CN108473473A - 用于抑制蛋白酪氨酸激酶活性的稠合嘧啶类化合物 - Google Patents

用于抑制蛋白酪氨酸激酶活性的稠合嘧啶类化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN108473473A
CN108473473A CN201780004361.5A CN201780004361A CN108473473A CN 108473473 A CN108473473 A CN 108473473A CN 201780004361 A CN201780004361 A CN 201780004361A CN 108473473 A CN108473473 A CN 108473473A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
alkyl
added
ring
synthesis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201780004361.5A
Other languages
English (en)
Inventor
王义汉
李焕银
任兴业
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenzhen Targetrx Inc
Original Assignee
Shenzhen Targetrx Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenzhen Targetrx Inc filed Critical Shenzhen Targetrx Inc
Publication of CN108473473A publication Critical patent/CN108473473A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

一种式（I）所示的稠合嘧啶类化合物、其制备以及含有该化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物的药物组合物。该化合物可用于治疗和/或预防蛋白酪氨酸激酶相关疾病，例如细胞增殖性疾病、癌症、免疫性疾病。

Description

用于抑制蛋白酪氨酸激酶活性的稠合嘧啶类化合物 技术领域
本发明属于医药领域。具体地，本发明涉及对蛋白酪氨酸激酶活性具有抑制作用的稠合嘧啶类化合物，包含它们的药物组合物，以及它们的制备方法和用途。
背景技术
表皮生长因子受体(即EGFR、ErbB-1或HER1)是ErbB受体家族的成员之一，ErbB受体家族包括四种密切相关的受体酪氨酸激酶成员：EGFR(ErbB-1)、HER2/c-neu(ErbB-2)、Her3(ErbB-3)和Her4(ErbB-4)。EGFR是胞外蛋白配体的表皮生长因子家族(EGF家族)成员的细胞表面受体。影响EGFR表达或活性的突变可能导致癌症。据报道，在大多数实体瘤如肺癌、乳腺癌和脑瘤中，EGFR处于失调状态。据估计，30％的上皮癌与EGFR或家族成员的突变、扩增或失调有关联。
已经研发出基于通过抗体药或小分子抑制剂药物(例如吉非替尼和厄洛替尼)抑制EGFR的治疗方法。在非小细胞肺癌(NSCLC)的情况下，吉非替尼和厄洛替尼对10％～40％的病人有益处。然而，治疗一段时间后，对吉非替尼或厄洛替尼的获得性耐药性成为主要的临床问题。研究证实，产生耐药性的一个主要原因是由于T790M的新突变，其为EGFR的“门卫”。然后，研发人员又研发了针对T790M的抑制剂，如BIBW2992，并在临床试验中表现出优势。但是，这些以EGFR的T790M突变为靶标的抑制剂对野生型EGFR也具有相当的抑制活性，这导致的严重的毒副作用限制了其临床应用。所以，有必要进一步研发出更多仅靶向突变型而非野生型的EGFR的选择性抑制剂的有效类型。
针对EGFR突变型的晚期非小细胞肺癌，虽然吉非替尼、厄洛替尼等EGFR激酶抑制剂(EGFR-TKI)取得了令人瞩目的疗效，但是随后发现EGFR-TKI在治疗非小细胞肺癌时的原发性耐药或继发性耐药，是我们在治疗晚期非小细胞肺癌面临新的挑战，继而有必要开展新的探索，寻找对策。
第三代及后续的EGFR抑制剂包括AZD9291和CO-1686等化合物，其不可逆抑制EGFR，并且对具有T790M耐药突变的患者有较高的有效率，但是对野生型EGFR仍存在抑制作用。
因此，有必要进一步研发新的EGFR抑制剂，其不仅能有效抑制T790M突变，而且相对于野生型而言对T790M突变具有高选择性。
发明内容
本发明提供了一种新的稠合嘧啶类化合物及包含该化合物的组合物及其用途，其具有更好的EGFR激酶抑制活性，以及对于耐药突变T790M、L858R及其二者的高选择性，可用于治疗、预防以及缓解EGFR激酶介导的疾病。
对此，本发明采用的技术方案如下：
本发明的第一方面中，提供了一种式(I)所示的稠合嘧啶类化合物，
其中，
R1选自H、-OH、卤素、-CN、-NO2、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基；
L选自键、NR、O、CR2或S；其中R独立地选自H、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；
R2选自C1-C6烷基或含有1-2个选自N和O的杂原子的3至6元杂环基，其中上述基团未被取代或者被1-3个以下取代基取代：卤素、-OH、-CN、-NO2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、NR6R7；其中R6、R7各自独立地选自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或C3-C6碳环基；
R3、R4和R5独立地选自H、卤素、-CN、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基；
环A选自C3-C6碳环基、3至10元杂环基、C6-C14芳基或C5-C10杂芳基；
环B选自以下结构：
其中各X1独立地选自C、N、O和S原子，各X2和X3独立地选自C和N原子，其中含有X1、X2和X3的环任选地被1-3个R8取代基取代；
环C选自C3-C6碳环基、3至10元杂环基、C6-C14芳基或C5-C10杂芳基，其任选地被1-3个R8取代基取代；
表示单键或双键；
R8独立地选自H、卤素、氧代、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基；
或者环上的两个R8一起形成-Zm-；其中Z独立地选自CH2、NH、O、S、SO或SO2；m＝2、3、4或5；
或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物。
在另一方面，本发明提供了含有本发明化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在具体实施方案中，本发明化合物以有效量提供在所述药物组合物中。在具体实施方案中，本发明化合物以治疗有效量提供。在具体实施方案中，本发明化合物以预防有效量提供。
在另一方面，本发明提供了含有本发明化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物，其还含有其它治疗剂。
在另一方面，本发明提供了包含本发明化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物，和其它治疗剂以及药学上可接受的载剂、佐剂或媒剂的试剂盒。
在另一个方面，本发明提供了在需要其的受试者中治疗EGFR导致的癌症(包括EGFR突变导致的癌症，例如，带有T790M突变、L858R突变和L858R/T790M双突变的癌症)相关病症的方法，所述方法包括：给予受试者有效量的本发明化合物。在具体实施方案中，所述EGFR导致的癌症选自：非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌、胃肠间质瘤、白血病、组织细胞性淋巴癌、鼻咽癌等。在具体实施方案中，口服、皮下、静脉内或肌肉内给药所述化合物。在具体实施方案中，长期给药所述化合物。
由随后的具体实施方式、实施例和权利要求，本发明的其它目的和优点将对于本领域技术人员显而易见。
定义
化学定义
下面更详细地描述具体官能团和化学术语的定义。
当列出数值范围时，既定包括每个值和在所述范围内的子范围。例如“C1-C6烷基”包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C1-C6、C1-C5、C1-C4、C1-C3、C1-C2、C2-C6、C2-C5、C2-C4、C2-C3、C3-C6、C3-C5、C3-C4、C4-C6、C4-C5和C5-C6烷基。
应该理解，当本文描述时，任何下面所定义的基团可以被许多取代基取代，而且相应的定义在下面列出的它们的范围内，包括取代的基团。除非另作说明，否则，术语“取代”如下面所定义。
“C1-C6烷基”是指具有1至6个碳原子的直链或支链饱和烃基团，本文也称为“低级烷基”。在一些实施方案中，C1-C4烷基是特别优选的。所述烷基的实例包括但不限于：甲基(C1)、乙基(C2)、正丙基(C3)、异丙基(C3)、正丁基(C4)、叔丁基(C4)、仲丁基(C4)、异丁基(C4)、正戊基(C5)、3-戊基(C5)、戊基(C5)、新戊基(C5)、3-甲基-2-丁基(C5)、叔戊基(C5)和正己基(C6)。除非另作说明，否则，烷基的每个独立地任选被取代，即，未取代的(“未取代的烷基”)或被一个或多个取代基取代(“取代的烷基”)；例如，1至5个取代基、1至3个取代基或1个取代基。在一些实施方案中，烷基是未取代的C1-C6烷基(例如，-CH3)。在一些实施方案中，烷基是取代的C1-C6烷基。
“C1-C6烷氧基”是指基团-OR，其中，R为取代或未取代的C1-C6烷基。在一些实施方案中，C1-C4烷氧基是特别优选的。具体的所述烷氧基包括但不限于：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基和1,2-二甲基丁氧基。
“卤代”或“卤素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)和碘(I)。在一些实施方案中，卤素基团是F、Cl或Br。在一些实施方案中，卤素基团是F或Cl。在一些实施方案中，卤素基团是F。
因此，“C1-C6卤代烷基”和“C1-C6卤代烷氧基”是指上述“C1-C6烷基”和“C1-C6烷氧基”，其被一个或多个卤素基团取代。在一些实施方案中，C1-C4卤代烷基是特别优选的，更优选C1-C2卤代烷基。在 一些实施方案中，C1-C4卤代烷氧基是特别优选的，更优选C1-C2卤代烷氧基。示例性的所述卤代烷基包括但不限于：-CF3、-CH2F、-CHF2、-CHFCH2F、-CH2CHF2、-CF2CF3、-CCl3、-CH2Cl、-CHCl2、2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基，等等。示例性的所述卤代烷氧基包括但不限于：-OCH2F、-OCHF2、-OCF3，等等。
“C3-C6碳环基”是指具有3至6个环碳原子和零个杂原子的非芳香环烃基团。在一些实施方案中，优选C5-C6碳环基。碳环基还包括其中上述碳环基环与一个或多个芳基或杂芳基稠合的环体系，其中连接点在碳环基环上，且在这样的情况中，碳的数目继续表示碳环基体系中的碳的数目。示例性的所述碳环基包括但不限于：环丙基(C3)、环丙烯基(C3)、环丁基(C4)、环丁烯基(C4)、环戊基(C5)、环戊烯基(C5)、环戊二烯基(C5)、环己基(C6)、环己烯基(C6)、环已二烯基(C6)，等等。除非另作说明，否则碳环基的每个独立地为任选取代的，即，未取代的(“未取代的碳环基”)或被一个或多个取代基取代(“取代的碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基是未取代的C3-C6碳环基。在一些实施方案中，碳环基是取代的C3-C6碳环基。
“3至10元杂环基”是指具有环碳原子和1至4个环杂原子的3至10元非芳香环系的基团，其中，每个杂原子独立地选自氮、氧、硫、硼、磷和硅。在包含一个或多个氮原子的杂环基中，只要化合价允许，连接点可为碳或氮原子。在一些实施方案中，3至6元杂环基是特别优选的，其为具有环碳原子和1至3个环杂原子的3至6元非芳香环系；更优选5至6元杂环基，其为具有环碳原子和1至3个环杂原子的5至6元非芳香环系。除非另作说明，否则，杂环基的每个独立地为任选取代的，即，未取代的(“未取代的杂环基”)或被一个或多个取代基取代(“取代的杂环基”)。在一些实施方案中，杂环基是未取代的3-10元杂环基。在一些实施方案中，杂环基是取代的3-10元杂环基。杂环基还包括其中上述杂环基环与一个或多个碳环基稠合的环体系，其中连接点在碳环基环上，或其中上述杂环基环与一个或多个芳基或杂芳基稠合的环体系，其中连接点在杂环基环上；且在这样的情况下，环成员的数目继续表示在杂环基环体系中环成员的数目。示例性的包含一个杂原子的3元杂环基包括但不限于：氮杂环丙烷基、氧杂环丙烷基、硫杂环丙烷基。示例性的含有一个杂原子的4元杂环基包括但不限于：氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基和硫杂环丁烷基。示例性的含有一个杂原子的5元杂环基包括但不限于：四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢噻吩基、吡咯烷基、二氢吡咯基和吡咯基-2,5-二酮。示例性的包含两个杂原子的5元杂环基包括但不限于：二氧杂环戊烷基、氧硫杂环戊烷基、氧硫杂环戊烯基(1,2-氧硫杂环戊烯基、1,3-氧硫杂环戊烯基)、二硫杂环戊烷基、二氢吡唑基、二氢咪唑基、二氢噻唑基、二氢异噻唑基、二氢噁唑基、二氢异噁唑基、二氢噁二唑基和噁唑烷-2-酮。示例性的包含三个杂原子的5元杂环基包括但不限于：三唑啉基、噁二唑啉基和噻二唑啉基。示例性的包含一个杂原子的6元杂环基包括但不限于：哌啶基、四氢吡喃基、二氢吡啶基和硫杂环己烷基。示例性的包含两个杂原子的6元杂环基包括但不限于：二氢吡嗪基、哌嗪基、吗啉基、二硫杂环己烷基、二噁烷基。示例性的包含三个杂原子的6元杂环基包括但不限于：六氢三嗪基。示例性的含有一个杂原子的7元 杂环基包括但不限于：氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基和硫杂环庚烷基。示例性的包含一个杂原子的8元杂环基包括但不限于：氮杂环辛烷基、氧杂环辛烷基和硫杂环辛烷基。示例性的与C6芳基环稠合的5元杂环基(在本文中也称作5,6-双环杂环基)包括但不限于：二氢吲哚基、异二氢吲哚基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、苯并噁唑啉酮基，等等。示例性的与C6芳基环稠合的6元杂环基(本文还指的是6,6-双环杂环基)包括但不限于：四氢喹啉基、四氢异喹啉基，等等。
“C6-C14芳基”是指具有6-14个环碳原子和零个杂原子的单环或多环的(例如，双环或三环)4n+2芳族环体系(例如，具有以环状排列共享的6、10或14个π电子)的基团。在一些实施方案中，芳基具有六个环碳原子(“C6芳基”；例如，苯基)。在一些实施方案中，芳基具有十个环碳原子(“C10芳基”；例如，萘基，例如，1-萘基和2-萘基)。在一些实施方案中，芳基具有十四个环碳原子(“C14芳基”；例如，蒽基)。在一些实施方案中，C6-10芳基是特别优选的，更优选C6芳基。芳基还包括其中上述芳基环与一个或多个碳环基或杂环基稠合的环系统，而且连接点在所述芳基环上，在这种情况下，碳原子的数目继续表示所述芳基环系统中的碳原子数目。除非另作说明，否则，芳基的每个独立地任选被取代，即，未取代(“未取代的芳基”)或被一个或多个取代基取代(“取代的芳基”)。在一些实施方案中，芳基是未取代的C6-C14芳基。在一些实施方案中，芳基是取代的C6-C14芳基。
“C5-C10杂芳基”是指具有环碳原子和1-4个环杂原子的5-10元单环或双环的4n+2芳族环体系(例如，具有以环状排列共享的6或10个π电子)的基团，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫。在含有一个或多个氮原子的杂芳基中，只要化合价允许，连接点可以是碳或氮原子。杂芳基双环系统在一个或两个环中可以包括一个或多个杂原子。杂芳基还包括其中上述杂芳基环与一个或多个碳环基或杂环基稠合的环系统，而且连接点在所述杂芳基环上，在这种情况下，碳原子的数目继续表示所述杂芳基环系统中的碳原子数目。在一些实施方案中，C5-C6杂芳基是特别优选的，其为具有环碳原子和1-4个环杂原子的5-6元单环或双环的4n+2芳族环体系。除非另作说明，否则，杂芳基的每个独立地任选被取代的，即，未取代(“未取代的杂芳基”)或被一个或多个取代基取代(“取代的杂芳基”)。在一些实施方案中，杂芳基是未取代的5-10元杂芳基。在一些实施方案中，杂芳基是取代的5-10元杂芳基。示例性的含有一个杂原子的5元杂芳基包括但不限于：吡咯基、呋喃基和噻吩基。示例性的含有两个杂原子的5元杂芳基包括但不限于：咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基和异噻唑基。示例性的含有三个杂原子的5元杂芳基包括但不限于：三唑基、噁二唑基和噻二唑基。示例性的含有四个杂原子的5元杂芳基包括但不限于：四唑基。示例性的含有一个杂原子的6元杂芳基包括但不限于：吡啶基。示例性的含有两个杂原子的6元杂芳基包括但不限于：哒嗪基、嘧啶基和吡嗪基。示例性的含有三个或四个杂原子的6元杂芳基分别包括但不限于：三嗪基和四嗪基。示例性的含有一个杂原子的7元杂芳基包括但不限于：氮杂环庚三烯基、氧杂环庚三烯基和硫杂环庚三烯基。示例性的5,6-双环杂芳基包括但不限于：吲哚基、异吲哚基、吲唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、异苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并异呋喃基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、苯 并异噻唑基、苯并噻二唑基、茚嗪基和嘌呤基。示例性的6,6-双环杂芳基包括但不限于：萘啶基、喋啶基、喹啉基、异喹啉基、噌琳基、喹喔啉基、酞嗪基和喹唑啉基。
其它定义
术语“药学上可接受的盐”是指，在可靠的医学判断范围内，适合与人和低等动物的组织接触而没有过度毒性、刺激性、变态反应等等，并且与合理的益处/危险比例相称的那些盐。药学上可接受的盐在本领域是众所周知的。例如，Berge等人在J.Pharmaceutical Sciences(1977)66:1-19中详细描述的药学上可接受的盐。本发明化合物的药学上可接受的盐包括衍生自合适无机和有机酸和碱的盐。药学上可接受的无毒酸加成盐的实例是氨基与无机酸形成的盐，例如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸，或与有机酸形成的盐，例如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、枸橼酸、琥珀酸或丙二酸，或使用本领域使用的方法形成的盐，例如，离子交换方法。其它药学上可接受的盐包括：已二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、重硫酸盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酯酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐，等等。衍生自合适的碱的药学上可接受的盐包括碱金属、碱土金属、铵和N+(C1-4烷基)4盐。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁盐，等等。如果合适的话，进一步的药学上可接受的盐包括使用反离子形成的无毒的铵盐、季铵盐和胺阳离子，反离子例如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低级烷基磺酸根和芳基磺酸根。
给药的“受试者”包括但不限于：人(即，任何年龄组的男性或女性，例如，儿科受试者(例如，婴儿、儿童、青少年)或成人受试者(例如，年轻的成人、中年的成人或年长的成人))和/或非人的动物，例如，哺乳动物，例如，灵长类(例如，食蟹猴、恒河猴)、牛、猪、马、绵羊、山羊、啮齿动物、猫和/或狗。在一些实施方案中，受试者是人。在一些实施方案中，受试者是非人动物。
“疾病”、“障碍”和“病症”在本文中可互换地使用。
除非另作说明，否则，本文使用的术语“治疗”包括受试者患有具体疾病、障碍或病症时所发生的作用，它降低疾病、障碍或病症的严重程度，或延迟或减缓疾病、障碍或病症的发展(“治疗性治疗”)，还包括受试者开始患有具体疾病、障碍或病症之前发生的作用(“预防性治疗”)。
通常，化合物的“有效量”是指足以引起目标生物反应的数量。正如本领域普通技术人员所理解的那样，本发明化合物的有效量可以根据下列因素而改变：例如，生物学目标、化合物的药物动力学、所治疗的疾病、给药模式以及受试者的年龄健康情况和症状。有效量包括治疗和预防性治疗有效量。
除非另作说明，否则，本文使用的化合物的“治疗有效量”是在治疗疾病、障碍或病症的过程中足 以提供治疗益处的数量，或使与疾病、障碍或病症有关的一或多种症状延迟或最小化。化合物的治疗有效量是指单独使用或与其它疗法联用的治疗剂的数量，它在治疗疾病、障碍或病症的过程中提供治疗益处。术语“治疗有效量”可以包括改善总体治疗、降低或避免疾病或病症的症状或病因、或增强其它治疗剂的治疗效能的数量。
除非另作说明，否则，本文使用的化合物的“预防有效量”是足以预防疾病、障碍或病症的数量，或足以预防与疾病、障碍或病症有关的一或多种症状的数量，或防止疾病、障碍或病症复发的数量。化合物的预防有效量是指单独使用或与其它药剂联用的治疗剂的数量，它在预防疾病、障碍或病症的过程中提供预防益处。术语“预防有效量”可以包括改善总体预防的数量，或增强其它预防药剂的预防效能的数量。
“组合”以及相关术语是指同时或依次给药本发明的治疗剂。例如，本发明化合物可以与另一治疗剂以分开的单位剂型同时或依次给药，或与另一治疗剂一起呈单一单位剂型同时给药。
“EGFR导致的癌症”是指以EGFR基因的不适合的高表达为特征或以改变EGFR核酸分子或多肽的生物活性的EGFR基因突变为特征的癌症。EGFR导致的癌症可出现在任何组织(包括脑、血液、结缔组织、肝、口、肌肉、脾、胃、睾丸和气管)中。EGFR导致的癌症包括但不限于非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌、胃肠间质瘤、白血病、组织细胞性淋巴癌、鼻咽癌。
“EGFR突变”或“EGFR突变体”包括EGFR蛋白或EGFR编码序列的氨基酸或核苷酸序列中一个或多个缺失、置换或添加。EGFR突变还可以包括一个或多个缺失、置换或添加，或其片段，只要该突变体相对于野生型EGFR保留或增加了酪氨酸激酶活性。在具体的EGFR突变中，激酶或磷酸化活性相对于野生型EGFR可以增加或减少(例如，至少5％、10％、15％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或甚至100％)。示例性的EGFR突变包括但不限于T790M突变、L858R突变和L858R/T790M双突变。
具体实施方式
化合物
本文中，“本发明化合物”指的是以下的式(I)化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物。
在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物：
其中，
R1选自H、卤素、-OH、-CN、-NO2、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基；
L选自键、NR、O、CR2或S；其中R独立地选自H、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；
R2选自C1-C6烷基或含有1-2个选自N和O的杂原子的3至6元杂环基，其中上述基团未被取代或者被1-3个以下取代基取代：卤素、-OH、-CN、-NO2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、NR6R7；其中R6、R7各自独立地选自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或C3-C6碳环基；
R3、R4和R5独立地选自H、卤素、-CN、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基；
环A选自C3-C6碳环基、3至10元杂环基、C6-C14芳基或C5-C10杂芳基；
环B选自以下结构：
其中各X1独立地选自C、N、O和S原子，各X2和X3独立地选自C和N原子，其中含有X1、X2和X3的环任选地被1-3个R8取代基取代；
环C选自C3-C6碳环基、3至10元杂环基、C6-C14芳基或C5-C10杂芳基，其任选地被1-3个R8取代基取代；
表示单键或双键；
R8独立地选自H、卤素、氧代、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基；
或者环上的两个R8一起形成-Zm-；其中Z独立地选自CH2、NH、O、S、SO或SO2；m＝2、3、4或5；
或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物。
优选地，在该实施方案中，R1独立地选自卤素、-OH、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基。更优选地，R1独立地选自卤素、-OH、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基。更优选地，R1为C1-C6烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基和1,2-二甲基丁氧基。更优选地，R1为C1-C4烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基和仲丁氧基。更优选地，R1为卤素，例如Cl或Br。 更优选地，R1为Cl或甲氧基。最优选地，R1为甲氧基。
