CN108576083A - 一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及预防炭疽病药剂技术领域，具体为一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物及其制备方法，按照重量份计包括如下组分：沙姜3‑6份、补骨脂5‑9份、百花丁香7‑10份、杜鹃3‑9份、大蒜10‑13份、天麻1‑2份、水芹菜15‑17份，本发明中药组合物具有抵抗炭疽病的效果，提高了黄瓜的抗病能力和抗逆性能，并且，本发明的组合物还含有丰富的维生素、氨基酸以及微量元素，能够促进有效成分的吸收，使得营养吸收均衡、全面，因此，有效地避免了抗药性问题以及农药残留问题。

Description

一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及预防炭疽病药剂技术领域，具体为一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物及其制备方法。
背景技术
植物炭疽病是一类真菌，且分布很广，生长在热带，亚热带甚至温带等地区适宜真菌繁殖的植物均可成为其寄主，炭疽病是由多种炭疽菌属的真菌诱发的，已确认包括粮食、蔬菜、果树、花卉等600多种植物遭受其危害。炭疽病主要危害果实，叶片、果梗也可受害，果实染病，初现水浸状黄褐色圆斑，边缘褐色，中央呈灰褐色，表面有隆起的同心轮纹，往往由许多小点集成，小点有时为黑色。
黄瓜炭疽病是一种重要的黄瓜病害，主要为害黄瓜叶片、茎蔓和果实，全生育期均可发病，目前，生产上对黄瓜炭疽病的防治主要还是依赖于化学农药，但是化学农药防治存在成本高、农药残留、环境污染、病原抗药性增强等问题。
发明内容
本发明为解决上述技术问题，本发明提供了一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物及其制备方法。
具体按照以下技术方案实现：
一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物，按照重量份计包括如下组分：沙姜3-6份、补骨脂5-9份、百花丁香7-10份、杜鹃3-9份、大蒜10-13份、天麻1-2份、水芹菜15-17份。
进一步地优选，按照重量份计包括如下组分：沙姜4份、补骨脂7份、百花丁香9份、杜鹃6份、大蒜12份、天麻1.7份、水芹菜15.7份。
一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
S1补骨脂提取：称取补骨脂，加入枸杞酒至料液比(质量体积比)为1:(6-7)，置于温度为42-46℃条件下提取2-3h，然后在常温下提取1-2h，过滤，取滤液得补骨脂提取物；
S2沙姜提取：称取沙姜经超临界CO2萃取，取萃取液得沙姜提取物；
S3杜鹃、百花丁香提取：称取杜鹃、百花丁香，加入枸杞酒至料液比(质量体积比)为1:(2.5-3.2)，置于温度为36-40℃条件下提取3-4h，过滤，取滤液得杜鹃/白花丁香提取物；
S4天麻、大蒜提取：称取天麻、大蒜混合研磨至过60目筛，经超临界CO2萃取，取萃取液得天麻/大蒜提取物；
S5水芹菜提取：称取水芹菜，加水至料液比(质量体积比)为1:(1.8-2.3)，置于温度为80-85℃条件下提取20-30min，再置于温度为54-66℃条件下提取20-30min，过滤，取滤液得水芹菜提取物；
S6蒸馏：将S1-S5步骤所得物混合均匀，置于蒸馏压力为36-40Pa，蒸馏温度为77-86℃条件下蒸馏10-15min，再置于蒸馏压力为55-62Pa，蒸馏温度为48-54℃条件下蒸馏8-12min，合并蒸馏液，得中药组合物。
所述超临界CO2萃取，萃取条件为：储罐压力为4.8-5.2MPa，萃取釜压力为23.2-23.8MPa，解析釜压力为5.0-5.8MPa，萃取釜温度为43-48℃，萃取时间为1-1.5h。
所述枸杞酒，其制备方法为：
1)按重量份称取枸杞叶8-11份、枸杞子20-30份、饮用水110-130份、发酵剂0.01-0.02份；
