-时间图中直接获得。使用对数线性梯形法计算下列药代动力学参数：半衰期(T_1/2)，表观分布容积(V_dss)以及清除率(Cl)，0点到末端时间点时间-血浆浓度曲线下面积(AUC_0-last)，初始浓度(C₀)。

实验结果：

见表5和表6。

实验结论：

本发明化合物在大鼠中口服吸收较好，具有较低的清除率，半衰期较长，生物利用度较高；剂量爬坡实验显示暴露量与剂量基本呈线性相关，且在第24小时脑脊液中仍有较好的药物浓度，说明该药物具有较好的入脑性质。本发明化合物在猴中口服吸收较好，半衰期较长，生物利用度较高；暴露量与剂量基本呈线性相关，同时在脑脊液中具有较高的暴露量。

表5大鼠单次静脉和口服给药给予不同剂量化合物13的药代动力学参数

表6猴单次静脉和口服给药给予不同剂量化合物13后的药代动力学参数

Claims

1.式(XV)所示化合物或其药学上可接受的盐，

其中，

R_4a、R_4b、R_4c、R_4d和R_4e分别独立地选自H、F、Cl、Br、C_1-3烷基或乙炔基，所述C_1-3烷基任选被1、2或3个R取代；

R_5b选自H或C_1-5烷基，所述C_1-5烷基任选被1、2或3个R取代；和

R分别独立地选自F、Cl、Br、OH或NH₂。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R₃选自H或OCH₃，所述OCH₃任选被1、2或3个R取代。

3.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R₃选自H、OCH₃或OCHF₂。

4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R_4a、R_4b、R_4c、R_4d和R_4e分别独立地选自H、F、Cl、Br、CH₃或乙炔基。

5.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R_5a选自H、CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂CH₃、所述CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂CH₃、任选被1、2或3个R取代。

6.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R_5a选自H、CH₃、CH₂CH₃、CH₂CH₂F、CH₂CH₂CH₃、

7.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R_5b选自H或CH₃，所述CH₃任选被1、2或3个R取代。

8.根据权利要求7所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R_5b选自H或CH₃。

9.根据权利要求1、6或8所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，结构单元选自

10.根据权利要求1或4所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，结构单元选自

11.化合物或其药学上可接受的盐，其选自

12.根据权利要求11所述的化合物或其药学上可接受的盐，其选自

13.根据权利要求1-12任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述的盐选自马来酸盐、甲酸盐或盐酸盐。

14.根据权利要求13所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述马来酸盐结构如下：

15.根据权利要求1-14任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗癌症药物中的应用。