CN108586569A - 一种全保护多肽的处理方法 - Google Patents

一种全保护多肽的处理方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108586569A
CN108586569A CN201810449508.8A CN201810449508A CN108586569A CN 108586569 A CN108586569 A CN 108586569A CN 201810449508 A CN201810449508 A CN 201810449508A CN 108586569 A CN108586569 A CN 108586569A
Authority
CN
China
Prior art keywords
target product
ethyl acetate
processing method
full guard
fraction
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810449508.8A
Other languages
English (en)
Inventor
徐红岩
秦敬国
马月红
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Glbetter Biochemical (shanghai) Co Ltd
Original Assignee
Glbetter Biochemical (shanghai) Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Glbetter Biochemical (shanghai) Co Ltd filed Critical Glbetter Biochemical (shanghai) Co Ltd
Priority to CN201810449508.8A priority Critical patent/CN108586569A/zh
Publication of CN108586569A publication Critical patent/CN108586569A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及了一种全保护多肽的处理方法。主要解决如何对多肽暂时不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护的技术问题。本发明处理方法包括如下步骤：1）将纯化后的馏分用NaHCO3水溶液调节pH值至中性或者弱碱性；2）减压蒸馏去除馏分中的有机溶剂，然后加入醋酸乙酯；3）搅拌充分混合后用HCL溶液调节pH至弱酸性，萃取目标产物；4）用饱和盐水洗涤2次含有目标产物的醋酸乙酯溶液，然后减压蒸馏，保留适量醋酸乙酯；5）冷却后加入适量乙醚或者石油醚结晶析出固体，使用布氏漏斗抽滤后烘干得到目标产物。本发明特别适合C端裸露的全保护多肽。