2)枸杞叶处理：将枸杞叶置于温度为35-40℃的条件下恒温炒制1-2h，然后加入饮用水进行榨汁，得枸杞叶汁；
3)枸杞子处理：将枸杞子置于温度为0-4℃的条件下恒温贮存6-10h，然后加入枸杞叶汁，阶段性升温至煮沸，保持沸腾5-8min；
4)发酵：将步骤3)所得物降温至常温，加入发酵剂，置于温度为10-15℃条件下密封遮光储存7-10天。
所述发酵剂由如下重量份原料组成：活性干酵母粉10-15份、嗜酸乳杆菌粉2-3份、生麦曲5-8份、豆浆22-26份、蜂蜜3-5份。
所述阶段性升温分别四阶段升温，第一阶段升温至15-20℃，保温10min，第二阶段升温至30-35℃，保温15min，第三阶段升温68-76℃，保温20min，第四阶段升温至沸腾。
所述第一阶段升温，其升温速率为0.5-1.0℃/min。
所述第二阶段升温，其升温速率为0.1-0.4℃/min。
所述第三阶段升温，其升温速率为1.1-1.3℃/min。
所述第四阶段升温，其升温速率为1.5-2.0℃/min。
本发明通过对具有抵抗炭疽病的中药材进行筛选，筛选出紫苏、薄荷、枸杞、杜仲、肉桂、艾蒿、苍耳、丁香、黄芩、苦参、石菖蒲等对黄瓜抵抗炭疽病具有防治效果，在基于中药学、植物学的基础上，进一步优化得出：沙姜、补骨脂、百花丁香、杜鹃、大蒜、天麻、水芹菜的预防炭疽病组合物；其中，沙姜药性温，药味辛，含有对甲氧基桂皮酸酯；补骨脂药性温，药味辛，含香豆素类、黄酮类及单萜酚类；百花丁香药性寒，药味苦，含丁香油；杜鹃药性平，药味甘，含鞣质、还原性物质、强心甙、黄酮类、中性树脂、酸性树脂、油脂和挥发油等，黄酮类有杜鹃素、杜鹃乙素、杨梅树皮素和二氢槲皮素；大蒜药性温，药味辛，含蒜素、柠檬醛；天麻药性平，药味甘，含香荚兰醇、香荚兰醛、天麻甙、多粮、维生素A类物质、粘液质；水芹菜药性平，药味甘，含有芸香苷、水芹素和檞皮素等。
本发明的有益效果在于：
本发明通过选择药用植物进行合理组合，使得中药组合物具有抵抗炭疽病的效果，原料易得、成本低、无污染，并且，本发明通过合理的提取，保留了中药材中活性成分，使得活性成分间相互协同，进而提高了黄瓜的抗病能力和抗逆性能，并且，本发明的组合物还含有丰富的维生素、氨基酸以及微量元素，能够促进有效成分的吸收，使得营养吸收均衡、全面，因此，有效地避免了抗药性问题以及农药残留问题。
本发明从炭疽病抑制率方面对本发明创造中原料搭配进行验证；
一、原料筛选
1.1黄瓜炭疽病病菌菌丝生长抑制效果
采用菌丝生长速率法(方中达.植病研究方法[M].北京：中国农业出版社，1999)测定不同原料配方的抑菌活性：
步骤1：取配方组1-配方组9的组合物1ml，分别与9mlPDA培养基在培养皿内混匀，制成含不同组合物的PDA培养基(见表1)，以无菌水作空白对照；
步骤2：将保留的黄瓜炭疽病菌转接到PDA平皿中，25℃下活化96h，然后在近菌落边缘用打孔器制取直径为5mm的菌饼，并转接到步骤1的PDA培养基上，于25℃下活化96h，待对照中菌落长至约平皿直径的4/5时，采用“十”字交叉法量取菌落直径，精算菌落直径平均值，并按照下列公事计算菌丝生长平均抑制率：菌丝生长平均抑制率γ＝(对照菌落直径-配方组菌落直径)/(对照菌落直径-菌饼直径)×100％，结果见表2；
1.2室内盆栽试验
将芽势一致的黄瓜种子播种在花盆中，当植株长到2叶1心时，喷施表1药业，并设无菌水对照。24h风干之后，将黄瓜炭疽病菌孢子悬液均匀喷洒于支柱。接种后的试材放置在迷雾气候箱中培养，温度28-30℃，相对湿度RH为100％，接种24h内保证黑暗条件，24h之后光照：黑暗＝12h:12h处理；每处理10株黄瓜苗，重复3次；待对照组充分发病后调查防病效果，调查分级标准采用《农药田间药效试验》标准。
黄瓜炭疽病分级标准：0级为叶片无病斑；1级为病斑面积占整个叶面积5％以下；3级为病斑面积占整个叶面积6-10％；5级为病斑面积占整个叶面积11-25％；7级为病斑面积占整个叶面积26-50％；9级为病斑面积占整个叶面积50％以上。按照以下公式计算病情指数和相对防效：
病情指数＝Σ[各级病株数×相应代表及数]/(调查数总和×发病最重极的代表值)×100％；
防效η＝(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数×100％；