优选地，在该实施方案中，L选自键、NR、O、CR2、或S，其中R选自H或C1-C6烷基。更优选地，L选自NR、O、或S，其中R选自C1-C6烷基。最优选地，L选自NR，且R为甲基。
优选地，在该实施方案中，R2选自被1-3个取代基取代的C1-C6烷基或含有1-2个选自N和O的杂原子的3至6元杂环基，其中，所述的取代基为卤素、-OH、-CN、-NO2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、NR6R7。更优选地，R2选自被1-3个取代基取代的C1-C6烷基，其中，所述的取代基为NR6R7。更优选地，R2选自1个取代基取代的C1-C4烷基，其中，所述的取代基为NR6R7。最优选地，R2选自1个取代基取代的乙基，其中，所述的取代基为N(CH3)2。
优选地，在该实施方案中，R3、R4和R5独立地选自H、卤素或C1-C6烷基。更优选地，R3、R4和R5均为H。
优选地，在该实施方案中，环A选自C5-C6碳环基、5至6元杂环基、C6芳基或C5-C6杂芳基。更优选地，环A选自5至6元杂环基或C5-C6杂芳基。更优选地，环A选自C5-C6杂芳基。最优选地，环A选自C5杂芳基。
在环A的优选技术方案中，环A具有以下结构：
其中，
各Y1独立地选自C、N、O或S原子，各Y2独立地选自C或N原子，其任选被选自以下的R9取代基取代：H、卤素、-CN、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基或C1-C6烷基磺酰基，其中所述C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基或C1-C6烷基磺酰基任选地被一个或多个-OH取代。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，环A具有以下结构：
其中R9独立地选自H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基或C1-C6烷基磺酰基，其中所述C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基或C1-C6烷基磺酰基任选地被一个或多个-OH取代。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，环A具有以下结构：
其中R9独立地选自H、C1-C6烷基、被一个或多个-OH取代的C1-C6烷基。
优选地，在该实施方案中，环B具有以下结构：
其中各X1独立地选自C、N、O和S原子，各X2和X3独立地选自C和N原子，其中含有X1、X2和X3的环任选地被1-3个R8取代基取代；
环C选自C5-C6碳环基、5至6元杂环基、C6-C10芳基或C5-C6杂芳基，其任选地被1-3个R8取代基取代；
表示单键或双键；
R8独立地选自H、卤素、氧代、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基；
或者环上的两个R8一起形成-(CH2)m-、-NH(CH2)n-、-O(CH2)n-、-S(CH2)n-、-SO(CH2)n-、-SO2(CH2)n-、-CH2NH(CH2)p-、-CH2O(CH2)p-、-CH2S(CH2)p-、-CH2SO(CH2)p-或-CH2SO2(CH2)p-；其中m＝2、3、4或5；n＝1、2或3；p＝1或2。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，X1为C原子。在上述技术方案的更优选的实施方案中，X1为N原子。在上述技术方案的更优选的实施方案中，X1为O原子。在上述技术方案的更优选的实施方案中，X1为S原子。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，X2为C原子。在上述技术方案的更优选的实施方案中，X2为N原子。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，X3为C原子。在上述技术方案的更优选的实施方案中， X3为N原子。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，环C选自C5-C6碳环基、5至6元杂环基、C6芳基或C5-C6杂芳基。在上述技术方案的更优选的实施方案中，环C选自环戊二烯基、环己二烯基、苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、二氢吡嗪基。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，R8独立地选自H、F、氧代和C1-C6烷基。在上述技术方案的更优选的实施方案中，环上的两个R8一起形成-(CH2)2-、-(CH2)3-、-OCH2-、-O(CH2)2-或-CH2OCH2-。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，环B具有以下结构：
其中各环任选地被1-3个R8取代基取代，且R8、X1和X2如上所定义。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，同一个环上的两个R8一起形成-Zm-。在上述技术方案的更优选的实施方案中，不同环上的两个R8一起形成-Zm-。
在上述技术方案的更优选的实施方案中，环B具有以下结构：
其中各环任选地被1-2个R8取代基取代，且R8、Z、m、X1和X2如上所定义。
更优选地，在一些实施方案中，环B选自以下基团：
其中R8如上所定义。
在更具体的实施方案中，本发明涉及下列化合物：
本发明化合物可包括一个或多个不对称中心，且因此可以存在多种立体异构体形式，例如，对映异构体和/或非对映异构体形式。例如，本发明化合物可为单独的对映异构体、非对映异构体或几何异构体(例如顺式和反式异构体)，或者可为立体异构体的混合物的形式，包括外消旋混合物和富含一种或多种立体异构体的混合物。异构体可通过本领域技术人员已知的方法从混合物中分离，所述方法包括：手性高压液相色谱法(HPLC)以及手性盐的形成和结晶；或者优选的异构体可通过不对称合成来制备。
本发明也包括本发明化合物的所有合适的同位素衍生物。本发明化合物的同位素衍生物的定义为其中至少一个原子被具有相同原子数但原子质量与自然界中通常发现的原子质量不同的原子代替。可以掺入本发明化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、氟和氯的同位素，例如分别为2H、3H、13C、14C、15N、17O、18O、18F、31P、32P、35S和36Cl。本发明化合物的一些同位素衍生物，例如其中掺入放射性同位素如3H或14C的那些，可用于药物和/或底物组织分布研究。氚化(即3H)和碳-14(即14C)同位素因其易于制备和可检测性而为特别优选的。此外，用同位素(例如氘，即2H)取代可以提供由于更大的代谢稳定性而得到的一些治疗优点，例如增加的体内半衰期或减少的剂量需要，并且因此 在一些情况下可以是优选的。本发明化合物的同位素衍生物通常可以通过如下制备：常规程序例如通过说明性方法或通过下文实施例中描述的制备，其使用合适试剂的适当同位素衍生物。
本发明化合物或其药学上可接受的盐可以是无定形或结晶形式。此外，本发明化合物可以以一种或多种结晶形式存在。因此，本发明在其范围内包括本发明化合物的所有无定形或结晶形式。
本领域技术人员将理解，许多有机化合物可以与溶剂形成复合物，其在该溶剂中发生反应或从该溶剂中沉淀或结晶出来。这些复合物称为“溶剂合物”。当溶剂是水时，复合物称为“水合物”。本发明涵盖了本发明化合物的所有溶剂合物。
此外，前药也包括在本发明的上下文内。本文所用的术语“前药”是指在体内通过例如在血液中水解转变成其具有医学效应的活性形式的化合物。药学上可接受的的前药描述于T.Higuchi和V.Stella，Prodrugs as Novel Delivery Systems，A.C.S.Symposium Series的Vol.14，Edward B.Roche，ed.，Bioreversible Carriers in Drug Design，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987，以及D.Fleisher、S.Ramon和H.Barbra“Improved oral drug delivery：solubility limitations overcome by the use of prodrugs”，Advanced Drug Delivery Reviews(1996)19(2)115-130，每篇引入本文作为参考。
前药为任何共价键合的载体，当将这种前药给予患者时，其在体内释放式(I)化合物。通常通过修饰官能团来制备前药，修饰是以使得该修饰可以通过常规操作或在体内裂解产生母体化合物的方式进行的。前药包括，例如，其中羟基、胺或巯基与任意基团键合的本发明化合物，当将其给予患者时，可以裂解形成羟基、胺或巯基。因此，前药的代表性实例包括(但不限于)式(I)化合物的醇、巯基和胺官能团的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。另外，在羧酸(-COOH)的情况下，可以使用酯，例如甲酯、乙酯等。酯本身可以是有活性的和/或可以在人体体内条件下水解。合适的药学上可接受的体内可水解的酯基包括容易在人体中分解而释放母体酸或其盐的那些基团。
药物组合物、制剂和试剂盒
在另一方面，本发明提供了药物组合物，其包含本发明化合物(还称为“活性组分”)和药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，所述药物组合物包含有效量的活性组分。在一些实施方案中，所述药物组合物包含治疗有效量的活性组分。在一些实施方案中，所述药物组合物包含预防有效量的活性组分。
用于本发明的药学上可接受的赋形剂是指不会破坏一起调配的化合物的药理学活性的无毒载剂、佐剂或媒剂。可以用于本发明组合物中的药学上可接受的载剂、佐剂或媒剂包括(但不限于)离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(如人类血清白蛋白)、缓冲物质(如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质(如硫酸鱼精蛋白)、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅胶、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇以及羊毛脂。
本发明还包括试剂盒(例如，药物包装)。所提供的试剂盒可以包括本发明化合物、其它治疗剂，以及含有本发明化合物、其它治疗剂的第一和第二容器(例如，小瓶、安瓿瓶、瓶、注射器和/或可分散包装或其它合适的容器)。在一些实施方案中，提供的试剂盒还可以任选包括第三容器，其含有用于稀释或悬浮本发明化合物和/或其它治疗剂的药用赋形剂。在一些实施方案中，提供在第一容器和第二容器中的本发明化合物和其它治疗剂组合形成一个单位剂型。
下列制剂实施例说明可根据本发明制备的代表性的药物组合物。然而，本发明不限于下列药物组合物。
示例性的制剂1-片剂：可以将干粉形式的本发明化合物与干燥的凝胶粘合剂以约1:2的重量比混合。加入较少量的硬脂酸镁作为润滑剂。使该混合物在压片机中成型为0.3-30mg片剂(每个片剂含有0.1-10mg活性化合物)。
示例性的制剂2-片剂：可以将干粉形式的本发明化合物与干燥的凝胶粘合剂以约1:2的重量比混合。加入较少量的硬脂酸镁作为润滑剂。使该混合物在压片机中成型为30-90mg片剂(每个片剂含有10-30mg活性化合物)。
示例性的制剂3-片剂：可以将干粉形式的本发明化合物与干燥的凝胶粘合剂以约1:2的重量比混合。加入较少量的硬脂酸镁作为润滑剂。使该混合物在压片机中成型为90-150mg片剂(每个片剂含有30-50mg活性化合物)。
示例性的制剂4-片剂：可以将干粉形式的本发明化合物与干燥的凝胶粘合剂以约1:2的重量比混合。加入较少量的硬脂酸镁作为润滑剂。使该混合物在压片机中成型为150-240mg片剂(每个片剂含有50-80mg活性化合物)。
示例性的制剂5-片剂：可以将干粉形式的本发明化合物与干燥的凝胶粘合剂以约1:2的重量比混合。加入较少量的硬脂酸镁作为润滑剂。使该混合物在压片机中成型为240-270mg片剂(每个片剂含有80-90mg活性化合物)。
示例性的制剂6-片剂：可以将干粉形式的本发明化合物与干燥的凝胶粘合剂以约1:2的重量比混合。加入较少量的硬脂酸镁作为润滑剂。使该混合物在压片机中成型为270-450mg片剂(每个片剂含有90-150mg活性化合物)。
示例性的制剂7-片剂：可以将干粉形式的本发明化合物与干燥的凝胶粘合剂以约1:2的重量比混合。加入较少量的硬脂酸镁作为润滑剂。使该混合物在压片机中成型为450-900mg片剂(每个片剂含有150-300mg活性化合物)。
示例性的制剂8-胶囊剂：可以将干粉形式的本发明化合物与淀粉稀释剂以约1:1的重量比混合。将该混合物填充到250mg胶囊中(每个胶囊含有125mg活性化合物)。
示例性的制剂9-液体：可以将本发明化合物(125mg)与蔗糖(1.75g)和黄原胶(4mg)混合，且可将得到的混合物共混，通过No.10筛目美国筛，然后与预先制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠(11:89， 50mg)的水溶液混合。将苯甲酸钠(10mg)、调味剂和着色剂用水稀释，并在搅拌下加入。然后，可以加入充足的水，得到5mL的总体积。
示例性的制剂10-注射剂：可以将本发明化合物溶解或悬浮在缓冲无菌盐水可注射的水性介质中，达到约5mg/mL的浓度。
给药
本发明提供的药物组合物可以通过许多途径给药，包括但不限于：口服给药、肠胃外给药、吸入给药、局部给药、直肠给药、鼻腔给药、口腔给药、阴道给药、通过植入剂给药或其它给药方式。例如，本文使用的肠胃外给药包括皮下给药、皮内给药、静脉内给药、肌肉内给药、关节内给药、动脉内给药、滑膜腔内给药、胸骨内给药、脑脊髓膜内给药、病灶内给药、和颅内的注射或输液技术。
通常，给予有效量的本文所提供的化合物。按照有关情况，包括所治疗的病症、选择的给药途径、实际给予的化合物、个体患者的年龄、体重和响应、患者症状的严重程度，等等，可以由医生确定实际上给予的化合物的量。
当用于预防本发明所述病症时，给予处于形成所述病症危险之中的受试者本文所提供的化合物，典型地基于医生的建议并在医生监督下给药，剂量水平如上所述。处于形成具体病症的危险之中的受试者，通常包括具有所述病症的家族史的受试者，或通过遗传试验或筛选确定尤其对形成所述病症敏感的那些受试者。
还可以长期给予本文所提供的药物组合物(“长期给药”)。长期给药是指在长时间内给予化合物或其药物组合物，例如，3个月、6个月、1年、2年、3年、5年等等，或者可无限期地持续给药，例如，受试者的余生。在一些实施方案中，长期给药意欲在长时间内在血液中提供所述化合物的恒定水平，例如，在治疗窗内。
可以使用各种给药方法，进一步递送本发明的药物组合物。例如，在一些实施方案中，可以推注给药药物组合物，例如，为了使化合物在血液中的浓度提高至有效水平。推注剂量取决于通过身体的活性组分的目标全身性水平，例如，肌内或皮下的推注剂量使活性组分缓慢释放，而直接递送至静脉的推注(例如，通过IV静脉滴注)能够更加快速地递送，使得活性组分在血液中的浓度快速升高至有效水平。在其它实施方案中，可以以持续输液形式给予药物组合物，例如，通过IV静脉滴注，从而在受试者身体中提供稳态浓度的活性组分。此外，在其它实施方案中，可以首先给予推注剂量的药物组合物，而后持续输液。
口服组合物可以采用散装液体溶液或混悬剂或散装粉剂形式。然而，更通常，为了便于精确地剂量给药，以单位剂量形式提供所述组合物。术语“单位剂型”是指适合作为人类患者及其它哺乳动物的单元剂量的物理离散单位，每个单位包含预定数量的、适于产生所需要的治疗效果的活性物质与合适药学赋形剂。典型的单位剂量形式包括液体组合物的预装填的、预先测量的安瓿或注射器，或者在固 体组合物情况下的丸剂、片剂、胶囊剂等。在这种组合物中，所述化合物通常为较少的组分(约0.1至约50重量％，或优选约1至约40重量％)，剩余部分为对于形成所需给药形式有用的各种载体或赋形剂以及加工助剂。
对于口服剂量，代表性的方案是，每天一个至五个口服剂量，尤其是两个至四个口服剂量，典型地是三个口服剂量。使用这些剂量给药模式，每个剂量提供大约0.01至大约20mg/kg的本发明化合物，优选的剂量各自提供大约0.1至大约10mg/kg，尤其是大约1至大约5mg/kg。
为了提供与使用注射剂量类似的血液水平，或比使用注射剂量更低的血液水平，通常选择透皮剂量，数量为大约0.01至大约20％重量，优选大约0.1至大约20％重量，优选大约0.1至大约10％重量，且更优选大约0.5至大约15％重量。
从大约1至大约120小时，尤其是24至96小时，注射剂量水平在大约0.1mg/kg/小时至至少10mg/kg/小时的范围。为了获得足够的稳定状态水平，还可以给予大约0.1mg/kg至大约10mg/kg或更多的预载推注。对于40至80kg的人类患者来说，最大总剂量不能超过大约2g/天。
适于口服给药的液体形式可包括合适的水性或非水载体以及缓冲剂、悬浮剂和分散剂、着色剂、调味剂，等等。固体形式可包括，例如，任何下列组份，或具有类似性质的化合物：粘合剂，例如，微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，例如，淀粉或乳糖，崩解剂，例如，褐藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，例如，硬脂酸镁；助流剂，例如，胶体二氧化硅；甜味剂，例如，蔗糖或糖精；或调味剂，例如，薄荷、水杨酸甲酯或橙味调味剂。
可注射的组合物典型地基于可注射用的无菌盐水或磷酸盐缓冲盐水，或本领域中已知的其它可注射的赋形剂。如前所述，在这种组合物中，活性化合物典型地为较少的组分，经常为约0.05至10％重量，剩余部分为可注射的赋形剂等。
典型地将透皮组合物配制为含有活性组分的局部软膏剂或乳膏剂。当配制为软膏剂时，活性组分典型地与石蜡或可与水混溶的软膏基质组合。或者，活性组分可与例如水包油型乳膏基质一起配制为乳膏剂。这种透皮制剂是本领域中公知的，且通常包括用于提升活性组分或制剂的稳定的皮肤渗透的其它组份。所有这种已知的透皮制剂和组份包括在本发明提供的范围内。
本发明化合物还可通过经皮装置给予。因此，经皮给药可使用贮存器(reservoir)或多孔膜类型、或者多种固体基质的贴剂实现。
用于口服给予、注射或局部给予的组合物的上述组份仅仅是代表性的。其它材料以及加工技术等阐述于Remington's Pharmaceutical Sciences,17th edition,1985,Mack Publishing Company,Easton,Pennsylvania的第8部分中，本文以引用的方式引入该文献。
本发明化合物还可以以持续释放形式给予，或从持续释放给药系统中给予。代表性的持续释放材料的描述可在Remington's Pharmaceutical Sciences中找到。
本发明还涉及本发明化合物的药学上可接受的制剂。在一个实施方案中，所述制剂包含水。在另 一个实施方案中，所述制剂包含环糊精衍生物。最常见的环糊精为分别由6、7和8个α-1,4-连接的葡萄糖单元组成的α-、β-和γ-环糊精，其在连接的糖部分上任选包括一个或多个取代基，其包括但不限于：甲基化的、羟基烷基化的、酰化的和磺烷基醚取代。在一些实施方案中，所述环糊精为磺烷基醚β-环糊精，例如，磺丁基醚β-环糊精，也称作Captisol。参见，例如，U.S.5,376,645。在一些实施方案中，所述制剂包括六丙基-β-环糊精(例如，在水中，10-50％)。
组合
本发明化合物或其组合物可以与其它治疗剂组合给药，以治疗所述疾病。已知治疗剂的实例包括但不限于阿德力霉素(Adriamycin)、地塞米松(dexamethasone)、长春新碱(vincristine)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、拓朴替康(topotecan)、紫杉酚(taxol)、干扰素、铂衍生物、紫杉烷(taxane)(例如太平洋紫杉醇(paclitaxel))、长春花生物碱(例如长春碱(vinblastine))、蒽环霉素(anthracycline)(例如多柔比星(doxorubicin))、表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin)(例如依托泊苷(etoposide))、顺铂(cisplatin)、mTOR抑制剂(例如雷帕霉素(rapamycin))、甲氨蝶呤(methotrexate)、放线菌素D(actinomycin D)、海兔毒素10(dolastatin 10)、秋水仙碱(colchicine)、吐根素(emetine)、三甲曲沙(trimetrexate)、氯苯氨啶(metoprine)、环孢霉素(cyclosporine)、道诺霉素(daunorubicin)、替尼泊苷(teniposide)、两性霉素(amphotericin)、烷化剂(例如苯丁酸氮芥(chlorambucil))、5-氟尿嘧啶、喜树碱(camptothecin)、顺铂、甲硝哒唑(metronidazole)以及GleevecTM。在其它实施例中，本发明化合物与如阿瓦斯汀(Avastin)或维克替比(VECTIBIX)等生物剂组合给药。
在一些实施方案中，本发明化合物或其组合物可以与选自以下中的任一种或一种以上的抗增殖剂或化学治疗剂组合给药：阿巴瑞克(abarelix)、阿地白介素(aldesleukin)、阿仑单抗(alemtuzumab)、阿利维甲酸(alitretinoin)、别嘌呤醇(allopurinol)、六甲蜜胺(altretamine)、氨磷汀(amifostine)、阿那曲唑(anastrozole)、三氧化二砷、天冬酰胺酶、阿扎胞苷(azacitidine)、BCG Live、贝伐单抗(bevacuzimab)、氟尿嘧啶、贝瑟罗汀(bexarotene)、博莱霉素(bleomycin)、硼替佐米(bortezomib)、白消安(busulfan)、二甲睾酮(calusterone)、卡培他滨(capecitabine)、喜树碱、卡铂(carboplatin)、卡莫司汀(carmustine)、塞内昔布(celecoxib)、西妥昔单抗(cetuximab)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、克拉屈滨(cladribine)、氯法拉滨(clofarabine)、环磷酰胺、阿糖胞苷(cytarabine)、放线菌素D、达贝泊汀α(darbepoetin alfa)、道诺霉素、地尼白介素(denileukin)、右雷佐生(dexrazoxane)、多烯紫杉醇(docetaxel)、多柔比星、盐酸多柔比星、丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)、表柔比星(epirubicin)、依伯汀α(epoetin alfa)、埃罗替尼(erlotinib)、雌莫司汀(estramustine)、磷酸依托泊苷、依托泊苷、依西美坦(exemestane)、非格司亭(filgrastim)、氟尿苷(floxuridine)、氟达拉宾(fludarabine)、氟维司群(fulvestrant)、吉非替尼、吉西他滨(gemcitabine)、吉妥珠单抗(gemtuzumab)、乙酸戈舍瑞林(goserelin acetate)、乙酸组氨瑞林(histrelin acetate)、羟基脲(hydroxyurea)、替伊莫单抗(ibritumomab)、艾达霉素(idarubicin)、异环磷酰胺(ifosfamide)、 甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate)、干扰素α-2a、干扰素α-2b、伊立替康(irinotecan)、来那度胺(lenalidomide)、来曲唑(letrozole)、甲酰四氢叶酸(leucovorin)、乙酸亮丙立德(leuprolide acetate)、左旋咪唑(levamisole)、洛莫司汀(lomustine)、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)、美法仑(melphalan)、巯嘌呤(mercaptopurine)、6-MP、巯乙磺酸钠(mesna)、甲氨蝶呤、补骨脂素(methoxsalen)、丝裂霉素C(mitomycin C)、米托坦(mitotane)、米托蒽醌(mitoxantrone)、诺龙(nandrolone)、奈拉滨(nelarabine)、诺非单抗(nofetumomab)、奥普瑞白介素(oprelvekin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、太平洋紫杉醇、帕利夫明(palifermin)、帕米膦酸盐(pamidronate)、培加酶(pegademase)、培门冬酶(pegaspargase)、乙二醇化非格司亭(pegfilgrastim)、培美曲塞二钠(pemetrexed disodium)、喷司他汀(pentostatin)、哌泊溴烷(pipobroman)、普卡霉素(plicamycin)、卟吩姆钠(porfimer sodium)、丙卡巴肼(procarbazine)、奎纳克林(quinacrine)、拉布立酶(rasburicase)、利妥昔单抗(rituximab)、沙格司亭(sargramostim)、索拉非尼(sorafenib)、链脲霉素(streptozocin)、顺丁烯二酸舒尼替尼(sunitinib maleate)、滑石、他莫西芬(tamoxifen)、替莫唑胺(temozolomide)、替尼泊苷、VM-26、睾内酯(testolactone)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、6-TG、噻替派(thiotepa)、拓朴替康、托瑞米芬(toremifene)、托西莫单抗(tositumomab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、维甲酸(tretinoin)、ATRA、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)、伐柔比星(valrubicin)、长春碱、长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、唑来膦酸盐(zoledronate)或唑来膦酸(zoledronic acid)。
本发明化合物还可以组合的治疗剂的其它实例包括但不限于：用于阿尔茨海默氏病(Alzheimer′s Disease)的治疗剂，如盐酸多奈哌齐(donepezil hydrochloride)和雷斯替明(rivastigmine)；用于帕金森氏病(Parkinson′s Disease)的治疗剂，如L-DOPA/卡比多巴(carbidopa)、恩他卡朋(entacapone)、罗匹尼洛(ropinrole)、普拉克索(pramipexole)、溴麦角环肽(bromocriptine)、培高利特(pergolide)、三己芬迪(trihexephendyl)以及三环癸胺(amantadine)；用于多发性硬化症(Multiple Sclerosis；MS)的治疗剂，如β干扰素、乙酸格拉默(glatiramer acetate)和米托蒽醌；用于哮喘的治疗剂，如舒喘宁(albuterol)和孟鲁司特；用于精神分裂症的治疗剂，如再普乐(zyprexa)、理斯必妥(risperdal)、思瑞康(seroquel)以及氟哌啶醇(haloperidol)；消炎剂，如皮质类固醇、TNF阻断剂、IL-1RA、硫唑嘌呤(azathioprine)、环磷酰胺以及柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)；免疫调节剂和免疫抑制剂，如环孢素(cyclosporin)、他克莫司(tacrolimus)、雷帕霉素、霉酚酸吗啉乙酯(mycophenolate mofetil)、干扰素、皮质类固醇、环磷酰胺、硫唑嘌呤以及柳氮磺胺吡啶；神经营养因子，如乙酰胆碱酯酶抑制剂、MAO抑制剂、干扰素、抗惊厥剂、离子通道阻断剂、利鲁唑(riluzole)以及抗帕金森氏病剂；用于心血管疾病的治疗剂，如β阻断剂、ACE抑制剂、利尿剂、硝酸盐、钙离子通道阻断剂以及他汀类(statin)；用于肝病的治疗剂，如皮质类固醇、消胆胺(cholestyramine)、干扰素以及抗病毒剂；用于血液病症的治疗剂，如皮质类固醇、抗白血病剂以及生长因子；以及用于免疫缺陷病症的治疗剂，如γ球蛋白。
那些其它活性剂可以与含有本发明化合物的组合物分开给药，作为多次给药方案的一部分。或者，那些活性剂可以是单一剂型的一部分，与本发明化合物一起混合在单一组合物中。如果作为多次给药 方案的一部分给药，那么两种活性剂可以同时、依次或彼此间隔一段时间(通常彼此间隔在5小时以内)提供。
治疗
本发明提供了一种抑制蛋白酪氨酸激酶(如EGFR激酶)的方法或治疗疾病(如癌症、细胞增殖性疾病、炎症、感染、免疫性疾病、器官移植、病毒性疾病、心血管疾病或代谢性疾病)的方法，它包括步骤：给需要治疗的受试者给药本发明化合物，或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物，或给药本发明所述的药物组合物。
本发明化合物可用于治疗EGFR导致的癌症。尤其是，所述化合物可用于治疗表达EGFR突变体的EGFR导致的癌症和用于治疗对RTKI疗法(例如，厄洛替尼或吉非替尼)难治的EGFR导致的癌症。
本发明化合物是EGFR的至少一种突变体的抑制剂并且因此适用于治疗与一种或一种以上EGFR突变体(例如缺失突变、活化突变、抗性突变或其组合，具体实例包括T790M突变、L858R突变和L858R/T790M双突变)的活性相关的一种或一种以上病症。因此，在具体实施方案中，本发明提供一种治疗突变EGFR介导的病症的方法，其包含向有需要的患者给药本发明化合物，或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物，或给药本发明所述的药物组合物的步骤。
本发明化合物可治疗的癌症包括但不限于：非小细胞肺癌(NSCLS)、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌、胃肠间质瘤、白血病、组织细胞性淋巴癌、鼻咽癌等过度增殖性疾病。此外，本发明化合物也可用于在需要此类治疗的患者中起到预防癌症复发的维持作用。
本发明化合物的有效量通常在平均日剂量为0.01mg至50mg化合物/千克患者体重，优选0.1mg至25mg化合物/千克患者体重，以单次或多次给药。通常，本发明化合物可向该有此治疗需要的患者以每位患者约1mg至约3500mg的日剂量范围给药，优选10mg至1000mg。例如，每位患者的日剂量可为10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、500、600、700、800、900或1000mg。可每天、每周(或间隔数天)或以间歇时间表，给药一次或多次。例如，可在每周的基础上(例如每周一)，每天给予所述化合物一次或多次，不定地或持续几周，例如4-10周。或者，可每天给药持续几天(例如2-10天)，然后几天(例如1-30天)不给药所述化合物，不定地重复该循环或重复给定的次数，例如4-10个循环。例如，本发明化合物可每天给药持续5天，然后间断9天，然后再每天给药持续5天，然后间断9天，以此类推，不定地重复该循环或共重复4-10次。
当EGFR-TKI(例如，厄洛替尼或吉非替尼)与本发明化合物组合使用时，该组合疗法的各个成分可以以它们单一疗法的剂量水平和方案给药。例如，厄洛替尼，对于治疗非小细胞肺癌，已经以每天150mg口服给药，对于胰腺癌，已经以每天100mg口服给药。在另一实例中，吉非替尼对于治疗非 小细胞肺癌已经以每天250mg口服给药。
优选地，当EGFR-TKI(例如，厄洛替尼或吉非替尼)与本发明化合物组合使用，其一种或两种成分的剂量水平相比于单独使用时降低。
实施例
提供以下实施例以便为本领域技术人员提供如何进行、制备和评估本文请求保护的方法和化合物的完整公开和说明，旨在仅仅示例本发明而非限制本发明的范围。
合成方法
本发明化合物可按照本领域常规方法，并使用合适的试剂、原料和本领域技术人员已知的纯化方法制备。
下面更具体地描述本发明式I结构化合物的制备方法，但这些具体方法不对本发明构成任何限制。本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述的或本领域已知的各种合成方法组合起来而方便地制得，这样的组合可由本发明所属领域的技术人员容易地进行。
通常，在制备中，各反应通常在惰性溶剂中，在室温至回流温度(如0℃～100℃，优选0℃～80℃)进行。反应时间通常为0.1小时-60小时，优选0.5-24小时。
实施例1 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-H-吲哚-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2- 基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-1)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物3的合成。
氮气氛围下，依次将2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(化合物2，393mg,1.9mmol)，Na2CO3(201mg,1.9mmol)，Pd(PPh3)4(44mg,0.038mmol)加入至1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-硼酸(0.5g,1.9mmol)的乙醇(7mL)溶液中，该反应液在70℃下搅拌2小时后，冷却至室温，移除溶剂，用柱色谱分离纯化得到白色固体产物600mg，收率为96％。LC-MS(APCI):m/z＝386.1(M+1)+，1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)8.28-8.24(m,1H),8.13(d,J＝5.7Hz,1H),7.70-7.67(m,1H),7.58(d,J＝5.7Hz,1H),7.51-7.45(m,1H),7.37-7.31(m,1H),7.25(s,1H),1.32(s,9H)。
步骤2 化合物5的合成。
依次将化合物4(186mg,1.2mmol)和对甲苯磺酸一水合物(228mg,1.44mmol)加入至化合物3(385mg,1.2mmol)的2-戊醇(6mL)溶液中，加热至105℃并反应过夜后，反应液冷却至室温，过滤后用乙酸乙酯洗涤得到黄色固体产物400mg，收率为92％。LC-MS(APCI):m/z＝436.1(M+1)+。
步骤3 化合物7的合成。
氮气氛围下，依次将化合物6(280mg,2.75mmol)和碳酸钾(507mg,3.68mmol)加入至化合物5(400mg,0.92mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(DMF,5mL)溶液中，室温下搅拌3小时后过滤，用二氯甲烷萃取，收集有机相得到红色固体产物426mg，收率为90％。LC-MS(APCI):m/z＝518.1(M+1)+，1H NMR(400MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.94(br s,1H),9.59(s,1H),7.94(d,J＝5.6Hz,1H),7.75(d,J＝8.0Hz,1H),7.70(d,J＝8.0Hz,1H),7.60(s,1H),7.46(d,J＝1.6Hz,1H),7.38-7.33(m,2H),7.18(t,J＝15.2Hz,1H),6.67(s,1H),3.99(s,3H),3.32(t,J＝6.8Hz,2H),2.94(s,3H),2.61(t,J＝6.8Hz,2H),2.29(s,6H)。
步骤4 化合物8的合成。
氮气氛围下，依次将铁粉(276mg,4.9mmol)、氯化铵(66mg,1.23mmol)加入至化合物7(426mg,0.82mmol)的乙醇(6mL)和水(2mL)溶液中，加热至85℃反应2小时后，冷却至室温，过滤减 压移除溶剂，用CH3Cl:i-PrOH(3:1)萃取，收集有机相得到棕色固体产物，直接用于下一步。
步骤5 化合物T-1的合成。
将上一步反应产物溶于二氯甲烷(25mL)，加入三乙胺(0.1g,1mmol)，冷却至-20℃，加入丙烯酰氯(化合物9，81mg,0.9mmol)的二氯甲烷溶液，继续在该温度下反应2小时，加水淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相，通过柱色谱分离纯化得到白色固体产物200mg，收率为45％。LC-MS(APCI):m/z＝542.2(M+1)+，1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)11.61(br s,1H),10.45(br s,1H),10.01(s,1H),7.93-7.90(m,2H),7.82(s,1H),7.75(d,J＝8.1Hz,1H),7.53(d,J＝1.5Hz,1H),7.34-7.28(m,2H),7.12(t,J＝8.1Hz,1H),6.83(s,1H),6.70-6.64(m,1H),5.51-6.48(m,1H),5.86-5.82(m,1H),3.91(s,3H),2.92(t,J＝5.4Hz,2H),2.75(s,3H),2.31-2.29(m,8H)。
实施例2 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶 -2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-2)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物10的合成。
氮气氛围下，向一个连续搅拌的三颈圆底烧瓶加入2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(化合物2，1.0g,4.88mmol)和1,2-二氯乙烷(13mL)，加热至60℃后加入FeCl3(0.78g,4.81mmol)，继续向反应体 系滴加1-甲基吲哚(0.72g,5.49mmol)的1,2-二氯乙烷(3mL)溶液，滴加完成后于60℃反应过夜，加入20mL甲醇稀释，过滤，收集有机相，加入乙酸乙酯搅拌20分钟，依次用水，乙酸乙酯，二氯甲烷洗涤，干燥得到棕色固体950mg，收率为65％。LC-MS(APCI):m/z＝300(M+1)+，1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)8.64(d,J＝4.8Hz,1H),8.57(d,J＝4.8Hz,1H),8.48(s,1H),7.62-7.60(m,2H),7.36-7.32(m,2H),4.00(s,3H)。
步骤2 化合物11的合成。
依次将化合物4(186mg,1.2mmol)和对甲苯磺酸一水合物(205mg,1.2mmol)加入至化合物10(300mg,1.0mmol)的2-戊醇(6mL)溶液中，加热至105℃并反应过夜后，反应液冷却至室温，过滤后用乙酸乙酯洗涤得到棕色固体产物420mg，收率为98％。LC-MS(APCI):m/z＝450(M+1)+。
步骤3 化合物12的合成。
氮气氛围下，依次将化合物6(102mg,1.0mmol)和碳酸钾(507mg,3.68mmol)加入至化合物11(385mg,0.78mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，室温下搅拌3小时后过滤，滤饼溶于水，过滤，用水洗涤，干燥后通过柱色谱分离纯化得黄色固体产物371mg，收率为89％。LC-MS(APCI):m/z＝532(M+1)+，1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.36(s,1H),8.66(d,J＝7.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.83(d,J＝5.4Hz,1H),7.62(s,1H),7.40-7.34(s,4H),6.70(s,1H),4.01(s,3H),3.94(s,3H),3.27(t,J＝6.9Hz,2H),2.90(s,3H),2.57(t,J＝6.9Hz,2H),2.27(s,6H)。
步骤4 化合物13的合成。
氮气氛围下，依次将铁粉(235mg,4.2mmol)、氯化铵(37mg,0.7mmol)加入至化合物12(371mg,0.7mmol)的乙醇(10mL)和水(2mL)溶液中，加热至85℃反应2小时后，冷却至室温，过滤减压移除溶剂，加水，二氯甲烷萃取、干燥后得到黄色固体产物350mg，收率为98％。LC-MS(APCI):m/z＝502(M+1)+。
步骤5 化合物T-2的合成。
在一个连续搅拌的三颈圆底烧瓶中依次加入化合物13(350mg,0.7mmol)，四氢呋喃(10mL)，水(1mL)，将反应液冷却至0℃，加入化合物14(107mg,0.84mmol)，室温下搅拌15分钟后，加入氢氧化钠(112mg,2.8mmol)，加热至65℃并反应15小时，加水和乙酸乙酯萃取，用水洗涤，干燥后用柱色谱分离纯化得黄色固体产物160mg，收率为41％。LC-MS(APCI):m/z＝556(M+1)+，1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)10.09(s,1H),8.82(s,1H),8.50(d,J＝8.1Hz,1H),8.31(s,1H),8.26(d,J＝5.4Hz,1H),8.18(s,1H),7.53(d,J＝8.1Hz,1H),7.23-7.30(m,2H),7.11(t,J＝6.9Hz,1H),7.04(s,1H),6.36-6.42(m,1H),6.19(dd,J＝17.1Hz,2.4Hz,1H),5.70-5.75(m,1H),3.97(s,3H),3.80(s,3H),2.92(s,2H),2.73(s,3H),2.37(s,2H),2.23(s,6H)。
实施例3 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)噻吩并[3,2-d] 嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-3)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物16的合成。
依次将2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(化合物2，1.5g,7.32mmol)，乙烯基正丁醚(化合物15，2.2g,21.95mmol)和三乙胺(777mg,7.68mmol)溶于20mL聚乙二醇(PEG200)中，加入Pd(OAc)2(82mg,366μmol)后将反应液加热至80℃，并在该温度下反应16小时，倒入水，用乙酸乙酯萃取后，收集有机相直接用于下一步。
步骤2 化合物18的合成。
将化合物16(1.9g,7.07mmol)，1-氨基吡啶碘化物(化合物17，1.57g,7.07mmol)和碳酸钾(2.44g,17.67mmo)溶于10mLDMF溶液中，加热至110℃，反应2小时后冷却至室温，过滤，水洗滤饼，抽干得到黄色固体产物400mg，收率为20％。LC-MS(APCI):m/z＝287.3(M+1)+，1HNMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)8.89(d,1H,J＝9Hz),8.79(s,1H),8.63(d,1H,J＝6.9Hz),8.04(d,1H,J＝4.5Hz),7.58-7.55(m,2H),7.12-7.06(m,1H)。
步骤3 化合物19的合成。
将化合物18(400mg,1.4mmol)和化合物4(1.04g,5.58mmol)的3mL三氟乙酸溶液加热至150℃并反应4小时，冷却至室温后过滤，收集滤液并用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，干燥后得黄色固体产物330mg，收率为50％。LC-MS(APCI):m/z＝437.4(M+1)+。
步骤4 化合物20的合成。
将化合物6(140mg,1.37mmol)、碳酸钾(285mg,2.06mmol)和化合物19(300mg,0.69mmol) 的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中，室温下搅拌16小时后，加水和二氯甲烷萃取收集有机相后，用薄层色谱分离纯化得棕色固体66mg，收率为18％。LC-MS(APCI):m/z＝519.3(M+1)+。
步骤5 化合物T-3的合成。
氮气氛围下，将铁粉(35mg,0.64mmol)、氯化铵(41mg,0.7mmol)和化合物20(66mg,0.1mmol)的乙醇(6mL)和水(3mL)溶液加热至90℃并反应2小时后，冷却至室温，过滤减压移除溶剂，加入二氯甲烷萃取后干燥得黄色固体。将此黄色固体与三乙胺(23mg,225μmol)溶于10mL二氯甲烷溶液中，冷却至-15℃后加入丙烯酰氯(10mg,112μmol)，继续在-10℃搅拌15分钟，倒入10mL NaHCO3溶液，加入二氯甲烷萃取，收集有机相，用柱色谱分离纯化得黄色固体产物32mg，收率为52％。LC-MS(APCI):m/z＝543.4(M+1)+，1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)10.06(s,1H),9.67(s,1H),8.79-8.77(m,2H),5.58-8.56(m,1H),7.86-7.85(m,1H),7.56(s,1H),7.48(d,J＝4.2Hz,1H),7.40-7.35(m,1H),6.97-6.94(m,1H),6.82(s,1H),6.38-6.34(m,2H),2.70-5.67(m,1H),3.91(s,3H),2.94-2.90(m,2H),2.70(s,3H),2.38-2.33(m,2H),2.29(s,6H)。
实施例4 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1H-苯并[d]咪唑-1-基)噻吩并[3,2-d] 嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-4)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物22的合成。
氮气氛围下，依次将1H-苯并[d]咪唑(0.56g,0.5mmol)、碳酸钾(0.83g,0.6mmol)加入至2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(化合物2，1.0g,0.5mmol)的DMF(5mL)溶液中，室温下搅拌过夜，倒入80mL水，有白色固体生成，过滤，水洗得到目标产物1.1g，收率为95％。LC-MS(APCI):m/z＝287.0(M+1)+，1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)8.86(s,1H),8.49-8.46(m,1H),8.18(d,J＝6.0Hz,1H),7.92-7.89(m,1H),7.66(d,J＝6.0Hz,1H),7.52-7.46(m,2H)。
步骤2 化合物23的合成。
氮气保护下，将化合物22(290mg,1.0mmol)、化合物4(223mg,1.2mmol)、对甲苯磺酸(205mg,1.2mmol)和2-戊醇加入至一个连续搅拌的三颈圆底烧瓶中，加热至105℃并在该温度下反应过夜，冷却至室温，过滤，干燥得棕色固体产物410mg，收率为94％。LC-MS(APCI):m/z＝437.0(M+1)+。
步骤3 化合物24的合成。
氮气保护下，依次将化合物23(350mg,0.78mmol)、化合物6(102mg,1mmol)、碳酸钾(138mg,1mmol)和DMF(10mL)加入至三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌过夜，加入20mL水，过滤，水洗滤饼，干燥后通过柱色谱分离纯化得到黄色固体产物371mg，收率为69％。LC-MS(APCI):m/z＝519(M+1)+，1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.20(s,1H),8.79(s,1H),8.30-8.27(m,1H),7.99(d,J＝5.4Hz,1H),7.92-7.89(m,1H),7.65(s,1H),7.48-7.43(m,3H),6.71(s,1H),4.01(s,3H),3.30(t,J＝6.9Hz,2H),2.90(s,3H),2.59(t,J＝6.9Hz,2H),2.29(s,6H)。
步骤4 化合物25的合成。
氮气氛围下，将铁粉(235mg,4.2mmol)、氯化铵(37mg,0.7mmol)和化合物24(371mg,0.7mmol)的乙醇(10mL)和水(3mL)溶液加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，过滤减压移除溶剂，加入二氯甲烷萃取后干燥得黄色固体350mg。LC-MS(APCI):m/z＝489(M+1)+。
步骤5 化合物T-4的合成。
氮气保护下，将化合物25(342mg,0.7mmol)溶于50mL二氯甲烷中，逐滴滴加三乙胺(106mg,1.05mmol)，滴加完成后将反应体系冷却至-20℃，在该温度下缓慢加入丙烯酰氯(76mg，0.84mmol)，搅拌15分钟，加水，分离有机相并依次用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到黄色固体产物156mg，收率为41％。LC-MS(APCI):m/z＝543(M+1)+，1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.97(br s,1H),9.72(s,1H),8.88(s,1H),8.26-8.23(m,1H),7.95(d,J＝5.4Hz,1H),7.90-7.87(m,1H),7.69(s,1H),7.55(d,J＝5.4Hz,1H),7.42-7.36(m,2H),6.81(s,1H),6.44(d,J＝6.0Hz,2H),5.70(t,J＝6.0Hz,1H),3.91(s,3H),2.96(t,J＝6.0Hz,2H),2.71(s,3H),2.44(t,J＝6.0Hz,2H),2.35(s,6H)。
实施例5 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1H-苯并[d]三氮唑-1-基)噻吩并[3,2-d] 嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-5)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物27的合成。
氮气保护下，依次将1H-苯并[d]三氮唑(0.56g,0.5mmol)和碳酸钾(0.83g,0.6mmol)加入至2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(化合物2，1.0g,0.5mmol)的DMF(5mL)溶液中，60℃下搅拌过夜，倒入80mL水，有白色固体生成，过滤，水洗得到目标产物1.1g，收率为77％。LC-MS(APCI):m/z＝288.1(M+1)+。
步骤2 化合物28的合成。
氮气保护下，将化合物27(290mg,1.0mmol)、化合物4(223mg,1.2mmol)、对甲苯磺酸(205mg,1.2mmol)和2-戊醇(6mL)加入至一个连续搅拌的三颈圆底烧瓶中，加热至105℃并在该温度下反应过夜，冷却至室温，过滤，干燥得棕色固体产物410mg，收率为94％。LC-MS(APCI):m/z＝438(M+1)+。
步骤3 化合物29的合成。
氮气保护下，依次将化合物28(350mg,0.78mmol)、化合物6(102mg,1mmol)、碳酸钾(138mg,1mmol)和DMF(10mL)加入至三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌过夜，加入20mL水，过滤，水洗滤饼，干燥后通过柱色谱分离纯化得到黄色固体产物280mg，收率为69％。LC-MS(APCI):m/z＝ 520(M+1)+，1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.09(s,1H),8.68(d,J＝8.1Hz,1H),8.18(d,J＝8.4Hz,1H),8.06(d,J＝6.0Hz,1H),7.72-7.66(m,1H),7.56-7.51(m,2H),7.40(d,J＝5.4Hz,1H),6.72(s,1H),4.02(s,3H),3.32(t,J＝6.9Hz,2H),2.92(s,3H),2.30(s,6H)。
步骤4 化合物30的合成。
氮气氛围下，将铁粉(170mg,3mmol)、氯化铵(27mg,0.5mmol)加入至化合物29(260mg,0.5mmol)的乙醇(10mL)和水(3mL)溶液加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，过滤减压移除溶剂，加入二氯甲烷萃取后干燥得黄色固体245mg，LC-MS(APCI):m/z＝490.2(M+1)+。
步骤5 化合物T-5的合成。
氮气保护下，将化合物30(245mg,0.5mmol)溶于100mL二氯甲烷中，逐滴滴加三乙胺(75mg,0.7mmol)，滴加完成后将反应体系冷却至-20℃，在该温度下缓慢加入丙烯酰氯(54mg，0.6mmol)，搅拌15分钟，加水，分离有机相并依次用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到黄色固体产物166mg，收率为61％。LC-MS(APCI):m/z＝544(M+1)+，1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)10.08(s,1H),9.02(s,1H),8.55(s,2H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),7.63-7.58(m,2H),7.36(d,J＝6.0Hz,1H),7.07(s,1H),6.51(br s,1H),6.21-6.16(m,1H),5.74-5.70(m,1H),3.77(s,3H),3.02-2.97(m,2H),2.76(s,3H),2.55-2.53(m,2H),2.32(s,6H)。
实施例6 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(5,6-二氢-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-1- 基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-6)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物32的合成。
氮气保护下，依次将氯化铁(1.5g,9mmol)和5,6-二氢-4H吡咯并[3,2,1-ij]喹啉(1g,6.4mmol)加入至2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(化合物2，1.13g,6.97mmol)的1,2-二氯乙烷(20mL)溶液中，加热至60℃并搅拌过夜后冷却至室温，倒入100mL水搅拌30分钟，有白色固体生成，过滤，水洗得到目标产物1.5g，收率为74％。LC-MS(APCI):m/z＝326.1(M+1)+。
步骤2 化合物33的合成。
氮气保护下，将化合物4(230mg,1.2mmol)、对甲苯磺酸(230mg,1.4mmol)加入至化合物32(400mg,1.2mmol)的2-戊醇(6mL)溶液中，加热至105℃并在该温度下反应过夜，冷却至室温，在石油醚与乙醇(1:1)的溶液中搅拌15分钟，过滤，干燥得绿色固体产物350mg，收率为61％。LC-MS(APCI):m/z＝476.2(M+1)+。
步骤3 化合物34的合成。
氮气保护下，依次将化合物6(300mg,3mmol)和碳酸钾(550mg,4mmol)加入至化合物33(475mg,1.0mmol)的DMF(10mL)溶液中，室温下搅拌3小时，加入20mL水，过滤，水洗滤饼，干燥后通过柱色谱分离纯化得到红色固体产物260mg，收率为47％。LC-MS(APCI):m/z＝558.2(M+1)+，1H NMR(400MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.39(s,1H),8.40(d,J＝8.0Hz,1H),8.05(s,1H),7.84(d,J＝5.6Hz,1H),7.64(s,1H),7.40(d,J＝5.6Hz,1H),7.25(t,J＝8.0Hz,1H),7.07(d,J＝6.8Hz,1H),6.75(s,1H),4.33(t,J＝5.6Hz,2H),4.04(s,3H),3.33(t,J＝7.2Hz,2H),3.07(t,J＝9.6Hz,2H),2.91(s,3H),2.66(t,J＝7.2Hz,2H),2.36-2.32(m,8H)。
步骤4 化合物35的合成。
氮气保护下，依次将铁粉(80mg,1.4mmol)和氯化铵(23mg,0.44mmol)加入至化合物34(160mg,0.29mmol)的乙醇(3mL)和水(1mL)溶液中，加热至85℃并反应2小时，待反应液由红色变无色时，冷却至室温，减压移除乙醇，干燥得绿色固体产物，直接用于下一步。
步骤5 化合物T-6的合成。
将上一步反应所得的产物溶于二氯甲烷(15mL)，加入三乙胺(40mg,1.3eq)，冷却至-20℃，在该温度下缓慢加入丙烯酰氯(32mg,0.35mmol)，并搅拌1小时，加水淬灭反应，分离有机相，用二氯甲烷萃取后依次用水饱和碳酸氢钠溶液洗涤，收集有机相通过柱色谱纯化得白色固体产物80mg，收率为76％。LC-MS(APCI):m/z＝582.2(M+1)+，1H NMR(300MHz,CDCl3+MeOH-d4)(δ/ppm)8.94(s,1H),8.27(d,J＝4.8Hz,1H),8.06(s,1H),7.87(d,J＝3.6Hz,1H),7.33(d,J＝3.0Hz,1H),7.13(t,J＝4.2Hz,1H),6.98(d,J＝4.2Hz,1H),6.76(s,1H),6.68-6.63(m,1H),6.37-6.33(m,1H),5.77-4.75(m,1H),4.30(t,J＝3.3Hz,2H),3.95(s,3H),3.35-3.33(m,2H),3.17-3.14(m,2H),3.02(t,J＝3.3Hz,2H),2.77(s,6H),2.68(s,3H),2.30-2.28(m,2H)。
实施例7 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1H-吲唑-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2- 基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-7)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物37的合成。
在氮气保护下，向一个连续搅拌的单颈圆底烧瓶中依次加入化合物36(2.44g,10mmol)、化合物2(2.05g,10mmol)、碳酸钾(1.66g,12mmol)及DMF(30mL)，加料完成后室温下搅拌过夜，向反应体系中加入20mL水，过滤后水洗滤饼，干燥后得白色固体产物3.2g，收率为78％。LC-MS(APCI):m/z＝413(M+1)+。
步骤2 化合物38的合成。
在氮气保护下，向一个连续搅拌的单颈圆底烧瓶中依次加入化合物37(2.06g,5mmol)、THF(50mL)、四甲基乙二胺(2g,17mmol)、Pd(dppf)Cl2(204.2g,0.25mmol)和NaBH4(0.65g,17mmol)，室温下搅拌2小时，加入20mL水，过滤后水洗滤饼，干燥后得到白色固体产物0.9g，收率为63％。LC-MS(APCI):m/z＝287(M+1)+。
步骤3 化合物39的合成。
氮气保护下，依次将化合物38(900mg,3.15mmol)、化合物4(700mg,3.78mmol)、对甲基苯磺酸(651mg,3.78mmol)和2-戊醇(6mL)加入至一个单颈圆底烧瓶中并在105℃下反应3小时后，过滤并依次用2-戊醇、水洗涤滤饼，干燥得棕色固体产物1g，收率为73％。LC-MS(APCI):m/z＝437(M+1)+。
步骤4 化合物40的合成。
氮气保护下，依次将化合物39(436mg,1mmol)、化合物6(120mg,1.2mmol)、碳酸钾(200mg,1.5mmol)和DMF(10mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌3小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到黄色固体产物400mg，收率为77％。LC-MS(APCI):m/z＝519(M+1)+。1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.14(s,1H),8.83(d,J＝8.4Hz,1H),8.30(s,1H),7.94(d,J＝5.7Hz,1H),7.78(d,J＝7.2Hz,1H),7.59-7.53(m,1H),7.45(s,1H),7.32-7.37(m,2H),6.97(s,1H),4.00(s,3H),3.30(t,J＝6.9Hz,2H),2.91(s,3H),2.59(t,J＝7.5Hz,2H),2.29(s,6H)。
步骤5 化合物41的合成。
氮气氛围下，依次将化合物40(371mg,0.7mmol)、铁粉(235mg,4.2mmol)和氯化铵(37mg,0.7mmol)加入至水/乙醇(10mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到黄色固体产物230mg，收率为72％。LC-MS(APCI):m/z＝489(M+1)+。
步骤6 化合物T-7的合成。
氮气保护下，向一个装有50mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物41(245mg,0.5mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(75mg,0.75mmol)，将反应体系冷却至-20℃，缓慢加入化合物9(54mg,0.6mmol)后继续搅拌15分钟，加水淬灭反应，分离有机相，并以此用水、饱和碳酸氢钠溶液洗涤，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物156mg，收率为57％。LC-MS(APCI):m/z＝543(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)10.12(s,1H),9.67(s,1H),8.91(d,J＝8.4Hz,1H),8.33(s,1H),7.93(d,J＝5.7Hz,1H),7.79(d,J＝7.8Hz,1H),7.45-7.52(m,3H),7.32(t,J＝7.8Hz,1H),6.85(s,1H),6.33-6.36(m,2H),5.65-5.69(m,1H),3.93(s,3H),2.93(t,J＝6Hz,2H),2.75(s,3H),2.32-2.36(m,2H),2.29(s,6H)。
实施例8 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1H-吲哚-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2- 基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-8)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物42的合成。
在氮气保护下，向一个连续搅拌的单颈圆底烧瓶中依次加入吲哚(1.18g,10mmol)、化合物2(2g,10mmol)、碳酸钾(1.5g,11mmol)及DMF(20mL)，加料完成后室温下搅拌1小时，向反应体系中加入20mL水，过滤后水洗滤饼，干燥后得白色固体产物2.0g，收率为70％。LC-MS(APCI):m/z＝286(M+1)+。
步骤2 化合物43的合成。
氮气保护下，依次将化合物42(900mg,3.15mmol)、化合物4(700mg,3.78mmol)、对甲基苯磺酸(651mg,3.78mmol)和2-戊醇(6mL)加入至一个单颈圆底烧瓶中并在105℃下反应3小时后，过滤并依次用2-戊醇、水洗涤滤饼，干燥得棕色固体产物1g，收率为73％。LC-MS(APCI):m/z＝436(M+1)+。
步骤3 化合物44的合成。
氮气保护下，依次将化合物43(436mg,1mmol)、化合物6(120mg,1.2mmol)、碳酸钾(200mg,1.5mmol)和DMF(10mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌3小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到黄色固体产物400mg， 收率为77％。1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.24(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),7.95(d,J＝2.4Hz,1H),7.89(d,J＝3.3Hz,1H),7.66(d,J＝4.8Hz,1H),7.59(s,1H),7.39(d,J＝3Hz,1H),7.33-7.35(m,1H),7.26-7.29(m,1H),6.82(d,J＝2.1Hz,1H),6.69(s,1H),3.97(s,3H),3.28(t,J＝4.2Hz,2H),2.89(s,3H),2.57(t,J＝4.5Hz,2H),2.27(s,6H)。LC-MS(APCI):m/z＝518(M+1)+。
步骤4 化合物45的合成。
氮气氛围下，依次将化合物44(371mg,0.7mmol)、铁粉(235mg,4.2mmol)和氯化铵(37mg,0.7mmol)加入至水/乙醇(10mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到黄色固体产物245mg，收率为71％。LC-MS(APCI):m/z＝488(M+1)+。
步骤5 化合物T-8的合成。
氮气保护下，向一个装有50mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物45(245mg,0.5mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(75mg,0.75mmol)，将反应体系冷却至-20℃，缓慢加入化合物9(54mg,0.6mmol)后继续搅拌15分钟，加水淬灭反应，分离有机相，并以此用水、饱和碳酸氢钠溶液洗涤，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物166mg，收率为61％。LC-MS(APCI):m/z＝542(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)10.08(s,1H),9.75(s,1H),8.44(d,J＝8.4Hz,1H),8.02(d,J＝3.6Hz,1H),7.89(d,J＝5.4Hz,1H),7.65-7.68(m,2H),7.55(d,J＝5.4Hz,1H),7.25-7.35(m,2H),6.82(d,J＝4.2Hz,2H),6.40-6.42(m,2H),5.67-5.72(m,1H),3.91(s,3H),2.92(t,J＝5.1Hz,2H),2.73(s,3H),2.32-2.36(m,2H),2.30(s,6H)。
实施例9 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(3-甲基-1H-吲唑-1-基)噻吩并[3,2-d] 嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-9)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物47的合成。
在氮气保护下，向一个连续搅拌的单颈圆底烧瓶中依次加入化合物46(0.66g,5mmol)、化合物2(1g,5mmol)、碳酸钾(0.83g,6mmol)及DMF(10mL)，加料完成后室温下搅拌1小时，向反应体系中加入20mL水，过滤后水洗滤饼，干燥后得白色固体产物1.2g，收率为80％。LC-MS(APCI):m/z＝301(M+1)+。
步骤2 化合物48的合成。
氮气保护下，依次将化合物47(1.2g,4mmol)、化合物4(700mg,3.78mmol)、对甲基苯磺酸(827mg,4.8mmol)和2-戊醇(6mL)加入至一个单颈圆底烧瓶中并在105℃下反应3小时后，过滤并依次用2-戊醇、水洗涤滤饼，干燥得棕色固体产物1.1g，收率为61％。LC-MS(APCI):m/z＝451(M+1)+。
步骤3 化合物49的合成。
氮气保护下，依次将化合物48(450mg,1mmol)、化合物6(120mg,1.2mmol)、碳酸钾(200mg,1.5mmol)和DMF(10mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌3小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到黄色固体产物300mg，收率为56％。LC-MS(APCI):m/z＝532(M+1)+。
步骤4 化合物50的合成。
氮气氛围下，依次将化合物49(160mg,0.3mmol)、铁粉(100mg,1.8mmol)和氯化铵(16mg,0.3mmol)加入至水/乙醇(10mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到黄色固体产物150mg，收率为98％。LC-MS(APCI):m/z＝503(M+1)+。
步骤5 化合物T-9的合成。
氮气保护下，向一个装有50mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物50(150mg,0.3mmol)， 待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(50mg,0.45mmol)，将反应体系冷却至-20℃，缓慢加入化合物9(33mg,0.36mmol)后继续搅拌15分钟，加水淬灭反应，分离有机相，并以此用水、饱和碳酸氢钠溶液洗涤，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物86mg，收率为52％。LC-MS(APCI):m/z＝557(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)10.05(s,1H),9.66(s,1H),8.85(d,J＝5.1Hz,1H),7.89(d,J＝3.6Hz,1H),7.68(d,J＝4.8Hz,1H),7.42-7.48(m,3H),7.30(t,J＝4.2Hz,1H),6.83(s,1H),6.36(d,J＝3.3Hz,2H),5.65-5.68(m,1H),3.91(s,3H),2.93(t,J＝3.3Hz,2H),2.74(s,3H),2.69(s,3H),2.36(s,2H),2.31(s,6H)。
实施例10 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(3-甲基-1H-吲哚-1-基)噻吩并[3,2-d] 嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-10)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物52的合成。
在氮气保护下，向一个连续搅拌的单颈圆底烧瓶中依次加入化合物51(1.28g,9.75mmol)、化合物2(2g,9.75mmol)、碳酸钾(2.02g,14.63mmol)及DMF(20mL)，加料完成后室温下搅拌过夜，向反应体系中加入20mL水，过滤后水洗滤饼，干燥后得黄色色固体产物2.2g，收率为75％。LC-MS(APCI):m/z＝300(M+1)+。1HNMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)8.70(d,J＝8.1Hz,1H),8.05(d,J＝5.4Hz,1H),7.77(d,J＝1.2Hz,1H),7.60(d,J＝7.8Hz,1H),7.55(d,J＝5.4Hz,1H),7.46-7.41(m,1H),7.37-7.32(m,1H),2.41(d,J＝ 1.2Hz,3H)。
步骤2 化合物53的合成。
氮气保护下，依次将化合物52(966mg,3.2mmol)、化合物4(500mg,2.7mmol)、对甲基苯磺酸(555mg,3.2mmol)和2-戊醇(6mL)加入至一个单颈圆底烧瓶中并在105℃下反应3小时后，过滤并依次用2-戊醇、水洗涤滤饼，干燥得棕色固体产物950mg，收率为79％。LC-MS(APCI):m/z＝450(M+1)+。
步骤3 化合物54的合成。
氮气保护下，依次将化合物53(500mg,1.1mmol)、化合物6(170mg,1.7mmol)、碳酸钾(461mg,3.3mmol)和DMF(10mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌3小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到黄色固体产物220mg，收率为37％。LC-MS(APCI):m/z＝532(M+1)+。1HNMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.26(s,1H),8.46(d,J＝5.1Hz,1H),7.92(d,J＝3.3Hz,1H),7.77(d,J＝0.6Hz,1H),7.61(d,J＝4.8Hz,1H),7.58(s,1H),7.41(d,J＝3.3Hz,1H),7.37-7.35(m,1H),7.32-7.30(m,1H),6.71(s,1H),4.01(s,3H),3.29(t,J＝3.9Hz,2H),2.90(s,3H),2.58(t,J＝4.2Hz,2H),2.42(d,J＝0.9Hz,3H),2.28(s,6H)。
步骤4 化合物55的合成。
氮气氛围下，依次将化合物54(210mg,0.4mmol)、铁粉(110mg,2.0mmol)和氯化铵(42mg,0.8mmol)加入至水/乙醇(10mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物直接用于下一步。LC-MS(APCI):m/z＝502(M+1)+。
步骤5 化合物T-10的合成。
氮气保护下，向一个装有30mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物55(198mg,0.4mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(80mg,0.8mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(39mg,0.4mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液后继续搅拌30分钟，加水淬灭反应，分离有机相，并以此用水、饱和碳酸氢钠溶液洗涤，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物85mg，收率为39％。LC-MS(APCI):m/z＝556(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)10.13(s,1H),9.82(s,1H),8.48(s,1H),8.45(d,J＝4.5Hz,1H),8.32(d,J＝5.1Hz,1H),7.90(s,1H),7.59-7.58(m,1H),7.33(d,J＝3Hz,1H),7.23-7.19(m,2H),6.99(s,1H),6.23(dd,J＝1.2Hz,10.5Hz,1H),5.71(dd,J＝＝1.2Hz,7.2Hz,1H),3.82(s,3H),3.30(s,2H),2.68-2.61(m,5H),2.49(s,6H),2.35(s,3H)。
实施例11 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-11)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物58的合成。
将化合物56(400mg,1.49mmol)和N-溴代丁二酰亚胺(NBS,318mg,1.79mmol)的1,4-二氧六环/水(5mL/1mL)的混合溶液在室温下搅拌1小时后，加入化合物57(140mg,1.49mmol)，加热至85℃并在该温度下反应2小时，冷却至室温后过滤，水洗滤饼后干燥得黄色固体产物310mg，收率为73％。LC-MS(APCI):m/z＝287.3(M+1)+。1HNMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)8.89(d,J＝9Hz,1H),8.79(s,1H),8.63(d,J＝6.9Hz,1H),8.04(d,J＝4.5Hz,1H),7.58-7.55(m,2H),7.12-7.06(m,1H)。
步骤2 化合物59的合成。
氮气保护下，依次将化合物58(308mg,1.1mmol)、化合物4(200mg,1.1mmol)、对甲基苯磺酸(555mg,3.2mmol)和2-戊醇(10mL)加入至一个单颈圆底烧瓶中并在105℃下反应16小时后，冷却至室温后，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，搅拌30分钟后过滤并水洗涤滤饼，干燥得棕色固体产物300mg，收率为64％。LC-MS(APCI):m/z＝437(M+1)+。
步骤3 化合物60的合成。
氮气保护下，依次将化合物59(300mg,0.7mmol)、化合物6(84mg,0.8mmol)、碳酸钾(285mg,2.1mmol)和DMF(10mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物148mg，收率为42％。LC-MS(APCI):m/z＝519(M+1)+。
步骤4 化合物61的合成。
氮气氛围下，依次将化合物60(148mg,0.3mmol)、铁粉(159mg,2.8mmol)和氯化铵(76mg,1.4mmol)加入至水/乙醇(6mL/3mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物139mg，收率为99％。LC-MS(APCI):m/z＝488(M+1)+。1HNMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.91(d,J＝6.6Hz,1H),9.10(s,1H),8.64(s,1H),7.93(d,J＝5.4Hz,1H),7.79(d,J＝9Hz,1H),7.51(s,1H),7.48-7.41(m,1H),7.40(d,J＝5.4Hz,1H),7.08-7.03(m,1H),6.73(s,1H),4.02(s,3H),3.32(t,J＝6.9Hz,2H),2.91(s,3H),2.62(t,J＝7.2Hz,2H),2.31(s,6H)。
步骤5 化合物T-11的合成。
氮气保护下，向一个装有30mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物61(139mg,0.3mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(57mg,0.6mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(31mg,0.3mmol)继续搅拌15分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物75mg，收率为49％。LC-MS(APCI):m/z＝543(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)9.98(d,J＝6.9Hz,1H),8.49-8.47(m,2H),8.10(d,J＝5.7Hz,1H),7.70(d,J＝6.3Hz,1H),7.54-7.49(m,1H),7.29(d,J＝5.7Hz,1H),7.08(t,J＝6.6Hz,1H),6.97(s,1H),6.62-6.53(m,1H),6.47-6.41(m,1H),5.87-5.83(m,1H),3.98(s,3H),3.44(t,J＝5.7Hz,2H),3.19(t,J＝5.4Hz,2H),2.81(s,6H),2.71(s,3H)。
实施例12 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-5-((7-(羟甲基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-7H-吡 咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-12)
实施例13 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-7H-吡 咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-13)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物63的合成。
室温下，将无水三氯化铝(4.0g,30.0mmol)在氮气保护下分批加入到化合物62(1.9g,10.0mmol)和1-甲基吲哚(2.6g,20.0mmol)的无水1,2-二氯乙烷(DCE,100mL)中。反应搅拌回流过夜，反应冷却至室温。加水淬灭反应，用固体碳酸氢钠调pH至碱性，减压除去DCE，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，用乙醇重结晶得到褐色固体900mg，收率为32％。LC-MS(APCI):m/z＝283(M+1)+。
步骤2 化合物64的合成。
冰浴下将氢化钠(38mg，1.60mmol)加到化合物63(300mg，1.1mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)的溶液中，反应升温至室温搅拌反应30分钟。再在冰浴下，将2-(三甲硅烷基)乙氧甲基氯(SEMCl,211mg,1.3mmol)滴加到反应液中，反应升温是室温搅拌反应2小时。加水(25mL)萃取反应，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(30mL)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，除去溶剂，浓缩液进行柱分离得到白色固体270mg，收率为62％。LC-MS(APCI):m/z＝413(M+1)+。
步骤3 化合物66的合成。
氮气保护下将无水叔丁醇(3mL)加入到化合物64(50mg，0.12mmol)和化合物65(45mg，0.15mmol)、碳酸钾(50mg，0.36mmol)、Pd2(dba)3(10mg,0.01mmol)和X-Phos(10mg,0.02mmol)的混合物中，反应在氮气保护下，90℃搅拌反应过夜。冷却至室温，硅藻土过滤，用二氯甲烷洗涤滤饼，减压浓缩滤液，浓缩液进行柱分离得到淡黄色固体45mg，收率：56.1％。LC-MS(APCI):m/z＝669(M+1)+。
步骤4 化合物T-12和T-13的合成。
将三氟乙酸(3mL)加到化合物66(160mg，0.24mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液中，反应在 室温下反应3小时。减压浓缩反应液，残渣溶入四氢呋喃(3mL)，用7N的氨的甲醇溶液(3mL)至碱性，反应液在室温下搅拌过夜。减压浓缩反应液，加水稀释(20mL)，二氯甲烷(30mL x 3)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30mL)洗涤无水硫酸钠干燥，除去溶剂,浓缩液进行柱分离得到黄色固体混合物，进一步通过薄层色谱(DCM/MeOH v/v＝15/1)纯化得到N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-5-((7-(羟甲基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(化合物T-12)50mg，收率为37％。LC-MS(APCI):m/z＝569(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)10.07(s,1H),9.44(s,1H),8.59(d,J＝7.7Hz,1H),8.44(s,1H),7.72(s,1H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),7.33(d,J＝3.7Hz,1H),7.28–7.13(m,2H),7.01(s,1H),6.92(d,J＝3.7Hz,1H),6.58(br,1H),6.44(t,J＝7.3Hz,1H),6.24(d,J＝15.3Hz,1H),5.77–5.71(m,1H),5.64(d,J＝7.2Hz,2H),3.93(s,3H),3.91(s,3H),3.11–2.93(m,2H),2.68(s,3H),2.51–2.49(m,2H),2.38(s,6H)。
得到黄色固体混合物，进一步通过薄层色谱纯化得到(DCM/MeOH v/v＝15/1)得到N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((6-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺(化合物T-13)30mg，收率为23.％。LC-MS(APCI):m/z＝539(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)11.39(s,1H),10.03(s,1H),8.79(s,1H),8.58(d,J＝7.9Hz,1H),8.41(s,1H),7.65(s,1H),7.49(d,J＝8.1Hz,1H),7.25–7.18(m,1H),7.17–7.09(m,2H),6.98(s,1H),6.83(d,J＝1.9Hz,1H),6.54(s,1H),6.20(d,J＝16.7Hz,1H),5.72(d,J＝10.6Hz,1H),3.92(s,3H),3.86(s,3H),3.09–2.96(m,2H),2.67(s,3H),2.50–2.48(m,2H),2.38(s,6H)。
实施例14 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-1H-吡 唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)氨基)苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-14)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物68的合成。
室温下，将无水三氯化铝(4.00g,30.0mmol)在氮气保护下分批加入到化合物67(1.89g,10.0mmol)和1-甲基-1H-吲哚(1.38g,1.05mmol)的无水DCE(70mL)中。反应搅拌回流过夜，反应冷却至室温。加水淬灭反应，用固体碳酸氢钠调pH至碱性，减压除去DCE，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，用乙醇重结晶得到褐色固体900mg，收率为32％。LC-MS(APCI):m/z＝284(M+1)+。
步骤2 化合物69的合成。
冰浴下将氢化钠(101mg，4.20mmol)加到化合物68(900mg，2.8mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(15mL)的溶液中，反应升温至室温搅拌反应1小时。再在冰浴下，将2-(三甲硅烷基)乙氧甲基氯(570mg,3.40mmol)滴加到反应液中，反应升温是室温搅拌反应过夜。加水(25mL)萃取反应，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(30mL)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，除去溶剂,浓缩液进行柱分离得到白色固体300mg，收率为26％。LC-MS(APCI):m/z＝414(M+1)+。
步骤3 化合物70的合成。
氮气保护下将无水叔丁醇(6mL)加入到化合物69(270mg，0.65mmol)和化合物65(210mg，0.78mmol)、碳酸钾(278mg，2.00mmol)、Pd2(dba)3(60mg,0.06mmol)和X-Phos(60mg,0.12mmol)的混合物中，反应在氮气保护下，90℃搅拌反应过夜。冷却至室温，硅藻土过滤，用二氯甲烷洗涤滤饼，减压浓缩滤液，浓缩液进行柱分离(淋洗剂：二氯甲烷/甲醇淡黄色固体得到180mg，收率为41％。LC-MS(APCI):m/z＝670.3(M+1)+。
步骤4 化合物T-14的合成。
将三氟乙酸(3mL)加到化合物70(180mg，0.27mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液中，反应在室温下反应3小时。减压浓缩反应液，残渣溶入四氢呋喃(3mL)，用7N的氨的甲醇溶液(3mL) 至碱性，反应液在室温下搅拌过夜。减压浓缩反应液，加水稀释(20mL)，二氯甲烷(30mL x 3)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30mL)洗涤无水硫酸钠干燥，除去溶剂,浓缩液进行柱分离得到白黄色固体50mg，收率为34％，LC-MS(APCI):m/z＝540(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)13.12(s,1H),9.97(s,1H),8.72–8.58(m,2H),8.55–8.37(m,2H),8.28(s,1H),7.53(d,J＝8.2Hz,1H),7.30–7.12(m,2H),6.98(s,1H),6.78(br,1H),6.21(d,J＝16.8Hz,1H),5.71(d,J＝11.8Hz,1H),3.94(s,3H),3.83(s,3H),3.16(d,J＝4.6Hz,2H),2.66(s,3H),2.57–2.53(m,2H),2.49(s,6H)。
实施例15 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((6-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-9H-嘌 呤-2-基)氨基)苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-15)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物72的合成。
室温下，将无水三氯化铝(4.00g,30.0mmol)在氮气保护下分批加入到化合物71(1.89g,10.0mmol)和1-甲基吲哚(1.57g,12.0mmol)的无水DCE(100mL)中。反应搅拌回流过夜，反应冷却至室温。加水淬灭反应，用固体碳酸氢钠调pH至碱性，减压除去DCE，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，用乙醇重结晶得到黄色固体2.0g，收率为71％。LC-MS(APCI):m/z＝284.1(M+1)+。
步骤2 化合物73的合成。
室温下将3,4-二氢-2H-吡喃(THP,444mg，5.28mmol)加到化合物72(300mg，1.05mmol)和 无水对甲基苯磺酸(30mg,0.16mmol)的四氢呋喃(10mL)的溶液中，反应在回流下搅拌反应过夜。减压浓缩，除去溶剂,浓缩液进行柱分离得到淡黄色固体218mg，收率为56％。LC-MS(APCI):m/z＝368.1(M+1)+。
步骤3 化合物74的合成。
氮气保护下将无水叔丁醇(10mL)加入到化合物73(210mg，0.57mmol)和化合物65(200mg，0.68mmol)、碳酸钾(190mg，1.4mmol)、Pd2(dba)3(55mg,0.06mmol)和X-Phos(56mg,0.12mmol)的混合物中，反应在氮气保护下，90℃搅拌反应过夜。冷却至室温，硅藻土过滤，用二氯甲烷洗涤滤饼，减压浓缩滤液，浓缩液进行柱分离，得到淡黄色固体200mg，收率为56％。LC-MS(APCI):m/z＝624.3(M+1)+。
步骤4 化合物T-15的合成。
在N2保护下，将4M的氯化氢甲醇溶液(2mL)加到化合物74(200mg，0.3mmol)的四氢呋喃(5mL)溶液中，反应在室温下反应1小时。用饱和碳酸氢钠调pH至碱性，二氯甲烷萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，除去溶剂,浓缩液进行柱分离得到黄色固体120mg，收率为75％，LC-MS(APCI):m/z＝540.3(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)12.76(s,1H),10.11(s,1H),8.95(s,1H),8.77(s,1H),8.69(d,J＝7.8Hz,1H),8.10(s,1H),7.93(s,1H),7.51(d,J＝8.1Hz,1H),7.23(t,J＝7.2Hz,1H),7.12(t,J＝7.3Hz,1H),7.02(s,1H),6.42(dd,J＝17.0,10.0Hz,1H),6.18(dd,J＝16.9,2.0Hz,1H),5.72(dd,J＝10.1,2.0Hz,1H),3.94(s,3H),3.83(s,3H),2.98–2.86(m,2H),2.72(s,3H),2.44–2.30(m,2H),2.24(s,6H)。
实施例16 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((9-甲基-6-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)-9H-嘌呤-2-基)氨基)苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-16)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物75的合成。
冰浴下将碘甲烷(960mg，6.76mmol)加到化合物72(300mg，1.06mmol)和碳酸钾(30mg,0.16mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)的溶液中，反应在冰浴下反应3小时。加水(25mL)萃取反应，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(30mL)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，除去溶剂,浓缩液进行柱分离得到淡黄色固体190mg，收率为61％。LC-MS(APCI):m/z＝98.1(M+1)+。
步骤2 化合物T-16的合成。
氮气保护下将无水叔丁醇(6mL)加入到化合物75(190mg，0.64mmol)和化合物65(210mg，0.7mmol)、碳酸钾(278mg，2.0mmol)、Pd2(dba)3(60mg,0.06mmol)和X-Phos(0.12mg,0.12mmol)的混合物中，反应在氮气保护下，90℃搅拌反应过夜。冷却至室温，硅藻土过滤，用二氯甲烷洗涤滤饼，减压浓缩滤液，浓缩液进行柱分离得到淡黄色固体120mg，收率为35％。LC-MS(APCI):m/z＝554.3(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)9.95(s,1H),9.28(s,1H),8.95(s,1H),8.68(d,J＝7.8Hz,1H),8.16(s,1H),7.94(s,1H),7.55–7.49(m,1H),7.28–7.13(m,2H),7.01(s,1H),6.84–6.63(m,1H),6.28–6.10(m,1H),5.76–5.67(m,1H),3.94(s,3H),3.88(s,3H),3.82(s,3H),3.15–2.99(m,2H),2.67(s,3H),2.54–2.46(m,8H)。
实施例17 N-(5-((6-(5,6-二氢-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-1-基)-9H-嘌呤-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨 基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-17)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物76的合成。
室温下，将无水三氯化铝(4.00g,30.0mmol)在氮气保护下分批加入到化合物71(1.89g,10.0mmol)和5,6-二氢-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉(1.65g,10.5mmol)的无水DCE(100mL)中。反应搅拌回流过夜，反应冷却至室温。加水淬灭反应，用固体碳酸氢钠调pH至碱性，减压除去DCE，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，用乙醇重结晶得到黄色固体1.7g，收率为55％。LC-MS(APCI):m/z＝310.1(M+1)+。
步骤2 化合物77的合成
室温下将3,4-二氢-2H-吡喃(165mg，1.95mmol)加到化合物76(500mg，1.62mmol)的四氢呋喃(10mL)的溶液中，反应在回流下搅拌反应过夜。减压浓缩，除去溶剂,浓缩液进行柱分离得到淡黄色固体255mg，收率：40％。LC-MS(APCI):m/z＝394.2(M+1)+。
步骤3 化合物78的合成。
氮气保护下将无水叔丁醇(10mL)加入到化合物77(215mg，0.55mmol)和化合物65(180mg，0.62mmol)、碳酸钾(230mg，1.65mmol)、Pd2(dba)3(50mg,0.05mmol)和X-Phos(52mg,0.11mmol)的混合物中，反应在氮气保护下，90℃搅拌反应过夜。冷却至室温，硅藻土过滤，用二氯甲烷洗涤滤饼，减压浓缩滤液，浓缩液进行柱分离得到淡黄色固体200mg，收率为56％。LC-MS(APCI):m/z＝650.4(M+1)+。
步骤4 化合物T-17的合成。
在N2保护下，将4M的氯化氢甲醇溶液(2mL)加到化合物78(200mg，0.3mmol)的四氢呋喃(5mL)溶液中，反应在室温下反应1小时。用饱和碳酸氢钠调pH至碱性，二氯甲烷(30mL x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，除去溶剂，浓缩液进行柱分离得到米黄色固体120mg，收率为76％。LC-MS(APCI):m/z＝566.4(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)(δ/ppm)12.74(s,1H),10.12(s, 1H),8.94(s,1H),8.80(s,1H),8.36(d,J＝7.8Hz,1H),8.09(s,1H),7.88(s,1H),7.05–6.98(m,2H),6.96–6.90(m,1H),6.42(dd,J＝16.9,10.1Hz,1H),6.19(dd,J＝17.0,1.6Hz,1H),5.72(d,J＝11.7Hz,1H),4.44–4.22(m,2H),3.83(s,3H),3.02–2.84(m,4H),2.72(s,3H),2.42–2.30(m,2H),2.24(s,6H),2.20–2.11(m,2H)。
实施例18 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(咪唑并[1,2-a]嘧啶-3-基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-18)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物81的合成。
将化合物56(400mg,1.49mmol)和N-溴代丁二酰亚胺(NBS,318mg,1.79mmol)的1,4-二氧六环/水(5mL/1mL)的混合溶液在室温下搅拌1小时后，加入化合物80(140mg,1.49mmol)，加热至85℃并在该温度下反应2小时，冷却至室温后过滤，水洗滤饼后干燥得黄色固体产物300mg，收率为70.1％。LC-MS(APCI):m/z＝288.3(M+1)+。
步骤2 化合物82的合成。
氮气保护下，依次将化合物81(161mg,559umol)、化合物4(104mg,559umol)、对甲基苯磺酸(425mg,2.23mmol)和2-戊醇(5mL)加入至一个单颈圆底烧瓶中并在105℃下反应16小时后，冷却至室温后，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，搅拌30分钟后过滤并水洗涤滤饼，干燥得棕色固体产物100mg，收率为40.9％。LC-MS(APCI):m/z＝438(M+1)+。
步骤3 化合物83的合成。
氮气保护下，依次将化合物82(100mg,0.229mmol)、化合物6(70mg,0.686mmol)、碳酸钾(95mg,0.686mmol)和DMF(3mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物40mg，收率为33.7％。LC-MS(APCI):m/z＝520.4(M+1)+。
步骤4 化合物84的合成。
氮气氛围下，依次将化合物83(40mg,0.077mmol)、铁粉(43mg,0.77mmol)和氯化铵(21mg,0.0385mmol)加入至水/乙醇(3mL/1mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物31mg，收率82.2％。LC-MS(APCI):m/z＝490.2(M+1)+。
步骤5 化合物T-18的合成。
氮气保护下，向一个装有5mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物84(31mg,0.063mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(9.6mg,0.095mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(7mg,0.076mmol)继续搅拌15分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物11mg，收率为32.0％。LC-MS(APCI):m/z＝544.2(M+1)+。1H NMR(300MHz,MeOH-D4)(δ/ppm)9.14(s,1H),9.08(s,1H),8.69(dd,J＝9.9Hz,J＝0.9Hz,1H),8.53(s,1H),7.14(d,J＝3.3Hz,1H),7.20(d,J＝3.3Hz,1H),7.04(d,J＝4.2Hz,1H),6.90(s,1H),6.57-6.51(m,1H),6.37(dd,J＝13.6Hz,J＝1.2Hz,1H),6.16(s,1H),5.79-5.77(m,1H),3.95(s,3H),3.23(t,J＝3.3Hz,2H),2.90(t,J＝3.3Hz,2H),2.72(s,3H),2.62(s,6H).
实施例19 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(咪唑并[1,2-a]吡嗪-3-基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-19)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物86的合成。
将化合物56(400mg,1.49mmol)和N-溴代丁二酰亚胺(NBS,318mg,1.79mmol)的1,4-二氧六环/水(5mL/1mL)的混合溶液在室温下搅拌1小时后，加入化合物85(140mg,1.49mmol)，加热至85℃并在该温度下反应2小时，冷却至室温后过滤，水洗滤饼后干燥得黄色固体产物255mg，收率为59.6％。LC-MS(APCI):m/z＝288.3(M+1)+。
步骤2 化合物87的合成。
氮气保护下，依次将化合物86(255mg,886umol)、化合物4(150mg,806umol)、对甲基苯磺酸(28mg,3.3mmol)和2-戊醇(5mL)加入至一个单颈圆底烧瓶中并在105℃下反应16小时后，冷却至室温后，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，搅拌30分钟后过滤并水洗涤滤饼，干燥得棕色固体产物100mg，收率为28.4％。LC-MS(APCI):m/z＝438(M+1)+。
步骤3 化合物88的合成。
氮气保护下，依次将化合物82(100mg,0.229mmol)、化合物6(70mg,0.686mmol)、碳酸钾(95mg,0.686mmol)和DMF(3mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物40mg，收率为33.7％。LC-MS(APCI):m/z＝520.4(M+1)+。
步骤4 化合物89的合成。
氮气氛围下，依次将化合物83(40mg,0.077mmol)、铁粉(43mg,0.77mmol)和氯化铵(21mg, 0.0385mmol)加入至水/乙醇(3mL/1mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物31mg，收率82.2％。LC-MS(APCI):m/z＝490.2(M+1)+。
步骤5 化合物T-19的合成。
氮气保护下，向一个装有5mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物84(31mg,0.063mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(9.6mg,0.095mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(7mg,0.076mmol)继续搅拌15分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物11mg，收率为32.0％。LC-MS(APCI):m/z＝544.2(M+1)+。1H NMR(500MHz,MeOH-D4)(δ/ppm)9.76(d,J＝4.0Hz,1H),9.07(s.1H),8.56(s,1H),8.50(s,1H),8.05(d,J＝5.5Hz,1H),7.94(d,J＝5.0Hz,1H),7.18(d,J＝5.5Hz,1H),6.96-6.91(m,1H),6.60-6.55(m,1H),6.42-6.38(m,1H),5.85-5.82(m,1H),3.90(s,3H),3.32-3.28(m,2H),3.27-3.24(m,2H),2.72(s,3H),2.62(s,6H).
实施例20 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(2-甲基-1-H-苯[d]-咪唑-1-)噻吩并 [3,2-d]嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(化合物T-20)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物91的合成。
将碳酸钾(2.7g，19.51mmol)、化合物2(2.0g，9.75mmol)依次加入到化合物90(1.29g，9.75mmol)的DMF(20Ml)溶液中，氮气氛下室温搅拌反应过夜。倒入水(200mL)中，析出大量固体，过滤，真空干燥得白色固体1.1g，收率为37.5％。LC-MS(APCI):m/z＝301.1(M+1)+。
步骤2 化合物92的合成。
氮气保护下，依次将化合物91(614mg,2.04mmol)、化合物4(380mg,2.04mmol)、Cs2CO3(798mg,2.45mmol)加入1,4-二氧六环(10mL)中，加入Pd2(dba)3(93mg,102umol)和xantphos(228mg,408umol)，反应混合物液氮气氛下100℃反应过夜。冷却到室温，加入乙酸乙酯(30mL)，过滤，滤饼水洗(30mL)，烘干得黄色固体500mg，收率54.4％。LC-MS(APCI):m/z＝451.2M+1)+,1H NMR(400MHz,DMSO-D6)(δ/ppm)9.00(s,1H),8.96(d,J＝8.0Hz,1H),8.47(d,J＝5.6Hz,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.52(d,J＝5.2Hz,1H),7.34-7.22(M,4h),3.99(s,3H),2.62(s,3H).
步骤3 化合物93的合成。
氮气保护下，依次将化合物92(500mg,1.11mmol)、化合物6(170mg,1.67mmol)、碳酸钾(307mg,2.22mmol)和DMF(5mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物350mg，收率为59.2％。LC-MS(APCI):m/z＝533.4(M+1)+,1H NMR(400MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.26(s,1H),7.98(d,J＝5.6Hz,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.73(s,1H),7.50(d,J＝5.6Hz,1H),7.36-7.32(m,1H), 7.26-7.24(m,2H),6.70(s,1H),3.99(s,3H),3.29(t,J＝6.8Hz,2H),2.90(s,3H),2.74(s,3H),2.57(t,J＝5.6Hz,2H),2.27(s,6H).
步骤4 化合物94的合成。
氮气氛围下，依次将化合物83(350mg,657umol)、铁粉(367mg,6.57mmol)和氯化铵(176mg,3.29mmol)加入至乙醇/水(10mL/5mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物330mg，收率99.9％。LC-MS(APCI):m/z＝503.3(M+1)+。
步骤5 化合物T-20的合成。
氮气保护下，向一个装有5mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物84(330mg,656umol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(100mg,985umol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(71mg,788umol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物160mg,收率为43.8％。LC-MS(APCI):m/z＝557.2(M+1)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)(δ/ppm)10.08(br s,1H),9.72(s,1H),7.92(d,J＝5.5Hz,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.57(d,J＝6.0Hz,1H),7.33-7.30(m,1H),7.26-7.21(m,2H),6.81(s,1H),6.48-6.42(m,1H),6.38-6.32(m,1H),5.69(dd,J＝10.0Hz,J＝1.5Hz,1H),3.89(s,3H),2.90(t,J＝5.5Hz,2H),2.73(s,3H),2.71(s,3H),2.32(t,J＝5.5Hz,2H),2.28(s,6H).
实施例21 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-5-(4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H苯并[d]咪唑-6-)噻 吩并[3,2-d]嘧啶-2-氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(T-21)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物96的合成。
氮气氛下，依次向DMSO(100mL)加入化合物95(5.5g，20.37mmol)、偏嗱醇硼酸酯(10.3g，40.74mmol)、醋酸钾(6g,61.11mmol)、醋酸钯(457mg,2.04mmol)、三环己基膦(950mg,3.05mmol)，升温到100℃，并控温搅拌反应3h。冷却到室温，倒入水(300mL)中，乙酸乙酯萃取(100mL x 3)，水洗(200mL x 3)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩并过硅胶柱得淡黄色固体5.4g，收率83.4％。LC-MS(APCI):m/z＝319.2(M+1)+。
步骤2 化合物97的合成。
氮气氛下，依次向乙腈/水(20mL/10mL)中加入化合物96(2g，6.29mmol)、化合物2(1.3g，6.29mmol)、碳酸钠(2g,18.87mmol)、四三苯基磷钯(400mg,0.173mmol)，升温到回流，并控温搅拌反应3h。冷却到室温，滤掉不溶性物质，旋掉乙腈，乙酸乙酯萃取(600mL x 3)，水洗(40mL)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩并过硅胶柱得淡黄色固体1.7g，收率75.0％。LC-MS(APCI):m/z＝361.0(M+1)+。
步骤3 化合物99的合成。
氮气保护下，依次向DMF(20mL)中加入化合物97(322mg,0.896mmol)、化合物98(200mg,0.746mmol)、碳酸铯(608mg，1.865mmol)、Pd(OAc)2(18mg，0.075mmol)和Xantphos(86mg，0.149mmol)，升温到105℃并保温搅拌反应过夜。冷却到室温，加入乙酸乙酯(60mL)，滤掉不溶性固体，浓缩，残留物过硅胶柱得黄色固体200mg，收率为45％。LC-MS(APCI):m/z＝593.2(M+1)+。
步骤4 化合物100的合成。
氮气氛围下，依次将化合物99(200mg,0.338mmol)、铁粉(113mg,2.03mmol)和氯化铵(35mg,0.67mmol)加入至乙醇/水(6mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物189mg，收率99.0％。LC-MS(APCI):m/z＝563.2(M+1)+。
步骤5 化合物T-21的合成。
氮气保护下，向一个装有5mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物100(189mg,0.338mol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(69mg,686umol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(30mg,0.338mmol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物80mg,收率为38.4％。LC-MS(APCI):m/z＝617.2(M+1)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)(δ/ppm):9.79(s,1H),9.58(br s,1H),8.15(s,1H),7.96(d,J＝11.5Hz,1H),7.91(d,J＝5.5Hz,1H),7.75(s,1H),7.49(d,J＝5.5Hz,1H),6.74(s,1H),6.48(dd,J＝17.0Hz,J＝1.5Hz,1H),5.71(d,J＝10.0Hz,1H),4.78-4.74(m,1H),3.90(s,3H),3.16-3.09(m,2H),2.74-2.72(m,2H),2.71(s,3H),2.69(s,3H),2.56(s,6H),1.72(s,3H),1.70(s,3H).
实施例22 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-(4-(1-甲基-1-H-吲哚-5-)噻吩并[2,3-d] 嘧啶-2-氨基)丙烯酰胺(T-22)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物102的合成。
氮气氛下，依次向化合物2(1.9g,9.22mmol)和化合物101(1.5g,8.38mmol)的乙腈/水(2/1)(45mL)溶液中加入Na2CO3(1.8g,16.76mmol),Pd(pph3)4(0.484g,0.42mmol)，加热到回流，并保温搅拌反应3h。冷却到室温，过滤，滤液浓缩，旋掉乙腈，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体1.7g，收率为67.8％。LC-MS(APCI):m/z＝300.2(M+1)+。
步骤2 化合物103的合成。
氮气保护下，依次将化合物102(1.0g,3.34mmol)、化合物4(0.62g,3.34mmol)、溶于2-戊醇(8mL)中，加入一水合对甲苯磺酸(0.76g,4.0mmol)，反应混合物液氮气氛下105℃反应过夜。冷却到室温，加入饱和碳酸氢钠水液(20mL)，二氯甲烷萃取(40mL x 4)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物二氯甲烷重结晶得黄色固体800mg,收率53.3％。LC-MS(APCI):m/z＝450.1(M+1)+。
步骤3 化合物104的合成。
氮气保护下，依次将化合物103(780mg,1.79mmol)、化合物6(219mg,2.15mmol)、碳酸钾(495mg,3.58mmol)和DMF(5mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物560mg，收率为58.9％。LC-MS(APCI):m/z＝532.2(M+1)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.60(s,1H),8.22(dd,J＝8.4Hz,J＝1.6Hz,1H),7.93(d,J＝5.6Hz,1H),7.71(s,1H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.40(d, J＝1.6Hz,1H),7.15(d,J＝3.2Hz,1H),6.71-6.69(m,2H),4.00(s,3H),3.88(s,3H),3.28(t,J＝7.2Hz,2H),2.90(s,3H),2.57(t,J＝7.2Hz,2H),2.27(s,6H).
步骤4 化合物105的合成。
氮气氛围下，依次将化合物104(560mg,1.06mmol)、铁粉(354mg,6.3mmol)和氯化铵(226mg,4.22mmol)加入至乙醇/水(15mL/5mL)的混合液中，加热至回流并反应1小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物530mg，收率99.9％。LC-MS(APCI):m/z＝502.1(M+1)+。
步骤5 化合物T-22的合成。
氮气保护下，向一个装有10mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物105(530mg,1.06mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(120mg,1.16mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(100mg,1.16mol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物200mg,收率为34.0％。LC-MS(APCI):m/z＝556.2(M+1)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)(δ/ppm)10.04(br s,1H),9.91(s,1H),8.67(s,1H),8.25(d,J＝7.5Hz,1H),7.88(d,J＝5.0Hz,1H),7.80(s,1H),7.49(t,J＝7.0Hz,2H),7.12(d,J＝3.0Hz,1H),6.80(s,1H),6.68(dd,J＝3.0Hz,J＝1.0Hz,1H),6.52-6.48(m,1H),6.39-6.35(m,1H),5.70(dd,J＝10.5Hz,J＝1.5Hz,1H),3.90(s,3H),3.86(s,3H),2.90(t,J＝5.5Hz,2H),2.71(s,3H),2.29(t,J＝5.5Hz,2H),2.26(s,6H).
实施例23 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-5-(4-(4-氟-1-异丙基-2-甲基-1H苯并[d]咪唑-6-)噻 吩并[2,3-d]嘧啶-2-氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(T-23)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物106的合成。
氮气氛下，依次向乙腈/水(20mL/10mL)中加入化合物96(2g，6.29mmol)、化合物95(1.3g，6.29mmol)、碳酸钠(2g,18.87mmol)、四三苯基磷钯(400mg,0.173mmol)，升温到回流，并控温搅拌反应3h。冷却到室温，滤掉不溶性物质，旋掉乙腈，乙酸乙酯萃取(600mL x 3)，水洗(40mL)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩并过硅胶柱得淡黄色固体1.7g，收率75.0％。LC-MS(APCI):m/z＝361.0(M+1)+。
步骤3 化合物107的合成。
氮气保护下，依次向DMF(20mL)中加入化合物97(322mg,0.896mmol)、化合物98(200mg,0.746mmol)、碳酸铯(608mg，1.865mmol)、Pd(OAc)2(18mg，0.075mmol)和Xantphos(86mg，0.149mmol)，升温到105℃并保温搅拌反应过夜。冷却到室温，加入乙酸乙酯(60mL)，滤掉不溶性固体，浓缩，残留物过硅胶柱得黄色固体200mg，收率为45％。LC-MS(APCI):m/z＝593.2(M+1)+。
步骤4 化合物108的合成。
氮气氛围下，依次将化合物99(200mg,0.338mmol)、铁粉(113mg,2.03mmol)和氯化铵(35mg,0.67mmol)加入至乙醇/水(6mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应2小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物189mg，收率99.0％。LC-MS(APCI):m/z＝563.2(M+1)+。
步骤5 化合物T-23的合成。
氮气保护下，向一个装有5mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物100(189mg,0.338mol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(69mg,686umol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(30mg,0.338mmol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物80mg,收率为38.4％。LC-MS(APCI):m/z＝617.2(M+1)+。1H NMR(300MHz,CDCl3)(δ/ppm)10.08(br s,1H),9.76(s,1H),7.92(d,J＝1.2Hz,1H),7.77(s,1H),7.72(d, J＝11.8Hz,1H),7.42(d,J＝6.0Hz,1H),7.19(d,J＝6.0Hz,1H),6.81(s,1H),6.52-6.45(m,1H),6.39-6.36(m,1H),5.73-5.69(m,1H),4.83-4.76(m,1H),3.90(s,3H),2.90(t,J＝6.0Hz,2H),2.72(s,3H),2.71(s,3H),2.32(t,J＝6.0Hz,2H),2.29(s,6H),1.70(s,3H),1.67(s,3H).
实施例24 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-(4-(1-甲基-1-H-吲哚-5-)噻吩并[2,3-d] 嘧啶-2-氨基)丙烯酰胺(T-24)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物110的合成。
氮气氛下，依次向化合物95(1.9g,9.22mmol)和化合物101(1.5g,8.38mmol)的乙腈/水(2/1)(45mL)溶液中加入Na2CO3(1.8g,16.76mmol),Pd(pph3)4(0.484g,0.42mmol)，加热到回流，并保温搅拌反应3h。冷却到室温，过滤，滤液浓缩，旋掉乙腈，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，无水硫酸钠干燥， 过滤，浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体1.7g，收率为67.8％。LC-MS(APCI):m/z＝300.2(M+1)+。
步骤2 化合物111的合成。
氮气保护下，依次将化合物110(1.0g,3.34mmol)、化合物4(0.62g,3.34mmol)、溶于2-戊醇(8mL)中，加入一水合对甲苯磺酸(0.76g,4.0mmol)，反应混合物液氮气氛下105℃反应过夜。冷却到室温，加入饱和碳酸氢钠水液(20mL)，二氯甲烷萃取(40mL x 4)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物二氯甲烷重结晶得黄色固体800mg,收率53.3％。LC-MS(APCI):m/z＝450.1(M+1)+。
步骤3 化合物112的合成。
氮气保护下，依次将化合物11(780mg,1.79mmol)、化合物6(219mg,2.15mmol)、碳酸钾(495mg,3.58mmol)和DMF(5mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物560mg，收率为58.9％。LC-MS(APCI):m/z＝532.2(M+1)+。
步骤4 化合物113的合成。
氮气氛围下，依次将化合物104(560mg,1.06mmol)、铁粉(354mg,6.3mmol)和氯化铵(226mg,4.22mmol)加入至乙醇/水(15mL/5mL)的混合液中，加热至回流并反应1小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物530mg，收率99.9％。LC-MS(APCI):m/z＝502.1(M+1)+。
步骤5 化合物T-24的合成。
氮气保护下，向一个装有10mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物105(530mg,1.06mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(120mg,1.16mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(100mg,1.16mol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物200mg,收率为34.0％。LC-MS(APCI):m/z＝556.2(M+1)+。1H NMR(500MHz,DMSO-D6)(δ/ppm)9.92(br s,1H),8.63(s,1H),8.46(s,1H),8.40(d,J＝7.5Hz,1H),8.30(s,1H),7.78(d,J＝6.5Hz,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(d,J＝6.5Hz,1H),7.24(t,J＝7.0Hz,1H),7.11(t,J＝7.0Hz,1H),7.01(s,1H),6.78-6.67(m,1H),6.23(d,J＝16.5Hz,1H),5.73(d,J＝16.5Hz,1H),3.92(d,3H),2.83(s,3H),3.34-3.32(m,2H),3.21-3.18(m,2H),2.67(s,3H),2.52(s,6H).
实施例25 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-(4-(1-H-吲哚)-5-)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2- 氨基)丙烯酰胺(T-25)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物115的合成。
氮气氛下，依次向化合物95(1.9g,9.22mmol)和化合物114(2.2g,8.38mmol)的乙腈/水(2/1)(45mL)溶液中加入Na2CO3(1.8g,16.76mmol),Pd(pph3)4(0.484g,0.42mmol)，加热到回流，并保温搅拌反应3h。冷却到室温，过滤，滤液浓缩，旋掉乙腈，乙酸乙酯萃取(30Ml x 3)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体2.4g，收率为74.3％。LC-MS(APCI):m/z＝386.1(M+1)+。
步骤2 化合物116的合成。
磁力搅拌并冰水浴下，向化合物116(410mg，1.06mmol)的DCM(10mL)溶液中滴入三氟醋酸(10mL)，加完后室温搅拌反应2h。旋掉二氯甲烷及多余的三氟醋酸，加入乙酸乙酯(30mL)，搅拌半小时，生成的固体过滤，乙酸乙酯洗涤，烘干得黄色固体265mg，收率为87.7％。LC-MS(APCI):m/z＝286.1(M+1)+。
步骤3 化合物117的合成。
氮气保护下，依次将化合物116(266mg,0.886mmol)、化合物4(165mg,0.886mmol)、溶于2-戊醇(5mL)中，加入一水合对甲苯磺酸(381g,2.22mmol)，反应混合物液氮气氛下105℃反应过夜。冷却到室温，加入饱和碳酸氢钠水液(20mL)，二氯甲烷萃取(40mL x 4)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物二氯甲烷重结晶得黄色固体230mg,收率59.7％。LC-MS(APCI):m/z＝436.2(M+1)+。
步骤4 化合物118的合成。
氮气保护下，依次将化合物117(230mg,0.53mmol)、化合物6(81mg,0.79mmol)、碳酸钾(109mg,0.79mmol)和DMF(3mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物136mg，收率为19.6％。LC-MS(APCI):m/z＝518.2(M+1)+。
步骤5 化合物119的合成。
氮气氛围下，依次将化合物118(136mg,0.263mmol)、铁粉(88mg,1.582mmol)和氯化铵(7mg,0.132mmo)加入至乙醇/水(6mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应1小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物128mg，收率99.9％。LC-MS(APCI):m/z＝488.1(M+1)+。
步骤6 化合物T-25的合成。
氮气保护下，向一个装有10mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物119(128mg,0.263mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(30mg,0.29mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(23mg,0.263mol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物40mg,收率为28.0％。LC-MS(APCI):m/z＝542.2(M+1)+。1H NMR(500MHz,DMSO-D6)(δ/ppm)11.90(s,1H),10.08(s,1H),8.74(s,1H),8.36(d,J＝2.5Hz,1H),8.35(d,J＝8.0Hz,1H),8.30(s,1H),7.73(d,J＝6.0Hz,1H),7.44(d,J＝7.5Hz,1H),7.90(d,J＝5.5Hz,1H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),7.03-7.01(m,2H),6.43-6.37(m,1H),6.21-6.16(m,1H),5.73-5.71(m,1H),3.79(s,3H),2.92-2.88(m,2H),2.72(s,3H),2.36-2.32(m,2H),2.22(s,6H).
实施例26 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-(4-(1-H-吲哚)-5-)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2- 氨基)丙烯酰胺(T-26)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物120的合成。
氮气氛下，依次向化合物2(1.9g,9.22mmol)和化合物114(2.2g,8.38mmol)的乙腈/水(2/1)(45mL)溶液中加入Na2CO3(1.8g,16.76mmol),Pd(pph3)4(0.484g,0.42mmol)，加热到回流，并保温搅拌反应3h。冷却到室温，过滤，滤液浓缩，旋掉乙腈，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体2.4g，收率为74.3％。LC-MS(APCI):m/z＝386.1(M+1)+。
步骤2 化合物121的合成。
磁力搅拌并冰水浴下，向化合物120(410mg，1.06mmol)的DCM(10mL)溶液中滴入三氟醋酸(10mL)，加完后室温搅拌反应2小时。旋掉二氯甲烷及多余的三氟醋酸，加入乙酸乙酯(30mL)，搅拌半小时，生成的固体过滤，乙酸乙酯洗涤，烘干得黄色固体265mg，收率为87.7％。LC-MS(APCI):m/z＝286.1(M+1)+。
步骤3 化合物122的合成。
氮气保护下，依次将化合物121(266mg,0.886mmol)、化合物4(165mg,0.886mmol)、溶于2-戊醇(5mL)中，加入一水合对甲苯磺酸(381g,2.22mmol)，反应混合物液氮气氛下105℃反应过夜。冷却到室温，加入饱和碳酸氢钠水液(20mL)，二氯甲烷萃取(40mL x 4)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物二氯甲烷重结晶得黄色固体230mg,收率59.7％。LC-MS(APCI):m/z＝436.2(M+1)+。
步骤4 化合物123的合成。
氮气保护下，依次将化合物122(230mg,0.53mmol)、化合物6(81mg,0.79mmol)、碳酸钾(109mg,0.79mmol)和DMF(3mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释， 过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物136mg，收率为19.6％。LC-MS(APCI):m/z＝518.2(M+1)+。
步骤5 化合物124的合成。
氮气氛围下，依次将化合物123(136mg,0.263mmol)、铁粉(88mg,1.582mmol)和氯化铵(7mg,0.132mmo)加入至乙醇/水(6mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应1小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物128mg，收率99.9％。LC-MS(APCI):m/z＝488.1(M+1)+。
步骤6 化合物T-26的合成。
氮气保护下，向一个装有10mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物119(128mg,0.263mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(30mg,0.29mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(23mg,0.263mol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物40mg,收率为28.0％。LC-MS(APCI):m/z＝542.2(M+1)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)(δ/ppm):9.91(s,1H),8.67(s,1H),8.25(d,J＝7.5Hz,1H),7.88(d,J＝5.0Hz,1H),7.80(s,1H),7.49(t,J＝7.0Hz,2H),7.12(d,J＝3.0Hz,1H),6.80(s,1H),6.68(dd,J＝3.0Hz,J＝1.0Hz,1H),6.52-6.48(m,1H),6.39-6.35(m,1H),5.70(dd,J＝10.5Hz,J＝1.5Hz,1H),3.90(s,3H),3.86(s,3H),2.90(t,J＝5.5Hz,2H),2.71(s,3H),2.29(t,J＝5.5Hz,2H),2.26(s,6H).
实施例27 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-(4-(1-H-吲唑)-3-)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2- 氨基)丙烯酰胺(T-27)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物127的合成。
氮气氛下，化合物125(2.4g，10mmol)溶于无水THF(30mL)中，冷却到0℃，加入NaH(60％，0.52g，13mmol)，0℃下搅拌反应20分钟，缓慢滴加入三苯甲基氯(2.78g，10mmol)的THF(5mL)溶液，室温搅拌反应过夜。加入乙酸乙酯(60mL)，生成的固体过滤，滤液浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体3.1g，收率为63.8％。LC-MS(APCI):m/z＝487.1(M+1)+。
步骤2 化合物128的合成。
氮气氛下，依次向二氧六环(5mL)加入化合物127(0.97g，2.0mmol)、双联频哪醇硼酸酯(1.03g，4.0mmol)、醋酸钾(0.588g,6.0mmol)和Pd(dppf)Cl2-DCM(81mg,0.1mmol)，升温到100℃，并控温搅拌反应过夜。冷却到室温，加入乙酸乙酯(30mL)过滤，浓缩并过硅胶柱得淡黄色固体0.6g，收率61.7％。LC-MS(APCI):m/z＝487.1(M+1)+。
步骤3 化合物129的合成。
氮气氛下，依次向化合物128(0.48g,1.0mmol)和化合物2(0.2g,1.0mmol)的乙腈/水(2/1)(10mL)溶液中加入Na2CO3(0.2g,2mmol),Pd(PPh3)4(57mg,0.05mmol)，加热到回流，并保温搅拌反应3h。冷却到室温，过滤，滤液浓缩，旋掉乙腈，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体0.35g，收率为66.3％。LC-MS(APCI):m/z＝529.2(M+1)+。
步骤4 化合物130的合成。
氮气保护下，依次将化合物19(350mg,0.663mmol)、化合物4(120mg,0.663mmol)、溶于2-戊醇(5mL)中，加入一水合对甲苯磺酸(250mg,1.3mmol)，反应混合物液氮气氛下105℃反应过夜。 冷却到室温，加入饱和碳酸氢钠水液(20mL)，二氯甲烷萃取(40mL x 4)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物二氯甲烷重结晶得黄色固体300mg,收率67.0％。LC-MS(APCI):m/z＝679.2(M+1)+。
步骤5 化合物131的合成。
氮气保护下，依次将化合物122(300mg,0.44mmol)、化合物6(81mg,0.79mmol)、碳酸钾(109mg,0.79mmol)和DMF(3mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物240mg，收率为71.8％。LC-MS(APCI):m/z＝761.3(M+1)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)(δ/ppm)9.27(s,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.81(d,J＝5.6Hz,1H),7.63(s,1H),7.32-7.27(m,17H),7.10(t,J＝8.0Hz,1H),6.75(s,1H),6.63(d,J＝8.0Hz,1H),4.03(s,3H),3.31(t,J＝6.8Hz,2H),2.92(s,3H),2.62(t,J＝6.8Hz,2H),2.31(s,6H).
步骤6 化合物132的合成。
氮气氛围下，依次将化合物131(240mg,0.316mmol)、铁粉(114mg,1.89mmol)和氯化铵(33mg,0.62mmo)加入至乙醇/水(6mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应1小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物230mg，收率99.9％。LC-MS(APCI):m/z＝731.1(M+1)+。
步骤7 化合物133的合成。
氮气保护下，向一个装有10mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物132(230mg,0.316mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(33mg,0.32mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(29mg,0.32mol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物100mg,收率为40.40％。LC-MS(APCI):m/z＝785.1(M+1)+。
步骤8 化合物T-27的合成。
氮气氛下，依次向化合物133(100mg，0.127mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中滴加入三乙基硅烷(0.29g，2.54mmol)和三氟醋酸(1.0g，8.89mmol)，室温下搅拌反应2h。加入饱和NaHCO3(20mL)淬灭反应，二氯甲烷(30mL x 3)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体30mg，收率为43.6％。LC-MS(APCI):m/z＝543.2(M+1)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)(δ/ppm):11.70(s,1H),10.19(s,1H),9.76-9.71(m,1H),8.72(d,J＝8.0Hz,1H),7.75-7.73(m,1H),7.65(s,1H),7.34-7.19(m,4H),6.85-6.84(m,1H),6.52-6.51(m,1H),5.80-5.77(m,1H),3.94(s,3H),3.31-3.29(m,2H),2.77(s,3H),2.57-2.55(m,2H),2.42(s,6H).
实施例28 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-(4-(1-甲基-1-H-吲唑)-3-)噻吩并[3,2-d] 嘧啶-2-氨基)丙烯酰胺(T-28)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物134的合成。
氮气氛下，依次向化合物129(528mg，1.0mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中滴加入三乙基硅烷(1.16g，10mmol)和三氟醋酸(3.42g，30mmol)，室温下搅拌反应2h。加入饱和NaHCO3(20mL)淬灭反应，二氯甲烷(30mL x 3)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体200mg，收率为69.9％。LC-MS(APCI):m/z＝287.1(M+1)+。
步骤2 化合物135的合成。
氮气氛下，化合物134(200mg，0.699mmol)溶于无水THF(8mL)中，冷却到0℃，加入NaH(60％，36mg，0.91mmol)，0℃下搅拌反应20分钟，缓慢滴加入对甲苯磺酸甲酯(0.17g，0.91mmol)的THF(1mL)溶液，室温搅拌反应过夜。加入乙酸乙酯(60mL)，生成的固体过滤，滤液浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体180mg，收率为85.7％。LC-MS(APCI):m/z＝301.1(M+1)+。
步骤3 化合物136的合成。
氮气保护下，依次将化合物135(180mg,0.60mmol)、化合物4(120mg,0.663mmol)、溶于2-戊醇(5mL)中，加入一水合对甲苯磺酸(250mg,1.3mmol)，反应混合物液氮气氛下105℃反应过夜。冷却到室温，加入饱和碳酸氢钠水液(20mL)，二氯甲烷萃取(40mL x 4)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物二氯甲烷重结晶得黄色固体130mg,收率48.1％。LC-MS(APCI):m/z＝451.1(M+1)+。
步骤4 化合物137的合成。
氮气保护下，依次将化合物136(130mg,0.29mmol)、化合物6(81mg,0.79mmol)、碳酸钾(109mg,0.79mmol)和DMF(3mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释，过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物120mg，收率为77.8％。LC-MS(APCI):m/z＝533.2(M+1)+。
步骤5 化合物138的合成。
氮气氛围下，依次将化合物131(120mg,0.226mmol)、铁粉(114mg,1.89mmol)和氯化铵(33mg,0.62mmol)加入至乙醇/水(6mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应1小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物100mg，收率88.1％。LC-MS(APCI):m/z＝503.1(M+1)+。
步骤6 化合物T-28的合成。
氮气保护下，向一个装有10mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物138(100mg,0.20mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(23mg,0.22mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(19mg,0.20mol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物40mg,收率为36.0％。LC-MS(APCI):m/z＝557.1(M+1)+。1H NMR(400MHz,DMSO-D6)(δ/ppm):10.24(br s,1H),9.56(br s,1H),8.57-8.53(m,2H),8.39(s,1H),8.29(d,J＝4.8Hz,1H),7.76(d,J＝6.8Hz,1H),7.48(t,J＝6.0Hz,1H),7.30-7.26(m,2H),7.00(s,1H),6.22-6.18(m,1H),5.71-05.69(m,1H),4.23(s,3H),3.83(s,3H),3.33-3.31(m,2H),2.77(s,3H),2.57-2.55(m,2H),2.42(s,6H).
实施例29 N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-(4-(1-H-吲哚)-3-)噻吩并[2,2-d]嘧啶-2- 氨基)丙烯酰胺(T-25)
具体合成步骤如下：
步骤1 化合物139的合成。
氮气氛下，依次向化合物2(1.9g,9.22mmol)和化合物114(2.2g,8.38mmol)的乙腈/水(2/1)(45mL)溶液中加入Na2CO3(1.8g,16.76mmol),Pd(pph3)4(0.484g,0.42mmol)，加热到回流，并保温搅拌反应3h。冷却到室温，过滤，滤液浓缩，旋掉乙腈，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物过硅胶柱得白色固体2.4g，收率为74.3％。LC-MS(APCI):m/z＝386.1(M+1)+。
步骤2 化合物140的合成。
磁力搅拌并冰水浴下，向化合物139(410mg，1.06mmol)的DCM(10mL)溶液中滴入三氟醋酸(10mL)，加完后室温搅拌反应2小时。旋掉二氯甲烷及多余的三氟醋酸，加入乙酸乙酯(30mL)，搅拌半小时，生成的固体过滤，乙酸乙酯洗涤，烘干得黄色固体265mg，收率为87.7％。LC-MS(APCI):m/z＝286.1(M+1)+。
步骤3 化合物141的合成。
氮气保护下，依次将化合物140(266mg,0.886mmol)、化合物4(165mg,0.886mmol)、溶于2-戊醇(5mL)中，加入一水合对甲苯磺酸(381g,2.22mmol)，反应混合物液氮气氛下105℃反应过夜。冷却到室温，加入饱和碳酸氢钠水液(20mL)，二氯甲烷萃取(40mL x 4)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物二氯甲烷重结晶得黄色固体230mg,收率59.7％。LC-MS(APCI):m/z＝436.2(M+1)+。
步骤4 化合物142的合成。
氮气保护下，依次将化合物141(230mg,0.53mmol)、化合物6(81mg,0.79mmol)、碳酸钾(109mg,0.79mmol)和DMF(3mL)加入至一个三颈圆底烧瓶中，室温下搅拌16小时后，加入20mL水稀释， 过滤后水洗并将滤饼溶于二氯甲烷后，萃取，收集有机相并通过柱色谱分离纯化得到橙色固体产物136mg，收率为19.6％。LC-MS(APCI):m/z＝518.2(M+1)+。
步骤5 化合物143的合成。
氮气氛围下，依次将化合物142(136mg,0.263mmol)、铁粉(88mg,1.582mmol)和氯化铵(7mg,0.132mmol)加入至乙醇/水(6mL/2mL)的混合液中，加热至回流并反应1小时后，冷却至室温，移除乙醇加入水，用二氯甲烷萃取后收集有机相得到固体产物128mg，收率99.9％。LC-MS(APCI):m/z＝488.1(M+1)+。
步骤6 化合物T-29的合成。
氮气保护下，向一个装有10mL二氯甲烷的单颈圆底烧瓶依次加入化合物143(128mg,0.263mmol)，待其完全溶解后，逐滴加入三乙胺(30mg,0.29mmol)，将反应体系冷却至-10℃，缓慢加入化合物9(23mg,0.263mol)继续搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取，收集有机相后通过柱色谱纯化得到黄色固体产物40mg,收率为28.0％。LC-MS(APCI):m/z＝542.2(M+1)+。1H NMR(500MHz,DMSO-D6)(δ/ppm):11.90(s,1H),10.08(s,1H),8.74(s,1H),8.47(d,J＝2.5Hz,1H),8.29-8.23(m,2H),8.13(s,1H),7.48(d,J＝6.0Hz,1H),7.30-7.28(m,1H),7.20-7.17(m,1H),7.12-7.08(m,1H),7.00(s,1H),6.67-6.61(m,1H),6.22-6.18(m,1H),5.73-5.69(m,1H),3.79(s,3H),2.92-2.88(m,2H),2.72(s,3H),2.36-2.32(m,2H),2.22(s,6H).
生物活性测试
(1)激酶抑制实验
试剂和耗材：
WT EGFR(Carna,目录号08-115)，EGFR[L858R](Carna,目录号08-502)EGFR[L858R/T790M](Carna,目录号08-510)，ATP(Sigma,目录号A7699-1G)，DMSO(Sigma,目录号D2650)，96孔板(Corning,目录号3365)，384孔板(Greiner,目录号784076)，HTRF Kinase TK试剂盒(Cisbio,目录号62TK0PEJ)，厄洛替尼(Selleckchem,目录号S7787)，EGFR[d746-750](Life Technologies,目录号PV6178)，5x激酶缓冲液A(Life Technologies,目录号PV3186)，激酶示踪剂199(Life Technologies,目录号PV5830)，Eu-anti-GST抗体(Life Technologies,目录号PV5594)。
具体实验方法：
化合物配制：将受试化合物溶于DMSO配成20mM母液。然后，在DMSO中等梯度3倍稀释，稀释十次。加药时再用缓冲液稀释10倍。
WT EGFR、EGFR[L858R]及EGFR[L858R/T790M]激酶检测：在5x激酶缓冲液A中，将WT EGFR、EGFR[L858R]或EGFR[L858R/T790M]激酶与预先稀释配制的不同浓度的化合物混合10分钟，每个浓度双复孔。加入试剂盒中对应的底物及ATP，室温反应20分钟(其中设置阴阳性对照：阴性为空白对照，阳性为厄洛替尼)。反应完毕加入检测试剂(HTRF Kinase TK试剂盒内的试剂)，室温孵育30分钟 后，通过Evnvision酶标仪检测，测定在各浓度的本发明化合物存在下的酶活力，并计算不同浓度的化合物对酶活力的抑制活性，之后根据四参数方程，根据Graphpad 5.0软件对不同浓度化合物下酶活力的抑制活性进行拟合，计算出IC50值，其中A意指IC50≤1nM，B意指IC50为1-10nM，C意指IC50是10-50nM，D意指IC50是50-100nM。
在上述激酶抑制实验中测试了本发明化合物，发现本发明化合物对EGFR[L858R]和EGFR[L858R/T790M]具有强效的活性以及优于WT EGFR的优异选择性。实施例化合物的结果归纳于如下表1中。
表1
(2)细胞毒性实验
采用MTS方法检测了本发明化合物对体外培养的3株肿瘤细胞的体外抗增殖活性。实验结果表明本发明化合物对体外培养的癌细胞的体外增殖具有抑制作用；其中对肺癌细胞的体外增殖的抑制作用比皮肤癌细胞的体外增殖的抑制作用强。
细胞系：
皮肤癌细胞A431(购自美国标准生物品收藏中心(ATCC))；肺癌细胞NCI-H1975(购自美国标准生物品收藏中心(ATCC))和HCC827(购自美国标准生物品收藏中心(ATCC))；均用含10％胎牛血清、100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素的RPMI1640培养基培养。
试剂和耗材：
RPMI-1640(GIBCO,目录号A10491-01)；胎牛血清(GIBCO,目录号10099141)；0.25％胰蛋白酶-EDTA(GIBCO,目录号25200)；青霉素-链霉素,液体(GIBCO,目录号15140-122)；DMSO(Sigma,目录号D2650)；MTS测试试剂盒(Promega,目录号G3581)，96孔板(Corning,目录号3365)。
具体实验方法：
化合物配制：受试化合物溶于DMSO配成20mM母液，-20℃保存。使用时用DMSO等梯度3倍稀释，稀释10次。加药时再用细胞培养基RPMI-1640稀释4倍。
MTS细胞活力检测：0.25％胰蛋白酶-EDTA消化对数生长期细胞，按已优化的密度接种150μl于96孔板，24小时后加入培养基RPMI-1640稀释4倍的化合物，50μl/孔(一般选择十个浓度：100、33.3、11.1、3.70、1.23、0.412、0.137、0.0457、0.0152、0.00508μM)。以加入同样体积的0.5％DMSO的孔作为对照。细胞继续培养72小时后，MTS检测细胞活力。
具体操作：贴壁细胞，弃去培养基，每孔加入含20μL MTS和100μL培养基的混合液。放入培养箱继续培养1-4小时后检测OD490，以OD650值作为参考。用GraphPad Prism软件制作量效曲线并计算IC50，其中A意指IC50≤100nM，B意指IC50为100-500nM，C意指IC50为500-1000nM，并且D意指IC50≥1000nM。
在上述细胞毒性实验中测试了本发明化合物，发现本发明化合物对肺癌细胞NCI-H1975和 HCC827具有强效的活性以及优于皮肤癌细胞A431的优异选择性。实施例对癌细胞的体外增殖的抑制作用的结果归纳于下表2中。
表2
(3)代谢稳定性实验
微粒体实验：人肝微粒体：0.5mg/mL，BD Gentest；大鼠肝微粒体：0.5mg/mL，Xenotech；小鼠肝微粒体：0.5mg/mL，Xenotech；辅酶(NADPH/NADH)：1mM，Sigma Life Science；氯化镁：5mM，100mM磷酸盐缓冲剂(pH为7.4)。
储备液的配制：精密称取一定量的实施例化合物粉末，并用DMSO分别溶解至5mM。
磷酸盐缓冲液(100mM，pH7.4)的配制：取预先配好的0.5M磷酸二氢钾150mL和700mL的0.5M磷酸氢二钾溶液混合，再用0.5M磷酸氢二钾溶液调节混合液pH值至7.4，使用前用超纯水稀释5倍，加入氯化镁，得到磷酸盐缓冲液(100mM)，其中含100mM磷酸钾，3.3mM氯化镁，pH为7.4。
配制NADPH再生系统溶液(含有6.5mM NADP，16.5mM G-6-P，3U/mL G-6-P D，3.3mM氯化镁)，使用前置于湿冰上。
配制终止液：含有50ng/mL盐酸普萘洛尔和200ng/mL甲苯磺丁脲(内标)的乙腈溶液。取25057.5μL磷酸盐缓冲液(pH7.4)至50mL离心管中，分别加入812.5μL人肝微粒体，混匀，得到蛋白浓度为0.625mg/mL的肝微粒体稀释液。取25057.5μL磷酸盐缓冲液(pH7.4)至50mL离心管中，分别加入812.5μL大鼠肝微粒体，混匀，得到蛋白浓度为0.625mg/mL的肝微粒体稀释液。取25057.5μL磷酸盐缓冲液(pH7.4)至50mL离心管中，分别加入812.5μL小鼠肝微粒体，混匀，得到蛋白浓度为0.625mg/mL的肝微粒体稀释液。
样品的孵育：用含70％乙腈的水溶液将相应化合物的储备液分别稀释至0.25mM，作为工作液，备用。分别取398μL的人肝微粒体或者大鼠肝微粒体或者小鼠肝微粒体稀释液加入96孔孵育板中(N＝2)，分别加入2μL 0.25mM的的工作液中，混匀。
代谢稳定性的测定：在96孔深孔板的每孔中加入300μL预冷的终止液，并置于冰上，作为终止板。将96孔孵育板和NADPH再生系统置于37℃水浴箱中，100转/分钟震荡，预孵5min。从孵育板每孔取出80μL孵育液加入终止板，混匀，补充20μL NADPH再生系统溶液，作为0min样品。再向孵育板每孔加入80μL的NADPH再生系统溶液，启动反应，开始计时。相应化合物的反应浓度为1μM，蛋白浓度为0.5mg/mL。分别于反应10、30、90min时，各取100μL反应液，加入终止板中，涡旋3min终止反应。将终止板于5000×g，4℃条件下离心10min。取100μL上清液至预先加入100μL蒸馏水的96孔板中，混匀，采用LC-MS/MS进行样品分析。
数据分析：通过LC-MS/MS系统检测相应化合物及内标的峰面积，计算化合物与内标峰面积比值。通过化合物剩余量的百分率的自然对数与时间作图测得斜率，并根据以下公式计算t1/2和CLint，其中V/M即等于1/蛋白浓度。
在上述微粒体实验中测试了本发明化合物，发现本发明化合物具有优越的代谢稳定性。代表性的实施例的人肝微粒体实验和大鼠肝微粒体实验的结果归纳于下表3中。
表3：
(4)大鼠的药代动力学实验
8只雄性Sprague-Dawley大鼠，7-8周龄，体重约210g，分成2组，每组4只，单次口服给予5mg/kg剂量的(a)对照组：(R)-3-(4-(2-(2-甲基四唑-5-基)吡啶-5-基)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮；(b)试验组：实施例化合物，比较其药代动力学差异。
大鼠采用标准饲料饲养，给予水。试验前16小时开始禁食。药物用PEG400和二甲亚砜溶解。眼眶采血，采血的时间点为给药后0.083小时，0.25小时、0.5小时、1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、12小时和24小时。
大鼠吸入乙醚后短暂麻醉，眼眶采集300μL血样于试管。试管内有30μL1％肝素盐溶液。使用前，试管于60℃烘干过夜。在随后一个时间点血样采集完成之后，大鼠乙醚麻醉后处死。
血样采集后，立即温和地颠倒试管至少5次，保证混合充分后放置于冰上。血样在4℃5000rpm离心5分钟，将血浆与红细胞分离。用移液器吸出100μL血浆到干净的塑料离心管中，标明化合物的名称和时间点。血浆在进行分析前保存在-80℃。用LC-MS/MS测定血浆中本发明化合物的浓度。药代动力学参数基于每只动物在不同时间点的血药浓度进计算。
在上述大鼠的药代动力学实验中测试了本发明化合物，发现本发明化合物对动物体内具有一定的药代动力学性质。代表性实施例2和实施例29的大鼠的药代动力学实验的结果归纳于下表4中。
表4：
应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则份数和百分比为重量份和重量百分比。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims (19)

  1. 式(I)化合物：
    其中，
    R1选自H、卤素、-OH、-CN、-NO2、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基；
    L选自键、NR、O、CR2或S；其中R独立地选自H、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；
    R2选自C1-C6烷基或含有1-2个选自N和O的杂原子的3至6元杂环基，其中上述基团未被取代或者被1-3个以下取代基取代：卤素、-OH、-CN、-NO2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、NR6R7；其中R6、R7各自独立地选自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或C3-C6碳环基；
    R3、R4和R5独立地选自H、卤素、-CN、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基；
    环A选自C3-C6碳环基、3至10元杂环基、C6-C14芳基或C5-C10杂芳基；
    环B选自以下结构：
    其中各X1独立地选自C、N、O和S原子，各X2和X3独立地选自C和N原子，其中含有X1、X2和X3的环任选地被1-3个R8取代基取代；
    环C选自C3-C6碳环基、3至10元杂环基、C6-C14芳基或C5-C10杂芳基，其任选地被1-3个R8取代基取代；
    表示单键或双键；
    R8独立地选自H、卤素、氧代、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基；
    或者环上的两个R8一起形成-Zm-；其中Z独立地选自CH2、NH、O、S、SO或SO2；m＝2、3、4或5；
    或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物。
  2. 根据权利要求1所述的化合物，其中R1选自-OH、卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基，L选自NR、O或S，其中R选自C1-C6烷基，R3、R4和R5为H。
  3. 根据权利要求1或2所述的化合物，其中R1为甲氧基，L为NR，其中R为甲基，R3、R4和 R5为H。
  4. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中R2为被1-3个取代基取代的C1-C6烷基，其中，所述的取代基为C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、NR6R7；更优选地，R2为CH2CH2N(CH3)2。
  5. 根据权利要求1-4中任一项所述的化合物，其中环A选自C5-C6碳环基、5至6元杂环基、C6芳基或C5-C6杂芳基；更优选地，环A选自5至6元杂环基或C5-C6杂芳基；更优选地，环A选自C5-C6杂芳基；最优选地，环A选自C5杂芳基。
  6. 根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中环A具有以下结构：
    其中，
    各Y1独立地选自C、N、O或S原子，各Y2独立地选自C或N原子，Y1和Y2任选被选自以下的R9取代基取代：H、卤素、-CN、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基或C1-C6烷基磺酰基，其中所述C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基或C1-C6烷基磺酰基任选地被一个或多个-OH取代。
  7. 根据权利要求1-6中任一项所述的化合物，其中环A具有以下结构：
    其中R9独立地选自H、C1-C6烷基、被一个或多个-OH取代的C1-C6烷基。
  8. 根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，其中环B具有以下结构：
    其中各X1独立地选自C、N、O和S原子，各X2和X3独立地选自C和N原子，其中含有X1、X2和X3的环任选地被1-3个R8取代基取代；
    环C选自C5-C6碳环基、5至6元杂环基、C6-C10芳基或C5-C6杂芳基，其任选地被1-3个R8取代基取代；
    表示单键或双键；
    R8独立地选自H、卤素、氧代、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基；
    或者环上的两个R8一起形成-(CH2)m-、-NH(CH2)n-、-O(CH2)n-、-S(CH2)n-、-SO(CH2)n-、-SO2(CH2)n-、-CH2NH(CH2)p-、-CH2O(CH2)p-、-CH2S(CH2)p-、-CH2SO(CH2)p-或-CH2SO2(CH2)p-；其中m＝2、3、4或5；n＝1、2或3；p＝1或2。
  9. 根据权利要求8所述的化合物，其中环C选自C5-C6碳环基、5至6元杂环基、C6芳基或C5-C6杂芳基；更优选地，环C选自环戊二烯基、环己二烯基、苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、二氢吡嗪基。
  10. 根据权利要求8或9中任一项所述的化合物，其中R8独立地选自H、F、氧代和C1-C6烷基；或者环上的两个R8一起形成-(CH2)2-、-(CH2)3-、-OCH2-、-O(CH2)2-或-CH2OCH2-。
  11. 根据权利要求1-10中任一项所述的化合物，其中环B具有以下结构：
    其中各环任选地被1-3个R8取代基取代，且R8、X1和X2如权利要求1-10中任一项所定义。
  12. 根据权利要求1-11中任一项所述的化合物，其中环B选自以下基团：
    其中R8如权利要求1-10中任一项所定义。
  13. 根据权利要求1所述化合物，其可选自下式化合物：
  14. 药物组合物，其含有权利要求1-13中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物，和药学上可接受的赋形剂。
  15. 权利要求14的药物组合物，其还含有其它治疗剂。
  16. 试剂盒，其包括
    第一容器，其中含有权利要求1-13中任一项的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物；和
    任选地，第二容器，其中含有其它治疗剂；和
    任选地，第三容器，其中含有用于稀释或悬浮所述化合物和/或其它治疗剂的药用赋形剂。
  17. 权利要求1-13中任一项的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物在制备用于治疗EGFR导致的癌症的药物中的用途。
  18. 一种在受试者中治疗EGFR导致的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者给药权利要求1-13中任一项的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物、水合物、晶型、前药或同位素衍生物，或者权利要求14-15中任一项的药物组合物。
  19. 权利要求17的用途或18的方法，其中所述EGFR导致的癌症选自：非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌、胃肠间质瘤、白血病、组织细胞性淋巴癌、鼻咽癌。
CN201780004361.5A 2016-05-06 2017-05-02 用于抑制蛋白酪氨酸激酶活性的稠合嘧啶类化合物 Pending CN108473473A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2016103005114 2016-05-06
CN201610300511 2016-05-06
PCT/CN2017/082682 WO2017190637A1 (zh) 2016-05-06 2017-05-02 用于抑制蛋白酪氨酸激酶活性的稠合嘧啶类化合物

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108473473A true CN108473473A (zh) 2018-08-31

Family

ID=60202722

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201780004361.5A Pending CN108473473A (zh) 2016-05-06 2017-05-02 用于抑制蛋白酪氨酸激酶活性的稠合嘧啶类化合物

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN108473473A (zh)
WO (1) WO2017190637A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115246822A (zh) * 2021-04-27 2022-10-28 中国科学院上海药物研究所 嘧啶类化合物及其制备方法和用途

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI726968B (zh) 2016-01-07 2021-05-11 開曼群島商Ｃｓ醫藥技術公司 Egfr酪胺酸激酶之臨床重要突變體之選擇性抑制劑
CN110078732A (zh) * 2018-01-26 2019-08-02 沈阳药科大学 嘌呤类化合物及其用途
TW202120486A (zh) * 2019-08-09 2021-06-01 英商阿帝歐斯製藥有限公司 新穎化合物
CN113956259A (zh) * 2021-11-05 2022-01-21 华北水利水电大学 一种丙烯酰胺类药物的制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013169401A1 (en) * 2012-05-05 2013-11-14 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Compounds for inhibiting cell proliferation in egfr-driven cancers
CN104203924A (zh) * 2012-01-13 2014-12-10 艾森生物科学公司 杂环化合物及其作为抗癌药的用途
CN105315285A (zh) * 2014-07-25 2016-02-10 上海海雁医药科技有限公司 2,4-二取代7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物、其制法与医药上的用途
CN106496196A (zh) * 2016-10-20 2017-03-15 南京雷科星生物技术有限公司 一种喹唑啉、吡啶并嘧啶或则双并嘧啶衍生物表皮生长因子抑制剂及其制备方法与用途

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2976227C (en) * 2015-02-17 2023-10-24 Neupharma, Inc. Quinazoline derivatives and their use in treatment of cancer

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104203924A (zh) * 2012-01-13 2014-12-10 艾森生物科学公司 杂环化合物及其作为抗癌药的用途
WO2013169401A1 (en) * 2012-05-05 2013-11-14 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Compounds for inhibiting cell proliferation in egfr-driven cancers
CN105315285A (zh) * 2014-07-25 2016-02-10 上海海雁医药科技有限公司 2,4-二取代7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物、其制法与医药上的用途
CN106496196A (zh) * 2016-10-20 2017-03-15 南京雷科星生物技术有限公司 一种喹唑啉、吡啶并嘧啶或则双并嘧啶衍生物表皮生长因子抑制剂及其制备方法与用途

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115246822A (zh) * 2021-04-27 2022-10-28 中国科学院上海药物研究所 嘧啶类化合物及其制备方法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017190637A1 (zh) 2017-11-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113382991B (zh) 用于抑制蛋白酪氨酸激酶活性的氨基嘧啶类化合物
TWI791511B (zh) 細胞凋亡誘導劑
CN108473473A (zh) 用于抑制蛋白酪氨酸激酶活性的稠合嘧啶类化合物
CN103974948B (zh) 在治疗过度增殖性疾病中用作bub1激酶抑制剂的取代的苄基吲唑
CN113999226A (zh) 作为kras抑制剂的杂环化合物的制备及其应用方法
CN103476767B (zh) 作为pi3激酶抑制剂的杂环化合物
US11168089B2 (en) Fused pyrimidine derivatives as A2A / A2B inhibitors
EP4269405A1 (en) Preparation and application method of heterocyclic compound as kras inhibitor
CA3105721A1 (en) Fused pyrazine derivatives as a2a / a2b inhibitors
EP2855459B1 (en) Aminoquinazoline and pyridopyrimidine derivatives
EP3424928A1 (en) Nitrogenous heterocyclic compound, preparation method, intermediate, composition and use
CN105164116A (zh) 杂芳基取代的吲唑
CA3107365A1 (en) Pyrazine compounds and uses thereof
KR20140129266A (ko) Smac 모방체로서의 6-알키닐 피리딘
CN104910137A (zh) Cdk激酶抑制剂
CN112830928A (zh) 一种嘧啶并环衍生物及其在医药上的应用
CN102119157A (zh) 用于治疗癌症和骨髓增生性疾病的三环2，4-二氨基-l，3，5-三嗪衍生物
TW201514167A (zh) 二胺基雜芳基取代之吲唑
CN102911172A (zh) 杂芳基并嘧啶类衍生物、其制备方法和用途
CN102643272B (zh) 新的噻吩并[3,2-d]嘧啶类化合物
MX2014009180A (es) Derivados de isoquinolina y naftiridina.
CN104926788A (zh) 取代哌啶类衍生物、含其的药物组合物及其在抗肿瘤中的应用
AU2016274961A1 (en) Adipate forms and compositions of biaryl inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
TW201710250A (zh) 經取代之喹喏啉衍生物
JP2022515309A (ja) 置換アリール化合物、その製造方法及び用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination