CN108610405B - 蛋白质TaNRT2.5在调控植物根系发育中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了蛋白质TaNRT2.5在调控植物根系发育中应用。本发明提供了aNRT2.5蛋白或其相关生物材料在调控植物根系发育中的应用;所述相关生物材料为能够表达所述TaNRT2.5蛋白的核酸分子或含有所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组菌或转基因细胞系。本发明所提供的蛋白质TaNRT2.5能够促进植物根系发育:与野生型植物相比,TaNRT2.5‑3B超量表达转基因植物的总侧根长/可见侧根数/根系生物量均显著增加。因此,可以利用蛋白质TaNRT2.5调控植物根系发育。本发明对选育高产植物新材料的具有重要应用价值。

Description

蛋白质TaNRT2.5在调控植物根系发育中的应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体涉及蛋白质TaNRT2.5在调控植物根系发育中应用。
背景技术
根是植物生长发育的重要器官,主要功能是吸收、输导、支持、合成和贮藏。植 物通过根系从土壤中吸收水分、矿物质及其它营养成分,因此,根系对植物的生长发 育极其重要。而单、双子叶植物的根系之间存在显著不同。因此,尽管近几年在拟南 芥根系发育的研究中取得了较大进展,但对粮食作物如小麦等的相关机制了解并不多。
小麦是主要粮食作物,而在半干旱的旱作农业区,水资源贫乏成为限制小麦高产的主要因子,植物个体间竞争最强烈的环境资源是土壤水分,而根系是竞争水分和肥 料最主要的器官。根系生长发育状况与作物产量密切相关。鉴于根系在高效吸收水肥 方面的重要性,科学家认为遗传改良农作物根系形态构型是实现第二次绿色革命、进 一步提高产量的关键。
发明内容
本发明的目的是提供一种蛋白质TaNRT2.5在调控植物根系发育中应用。
第一方面,本发明要求保护TaNRT2.5蛋白或其相关生物材料在调控植物根系发育(如促进植物根系发育)中的应用;
所述相关生物材料可为能够表达所述TaNRT2.5蛋白的核酸分子或含有所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组菌或转基因细胞系。
进一步地,在所述应用中,所述TaNRT2.5蛋白或其编码基因在所述植物中的表 达量和/或活性增加,促进植物根系发育。
其中,所述植物根系发育具体可体现为如下中至少一种:
(a1)植物总侧根长;
(a2)植物可见侧根数;
(a3)植物根系生物量。
第二方面,本发明要求保护一种培育总侧根长增加和/或可见侧根数增多和/或根系 生物量增加的植物品种的方法。
本发明所提供的培育总侧根长增加和/或可见侧根数增多和/或根系生物量增加的 植物品种的方法,可包括使受体植物中TaNRT2.5蛋白的表达量和/或活性提高的步骤。
进一步地,本发明提供了一种培育总侧根长增加和/或可见侧根数增多和/或根系生 物量增加的转基因植物的方法。
本发明所提供的培育总侧根长增加和/或可见侧根数增多和/或根系生物量增加的 转基因植物的方法,具体可包括如下步骤:向受体植物中导入能够表达TaNRT2.5蛋 白的核酸分子,得到转基因植物;所述转基因植物与所述受体植物相比总侧根长增加 和/或可见侧根数增多和/或根系生物量增加。
在第二方面中,所述“向受体植物中导入能够表达所述TaNRT2.5蛋白的核酸分子”具体可通过向所述受体植物中导入含有所述TaNRT2.5蛋白的编码基因的重组表 达载体实现。
所述重组表达载体可用现有的植物表达载体构建。所述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等,如pCAMBIA-1300-221、pGreen0029、pCAMBIA3301、pCAMBIA1300、pBI121、pBin19、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301-UbiN 或其它衍生植物表达载体。所述植物表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域, 即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺 苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端。使用所述基因构建重组表达载体 时,在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启 动子,例如花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子、泛素基因Ubiquitin启动子(pUbi)、 胁迫诱导型启动子rd29A等,它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用;此外, 使用本发明的基因构建重组表达载体时,还可使用增强子,包括翻译增强子或转录增 强子,这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等,但必需与编 码序列的阅读框相同,以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子 的来源是广泛的,可以是天然的,也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始 区域或结构基因。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选,可对所用重组 表达载体进行加工,如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物 的基因、具有抗性的抗生素标记物或是抗化学试剂标记基因等。也可不加任何选择性 标记基因,直接以逆境筛选转化植株。
在本发明中,所述重组载体中启动所述TaNRT2.5蛋白的编码基因转录的启动子为Ubiquitin启动子。
更加具体的,所述重组表达载体为将所述TaNRT2.5蛋白的编码基因插入到 pUbi-163载体的多克隆位点处(BamHⅠ和KpnI)所得的重组质粒。
在第一方面、第二方面,所述TaNRT2.5蛋白均可为TaNRT2.5-3B蛋白(即位于 小麦B染色体组上的TaNRT2.5蛋白)。更进一步,所述TaNRT2.5-3B蛋白具体可为如 下任一所示蛋白质:
(A1)氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质;
(A2)将SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/ 或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;
(A3)与(A1)-(A2)中任一所限定的氨基酸序列具有99%以上、95%以上、 90%以上、85%以上或者80%以上同源性且具有相同功能的蛋白质;
(A4)在(A1)-(A3)中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得 到的融合蛋白。
在本发明的具体实施方式中,所述TaNRT2.5-3B蛋白具体为将SEQ ID No.2所示核苷酸序列编码所得的蛋白质(即在SEQ ID No.1所示氨基酸序列的C端增加 HHHHHH)。
相应的,在第一方面、第二方面中,所述“能够表达所述TaNRT2.5蛋白的核酸 分子”均可为所述TaNRT2.5-3B蛋白的编码基因。更进一步,所述TaNRT2.5-3B蛋白 的编码基因具体可如下任一所述的DNA分子:
(B1)SEQ ID No.2的第1-1542位所示的DNA分子;
(B2)SEQ ID No.2所示的DNA分子;
(B3)在严格条件下与(B1)或(B2)限定的DNA分子杂交且编码所述TaNRT2.5 蛋白的DNA分子;
(B4)与(B1)-(B3)中任一限定的DNA序列具有99%以上、95%以上、90% 以上、85%以上或者80%以上同源性且编码所述TaNRT2.5蛋白的DNA分子。
上述严格条件可为用6×SSC,0.5%SDS的溶液,在65℃下杂交,然后用2×SSC,0.1%SDS和1×SSC,0.1%SDS各洗膜一次。
在第一方面、第二方面中,所述植物均可为单子叶植物,也可为双子叶植物。
在第一方面、第二方面中,所述根系生物量以单株根系鲜重体现。
进一步地,所述单子叶植物可为禾本科植物。
更进一步地,所述禾本科植物可为小麦。
在本发明的具体实施方式中,所述植物具体为小麦品种陇春23号。
实验证明,本发明所提供的蛋白质TaNRT2.5能够促进植物根系发育:与野生型 植物相比,TaNRT2.5-3B超量表达转基因植物的总侧根长/可见侧根数/根系生物量均显 著增加。因此,可以利用蛋白质TaNRT2.5调控植物根系发育。本发明对选育高产植 物新材料的具有重要应用价值。
附图说明
图1为pUbi-TaNRT2.5-3B载体示意图。
图2为TaNRT2.5转基因系DNA水平鉴定。WT代表野生型陇春23号(阴性对 照)。箭头所指为目的条带位置。
图3为TaNRT2.5转基因系RNA水平鉴定。WT代表野生型陇春23号。TaActin 作为内参基因,图中数值为平均值±S.E.(n=4),星号代表TaNRT2.5转基因系和野 生型表达量的显著性分析,P<0.01(**)水平。
图4为超表达TaNRT2.5-3B促进小麦根系发育。A为TaNRT2.5-3B超表达系和野 生型根系表型图片(Bar=5cm);B为水培条件下高低氮培养的TaNRT2.5-3B超表达 系和野生型的单株根系鲜重;C为水培条件下高低氮培养的TaNRT2.5-3B超表达系和 野生型根系总侧根长;D为水培条件下高低氮培养的TaNRT2.5-3B超表达系和野生型 根系可见侧根数。B-D中,每组从左到右依次为野生型陇春23号、TaNRT2.5-3B超表 达系OE102-6和TaNRT2.5-3B超表达系OE103-1。图中数值为平均值±S.E.(n=4), 不同字母代表TaNRT2.5-3B超表达系和野生型在P<0.05水平上的差别。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
小麦品种陇春23号在文献“袁俊秀,杨文雄,丰产广适优质春小麦新品种-陇春 23号,麦类作物学报,2009,29(4):740”中公开过,公众可从中国科学院遗传与发育生 物学研究所获得。
pUbi-163载体:记载于“Shao,A.,Ma,W.Y.,Zhao,X.Q.,Hu,M.Y.,He,X.,Teng,W.,Li,H.,and Tong,Y.P.(2017).The auxin biosynthetic TRYPTOPHAN AMINOTRANSFERASERELATED TaTAR2.1-3A increases grain yield of wheat.Plant Physiol.174,2274-2288.”一文,公众可从申请人处获得,仅可用于重复本发明实验使 用。
实施例1、转TaNRT2.5基因小麦的构建
一、转TaNRT2.5基因植株的制备
(一)TaNRT2.5基因的获得
1、提取小麦品种陇春23号的总RNA,反转录得到其基因组cDNA。
2、以步骤1得到的cDNA为模板,以如下引物为引物进行PCR扩增构建超量表 达TaNRT2.5-3B转基因系小麦所需序列:
TaNRT2.5-OE-F:5’-GGATCCATGGAGGGGGAGTCGAAGCC-3’(下划线所示序 列为BamHⅠ酶切识别位点);
TaNRT2.5-OE-R:5’-GGTACCTCAATGGTGATGGTGATGATGCACGTCGGCCGG CGACC-3’(下划线所示序列为KpnⅠ酶切识别位点)。
PCR体系(40μl):模板cDNA 4μl,KOD plus DNA聚合酶1μl,10×PCR buffer forKOD plus 4μl,dNTPs(2mM each)4μl,25mM的MgSO4 2μl,上下游引物各20mM, 再用双蒸水将反应体系补足至40μl。
PCR反应程序:98℃2min;98℃30sec,58℃30sec,68℃45sec,35个循环。
用于超量表达TaNRT2.5-3B基因的PCR产物(记为PCR产物1)的核苷酸序列为 “5’-GGATCC+SEQ ID No.2+GGTACC-3’”。其中,SEQ ID No.2的第1-1542位为 TaNRT2.5基因的cDNA序列(编码SEQ ID No.1所示的TaNRT2.5-3B蛋白),第 1543-1563位为人为加入的纯化标签。
(二)TaNRT2.5基因克隆载体的构建
用BamHⅠ和KpnⅠ双酶切上述PCR产物1,得到基因片段;BamHⅠ和KpnI双 酶切pUbi-163载体,得到载体大片段,将基因片段与载体大片段连接,得到重组质粒, 将其命名为pUbi-TaNRT2.5-3B,将重组质粒送测序,结果正确。pUbi-TaNRT2.5-3B中 TaNRT2.5-3B基因由Ubiquitin启动子启动,如图1所示。pUbi-TaNRT2.5-3B载体的结 构描述:将SEQ ID No.2所示DNA片段替换pUbi-163载体的酶切位点BamHⅠ和KpnI 之间的小片段后所得的重组质粒。
(三)转基因小麦的获得
将pUbi-TaNRT2.5-3B载体和pUbi-TaNRT2.5-RNAi载体用基因枪的方法分别转入野生型小麦陇春23号中,得到T0代TaNRT2.5-3B超量表达转基因小麦。提取T0代 TaNRT2.5-3B超量表达转基因小麦叶片的基因组DNA,以其作为模板,用各自的上游 引物和下游引物进行PCR扩增,得到550bp左右的片段,即为阳性T0代TaNRT2.5-3B 超量表达转基因小麦。
用于鉴定TaNRT2.5-3B超量表达转基因小麦的引物:
上游引物T-OE pF:5’-TTAGCCCTGCCTTCATACGCT-3’(载体序列);
下游引物T-OE pR:5’-GGCGACGAGAACATGGAGCT-3’。
将上述鉴定为阳性的T0代转TaNRT2.5-3B超量表达转基因小麦培养至T3代, T1-T3代按照T0代的鉴定方法进行鉴定,筛选T3代TaNRT2.5-3B超量表达转基因小 麦纯合系(即T2代的种子收获后PCR鉴定下一代植株全部是TaNRT2.5-3B超量表达 转基因小麦认定为纯合系),收获种子,后续实验均采用该T3代TaNRT2.5-3B超量表 达转基因纯合系小麦(以下简称T3代TaNRT2.5-3B超量表达转基因纯合系小麦)。
实验同时设置向野生型小麦陇春23号中导入pUbi-163载体的空载对照(下文简称空载对照植株)。
二、转基因植株的检测
(一)DNA水平检测
分别提取T3代TaNRT2.5-3B超量表达小麦以及野生型小麦陇春23号的叶片的DNA,分别以其为模板,以T-OE pF和T-OE pR(具体序列同上)为引物鉴定 TaNRT2.5-3B超量表达系,同时以各自的载体为阳性对照(PC),以野生型陇春23号 作为阴性对照(WT)。
PCR反应体系(20μl):DNA模板(约20ng/μl)2μl;正向引物(10μM)0.5μl; 反向引物(10μM)0.5μl;10×PCR扩增缓冲液2μl;dNTP Mixture 1μl;TaqDNA聚合 酶0.2μl;ddH2O补足至20μl。
PCR反应程序:94℃,3min;94℃30s,60℃30s,72℃40s,40个循环;72 ℃5min。
TaNRT2.5-3B超量表达小麦的目的PCR扩增条带为550bp左右,结果如图2所示。
图2中,PC:载体质粒阳性对照;WT:野生型小麦陇春23号;OE102-6和OE103-1 分别是两个T3代TaNRT2.5-3B超量表达小麦株系。
图2表明,野生型小麦陇春23号没有目的条带,两个T3代TaNRT2.5-3B超量表 达小麦株系经初步鉴定为阳性小麦。
(二)RNA水平检测
1、分别提取T3代TaNRT2.5-3B超量表达小麦和野生型小麦陇春23号灌浆期种 子的总RNA,并反转录成cDNA。
2、分别以步骤1得到的cDNA为模板,以TaNRT2.5 RT pF和TaNRT2.5 RT pR为 引物进行RT-PCR,扩增TaNRT2.5基因,同时以TaActin pF和TaActin pR为引物进行 RT-PCR,扩增内参基因TaActin。
引物如下:
上游引物TaNRT2.5 RT pF:5’-CGGGAAGTAGATGAGCGTGAT-3’;
下游引物TaNRT2.5 RT pR:5’-GGTGGCCGTCATGATACTCT-3’;
上游引物TaActin pF:5'-ACCTTCAGTTGCCCAGCAAT-3';
下游引物TaActin pR:5'-CAGAGTCGAGCACAATACCAGTTG-3'。
PCR体系:DNA模板(约20ng/μl)2μl;上游引物(10μM)0.4μl;下游引物(10μM) 0.4μl;2×mixture(light Cycler SYBR Green I master,Roche)10μl;ddH2O补足至20μl。
PCR程序:94℃,5min;94℃20s,60℃20s,72℃15s,45个循环。
定量分析:采用Roche LightCycler 480 Ⅱrealtime PCR仪分析其CT值。以TaActin 基因为内参,T3代TaNRT2.5转基因小麦和野生型小麦陇春23号中的TaNRT2.5基因用2-Δct进行相对定量。
OE102-6和OE103-1两个T3代TaNRT2.5-3B超量表达小麦中TaNRT2.5基因的检 测结果如图3所示。
图3中,WT代表野生型小麦陇春23号,OE102-6和OE103-1代表TaNRT2.5-3B 超量表达小麦。
图3表明,与野生型小麦陇春23号相比,OE102-6和OE103-1两个T3代 TaNRT2.5-3B超量表达小麦中TaNRT2.5基因的表达量分别增加了372.15和1665.64倍。
经过步骤(一)的DNA水平检测和步骤(二)的RNA水平检测确定OE102-6 和OE103-1两个T3代TaNRT2.5-3B超量表达小麦构建成功。
实施例2、TaNRT2.5转基因小麦的根系表型鉴定
供试小麦:两个T3代TaNRT2.5-3B超量表达小麦OE102-6和OE103-1,野生型 小麦陇春23号,以及空载对照植株。
根系表型鉴定在水培条件下进行,具体步骤如下:
将各供试小麦的种子于23℃培养箱中萌发(自来水培养)7天后,去掉胚后分别 转入高氮营养液(2mM氮)或低氮营养液(0.1mM氮)中培养,培养液配方详见如 下表1。培养14天后,将地上部与根系分开,称取单株根系鲜重,用WinRHIZO根系 扫描系统分析总侧根长和可见侧根数。
表1小麦水培营养液配方
Figure BDA0001662692460000071
结果如图4所示。图4中,WT代表野生型小麦陇春23号,Low-N代表低氮营养 液中培养结果,High-N代表高氮营养液中培养结果。
由图4可见,低氮培养条件下野生型小麦陇春23号的单株根系鲜重为0.58g,总 侧根长为379.50cm,可见侧根数为136个;OE102-6的单株根系鲜重为0.82g,总侧 根长为553.16cm,可见侧根数为190.11个;OE103-1的单株根系鲜重为0.74g,总侧 根长为598.62cm,可见侧根数为199.21个。高氮培养条件下野生型小麦陇春23号的 单株根系鲜重为0.53g,总侧根长为294.03cm,可见侧根数为103.31个;OE102-6的 单株根系鲜重为0.67g,总侧根长为390.42cm,可见侧根数为147.02;OE103-1的单 株根系鲜重为0.64g,总侧根长为399.02cm,可见侧根数为152.06个。而空载对照株 系与野生型植株相比,以上各根系表型指标数据均无显著差异。
结果表明,无论是高氮还是低氮条培养件下TaNRT2.5-3B超量表达系小麦相对于野生型小麦陇春23号的根系鲜重,总侧根长和可见侧根数增加明显。
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<210> 1
<211> 514
<212> PRT
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<400> 1
Met Glu Gly Glu Ser Lys Pro Ala Ala Met Gly Val Gln Ala Ala Pro
1 5 10 15
Lys Gly Lys Phe Arg Ile Pro Val Asp Ser Asp Asn Lys Ala Thr Glu
20 25 30
Phe Trp Leu Phe Ser Phe Ala Arg Pro His Met Ser Ala Phe His Leu
35 40 45
Ser Trp Phe Ser Phe Phe Cys Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala Pro
50 55 60
Pro Leu Leu Pro Leu Ile Arg Asp Asn Leu Gly Leu Thr Gly Lys Asp
65 70 75 80
Ile Gly Asn Ala Gly Ile Ala Ser Val Ser Gly Ala Val Phe Ala Arg
85 90 95
Leu Ala Met Gly Thr Ala Cys Asp Leu Val Gly Pro Arg Leu Ala Ser
100 105 110
Ala Ala Ile Ile Leu Leu Thr Thr Pro Ala Val Tyr Cys Ser Ala Ile
115 120 125
Ile Asp Ser Ala Ser Ser Phe Leu Leu Val Arg Phe Phe Thr Gly Phe
130 135 140
Ser Leu Ala Ser Phe Val Ser Thr Gln Phe Trp Met Ser Ser Met Phe
145 150 155 160
Ser Ser Pro Lys Val Gly Leu Ala Asn Gly Val Ala Gly Gly Trp Gly
165 170 175
Asn Leu Gly Gly Gly Ala Val Gln Phe Ile Met Pro Leu Val Phe Glu
180 185 190
Val Val Arg Lys Ile Gly Ser Thr Asp Phe Val Ala Trp Arg Val Ala
195 200 205
Phe Phe Ile Pro Gly Ile Met Gln Thr Phe Ser Ala Ile Ala Val Leu
210 215 220
Ala Phe Gly Gln Asp Met Pro Asp Gly Asn Tyr Arg Lys Leu His Lys
225 230 235 240
Ser Gly Glu Met His Lys Asp Ser Phe Gly Asn Val Leu Arg His Ala
245 250 255
Val Thr Asn Tyr Arg Ala Trp Ile Leu Ala Leu Thr Tyr Gly Tyr Cys
260 265 270
Phe Gly Val Glu Leu Ala Val Asp Asn Ile Val Ala Gln Tyr Phe Tyr
275 280 285
Asp Arg Phe Asp Val Asn Leu His Thr Ala Gly Leu Ile Ala Ala Ser
290 295 300
Phe Gly Met Ala Asn Ile Ile Ser Arg Pro Gly Gly Gly Leu Met Ser
305 310 315 320
Asp Trp Leu Ser Asp Arg Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu Trp Gly Leu
325 330 335
Trp Ile Val Gln Thr Ile Gly Gly Ile Leu Cys Val Val Leu Gly Val
340 345 350
Val Asp Tyr Ser Phe Gly Ala Ser Val Ala Val Met Ile Leu Phe Ser
355 360 365
Phe Phe Val Gln Ala Ala Cys Gly Leu Thr Phe Gly Ile Val Pro Phe
370 375 380
Val Ser Arg Arg Ser Leu Gly Leu Ile Ser Gly Met Thr Gly Gly Gly
385 390 395 400
Gly Asn Val Gly Ala Val Leu Thr Gln Val Ile Phe Phe Arg Gly Thr
405 410 415
Thr Tyr Lys Thr Glu Thr Gly Ile Met Tyr Met Gly Leu Met Ile Leu
420 425 430
Ala Cys Thr Leu Pro Ile Thr Leu Ile Tyr Phe Pro Gln Trp Gly Gly
435 440 445
Met Phe Ala Gly Pro Arg Lys Gly Ala Thr Ala Glu Glu Tyr Tyr Ser
450 455 460
Gln Glu Trp Thr Glu Glu Glu Arg Ala Lys Gly Tyr Ser Ala Ala Thr
465 470 475 480
Glu Arg Phe Ala Glu Asn Ser Val Arg Glu Gly Gly Arg Arg Ala Ala
485 490 495
Ser Gly Ser Gln Ser Arg His Thr Val Pro Val Asp Gly Ser Pro Ala
500 505 510
Asp Val
<210> 2
<211> 1563
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<400> 2
atggaggggg agtcgaagcc ggcggcgatg ggggtgcagg cggcgcccaa gggcaagttc 60
aggatcccgg tggactccga caacaaggcc accgagttct ggctcttctc gttcgcgagg 120
ccgcacatga gcgctttcca cctctcgtgg ttctccttct tctgctgctt cgtctccacc 180
ttcgccgcgc cgccgctcct gccgctcatc cgggacaacc tcggcctcac gggcaaggac 240
atcggcaacg ccgggatcgc gtccgtgtcg ggagccgtgt tcgcgcgtct cgccatgggc 300
acggcctgcg acctggtcgg gccccgcctg gcgtccgcgg ccatcatact gctcaccacc 360
cccgcggtgt actgctccgc catcatcgac tccgcgtcgt cgttcctgct cgtgcgcttc 420
ttcacgggct tctcgctcgc ctccttcgtg tccacgcagt tctggatgag ctccatgttc 480
tcgtcgccca aggtggggct ggccaacggc gtcgccggcg gctggggcaa cctcggcggg 540
ggcgccgtgc agttcatcat gccgctcgtg ttcgaggtcg tccgcaagat cggcagcacg 600
gacttcgtcg cgtggcgcgt cgccttcttc atcccgggca tcatgcagac gttctcggcc 660
atcgccgtgc tggcgttcgg gcaggacatg ccggacggca actaccgtaa gctgcacaag 720
agcggggaga tgcacaagga cagcttcggc aacgtgctgc gccacgcggt caccaactac 780
cgggcctgga tcctggcgct cacctacggc tactgcttcg gcgtcgagct cgccgtcgac 840
aacatcgtgg cgcagtactt ctacgaccgc ttcgacgtga acctccacac ggccggactc 900
atcgccgcca gcttcgggat ggccaacatc atctcccgcc ccggcggcgg gctcatgtcc 960
gactggctct ccgaccggtt cggcatgcgc ggcaggctgt ggggactgtg gatcgtgcag 1020
accatcggcg gcatcctctg cgtggtgctc ggcgtcgtcg actactcgtt cggcgcgtcg 1080
gtggccgtca tgatactctt ctccttcttc gtgcaggccg cgtgcgggct caccttcggc 1140
atcgtgccgt tcgtctcgcg gcggtcgctg gggctcatct ccggaatgac cggcgggggc 1200
ggcaacgtgg gggccgtgct gacgcaggtc atcttcttcc gcggcaccac gtacaagacg 1260
gagacgggga tcatgtacat ggggctgatg atcctggcgt gcacgctgcc catcacgctc 1320
atctacttcc cgcagtgggg cggcatgttc gccgggccgc ggaagggggc gacggcggag 1380
gagtactaca gccaggagtg gaccgaggag gagcgggcca aggggtacag cgccgcgacc 1440
gagcgtttcg cggagaacag cgtgcgcgag ggcggtcgga gggcggcgtc gggcagccag 1500
tcaaggcaca ccgtccccgt cgacgggtcg ccggccgacg tgcatcatca ccatcaccat 1560
tga 1563

Claims (14)

1.TaNRT2.5蛋白或其相关生物材料在调控植物根系发育中的应用;
所述相关生物材料为能够表达所述TaNRT2.5蛋白的核酸分子或含有所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组菌或转基因细胞系;
所述TaNRT2.5蛋白为TaNRT2.5-3B蛋白;所述TaNRT2.5-3B蛋白为如下任一所示蛋白质:
(A1)氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质;
(A2)在(A1)所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述TaNRT2.5蛋白或其编码基因在所述植物中的表达量和/或活性增加,促进植物根系发育。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述植物根系发育体现为如下中至少一种:
(a1)植物总侧根长;
(a2)植物可见侧根数;
(a3)植物根系生物量。
4.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述核酸分子和所述编码基因是如下任一所述的DNA分子:
(B1)SEQ ID No.2的第1-1542位所示的DNA分子;
(B2)SEQ ID No.2所示的DNA分子。
5.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:所述单子叶植物为禾本科植物。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述禾本科植物为小麦。
8.一种培育总侧根长增加和/或可见侧根数增多和/或根系生物量增加的植物品种的方法,包括使受体植物中TaNRT2.5蛋白的表达量和/或活性提高的步骤;
所述TaNRT2.5蛋白为TaNRT2.5-3B蛋白;所述TaNRT2.5-3B蛋白为如下任一所示蛋白质:
(A1)氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质;
(A2)在(A1)所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。
9.一种培育总侧根长增加和/或可见侧根数增多和/或根系生物量增加的转基因植物的方法,包括如下步骤:向受体植物中导入能够表达TaNRT2.5蛋白的核酸分子,得到转基因植物;所述转基因植物与所述受体植物相比总侧根长增加和/或可见侧根数增多和/或根系生物量增加;
所述TaNRT2.5蛋白为TaNRT2.5-3B蛋白;所述TaNRT2.5-3B蛋白为如下任一所示蛋白质:
(A1)氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质;
(A2)在(A1)所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述“向受体植物中导入能够表达所述TaNRT2.5蛋白的核酸分子”是通过向所述受体植物中导入含有所述TaNRT2.5蛋白的编码基因的重组表达载体实现的。
11.根据权利要求9或10所述的方法,其特征在于:所述核酸分子是如下任一所述的DNA分子:
(B1)SEQ ID No.2的第1-1542位所示的DNA分子;
(B2)SEQ ID No.2所示的DNA分子。
12.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于:所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于:所述单子叶植物为禾本科植物。
14.根据权利要求13所述的方法,其特征在于:所述禾本科植物为小麦。
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