结果见表2
表1
表2
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明，但本发明并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
实施例1
一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物，包括组分：沙姜3g、补骨脂5g、百花丁香7g、杜鹃3g、大蒜10g、天麻1g、水芹菜15g。
实施例2
一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物，包括组分：沙姜6g、补骨脂9g、百花丁香10g、杜鹃9g、大蒜13g、天麻2g、水芹菜17g。
实施例3
一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物，包括组分：沙姜4g、补骨脂7g、百花丁香9g、杜鹃6g、大蒜12g、天麻1.7g、水芹菜15.7g。
实施例4-6
一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
S1补骨脂提取：称取补骨脂，加入枸杞酒至料液比(质量体积比)为1:6，置于温度为45℃条件下提取2h，然后在常温下提取2h，过滤，取滤液得补骨脂提取物；
S2沙姜提取：称取沙姜经超临界CO2萃取，取萃取液得沙姜提取物；
S3杜鹃、百花丁香提取：称取杜鹃、百花丁香，加入枸杞酒至料液比(质量体积比)为1:3，置于温度为38℃条件下提取3-4h，过滤，取滤液得杜鹃/白花丁香提取物；
S4天麻、大蒜提取：称取天麻、大蒜混合研磨至过60目筛，经超临界CO2萃取，取萃取液得天麻/大蒜提取物；
S5水芹菜提取：称取水芹菜，加水至料液比(质量体积比)为1:1.8，置于温度为82℃条件下提取25min，再置于温度为60℃条件下提取30min，过滤，取滤液得水芹菜提取物；
S6蒸馏：将S1-S5步骤所得物混合均匀，置于蒸馏压力为40Pa，蒸馏温度为80℃条件下蒸馏12min，再置于蒸馏压力为58Pa，蒸馏温度为50℃条件下蒸馏10min，合并蒸馏液，得中药组合物；
所述超临界CO2萃取，萃取条件为：储罐压力为5.0MPa，萃取釜压力为23.5MPa，解析釜压力为5.5MPa，萃取釜温度为45℃，萃取时间为1.2h；
所述枸杞酒，其制备方法为：
1)称取枸杞叶10g、枸杞子25g、饮用水120g、发酵剂0.02g；
2)枸杞叶处理：将枸杞叶置于温度为38℃的条件下恒温炒制1.5h，然后加入饮用水进行榨汁，得枸杞叶汁；
3)枸杞子处理：将枸杞子置于温度为2℃的条件下恒温贮存8h，然后加入枸杞叶汁，阶段性升温至煮沸，保持沸腾6min；
4)发酵：将步骤3)所得物降温至常温，加入发酵剂，置于温度为15℃条件下密封遮光储存8天；
所述发酵剂由如下原料组成：活性干酵母粉15g、嗜酸乳杆菌粉2g、生麦曲6g、豆浆25g、蜂蜜3g；
所述阶段性升温分别四阶段升温，第一阶段升温至20℃，保温10min，第二阶段升温至32℃，保温15min，第三阶段升温72℃，保温20min，第四阶段升温至沸腾；
所述第一阶段升温，其升温速率为0.8℃/min；
所述第二阶段升温，其升温速率为0.2℃/min；
所述第三阶段升温，其升温速率为1.3℃/min；
所述第四阶段升温，其升温速率为2.0℃/min。
试验例1
室内盆栽试验
将芽势一致的黄瓜种子播种在花盆中，当植株长到2叶1心时，喷施实施例4-6的组合物，并设无菌水对照。24h风干之后，将黄瓜炭疽病菌孢子悬液均匀喷洒于支柱。接种后的试材放置在迷雾气候箱中培养，温度28-30℃，相对湿度RH为100％，接种24h内保证黑暗条件，24h之后光照：黑暗＝12h:12h处理；每处理10株黄瓜苗，重复3次；待对照组充分发病后调查防病效果，调查分级标准采用《农药田间药效试验》标准。
黄瓜炭疽病分级标准：0级为叶片无病斑；1级为病斑面积占整个叶面积5％以下；3级为病斑面积占整个叶面积6-10％；5级为病斑面积占整个叶面积11-25％；7级为病斑面积占整个叶面积26-50％；9级为病斑面积占整个叶面积50％以上。按照以下公式计算病情指数和相对防效：
病情指数＝Σ[各级病株数×相应代表及数]/(调查数总和×发病最重极的代表值)×100％；
防效η＝(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数×100％；
结果见表3：
表3
实施例4 实施例5 实施例6
防效η(％) 89.9 91.7 93.2

Claims (7)

1.一种预防黄瓜炭疽病的中药组合物，其特征在于，按照重量份计包括如下组分：沙姜3-6份、补骨脂5-9份、百花丁香7-10份、杜鹃3-9份、大蒜10-13份、天麻1-2份、水芹菜15-17份。
2.如权利要求1所述的预防黄瓜炭疽病的中药组合物，其特征在于，按照重量份计包括如下组分：沙姜4份、补骨脂7份、百花丁香9份、杜鹃6份、大蒜12份、天麻1.7份、水芹菜15.7份。
3.如权利要求1或2所述的预防黄瓜炭疽病的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1补骨脂提取：称取补骨脂，加入枸杞酒至料液比(质量体积比)为1:(6-7)，置于温度为42-46℃条件下提取2-3h，然后在常温下提取1-2h，过滤，取滤液得补骨脂提取物；
S2沙姜提取：称取沙姜经超临界CO2萃取，取萃取液得沙姜提取物；
S3杜鹃、百花丁香提取：称取杜鹃、百花丁香，加入枸杞酒至料液比(质量体积比)为1:(2.5-3.2)，置于温度为36-40℃条件下提取3-4h，过滤，取滤液得杜鹃/白花丁香提取物；
S4天麻、大蒜提取：称取天麻、大蒜混合研磨至过60目筛，经超临界CO2萃取，取萃取液得天麻/大蒜提取物；
S5水芹菜提取：称取水芹菜，加水至料液比(质量体积比)为1:(1.8-2.3)，置于温度为80-85℃条件下提取20-30min，再置于温度为54-66℃条件下提取20-30min，过滤，取滤液得水芹菜提取物；
S6蒸馏：将S1-S5步骤所得物混合均匀，置于蒸馏压力为36-40Pa，蒸馏温度为77-86℃条件下蒸馏10-15min，再置于蒸馏压力为55-62Pa，蒸馏温度为48-54℃条件下蒸馏8-12min，合并蒸馏液，得中药组合物。
4.如权利要求3所述的预防黄瓜炭疽病的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述超临界CO2萃取，萃取条件为：储罐压力为4.8-5.2MPa，萃取釜压力为23.2-23.8MPa，解析釜压力为5.0-5.8MPa，萃取釜温度为43-48℃，萃取时间为1-1.5h。
5.如权利要求3所述的预防黄瓜炭疽病的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述枸杞酒，其制备方法为：
1)按重量份称取枸杞叶8-11份、枸杞子20-30份、饮用水110-130份、发酵剂0.01-0.02份；
2)枸杞叶处理：将枸杞叶置于温度为35-40℃的条件下恒温炒制1-2h，然后加入饮用水进行榨汁，得枸杞叶汁；
3)枸杞子处理：将枸杞子置于温度为0-4℃的条件下恒温贮存6-10h，然后加入枸杞叶汁，阶段性升温至煮沸，保持沸腾5-8min；
4)发酵：将步骤3)所得物降温至常温，加入发酵剂，置于温度为10-15℃条件下密封遮光储存7-10天。
6.如权利要求5所述的预防黄瓜炭疽病的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述发酵剂由如下重量份原料组成：活性干酵母粉10-15份、嗜酸乳杆菌粉2-3份、生麦曲5-8份、豆浆22-26份、蜂蜜3-5份。
7.如权利要求5所述的预防黄瓜炭疽病的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述阶段性升温分别四阶段升温，第一阶段升温至15-20℃，保温10min，第二阶段升温至30-35℃，保温15min，第三阶段升温68-76℃，保温20min，第四阶段升温至沸腾。
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