Description

一种全保护多肽的处理方法
技术领域
本发明属于有机化学技术领域，涉及一种全保护多肽的处理方法。
背景技术
所谓多肽，它是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物。它由氨基酸构成，但与蛋白质又有所不同，属于它们之间的中间物质。氨基酸能够彼此以肽键相互连接的化合物称作肽。一种肽含有的氨基酸少于10个就被称为寡肽，超过的就称为多肽，氨基酸为50多个以上的多肽称为蛋白质。多肽生物活性高，它能调节各种生理活动和生化反应。到现在，人们已发现和分离出100多种存在于人体的肽，对于多肽的研究和利用，在世界范围内已经出现了一个空前的繁荣景象。
近几十年来，对于多肽的研究取得了突飞猛进的发展，现在的科学家已经对多肽有了清醒的认识。他们说，多肽对人体具有非常重要的不可替代的调节作用，这种作用几乎涉及到人体的所有生理活动。要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽，需要对暂时不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护，同时对氨基酸侧链上的活性基团也要保护。
发明内容
本发明的目的是提供一种简单有效的全保护多肽的处理方法。主要解决如何对多肽暂时不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护的技术问题。
为实现上述目的，本发明的技术方案如下：
一种全保护多肽的处理方法，主要是针对全保护多肽纯化后的馏分提供了一种处理方法，其特征是包括如下步骤：
1）将纯化后的馏分用NaHCO3水溶液调节pH值至中性或者弱碱性；
2）减压蒸馏去除馏分中的有机溶剂，然后加入一定量的醋酸乙酯；
3）搅拌后用HCL水溶液调节pH至弱酸性，倒入分液漏斗中分层，萃取目标产物，TLC点板紫外或2%茚三酮茚烤下显示目标产品萃取完全；
4）用饱和盐水洗涤2次含有目标产物的醋酸乙酯溶液，然后减压蒸馏，保留适量醋酸乙酯；
5）冷却后加入适量乙醚或者石油醚结晶析出固体，使用布氏漏斗抽滤后烘干得到目标产物。
更为优选的方案是：所述纯化后的馏分用NaHCO3水溶液调节pH值为7-9。
更为优选的方案是：所述保留适量醋酸乙酯为目标产物体积量的1-2倍。
更为优选的方案是：所述用2NHCL水溶液调节pH为4-6。
更为优选的方案是：所述加入适量乙醚或者石油醚为保留醋酸乙酯体积量的2-4倍。
本发明的有益效果是：本发明的方法工艺简单，操作方便，特别适合C端裸露的全保护多肽。减压蒸馏后保留适量醋酸乙酯，冷却后加入适量乙醚或者石油醚结晶析出固体，即得到最终产品，减少旋蒸时间及后续的处理。
附图说明
图1为本发明实施例1目标产物的TLC谱图。
图2为本发明实施例2目标产物的TLC谱图。
图3为本发明实施例3目标产物的TLC谱图。
图4为本发明实施例4目标产物的TLC谱图。
图5为本发明实施例5目标产物的TLC谱图。
图6为本发明实施例6目标产物的TLC谱图。
具体实施方式
实施例1
1.称取一定量的多肽，序列为AC-Gly-Gly-Phe-OH，溶解过滤后纯化得到目标产物馏分；
2．将上述馏分用NaHCO3水溶液调节pH值至7；
3．减压蒸馏去除馏分中的有机溶剂，然后加入一定量的醋酸乙酯；
4．搅拌充分混合后用2NHCL溶液调节pH值至4，萃取目标产物。 TLC点板紫外显示目标产品萃取完全。结果见图1；
5.用饱和盐水洗涤2次含有目标产物的醋酸乙酯溶液，然后减压蒸馏，保留目标产物1倍体积量的醋酸乙酯；
6.冷却后加入2倍体积量乙醚结晶析出固体，使用布氏漏斗抽滤后烘干得到目标产物。
实施例2
1.称取一定量的多肽，序列为Z-Trp(Boc)-Gly-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-OH，溶解过滤后纯化得到目标产物馏分；
2．将上述馏分用NaHCO3水溶液调节pH值至8；
3．减压蒸馏去除馏分中的有机溶剂，然后加入一定量的醋酸乙酯；
4．搅拌充分混合后用2NHCL溶液调节pH值至5，萃取目标产物。TLC点板紫外显示目标产品萃取完全。结果见图2；
5.用饱和盐水洗涤2次含有目标产物的醋酸乙酯溶液，然后减压蒸馏，保留目标产物2倍体积量的醋酸乙酯；
6.冷却后加入2倍体积量石油醚结晶析出固体，使用布氏漏斗抽滤后烘干得到目标产物。
实施例3
1.称取一定量的多肽，序列为Ac-Ala-Ala-Glu(tBu)-OH，溶解过滤后纯化得到目标产物馏分；
2．将上述馏分用NaHCO3水溶液调节pH值至7；
3．减压蒸馏去除馏分中的有机溶剂，然后加入一定量的醋酸乙酯；
4．搅拌充分混合后用2NHCL溶液调节pH值至4，萃取目标产物。TLC点板2%茚三酮茚烤下显示目标产品萃取完全。结果见图3；
5.用饱和盐水洗涤2次含有目标产物的醋酸乙酯溶液，然后减压蒸馏，保留目标产物1倍体积量的醋酸乙酯；
6.冷却后加入3倍体积量乙醚结晶析出固体，使用布氏漏斗抽滤后烘干得到目标产物。
实施例4
1.称取一定量的多肽，序列为Boc-Tyr(tBu)-Gly-Gly-Phe-Met-OH，溶解过滤后纯化得到目标产物馏分；
2．将上述馏分用NaHCO3水溶液调节pH值至9；
3．减压蒸馏去除馏分中的有机溶剂，然后加入一定量的醋酸乙酯；
4．搅拌充分混合后用2NHCL溶液调节pH值至6，萃取目标产物。TLC点板紫外显示目标产品萃取完全。结果见图4；
5.用饱和盐水洗涤2次含有目标产物的醋酸乙酯溶液，然后减压蒸馏，保留目标产物1倍体积量的醋酸乙酯；
6.冷却后加入3倍体积量石油醚结晶析出固体，使用布氏漏斗抽滤后烘干得到目标产物。
实施例5
1.称取一定量的多肽，序列为Ac-Gly-Ala-Val-OH，溶解过滤后纯化得到目标产物馏分；
2．将上述馏分用NaHCO3水溶液调节pH值至9；
3．减压蒸馏去除馏分中的有机溶剂，然后加入一定量的醋酸乙酯；
4．搅拌充分混合后用2NHCL溶液调节pH值至6，萃取目标产物。TLC点板2%茚三酮茚烤下显示目标产品萃取完全。结果见图5；
5.用饱和盐水洗涤2次含有目标产物的醋酸乙酯溶液，然后减压蒸馏，保留目标产物1倍量的醋酸乙酯；
6.冷却后加入4倍乙醚结晶析出固体，使用布氏漏斗抽滤后烘干得到目标产物。
实施例6
1.称取一定量的多肽，序列为Boc-Tyr（tbu）-Val-Met -Ser（tbu）-Ala，溶解过滤后纯化得到目标产物馏分；
2．将上述馏分用NaHCO3水溶液调节pH值至8；
3．减压蒸馏去除馏分中的有机溶剂，然后加入一定量的醋酸乙酯；
4．搅拌充分混合后用2NHCL溶液调节pH值至5，萃取目标产物。TLC点板紫外显示目标产品萃取完全。结果见图6；
5.用饱和盐水洗涤2次含有目标产物的醋酸乙酯溶液，然后减压蒸馏，保留目标产物1倍量的醋酸乙酯；
6.冷却后加入4倍石油醚结晶析出固体，使用布氏漏斗抽滤后烘干得到目标产物。

Claims (5)

1.一种全保护多肽的处理方法，其特征是：包括如下步骤：
1）将纯化后的馏分用NaHCO3水溶液调节pH值至中性或者弱碱性；
2）减压蒸馏去除馏分中的有机溶剂，然后加入醋酸乙酯；
3）搅拌后用HCL水溶液调节pH至弱酸性，萃取目标产物；
4）用饱和盐水洗涤2次含有目标产物的醋酸乙酯溶液，然后减压蒸馏，保留适量醋酸乙酯；
5）冷却后加入适量乙醚或者石油醚结晶析出固体，使用布氏漏斗抽滤后烘干得到目标产物。
2.根据权利要求1所述的一种全保护多肽的处理方法，其特征是：将纯化后的馏分用NaHCO3水溶液调节pH值为7-9。
3.根据权利要求1所述的一种全保护多肽的处理方法，其特征是：用2NHCL水溶液调节pH为4-6。
4.根据权利要求1所述的一种全保护多肽的处理方法，其特征是：所述保留适量醋酸乙酯为目标产物体积量的1-2倍。
5.根据权利要求1所述的一种全保护多肽的处理方法，其特征是：所述加入适量乙醚或者石油醚为保留醋酸乙酯体积量的2-4倍。
CN201810449508.8A 2018-05-11 2018-05-11 一种全保护多肽的处理方法 Pending CN108586569A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810449508.8A CN108586569A (zh) 2018-05-11 2018-05-11 一种全保护多肽的处理方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810449508.8A CN108586569A (zh) 2018-05-11 2018-05-11 一种全保护多肽的处理方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108586569A true CN108586569A (zh) 2018-09-28

Family

ID=63637225

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810449508.8A Pending CN108586569A (zh) 2018-05-11 2018-05-11 一种全保护多肽的处理方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108586569A (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE60025256D1 (de) * 1999-08-17 2006-02-02 Cms Technology Holdings Inc Osmotisches destillationsverfahren
CN101440123A (zh) * 2007-10-26 2009-05-27 张宏业 一种新的四肽(TFA-GLy-Pro-Thr-Ala-OH)合成工艺
CN106046120A (zh) * 2015-12-02 2016-10-26 烟台海安药物研发有限公司 多西紫杉醇维瑞肽偶合物及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE60025256D1 (de) * 1999-08-17 2006-02-02 Cms Technology Holdings Inc Osmotisches destillationsverfahren
CN101440123A (zh) * 2007-10-26 2009-05-27 张宏业 一种新的四肽(TFA-GLy-Pro-Thr-Ala-OH)合成工艺
CN106046120A (zh) * 2015-12-02 2016-10-26 烟台海安药物研发有限公司 多西紫杉醇维瑞肽偶合物及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106632609B (zh) 一种六胜肽的制备方法及其产品
CN103613642B (zh) 一种六胜肽的液相分段合成方法
US5767239A (en) Process for preparing cardiodilatin fragments; highly purified cardiodilatin fragments and intermediate products for the preparation of same
CN104710525B (zh) 一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源锌螯合胶原肽及其制备方法和用途
CN107857797A (zh) 一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法
GB2037296A (en) Purified proteins, especially interferon and process therefor
NO742383L (zh)
CN105001298B (zh) 一种难溶多肽的合成‑分离纯化方法
CN107312073A (zh) 一种纯化分离西曲瑞克的方法
CN110894225B (zh) 一种μ-芋螺肽的规模化制备纯化方法以及应用
JPH09502423A (ja) １‐デアミノ‐８‐ｄ‐アルギニン・バソプレッシンの製造法
JP2016513107A5 (zh)
CN106243214B (zh) 一种美拉诺坦ⅰ的制备方法
CN103214568B (zh) 一种固相制备促胰液素的方法
CN108586569A (zh) 一种全保护多肽的处理方法
WO1996014336A1 (fr) Nouvelle oxyntomoduline
CN103965293B (zh) 一种高纯度比伐卢定及其工业化制备方法
JPS58140024A (ja) セクレチンの精製方法
JPH07316195A (ja) 新規なＰＴＨｒＰ関連ペプチド及びその用途
CN110256532B (zh) 一种rgd环肽合成方法
CN104558110B (zh) 具有ace抑制活性的多肽及其在降血压药物中的应用
CN102241736A (zh) 抗肿瘤药物罗米迪司肽的关键中间体的合成方法
KR101224809B1 (ko) 레티노산 유도체, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 화장품 조성물
CN111690037A (zh) 一种合成ghk醋酸盐的方法
JP4490547B2 (ja) 新規ペプチド、その製造法及び用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20180928

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication