CN108576398B - 改性腐植酸钠制品及制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
一种改性腐植酸钠制品及制备方法和应用。本发明制备方法包括（1）腐植酸矿粉与氢氧化钠反应生成腐植酸钠粗品；（2）腐植酸钠经离心获得可溶性腐植酸钠；（3）腐植酸钠中缩酚羧键等酯键经单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，生成酚羟基与酚酸基，获得改性腐植酸钠。改性腐植酸钠制品pH值7.0‑8.0，酚羟基含量为21‑30%，酚酸基含量为15‑20%。腐植酸钠制品按照5kg/吨饲料添加，饲喂育肥猪。酚羟基与酚酸基是腐植酸钠抑菌、收敛、止泻的功能基础，改性腐植酸钠中酚羟基及酚酸基获得释放，大大提高腐植酸钠中活性基团的比例，提高产品对畜禽肠道的修复与改善功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种改性腐植酸钠制品及制备方法和应用，具体涉及一种以腐植酸矿粉为原料，通过单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，获得高酚羟基、酚羧基含量，低pH值的改性腐植酸钠制品。
背景技术
腐植酸钠具有止泻、收敛，促进畜禽肠道健康的特点。育肥猪饲料中主要通过添加氧化锌来防止腹泻、拉稀的发生。由于氧化锌随粪便排出后会严重污染环境，因此氧化锌在猪料中的禁用已经迫在眉睫。腐植酸钠在工业及种植业领域已得到广泛应用，但是由于对其研究的不足，产品同质化严重，且未根据畜禽等动物的具体生理特征进行深入研究。因此，现有生产工艺条件下获得的腐植酸钠并不能严格称为“饲用”腐植酸钠，难以充分发挥对动物肠道疾病的治疗功效。
发明人通过前期研究获得，腐植酸中羧基及酚羟基等酸性基团不仅是抑菌、收敛、止泻的功能基础，而且相关酸性基团含量的增加，可以降低腐植酸钠产品自身pH值，提高产品品质。同时，结构分析表明，腐植酸分子中酚羟基与羧基会自然发生酯化反应，降低游离酚羟基及羧基含量。通过水解反应，腐植酸钠中苯甲酸酯键被打开，其中邻苯甲酸酯含量明显下降，使苯甲酸及酚羟基得以释放。
通过对已公开专利进行分析发现，腐植酸钠相关专利主要围绕三个方面展开：
I、腐植酸制备腐植酸钠工艺及装备
专利用煤生产腐植酸钠的工艺（专利号：200610059372.7）通过粉碎、风选、提取、固液连续分离、浓缩烘干等工艺获得腐植酸钠产品；一种水溶性腐植酸钠的制备方法（专利号：201610639620.9）通过一次、二次沉淀获得水溶性腐植酸钠制品；一种腐植酸钠的生产技术（专利号：201610639620.9）通过酸化，去除其中结合钙镁离子后再次用氢氧化钠进行碱化，获得纯腐植酸钠；一种腐植酸钠生产设备（专利号：201320017323.2）可降低腐植酸钠生产过程劳动强度和能耗等。
II、腐植酸钠包膜工艺
该类专利主要针对腐植酸钠颜色较黑，饲料中添加会影响饲料颜色的缺点，采用各种材料或工艺对腐植酸钠进行包膜、制粒。专利一种饲料添加剂及其加工方法及应用（专利号：201210002425.7）将腐植酸钠与大蒜皮粉末混合制粒；一种腐植酸钠包膜的饲料添加剂（专利号201621228621.6）利用石粉、麦饭石、石膏等作为包膜材料，制备腐植酸钠产品
III、含腐植酸钠饲料添加剂制品
通过将腐植酸钠与不同成分进行复配，获得具有不同功效的添加剂制品。专利稀土与腐植酸钠复合饲料添加剂及其制备方法将氯化稀土、食用级柠檬酸与腐植酸钠复配；一种鱼饲料及其制作方法（专利号：201710766745.2）将腐植酸钠与鱼腥草、低聚木糖等复配；一种植物饲料添加剂（专利号：201410315619.1）将腐植酸钠与黄芪、当归等中药成分复配。
以上与腐植酸钠生产相关专利中，主要从腐植酸钠的纯度和含量出发，对于腐植酸钠结构并未涉及；至于包膜与复配相关专利直接以腐植酸钠为原料，更加没有涉及腐植酸钠的具体结构。因此根据具体应用目的，对腐植酸钠的结构进行解析与改造，是增强腐植酸钠制品效果，提高产品差异化水平的关键所在。
与此同时，受腐植酸性质影响，传统腐植酸钠产品的pH值偏高，在9.5-11之间。过高的pH值在使用过程中会对饲料中益生菌、维生素、抗生素及酶制剂等产生不利影响。临床试验表明，育肥猪饲料中添加0.5%传统腐植酸钠会导致猪只腹泻严重。如果通过简单减少氢氧化钠来控制pH值，不仅会降低腐植酸钠得率，而且腐植酸会因pH值过低而沉降，影响产品效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种改性腐植酸钠制品，该方法通过通过单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，获得高酚羟基、酚羧基含量，低pH值的改性腐植酸钠制品。
本发明的目的是这样实现的：一种改性腐植酸钠制品，其特征是腐植酸钠经单宁酯酰水解酶与漆酶酶解获得改性腐植酸钠；单宁酯酰水解酶的酶活力为500u/g；漆酶的酶活力为10000 u/g；改性腐植酸钠产品指标为pH值7.0-8.0，酚羟基含量为21-30%，酚酸基含量为15-20%。
一种改性腐植酸钠制品的制备方法，其特征是它包括如下步骤：
（1）将10份腐植酸矿粉与1份氢氧化钠及10份蒸馏水在搅拌反应釜中混匀，通入蒸汽反应120分钟，获得腐植酸钠粗品；
（2）将腐植酸钠粗品经2000转/分钟离心20分钟获得含有可溶性腐植酸钠的离心液，并将离心液转至搅拌反应釜中；
（3）在搅拌反应釜中调整离心液中的腐植酸钠含量为40-50%；
（4）向搅拌反应釜中加入单宁酯酰水解酶和漆酶酶解；单宁酯酰水解酶占腐植酸钠重量的0.05~0.25%；漆酶占腐植酸钠重量的0.01-0.05%，反应温度为40~60℃，150-200转/分钟反应60-120分钟，获得改性腐植酸钠反应液。
（5）改性腐植酸钠反应液经干燥获得改性腐植酸钠制品。
一种改性腐植酸钠制品在育肥猪饲料制备中的应用，其特征是将改性腐植酸钠制品按照5kg/吨添加饲料并饲喂育肥猪。
本发明具有如下有益效果：
1、腐植酸钠通过酶解反应，分子中酚羟基与酚羧基形成的酯键被打开，酚羟基与酚羧基得以释放，提高了产品中游离酚羟基与酚羧基的含量。
2、酚羟基与酚羧基是腐植酸钠抑菌、收敛、止泻的基础，因此相关基团含量的提高，大大提高产品对育肥猪的肠道保健功效。
3、通过提高内源酚羟基及酚羧基等酸性基团的含量，降低了产品的pH值（7.0-8.0），与传统腐植酸钠（pH值为9.5-11）相比能够降低饲料添加的“系酸力”，提高饲料品质。
4、单宁酯酰水解酶与漆酶水解过程无需添加化学催化剂，反应温和，同时无化学试剂残留，减少了反应后化学催化剂脱除过程。
附图说明
图1为本发明工艺流程图。
具体实施方式
实施例1 ：一种改性腐植酸钠制品，腐植酸钠经单宁酯酰水解酶（南宁东恒华道生物科技有限责任公司）与漆酶（夏盛实业集团）酶解，单宁酯酰水解酶活力为500u/g，漆酶酶活力为10000 u/g，改性腐植酸钠pH值为7.0-8.0，其中酚羟基含量为21-30%，酚酸基含量为15-20%。
上述改性腐植酸钠制品的制备方法包括如下步骤：
（1）将10份腐植酸矿粉与1份氢氧化钠及10份蒸馏水在搅拌反应釜中混匀，通入蒸汽反应120分钟，获得腐植酸钠粗品；
（2）将腐植酸钠粗品经2000转/分钟离心20分钟获得含有可溶性腐植酸钠的离心液，并将离心液转至1吨的搅拌反应釜中；
（3）在搅拌反应釜中调整离心液中的腐植酸钠含量为40%；
（4）分别按照腐植酸钠重量0.05%和0.01%的比例加入单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，反应温度为60℃， 200转/分钟反应60分钟，获得改性腐植酸钠反应液。
（5）改性腐植酸钠反应液经干燥获得改性腐植酸钠制品，其中pH值为7.8，酚羟基含量为21.4%，酚酸基含量为15.6%。
实施例2：本实施例与实施例1相同之处不再赘述，不同之处在于：搅拌反应釜中调整离心液中腐植酸钠含量为45%；按照腐植酸钠重量0.17%和0.03%比例加入单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，反应温度为51℃，180转/分钟反应90分钟，获得改性腐植酸钠反应液。改性腐植酸钠反应液经干燥获得改性腐植酸钠制品，其中pH值为7.2，酚羟基含量为29.5%，酚酸基含量为18.3%。
实施例3：本实施例与实施例1相同之处不再赘述，不同之处在于：反应釜中调整离心液中腐植酸钠含量为50%；按照腐植酸钠重量0.25%与0.05%比例加入单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，反应温度为40℃， 150转/分钟反应120分钟，获得改性腐植酸钠反应液。改性腐植酸钠反应液经干燥获得改性腐植酸钠制品，其中制品pH值为7.6，酚羟基含量为22.3%，酚酸基含量为17.1%。
实施例4：本实施例与实施例1相同之处不再赘述，不同之处在于：反应釜中调整离心液中腐植酸钠含量为45%；按照腐植酸钠重量0.17%比例加入单宁酯酰水解酶酶解，反应温度为51℃，180转/分钟反应90分钟，获得改性腐植酸钠反应液。改性腐植酸钠反应液经干燥获得改性腐植酸钠制品，其中pH值为9.2，酚羟基含量为8.5%，酚酸基含量为7.4%。
实施例5：本实施例与实施例1相同之处不再赘述，不同之处在于：反应釜中调整离心液中腐植酸钠含量为45%；按照腐植酸钠重量0.03%比例加入漆酶酶解，反应温度为51℃，180转/分钟反应90分钟，获得改性腐植酸钠反应液。改性腐植酸钠反应液经干燥获得改性腐植酸钠制品，其中pH值为9.8，酚羟基含量为9.1%，酚酸基含量为9.7%。
实施例6：本实施例与实施例1相同之处不再赘述，不同之处在于：反应釜中调整离心液中腐植酸钠含量为45%；在未添加单宁酯酰水解酶与漆酶的条件下，控制反应温度为51℃，180转/分钟反应90分钟，获得改性腐植酸钠反应液。腐植酸钠反应液经干燥获得腐植酸钠制品，其中pH值为10.3，酚羟基含量为8.4%，酚酸基含量为6.9%。
实施例7：本实施例为腐植酸矿粉与氢氧化钠反应后离心获得可溶性腐植酸钠。
1、将10份腐植酸矿粉与1份氢氧化钠及10份蒸馏水混匀，通入蒸汽反应120分钟，获得腐植酸钠粗品；
2、腐植酸钠粗品经2000转/分钟离心20分钟获得可溶性腐植酸钠并将离心液转至1吨搅拌反应釜中，获得改性腐植酸钠反应液。
3、腐植酸钠反应液经干燥获得腐植酸钠制品，其中pH值为10.7，酚羟基含量为8.9%，酚酸基含量为6.2%。
实施例8：本实施例与实施例1相同之处不再赘述，不同之处在于：反应釜中调整可溶腐植酸钠中腐植酸钠含量为45%；按照腐植酸钠重量0.04%和0.008%比例加入单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，反应温度为51℃，180转/分钟反应90分钟，获得改性腐植酸钠反应液。改性腐植酸钠反应液经干燥获得改性腐植酸钠制品，其中pH值为9.8，酚羟基含量为9.4%，酚酸基含量为8.9%。
实施例9：本实施例与实施例1相同之处不再赘述，不同之处在于：反应釜中调整可溶腐植酸钠中腐植酸钠含量为45%；按照腐植酸钠重量0.3%与0.06%比例加入单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，反应温度为51℃，180转/分钟反应90分钟，获得改性腐植酸钠反应液。改性腐植酸钠反应液经干燥获得改性腐植酸钠制品，其中制品pH值为8.5，酚羟基含量为10.2%，酚酸基含量为9.3%。
通过比较实施例1-3，6-7可以看出，通过单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，可以通过提高酚羟基及酚羧基基团含量降低可溶性腐植酸钠的pH值。而由实施例4-5，8-9可以看出，酶解过程中单宁酯酰水解酶与漆酶的添加量及反应工艺条件对产品pH及酚羟基与酚酸基的释放具有显著影响。
本发明添加剂制品育肥猪临床应用实施例：
2017年7-9月在济南海华生物科技有限公司试验猪场进行饲养试验，在济南绿安食品有限责任公司进行屠宰分割试验。选择品种相同、年龄相近的60kg体重杜长大商品猪500头，分为10组，每组50头。对照组每吨饲料添加5kg氧化锌，试验组为将氧化锌替换为腐植酸钠。按表格1分组并添加相应本发明制剂，对照组饲喂临邑和康源饲料有限公司的配合饲料。饲养试验至平均体重为100kg左右终止，对育肥猪的体重、采食量及料肉比等进行计算。
表1
实施例10：一种改性腐植酸钠制品及其应用，将实施例2中获得的腐植酸钠制品按照5kg/吨添加饲料并饲喂育肥猪。
表2
实施例11：一种改性腐植酸钠制品及其应用，将实施例6中获得的腐植酸钠制品按照5kg/吨添加饲料并饲喂育肥猪。
表3
实施例12：一种改性腐植酸钠制品及其应用，将实施例7中获得的腐植酸钠制品按照5kg/吨添加饲料并饲喂育肥猪。
表4
由实施例10-12可以看出，实施例2中改性腐植酸钠与传统防治腹泻、拉稀制品氧化锌相比能够显著降低实验猪的腹泻发生率和料肉比。而实施例11、12中试验组腹泻率及料肉比高于对照组，说明未经改性腐植酸钠因pH及结构原因，非但不能降低猪只的腹泻率，反而有增加腹泻的风险。
Claims (5)
1.一种改性腐植酸钠制品，其特征是腐植酸钠经单宁酯酰水解酶与漆酶酶解获得改性腐植酸钠；单宁酯酰水解酶的酶活力为500u/g；漆酶的酶活力为10000 u/g；改性腐植酸钠产品指标为pH值7.0-8.0，酚羟基含量为21-30%，酚酸基含量为15-20%。
2.根据权利要求1所述的改性腐植酸钠制品，其特征是改性腐植酸钠制品指标为：pH值为7.2，酚羟基含量为29.5%，酚酸基含量为18.3%。
3.一种根据权利要求1所述的改性腐植酸钠制品的制备方法，其特征是它包括如下步骤：
（1）将10份腐植酸矿粉与1份氢氧化钠及10份蒸馏水在搅拌反应釜中混匀，通入蒸汽反应120分钟，获得腐植酸钠粗品；
（2）将腐植酸钠粗品经2000转/分钟离心20分钟获得含有可溶性腐植酸钠的离心液，并将离心液转至搅拌反应釜中；
（3）在搅拌反应釜中调整离心液中的腐植酸钠含量为40-50%；
（4）向搅拌反应釜中加入单宁酯酰水解酶和漆酶酶解；单宁酯酰水解酶占腐植酸钠重量的0.05~0.25%；漆酶占腐植酸钠重量的0.01-0.05%，反应温度为40~60℃，150-200转/分钟反应60-120分钟，获得改性腐植酸钠反应液；
（5）改性腐植酸钠反应液经干燥获得改性腐植酸钠制品。
4.根据权利要求3所述的改性腐植酸钠制品的制备方法，其特征是搅拌反应釜中调整离心液中腐植酸钠含量为45%；按照腐植酸钠重量0.17%和0.03%比例加入单宁酯酰水解酶与漆酶酶解，反应温度为51℃，180转/分钟反应90分钟，获得改性腐植酸钠反应液。
5.一种改性腐植酸钠制品在育肥猪饲料制备中的应用，其特征是将改性腐植酸钠制品按照5kg/吨添加饲料并饲喂育肥猪。
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